RU2088938C1 - Method for diagnosing intestinal dysbiosis and intestinal infection cases - Google Patents
Method for diagnosing intestinal dysbiosis and intestinal infection cases Download PDFInfo
- Publication number
- RU2088938C1 RU2088938C1 RU93034438A RU93034438A RU2088938C1 RU 2088938 C1 RU2088938 C1 RU 2088938C1 RU 93034438 A RU93034438 A RU 93034438A RU 93034438 A RU93034438 A RU 93034438A RU 2088938 C1 RU2088938 C1 RU 2088938C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- intestinal
- colonies
- dysbiosis
- interferon
- feces
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, в частности к медицинской микробиологии, и может быть использовано для диагностики кишечного дисбиоза и кишечной инфекции. The invention relates to medicine, in particular to medical microbiology, and can be used to diagnose intestinal dysbiosis and intestinal infection.
В последние годы повсеместно отмечается значительный рост заболеваемости кишечным дисбиозом (дисбактериозом), который является источником острых эндогенных инфекций (перитонит, аппендицит, холецистит, пиелонефрит, пневмония), способствует развитию аллергических заболеваний, формированию и прогрессированию хронических воспалительных процессов в различных органах. Микрофлора кишечника при кишечном дисбиозе играет роль в канцерогенезе, развитии атеросклероза, является источником генов антибиотикорезистентности, способных передаваться другим бактериям. In recent years, there has been a widespread increase in the incidence of intestinal dysbiosis (dysbiosis), which is a source of acute endogenous infections (peritonitis, appendicitis, cholecystitis, pyelonephritis, pneumonia), contributes to the development of allergic diseases, the formation and progression of chronic inflammatory processes in various organs. The intestinal microflora in intestinal dysbiosis plays a role in carcinogenesis, the development of atherosclerosis, is a source of antibiotic resistance genes that can be transmitted to other bacteria.
В связи с высокой распространенностью кишечного дисбиоза вопрос своевременного его распознавания становится одной из задач диагностической службы. Для выявления кишечного дисбиоза, как известно, применяется расширенное бактериологическое исследование фекалий классическим способом с определением количества и биологических свойств анаэробной микрофлоры (Эпштейн-Литвак Р. В. и др. Бактериологическая диагностика дисбактериоза кишечника: Методические рекомендации. М. 1977). Чрезвычайное многообразие кишечной микрофлоры (в содержимом слепой кишки находятся представители 17 семейств, 45 родов и свыше 400 различных видов) требует большого набора питательных сред и создания особых условий культивирования микроорганизмов. Это приводит к тому, что лабораторные методы диагностики дисбиоза кишечника до настоящего времени остаются дорогостоящими, трудоемкими, длительными и неприемлемыми для проведения массовых исследований. Due to the high prevalence of intestinal dysbiosis, the question of its timely recognition becomes one of the tasks of the diagnostic service. To detect intestinal dysbiosis, as is known, an extended bacteriological study of feces is used in a classical way with the determination of the quantity and biological properties of anaerobic microflora (Epstein-Litvak R.V. et al. Bacteriological diagnosis of intestinal dysbiosis: Methodological recommendations. M. 1977). The extraordinary variety of intestinal microflora (representatives of 17 families, 45 genera and over 400 different species are found in the contents of the cecum) require a large set of culture media and create special conditions for the cultivation of microorganisms. This leads to the fact that laboratory methods for the diagnosis of intestinal dysbiosis to date remain expensive, time-consuming, lengthy and unacceptable for mass research.
На основании вышеизложенного можно сделать вывод о важности раннего выявления кишечного дисбиоза для своевременного и эффективного проведения коррекции микрофлоры био- и иммунопрепаратами. Для решения такой задачи требуются программы по скринингу населения на предмет кишечного дисбиоза. Based on the foregoing, it can be concluded that the early detection of intestinal dysbiosis is important for timely and effective microflora correction with bio- and immunotherapy. To solve this problem, programs are required to screen the population for intestinal dysbiosis.
