RU2213779C2 - Nutrient medium for isolation of lactobacilli - Google Patents
Nutrient medium for isolation of lactobacilli Download PDFInfo
- Publication number
- RU2213779C2 RU2213779C2 RU2001123804/13A RU2001123804A RU2213779C2 RU 2213779 C2 RU2213779 C2 RU 2213779C2 RU 2001123804/13 A RU2001123804/13 A RU 2001123804/13A RU 2001123804 A RU2001123804 A RU 2001123804A RU 2213779 C2 RU2213779 C2 RU 2213779C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- medium
- source
- dry
- water
- sulfate
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно клинической микробиологии, и может быть использовано для выделения и количественного учета лактобактерий при диагностике дисбактериоза кишечника. The invention relates to medicine, namely to clinical microbiology, and can be used to isolate and quantify lactobacilli in the diagnosis of intestinal dysbiosis.
Известно использование для культивирования лактобактерий среды МРС (1) и для выделения лактобактерий из испражнений среды Рогозы (2). It is known to use MPC medium (1) for the cultivation of lactobacilli and for isolating lactobacilli from the stool of Rogoza medium (2).
Недостатком этих сред является трудоемкость их приготовления в лабораторных условиях. The disadvantage of these environments is the complexity of their preparation in the laboratory.
Наиболее близким решением задачи того же назначения к заявляемому изобретению по совокупности признаков является среда Рогозы (2), содержащая в качестве азотистого питания молоко по Богданову (1, 3), в качестве источника витаминов группы В дрожжевой автолизат, Д (+) глюкозу, аминокислоту цистеин, соли аммония, калия, ацетата, магния, марганца, железа, ледяную уксусную кислоту, агар. The closest solution to the problem of the same purpose to the claimed invention according to the totality of signs is the Rogoza medium (2), containing milk according to Bogdanov as a nitrogenous nutrition (1, 3), as a source of B vitamins, yeast autolysate, D (+) glucose, amino acid cysteine, salts of ammonium, potassium, acetate, magnesium, manganese, iron, glacial acetic acid, agar.
К причинам, препятствующим достижению указанного ниже технического результата при использовании известной среды, принятой за прототип, является то, что среда Рогозы требует дополнительных условий культивирования (присутствия СО2 или светильного газа при 37oС в течение 4-5 сут). Среда стерилизуется автоклавированием.For reasons that impede the achievement of the following technical result when using the known medium adopted for the prototype, is that the environment of Rogoza requires additional cultivation conditions (the presence of CO 2 or light gas at 37 o C for 4-5 days). The medium is sterilized by autoclaving.
Задача предлагаемого изобретения - сохранение основных биологических свойств растущих на среде лактобактерий и упрощение условий культивирования посевного материала. The objective of the invention is the preservation of the basic biological properties of lactobacilli growing on the environment and the simplification of the cultivation conditions of seed material.
Указанный технический результат при осуществлении изобретения достигается тем, что предлагаемая среда содержит сернокислые соли железа и магния, цитрат аммония, калий фосфорнокислый однозамещенный, агар, поваренную соль, в качестве источника азотистого питания сухой панкреатический гидролизат казеина, в качестве комплекса витаминов группы В экстракт кормовых дрожжей, в качестве углевода Д (+) глюкозу, в качестве аминокислоты, обладающей ростовой активностью, цистеин, в качестве растворителя белковых компонентов среды трехзамещенный цитрат натрия, в качестве ингибитора сопутствующих грамотрицательных энтеробактерий и кокковой микрофлоры натрий уксуснокислый плавленный, кристалл-виолет и полимиксин М сульфат при следующем соотношении компонентов, г/л:
Панкреатический гидролизат казеина сухой - 15,0 - 30,0
