RU2121323C1

RU2121323C1 - Solution "keratane c" for treatment of patients with sickness and damage of cornea

Info

Publication number: RU2121323C1
Application number: RU96113185A
Authority: RU
Inventors: Святослав Николаевич Федоров; Сергей Николаевич Багров; Альбина Ивановна Ивашина; Евгений Викторович Ларионов; Сергей Викторович Новиков
Original assignee: Святослав Николаевич Федоров; Сергей Николаевич Багров; Альбина Ивановна Ивашина; Евгений Викторович Ларионов; Сергей Викторович Новиков
Priority date: 1996-07-02
Filing date: 1996-07-02
Publication date: 1998-11-10

Abstract

FIELD: medicine, ophthalmology. SUBSTANCE: solution containing keratane sulfate and physiological solution has additionally cytochrome c at the following ratio of components, wt. -%: keratane sulfate 0.5-2; cytochrome c 0.001-0.006, and physiological solution - the rest. Solution promotes to the accelerated eye cornea damages. EFFECT: enhanced effectiveness of an agent, accelerated curative effect. 1 cl, 3 ex

Description

Изобретение относится к медицине, а более конкретно к офтальмологии, и может быть использовано в качестве лечебного средства при отеках роговицы, кератитах и кератоконъюнктивитах, ожогах, бельмах, язвах; в офтальмохирургии при кератотомии, кератомилезе, при пересадках роговицы для защиты трансплантата, а также для введения в переднюю камеру глаза с целью предотвращения потери эндотелиальных клеток. The invention relates to medicine, and more particularly to ophthalmology, and can be used as a therapeutic agent for edema of the cornea, keratitis and keratoconjunctivitis, burns, sore throats, ulcers; in ophthalmic surgery for keratotomy, keratomileusis, for corneal transplants to protect the transplant, as well as for insertion into the anterior chamber of the eye in order to prevent the loss of endothelial cells.

Известен раствор и способ его получения, содержащий сульфатированные гликозаминогликаны (С ГАГ), которые получают из роговиц сельскохозяйственных животных, в состав которых входит композиция кератан-сульфат и хондроитин-сульфат в соотношении 2:1 (патент РФ N 2056851). A known solution and method for its preparation containing sulfated glycosaminoglycans (C GAG), which are obtained from the corneas of farm animals, which include the composition of keratan sulfate and chondroitin sulfate in a ratio of 2: 1 (RF patent N 2056851).

Однако в ряде случаев входящий в состав раствора хондроитин- сульфат конкурентно ингибирует действие кератан-сульфата, а при пересадках роговицы часто вызывает неоваскуляризацию трансплантата. При повышении концентрации хондроитин-сульфата в композите, в ряде случаев возникает торможение действия раствора при лечении некоторых заболеваний (например, ожоги, язвы). However, in some cases, the chondroitin sulfate included in the solution competitively inhibits the action of keratan sulfate, and often causes neovascularization of the graft during corneal transplants. With an increase in the concentration of chondroitin sulfate in the composite, in some cases there is inhibition of the action of the solution in the treatment of certain diseases (for example, burns, ulcers).

Задачей предлагаемого изобретения является создание лекарственной формы, обладающей выраженными лечебными свойствами при заболеваниях и повреждениях роговой оболочки глаза. The objective of the invention is the creation of a dosage form with pronounced therapeutic properties for diseases and injuries of the cornea.