Поскольку при нарушении кишечного биоценоза все свойства, микрофлоры (антагонистическая и витаминообразующая активность, участие в метаболических процессах и др. ) значительно изменяются, предложены различные косвенные тесты диагностики кишечного дисбиоза. Так, о состоянии микробиоценоза судят по уровню метаболитов кишечной микрофлоры. С этой целью определяют индикан, п-крезол и фенол в моче; водород и метан в выдыхаемом воздухе; летучие жирные кислоты в содержимом тощей кишки или в фекалиях; аммиак в крови, в кале или в выдыхаемом воздухе (Тамм А.О. и др. Метаболиты кишечной микрофлоры в диагностике дисбиоза кишечника. Антибиотики и медицинская биотехнология. 1987, т. 32, N 3, с.191-195). Методы выявления кишечного дисбиоза, основанные на обнаружении продуктов метаболизма, дают удовлетворительные результаты при выраженном дисбалансе кишечной микрофлоры и имеют малую чувствительность и диагностическую ценность в начальной стадии кишечного дисбиоза (там же, с. 192). Следовательно, эти методы недостаточны для проведения скрининговых исследований населения на дисбиоз кишечника. В основу другого метода выявления дисбиотических нарушений положена степень антагонистической активности микроорганизмов, выделенных из фекалий (Завгородняя Е.Ф. и др. Антагонистическая активность кишечной аутофлоры как косвенный метод выявления дисбактериоза кишечника. Врачебное дело. 1981, N 6, с.113-116). Недостатком данного метода оценки состояния кишечника микрофлоры является длительность исследования (5 сут). Since in case of violation of intestinal biocenosis all the properties, microflora (antagonistic and vitamin-forming activity, participation in metabolic processes, etc.) change significantly, various indirect tests for the diagnosis of intestinal dysbiosis have been proposed. So, the state of microbiocenosis is judged by the level of metabolites of intestinal microflora. For this purpose, indican, p-cresol and phenol in urine are determined; hydrogen and methane in exhaled air; volatile fatty acids in the contents of the jejunum or in feces; ammonia in the blood, in feces or in expired air (Tamm A.O. et al. Metabolites of intestinal microflora in the diagnosis of intestinal dysbiosis. Antibiotics and medical biotechnology. 1987, v. 32, No. 3, pp. 191-195). Methods for detecting intestinal dysbiosis, based on the detection of metabolic products, give satisfactory results with a pronounced imbalance of intestinal microflora and have low sensitivity and diagnostic value in the initial stage of intestinal dysbiosis (ibid., P. 192). Therefore, these methods are insufficient for screening studies of the population for intestinal dysbiosis. Another method for detecting dysbiotic disorders is based on the degree of antagonistic activity of microorganisms isolated from feces (Zavgorodnaya E.F. et al. Antagonistic activity of intestinal autoflora as an indirect method for detecting intestinal dysbiosis. Medical practice. 1981, No. 6, pp. 113-116) . The disadvantage of this method of assessing the intestinal state of microflora is the duration of the study (5 days).
В связи с изложенными выше обстоятельствами поиск новых методов скрининговой диагностики кишечного дисбиоза является актуальной задачей клинической микробиологии. При проведении массовых обследований населения, особенно детского, на выявление дисбиоза кишечника немаловажное значение имеет дифференцирование последнего со спорадическими случаями кишечных инфекций. В настоящее время отсутствуют четкие клинические и микробиологические критерии дифференциации этих двух заболеваний. Существующие лабораторные методы диагностики кишечных инфекций, вызванных условно-патогенными энтеробактериями (УПЭ) эшерихиями, протеями, клебсиеллами и др. основаны на обнаружении их в количестве не менее 106 КОЕ в 1 г фекалий, оценке их биологических свойств, наличии антител к условно-патогенным энтеробактериям в титре 1:40 и выше с нарастанием их уровня в динамике заболевания при исследовании "парных" сывороток (Королева Л. Б. и др. Клиника, диагностика, лечение, эпидемиология и противоэпидемические мероприятия при острых кишечных инфекциях, вызванных условно-патогенными бактериями у детей раннего возраста: Методические рекомендации, М. 1988, с.19). Дороговизна, трудоемкость, длительность исследований исключает возможность использования перечисленных методов диагностики кишечных инфекций, вызванных УПЭ, для проведения скрининговых исследований. Следовательно, особую активность приобретает разработка метода бактериологического скрининга, позволяющего на первом этапе обследования (поисковая программа) выявлять и проводить дифференциальный диагноз наиболее распространенных инфекционных заболеваний кишечника кишечного дисбиоза и кишечной инфекции, вызванных условно-патогенными бактериями.In connection with the above circumstances, the search for new methods for screening diagnosis of intestinal dysbiosis is an urgent task of clinical microbiology. When conducting mass examinations of the population, especially children, to identify intestinal dysbiosis, the differentiation of the latter with sporadic cases of intestinal infections is of no small importance. Currently, there are no clear clinical and microbiological criteria for the differentiation of these two diseases. Existing laboratory methods for the diagnosis of intestinal infections caused by opportunistic enterobacteria (UPE) by Escherichia, proteins, Klebsiella, etc. are based on the detection of at least 10 6 CFU per 1 g of feces, assessment of their biological properties, and the presence of antibodies to opportunistic pathogens enterobacteria in a titer of 1:40 and higher with an increase in their level in the dynamics of the disease in the study of "paired" sera (Koroleva L. B. et al. Clinic, diagnosis, treatment, epidemiology and anti-epidemic measures in acute intestinal infections s, caused by opportunistic bacteria in infants: guidelines, M. 1988, p.19). The high cost, laboriousness, and duration of studies exclude the possibility of using the above methods for the diagnosis of intestinal infections caused by UPE for screening studies. Consequently, the development of a method of bacteriological screening, which allows one to identify and conduct a differential diagnosis of the most common infectious diseases of the intestine of intestinal dysbiosis and intestinal infection caused by opportunistic bacteria, is particularly active.
