RU2051963C1 - Strain of bacterium brucella ovis used for preparing r-brucellosis diagnostica - Google Patents
Strain of bacterium brucella ovis used for preparing r-brucellosis diagnostica Download PDFInfo
- Publication number
- RU2051963C1 RU2051963C1 SU5057381A RU2051963C1 RU 2051963 C1 RU2051963 C1 RU 2051963C1 SU 5057381 A SU5057381 A SU 5057381A RU 2051963 C1 RU2051963 C1 RU 2051963C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- brucellosis
- antibodies
- brucella ovis
- preparing
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к микробиологии и может использоваться как штамм-продуцент специфических бруцеллезных R-антигенов, необходимых для получения кроличьей диагностической сыворотки к бруцеллам в R-форме, а также как антиген для конструирования R-эритроцитарного диагностикума. Известен референтный штамм B. ovis 63/290, обладающий характерными для данного рода культурально-морфологическими и биохимическими свойствами [1]
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту является штамм B.ovis И-61, используемый как антиген для конструирования R-эритроцитарного диагностикума [2, 3]
Недостатком вышеназванных штаммов является содержание в них клеток в S-форме, что не позволяет использовать их для получения R-специфического антигена.The invention relates to microbiology and can be used as a strain producing specific brucellosis R-antigens necessary for obtaining rabbit diagnostic serum for brucella in the R-form, as well as an antigen for constructing an R-erythrocyte diagnosticum. Known reference strain B. ovis 63/290, having characteristic for this kind of cultural-morphological and biochemical properties [1]
The closest in technical essence and the achieved positive effect is the strain B.ovis I-61, used as an antigen for the construction of R-erythrocyte diagnosticum [2, 3]
The disadvantage of the above strains is the content of cells in them in the S-form, which does not allow them to be used to obtain R-specific antigen.
Целью изобретения является изыскание штамма, находящегося в стойкой R-форме и продуцирующего специфический R-бруцеллезный антиген. The aim of the invention is to find a strain that is in a stable R-form and producing a specific R-brucellosis antigen.
Штамм Brucella ovis И-107 выделен из семенников барана, депонирован в коллекции живых культур Научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН под N 792 и характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиолого-биохимическими признаками. Strain Brucella ovis I-107 isolated from ram testes, deposited in a collection of living cultures of the Research Institute of Epidemiology and Microbiology. N.F. Gamalei RAMS under N 792 and is characterized by the following cultural-morphological and physiological-biochemical characteristics.
Культурально-морфологические признаки. Мелкие полиморфные коккобациллы размером 0,4 х 0,8-0,4-2,2 мкм с выраженным полиморфизмом. Спор и капсул не образуют. Неподвижные. Грамотрицательные. На бульоне Мартена рН 6,8 при 37оС через 48 ч образуется плотный сероватый осадок с просветлением самой жидкости. На агаре Мартена (рН 6,8) с добавлением 1% глюкозы и 1,5% глицерина и 10-15% бычьей или лошадиной сыворотки образуют выпуклые колонии правильной округлой формы с ровными краями, гладкой поверхностью, влажные, маслянистые, белесоваты при падающем и янтарно-желтые в проходящем свете диаметром 2-3 мм.Cultural and morphological characters. Small polymorphic coccobacilli 0.4 x 0.8-0.4-2.2 microns in size with pronounced polymorphism. Spore and capsules do not form. Motionless. Gram-negative. Martin broth pH 6.8 at 37 ° C in 48 hours, a dense gray precipitate Coated with the liquid itself. On Marten’s agar (pH 6.8), with the addition of 1% glucose and 1.5% glycerol and 10-15% bovine or horse serum, they form convex colonies of regular round shape with smooth edges, a smooth surface, moist, oily, whitish when falling and amber yellow in transmitted light with a diameter of 2-3 mm.
Физиолого-биохимические признаки. Анаэроб растет в присутствии повышенного содержания СО2. Температурный диапазон роста 20-40оС. Оптимальная температура роста 37оС. Оптимум Ph 6,6-7,4.Physiological and biochemical characteristics. Anaerobic grows in the presence of a high content of CO 2 . Temperature growth range of 20-40 ° C Optimum growth temperature 37 ° C Optimum Ph 6,6-7,4.
Штамм не выделяет сероводород, не лизируется бактериофагом Тб, растет на средах с тионином в разведениях краски 1 50.000, 1 100.000. На питательных средах с добавлением основного фуксина, сафранина, метилвиолета рост бруцелл отсутствует. Уреазной и бактериоциногенной активностью не обладает. Штамм инагглютинабельный и инагглютиногенный, так как реакции агглютинации с поливалентной бруцеллезной и моноспецифическими сыворотками (антиабортус, антимелитензис) отрицательные, а заражение этим штаммом подопытных лабораторных животных не вызывает у них образование бруцеллезных S-антител. The strain does not emit hydrogen sulfide, it is not lysed by the TB bacteriophage, it grows on media with thionine in dilutions of 1 50.000, 1 100.000 paint. In nutrient media supplemented with basic fuchsin, safranin, methyl violet, brucella growth is absent. Urease and bacteriocinogenic activity does not possess. The strain is inagglutinable and inagglutinogenic, since agglutination reactions with polyvalent brucellosis and monospecific sera (antiabortus, antimelitensis) are negative, and infection of experimental laboratory animals with this strain does not cause them to form brucellosis S antibodies.
