RU2173519C2 - Method of preparing plant resistance inducing agent to fungal disease - Google Patents
Method of preparing plant resistance inducing agent to fungal disease Download PDFInfo
- Publication number
- RU2173519C2 RU2173519C2 RU99114352/13A RU99114352A RU2173519C2 RU 2173519 C2 RU2173519 C2 RU 2173519C2 RU 99114352/13 A RU99114352/13 A RU 99114352/13A RU 99114352 A RU99114352 A RU 99114352A RU 2173519 C2 RU2173519 C2 RU 2173519C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- inducing agent
- fungus
- inducer
- carried out
- sunflower
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к получению биологических средств защиты растений, и может быть использовано в сельском хозяйстве, растениеводстве для получения экологически чистой продукции. The invention relates to biotechnology, namely to the production of biological plant protection products, and can be used in agriculture, crop production for environmentally friendly products.
Известен способ профилактики болезней растений путем иммунизации семян индукторами устойчивости, представляющими собой физиологически активные вещества [1] . Однако данный способ не нашел широкого применения из-за низкой эффективности. A known method of preventing plant diseases by immunizing seeds with resistance inducers, which are physiologically active substances [1]. However, this method has not found wide application due to low efficiency.
Известен способ иммунизации грибными метаболитами устойчивости озимой пшеницы к возбудителям корневой гнили [2]; однако указанный способ не нашел широкого применения из-за необходимости использовать большие объемы культуральной жидкости. A known method of immunization with fungal metabolites of the resistance of winter wheat to root rot pathogens [2]; however, this method has not found wide application because of the need to use large volumes of culture fluid.
Известен способ индуцирования растений кукурузы к корневым гнилям и плесневению семян с помощью грибной вакцины-культуральной жидкости трех самых агрессивных почвенных фитопатогенов [3]. Однако указанный способ иммунизации не нашел широкого применения так же, как и в предыдущем случае, из-за необходимости использовать большие объемы культуральной жидкости. A known method of inducing corn plants to root rot and seed mold using a mushroom vaccine-culture fluid of the three most aggressive soil phytopathogens [3]. However, this method of immunization did not find wide application in the same way as in the previous case, because of the need to use large volumes of culture fluid.
Известен способ повышения устойчивости огурца к белой гнили, заключающийся в предпосевном замачивании семян огурца в культуральной жидкости гриба возбудителя белой гнили в течение 24 ч [4]. Но этот способ не нашел широкого применения из-за довольно продолжительной операции замачивания семян. There is a method of increasing the resistance of cucumber to white rot, which consists in pre-soaking the seeds of cucumber in the culture fluid of the fungus of the white rot pathogen for 24 hours [4]. But this method has not found wide application due to a rather lengthy operation of soaking seeds.
Предлагаемый способ получения индуктора устойчивости растений к грибковым заболеваниям предусматривает извлечение его из культуральной жидкости гриба - возбудителя белой гнили Sclerotinia sclerotiorum с помощью сорбента с последующей десорбцией индуктора органическими растворителями и концентрированием путем упаривания. The proposed method for producing an inducer of plant resistance to fungal diseases involves extracting it from the culture fluid of the fungus, the causative agent of white rot Sclerotinia sclerotiorum, using a sorbent, followed by desorption of the inductor with organic solvents and concentration by evaporation.
Наиболее близким по техническому решению является способ иммунизации растений огурца культуральной жидкостью гриба-возбудителя белой гнили путем замачивания семян в ней [4]. The closest in technical solution is the method of immunizing cucumber plants with the culture fluid of the white rot fungus pathogen by soaking the seeds in it [4].