Наиболее близким техническим решением, выбранным в качестве прототипа, является способ определения кишечного дисбиоза по дефициту бифидобактерий (посев взвеси фекалий производится в среду Блаурокка; учет путем микроскопии окрашенных по Граму мазков, приготовленных из характерных колоний) и обнаружению тканевого белка в кале (осаждение растворимого белка путем добавления трихлоруксусной кислоты к эмульсии из фекалий; учет визуальная регистрация степени просветвления надосадочной жидкости), указывающего на возможное повреждение клеточных элементов кишечной стенки (Дорофейчук В.Г. и др. Ключевые тесты для определения кишечного дисбактериоза: Пристендовый листок ВДНХ СССР. М. 1991). Недостатком известного способа является отсутствие возможности диагностики дисбиоза кишечника на ранней стадии, характеризующейся лишь незначительными изменениями в аэробной части микробиоценоза (увеличение или уменьшение количества кишечной палочки при отсутствии снижения уровня бифидобактерий 1 степень дисбиоза) (Грачева Н.М. и др. Применение бактерийных биологических препаратов в практике лечения больных кишечными инфекциями. Диагностика и лечение дисбактериоза кишечника: Методические рекомендации. М. 1986, с. 16-17). Кроме того, визуальная оценка ("полное", "значительное", "незначительное" просветвление жидкости) не позволяет объективно оценить и стандартизировать результаты. The closest technical solution, selected as a prototype, is a method for determining intestinal dysbiosis by a deficiency of bifidobacteria (suspension of feces is carried out in Blaurock medium; microscopic examination of smears stained with Gram stains prepared from characteristic colonies) and detection of tissue protein in feces (precipitation of soluble protein by adding trichloroacetic acid to the fecal emulsion; taking into account visual registration of the degree of clarification of the supernatant), indicating possible damage to cells full-time elements of the intestinal wall (Dorofeychuk VG and others. Key tests for determining intestinal dysbiosis: Poster leaflet of VDNH USSR. M. 1991). The disadvantage of this method is the inability to diagnose intestinal dysbiosis at an early stage, characterized by only minor changes in the aerobic part of microbiocenosis (an increase or decrease in the number of Escherichia coli in the absence of a decrease in the level of bifidobacteria, 1 degree of dysbiosis) (Gracheva N.M. et al. Use of bacterial biological preparations in the practice of treating patients with intestinal infections. Diagnosis and treatment of intestinal dysbiosis: guidelines. M. 1986, S. 16-17). In addition, visual assessment ("complete", "significant", "minor" fluid clarification) does not allow an objective assessment and standardization of the results.
Изложенная выше обобщенная характеристика выявленных способов-аналогов с указанием причин, препятствующих получению требуемого технического результата, дает основание сделать вывод, что заявляемое изобретение не известно из уровня техники, т.е. является новым. The above generalized characteristic of the identified methods-analogues indicating the obstacles to obtaining the desired technical result, gives reason to conclude that the claimed invention is not known from the prior art, i.e. is new.
Существенные отличия заключаются в том, что определяют антиинтерфероновую активность одномоментно у всех колоний энтеробактерий в посеве фекалий на питательном агаре с препаратом человеческого лейкоцитарного интерферона в концентрации 2 МБК для тест-культуры Corinebacterium xerosis ГИСК N 181 и при инактивации интерферона колониями делают заключение о состоянии кишечного микробиоценоза: отсутствие антиинтерфероновой активности у выросших колоний свидетельствует об эубиозе; обнаружение признака у 1-50% колоний указывает на кишечный дисбиоз, а наличие признака у более 50% колоний на кишечную инфекцию. Significant differences are that they determine the anti-interferon activity simultaneously in all colonies of enterobacteria in the culture of feces on nutrient agar with the preparation of human leukocyte interferon at a concentration of 2 MBK for the test culture of Corinebacterium xerosis GISK N 181 and, when the interferon is inactivated by colonies, the microbial state : the lack of anti-interferon activity in the grown colonies indicates eubiosis; detection of a trait in 1-50% of colonies indicates intestinal dysbiosis, and the presence of a trait in more than 50% of colonies indicates intestinal infection.