Вирулентность штамма низкая: введение морским свинкам штамма в дозе 32 х 109 микробов не вызывает генерализованной формы инфекции, т.е. установить МИД невозможно. ИИ равен 30,1% а ИД50 соответствует 3,1 х 109 микробам. Хранение штамма осуществляют в лиофильном состоянии в ампулах. После лиофилизации все свойства штамма сохраняются.The virulence of the strain is low: the introduction of a strain of 32 x 10 9 microbes to guinea pigs does not cause a generalized form of infection, i.e. it is impossible to establish a Foreign Ministry. AI is 30.1% and ID 50 is 3.1 x 10 9 germs. Storage of the strain is carried out in a lyophilic state in ampoules. After lyophilization, all the properties of the strain are preserved.
Антигенные свойства. При иммунизации кроликов вызывает образование специфических R-антител. Antigenic properties. Immunization of rabbits causes the formation of specific R antibodies.
Штамм Brucella ovis И-107 отличается от штамма прототипа B. ovis 63/290 отсутствием в популяции клеток в S-форме, а также устойчивыми биологическими свойствами. The strain Brucella ovis I-107 differs from the strain of the prototype B. ovis 63/290 by the absence of S-form cells in the population, as well as by its stable biological properties.
Сущность изобретения поясняется следующим конкретным примером использования штамма B. ovis И-107. The invention is illustrated by the following specific example of the use of strain B. ovis I-107.
П р и м е р. Бактерии смывают 0,9%-ным раствором хлорида натрия и однократно отмывают этим же раствором. Микробную массу инактивируют трехкратным объемом охлажденного до 4оС ацетона в течение 6 сут. со сменой ацетона через 48 ч и контролируют специфическую стерильность.PRI me R. Bacteria are washed off with a 0.9% sodium chloride solution and washed once with the same solution. Inactivate microbial mass cooled to a threefold volume of 4 ° C acetone for 6 days. with a change of acetone after 48 hours and control specific sterility.
При изучении отдельных антигенных комплексов наиболее перспективным для конструирования диагностических препаратов оказались водно-солевые фракции целых клеток штамма B. ovis И-107 [3]
Получение водно-солевых экстрактов. Водно-солевые АГ получают экстрагированием инактивированных клеток штамма B. ovis И-107 теплым 10%-ным раствором хлорида натрия в течение 4 ч при 37оС, непрерывно встряхивая. Суспензию центрифугируют (6·103 ·q, 30 мин). Супернатант диализуют против дистиллированной воды, лиофилизируют и хранят при 4оС.When studying individual antigenic complexes, the most promising for the construction of diagnostic preparations turned out to be the water-salt fractions of whole cells of the B. ovis I-107 strain [3]
Obtaining water-salt extracts. Water-salt hypertensive obtained by extracting cells of the strain of inactivated B. ovis and warm-107 10% sodium chloride for 4 hours at 37 ° C, shaking continuously. The suspension is centrifuged (6 · 10 3 · q, 30 min). The supernatant was dialyzed against distilled water, lyophilized and stored at 4 ° C.