Пример 1. Для получения 100 л культуральной жидкости (КЖ) гриба Sclerotinia sclerotiorum в ферментере готовили жидкую минеральную среду, содержащую: MgSO4 - 13 г, KCl - 14,9 г, NH4NO3 - 100 г, KH2PO4 - 68,0 г, ZnSO4 • 7H2O - 1,13 г, MnSO4 • 7H2O - 1,39 г, FeCl3 - 400 мг, сахароза - 50 г. Стерилизация при 0,5 ати 30 мин. Стерильную среду, охлажденную до 22oC, инокулировали 5 л посевной культуры Sclerotinia sclerotiorum, выращенной на питательной среде вышеприведенного состава в течение 5 суток в колбе на качалке при температуре 22oC, 220 об./мин-1. Выращивание проводили в течение 5 суток в ферментере. Содержимое ферментера центрифугировали при 4000 об. /мин-1. Проводили очистку полученной КЖ на анионите АРА-2р в соотношении 10 л КЖ на 0,8 кг анионита. В очищенную культуральную жидкость (КЖ) вносили активированный уголь (АУ) из расчета 20 г АУ на 1 л КЖ, т.е. 2 кг, интенсивно перемешивали в течение 30 мин, оставляли на 5 ч, декантировали, твердую фазу подсушивали при температуре 30±5oC до воздушно-сухого состояния, помещали на нутч-фильтр; проводили десорбцию, пропуская растворитель ДМСО (диметилсульфоксид) через осадок, из расчета 2,5 части растворителя на 1 часть десорбируемой массы на фильтре. Для полноты удаления ДМСО осадок на фильтре промывали хлороформом из расчета 5:1. Полученную смесь после фильтра помещали в морозильную камеру при температуре -20oC до полной кристаллизации ДМСО, беловато-серые кристаллы которого отделяли фильтрованием на стеклянном пористом фильтре N 1 под вакуумом. Полученный фильтрат упаривали на роторном испарителе при 40oC примерно в 100 раз, т.е. до 100 мл. Полученный сироп использовали для выявления активности индуктора устойчивости. Результаты приведены в табл. 1.Example 1. To obtain 100 l of culture fluid (CL) of the fungus Sclerotinia sclerotiorum in a fermenter prepared a liquid mineral medium containing: MgSO 4 - 13 g, KCl - 14.9 g, NH 4 NO 3 - 100 g, KH 2 PO 4 - 68.0 g, ZnSO 4 • 7H 2 O - 1.13 g, MnSO 4 • 7H 2 O - 1.39 g, FeCl 3 - 400 mg, sucrose - 50 g. Sterilization at 0.5 ati 30 min. A sterile medium cooled to 22 ° C. was inoculated with 5 L of the inoculum culture of Sclerotinia sclerotiorum grown on a nutrient medium of the above composition for 5 days in a flask on a shaker at a temperature of 22 ° C., 220 rpm -1 . Cultivation was carried out for 5 days in a fermenter. The contents of the fermenter were centrifuged at 4000 vol. / min -1 . The obtained QOL was purified on ARA-2p anion exchanger in the ratio of 10 L of QOL to 0.8 kg of anion exchange resin. Activated carbon (AC) was added to the purified culture fluid (QL) at the rate of 20 g AC per 1 liter of QOL, i.e. 2 kg, intensively stirred for 30 minutes, left for 5 hours, decanted, the solid phase was dried at a temperature of 30 ± 5 o C to an air-dry state, placed on a suction filter; carried out desorption by passing the DMSO (dimethyl sulfoxide) solvent through the precipitate, at the rate of 2.5 parts of solvent per 1 part of the stripped mass on the filter. To complete the removal of DMSO, the filter cake was washed with chloroform at a ratio of 5: 1. The resulting mixture after the filter was placed in a freezer at a temperature of -20 o C until complete crystallization of DMSO, whitish-gray crystals of which were separated by filtration on a glass porous filter No. 1 under vacuum. The obtained filtrate was evaporated on a rotary evaporator at 40 ° C about 100 times, i.e. up to 100 ml. The resulting syrup was used to detect resistance inducer activity. The results are shown in table. 1.