Авторы полагают, что существенные отличия являются новыми и дают возможность осуществлять раннюю диагностику кишечного дисбиоза и кишечной инфекции за счет сокращения сроков и повышения информативности исследования путем предварительной ориентировочной оценки состояния кишечной микрофлоры. Заявляемый способ может быть использован как для выполнения массового скрининга с целью определения групп риска, так и для проведения дифференциального диагноза различных состояний микробиоценоза кишечника в сложных клинико-бактериологических ситуациях. The authors believe that the significant differences are new and make it possible to carry out early diagnosis of intestinal dysbiosis and intestinal infection by reducing the time and increasing the information content of the study by tentatively assessing the state of intestinal microflora. The inventive method can be used both for mass screening to determine risk groups, and for differential diagnosis of various conditions of intestinal microbiocenosis in complex clinical and bacteriological situations.
Способ осуществляют следующим образом. The method is as follows.
Ректальной петлей производят посев содержимого прямой кишки на чашки Петри с 1,5% мясо-пептонным агаром, содержащим препарат человеческого лейкоцитарного интерферона (НПО "Иммунопрепарат", г. Уфа) в количестве 0,3 мл рабочего раствора в 7,5 мл агара, что соответствует концентрации 2 МБК для тест-культуры Corynebacterium xerosis ГИСК N 181. Рабочий раствор готовится согласно инструкции растворенного вещества ампулы в 2 мл стерильного 0,85% раствора хлорида натрия. Одновременно на одну чашку допускается посев кала по секторам от двух-трех обследуемых. Посевы инкубируют в термостате 18-24 ч при 37oC. Выросшие колонии убирают парами хлороформа. Для этого, держа чашку перевернутой, вкладывают в ее крышку кусочек бумаги ватман площадью 8-10 см2 и пропитывают его 0,3-0,5 мл хлороформа. Держат чашку закрытой 20-30 мин. Переворачивают чашку и сверху на колонии наслаивают 3-4 мл мягкого (0,6-0,7% ) агара, смешанного с 0,1 мл взвеси (в 1 мл около 109 индикаторных клеток по оптическому стандарту мутности) суточной агарной тест-культуры Corynebacterium xerosis ГИСК N 181.The rectal loop inoculates the contents of the rectum on Petri dishes with 1.5% meat-peptone agar containing the preparation of human leukocyte interferon (NPO Immunopreparat, Ufa) in the amount of 0.3 ml of working solution in 7.5 ml of agar, which corresponds to a concentration of 2 MBC for the test culture of Corynebacterium xerosis GISK N 181. The working solution is prepared according to the instructions of the dissolved substance of the ampoule in 2 ml of sterile 0.85% sodium chloride solution. At the same time, sowing of feces in sectors from two to three subjects is allowed per cup. Crops are incubated in an incubator for 18-24 hours at 37 o C. The grown colonies are removed in pairs of chloroform. To do this, holding the cup upside down, put a piece of Whatman paper with an area of 8-10 cm 2 in its lid and impregnate it with 0.3-0.5 ml of chloroform. Keep the cup closed for 20-30 minutes. The plate is inverted and 3-4 ml of soft (0.6-0.7%) agar mixed with 0.1 ml of suspension (in 1 ml of about 10 9 indicator cells according to the optical turbidity standard) of a daily agar test culture are layered on top of the colony. Corynebacterium xerosis GISK N 181.
Результат учитывают через 18-24 ч инкубации в термостате при 37o C, т.е. через двое суток от начала исследования. По окончании срока инкубации определяют антиинтерфероновую активность в посеве фекалий, по росту тест-штамма на поверхности и вокруг колоний, что свидетельствует о неблагополучии в кишечном микробиоценозе. Обнаружение антиинтерфероновой активности у 1-50% выросших колоний свидетельствует о кишечном дисбиозе; наличие признака у более 50% колоний указывает на кишечную инфекцию, а отсутствие признака на эубиоз.The result is taken into account after 18-24 hours of incubation in a thermostat at 37 o C, i.e. two days after the start of the study. At the end of the incubation period, anti-interferon activity in feces is determined by the growth of the test strain on the surface and around the colonies, which indicates a failure in the intestinal microbiocenosis. The detection of anti-interferon activity in 1-50% of the grown colonies indicates intestinal dysbiosis; the presence of a sign in more than 50% of the colonies indicates an intestinal infection, and the absence of a sign on eubiosis.
