RU2025717C1

RU2025717C1 - Method for quantitative determination of thymol in starting medicinal plant material

Info

Publication number: RU2025717C1
Authority: RU
Inventors: Александр Владиленович Мазулин; Владимир Васильевич Петренко; Надежда Александровна Калошина
Original assignee: Александр Владиленович Мазулин
Priority date: 1991-01-31
Filing date: 1991-01-31
Publication date: 1994-12-30

Abstract

FIELD: quantitative determination of thymol in staring medicinal plant material. SUBSTANCE: method for determination of thymol in starting medicinal plant material includes crushing of plant material and depleting extraction with 96% ethyl alcohol. Added to extract is 10% solution of lead acetate for precipitation of all substances hindering spectrophotometric determination of thymol. Precipitates are filtered off, and filtrate is scanned photometrically at wave length of 272 nm. Content of thymol is calculated with the aid of preliminarily constructed calibrating graph, or with the use of known formulas. EFFECT: higher efficiency. 1 tbl

Description

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения тимола в лекарственном растительном сырье, применяемом в медицинской практике, за счет содержания тимола в качестве противоглистного, антимикробного, противовоспалительного, отхаркивающего, дезинфицирующего и антисептического средств. The invention relates to analytical chemistry, and in particular to methods for the quantitative determination of thymol in medicinal plant materials used in medical practice, due to the content of thymol as an anthelmintic, antimicrobial, anti-inflammatory, expectorant, disinfectant and antiseptic.

Известны способы количественного определения тимола в эфирных маслах, выделенных из растительного материала методом перегонки с водяным паром [1-3]. Known methods for the quantitative determination of thymol in essential oils isolated from plant material by steam distillation [1-3].

Недостатком указанных способов являются невозможность определения тимола непосредственно в растительном сырье, минуя определенную стадию выделения эфирного масла, которое самостоятельно в медицине не применяется, громоздкость и длительность экспериментов, приводящая зачастую к случайным ошибкам (негерметичность аппаратуры, нарушение температурного режима экстракции эфирного масла и др.), необходимость затрат времени на приготовление аппаратуры, реагентов и титрованных растворов, нестабильность окрашенных продуктов реакций, недостаточная чувствительность и селективность. The disadvantage of these methods is the inability to determine thymol directly in plant materials, bypassing a certain stage of isolation of essential oil, which is not independently used in medicine, the cumbersomeness and duration of experiments, often leading to random errors (leaks in equipment, violation of the temperature regime of extraction of essential oil, etc.) , the need for time-consuming preparation of equipment, reagents and titrated solutions, the instability of colored reaction products, lack of accurate sensitivity and selectivity.

Наиболее близким к настоящему изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ определения тимола в растительном сырье [3] . Согласно этому способу измельчают сырье, встряхивают его с подкисленной водой, отгоняют тимол, собирают отгон в колбу с водным раствором гидроокиси натрия, определяют тимол в отгоне по фотометричной реакции с цветореагентом. Closest to the present invention in technical essence and the achieved result is a method for determining thymol in plant materials [3]. According to this method, the raw material is crushed, it is shaken with acidified water, thymol is distilled off, the distillation is collected in a flask with an aqueous solution of sodium hydroxide, thymol is determined in the distillation by photometric reaction with a color reagent.

Цель изобретения - повышение экспрессности, точности упрощение способа, позволяющее проводить определение тимола непосредственно в лекарственном растительном сырье - траве тимиана обыкновенного, тимиана ползучего (чабреца), душицы, плодах ажгона и др. The purpose of the invention is to increase the expressivity, accuracy, simplification of the method, allowing the determination of thymol directly in the medicinal plant material - grass of thyme ordinary, creeping thyme (thyme), oregano, azhgon fruits, etc.

Цель достигается способом определения тимола в лекарственном растительном сырье, заключающемся в экстракции 96%-ным этиловым спиртом, осаждении сопутствующих веществ 10%-ным раствором ацетата свинца, фильтровании и спектрофотометрическом измерении оптической плотности раствора при длине волны 272 нм. The goal is achieved by the method of determining thymol in medicinal plant materials, which consists in extraction with 96% ethyl alcohol, precipitation of the accompanying substances with a 10% solution of lead acetate, filtering and spectrophotometric measurement of the optical density of the solution at a wavelength of 272 nm.

Для растворов тимола в 96%-ном этиловом спирте выполняется закон Бугера-Ламберта-Бера в пределах 0,4-25 мкг/мл. В качестве стандарта для количественного определения тимола в лекарственном растительном сырье использовались спиртовые растворы тимола. For solutions of thymol in 96% ethanol, the Bouguer-Lambert-Beer law is valid in the range of 0.4-25 μg / ml. Alcohol solutions of thymol were used as a standard for the quantitative determination of thymol in medicinal plant materials.

При проведении истощающей экстракции 96%-ным этиловым спиртом в раствор переходят: тимол, карвакрол, дубильные вещества, нефенольная фракция, содержащая в основном: n-цимол, терпинен, терпинол, борнеол, сесквитерпен, цингиберен, урсоловая и олеоноловая кислоты, флавоноиды. When conducting exhaustive extraction with 96% ethyl alcohol, the solution passes: thymol, carvacrol, tannins, non-phenolic fraction containing mainly: n-cimol, terpinene, terpinol, borneol, sesquiterpen, zingiberin, ursolic and oleonolic acids, flavonoids.

