RU2173460C1

RU2173460C1 - Method for diagnosing cataract

Info

Publication number: RU2173460C1
Application number: RU2000116478A
Authority: RU
Inventors: С.Н. Шатохина; В.Н. Шабалин; Л.А. Деев
Original assignee: Российский НИИ геронтологии
Filing date: 2000-06-27
Publication date: 2001-09-10

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves carrying out microscopic examination of lacrimal fluid. The lacrimal fluid is placed on microscopic slide in the amount of 1020 mcl, dried at room temperature during 10-12 h. Microscopic examination is carried out with crossed polarizers. Anisotropic inclusions in the peripheral zones of the sample being observed, early stage cataract is diagnosed. EFFECT: simplified, high speed diagnosis method. 2 dwg

Description

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторному методу исследования биологических жидкостей. The invention relates to medicine, in particular to a laboratory method for studying biological fluids.

Известен тезинграфический способ исследования слезной жидкости с целью дифференциальной диагностики различных заболеваний глаз (Ченцова О.Б., Прошина О.И., Маркушева Л.И. Кристаллографический метод исследования слезной жидкости в диагностике некоторых заболеваний глаз. - Вестник офтальмологии. - 1990. - N 2. - С. 44 - 47). Данный способ основан на добавлении к слезной жидкости раствора кристаллообразующего вещества - дигидрата хлорида меди, последующем высушивании смеси, причем о воспалительном, дистрофическом или пролиферативном характере поражения глаз и орбиты в этом методе предложено судить по результатам оценки изменений картины кристаллизации дигидрата хлорида меди. Known tezingrafichesky method for the study of lacrimal fluid for the differential diagnosis of various eye diseases (Chentsova OB, Proshina OI, Markusheva LI Crystallographic method for the study of tear fluid in the diagnosis of some eye diseases. - Bulletin of Ophthalmology. - 1990. - N 2. - S. 44 - 47). This method is based on adding a solution of a crystal-forming substance, copper chloride dihydrate, to the tear fluid, then drying the mixture, and it is proposed to judge the inflammatory, dystrophic, or proliferative nature of eye and orbit lesions in this method based on the results of assessing changes in the crystallization pattern of copper chloride dihydrate.

Известен способ микроскопического исследования слезной жидкости в диагностике пролиферативных процессов глаза, заключающийся в том, что слезная жидкость смешивалась с водным раствором глицина, помещалась на предметное стекло и высушивалось в чашке Петри при комнатной температуре (Тюриков Ю.А., Покоева Т.В. Кристаллографический метод исследования слезной жидкости в диагностике новообразований. Офтальмологический журнал. - 1992. - N 4. - С. 223 - 226, прототип). A known method of microscopic examination of the tear fluid in the diagnosis of proliferative processes of the eye, which consists in the fact that the tear fluid was mixed with an aqueous solution of glycine, placed on a glass slide and dried in a Petri dish at room temperature (Tyurikov Yu.A., Pokoeva T.V. Crystallographic a method for the study of lacrimal fluid in the diagnosis of neoplasms. Ophthalmological journal. - 1992. - N 4. - S. 223 - 226, prototype).

Недостатком этого способа является то, что он не позволяет диагностировать катарактальный процесс на ранних стадиях. The disadvantage of this method is that it does not allow to diagnose the cataract process in the early stages.

Поставленной задачей было устранение указанного недостатка и создание такого способа диагностики, который позволил бы при исследовании слезной жидкости выявлять катаракту на ранней стадии заболевания. The task was to eliminate this drawback and create a diagnostic method that would allow the study of tear fluid to detect cataracts at an early stage of the disease.

Это достигается тем, что в способе диагностики катаракты, включающем микроскопическое исследование, слезная жидкость наносится на предметное стекло в количестве 15 - 20 мкл в форме капли, высушивается при температуре 10 - 12 часов, образец просматривается при скрещенных поляризаторах и при наличии анизотропных включений по периферии образца диагностируется катаракта. This is achieved by the fact that in the cataract diagnostic method, including microscopic examination, tear fluid is applied to a glass slide in an amount of 15 - 20 μl in the form of a drop, dried at a temperature of 10 - 12 hours, the sample is viewed with crossed polarizers and in the presence of anisotropic inclusions around the periphery The sample is diagnosed with cataract.

Одной из основ структурно-функционального баланса биожидкости, подчиняющегося сложным механизмом гомеостаза, является особая молекулярная структура, спонтанно образующаяся из амфифильных биологических молекул в водной среде. Нарушения в этой структуре связаны с рядом биохимических изменений биожидкости, вызывающих функциональные расстройства и возникновение заболеваний (или являющиеся их следствием). Регистрировать нарушения в этой молекулярной структуре означает диагностировать патологический процесс на самой ранней, т.е. доклинической стадии развития. Аналогия молекулярной структуры биологической жидкости с жидкокристаллическими средами позволяет использовать оптические методы, применяемые для исследования таких сред. One of the foundations of the structural and functional balance of biofluid, obeying the complex mechanism of homeostasis, is a special molecular structure that spontaneously forms from amphiphilic biological molecules in an aqueous medium. Violations in this structure are associated with a number of biochemical changes in biofluid, causing functional disorders and the occurrence of diseases (or resulting from them). To register violations in this molecular structure means to diagnose the pathological process at the earliest, i.e. preclinical stage of development. An analogy of the molecular structure of a biological fluid with liquid crystal media allows the use of optical methods used to study such media.