Пример 2. Для получения 100 л культуральной жидкости (КЖ) гриба Sclerotinia sclerotiorum в ферментере готовили жидкую питательную среду следующего состава:
Измельченные листья подсолнечника - 5 кг
Лимонная кислота - 500 г
Сахароза - 100 г
Вода - До 100 л
Среду стерилизовали в течение 40 мин при 0,5 ати (кгс/см2). Стерильную среду охлаждали до 22oC, инокулировали 5 л посевной культуры Sclerotinia sclerotiorum, выращенной как описано в примере 1. Дальнейшие операции осуществляли, как описано в примере 1. Результаты выявления индуктора устойчивости приведены в табл. 1.Example 2. To obtain 100 l of culture fluid (CL) of the fungus Sclerotinia sclerotiorum in a fermenter prepared a nutrient medium of the following composition:
Shredded sunflower leaves - 5 kg
Citric Acid - 500 g
Sucrose - 100 g
Water - Up to 100 L
The medium was sterilized for 40 min at 0.5 ati (kgf / cm 2 ). The sterile medium was cooled to 22 o C, inoculable 5 l of the inoculum culture Sclerotinia sclerotiorum grown as described in example 1. Further operations were carried out as described in example 1. The results of the identification of the resistance inducer are shown in table. 1.
Пример 3. Для получения 100 л КЖ гриба Sclerotinia sclerotiorum в ферментере готовили жидкую питательную среду следующего состава: листья и стебли (измельченные) донника лекарственного - 5 кг, лимонная кислота - 500 г, сахароза - 100 г, вода - до 100 л. Далее все технологические проводили как описано в примере 1. Example 3. To obtain 100 l of SC of the fungus Sclerotinia sclerotiorum in a fermenter, a liquid nutrient medium of the following composition was prepared: leaves and stems (crushed) of medicinal sweet clover - 5 kg, citric acid - 500 g, sucrose - 100 g, water - up to 100 l. Further, all technological was carried out as described in example 1.
Пример 4. Для получения 100 л КЖ гриба Sclerotinia sclerotiorum в ферментере готовили жидкую питательную среду следующего состава: листья и стебли (измельченные) люцерны - 5 кг, лимонная кислота - 500 г, сахароза - 100 г, вода - до 100 л. Далее все технологические операции проводили, как описано в примере 1. Результаты опытов 3 и 4 представлены в табл. 1. Example 4. To obtain 100 l of SC of the fungus Sclerotinia sclerotiorum in a fermenter, a liquid nutrient medium of the following composition was prepared: leaves and stalks (crushed) of alfalfa - 5 kg, citric acid - 500 g, sucrose - 100 g, water - up to 100 l. Further, all technological operations were carried out as described in example 1. The results of
Пример 5. Для получения 5 л КЖ известным способом [4] выращивали возбудитель белой гнили Sclerotinia sclerotiorum на жидкой питательной среде состава, как описано в примере 1. Приготовленную минеральную среду разливали в колбы, стерилизовали 30 мин при 1 кгс/см2, инокулировали мицелием гриба и помещали в термостат при 22oC для поверхностного выращивания гриба. По истечении 5 суток выращивания отделяли образовавшуюся пленку от КЖ, а КЖ использовали для опытов. Результаты приведены в табл. 1.Example 5. To obtain 5 l of QOL in a known manner [4], the white rot pathogen Sclerotinia sclerotiorum was grown on a liquid nutrient medium of the composition as described in Example 1. The prepared mineral medium was poured into flasks, sterilized for 30 min at 1 kgf / cm 2 , inoculated with mycelium fungus and placed in a thermostat at 22 o C for surface cultivation of the fungus. After 5 days of cultivation, the formed film was separated from QOL, and QOL was used for experiments. The results are shown in table. 1.
Пример 6. Проводили биотестирование семян подсолнечника и огурца по схеме, как описано в примере 1. Проращивание обработанных семян проводили в течение 10 дней в условиях фитотрона при 28±1oC и освещенности 50 тыс. лк и относительной влажности 90-100%.Example 6. Conducted biotesting of sunflower seeds and cucumber according to the scheme as described in example 1. Germination of treated seeds was carried out for 10 days under phytotron conditions at 28 ± 1 o C and illumination of 50 thousand lux and relative humidity of 90-100%.
