RU2181144C1 - Способ выделения дерматофитов из клинического материала - Google Patents
Способ выделения дерматофитов из клинического материала Download PDFInfo
- Publication number
- RU2181144C1 RU2181144C1 RU2000131769A RU2000131769A RU2181144C1 RU 2181144 C1 RU2181144 C1 RU 2181144C1 RU 2000131769 A RU2000131769 A RU 2000131769A RU 2000131769 A RU2000131769 A RU 2000131769A RU 2181144 C1 RU2181144 C1 RU 2181144C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dermatophytes
- ciprofloxacin
- release
- bile
- clinical material
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Изобретение относится к медицинской и ветеринарной микробиологии, а именно к микологии, лабораторной диагностике дерматомикозов. Осуществляют посев и выделение дерматофитов из клинического материала на селективной среде с добавлением жидкой медицинской желчи, дрожжевого аутолизата и антибиотика из группы фторхинолонов, например ципрофлоксацина, при следующем соотношении компонентов, г/л: глюкоза 40,0, пептон 10,0, агар 18,0-20,0, дистиллированная вода до 1 л, жидкая медицинская желчь 1,0, аутолизат дрожжевой концентрированный 5,0, ципрофлоксацин 5,0. Инкубируют посев при температуре 37oС 5-7 дней и 15 дней при температуре 28-30oС и индентифицируют вид колоний. Способ повышает эффективность выделения патогенных грибов - дерматофитов из клинического материала, позволяет за более короткий срок получить чистую культуру дерматофитов. 1 табл.
Description
Изобретение относится к медицинской и ветеринарной микробиологии, а именно к микологии, лабораторной диагностике дерматомикозов.
Дерматофиты представляют собой основную группу патогенных для человека грибов. Они представлены 39 видами, объединенными в роды Trichophytoh, Microsporum и Epidermophiton. Возможным признаком, объединяющим эти грибы, является то, что в процессе эволюции основные патогенные представители дерматофитов покинули почву и приспособились к жизни в тканях человека и животных, содержащих кератин.
Источником инфекции служит почва, зараженный человек или животное.
Дерматофиты поражают волосы, ногтевые пластинки и кожу человека и в структуре кожной патологии занимают одно из первых мест.
Диагноз дерматофитии ставится на основе микроскопии или на результатах посева патологического материала на различные питательные среды. Но даже при соблюдении всех правил сбора материала, при наличии современного оборудования лабораторий и высокой квалификации персонала число положительных результатов культурального исследования невелико. Процент положительных результатов при онихомикозах в отечественных лабораториях едва достигает 30. Таким образом, в 2 из каждых 3 случаев этиологию установить не удается. В зарубежных лабораториях процент положительных исследований не превышает 50 (Ю.В. Сергеев, А.Ю.Сергеев. Микозы стоп. 1998).
Морфологическая идентификация возбудителей в образцах тканей затруднена и требует выделения чистой культуры, которое осуществляется путем помещения отдельных волос или фрагментов кожи и ногтей на неселективные и селективные питательные среды.
Известен способ выделения дерматофитов, который предусматривает посев клинического материала на поверхность плотной среды Сабуро следующего состава, г/л:
Глюкоза или мальтоза - 40,0
Пептон - 10,0
Агар - 18,0 - 20,0
Дистиллированная вода - До 1 литра
Инкубация посевов производится при температуре 28-30oС в течение 30 дней (П. Н. Кашкин, В.В.Лисин. Практическое руководство по медицинской микологии. Л.: Медицина, 1983).
Глюкоза или мальтоза - 40,0
Пептон - 10,0
Агар - 18,0 - 20,0
Дистиллированная вода - До 1 литра
Инкубация посевов производится при температуре 28-30oС в течение 30 дней (П. Н. Кашкин, В.В.Лисин. Практическое руководство по медицинской микологии. Л.: Медицина, 1983).
Недостатком этого способа является то, что используемая питательная среда совершенно не обладает способностью подавлять рост сопутствующей бактериальной флоры и сапрофитных плесеней.