Экстракт кормовых дрожжей сухой - 3,0 - 7,0
Д(+) глюкоза - 17,0 - 25,0
Цистеин - 0,1 - 0,3
Железо сернокислое 7-водное - 0,03 - 0,06
Магний сернокислый 7-водный - 0,6 - 1,0
Цитрат аммония - 1,5 - 3,5
Калий фосфорнокислый однозамещенный - 4,0 - 8,0
Натрий лимоннокислый трехзамещенный - 6,0 - 8,5
Натрий уксуснокислый плавленный - 7,0 - 8,0
Агар микробиологический - 7,0 - 12,0
Поваренная соль - 3,0 - 8,0
Кристаллвиолет - 0,002 - 0,0025
Полимиксин М сульфат - 0,04 - 0,06 (40000-60000 Ед)
Среду получают следующим образом:
Пример 1. В 1 л дистиллированной воды последовательно растворяют 15,0 г панкреатического гидролизата казеина сухого, 3,0 г экстракта кормовых дрожжей сухого, 17,0 Д (+) глюкозы, 0,1 г цистеина, 0,03 г железа сернокислого 7-водного, 0,6 г магния сернокислого, 1,5 г цитрата аммония, 4,0 г калия фосфорнокислого однозамещенного, 6,0 г натрия лимоннокислого трехзамещенного, 7,0 г натрия уксуснокислого плавленного, 7,0 г агара микробиологического, 3,0 г поваренной соли, 0,002 г кристаллвиолета, 0,04 г (40000 Ед) полимиксина М сульфата.The specified technical result during the implementation of the invention is achieved by the fact that the proposed medium contains sulfate salts of iron and magnesium, ammonium citrate, potassium phosphate monosubstituted, agar, sodium chloride, dry pancreatic casein hydrolyzate as a source of nitrogen nutrition, as a complex of B vitamins, fodder yeast extract , as carbohydrate D (+) glucose, as an amino acid with growth activity, cysteine, as a solvent for the protein components of the medium, trisubstituted c sodium nitrate, as an inhibitor of concomitant gram-negative enterobacteria and coccal microflora, melted sodium acetic acid, crystal-violet and polymyxin M sulfate in the following ratio of components, g / l:
Casein dry pancreatic hydrolyzate - 15.0 - 30.0
Dry fodder yeast extract - 3.0 - 7.0
D (+) glucose - 17.0 - 25.0
Cysteine - 0.1 - 0.3
Iron sulfate 7-water - 0.03 - 0.06
Magnesium sulfate 7-water - 0.6 - 1.0
Ammonium Citrate - 1.5 - 3.5
Monosubstituted potassium phosphate - 4.0 - 8.0
Tri-substituted sodium citrate - 6.0 - 8.5
Fused sodium acetate - 7.0 - 8.0
Microbiological agar - 7.0 - 12.0
Salt - 3.0 - 8.0
Crystal violet - 0.002 - 0.0025
Polymyxin M sulfate - 0.04 - 0.06 (40000-60000 units)
The environment is prepared as follows:
Example 1. In 1 l of distilled water, 15.0 g of dry casein pancreatic hydrolyzate of dry casein, 3.0 g of dry fodder yeast extract, 17.0 D (+) glucose, 0.1 g of cysteine, 0.03 g of iron sulfate 7 are successively dissolved -aqueous, 0.6 g of magnesium sulfate, 1.5 g of ammonium citrate, 4.0 g of monosubstituted potassium phosphate, 6.0 g of trisubstituted sodium citrate, 7.0 g of melted sodium acetate, 7.0 g of microbiological agar, 3, 0 g of sodium chloride, 0.002 g of crystal violet, 0.04 g (40,000 units) of polymyxin M sulfate.
Смесь нагревают до полного расплавления агара, кипятят 2 мин, фильтруют через ватный фильтр, после фильтрации снова доводят до кипения. The mixture is heated until the agar is completely melted, boiled for 2 minutes, filtered through a cotton filter, after filtration, brought back to a boil.
Среду остужают до 50oС и разливают в стерильные чашки Петри слоем 3-5 мм, оставляют на столе при закрытых крышках на 40-60 мин для застывания агара. Затем чашки со средой и крышки раздельно подсушивают в термостате в течение 1,5 ч до высыхания конденсационной влаги на крышках чашек, после чего чашки закрывают крышками и среда готова для использования.The medium is cooled to 50 o C and poured into sterile Petri dishes with a layer of 3-5 mm, left on the table with the lids closed for 40-60 minutes to solidify the agar. Then the cups with the medium and the lids are separately dried in the thermostat for 1.5 hours until the condensation moisture on the cup covers dries, after which the cups are closed with lids and the medium is ready for use.