Технический результат достигается тем, что раствор, включающий кератан-сульфат и физиологический раствор, согласно изобретению, он дополнительно включает цитохром -С при следующих соотношениях компонентов, мас.%:
Кератан-сульфат - 0,5-2
Цитохром-С - 0,001-0,006
Физиологический раствор - Остальное
Кератан-сульфат является основным кислым гликозаминогликаном роговой оболочки глаза человека и животных, по химической структуре входит в разряд сложных полисахаридов с молекулярной массой 20,000-50,000 Дальтон. Кератан-сульфат обладает следующими биологическими свойствами - обуславливает прозрачность роговицы, регулирует ее водно-солевой обмен, принимает активную роль в репарации роговицы, путем прямого влияния на фибриллогенез коллагена. Кератан-сульфат активно влияет на нормализацию метаболизма роговицы в целом, снижает проницаемость гематоофтальмического барьера, что особенно важно при трансплантации роговой оболочки. Регулируя водно-солевой обмен, он препятствует отеку роговицы после оперативных вмешательств, что особенно ценно для сохранности клеток эндотелия при различных полостных операциях (удаление катаракты, имплантация ИОЛ и т.д.).The technical result is achieved in that the solution comprising keratan sulfate and physiological saline, according to the invention, it further includes cytochrome-C in the following ratios of components, wt.%:
Keratan sulfate - 0.5-2
Cytochrome C - 0.001-0.006
Saline - Rest
Keratan sulfate is the main acidic glycosaminoglycan of the cornea of the eye of humans and animals; according to its chemical structure it enters into the category of complex polysaccharides with a molecular weight of 20,000-50,000 Daltons. Keratan sulfate has the following biological properties - it determines the transparency of the cornea, regulates its water-salt metabolism, takes an active role in corneal repair, by directly affecting collagen fibrillogenesis. Keratan sulfate actively affects the normalization of the cornea metabolism as a whole, reduces the permeability of the blood-ophthalmic barrier, which is especially important during corneal transplantation. By regulating water-salt metabolism, it prevents corneal edema after surgical interventions, which is especially valuable for the preservation of endothelial cells during various abdominal operations (cataract removal, IOL implantation, etc.).

Кератан-сульфат входит в состав раствора в концентрации от 0,5 до 2%, поскольку снижение концентрации ниже 0,5% не приводит к лечебному эффекту, противоотечное действие снижается. Повышение концентрации свыше 2% может вызывать побочные явления в виде аллергии. Keratan sulfate is included in the solution in a concentration of from 0.5 to 2%, since a decrease in the concentration below 0.5% does not lead to a therapeutic effect, the decongestant effect is reduced. An increase in concentration over 2% can cause side effects in the form of an allergy.

Цитохром-С является дыхательным ферментом и выделяется из сердечной мышцы крупного рогатого скота и свиней (ФС 42-25 34-88). Этот фермент оказывает выраженное действие по связыванию свободных радикалов, которые накапливаются в больших количествах при заболеваниях и повреждениях роговицы, особенно при термических ожогах и других обширных травмах. Данный фермент вводится в раствор в концентрации от 0,001 до 0,006%. При концентрации ниже 0,001% связывание свободных радикалов не происходит. При повышении концентрации выше 0,006% могут наблюдаться аллергические явления (отек конъюнктивы). Cytochrome-C is a respiratory enzyme and is secreted from the heart muscle of cattle and pigs (FS 42-25 34-88). This enzyme has a pronounced effect on the binding of free radicals, which accumulate in large quantities during diseases and injuries of the cornea, especially during thermal burns and other extensive injuries. This enzyme is introduced into the solution in a concentration of from 0.001 to 0.006%. At a concentration below 0.001%, free radical binding does not occur. With an increase in concentration above 0.006%, allergic phenomena (conjunctival edema) can be observed.

Таким образом, предлагаемый раствор является сбалансированной композицией и может применяться как в виде инстилляций, так и для введения в полость глаза. Thus, the proposed solution is a balanced composition and can be used both in the form of instillations and for introduction into the cavity of the eye.

Предлагаемый раствор готовят следующим образом. The proposed solution is prepared as follows.

Получение кератан-сульфата. Obtaining keratan sulfate.

К 1 кг роговиц сельскохозяйственных животных, отмытых 0,02 М фосфатным буфером, добавляют 50-55 мл 1,25 г папаина. Смесь инкубируют при 60-65^oC в течение 4 ч, после чего кипятят 10-15 мин, осадок отделяют центрифугированием, а прозрачный гидролизат деализируют против смеси хлористого натрия и этанола в соотношении 7:3. На 1 л полученного диализата добавляют 0,0125 г. β- гиалуронидазы и продолжают инкубацию раствора при 60-65^oC в течение 4 ч при постоянном перемешивании. Гидролизат вновь кипятят, осадок отделяют центрифугированием. Прозрачный гидролизат окончательно диализуют против смеси однохлористого натрия и этанола и окончательно против дистиллированной воды. Диализат лиофилизируют и делают навески с нужной концентрацией, а именно от 0,5 до 2 мас.%.To 1 kg of the cornea of farm animals washed with 0.02 M phosphate buffer, add 50-55 ml of 1.25 g of papain. The mixture was incubated at 60-65 ^° C for 4 hours, after which it was boiled for 10-15 minutes, the precipitate was separated by centrifugation, and the clear hydrolyzate was dealized against a mixture of sodium chloride and ethanol in a 7: 3 ratio. 0.0125 g of β-hyaluronidase is added per 1 liter of obtained dialysate and the solution is continued to incubate at 60-65 ^° C for 4 hours with constant stirring. The hydrolyzate is again boiled, the precipitate is separated by centrifugation. The clear hydrolyzate is finally dialyzed against a mixture of sodium monochloride and ethanol and finally against distilled water. The dialysate is lyophilized and weighed with the desired concentration, namely from 0.5 to 2 wt.%.

