RU21958U1 - Инкубационно-диффузионная установка для экспресс-оценки бактерицидности и токсичности лекарственных препаратов - Google Patents

Abstract

1. Инкубационно-диффузионная установка для экспресс-оценки бактерицидности и токсичности лекарственных препаратов, отличающаяся тем, что она имеет термостат, в котором расположены емкость в емкости, в которые внесены на одинаковом уровне растворы, во внутреннюю емкость - лекарственный препарат, а в наружную - питательная среда с живой культурой Тетрахимена периформис, причем дно-мембрана внутренней емкости выполнено из целлофана.2. Инкубационно-диффузионная установка по п.1, отличающаяся тем, что в термостате расположена дополнительная идентичная система для контроля, в которой в наружной емкости содержится только культура Тетрахимена периформис.

Description

ИНКУБАЦМОННО-ДПФФ ЗПОННЛЯ СТАНОВКЛ ДЛЯ ЭКСПРЕСС-ОЦЕНКИ БАКТЕРПЦИДНОСТИ И ТОКСИЧННОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ НРЕНАРАТОВ

Г1редпола аемая полезная модель относится к медицине, а именно к фармакологии, биохимии, микробиоло Ч1и, инфекционным болезням, хирургии, анестезиологии и др. областям медицины. Оно может быть использовано для быстрого исследования действия лекарственных средств на подвижность и жизнеспособность одноклеточных организмов, как индикатора бактерицидности и токсичности лекарстве1П{ых средств.

Тоскольку многие химические процессы являются общими для бактерий, животных и человека, го некогорые зксперименгьк воспроизведенные на одноклеточных организмах можно с успехом экстраполировать на организм человека. Известно, что отдельные лекарственные средства, не относящиеся к классу антибиотиков, обладают способностью ингибировать активность ферментов, катализирующих обмен белков, углеводов и жиров и тем самым проявлять антибактериальные свойства. Экспериментируя с растворами чистых ферменгов, лекарсгвенных препаратов и культурами одноклеточных организмов, можно установить влияние того или иного лекарства на оп-ределенные звенья метаболизма и в организме человека.

в современной медицине, особенно нри оказании анестезиологического или реаниматологического пособия, часто используют одновременно несколько лекарственных средств, которые вызывают ингибирование ферментов. Сочетанное действие нескольких препаратов накладывается друг на друга, от чего их ингибирующие свойства возрастают в несколько раз. Для изучения выше указанных свойств обычно используют биохимические или микробиологические методы исследования и необходимые для этих целей реактивы, химическую посуду и специальное оборудование.

При патентном поиске в специальной и медицинской литературе аналогов предлагаемому устройству не обнаружено.

Недостатками вышеперечисленных методов являются: а) биохимические и микробиологические методы исследования относятся к сложными по техническому исполнению, дорогостоящим и продолжительным по времени выполнения;

б)для биохимических методов исследования треб)ются: наборы чистых (кристаллических) ферментов, различных реактивов и специальное оборудование (термостаты, центрифуги, спектрофотометр, ФЭК и др.);

в)для микробиологических методов исследования требуются: специальные бактериальные культуры, питательные среды, химическая посуда и необходимое оборудование. Кроме того, результаты микробиологического анализа можно прочитать не ранее чем через сутки.

Целью предло жения является разработка устройства для экспрессметода по определению бактерицидности и токсичности лекарственных препаратов по подвижности и жизнеспособности одноклеточных организмов (Tetrachimena pirifomiis).

Задачи : Разработать устройство, которое обеспечивало бы: а) нормальные условия для существования Tetrachimena piriformis (ТР) в системе её обитания, б) постепенное поступление испытуемого лекарственного преД 5о/ y/JVJ/ j

парата в систему обитания ТР, в) удобство для периодического забора пробы культуры ТР для визуального наблюдения, г) уменьшить трудозатраты и сократить расходы на исследование токсических свойств медицинских препаратов.

Сущностью устройства является то, что предлагаемая Инкубационно-диффузионная установка для экспресс-оценки бактерицидности и токсичности лекарственных препаратов, имеет термостат, в котором расположены емкость в емкости, с внесенными в них на одинаковом уровне растворами - во внутреннюю емкость лекарственного препарата, а в наружную питательной среды с живой культурой Tetrachimena piriformis, причем дномембрана внутренней емкости выполнено из целлофана.

Технической новизной является то, что инкубационной камерой для питательной среды и подвижной инфузории (Tetrachimena piriformis, ТР) служит колбочка (на 25-30 мл). В неё вставлена центрифужная пробирка с обрезанным и развальцованным нижним концом и закрепленной на нем полупроницаемой мембраной из целлофана, через которую испытуемый лекарственный препарат диффундирует из внутренней камеры в наружную. Параллельно в термостате размещена дополнительная идентичная система для контроля, в которой содержится только культура ТР и питательная среда.