Контроль качества среды осуществляют путем посева тест-штамма Lactobacterium plantarum 8-РА-3, Staphylocoсcus aureus 209 p, Escherichia coli 3912/41, Pseudomonas aeruginosa H8, Proteus vilgaris Hx 19 222.The quality control of the medium is carried out by seeding the test strain Lactobacterium plantarum 8-PA-3, Staphylococcus aureus 209 p, Escherichia coli 3912/41, Pseudomonas aeruginosa H 8 , Proteus vilgaris
Учет результатов производят через (46±2) ч инкубации посевов при (37±1)oС.The results are taken into account after (46 ± 2) h of incubation of crops at (37 ± 1) o C.
Пример 2. Отличается от примера 1 тем, что в 1 л воды растворяют 20,0 г панкреатического гидролизата казеина сухого, 5,0 г экстракта кормовых дрожжей, 22,0 г Д (+) глюкозы, 0,2 г цистеина, 0,04 г железа сернокислого 7-водного, 0,8 г магния сернокислого, 2,0 г цитрата аммония, 6,0 г калия фосфорнокислого однозамещенного, 7,0 г натрия лимоннокислого трехзамещенного, 7,5 г натрия уксуснокислого плавленного, 10,0 г агара микробиологического, 5,0 г поваренной соли, 0,002 г кристаллвиолета, 0,05 г (50000 Ед) полимиксина М сульфата. Example 2. It differs from example 1 in that 20.0 g of dry casein pancreatic hydrolyzate of dry casein, 5.0 g of feed yeast extract, 22.0 g of D (+) glucose, 0.2 g of cysteine, 0, 04 g of 7-hydrous iron sulfate, 0.8 g of magnesium sulfate, 2.0 g of ammonium citrate, 6.0 g of monosubstituted potassium phosphate, 7.0 g of trisubstituted sodium citrate, 7.5 g of fused sodium acetate, 10.0 g microbiological agar, 5.0 g of sodium chloride, 0.002 g of crystal violet, 0.05 g (50,000 U) of polymyxin M sulfate.
Пример 3. Отличается от примера 1, 2 тем, что в 1 л воды растворяют 30,0 г панкреатического гидролизата казеина сухого, 7,0 г экстракта кормовых дрожжей, 25,0 г Д (+) глюкозы, 0,3 г цистеина, 0,06 г железа сернокислого 7-водного, 1,0 г магния сернокислого, 3,5 г цитрата аммония, 8,0 г калия фосфорнокислого однозамещенного, 8,5 г натрия лимоннокислого трехзамещенного, 8,0 г натрия уксуснокислого плавленного, 12,0 г агара микробиологического, 8,0 г поваренной соли, 0,0025 г кристаллвиолета, 0,06 г (60000 Ед) полимиксина М сульфата. Example 3. It differs from example 1, 2 in that 30.0 g of dry casein pancreatic hydrolyzate of dry casein, 7.0 g of feed yeast extract, 25.0 g of D (+) glucose, 0.3 g of cysteine are dissolved in 1 liter of water, 0.06 g of 7-aqueous iron sulfate, 1.0 g of magnesium sulfate, 3.5 g of ammonium citrate, 8.0 g of monosubstituted potassium phosphate, 8.5 g of trisubstituted sodium citrate, 8.0 g of fused sodium acetate, 12, 0 g of microbiological agar, 8.0 g of sodium chloride, 0.0025 g of crystal violet, 0.06 g (60,000 U) of polymyxin M sulfate.
Далее согласно примеру 1. Further according to example 1.
Результаты бактериологического контроля предлагаемой и контрольной сред представлены в таблице. The results of bacteriological control of the proposed and control environments are presented in the table.
Из таблицы видно, что предлагаемая среда сохраняет основные биологические свойства: культура L. plantarum 8-PA-3 росла в виде колоний размером 1,0-1,2 мм, в то время как на контрольной среде наблюдался полиморфизм - размер колоний этой же культуры был от 0,1 до 1,0 мм. The table shows that the proposed environment retains the main biological properties: the culture of L. plantarum 8-PA-3 grew in the form of colonies with a size of 1.0-1.2 mm, while polymorphism was observed on the control medium - the size of the colonies of the same culture was from 0.1 to 1.0 mm.
Предлагаемая среда не требует стерилизации и дополнительных условий культивирования. Среда экономически выгодна, проста в приготовлении, не требует дополнительных затрат. Использование предлагаемой среды в практике здравоохранения будет способствовать улучшению диагностики дисбактериоза кишечника и правильной тактики его лечения. The proposed environment does not require sterilization and additional cultivation conditions. The environment is economically viable, easy to prepare, does not require additional costs. The use of the proposed environment in healthcare practice will help to improve the diagnosis of intestinal dysbiosis and the correct tactics of its treatment.