Известен способ выделения дерматофитов из клинического материала на плотной среде Сабуро с селективными добавками - - пенициллин (20000 ЕД) или стрептомицин (40000 ЕД), гентамицин (0,005 г/л); левомицетин (0,016 г/л); г/л:
Глюкоза или мальтоза - 40,0
Пептон - 10,0
Агар - 18,0 - 20,0
Дистиллированная вода - До 1 литра
Инкубируют посевы при температуре 28-30oС в течение 30 дней (П.Н.Кашкин, В. В.Лисин. Практическое руководство по медицинской микологии. Л.: Медицина, 1983).
Глюкоза или мальтоза - 40,0
Пептон - 10,0
Агар - 18,0 - 20,0
Дистиллированная вода - До 1 литра
Инкубируют посевы при температуре 28-30oС в течение 30 дней (П.Н.Кашкин, В. В.Лисин. Практическое руководство по медицинской микологии. Л.: Медицина, 1983).
Данные антибиотики вносят в среду для подавления роста бактериальной флоры и устранения тем самым ее антагонистического действия на дерматофиты. Недостатком этого способа является длительность процесса выделения чистой культуры, к применяемым антибиотикам появились устойчивые штаммы бактерий, а кроме этого сапрофитные плесени также оказывают антагонистическое действие на культуры грибов.
Наиболее близким к заявленному является способ выделения патогенных грибов родов Microsporum, Trichophyton, Epidermophyton на плотной селективной среде Сабуро с добавлением левомицетина (0,016 г/л) и циклогексимида (0,001 г/л), который вносят в среду для ингибирования бурного роста плесеней, подавляющих медленно растущие дерматофитные грибы, г/л:
Глюкоза - 40,0
Пептон - 10,0
Агар - 18,0 - 20,0
Дистиллированная вода - До 1 литра
Смесь автоклавируют при медленном поднятии давления до 1 атм (120oС), затем фильтруют через ватно-марлевый фильтр и добавляют, г/л:
Циклогексимид - 0,001
Левомицетин - 0,016
Стерилизуют среду при 0,5 атм (110oС) 20 минут и разливают по 3-5 см в пробирки со скошенным срезом. Посев исследуемого материала проводится на поверхность среды.
Глюкоза - 40,0
Пептон - 10,0
Агар - 18,0 - 20,0
Дистиллированная вода - До 1 литра
Смесь автоклавируют при медленном поднятии давления до 1 атм (120oС), затем фильтруют через ватно-марлевый фильтр и добавляют, г/л:
Циклогексимид - 0,001
Левомицетин - 0,016
Стерилизуют среду при 0,5 атм (110oС) 20 минут и разливают по 3-5 см в пробирки со скошенным срезом. Посев исследуемого материала проводится на поверхность среды.
Инкубируют посевы при температуре 28-30oС в течение 30 дней (П.Н. Кашкин, В.В. Лисин, 1983).
Недостатком этого способа является длительность процесса выделения дерматофитов из клинического материала, добавление к среде левомицетина в качестве ингибитора роста сопутствующей бактериальной флоры утрачивает свое значение в связи с широким распространением к данному антибиотику устойчивых штаммов (в пределах 76%), поэтому возникла необходимость замены его более эффективным антибактериальным препаратом широкого спектра действия, к которому практически не выявлено устойчивой микрофлоры.
Задача изобретения - повышение эффективности выделения патогенных грибов - дерматофитов из клинического материала (волос, ногтевых и кожных чешуек).
Поставленная задача достигается тем, что осуществляют посев и выделение дерматофитов из клинического материала на селективной среде с добавлением жидкой медицинской желчи, дрожжевого аутолизата и антибиотика из группы фторхинолонов, например ципрофлоксацина, при следующем соотношении компонентов, г/л:
Глюкоза - 40,0
Пептон - 10,0
Агар - 18,0 - 20,0
Дистиллированная вода - До 1 литра
Жидкая медицинская желчь - 1,0
Аутолизат дрожжевой концентрированный - 5,0
Ципрофлоксацин - 5,0
при этом инкубируют посев при температуре 37oС 5-7 дней и 15 дней при температуре 28-30oС с последующей идентификацией вида колоний.
