RU2021358C1

RU2021358C1 - Strain bacteriophagum shigellosum showing activity against shigella boydii b15

Info

Publication number: RU2021358C1
Authority: RU
Inventors: А.Х. Рахимова; Т. Искандаров; Э.Г. Потиевский; Ш.Ш. Шавахабов
Original assignee: Потиевский Эмиль Григорьевич
Priority date: 1993-03-13
Filing date: 1993-03-13
Publication date: 1994-10-15

Abstract

FIELD: medicinal microbiology. SUBSTANCE: for identification of Boyd-15 pathogen specific bacteriphage which is stored in Collection of Uzbekistan Republic Ministry Public Health at number 19 is used. EFFECT: accelerated diagnosis time at typical and atypical forms of pathogen by 1 and 2-3 days, respectively.

Description

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к способам лабораторной диагностики шигеллезов (Бойд 15) и может быть использовано в научных и практических лабораториях, занимающихся индикацией и идентификацией возбудителей бактериальной дизентерии. The invention relates to medical microbiology, and in particular to methods of laboratory diagnosis of shigellosis (Boyd 15) and can be used in scientific and practical laboratories involved in the indication and identification of pathogens of bacterial dysentery.

Для идентификации шигелл известен способ, заключающийся в поэтапном выделении из исследуемого материала чистой культуры шигелл, изучении ее свойств и заключительной идентификации серологическим способом (реакция агглютинации). Окончательный результат становится возможным на 4-е сутки при типичных формах и на 6-7-е сутки при атипичных формах возбудителя (Методические указания по лабораторной диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями. М., Минздрав СССР, 1984). For the identification of Shigella, a method is known which consists in the phased isolation of the pure Shigella culture from the test material, the study of its properties and final identification by a serological method (agglutination reaction). The final result becomes possible on the 4th day with typical forms and on the 6-7th day with atypical forms of the pathogen (Guidelines for laboratory diagnosis of diseases caused by enterobacteria. M., USSR Ministry of Health, 1984).

Штамм Bacteriophagum shigellosum Б15 хранится в официальной коллекции-депозитарии Республики Узбекистан (Республиканская коллекция микроорганизмов) при Научно-исследовательском институте эпидемиологии, микробиологии и инфекционных заболеваний Республиканского научного центра по борьбе с инфекционными и паразитарными заболеваниями Минздрава Республики Узбекистан под N 19 и характеризуется следующими морфологическими признаками. The strain Bacteriophagum shigellosum B15 is stored in the official depository collection of the Republic of Uzbekistan (Republican collection of microorganisms) at the Research Institute of Epidemiology, Microbiology and Infectious Diseases of the Republican Scientific Center for the Control of Infectious and Parasitic Diseases of the Ministry of Health of the Republic of Uzbekistan under No. 19 and is characterized by the following morphological characteristics.

Относится к третьей морфологической группе. Размер головки 400± 110

, отростка - 220± 50

. Тип нуклеиновой кислоты - ДНК, молекулярный вес 6000 кдальтон.It belongs to the third morphological group. Head size 400 ± 110

, appendix - 220 ± 50

. The type of nucleic acid is DNA, and its molecular weight is 6000 kdaltons.

Питательный агар (по ФС 42-188 ВС-88). На газоне Shigella Boydii 15 величина негативных колоний 4,0 ± 0,5 мм в диаметре. Край колоний ровный, дно прозрачное. Nutrient agar (according to FS 42-188 BC-88). On the Shigella Boydii 15 lawn, the size of the negative colonies was 4.0 ± 0.5 mm in diameter. The edge of the colonies is even, the bottom is transparent.

Питательный бульон (по ФС 42-224 ВС-88). При посевной дозе 1 x 10⁷микробных клеток на 1 мл среды и множественности инфекции 1:10 вызывает просветление взвеси и накапливается n x 10⁸ корпускул на 1 мл среды.Nutrient broth (according to FS 42-224 BC-88). With a seeding dose of 1 x 10 ⁷ microbial cells per 1 ml of medium and a multiplicity of infection of 1:10, suspension is clarified and nx 10 ⁸ corpuscles per 1 ml of medium accumulate.

Одиночный цикл развития характеризуется продолжительностью минимального латентного периода равного 15 мин. Урожайность 122 корпускул на 1 инфицированную клетку. A single developmental cycle is characterized by a minimum latency period of 15 minutes. Productivity 122 corpuscles per 1 infected cell.

Серологические свойства. Константа скорости нейтрализации антифаговой сыворотки 382 мл в 1 мин. Serological properties. Antiphase serum neutralization rate constant 382 ml per 1 min.

Цель изобретения - получить штамм специфического бактериофага для идентификации бактерий Shigella Boydii Б 15, выделяющихся на территории Узбекистана и других регионов, т.е. фаг, обладающий строгой специфичностью для указанной группы шигелл и пригодный для их ускоренной лабораторной диагностики. The purpose of the invention is to obtain a strain of a specific bacteriophage for the identification of bacteria Shigella Boydii B 15, allocated in Uzbekistan and other regions, i.e. phage with strict specificity for the indicated group of shigella and suitable for their accelerated laboratory diagnosis.

Предлагаемый штамм Bacteriophagum shigellosum Б 15 новый и в патентной литературе не описан. The proposed strain of Bacteriophagum shigellosum B 15 is new and is not described in the patent literature.

П р и м е р. На плотную питательную среду (питательный агар) бактериологической петлей наносят полоску свежей (не более 1 сут) бульонной культуры или взвеси микробов в конденсационной жидкости столбика трехсахарного агара. На полоску культуры наносят пастеровской пипеткой или бактериологической петлей каплю бактериофага. Посев инкубируют в течение 18 ч при 37^оС.PRI me R. On a dense nutrient medium (nutrient agar), a strip of fresh (no more than 1 day) broth culture or suspension of microbes in the condensation liquid of a tri-sugar agar column is applied with a bacteriological loop. A drop of the bacteriophage is applied to the culture strip with a Pasteur pipette or bacteriological loop. Sowing incubated for 18 hours at 37 ° ^C.

В случае, если исследуемая культура является Shigella Boydii 15, на полоске в месте нанесения бактериофага наблюдают четкую зону специфического лизиса. Наличие лизиса является диагностическим признаком для идентификации культуры, который подтверждается серологическим путем (реакция агглютинации), после чего выдается ответ. If the test culture is Shigella Boydii 15, a clear area of specific lysis is observed on a strip at the site of application of the bacteriophage. The presence of a lysis is a diagnostic sign for identifying the culture, which is confirmed by a serological route (agglutination reaction), after which an answer is issued.

Применение диагностического бактериофага Bacteriophagum shigellosum Б 15 позволяет сократить сроки лабораторной диагностики минимум на 1 сут за счет сокращения процесса диагностики (частичное сокращение этапа биохимического исследования - "пестрый ряд"). Достигается также экономический эффект за счет целенаправленного использования дорогостоящих агглютинирующих сывороток. The use of the diagnostic bacteriophage Bacteriophagum shigellosum B 15 allows reducing the time of laboratory diagnostics by at least 1 day due to the reduction of the diagnostic process (a partial reduction in the stage of biochemical research is “motley row”). An economic effect is also achieved through the targeted use of expensive agglutinating serums.

Claims

The strain Bacteriophagum shigellosum B15 NIIEMIZ RSCBIPZ of the Ministry of Health of the Republic of Uzbekistan N 19, active against Shigella Boydii B15.