На основании результатов обследования детей и взрослых по поисковой программе подозрение на кишечный дисбиоз или кишечную инфекцию по количеству антиинтерферонактивных колоний можно считать подтвержденным. Основная программа, применяемая на втором этапе диагностического поиска как дополнение к поисковой, требует развернутого бактериологического исследования фекалий с целью уточнения вида и степени дисбиоза кишечника, вида (эшерихиоз, клебсиеллез и др.) кишечной инфекции и решения вопроса о методах их коррекции. Based on the results of a survey of children and adults by a search program, a suspicion of intestinal dysbiosis or intestinal infection by the number of anti-interferon-active colonies can be considered confirmed. The main program, used at the second stage of the diagnostic search as an addition to the search, requires a detailed bacteriological study of feces in order to clarify the type and degree of intestinal dysbiosis, the type (Escherichiosis, Klebsiosis, etc.) of intestinal infection and resolve the issue of methods for their correction.
Теоретической предпосылкой к разработке предлагаемого способа выявления кишечного дисбиоза и кишечной инфекции послужили обнаруженные нами различия в количестве антиинтерферонактивных колоний на чашках с посевами фекалий у здоровых и больных с кишечными дисфункциями (табл. 1). The theoretical prerequisite for the development of the proposed method for the detection of intestinal dysbiosis and intestinal infection was the differences we found in the number of anti-interferon-active colonies on plates with feces in healthy and patients with intestinal dysfunctions (Table 1).
Так, при посеве фекалий от 30 больных с кишечной инфекцией, вызванной ЭПКП 0,18, нетипируемыми эшерихиями, клебсиеллой, протеем и другими энтеробактериями, в 28 случаях (93,3%) обнаружены антиинтерферонактивные колонии. Для больных этой группы оказалось характерным наличие антиинтерфероновой активности у большинства (80-100%) выросших колоний. So, when sowing feces from 30 patients with intestinal infection caused by EPEC 0.18, non-typable Escherichia, Klebsiella, Proteus and other enterobacteria, in 28 cases (93.3%), anti-interferon-active colonies were found. For patients of this group, the presence of anti-interferon activity in the majority (80-100%) of the grown colonies was characteristic.
При посеве испаражнений от 100 больных кишечных дисбиозом положительные результаты антиинтерферонового теста были выявлены с такой же частотой (87% больных), как и при кишечных инфекциях. Однако, на долю антиинтерфероактивных приходилось от 1 до 50% колоний, то есть менее половины выросших на чашке. When sowing feces from 100 patients with intestinal dysbiosis, positive results of the anti-interferon test were detected with the same frequency (87% of patients) as with intestinal infections. However, the share of anti-interferoactive was from 1 to 50% of the colonies, that is, less than half grown on a cup.
При обследовании 30 клинически и бактериологически здоровых детей и взрослых в 27 случаях (90%) в посеве фекалий не было обнаружено колоний, инактивирующих интерферон. Лишь у 3 из 30 обследованных выявлен положительный антиинтерфероновый тест, при этом количество активных колоний составило 3-5% от числа выросших. When examining 30 clinically and bacteriologically healthy children and adults in 27 cases (90%), no colonies inactivating interferon were found in the feces. Only 3 out of 30 examined showed a positive anti-interferon test, while the number of active colonies was 3-5% of the number grown.
Используя описанный выше метод, было проведено скрининговое исследование 140 детей детского соматического стационара СМЧ ПО "Стрела" г. Оренбурга по поводу затяжной кишечной дисфункции. Результаты исследования приведены в табл. 2. Using the method described above, a screening study was conducted of 140 children of the children's somatic hospital at the OMS of Strela in Orenburg for protracted intestinal dysfunction. The results of the study are given in table. 2.
При использовании критериев заявленного способа (наличие антиинтерфероновой активности у 1-50% колоний) положительный результат скрининга на кишечный дисбиоз выявлен в 22 случаях из 180 (12,2%), в то время как способом-прототипом (обнаружение тканевого белка в кале при отсутствии бифидобактерий) в 10 случаях (5,6%), P<0,05. Using the criteria of the claimed method (the presence of anti-interferon activity in 1-50% of the colonies), a positive result of screening for intestinal dysbiosis was detected in 22 cases out of 180 (12.2%), while the prototype method (detection of tissue protein in feces in the absence of bifidobacteria) in 10 cases (5.6%), P <0.05.
Аналогичные данные получены и в отношении диагностической значимости скринингового исследования фекалий на кишечную инфекцию: антиинтерфероновый тест (наличие активности у более чем 50% колоний) оказалось положительным в 13 из 180 случаев (7,2%) против 9 случаев (5%), выявленных способом-прототипом. Similar data were obtained regarding the diagnostic significance of a screening study of feces for intestinal infection: the anti-interferon test (activity in more than 50% of the colonies) was positive in 13 of 180 cases (7.2%) versus 9 cases (5%) identified by the method prototype.