Глюкоза - 40,0
Пептон - 10,0
Агар - 18,0 - 20,0
Дистиллированная вода - До 1 литра
Жидкая медицинская желчь - 1,0
Аутолизат дрожжевой концентрированный - 5,0
Ципрофлоксацин - 5,0
при этом инкубируют посев при температуре 37oС 5-7 дней и 15 дней при температуре 28-30oС с последующей идентификацией вида колоний.
Новизна заявляемого способа состоит в том, что выделение дерматофитов происходит на среде с повышенными селективными свойствами за счет создания композиции компонентов среды, подавляющих рост бактерий и плесени: к антибиотику ципрофлоксацин (ципролет, группа фторхинолонов) практически не выявлено устойчивой микрофлоры, желчь оказывает бактерицидное действие на плесени, широко распространенных в окружающей среде, дрожжевой аутолизат - стимулятор роста совместно с подобранным опытным путем температурным режимом. Инкубирование посевов первые 5-7 дней при температуре 37oС обеспечивает более быстрое выделение дерматофитов из патологического материала.
Сущность способа заключается в следующем.
Для выделения дерматофитив из клинического материала готовится плотная селективная среда следующего состава, г/л:
Глюкоза - 40,0
Пептон - 10,0
Агар - 18,0 - 20,0
Дистиллированная вода - До 1 литра
Смесь автоклавируют при медленном поднятии давления до 1 атм (120oС), затем фильтруют через ватно-марлевый фильтр и добавляют, г/л:
Жидкая медицинская желчь - 1,0
или
Циклогексимид - 0,001
Аутолизат дрожжевой концентрированный - 5,0
Ципрофлоксацин - 5,0
Стерилизуют среду при 0,5 атм (110oС) 20 мин и разливают по 3-5 см в пробирки со скошенным срезом. Посев исследуемого материала проводится на поверхность среды, инкубируют посевы при 37oС 5-7 дней и 15 дней при 28-30oС. Затем по характеру роста, цвету и т.д. определяют вид дерматофита.
Глюкоза - 40,0
Пептон - 10,0
Агар - 18,0 - 20,0
Дистиллированная вода - До 1 литра
Смесь автоклавируют при медленном поднятии давления до 1 атм (120oС), затем фильтруют через ватно-марлевый фильтр и добавляют, г/л:
Жидкая медицинская желчь - 1,0
или
Циклогексимид - 0,001
Аутолизат дрожжевой концентрированный - 5,0
Ципрофлоксацин - 5,0
Стерилизуют среду при 0,5 атм (110oС) 20 мин и разливают по 3-5 см в пробирки со скошенным срезом. Посев исследуемого материала проводится на поверхность среды, инкубируют посевы при 37oС 5-7 дней и 15 дней при 28-30oС. Затем по характеру роста, цвету и т.д. определяют вид дерматофита.
Пример 1
Выделение дерматофитов из ногтевых пластинок.
Выделение дерматофитов из ногтевых пластинок.
В колбу помещают глюкозы 40,0 г; пептона 10,0 г, агара 18 г, заливают дистиллированной водой до 1 литра. Смесь автоклавируют при медленном поднятии давления до 1 атм (120oС), затем фильтруют через ватно-марлевый фильтр и добавляют жидкую желчь 1,0 г; аутолизат дрожжевой концентрированный 5,0 г; ципрофлоксацин 5,0 г. Среду стерилизуют при 0,5 атм (110oС) 20 мин и разливают по 3-5 см в пробирки со скошенным срезом. Посев измельченных ногтевых пластинок проводится на поверхность среды. Инкубируют посев при t 37oС 5 дней и 15 дней при t 28-30oC. В результате удается получить чистую культуру Tr. rubrum, колонии Tr. rubrum на селективной среде красно-коричневые, бархатисто-пушистые.
