RU2205404C2 - Способ количественного определения глюкозы в биологических и водных растворах - Google Patents
Способ количественного определения глюкозы в биологических и водных растворах Download PDFInfo
- Publication number
- RU2205404C2 RU2205404C2 RU2000129576/14A RU2000129576A RU2205404C2 RU 2205404 C2 RU2205404 C2 RU 2205404C2 RU 2000129576/14 A RU2000129576/14 A RU 2000129576/14A RU 2000129576 A RU2000129576 A RU 2000129576A RU 2205404 C2 RU2205404 C2 RU 2205404C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- glucose
- aqueous solutions
- biological
- drop
- urine
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 title claims abstract description 30
- 239000008103 glucose Substances 0.000 title claims abstract description 30
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 title claims abstract description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract 3
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 claims abstract 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 6
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 claims description 3
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 abstract 1
- 238000000711 polarimetry Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 16
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 9
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 9
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- RNVCVTLRINQCPJ-UHFFFAOYSA-N o-toluidine Chemical compound CC1=CC=CC=C1N RNVCVTLRINQCPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к способу определения глюкозы в биологических и водных растворах. Для осуществления способа к одной капле исследуемой жидкости добавляют каплю ортофосфорной кислоты, нагревают до температуры 240±20oС в течение 1-3 минут, растворяют в 50 мл дистиллированной воды. и регистрируют цветную реакцию колориметрическим или поляриметрическим методом. Технический результат: повышение чувствительности и упрощение способа. 2 ил.
Description
Изобретение относится к способам определения количества сахарозы (сахара), глюкозы в биологических и водных растворах.
Существующие способы определения уровня сахарозы в водных растворах определяются в основном приборами поляриметрами, использующими поляризованный свет, проходящий через раствор, и вращающий луч в зависимости от концентрации сахарозы в растворе.
Несмотря на грубость замера, метод используется в пищевой промышленности.
В биологических же средах уровень глюкозы определяется при помощи более точных способов. Так при определении уровня глюкозы в крови, сыворотке, плазме крови, а также в моче применяют ортотолуидиновый метод. Это наиболее близкий способ по достигаемому эффекту.
Принцип этого метода состоит в том, что в кислой среде при повышенной температуре глюкоза образует с ортотолуидином комплексное соединение сине-зеленого цвета. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации глюкозы в исследуемом растворе, которая колориметрируется на приборе ФНК (фото-колориметр-нефилометр).
Однако этот метод для определения уровня глюкозы в моче используется на практике редко, т.к. метод сложен, многооперационен и требует высокой квалификации исполнителя.
На практике существуют унифицированные методы оценки уровня глюкозы в моче.
1. Качественные методы оценки наличия глюкозы в моче:
1.1. Проба Гайнеса. Принцип "Проба Бенедикта". Реактивы - 13,3 г химически чистого кристаллического сульфата меди растворяют в 400 мл воды, 50 г едкого натра растворяют в 400 мл воды и 15 г чистого глицерина разводят в 300 мл воды. Все три раствора смешивают. Одну каплю мочи и 9 капель реагента доводят до кипения.
1.1. Проба Гайнеса. Принцип "Проба Бенедикта". Реактивы - 13,3 г химически чистого кристаллического сульфата меди растворяют в 400 мл воды, 50 г едкого натра растворяют в 400 мл воды и 15 г чистого глицерина разводят в 300 мл воды. Все три раствора смешивают. Одну каплю мочи и 9 капель реагента доводят до кипения.
При отсутствии глюкозы цвет реактива не меняется.
Методика принята как унифицированная. Приказ Министра здравоохранения СССР 290 от 11 апреля 1972 г., с. 18-19.
1.2. Применение реактивной бумаги "Глюкотест". Проба энзимологическая с помощью реактивной бумаги.
Принцип - метод основан на окислении глюкозы ферментом глюкозооксидазы. Изменение окраски реактивной бумаги соответствует присутствию в моче глюкозы.
Метод принят как унифицированный. Приказ Министра здравоохранения СССР от 11 апреля 1978 г., с. 16-18.
2. К количественным методам уровня глюкозы в моче относятся следующие.
2.1. Поляриметрический метод.
Мочу подкисляют уксусной кислотой, кипятят, охлаждают, фильтруют, отсорбируют и снова фильтруют. Заполняют трубку поляриметра профильтрованной мочой. Закрывают шлифованным стеклом, помещают в аппарат. По углу отклонения поляризованного луча определяют % содержание глюкозы.
Метод принят как унифицированный. Приказ Министра здравоохранения СССР 290 от 11 апреля 1972 г., с. 20-21.
2.2. Колориметрический метод (модификация метода Альтгаузена). 4 мл испытываемой мочи смешивают с 1 мл 10% раствора едкого натрия. Ставят в кипящую водяную баню на 3 мин. Через 10 мин, колориметрируют на ФКН.
Количество глюкозы в процентах находят на калибровочной кривой.
"Унифицированные методы клинических лабораторных исследований" В.1. Биохимические методы. Под редакцией проф. В.В. Меньшикова, Москва, 1970, с. 87-89.