Источники информации
1. Регламент производства лактобактерина сухого, 1975 (г. Пермь).Sources of information
1. The rules for the production of dry lactobacterin, 1975 (Perm).
2. Ленцнер А.А., Тоом М.А., Микельсаар М.Э. К методике выделения лактобацилл из испражнений. Микробиология, 9, 1964, с.146. 2. Lenzner A.A., Toom M.A., Mikelsaar M.E. To the method of isolation of lactobacilli from feces. Microbiology, 9, 1964, p. 146.
3. Богданов В.М. Микробиология молока и молочных продуктов. М., "Пищевая промышленность". 1969, с.296. 3. Bogdanov V.M. Microbiology of milk and dairy products. M., "Food Industry". 1969, p. 266.
Claims (1)
Панкреатический гидролизат казеина сухой - 15,0 - 30,0
Экстракт кормовых дрожжей сухой - 3,0 - 7,0
Д(+) глюкоза - 17,0 - 25,0
Цистеин - 0,1 - 0,3
Железо сернокислое 7-водное - 0,03 - 0,06
Магний сернокислый 7-водный - 0,6 - 1,0
Цитрат аммония - 1,5 - 3,5
Калий фосфорнокислый однозамещенный - 4,0 - 8,0
Натрий лимоннокислый трехзамещенный - 6,0 - 8,5
Натрий уксуснокислый плавленный - 7,0 - 8,0
Агар микробиологический - 7,0 - 12,0
Поваренная соль - 3,0 - 8,0
Кристаллвиолет - 0,002 - 0,0025
Полимиксин М сульфат - 0,04 - 0,06пNutrient medium for the isolation of lactobacilli, containing a source of nitrogen nutrition, a source of vitamins of group B, D (+) glucose, iron sulfate 7-water, magnesium sulfate 7-water, cysteine, ammonium citrate, potassium phosphate monosubstituted, microbiological agar, sodium chloride, water distilled, characterized in that it additionally contains trisubstituted sodium citrate, fused sodium acetate, crystalline violet, polymyxin M sulfate, as a source of nitrogen nutrition - pancreatic hydrolyzate casein is dry, and as a source of B-group vitamins, feed yeast is dry in the following ratio of components, in g / l of distilled water:
Casein dry pancreatic hydrolyzate - 15.0 - 30.0
Dry fodder yeast extract - 3.0 - 7.0
D (+) glucose - 17.0 - 25.0
Cysteine - 0.1 - 0.3
Iron sulfate 7-water - 0.03 - 0.06
Magnesium sulfate 7-water - 0.6 - 1.0
Ammonium Citrate - 1.5 - 3.5
Monosubstituted potassium phosphate - 4.0 - 8.0
Tri-substituted sodium citrate - 6.0 - 8.5
Fused sodium acetate - 7.0 - 8.0
Microbiological agar - 7.0 - 12.0
Salt - 3.0 - 8.0
Crystal violet - 0.002 - 0.0025
Polymyxin M sulfate - 0.04 - 0.06p
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2001123804/13A RU2213779C2 (en) | 2001-08-27 | 2001-08-27 | Nutrient medium for isolation of lactobacilli |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2001123804/13A RU2213779C2 (en) | 2001-08-27 | 2001-08-27 | Nutrient medium for isolation of lactobacilli |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2001123804A RU2001123804A (en) | 2003-06-20 |
| RU2213779C2 true RU2213779C2 (en) | 2003-10-10 |
Family
ID=31988349
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2001123804/13A RU2213779C2 (en) | 2001-08-27 | 2001-08-27 | Nutrient medium for isolation of lactobacilli |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2213779C2 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7951913B2 (en) | 2006-06-02 | 2011-05-31 | Biotika A.S. | Method of polymyxin B recovery from fermentation broth |
| US8119371B2 (en) | 2006-06-15 | 2012-02-21 | Biotika A.S. | Process for the preparation of polymyxin B employing (PAENI) Bacillus polymyxa |
| RU2510416C1 (en) * | 2012-12-18 | 2014-03-27 | Федеральное бюджетное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кубанский государственный аграрный университет" | Nutritive medium for extraction of lactobacteria |
| RU2681440C1 (en) * | 2018-03-19 | 2019-03-06 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Quality control method of quality of fermented milk products |
-
2001