В группе детей с дисбиозом кишечника положительные результаты скрининга были подтверждены развернутым бактериологическим исследованием фекалий по методике Р.В. Эпштейн-Литвак и Ф.Л. Вильшанской (1977). In the group of children with intestinal dysbiosis, positive screening results were confirmed by an extensive bacteriological study of feces according to the method of R.V. Epstein-Litvak and F.L. Vilshansky (1977).
У больных с положительным скрининг-тестом на кишечную инфекцию диагноз был подтвержден бактериологическим методом (выявление УПЭ в чистой культуре из разведения фекалий 10-5, что соответствует их количеству более 106 КОЕ в 1 г), а также положительным иммунным ответом макроорганизма - наличием сывороточных антител к УПЭ в титре 1:160 и выше.In patients with a positive screening test for intestinal infection, the diagnosis was confirmed by the bacteriological method (detection of UPE in a pure culture from dilution of
Способ был использован для обследования трех групп детей: первая - больные с кишечным дисбиозом; вторая больные с кишечными инфекциями; третья контрольная. Приводим конкретные примеры. The method was used to examine three groups of children: the first - patients with intestinal dysbiosis; the second patients with intestinal infections; third control. We give specific examples.
Первая группа детей (больные с дисбизом кишечника). The first group of children (patients with intestinal dysbisis).
Пример 1. Больная З. 10 лет. Диагноз при поступлении хронический пиелонефрит эшерихиозной этиологии в стадии обострения. При проведении скрининга по предлагаемому способу обнаружен кишечный дисбиоз (количество антиинтерферонактивных колоний при посеве фекалий составило 15%), в то время как параллельно проведенное исследование кала по прототипу дисбиотических явлений не выявило. В ходе дальнейшего общепринятым методом подтверждено нарушение кишечного микробиоценоза в виде увеличения общего количества кишечной палочки (4,6 • 109 КОЕ/г) c появлением гемолитических и лактозонегативных форм (соответственно 8 и 20%), а также снижение бифидофлоры (107 КОЕ/г). Проведена целенаправленная коррекция микрофлоры кишечника биопрепаратами. Следовательно, у больного предлагаемым методом выявлен дисбиоз кишечника на раннем этапе обследования, что позволило своевременно провести коррекцию возникших нарушений и уменьшить число рецидивов пиелонефрита.Example 1. Patient Z. 10 years. The diagnosis of admission chronic pyelonephritis of escherichiological etiology in the acute stage. When conducting screening according to the proposed method, intestinal dysbiosis was detected (the number of anti-interferon-active colonies when sowing feces was 15%), while a parallel stool study on the prototype of dysbiotic phenomena did not reveal. In the course of the further generally accepted method, a violation of intestinal microbiocenosis was confirmed in the form of an increase in the total number of Escherichia coli (4.6 • 10 9 CFU / g) with the appearance of hemolytic and lactose-negative forms (8 and 20%, respectively), as well as a decrease in bifidoflora (10 7 CFU / d). Purposeful correction of intestinal microflora by biological products. Therefore, the patient by the proposed method revealed intestinal dysbiosis at an early stage of the examination, which allowed timely correction of the violations and reduce the number of pyelonephritis recurrences.
Пример 2. Больной Р. 8 лет. Страдает экземой с трехлетнего возраста. При бактериологическом исследовании фекалий предлагаемым методом выявлено 30% колоний, инактивирующих интерферон. Характер выявленных дисбиотических нарушений установлен в дальнейшем путем развернутого анализа в виде дефицита бифидобактерий (105 КОЕ/г) и эшерихий (106 КОЕ/г), увеличения содержания УПЭ клебсиелл (107 КОЕ/г).Example 2. Patient R. 8 years. Suffers from eczema from the age of three. When bacteriological examination of feces by the proposed method revealed 30% of colonies that inactivate interferon. The nature of the identified dysbiotic disorders was established later by an extensive analysis in the form of a deficiency of bifidobacteria (10 5 CFU / g) and Escherichia (10 6 CFU / g), an increase in the content of KPEs of Klebsiella (10 7 CFU / g).
Вторая группа больных (больные с кишечными инфекциями). The second group of patients (patients with intestinal infections).