3. Существуют другие методы определения глюкозы в моче (титрационный, бродильный, ортотолуидиновый), которые редко применяют в практических лабораториях.
"Методические указания по применению унифицированных клинических лабораторных методов исследования". Раздел биохимических исследований. Москва, 1972 г., с. 60.
Литература: Справочник по клиническим лабораторным методам исследования под редакцией Е.А. Кост. Издательство второе переработанное и дополненное. - М.: Медицина, 1972 г., с. 224-227.
Существующие указанные количественные методы сложны, многоперационны, требуют большого количества специального оборудования и высокой квалификации исполнителя, а также обладают низкой точностью при малом уровне глюкозы в моче.
Низкий уровень точности замера количества глюкозы в моче обуславливается не регистрирующими приборами, а самими способами.
До настоящего времени не существует высокочувствительного ферментивного метода, который бы позволил определять глюкозу в моче у здоровых людей и мог быть рекомендован для клинико-диагностических целей.
Целью предлагаемого изобретения является способ определения уровня глюкозы, сахарозы в биологических и водных растворах, который значительно проще и обладает высокой чувствительностью.
Способ дает возможность определять уровень глюкозы в моче как здорового человека, так и больных сахарным диабетом.
Предлагаемый способ является единым для растворов биологических и водных и заключается в следующем.
На покровное стекло капают одну каплю концентрированной ортофосфорной кислоты, добавляют каплю исследуемого раствора и нагревают эту навеску до температуры 240±20oС в течение 1-3 минут. Степень потемнения навески пропорциональна концентрации глюкозы или сахарозы в растворе, и изменение цвета обуславливается глубокими изменениями углеродной структуры.
После этого накрывают указанную навеску стеклом (толщиной 1,5-2 мм) и делают качественную оценку по аналогии с указанным методом "Глюкотест" для мочи, т. е. , если светлый цвет, то уровень глюкозы в норме, если темный, - выше нормы.
При таком визуальном способе оценки уровня глюкозы и сахарозы в растворах используется и шкала цветности для более диференцированного определения уровня глюкозы, сахарозы в растворах.
Для качественной оценки указанную навеску после температурной обработки растворяют в 50 мл дисцилированной воды, заливают в 10 мм кювету и колометрируют на приборе ФКН. Количество глюкозы или сахарозы в моче или в водном растворе определяют на калибровочной кривой. Графики определения глюкозы в водном раствор и биологическом прилагаются (фиг.1, 2).
График замера сахарозы принципиально ничем не отличается от графика глюкозы.
Claims (1)
- Способ количественного определения глюкозы в биологических и водных растворах заключается в добавлении к ним кислой среды с последующим нагревом и регистрацией цветной реакции колориметрическим методом или поляриметром, отличающийся тем, что к одной капле исследуемой жидкости добавляют одну каплю орто-фосфорной кислоты с последующим нагревом до температуры (240±20)oС в течение 1-3 мин, а после температурной обработки растворяют исследуемую жидкость в 50 мл дистиллированной воды, заливают десятимиллиметровую кювету и колориметрируют на приборе ФКН, определяя величину глюкозы в исследуемом растворе на калибровочной кривой.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000129576/14A RU2205404C2 (ru) | 2000-11-28 | 2000-11-28 | Способ количественного определения глюкозы в биологических и водных растворах |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000129576/14A RU2205404C2 (ru) | 2000-11-28 | 2000-11-28 | Способ количественного определения глюкозы в биологических и водных растворах |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2205404C2 true RU2205404C2 (ru) | 2003-05-27 |
| RU2000129576A RU2000129576A (ru) | 2003-07-27 |
Family
ID=20242584
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000129576/14A RU2205404C2 (ru) | 2000-11-28 | 2000-11-28 | Способ количественного определения глюкозы в биологических и водных растворах |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2205404C2 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2314528C1 (ru) * | 2006-11-23 | 2008-01-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Тверская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ определения глюкозы в ротовой жидкости |
| RU2339948C1 (ru) * | 2007-06-26 | 2008-11-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Тверская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ определения суммарного количества альдоз в смешанной слюне |
| RU2429471C1 (ru) * | 2010-04-21 | 2011-09-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Воронежская государственная технологическая академия (ГОУ ВПО ВГТА) | Способ количественного определения глюкозы в водном растворе |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3958560A (en) * | 1974-11-25 | 1976-05-25 | Wayne Front March | Non-invasive automatic glucose sensor system |
| DE4315532A1 (de) * | 1992-05-12 | 1993-11-18 | Bayer Diagnostics Puteaux | Verfahren zur Überwachung einer physikalischen Größe, System zur Durchführung dieses Verfahrens und zu diesem System gehörendes Kompaktgehäuse |