Для улучшения понимания работы устройства предлагаем эскиз «Инкубационно-диффузионной установки. Фиг., где: внутренняя емкость для испытуемого препарата -1, раствор испытуемого препарата -2, целлофановое дно внутренней емкости - 3, наружная камера с живой культурой ТР - 4, зажим-держалка внутренней емкости -5, стеклянная кювета-термостат - 6, терморегулирующее устройство - 7.

Предлагаемое устройство используют следующим образом: в наружную емкость (4) вносят 7-10 мл питательной среды, в которой выращивалась и содержится ТР, а во внутреннюю емкость (3) -1,5-2 мл раствора испытуемого медицинского препарата, последнюю размещают в наружной емкости

таким образом, что бы уровни жидкостей в них совнадали, закренляют её при помощи зажима-держалки (5) и ставят в кювету-термостат (6), снабженный терморегулирующим устройством (7). Через полупроницаемую мембрану (3) начинает диффундировать лекарственное средство в наружную камеру и оказывать своё действие на ТР, Для оценки интенсивности действия препарата из наружной емкости пастеровской пипеткой берут пробы для визуального наблюдения, с периодичностью 15-20 минут. Одну-две капли жидкости с культурой ТР вносят в лунку предметного стекла и под микроскопом (х 10) наблюдают за их подвижностью, а в некоторых случаях, за началом лизиса. Параллельно ставят такую же систему, содержащую ТР, но без лекарственного препарата. Продолжительность исследования занимает 60-90 минут.

Возмоукность использования предлагаемого устройства была испытана при изучении антибактериальных свойств Н2О2 , и разрущающего его фермента - каталазы. В этих экспериментах было показано, что кристаллическая каталаза, растворенная в изотоническом растворе и добавленная в среду обитания ТР, приводит вначале к обездвиживанию, а затем к лизису ТР. Внесенный во внутреннюю камеру слабо концентрированный раствор П2О2 очень быстро вызывает лизис ТР. Гемолизат, полученный из эритроцитов донорской крови, обладает такими же свойствами, как и раствор каталазы. В экспериментах, с использованием этого устройства, впервые было установлено антибактериальное свойство эритроцитов, которое обеспечивается за счет каталазы плазматических мембран эритроцитов и П2О2, продуцируемой ТР. Эти эксперименты позволяют объяснить способность организма противостоять инфекционным заболеваниям у ВИЧ - инфицированных, у которых подавлена иммунная система ( Сторожук П.Г., Сторожук А. П. //Кубанский научный медицинский вестник. - Краснодар, 1996, № 1-2.- С.3133; Сторожук П.Г., Сторожук А.П., Быков И.М. // International journal on immunorehabilitation.-1997, № 6.- P.164-170).

o/ /J-JJ/

Медицинский эффект. Использование предлагаемого устройства даёт возможность быстро (в течение 60-90 мин) установить способность медицинских препаратов действовать на микроорганизмы. Эксперименты с использованием Н2О2 и ферментов разрушающих её, позволяют показать некоторые позитивные функции активных форм кислорода. А именно, что для деления клеток в различных органах и тканях необходимо участие Н2О2 , которая на заключительных стадиях митоза, разлагась под влиянием клеточной каталазы вызывает микровзрыв, способствуя разделению вновь образовавшихся двух клеток. Эти эксперименты можно экстраполировать, например, на эритропоэз, при котором стволовая мультипотентная клетка красного костного мозга делится 11 раз и дает более 2000 зрелых эритроцитов. На каждой стадии деления необходима перекись водорода и каталаза.

Предлагаемая «Инкбационно-диффузионная установка дает возможность оценивать бактерицидность и токсичность лекарственных препаратов.

Заявители: -.Сторожу к П. Г.

24.04.2001 г.

iX

,,Х Сторожук А.П.

Claims (2)

1. Инкубационно-диффузионная установка для экспресс-оценки бактерицидности и токсичности лекарственных препаратов, отличающаяся тем, что она имеет термостат, в котором расположены емкость в емкости, в которые внесены на одинаковом уровне растворы, во внутреннюю емкость - лекарственный препарат, а в наружную - питательная среда с живой культурой Тетрахимена периформис, причем дно-мембрана внутренней емкости выполнено из целлофана.

2. Инкубационно-диффузионная установка по п.1, отличающаяся тем, что в термостате расположена дополнительная идентичная система для контроля, в которой в наружной емкости содержится только культура Тетрахимена периформис.