RU2021356C1

RU2021356C1 - Strain bacteriophagum shigellosum 10 showing activity against shigella dysenteriae 10

Info

Publication number: RU2021356C1
Authority: RU
Inventors: А.Х. Рахимова; Т. Искандаров; Э.Г. Потиевский; Ш.Ш. Шавахабов
Original assignee: Искандаров Тулкин
Priority date: 1992-01-08
Filing date: 1992-01-08
Publication date: 1994-10-15

Abstract

FIELD: medicinal microbiology. SUBSTANCE: for identification of Dysentery-10 pathogen specific bacteriophage Bacteriophagum shigellosum-10 is used. EFFECT: diminished period of diagnosis at typical and atypical forms of pathogen by 1 and 2-3 days, respectively.

Description

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к способам лабораторной диагностики шигеллезов (дизентерия 10), и может быть использовано в научно- и практических лабораториях, занимающихся индикацией и идентификацией возбудителей бактериальной дизентерии. The invention relates to medical microbiology, and in particular to methods for laboratory diagnosis of shigellosis (dysentery 10), and can be used in scientific and practical laboratories involved in the indication and identification of pathogens of bacterial dysentery.

Для идентификации шигелл в исследуемом материале известен способ, заключающийся в поэтапном выделении из исследуемого материала чистой культуры шигелл, изучении ее свойств и заключительной идентификацией серологическим способом (реакция агглютинации). Окончательный результат становится возможным на 4-е сутки при типичных формах и на 6-7-е сутки при атипичных формах возбудителя (Методические указания по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями. Москва, Минздрав СССР, 1984). To identify Shigella in the test material, a method is known which consists in the phased isolation of the pure Shigella culture from the test material, the study of its properties and final identification by a serological method (agglutination reaction). The final result becomes possible on the 4th day with typical forms and on the 6-7th day with atypical forms of the pathogen (Guidelines for microbiological diagnosis of diseases caused by enterobacteria. Moscow, USSR Ministry of Health, 1984).

Штамм Bacteriophagum shigellosum 10 хранится в официальной коллекции-депозитарии Республики Узбекистан (Республиканская коллекция микроорганизмов) при Научно-исследовательском институте эпидемиологии, микробиологии и инфекционных заболеваний Республиканского научного центра по борьбе с инфекционными и паразитарными заболеваниями Минздрава Республики Узбекистан под N 15 и характеризуется следующими морфологическими признаками. The strain Bacteriophagum shigellosum 10 is stored in the official depository collection of the Republic of Uzbekistan (Republican collection of microorganisms) at the Research Institute of Epidemiology, Microbiology and Infectious Diseases of the Republican Scientific Center for the Control of Infectious and Parasitic Diseases of the Ministry of Health of the Republic of Uzbekistan under No. 15 and is characterized by the following morphological characteristics.

Относится к третьей морфологической группе. Размер головки 53± 12

, отростка - 18± 5

. Тип нуклеиновой кислоты - ДНК, молекулярный вес 6000 кдальтон.It belongs to the third morphological group. Head size 53 ± 12

, appendix - 18 ± 5

. The type of nucleic acid is DNA, and its molecular weight is 6000 kdaltons.

Питательный агар (по ФС 42-188 ВС-88). На газоне Shigella dysenteriae 10 величина негативных колоний 5,0 ± 0,5 мм в диаметре. Край колоний ровный, дно прозрачное. Nutrient agar (according to FS 42-188 BC-88). On the Shigella dysenteriae 10 lawn, the size of negative colonies is 5.0 ± 0.5 mm in diameter. The edge of the colonies is even, the bottom is transparent.

Питательный бульон (по ФС 42-224 ВС-88). При посевной дозе 1 x 10⁷микробных клеток на 1 мл среды и множественности инфекции 1:10 вызывает просветление взвеси и накапливается n x 10⁸ корпускул на 1 мл среды.Nutrient broth (according to FS 42-224 BC-88). With a seeding dose of 1 x 10 ⁷ microbial cells per 1 ml of medium and a multiplicity of infection of 1:10, suspension is clarified and nx 10 ⁸ corpuscles per 1 ml of medium accumulate.

Одиночный цикл развития характеризуется продолжительностью минимального латентного периода, равного 16 мин. Урожайность 121 корпускула на 1 инфицированную клетку. A single development cycle is characterized by a minimum latency period of 16 minutes. The yield of 121 corpuscles per 1 infected cell.

Серологические свойства. Константа скорости нейтрализации антифаговой сыворотки - 64 мл в 1 мин. Serological properties. Antiphase serum neutralization rate constant - 64 ml per 1 min.

Цель изобретения - получить штамм специфического бактериофага для идентификации бактерий Shigella dysenteriae 10, выделяющихся на территории Узбекистана и других регионов Союза, т.е. фаг, обладающий строгой специфичностью для указанной группы шигелл и пригодный для их ускоренной лабораторной диагностики. The purpose of the invention is to obtain a strain of a specific bacteriophage for the identification of Shigella dysenteriae 10 bacteria that are released on the territory of Uzbekistan and other regions of the Union, i.e. phage with strict specificity for the indicated group of shigella and suitable for their accelerated laboratory diagnosis.

Предлагаемый штамм Bacteriophagum shigellosum 10 новый и в патентной литературе не описан. The proposed strain of Bacteriophagum shigellosum 10 is new and is not described in the patent literature.

П р и м е р. На плотную питательную среду (питательный агар) бактериологической петлей наносят полоску свежей (не более 1 суток) бульонной культуры или взвеси микробов в конденсационной жидкости столбика трехсахарного агара. На полоску культуры наносят пастеровской пипеткой или бактериологической петлей каплю бактериофага. Посев инкубируют в течение 18 ч при 37^оС.PRI me R. On a dense nutrient medium (nutrient agar), a strip of fresh (no more than 1 day) broth culture or suspension of microbes in the condensation liquid of a tri-sugar agar column is applied with a bacteriological loop. A drop of the bacteriophage is applied to the culture strip with a Pasteur pipette or bacteriological loop. Sowing incubated for 18 hours at 37 ° ^C.

В случае, если исследуемая культура является Shigella dysenteriae 10 на полоске в месте нанесения бактериофага наблюдают четкую зону специфического лизиса. Наличие лизиса является диагностическим признаком для идентификации культуры, который подтверждается серологическим путем (реакция агглютинации), после чего выдается ответ. If the test culture is Shigella dysenteriae 10, a clear zone of specific lysis is observed on a strip at the site of application of the bacteriophage. The presence of a lysis is a diagnostic sign for identifying the culture, which is confirmed by a serological route (agglutination reaction), after which an answer is issued.

Применение диагностического фага Bacteriophagum shigellosum 10 позволяет сократить сроки лабораторной диагностики минимум на 1 сутки за счет сокращения процесса диагностики (этап биохимического исследования - "пестрый ряд"). Достигается также экономический эффект за счет целенаправленного использования дорогостоящих агглютинирующих сывороток. The use of the diagnostic phage Bacteriophagum shigellosum 10 can reduce the time of laboratory diagnostics by at least 1 day due to the reduction of the diagnostic process (stage of biochemical research - "motley row"). An economic effect is also achieved through the targeted use of expensive agglutinating serums.

Claims

The strain Bacteriophagum shigellosum 10 NIIEMIZ RNTSIBIPZ N 15, active against Shigella dysenteriae 10.