RU2196607C2 - Способ получения гипериммунной антирабической сыворотки - Google Patents
Способ получения гипериммунной антирабической сыворотки Download PDFInfo
- Publication number
- RU2196607C2 RU2196607C2 RU2001108407A RU2001108407A RU2196607C2 RU 2196607 C2 RU2196607 C2 RU 2196607C2 RU 2001108407 A RU2001108407 A RU 2001108407A RU 2001108407 A RU2001108407 A RU 2001108407A RU 2196607 C2 RU2196607 C2 RU 2196607C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- rabies
- sheep
- sera
- hyperimmune
- immunization
- Prior art date
Links
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 16
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 claims abstract description 18
- 241001494479 Pecora Species 0.000 claims abstract description 13
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims abstract description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims abstract description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 16
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 16
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 16
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 8
- 241000711798 Rabies lyssavirus Species 0.000 claims description 7
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 7
- 229940049155 rabies serum Drugs 0.000 claims description 5
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims description 4
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 abstract description 11
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 5
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 4
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 4
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 229960003127 rabies vaccine Drugs 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 208000031295 Animal disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283725 Bos Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000006054 immunological memory Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000003771 laboratory diagnosis Methods 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии. Способ осуществляется путем 5-кратной иммунизации овец инактивированным вирусом бешенства. Иммунизацию проводят в 3-42 точки животного с интервалом 14 дней. Способ позволяет получать сыворотки крови овец с титрами антител в тесте ингибиции фокусов флюоресценции 1: 10240 - 20480, а в реакции диффузной преципитации - 1:16 - 32. Способ позволяет эффективно и безопасно получать гипериммунные антирабические сыворотки с высокой вируснейтрализующей и преципитирующей активностью. 2 табл.
Description
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, в частности к способу получения диагностической гипериммунной антирабической сыворотки крови овец, и может быть использовано в научных учреждениях, предприятиях биологической промышленности и производственных лабораториях.
В настоящее время лабораторная диагностика бешенства базируется на серологических методах, достоверность которых зависит от качества ряда используемых реагентов и, в первую очередь, от активности и специфичности иммуноглобулинов [Laboratory techniques in rabies.- 1996,-450 с.].
В практике получения антирабических сывороток крови ряд исследователей использовали различные виды гетерологичных и гомологичных животных (морских свинок, кроликов, собак, овец, ослов, крупного рогатого скота, лошадей).
Кузнецова С. В. (1975), Бучнев К.Н. (1985) иммунизировали различных животных гомологичными и гетерологичными антигенами вируса бешенства, инактивированными 0,5% фенолом, материал вводили в возрастающих концентрация подкожно с интервалом между введениями 2-3 дня [Кузнецова С.В., Передереев Н. И. , Кузнецов П.П., Простяков А.П., Игнатьева B.C. Метод получения антирабической сыворотки // Тр. ВГНКИ. - 1975. - XXII, - с. 51-54; Бучнев К.Н., Квасов И.Л., Турсункулов Ш.Ж. Вируснейтрализующая и преципитирующая активность сывороток крови лошадей, привитых рабическими вирус-антигенами // Вестник с/х науки Казахстана. - 1985. - 2, - c.71-75].
Fuenzalida Е. и Palacios R. (1964), а позже Селимов М.А. (1978) для приготовления гипериммунной сыворотки использовали лошадей, которых подкожно иммунизировали вначале вирусом бешенства инактивированным фенолом, а затем вирулентным вирусом с интервалом 7 дней, но на заключительном этапе проводили сочетанное введение антигена подкожно, внутримышечно и внутрикожно [Fuenzalida Е., Palacios R. Production antirabic serum in horse // Bull. Wld Halth Org. - 1964. - 30, - p.437; Селимов М.А., Гордиенко Е.Г., Рачинская М. С. Антирабический гамма-глобулин из сыворотки лошадей // Руководство по вакцинному и сывороточному делу. - 1978, - с. 308-315].