Молекулярные агрегаты, которые образуются в биожидкости, также обладают анизотропией свойств, дихроизмом, двухлучепреломлением. В то же время биожидкость не является однородным жидким кристаллом, а представляет собой сложную дисперсную систему, содержащую агрегаты липидов, белков и других биомолекул с жидкокристаллическим упорядочением. Molecular aggregates that form in biofluids also have anisotropy of properties, dichroism, and birefringence. At the same time, the biofluid is not a homogeneous liquid crystal, but is a complex dispersed system containing aggregates of lipids, proteins, and other biomolecules with liquid crystal ordering.

Слезную жидкость можно рассматривать как смесь воды, белка и лиотропных жидких кристаллов. О фазовом составе слезной жидкости можно судить при исследовании ее в поляризованном свете: у практически здорового человека изотропная слезная жидкость не проявляет двулучепреломления и выглядит как однородное темное поле. При начальных стадиях катарактального процесса, когда происходят метаболитические нарушения в системе белок-липид-вода, это состояние сменяется появлением жидкокристаллических структур, хорошо наблюдаемых при поляризационной микроскопии. The tear fluid can be considered as a mixture of water, protein and lyotropic liquid crystals. The phase composition of the tear fluid can be judged by examining it in polarized light: in a practically healthy person, an isotropic tear fluid does not exhibit birefringence and looks like a uniform dark field. At the initial stages of the cataract process, when metabolic disorders occur in the protein-lipid-water system, this state is replaced by the appearance of liquid crystal structures that are well observed by polarization microscopy.

На фиг. 1 изображен фрагмент образца слезной жидкости с наличием по периферии анизотропных округлых включений у больного на ранней стадии катаракты (х55, поляризационная микроскопия) (пример 1); фиг. 2 - то же, при зрелой катаракте. In FIG. 1 shows a fragment of a sample of tear fluid with the presence of anisotropic rounded inclusions on the periphery of the patient at an early stage of cataract (x55, polarization microscopy) (example 1); FIG. 2 - the same with mature cataract.

Способ осуществляется следующим образом. The method is as follows.

Слезную жидкость забирают из глаза с помощью лабораторной пипетки со схемным наконечником, наносят на предметное стекло в форме капли объемом 10 - 20 мкл, высушивают при температуре 18 - 20^oC в течение 10 - 12 часов, микроскопируют образец при скрещенных поляризаторах и при наличии мелких, преимущественно округлых, анизотропных структур по периферии образца диагностируют раннюю стадию катаракты.A tear fluid is taken from the eye using a laboratory pipette with a circuit tip, applied to a glass slide in the form of a drop of 10-20 μl, dried at a temperature of 18-20 ^o C for 10-12 hours, the sample is microscopically with crossed polarizers and in the presence of small , mainly round, anisotropic structures around the periphery of the sample diagnose an early stage of cataract.

Пример 1. Example 1

Обследуемый К., 57 лет. Исследование слезной жидкости предложенным способом: выявлены округлые анизотропные структуры по периферии образца (фиг. 1). Surveyed K., 57 years old. Study of the lacrimal fluid of the proposed method: rounded anisotropic structures were revealed along the periphery of the sample (Fig. 1).

Заключение: ранняя стадия катарактального процесса. В последующем проведенное полное клиническое, инструментальное и функциональное обследование органа зрения дало основание поставить диагноз: начальная стадия катарактального процесса. Назначен курс профилактического лечения с целью остановки патологического процесса и рекомендовано дальнейшее наблюдение через каждые 6 месяцев. Conclusion: the early stage of the cataract process. Subsequently, a complete clinical, instrumental and functional examination of the organ of vision gave reason to make a diagnosis: the initial stage of the cataract process. A course of preventive treatment was prescribed in order to stop the pathological process and further follow-up is recommended every 6 months.

Пример 2. Example 2

Обследуемый В., 78 лет. Исследование слезной жидкости предложенным способом: по периферии образца определяются трещины в виде ячеистой структуры (нефункционирующий слой роговицы), далее располагается слой округлых анизотропных включений (фиг. 2). Surveyed V., 78 years old. Study of the tear fluid in the proposed way: along the periphery of the sample, cracks in the form of a cellular structure (non-functioning layer of the cornea) are determined, then a layer of rounded anisotropic inclusions is located (Fig. 2).

Заключение: поздняя стадия катаракты. Диагноз при клиническом обследовании: зрелая катаракта (помутнение роговицы). Conclusion: late stage cataract. Clinical diagnosis: mature cataract (corneal opacity).

Данный пример демонстрирует четкое различие в расположении липидного слоя при начальной и зрелой (легко диагностируемой) катаракте. This example demonstrates a clear difference in the location of the lipid layer in the initial and mature (easily diagnosed) cataracts.

По предлагаемой методике проведено обследование 275 здоровых лиц в возрасте 45 - 60 лет, у 37 из которых с помощью предлагаемого способа установлена начальная стадия катарактального процесса, назначен курс профилактической терапии. According to the proposed method, 275 healthy individuals aged 45-60 were examined, 37 of which using the proposed method established the initial stage of the cataract process, prescribed a course of preventive therapy.

Метод технически прост, быстро осуществим, неинвазивен и может с успехом использоваться в качестве скрининга с целью выявления начальной стадии катаракты, подлежащей эффективному консервативному лечению. The method is technically simple, quickly feasible, non-invasive and can be successfully used as a screening to identify the initial stage of cataract, which is subject to effective conservative treatment.

Claims

A method for the diagnosis of cataracts, including microscopic examination of the tear fluid, characterized in that the tear fluid is applied to a glass slide in an amount of 10-20 μl, dried at room temperature 18-20 ° C for 10-12 hours, microscopy is performed with crossed polarizers and the presence of anisotropic inclusions along the periphery of the sample diagnoses an early stage of cataract.