Пример 1. Больной М. 2 мес. Из анамнеза известно, что ребенок приложен к груди на третьи сутки после рождения (послеродовое кровотечение у матери). После выписки из роддома стул учащен до 8-10 раз со слизью. Вскармливание естественное. Отстает в массе (прибавка за 1 месяц 850 г, за второй 300 г). При осмотре выявлен признаки гипотрофии 1 степени. Стул 2-3 раза в день, жидкий, без патологических примесей. Антибиотиками не лечился. При исследовании фекалий по предлагаемому способу, проведенному при поступлении, выявлена антиинтерфероновая активность у 100% колоний в посеве фекалий на питательном агаре с лейкоцитарным интерфероном, что свидетельствует о кишечной инфекции. При дальнейшем клиническом и бактериологическом обследовании подтверждено наличие эшерихиозной кишечной инфекции: выявлена энтерпатогенная кишечная палочка серогруппы 018 в количестве 6,3•109 КОЕ/г со слабо выраженными ферментативными свойствами. Целенаправленная антибиотикотерапия в комплексе с патогенетическими средствами привела к положительному эффекту.Example 1. Patient M. 2 months. From the anamnesis it is known that the baby is applied to the chest on the third day after birth (postpartum hemorrhage in the mother). After discharge from the hospital, the stool is frequent up to 8-10 times with mucus. Feeding is natural. It lags behind in the mass (850 g increase for 1 month, 300 g for the second). On examination, signs of
Пример 2. Больной Г. 7 лет. Жалобы на субфебрилитет, жидкий стул в течение двух дней после употребления сухофруктов. В ходе клинико-лабораторного обследования по предлагаемому способу через двое суток после поступления установлена кишечная инфекция, что обосновано наличием в посеве фекалий у 80% колоний способности инактивировать интерферон. Последующие обследования выявило нетипируемые эшерихии в количестве 2,1•109 КОЕ/г, гемолитически неактивные, и четырехкратное нарастание титра антител к аутоштамму кишечной палочки на второй неделе заболевания.Example 2. Patient G. 7 years. Complaints of subfebrile, loose stools for two days after eating dried fruits. During a clinical and laboratory examination according to the proposed method, an intestinal infection was established two days after admission, which is justified by the ability to inactivate interferon in 80% of colonies in feces. Subsequent examinations revealed non-typable Escherichia in the amount of 2.1 • 10 9 CFU / g, hemolytically inactive, and a fourfold increase in the titer of antibodies to E. coli autostrain in the second week of the disease.
Третья группа детей (контрольная). The third group of children (control).
Пример 1. Ребенок А. 5 лет. Диагноз при поступлении энурез. При проведении скрининга на неблагополучие в кишечной микробиоценозе получен отрицательный результат антиинтерферонактивных колоний в посеве фекалий не обнаружено. Эубиоз подтвержден развернутым бактериологическим анализом. Example 1. Child A. 5 years. Diagnosis of enuresis. When conducting a screening for dysfunction in the intestinal microbiocenosis, a negative result of anti-interferon-active colonies was not found in feces sowing. Eubiosis is confirmed by a detailed bacteriological analysis.
Пример 2. Мальчик О. 6 лет. В возрасте 5 лет оперирован по поводу стеноза прилоханочного отдела мочеточника. Послеоперационный период осложнился синегнойной инфекцией мочевых путей. В поисках источника инфицирования мочевого тракта произведено исследование фекалий по предлагаемому способу. Получен отрицательный результат. При бактериологическом исследовании фекалий подтвержден эубиоз. Инфицирование мочевых путей синегнойной палочкой явилось следствием внутрибольничного инфицирования. Применение синегнойного фага привело к санации мочевых путей. Example 2. Boy O. 6 years old. At the age of 5 years, he was operated on for stenosis of the ureteric space of the ureter. The postoperative period was complicated by Pseudomonas urinary tract infection. In search of a source of infection of the urinary tract, feces were examined using the proposed method. Received a negative result. Bacteriological examination of feces confirmed eubiosis. Urinary tract infection with Pseudomonas aeruginosa was the result of nosocomial infection. The use of pseudomonas phage led to urinary tract sanitation.