Бусыгин К.Ф. (1986) и Турсункулов Ш.Ж. (1990) проводили гипериммунизацию лошадей, крупного рогатого скота и овец инактивированным, а затем вирулентным вирусом бешенства с интервалами в 7 дней. Авторами показано, что оптимальным при иммунизации является использование антигенов гомологичных виду продуцентов, которые обладают более выраженными иммуногенными свойствами по сравнению с гетерологичными [Бусыгин К.Ф. Флуоресцирующий антирабический глобулин из сыворотки крови баранов // Болезни животных. - 1986. - 89-91; Турсункулов Ш. Ж. Усовершенствование схем иммунизации лошадей, волов и овец-продуцентов гипериммунной антирабической сывороткой // Автореф. дис. канд. вет. наук. - 1990, - 25 с.].
Прототипом настоящего изобретения является способ получения антирабических сывороток, предложенный Luekrajang Т., (1996). Принцип способа заключается в подкожном введении инактивированного антигена в одну точку с интервалом 7 дней (при первичном введении с полным адъювантом Фрейнда) на протяжении 105 дней [Luekrajang Т., Wangsar. Т. и Phanuphak P. Production of antirabies serum of equine origin // Laboratory techniques in rabies. - 1996, - p. 401-403].
Таким образом, все известные способы получения антирабической сыворотки заключались во введении вируса под кожу животных (только на заключительных этапах использовали иной способ иммунизации) с 1-7 дневными интервалами, т. е. не учитывали динамику формирования антител и интервалы между инъекциями антигена.
Хотя достоверно известно, что клон иммунологической памяти, способный реагировать по вторичному типу, формируется только к 30 дню после первичного введения рабического антигена, а оптимальным интервалом между последующими инъекциями является период не менее 14 дней [Грибенча С.В. Современные аспекты биологии и профилактики лиссавирусных инфекций // Дисс. докт. мед. наук. - М., - 1993, - 80 с.].
Кроме этого, немаловажное значение имеет способ аппликации антигена, поскольку показана зависимость формирования иммунитета от обеспечения контакта рабического антигена с обширной сетью нервных рецепторов. Установлено, что наиболее выраженный иммунитет наблюдается при иммунизации животных внутрикожно и в меньшей степени иммуногенная потенция проявляется при аппликации внутримышечно и еще меньше - подкожно [Грибенча С.В. Современные аспекты биологии и профилактики лиссавирусных инфекций // Дисс. докт. мед. наук. - М. , - 1993, - 80 с; Иванов B.C., Самуйленко А.Я., Титеричев В.И., Иванов И.В. Проявление иммуногенной потенции антирабической вакцины из штамма Щелково-51 в зависимости от места ее введения // Тезисы конф. - Щелково. - 2000, - с.33-36].
Так, при внутрикожной иммунизации у животных вырабатывались антирабические антитела в титре 1:800, при внутримышечном введении - 1:200-400, а при подкожном 1:100 [Недосеков В.В. Разработка и совершенствование средств и методов оценки эффективности вакцин против бешенства // Автореф. дисс. на соис. уч. ст. к. вет. н. - Покров. - 1998, 24 с.].
Поэтому с учетом вышеописанного и в отличие от прототипов для получения высокоактивной антирабической сыворотки крови овец необходимо использование грундиммунизации с последующей комбинированной иммунизацией (внутрикожной и внутримышечной) овец гомологичным сорбированным и эмульгированным антигенами и введением антигена с высокой множественностью инъецирования.
В связи с этим нами разработан способ гипериммунизации животных при внутрикожном или внутримышечном введении антигена. Целью предлагаемого изобретения является разработка эффективного и безопасного способа получения гипериммунной антирабической сыворотки, обладающей высокой вируснейтрализующей и преципитирующей активностью.
Поставленная цель достигается тем, что при получении сывороток крови овец животных иммунизируют внутрикожным и внутримышечным способами инактивированным вирусом бешенства, референс-штаммом CVS, с высокой множественностью инъецирования (3-42 точек), с сочетанным использованием адъювантов и соблюдением интервалов иммунизации (14 дней).
В отечественной литературе материалов и результатов подобных исследований нами не обнаружено.
