RU2173461C1

RU2173461C1 - Method for estimating deformability of erythrocytes

Info

Publication number: RU2173461C1
Application number: RU2000117531A
Authority: RU
Inventors: А.В. Закутский; В.Л. Радушкевич; Л.Ю. Пастухова; В.А. Белошевский
Original assignee: Закутский Андрей Владимирович
Filing date: 2000-07-03
Publication date: 2001-09-10

Abstract

FIELD: medicine; laboratory analysis techniques. SUBSTANCE: decalcified filter is coated with sodium-chloride solution and 60% erythrocyte suspension, intensity of spot coloring with 60% erythrocyte suspension is visually estimates, and if uneven deformation of spot-constituting erythrocytes is detected, that is, if there is circular slightly-colored area in center of spot surrounded by light-color peripheral ring and a clear boundary is noted between lateral ring and central area of erythrocyte suspension spot, width of peripheral ring of erythrocyte suspension presented by negligible quantity of most deformable erythrocytes is determined. Then index of erythrocyte deformability is calculated from following formula:

where Z is index of erythrocyte deformability; Der is diameter of erythrocyte suspension spot; PRW_er is width of peripheral ring of erythrocyte suspension presented by negligible quantity of most deformed erythrocytes; Dscs is diameter of sodium-chloride solution spot. EFFECT: enhanced sensitivity, facilitated procedure, unbiased estimation of erythrocyte deformation. 2 cl, 1 dwg

Description

Изобретение относится к медицине и касается способа оценки деформируемости эритроцитов человека. The invention relates to medicine and relates to a method for assessing the deformability of human red blood cells.

Прототипом является способ определения индекса деформируемости эритроцитов Федоровой З. Д. , Котовщикова М.А., Бессмельцева С.С. и соавторов в модификации Васильева А. П. , заключающийся в расчете отношения диаметров пятна 60-процентной суспензии отмытых эритроцитов к диаметру пятна физиологического раствора после нанесения их на обеззоленный бумажный фильтр. При этом рассчитывался индекс деформируемости эритроцитов по формуле

где ИДЭ - индекс деформируемости эритроцитов,
Д_эр - диаметр пятна суспензии эритроцитов,
Д_фр - диаметр пятна физиологического раствора.The prototype is a method for determining the index of deformability of red blood cells Fedorova Z.D., Kotovshchikova M.A., Bessmeltseva S.S. and co-authors in the modification of Vasiliev A. P., which consists in calculating the ratio of the spot diameters of a 60 percent suspension of washed red blood cells to the spot diameter of physiological saline after applying them to an anesthetized paper filter. In this case, the erythrocyte deformability index was calculated by the formula

where IDE is the index of deformability of red blood cells,
D _er - the diameter of the spot suspension of red blood cells,
D _FR - the diameter of the spot of physiological solution.

Чем больше индекс деформируемости эритроцитов, тем более деформируемы эритроциты. (Васильев А.П. Определение индекса деформируемости эритроцитов // Лабораторное дело. -1991. -N 9. -С. 44-46). The greater the index of deformability of red blood cells, the more deformable red blood cells. (Vasiliev A.P. Determination of the index of deformability of red blood cells // Laboratory. -1991. -N 9.-S. 44-46).

Недостатком этого способа определения индекса деформируемости эритроцитов является отсутствие избирательной оценки степени выраженности деформируемости различных групп эритроцитов исследуемого больного. The disadvantage of this method of determining the index of deformability of red blood cells is the lack of selective assessment of the severity of the deformability of various groups of red blood cells of the studied patient.