Полное отсутствие тимола в лекарственном растительном сырье контролировали по качественным реакциям и хроматографическому анализу в тонком слое сорбента. The complete absence of thymol in the medicinal plant material was controlled by qualitative reactions and chromatographic analysis in a thin layer of sorbent.

Все сопутствующие компоненты - терпеноиды, флавоноиды и дубильные вещества, мешающие спектрофотометрическому определению, осаждались путем добавления раствора ацетата свинца. Отсутствие их контролировали хроматографическим анализом в тонком слое сорбента. All associated components — terpenoids, flavonoids, and tannins that interfere with spectrophotometric determination — were precipitated by the addition of a solution of lead acetate. Their absence was controlled by chromatographic analysis in a thin layer of sorbent.

П р и м е р 1. Приготовление РСО тимола. PRI me R 1. Preparation of RMS thymol.

Около 0,01 г (точная навеска) тимола, предварительно высушенного при температуре от 40 до 60^оС в течение 1 ч, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл 96%-ного спирта, 4 мл 10%-ного раствора ацетата свинца и перемешивают до растворения. Объем раствора доводят тем же растворителем до метки (раствор А). Срок годности раствора А - трое суток. 10 мл раствора А переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора 96%-ным спиртом до метки и перемешивают (раствор Б). Срок годности раствора Б - двое суток.About 0.01 grams (accurately weighed) of thymol, predried at a temperature of from 40 to ⁶⁰ ° C for 1 hour, placed in a volumetric flask of 100 ml, 50 ml of 96% alcohol, 4 ml of 10% solution lead acetate and mix until dissolved. The volume of the solution was adjusted to the mark with the same solvent (solution A). The shelf life of solution A is three days. 10 ml of solution A is transferred into a volumetric flask with a capacity of 100 ml, the volume of the solution is adjusted with 96% alcohol to the mark and stirred (solution B). The shelf life of solution B is two days.

П р и м е р 2. Определение тимола в лекарственном сырье. PRI me R 2. Determination of thymol in medicinal raw materials.

Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито по ТОСТ 214-83 с отверстиями диаметром 1 мм. Около 1,5 г (точная навеска) порошка помещают в колбу вместимостью 100 мл и экстрагируют 96% -ным спиртом три раза по 30 мл при нагревании на водяной бане при 70-80^оС по 6 мин. Горячее извлечение каждый раз фильтруют в колбу вместимостью 100 мл, избегая попадания сырья на фильтр. Фильтр промывают 10 мл 96% -ного спирта, прибавляют 4 мл 10%-ного раствора ацетата свинца, нагревают на электроплитке в течение 3 мин до коагуляции, охлаждают, фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят 96%-ным спиртом до метки. 10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем 96%-ным спиртом до метки. Измеряют оптическую плотность раствора при 272 нм на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используется 96%-ный спирт.An analytical sample of raw materials is crushed to the size of the particles passing through a sieve according to TOST 214-83 with holes with a diameter of 1 mm. About 1.5 g (accurately weighed) of powder was placed in a flask of 100 ml, and extracted with 96% ethyl alcohol three times with 30 ml under heating in a water bath at 70-80 ^{° C} for 6 min. The hot extract is each time filtered into a 100 ml flask, avoiding the ingress of raw materials onto the filter. The filter is washed with 10 ml of 96% alcohol, 4 ml of a 10% solution of lead acetate are added, heated on an electric stove for 3 minutes before coagulation, cooled, filtered into a 100 ml volumetric flask, adjusted to the mark with 96% alcohol. 10 ml of the resulting solution was placed in a volumetric flask with a capacity of 50 ml and the volume was adjusted with 96% alcohol to the mark. The optical density of the solution was measured at 272 nm using a spectrophotometer in a cuvette with a layer thickness of 10 mm. As a comparison solution, 96% alcohol is used.

Расчет концентрации тимола в сырье проводят по формуле
X =

, где D₁ - оптическая плотность испытуемого раствора;
D_о - оптическая плотность рабочего стандартного образца (РСО) тимола;
m₁ - масса сырья, г;
m_o - (РСО) стандартного образца, масса стандартного образца тимола (РСО), г;
W - потеря в массе сырья при высушивании, %.The calculation of the concentration of thymol in raw materials is carried out according to the formula
X =

where D ₁ is the optical density of the test solution;
D _about - the optical density of the working standard sample (RSO) thymol;
m ₁ is the mass of raw materials, g;
m _o - (РСО) of a standard sample, mass of a standard sample of thymol (РСО), g;
W is the loss in mass of raw materials upon drying,%.

Результаты определения тимола в растительном сырье представлены в таблице. The results of the determination of thymol in plant materials are presented in the table.

Claims

METHOD FOR QUANTITATIVE DETERMINATION OF THYMOL IN MEDICINAL VEGETABLE RAW MATERIAL, which consists in grinding vegetable raw materials, extracting thymol from it and converting it into solution, measure the optical density of the thymol solution and calculate the thymol content, which is different in order to increase the expressivity simplification of the method, thymol is extracted by extraction with 96% ethyl alcohol, then a 10% solution of lead acetate is added to the extract, the precipitate is filtered off and the optical density of the obtained solution is measured ora at 272 nm.