Примеры конкретного выполнения
Для иммунизации применяли гомологичный антиген вируса бешенства, представляющий собой 5%-ную суспензию мозга овец, инфицированных вирусом бешенства, референс-штамм CVS, инактивированную β-пропиолактоном (1:4000, в течение 2 ч при 37oС).
Для иммунизации применяли гомологичный антиген вируса бешенства, представляющий собой 5%-ную суспензию мозга овец, инфицированных вирусом бешенства, референс-штамм CVS, инактивированную β-пропиолактоном (1:4000, в течение 2 ч при 37oС).
Антиген, предназначенный для внутрикожного введения, эмульгировали в равных пропорциях с адъювантом Фрейнда (первоначально в полном адъюванте Фрейнда (ПАФ), в последующем в неполном адъюванте Фрейнда (НАФ)). Антиген для внутримышечного введения сорбировали на 0,3% гидроокиси алюминия в течение 18 ч при 4oС. Схема иммунизации представлена в таблице 1.
После окончания иммунизации отбирали сыворотки крови и определяли уровень вируснейтрализующих и преципитирующих антител в тесте ингибиции фокусов флуоресценции (ТИФФ) и реакции диффузионной преципитации (РДП).
С целью сравнительных исследований проведена иммунизация овец аналогично подготовленным антигеном (гомологичный, инактивированный, сорбированный), но традиционным способом - подкожно. Результаты сравнительного тестирования активности полученных гипериммунных сывороток представлены в табл. 2.
Из данных таблицы видно, что титр сывороток крови овец, полученных предлагаемым способом, составлял в ТИФФ 1:10240-20480, в РДП 1:16-32.
Следовательно, предлагаемым способом гипериммунизации овец можно получить высокоактивные антирабические сыворотки крови, пригодные для разработки высокочувствительных и специфичных средств диагностики бешенства.
Предлагаемый способ безопасен и может быть промышленно применен в научно-исследовательских институтах и производственных лабораториях.
Claims (1)
- Способ получения гипериммунной антирабической сыворотки крови овец, включающий иммунизацию овец инактивированным антигеном вируса бешенства и выделение гипериммунных антирабических сывороток, отличающийся тем, что иммунизацию овец проводят 5-кратно с интервалом 14 дней, используя внутрикожное и внутримышечное введение антигена вируса бешенства с адъювантами (адъюванты Фрейнда и гидроокись алюминия соответственно) в 3-4-2 точки животного, а выделенные сыворотки имеют титр антител в тесте ингибиции фокусов флюоресценции 1: 10240 - 20480, а в реакции диффузной преципитации - 1: 16 - 32.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2001108407A RU2196607C2 (ru) | 2001-03-30 | 2001-03-30 | Способ получения гипериммунной антирабической сыворотки |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2001108407A RU2196607C2 (ru) | 2001-03-30 | 2001-03-30 | Способ получения гипериммунной антирабической сыворотки |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2196607C2 true RU2196607C2 (ru) | 2003-01-20 |
Family
ID=20247777
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2001108407A RU2196607C2 (ru) | 2001-03-30 | 2001-03-30 | Способ получения гипериммунной антирабической сыворотки |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2196607C2 (ru) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2322503C1 (ru) * | 2006-07-21 | 2008-04-20 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ получения высокоспецифичной гетерологичной антирабической сыворотки |
| RU2339401C2 (ru) * | 2006-11-28 | 2008-11-27 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Препарат гетерологичного антирабического иммуноглобулина для внутривенного и внутримышечного введения и способ его получения |
| RU2609766C1 (ru) * | 2015-11-09 | 2017-02-02 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" (ФГБНУ ВНИТИБП) | Способ получения антирабической диагностической сыворотки |
| RU2772751C1 (ru) * | 2020-12-08 | 2022-05-25 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Центральная научно-методическая ветеринарная лаборатория" | Способ получения гипериммунной сыворотки к аденовирусу bovine-10 крупного рогатого скота |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2010577C1 (ru) * | 1991-07-09 | 1994-04-15 | Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока | Способ получения диагностической сыворотки |