Пример 7. Проводили полевые опыты по индуцированию устойчивости подсолнечника к белой гнили индуктором устойчивости с помощью индуктора, полученного по заявляемому способу. Опыты проводили в Краснодарском крае на естественном инфицированном фоне (зараженное поле). 20 кг семян подсолнечника обрабатывали раствором индуктора в сосуде-реакторе под давлением 2-2,5 кгс/см2 в течение 20 мин. Обработанные семена подсушивали, загружали в мешки до высева. Схема проведения опыта и результаты наблюдений приведены в табл. 2.Example 7. Conducted field experiments to induce the resistance of sunflower to white rot by a resistance inducer using an inductor obtained by the present method. The experiments were carried out in the Krasnodar Territory on a natural infected background (infected field). 20 kg of sunflower seeds were treated with an inductor solution in a reactor vessel under a pressure of 2-2.5 kgf / cm 2 for 20 minutes. The treated seeds were dried, loaded into bags before sowing. The experimental design and observation results are given in table. 2.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет:
- получать концентрированный продукт, содержащий индуктор устойчивости, что дает возможность разработать товарную (коммерческую) форму препарата вместо использования нативной КЖ в больших объемах и не подлежащeй хранению;
- осуществить безотходную технологию получения индуктора устойчивости, т. к. все используемые для обработки КЖ компоненты могут использоваться многократно после регенерирования;
- нарабатывать препарат независимо от сезона года.Thus, the proposed method allows you to:
- to receive a concentrated product containing a stability inducer, which makes it possible to develop a commodity (commercial) form of the drug instead of using native QOL in large volumes and not subject to storage;
- implement a non-waste technology for producing a stability inductor, since all components used for QOL processing can be used repeatedly after regeneration;
- develop the drug regardless of the season of the year.
Список литературы
1. Шкаликов B.A. и соавт. Оценка физиологически активных веществ в защите зерновых культур от корневой гнили.- M., Известия ТСХА, 1993 г., вып. 4, с. 106-111.List of references
1. Shkalikov BA et al. Assessment of physiologically active substances in the protection of crops from root rot. - M., Izvestia TSHA, 1993, vol. 4, p. 106-111.
2. Гаврилов A. A. Индуцированная грибными метаболитами устойчивость озимой пшеницы к возбудителям корневой гнили.- Автореферат диссертации на соискание канд. биол. наук, М., 1993 г. 2. Gavrilov A. A. Induced by mushroom metabolites, the resistance of winter wheat to root rot pathogens. - Abstract of dissertation for the candidate. biol. Sciences, M., 1993
3. Сокирко В.П. Создание индуцированной устойчивости у растений кукурузы к корневым гнилям и плесневению семян с помощью грибной вакцины/Cб. Защита с/х культур от вредителей, болезней, сорняков (Труды Кубанского СХИ), Краснодар, 1990 г., вып. 307 (335), с. 30-37. 3. Sokirko V.P. The creation of induced resistance in plants of corn to root rot and seed mold using a mushroom vaccine / SB. Protection of agricultural crops from pests, diseases, weeds (Proceedings of the Kuban Agricultural Institute), Krasnodar, 1990, issue. 307 (335), p. 30-37.