| RU2012878C1 (ru) * | 1991-07-19 | 1994-05-15 | Феликс Борисович Левин | Универсальная тест-полоска для определения содержания глюкозы в моче, крови и других биологических жидкостях |
| RU2023270C1 (ru) * | 1990-04-02 | 1994-11-15 | Санкт-Петербургский государственный университет | Способ определения глюкозы в крови |
| RU2042947C1 (ru) * | 1992-11-19 | 1995-08-27 | Государственный научно-исследовательский институт биологического приборостроения | Аналитический элемент для определения глюкозы в крови |
| RU97107120A (ru) * | 1997-04-30 | 1999-04-10 | Э.Л. Федоров | Способ определения сахара, глюкозы в биологических и водных растворах |
| US6091976A (en) * | 1996-05-09 | 2000-07-18 | Roche Diagnostics Gmbh | Determination of glucose concentration in tissue |
-
2000
- 2000-11-28 RU RU2000129576/14A patent/RU2205404C2/ru active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3958560A (en) * | 1974-11-25 | 1976-05-25 | Wayne Front March | Non-invasive automatic glucose sensor system |
| RU2023270C1 (ru) * | 1990-04-02 | 1994-11-15 | Санкт-Петербургский государственный университет | Способ определения глюкозы в крови |
| RU2012878C1 (ru) * | 1991-07-19 | 1994-05-15 | Феликс Борисович Левин | Универсальная тест-полоска для определения содержания глюкозы в моче, крови и других биологических жидкостях |
| DE4315532A1 (de) * | 1992-05-12 | 1993-11-18 | Bayer Diagnostics Puteaux | Verfahren zur Überwachung einer physikalischen Größe, System zur Durchführung dieses Verfahrens und zu diesem System gehörendes Kompaktgehäuse |
| RU2042947C1 (ru) * | 1992-11-19 | 1995-08-27 | Государственный научно-исследовательский институт биологического приборостроения | Аналитический элемент для определения глюкозы в крови |
| US6091976A (en) * | 1996-05-09 | 2000-07-18 | Roche Diagnostics Gmbh | Determination of glucose concentration in tissue |
| RU97107120A (ru) * | 1997-04-30 | 1999-04-10 | Э.Л. Федоров | Способ определения сахара, глюкозы в биологических и водных растворах |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Лабораторные методы исследования в клинике. Справочник /Под ред. проф. В.В. Меньшикова. - М.: Медицина, 1987, с.231. * |
| Справочник по клиническим лабораторным методам исследования/ Под редакцией Е.А. Кост. - М.: Медицина, 1972, с.224-227. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2314528C1 (ru) * | 2006-11-23 | 2008-01-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Тверская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ определения глюкозы в ротовой жидкости |
| RU2339948C1 (ru) * | 2007-06-26 | 2008-11-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Тверская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ определения суммарного количества альдоз в смешанной слюне |
| RU2429471C1 (ru) * | 2010-04-21 | 2011-09-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Воронежская государственная технологическая академия (ГОУ ВПО ВГТА) | Способ количественного определения глюкозы в водном растворе |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4515786B2 (ja) | 全血中の分析対象物の計測に対するヘマトクリットの影響を減らす方法ならびに当該方法で有用な試験キット及び試験用品 | |
| RU2050545C1 (ru) | Способ определения содержания глюкозы в цельной крови, фотометр для его реализации | |
| Cramp | New automated method for measuring glucose by glucose oxidase | |
| Vonach et al. | Application of mid-infrared transmission spectrometry to the direct determination of glucose in whole blood | |
| Coe et al. | Variations in vitreous humor chemical values as a result of instrumentation | |
| WO2000013002A3 (en) | Reagentless analysis of biological samples | |
| RU2343456C1 (ru) | Устройство для определения агрегационной способности тромбоцитов и свертываемости крови | |
| JPS5997041A (ja) | 着色水性流動体の濃度測定のための装置と方法 | |
| Levinson et al. | Measuring hemoglobin in plasma by reaction with tetramethylbenzidine. | |
| US5593894A (en) | Direct cholesterol assay | |
| CN104390918A (zh) | 一种糖尿病及其并发症的无创检测系统和方法 | |
| Sudha et al. | Quantification of sweat urea in diabetes using electro-optical technique | |
| RU2205404C2 (ru) | Способ количественного определения глюкозы в биологических и водных растворах | |
| WO2009071102A1 (en) | Optical method and device for measuring concentrations of substances in biological fluids | |
| Mathews-Roth et al. | Some factors affecting determination of carotenoids in serum. | |
| Leelasattarathkul et al. | Combination of distance-based paper analytical devices with ionic liquid-based dispersive liquid-liquid microextraction for enzyme-free bilirubin quantification | |
| US4304488A (en) | Blood oxygen analyzer | |
| EP0707711B1 (en) | Direct cholesterol assay | |
| US4211531A (en) | Colorimetric cholesterol assay | |
| Rendl et al. | Methods for measuring iodine in urine and serum | |
| US5246864A (en) | Circular dichroism and spectrophotometric absorption detection methods | |
| CN102901711A (zh) | 定量检测肌氨酸的肌氨酸氧化酶方法及检测试剂盒 | |
| Sonntag | Dry chemistry: analysis with carrier-bound reagents | |
| Bachorik | Lipid and lipoprotein analysis with desktop analyzers | |
| CN1313818C (zh) | 一种检测尿液中磷酸根的方法 |