Таким образом, проведенные микробиологические исследования и клинические испытания показали, что предлагаемый способ обладает следующими достоинствами: прост в испытании, доступный, неинвазивный, не требует специальных средств и оборудования, по сравнению с прототипом повышает точность диагностики вдвое, на одни сутки сокращает сроки исследования. Возможность проведения повторных, даже ежедневных анализов также является преимуществом способа. Thus, the microbiological studies and clinical trials showed that the proposed method has the following advantages: easy to test, affordable, non-invasive, does not require special tools and equipment, compared with the prototype increases the accuracy of diagnosis by half, reduces the study time by one day. The ability to conduct repeated, even daily analyzes is also an advantage of the method.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU93034438A RU2088938C1 (en) | 1993-07-01 | 1993-07-01 | Method for diagnosing intestinal dysbiosis and intestinal infection cases |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU93034438A RU2088938C1 (en) | 1993-07-01 | 1993-07-01 | Method for diagnosing intestinal dysbiosis and intestinal infection cases |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU93034438A RU93034438A (en) | 1997-01-27 |
| RU2088938C1 true RU2088938C1 (en) | 1997-08-27 |
Family
ID=20144428
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU93034438A RU2088938C1 (en) | 1993-07-01 | 1993-07-01 | Method for diagnosing intestinal dysbiosis and intestinal infection cases |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2088938C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2459209C1 (en) * | 2011-09-13 | 2012-08-20 | Зарема Римовна Хисматуллина | Method for prediction of acne severity level in patients with intestinal dysbiosis |
| RU2619834C2 (en) * | 2015-10-28 | 2017-05-18 | Общество с ограниченной ответственностью "Независимая лаборатория ИНВИТРО" (ООО "ИНВИТРО") | Method research on feces dysbacteriosis of the intestine |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2664623C1 (en) * | 2017-05-04 | 2018-08-21 | Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА) | Method for predicting progression of colonic dysbiosis in the postoperative period |
-
1993
- 1993-07-01 RU RU93034438A patent/RU2088938C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Дорофейчук В.Г., Паничев А.В. Ключевые тесты для определения кишечного дисбактериоза. Пристендовый листок ВДНХ СССР. - М.; 1991. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2459209C1 (en) * | 2011-09-13 | 2012-08-20 | Зарема Римовна Хисматуллина | Method for prediction of acne severity level in patients with intestinal dysbiosis |
| RU2619834C2 (en) * | 2015-10-28 | 2017-05-18 | Общество с ограниченной ответственностью "Независимая лаборатория ИНВИТРО" (ООО "ИНВИТРО") | Method research on feces dysbacteriosis of the intestine |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Trepeta et al. | Methylumbelliferyl-beta-D-glucuronide-based medium for rapid isolation and identification of Escherichia coli | |
| Baron et al. | Bilophila wadsworthia isolates from clinical specimens | |
| CN110129406A (en) | A kind of pseudomonas aeruginosa chromogenic culture medium and the method quickly detected using it | |
| Nakalema et al. | Prevalence patterns of bacterial urinary tract infections among febrile children under-five years of age at Kampala International University Teaching Hospital | |
| Faine et al. | Rapid microbiological assay of antibiotic in blood and other body fluids | |
| Motse et al. | Etiologic profile and sensitivity pattern of germs responsible for urinary tract infection among under-five children in Douala, Cameroon: a Hospital-Based Study | |
| RU2088938C1 (en) | Method for diagnosing intestinal dysbiosis and intestinal infection cases | |
| Lin et al. | Asymptomatic bacteriuria among the institutionalized elderly | |
| Al-Momani | Microbiological study of urinary tract infection in children at Princess Haya Hospital in south of Jordan | |
| Mårdh et al. | Mycoplasma in urine collected by suprapubic aspiration | |
| Nakalema et al. | Susceptibility patterns of bacterial urinary tract infections among febrile children under-five years of age at Kampala International University Teaching Hospital | |
| RU2410031C1 (en) | Method of controlling effectiveness of correcting intestinal microbiocenosis disturbances | |
| Al-Rammahi et al. | Bacteriological study of Enterococcus bacteria isolated from different diseases in the female cows | |
| Samuel et al. | ANTIBIOTIC RESISTANCE PATTERN OF BACTERIAL ISOLATES ASSOCIATED WITH ASYMPTOMATIC URINARY TRACT INFECTIONS IN WUKARI METROPOLIS, TARABA STATE, NIGERIA. | |
| RU2818369C1 (en) | Method for assessing lactobacillus viability preservation under effect of various antiseptic concentrations | |
| RU2194281C1 (en) | Method for early prediction of chronic disease flow in children after acute pyelonephritis | |
| Kolo et al. | Prevalence of UTI among pregnant women in Gashua, Nigeria | |
| Bingen et al. | Technical aspects of the quantitative and differential analysis of the microbial intestinal ecosystem | |
| RU2261903C1 (en) | NUTRIENT MEDIUM FOR DETECTION OF Mycoplasma hominis AND METHOD FOR DIAGNOSIS OF UROGENITAL MYCOPLASMOSIS | |
| Puthucheary et al. | Infections with Achromobacter xylosoxidans | |
| RU2429477C2 (en) | Diagnostic techniques for various forms of chronic tonsillitis | |
| Omar | Prevalence and Gender Related Etiology of Asymptomatic Bacteriuria in Medical Student of the Libyan International Medical University | |
| RU2154105C1 (en) | Method of quantitative estimation of bifidobacteria content in mixed cultures of microorganisms | |
| RU2235324C1 (en) | Method for assay of caseinolytic activity of microorganisms in express-diagnosis of intestine dysbacteriosis | |
| RU2103368C1 (en) | Nutrient medium for isolation and culturing meningococci (meningoagar) |