4. Переверзева В.Ф. Особенности белой гнили на огурцах и биологические меры борьбы с белой гнилью в закрытом грунте.- Автореферат диссертации на соискание канд. биол. наук, Минск, 1989 г. 4. Pereverzeva V.F. Features of white rot on cucumbers and biological measures to combat white rot in closed ground. - Abstract of dissertation for the candidate. biol. Sciences, Minsk, 1989
Claims (6)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99114352/13A RU2173519C2 (en) | 1999-06-30 | 1999-06-30 | Method of preparing plant resistance inducing agent to fungal disease |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99114352/13A RU2173519C2 (en) | 1999-06-30 | 1999-06-30 | Method of preparing plant resistance inducing agent to fungal disease |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU99114352A RU99114352A (en) | 2001-06-10 |
RU2173519C2 true RU2173519C2 (en) | 2001-09-20 |
Family
ID=35636029
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU99114352/13A RU2173519C2 (en) | 1999-06-30 | 1999-06-30 | Method of preparing plant resistance inducing agent to fungal disease |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2173519C2 (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB2507271A (en) * | 2012-10-23 | 2014-04-30 | Eberhard Karls Uni Tubingen | Plant-immunogenic extracts from Sclerotinia sclerotiorum and use to identify the plant receptor AtRLP30. |
-
1999
- 1999-06-30 RU RU99114352/13A patent/RU2173519C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ПЕРЕВЕРЗЕВА В.Ф. Особенности паразитизма SCLEROTINIA SCLEROTIORUM (LIB.) DE BARY на огурцах и биологические меры борьбы с белой гнилью в закрытом грунте. Автореферат дис. канд. биол. наук. - Минск, 1989, с. 6, 7, 10 - 18. * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB2507271A (en) * | 2012-10-23 | 2014-04-30 | Eberhard Karls Uni Tubingen | Plant-immunogenic extracts from Sclerotinia sclerotiorum and use to identify the plant receptor AtRLP30. |
WO2014064111A1 (en) * | 2012-10-23 | 2014-05-01 | Eberhard Karls Universität Tübingen | A novel immunogenic fungal extract and pattern recognition receptor in plants |
EP3563685A1 (en) * | 2012-10-23 | 2019-11-06 | Eberhard Karls Universität Tübingen | A novel immunogenic fungal extract and pattern recognition receptor in plants |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Grogan et al. | Influence of water potential | |
JP2862302B2 (en) | Preparation of nematicide | |
CA2285727A1 (en) | Method of increasing photosynthesis in plants comprising an exposure thereof to lipo-chitooligosaccharides and compositions therefor | |
KR20230008623A (en) | Bvp10 protein for controlling tetranychid mites and use thereof | |
CN110129210B (en) | Aspergillus aculeatus strain and application thereof | |
RU2173519C2 (en) | Method of preparing plant resistance inducing agent to fungal disease | |
US20050204619A1 (en) | Method of extracting rutin from buck wheat growed by hydroponics | |
KR940010036B1 (en) | Process for preparing macrocyclic compound | |
US6540998B2 (en) | Method for producing a nematocidal composition by heat treating a pH-adjusted fermentation broth | |
US4377571A (en) | Methods for treating Dutch elm disease | |
CN114190383A (en) | Application of 2-amino-3-phenylbutyric acid or 2, 6-diamino-3-methylhexanoic acid as plant immunity inducer | |
CN105852125A (en) | Aloe stem cell lyophilized powder as well as preparation method and application thereof | |
CN108902149B (en) | Application and using method of scopoletin in stimulating broad-spectrum disease resistance of plant immunity | |
KR100459869B1 (en) | A cultivation method of cordyceps sinensis by using silkworm or its chrysalis | |
RU2280362C2 (en) | Method for preparing winter wheat stimulating agent | |
WO2016209047A1 (en) | Cordyceps cultivated using sea horses and method for cultivating the cordyceps | |
CN113278532B (en) | Alternaria tenuissima and metabolite and application thereof | |
Gross et al. | Overwinter survival of bean rust urediniospores in North Dakota | |
SU1688818A1 (en) | Strain of fungi arthrobotrys oligospora fres for producing preparation against gall nematodes | |
KR102057318B1 (en) | Composition for improving immunity of plant comprising cultural filtrate of Chlorella sp. | |
JPS6084220A (en) | Antitumor agent containing phizoxin which is metabolite of plant pathogenic germ phizopus chinensis | |
BRPI0902598A2 (en) | isolated compound derived from (alpha) / ß d-glucopyranose, composition having activity inducing at least one plant defense mechanism, method for inducing a plant defense mechanism, method for treating infected plants, procedure for obtaining of a compound, extract that has inducing activity, procedure for obtaining the extract, use of the compound and use of the extract | |
CN114586630A (en) | Desmodium styracifolium planting method for improving content of schaftoside and isoschaftoside | |
CN116478855A (en) | Arthrobacter oxydans and application thereof in relieving continuous cropping obstacle of plants | |
CN116478880A (en) | Acremodelling acid bacteria KC 316 and application thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20040701 |