Как известно деформируемость различных групп эритроцитов циркулирующей крови одного человека может существенно различаться. При этом наиболее высокая деформируемость отмечается у весьма незначительного количества эритроцитов и не оказывает достоверного влияния на интегральный показатель деформируемости циркулирующих эритроцитов. Фракция таких малочисленных и высокодеформированных эритроцитов располагается на периферии пятна эритроцитарной суспензии, наносимой по способу-прототипу на обеззоленный бумажный фильтр. As you know, the deformability of different groups of red blood cells of the circulating blood of one person can vary significantly. Moreover, the highest deformability is observed in a very small number of red blood cells and does not significantly affect the integral index of deformability of circulating red blood cells. The fraction of such small and highly deformed red blood cells is located on the periphery of the erythrocyte suspension spot applied by the prototype method to an anesthetized paper filter.

Способ-прототип, принципиально состоящий в сопоставлении величин диаметров пятна эритроцитарной суспензии и пятна физиологического раствора, нанесенных на обеззоленный бумажный фильтр, предполагает измерение общего диаметра пятна эритроцитарной суспензии, включающего и незначительную фракцию с наибольшей деформируемостью, что приводит к результатам, необъективно отражающим деформируемость эритроцитов, также способ-прототип недостаточно чувствителен. The prototype method, essentially consisting in comparing the values of the diameters of the erythrocyte suspension spot and the physiological saline spot deposited on an an anesthetized paper filter, involves measuring the total diameter of the erythrocyte suspension spot, which includes a minor fraction with the highest deformability, which leads to results that objectively reflect the deformability of red blood cells, also the prototype method is not sensitive enough.

Цель изобретения: разработка точного и высокочувствительного способа оценки деформируемости эритроцитов. The purpose of the invention: the development of an accurate and highly sensitive method for assessing the deformability of red blood cells.

Указанная цель достигается тем, что после нанесения физиологического раствора и 60-процентной суспензии эритроцитов на фильтр проводится визуальная оценка интенсивности окрашивания пятна суспензии эритроцитов. Применение предлагаемого способа показано, если пятно суспензии эритроцитов имеет явные признаки неравномерной деформируемости составляющих его эритроцитов, а именно: в центре пятна определяется округлая зона наибольшей интенсивности окрашивания 1, окруженная более светлым кольцом (периферическое кольцо) 2, и четко выделяющаяся граница между латеральным кольцом и центральной зоной пятна эритроцитарной суспензии 3. This goal is achieved by the fact that after applying physiological saline and a 60 percent suspension of red blood cells to the filter, a visual assessment of the intensity of staining of the stain of the suspension of red blood cells is carried out. The application of the proposed method is shown if the spot of the erythrocyte suspension has obvious signs of uneven deformability of its red blood cells, namely: in the center of the spot is determined the rounded zone of the highest staining intensity 1, surrounded by a lighter ring (peripheral ring) 2, and a clearly distinguished border between the lateral ring and the central spot zone of the erythrocyte suspension 3.

Далее мы предлагаем рассчитывать показатель деформируемости эритроцитов по следующей формуле

где Z - показатель деформируемости эритроцитов,
Д_эр - диаметр пятна суспензии эритроцитов, ШПКэр- ширина периферического кольца суспензии эритроцитов, представленного незначительным количеством наиболее деформированных эритроцитов,
Д_фр - диаметр пятна физиологического раствора 6 (см. схему на чертеже).Next, we propose to calculate the rate of deformability of red blood cells according to the following formula

where Z is an indicator of the deformability of red blood cells,
D _er - the diameter of the spot of the suspension of red blood cells, ShPKer - the width of the peripheral ring of the suspension of red blood cells, represented by a small amount of the most deformed red blood cells,
D _FR - the diameter of the spot of physiological saline 6 (see. Scheme in the drawing).

Пример. Больная К, 24 года. История родов N 93. Диагноз: беременность 39-40 недель, гестоз (отечно-протеинурический синдром) 1 степени тяжести, анемия 1 степени тяжести, крупный плод. У больной К. до лечения и после завершения лечения определяли показатель деформируемости эритроцитов способом Федоровой З.Д., Котовщикова М.А., Бессмельцева С.С. и соавторов в модификации Васильева А.П., а также предлагаемым способом. Example. Patient K, 24 years old. The history of childbirth N 93. Diagnosis: pregnancy 39-40 weeks, gestosis (edematous proteinuric syndrome) of 1 severity, anemia of 1 severity, large fetus. Patient K., before treatment and after treatment was completed, the red blood cell deformability index was determined by the method of Fedorova Z.D., Kotovshchikova M.A., Bessmeltseva S.S. and co-authors in the modification of Vasiliev A.P., as well as the proposed method.