- 2001-08-27 RU RU2001123804/13A patent/RU2213779C2/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ЛЕНЦНЕР А.А. и др. К методике выделения лактобацилл из испражнений. - Микробиология, 1964, № 9, с.146. СТЕПАНЕНКО П.П. Микробиология молока и молочных продуктов. - М., 1999, с.150-153. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7951913B2 (en) | 2006-06-02 | 2011-05-31 | Biotika A.S. | Method of polymyxin B recovery from fermentation broth |
| US8119371B2 (en) | 2006-06-15 | 2012-02-21 | Biotika A.S. | Process for the preparation of polymyxin B employing (PAENI) Bacillus polymyxa |
| RU2510416C1 (en) * | 2012-12-18 | 2014-03-27 | Федеральное бюджетное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кубанский государственный аграрный университет" | Nutritive medium for extraction of lactobacteria |
| RU2681440C1 (en) * | 2018-03-19 | 2019-03-06 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Quality control method of quality of fermented milk products |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SE463598B (en) | PREPARATION, PROVIDED TO INCREASE THE ADMINISTRATION OF BACTERIA TO THE GIANT GAS OF HUMAN AND ANIMALS, AND A MANUFACTURING PROCEDURE FOR THIS | |
| US3856627A (en) | Culture medium for bacteria | |
| RU2213779C2 (en) | Nutrient medium for isolation of lactobacilli | |
| RU2681285C1 (en) | Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation | |
| RU2475535C1 (en) | Method to produce probiotic preparation lacto-amylovorin | |
| RU2510416C1 (en) | Nutritive medium for extraction of lactobacteria | |
| RU2415922C1 (en) | Nutrient medium for lactic acid bacilli cultivation | |
| RU2184774C1 (en) | Strain of bacterium bacillus subtilis used for preparing probiotic preparation designated for prophylaxis and treatment of gastroenteric diseases in animals, poultry and piscine | |
| RU2203947C1 (en) | Strain of bacterium bacillus licheniformis used for preparing probiotic preparation designated for prophylaxis and treatment of gastroenteric diseases in animals, poultry and fishes | |
| RU2788920C2 (en) | Method for production of bacterial concentrate | |
| RU2158302C2 (en) | Nutrient medium for bifidobacterium and lactobacterium culturing | |
| RU2333948C2 (en) | Nutritional medium for growing causative agent of tularemia | |
| RU2170023C2 (en) | Strain lactobacillus acidophilus a-91 used for preparing fermented-milk products, strain lactobacillus acidophilus h-91 used for preparing fermented-milk products, ferment for preparing fermented-milk products and preparation promoting body adaptation to unfavorable environment effects | |
| RU2264455C2 (en) | Broth for selective accumulation yersinia enterocolitica and yersinia pseudotuberculosis | |
| RU2804076C1 (en) | Nutrition medium for cultivation of transplant cell cultures | |
| RU2193061C1 (en) | Nutrient medium for tuberculosis mycobacterium culturing (mbt-broth) | |
| JPS62181797A (en) | Production of protein antigen produced by pathogenic bacteria of domestic animal or fowl | |
| Admanova et al. | Some enzymatic properties of lactic acid bacteria isolated from dairy products | |
| RU2103353C1 (en) | Strain of bacterium lactobacillus acidophilus used for correction of disbacteriosis at gastroenteric diseases and in patient with large intestine cancer | |
| RU2350648C1 (en) | Method of estimation of probiotics opposing activity on basis of lyophilised biomass of anaerobic bacteria in relation to pathogenic micobacteria | |
| RU2266956C2 (en) | Broth for brucelle isolation | |
| RU2644248C2 (en) | Dense nutrient medium for cultivation and growing of tularemic microbe | |
| RU2244744C2 (en) | Method for preparing liquid lactobacterin | |
| RU2328526C1 (en) | Method for revealing cattle tuberculosis mycobacteria | |
| SU1751199A1 (en) | Nutrient medium for pathogenic staphylococci isolation |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TK4A | Correction to the publication in the bulletin (patent) |
Free format text: AMENDMENT TO CHAPTER -FG4A- IN JOURNAL: 28-2003 |
|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20180716 |
|
| PD4A | Correction of name of patent owner |