Пример 2.
Выделение дерматофитов из фрагментов кожи.
В колбу помещают глюкозы 40,0 г; пептона 10,0 г; агара 18 г, заливают дистиллированной водой до 1 литра. Смесь автоклавируют при медленном поднятии давления до 1 атм (120oС), затем фильтруют через ватно-марлевый фильтр и добавляют жидкую желчь 1,0 г; аутолизат дрожжевой концентрированный 5,0 г; ципрофлоксацин 5,0 г. Среду стерилизуют при 0,5 атм (110oС) 20 мин и разливают по 3-5 см в пробирку со скошенным срезом. Посев кожных чешуек проводится на поверхность среды. Посев инкубируют 7 дней при t 37oС и 15 дней при t 28-30oС.
Выделенные чистые колонии Tr. verrucosum на селективной среде кожистые, крупноморщинистые, радиально-складчатые, серовато-белого цвета.
Ингибирующие свойства селективной среды в сравнении со средой Сабуро с левомицетином и циклогексимидом представлены в таблице.
Таким образом, полученные результаты доказывают, что заявляемый способ выделения дерматофитов позволяет значительно улучшить диагностику грибковых инфекций: за более короткий срок получить чистую культуру дерматофитов.
Claims (1)
- Способ выделения дерматофитов из клинического материала, заключающийся в выделении патогенных грибов на плотной селективной среде Сабуро с добавлением антибиотика и инкубирования ее при температуре 28-30oС, отличающийся тем, что осуществляют посев и выделение дерматофитов из клинического материала на селективной среде с добавлением жидкой медицинской желчи, аутолизата дрожжевого и антибиотика из группы фторхинолонов, например, ципрофлоксацина при следующем соотношении компонентов, г/л:
Глюкоза - 40,0
Пептон - 10,0
Агар - 18,0 - 20,0
Дистиллированная вода - До 1 л
Жидкая медицинская желчь - 1,0
Аутолизат дрожжевой концентрированный - 5,0
Ципрофлоксацин - 5,0
при этом инкубируют посев при температуре 37oС 5-7 дней и 15 дней при температуре 28-30oС с последующей индентификацией вида колоний.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2000131769A RU2181144C1 (ru) | 2000-12-18 | 2000-12-18 | Способ выделения дерматофитов из клинического материала |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2000131769A RU2181144C1 (ru) | 2000-12-18 | 2000-12-18 | Способ выделения дерматофитов из клинического материала |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2181144C1 true RU2181144C1 (ru) | 2002-04-10 |
Family
ID=20243601
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2000131769A RU2181144C1 (ru) | 2000-12-18 | 2000-12-18 | Способ выделения дерматофитов из клинического материала |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2181144C1 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2458991C1 (ru) * | 2011-01-13 | 2012-08-20 | Федеральное государственное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГУ "УрНИИДВиИ" Минздравсоцразвития России) | Способ диагностики микроспории |
RU2527074C1 (ru) * | 2013-02-19 | 2014-08-27 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии" Роспотребнадзора | Питательная среда для выращивания мицелиальных грибов-дерматомицетов из клинического материала |
RU2562540C1 (ru) * | 2014-06-17 | 2015-09-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Башкирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ специфической детекции trichophyton verrucosum в клиническом материале при различных клинических формах заболевания |
RU2695675C1 (ru) * | 2019-03-05 | 2019-07-25 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Башкирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Питательная среда для культивирования Microsporum canis |
-
2000
- 2000-12-18 RU RU2000131769A patent/RU2181144C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