Далее делают навеску сухого порошка цитохрома-С (ФС 42-25 34-88) от 0,001 до 0,006 г,растворяют эти навески в физиологическом растворе (0,9 V раствора натрия хлорида) и разливают во флаконы. Next, make a weighed portion of dry powder of cytochrome-C (FS 42-25 34-88) from 0.001 to 0.006 g, dissolve these weighed samples in physiological saline (0.9 V sodium chloride solution) and pour into vials.

Предлагаемое коммерческое название препарата "Кератан-С". The proposed commercial name of the drug is "Keratan-S".

Для лучшего понимания сущности изобретения приводим примеры конкретного действия биораствора. For a better understanding of the invention, we give examples of the specific action of the bio-solution.

Пример 1. Больной А. , Диагноз: Трофическая язва роговицы ⌀ - 0,4 мм. Больному в течение 10 дней закапывали раствор в следующем соотношении компонентов:
Кератан-сульфат - 0,5 г
Цитохром-С - 0,001 г
Физраствор - до 100 мл
Через 12 дней после лечения ⌀ язвы уменьшился на 0,2 мм.Example 1. Patient A., Diagnosis: Trophic corneal ulcer ⌀ - 0.4 mm. The patient was instilled with a solution in the following ratio of components for 10 days:
Keratan sulfate - 0.5 g
Cytochrome C - 0.001 g
Saline - up to 100 ml
12 days after treatment, ⌀ ulcer decreased by 0.2 mm.

Пример 2. Больной У. Аллергический кератоконъюнктивит. Example 2. Patient W. Allergic keratoconjunctivitis.

В течение 1 месяца в каждый больной глаз иннагиллировали биораствор по 1-2 капли 3-4 раза в день. Через 1 месяц после лечения отмечалось уменьшение отека роговицы, ее просветление, снижение гиперимия конъюнктивы уменьшение слезотечения. Within 1 month, in each diseased eye, a bio-solution of 1-2 drops was 3-4 times a day. 1 month after treatment, there was a decrease in corneal edema, its enlightenment, a decrease in conjunctival hyperimia, a decrease in lacrimation.

Раствор готовили в следующем соотношении компонентов:
Кератан-сульфат - 1 г
Цитохром-С - 0,003 г
Физраствор - до 100 мл.The solution was prepared in the following ratio of components:
Keratan sulfate - 1 g
Cytochrome C - 0.003 g
Saline - up to 100 ml.

Пример 3. Больная С., Удаление катаракты с имплантацией ИОЛ. Перед удалением помутневшего хрусталика в переднюю камеру глаза вводили 0,3 мл биораствора содержащего:
Кератан-сульфат - 2 г
Цитохром-С - 0,006 г
Физраствор - до 100 мл
После имплантации ИОЛ через 3 сут после операции роговица прозрачная, неотечная, клетки эндотелия плотно прилегают к Боуменовой мембране, их монослой не нарушен.Example 3. Patient S., Cataract removal with IOL implantation. Before removing a clouded lens, 0.3 ml of a bio-solution containing:
Keratan sulfate - 2 g
Cytochrome C - 0.006 g
Saline - up to 100 ml
After IOL implantation, 3 days after the operation, the cornea is transparent, non-edematous, endothelial cells adhere tightly to the Bowman membrane, their monolayer is not broken.

Claims

A solution for the treatment of diseases and injuries of the cornea, including keratan sulfate and physiological saline, characterized in that it additionally contains cytochrome-C in the following ratio of components wt.%:
Keratan sulfate - 0.5 - 2
Cytochrome C - 0.001 - 0.006
Saline - The Rest