На обеззоленный фильтр наносили строго вертикально 0,2 мл физиологического раствора; через 60 секунд после полного растекания раствора в центре образовавшегося пятна наносили 0,02 мл взвеси трижды отмытых эритроцитов, разведенных физиологическим раствором до 60-процентной величины гематокрита; окружности образовавшихся пятен обводили и рассчитывали показатели деформируемости эритроцитов. 0.2 ml of physiological saline was applied strictly vertically to the anesthetized filter; 60 seconds after the solution was completely spreading, 0.02 ml of a suspension of thrice washed red blood cells diluted with physiological saline to a 60% hematocrit was applied in the center of the resulting spot; the circles of the formed spots were circled and the indicators of the deformability of red blood cells were calculated.

Показатели деформируемости эритроцитов, определенные по способу Федоровой З.Д., Котовщикова М.А., Бессмельцева С.С. и соавторов в модификации Васильева А.П.:
Индекс деформируемости эритроцитов до лечения равен 23 мм/61 мм • 100= 37,7;
Индекс деформируемости эритроцитов после завершения лечения равен 25 мм /65 мм • 100 = 38,5.Red blood cell deformability indices determined by the method of Fedorova Z.D., Kotovshchikova M.A., Bessmeltseva S.S. and co-authors in the modification of Vasiliev A.P .:
The index of deformability of red blood cells before treatment is 23 mm / 61 mm • 100 = 37.7;
The index of deformability of red blood cells after completion of treatment is 25 mm / 65 mm • 100 = 38.5.

Вывод: после лечения деформируемость эритроцитов повысилась на 2,1%. Conclusion: after treatment, erythrocyte deformability increased by 2.1%.

Показатели деформируемости эритроцитов, определенные предлагаемым способом:
Z до лечения равен (23 мм - 5 мм)/61 мм • 100 = 29,5;
Z после завершения лечения равен 25 мм/65 мм • 100 = 38,5.Indicators of deformability of red blood cells, determined by the proposed method:
Z before treatment is equal (23 mm - 5 mm) / 61 mm • 100 = 29.5;
Z after completion of treatment is 25 mm / 65 mm • 100 = 38.5.

Вывод: после лечения деформируемость эритроцитов повысилась на 23,4%. Показатель деформируемости, определенный предлагаемым способом, значительно превосходит таковой, рассчитанный по способу-прототипу. Conclusion: after treatment, erythrocyte deformability increased by 23.4%. The deformability index determined by the proposed method significantly exceeds that calculated by the prototype method.

Таким образом, предложенный способ оценки деформируемости эритроцитов обладает большей чувствительностью, чем прототип и, несмотря на свою простоту, позволяет значительно объективнее оценить деформируемость эритроцитов. Thus, the proposed method for assessing the deformability of red blood cells is more sensitive than the prototype and, despite its simplicity, allows a much more objective assessment of the deformability of red blood cells.

Claims

A method for assessing the erythrocyte deformability, including applying a 60% suspension of washed red blood cells (Der) and physiological saline (Dfr) to the anesthetized filter stains and calculating their diameters, characterized in that a visual assessment of the staining intensity of the stain of a 60% suspension of washed red blood cells and in the case of signs of uneven deformability of the red blood cells that make it up, namely, in the center of the spot there is a rounded zone of highest staining intensity, surrounded by a lighter peripheral ring and clearly the width of the peripheral ring of the erythrocyte suspension, represented by a small amount of the most deformed red blood cells (ShPKer), and the erythrocyte deformability index (Z) are calculated by the formula