КАШКИН П.Н., ЛИСИН В.В. Практическое руководство по медицинской микологии. - М.: Медицина, 1983, с. 152-153. КАШКИН П.Н., ШЕКЛАКОВ Н.Д. Руководство по медицинской микологии. - М.: Медицина, 1978. с. 36-38. КУРАСОВА В.В. и др. Методы исследования в ветеринарной микологии. - М.: Колос, 1971, с. 65-67, 292, 301. БАЛАБАНОВ В.А. и др. Ультратонкая структура возбудителя дерматофилеза. Ветеринария, 1984, № 12, с. 23-26. * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2458991C1 (ru) * | 2011-01-13 | 2012-08-20 | Федеральное государственное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГУ "УрНИИДВиИ" Минздравсоцразвития России) | Способ диагностики микроспории |
RU2527074C1 (ru) * | 2013-02-19 | 2014-08-27 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии" Роспотребнадзора | Питательная среда для выращивания мицелиальных грибов-дерматомицетов из клинического материала |
RU2562540C1 (ru) * | 2014-06-17 | 2015-09-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Башкирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ специфической детекции trichophyton verrucosum в клиническом материале при различных клинических формах заболевания |
RU2695675C1 (ru) * | 2019-03-05 | 2019-07-25 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Башкирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Питательная среда для культивирования Microsporum canis |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Pradhan et al. | Prevalence of otomycosis in outpatient department of otolaryngology in Tribhuvan University Teaching Hospital, Kathmandu, Nepal | |
Anand et al. | Interaction of L. pneumophila and a free living amoeba (Acanthamoeba palestinensis) | |
Tamilselvam et al. | Streptococcus uberis internalizes and persists in bovine mammary epithelial cells | |
Reyn | Recent developments in the laboratory diagnosis of gonococcal infections | |
Kıvanç et al. | Biofilm formation of Candida Spp. isolated from the vagina and antibiofilm activities of lactic acid bacteria on the these Candida Isolates | |
RU2181144C1 (ru) | Способ выделения дерматофитов из клинического материала | |
Fuentes et al. | A dwarf form of Microsporum gypseum | |
Youssef et al. | Ecological effects of antibiotic production by dermatophyte fungi | |
CN104471054A (zh) | 原生动物火鸡组织滴虫(h.meleagridis)培养物的生产和应用 | |
Gnarpe et al. | Studies in venereal disease. I. Isolation of L-phase organisms of N. gonorrhoeae from patients with gonorrhoea. | |
Mishra et al. | Observations on paraffin baiting as a laboratory diagnostic procedure in nocardiosis | |
RU2694522C1 (ru) | Штамм бактерий Bacillus pumilus ВКПМ В-13250, обладающий выраженным антагонизмом по отношению к микроорганизмам Escherichia coli, Candida albicans, Staphylococcus aureus, St. epidermidis | |
Amies et al. | An easily prepared selective medium for the cultivation of Neisseria gonorrhoeae. | |
RU2237709C2 (ru) | Микробиологическая среда для выделения trichophyton verrucosum | |
CHAMBERS et al. | A fungistatic strain of Bacillus subtilis isolated from normal toes | |
Wagner et al. | Recent Studies on Nonespecific Urethritis | |
Bitew et al. | Clinical and microbiological profile of keratitis in menelik II memorial hospital, Addis Ababa, Ethiopia | |
Rusinovci et al. | Bacteria that cause dentoalveolar abscesses after failed endodontic treatments: a pilot study | |
Gagana et al. | Biofilm formation of Malassezia pachydermatis from dogs | |
RU2446214C1 (ru) | Способ определения степени эпидемической опасности патогенных и потенциально-патогенных бактерий, выделенных из воды различного вида водопользования | |
Slipchenko et al. | Study of antibacterial properties of the emulgel with scutellaria baicalensis extract | |
RU2711954C1 (ru) | Способ предварительной идентификации нетуберкулезных микобактерий с использованием универсальной хромогенной среды | |
CN113101284B (zh) | 大蒜辣素在制备抗酵母菌药物中的应用 | |
RU2737140C1 (ru) | Штамм бактерий streptomyces resistomycificus recb-31b для получения биопрепарата для защиты сельскохозяйственных растений от фитопатогенных грибов, стимуляции их роста и повышения урожайности | |
RU2794355C1 (ru) | Способ первичного посева отделяемого из пародонтальных карманов |