Таким образом, штамм может быть использован для получения растворимых антигенов методом водно-солевой экстракции, которые используются для получения кроличьих высокотитражных R-сывороток. Средний титр которых в ИФА 1 1638400±126300, в РИД 1 16±8,3. Также водно-солевой R-антиген применяется для создания R-бруцеллезного эритроцитарного диагностикума, диагностические титры которого колеблются от 1 800 до 1 3200. Thus, the strain can be used to obtain soluble antigens by the method of water-salt extraction, which are used to obtain rabbit high-volume R-serums. The average titer of which in ELISA is 1 1638400 ± 126300, in RID 1 16 ± 8.3. Also, the water-salt R-antigen is used to create an R-brucellosis erythrocyte diagnosticum, the diagnostic titers of which range from 1 800 to 1 3200.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5057381 RU2051963C1 (en) | 1992-07-31 | 1992-07-31 | Strain of bacterium brucella ovis used for preparing r-brucellosis diagnostica |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5057381 RU2051963C1 (en) | 1992-07-31 | 1992-07-31 | Strain of bacterium brucella ovis used for preparing r-brucellosis diagnostica |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2051963C1 true RU2051963C1 (en) | 1996-01-10 |
Family
ID=21610924
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU5057381 RU2051963C1 (en) | 1992-07-31 | 1992-07-31 | Strain of bacterium brucella ovis used for preparing r-brucellosis diagnostica |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2051963C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2491553C2 (en) * | 2011-10-03 | 2013-08-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) | Method of production of r-brucellar erythrocytic antigen for indirect hemagglutination test (iht) |
-
1992
- 1992-07-31 RU SU5057381 patent/RU2051963C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 1. Joint FAO/WHO Expert Committee on Brucellosis. Sixth Report. World Health Organisation. Technical Report Series, Geneva, 1986.-133p. 2. Методические рекомендации по приготовлению и применению овисного антигенного эритроцитарного диагностикума. С.П.Меринов, В.А.Широков, Л.П.Репина и др. 3. Методические рекомендации по получению высокоактивных гипериммунных противобруцеллезных сывороток. Е.П.Голубинский, Т.Ю.Загоскина, Л.П.Репина и др. Иркутск: 1988, с.9. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2491553C2 (en) * | 2011-10-03 | 2013-08-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) | Method of production of r-brucellar erythrocytic antigen for indirect hemagglutination test (iht) |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Edward | The pleuropneumonia group of organisms: a review, together with some new observations | |
| US6436652B1 (en) | Method of detecting a pathogen using a virus | |
| Namioka | Chapter X Pasteurella multocida---Biochemical Characteristics and Serotypes | |
| RU2051963C1 (en) | Strain of bacterium brucella ovis used for preparing r-brucellosis diagnostica | |
| Kurtti et al. | Growth of a microsporidian parasite in cultured cells of tent caterpillars (Malacosoma) | |
| JPS6384484A (en) | Special microplasma membrane antigen and antibody, and clinical application thereof | |
| RU2521651C1 (en) | STRAINS OF BACTERIA Moraxella bovoculi "SH-CH6 N-DEP" USED TO MANUFACTURE DIAGNOSTIC PREPARATIONS AND VACCINES AGAINST INFECTIOUS KERATOCONJUNCTIVITIS OF CATTLE | |
| RU2005781C1 (en) | Strain of bacterium brucella melitensis biovara i used for preparing of polyvalent hyperimmune serum to brucellas | |
| RU2085584C1 (en) | Method of preparing recombinant tularemia microorganisms - producers of virulence factors, recombinant strain of francisella tularensis subspecies, holarctica r5s - producer of virulence factor francisella tularensis nearctica shu, recombinant strain of francisella tularensis holarctica rn4 - a producer of virulence factor pseudomonas tularensis subspecies holarctica r1a - a producer of virulence factor francisella tularensis nearctica b 399 a cole | |
| RU2145353C1 (en) | Strain of bacterium moraxella bovis "g97-vnivi" used for preparing diagnostica and vaccines against infectious keratoconjunctivitis in cattle | |
| SU1177344A1 (en) | Lersinia psendotuberculosis shojbulakskij 82 strain used for producing diagnostic preparations | |
| RU2670054C1 (en) | BIFIDOBACTERIUM BIFIDUM ICIS-310 BACTERIUM STRAIN - PRODUCER OF INHIBITOR OF PRO-INFLAMMATORY CYTOKINE INF-γ | |
| SU1701743A1 (en) | Strain brucella abortus used for production of vaccine against brucellosis of cattle | |
| RU1092945C (en) | Strain pseudomonas acruginosa sepotype 5 n 77 used for obtaining pseudomonous antigen | |
| SU1391091A1 (en) | Strain of vibrio cholerae vibrion as producer of hemolyzine | |
| SU1669980A1 (en) | Strain of bacteria vibrio cholerae cholerae - a producer of dermonecrotic factor | |
| SU638337A1 (en) | P-9504 serotype 5 vibrio phosphoresceus strain as producer of standard agglutinating serum | |
| RU2130068C1 (en) | Strain brucella abortus used for preparing diagnostic and prophylactic biopreparations against brucellosis in animals | |
| RU2149183C1 (en) | Strain of bacterium brucella abortus used for preparing diagnostic and prophylactic biopreparations against brucellosis in animals | |
| SU1602865A1 (en) | Strain of vibrio cholerae eltor bacteria used as test culture for identification of hemolysine | |
| RU2133272C1 (en) | Strain of bacterium lactobacillus fermentum 90-ts-4(21) used for preparing eubiotic preparation for using in gynecological practice | |
| Bradner | A study of the physiology of bacteria which support the growth of Endamoeba histolytica in vitro | |
| RU2261109C1 (en) | Strain of bacterium streptococcus agalactiae 71 for preparing vaccine against streptococcosis in fur animal | |
| RU2080377C1 (en) | Strain of bacterium mycobacterium avium used for leprosy diagnosis | |
| UA135161U (en) | Epizootic strains SA-18 PASTEURELLA MULTOCIDA SEROVARIANTA A BACTERIAL PRODUCTION TSILNOKLITYNNOHO inactivated antigen in the composition of the inactivated adjuvanted vaccine against pasteurellosis, mammals and poultry induced PASTEURELLA MULTOCIDA A SEROVARIANTOM |