| RU2134590C1 (ru) * | 1997-11-24 | 1999-08-20 | Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Способ изготовления инактивированной вакцины против бешенства животных |
-
2001
- 2001-03-30 RU RU2001108407A patent/RU2196607C2/ru active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2010577C1 (ru) * | 1991-07-09 | 1994-04-15 | Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока | Способ получения диагностической сыворотки |
| RU2134590C1 (ru) * | 1997-11-24 | 1999-08-20 | Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Способ изготовления инактивированной вакцины против бешенства животных |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| LUEKRAJANG T., WANGSAR J., PHANUPHAK P. Production of antirabies serum of eguine origin. Laboratоry technigues in rabies. - 1996, р.401-403. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2322503C1 (ru) * | 2006-07-21 | 2008-04-20 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ получения высокоспецифичной гетерологичной антирабической сыворотки |
| RU2339401C2 (ru) * | 2006-11-28 | 2008-11-27 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Препарат гетерологичного антирабического иммуноглобулина для внутривенного и внутримышечного введения и способ его получения |
| RU2609766C1 (ru) * | 2015-11-09 | 2017-02-02 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" (ФГБНУ ВНИТИБП) | Способ получения антирабической диагностической сыворотки |
| RU2772751C1 (ru) * | 2020-12-08 | 2022-05-25 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Центральная научно-методическая ветеринарная лаборатория" | Способ получения гипериммунной сыворотки к аденовирусу bovine-10 крупного рогатого скота |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11554170B2 (en) | Immunogenic formulations comprising linear or branched polyacrylic acid polymer adjuvants | |
| RU2004121149A (ru) | Иммунизация против chlamydia trachomatis | |
| Pinto et al. | Immune response to virus-infection-associated (VIA) antigen in cattle repeatedly vaccinated with foot-and-mouth disease virus inactivated by formalin or acetylethyleneimine | |
| US5807551A (en) | Method to provide artificial passive immunity in birds | |
| Francis et al. | Antibody response in pig nasal fluid and serum following foot-and-mouth disease infection or vaccination | |
| Kang et al. | Protective immunity induced by CpG ODN‐adjuvanted virus‐like particles containing Toxoplasma gondii proteins | |
| RU2196607C2 (ru) | Способ получения гипериммунной антирабической сыворотки | |
| US4040904A (en) | Novel rabies virus vaccine and processes | |
| JPH09110719A (ja) | 実質的には非宿主アルブミンを含有しないアジユバント化ワクチン | |
| Mirchamsy et al. | Inactivated African horse sickness virus cell culture vaccine | |
| RU2002119313A (ru) | Способ получения противотуляремийной гипериммунной сыворотки и диагностикума эритроцитарного туляремийного иммуноглобулинового сухого | |
| Joo et al. | Antibody responses of guinea-pigs, rabbits and pigs to inactivated porcine parvovirus vaccines | |
| US3629413A (en) | Polyvalent bovine vaccines and methods of making and using same | |
| RU2587323C1 (ru) | Способ получения гипериммунной сыворотки против парагриппа-3 крупного рогатого скота | |
| CN110507819B (zh) | 青蒿琥酯作为免疫佐剂在制备狂犬病疫苗中的应用 | |
| Sudjarwo et al. | Production and characterization protein of anti HIV specific immunoglobulin Y for Immunotherapy | |
| WO1994006475A1 (en) | Attenuated, live vaccine for delaware strain ibdv | |
| RU2305936C1 (ru) | Способ специфической профилактики инфекционных респираторных болезней телят при групповом содержании | |
| RU2322503C1 (ru) | Способ получения высокоспецифичной гетерологичной антирабической сыворотки | |
| Rock et al. | The evaluation of an experimental porcine herpesvirus 1 (Aujeszky's disease virus) subunit vaccine in mice | |
| SU1676629A1 (ru) | Способ иммунизации животных | |
| RU2609766C1 (ru) | Способ получения антирабической диагностической сыворотки | |
| Aminzadeh et al. | Vaccine safety of a new toxoid-based vaccine against Clostridioides difficile infection in rabbits | |
| RU2183972C2 (ru) | Способ получения высокоактивной специфической к вирусу классической чумы свиней сыворотки крови свиней | |
| US3255081A (en) | Anti-viral vaccines immunized against oncogenic viruses |