RU2018113C1 - Method of novocainamide assay in the objects of biological origin - Google Patents

Method of novocainamide assay in the objects of biological origin Download PDF

Info

Publication number
RU2018113C1
RU2018113C1 SU4853999A RU2018113C1 RU 2018113 C1 RU2018113 C1 RU 2018113C1 SU 4853999 A SU4853999 A SU 4853999A RU 2018113 C1 RU2018113 C1 RU 2018113C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
solution
novocainamide
procainamide
volume
silica gel
Prior art date
Application number
Other languages
Russian (ru)
Inventor
А.С. Квач
Н.А. Вощинина
Original Assignee
Квач Александр Сергеевич
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Квач Александр Сергеевич filed Critical Квач Александр Сергеевич
Priority to SU4853999 priority Critical patent/RU2018113C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2018113C1 publication Critical patent/RU2018113C1/en

Links

Images

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

FIELD: analytical chemistry. SUBSTANCE: analyzed sample is treated with perchloric acid, pH is made up to 6-11, passed through chromatographic column with silica gel at the ratio of silica gel mass (g to sample volume in ml) (0.4-0.5):(5-6) at concentration of novocainamide 10-100 micro g in sample following by photometry of colored solution. Relative error is ± 3.8 %, time of analysis is 8 h. EFFECT: improved method of assay. 7 tbl

Description

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам определения новокаинамида в объектах биологического происхождения: печени, крови и моче при проведении химико-токсикологических, судебно-химических и клинических исследований. The invention relates to analytical chemistry, and in particular to methods for determining procainamide in objects of biological origin: liver, blood and urine during chemical-toxicological, forensic-chemical and clinical studies.

Известен способ определения новокаинамида в объектах биологического происхождения путем обработки анализируемой пробы водными растворами кислот и органическими растворителями с последующим фотоколориметрическим способом окрашенных растворов [1]. A known method for the determination of procainamide in biological objects by processing the analyzed samples with aqueous solutions of acids and organic solvents, followed by the photocolorimetric method of colored solutions [1].

Недостатком способа является малая точность, обусловленная мешающим влиянием балластных веществ. The disadvantage of this method is the low accuracy due to the interfering effect of ballast substances.

Наиболее близким к описываемому по технической сущности и достигаемым результатам является способ определения новокаинамида в объектах биологического происхождения путем обработки анализируемой пробы уксусной и трихлоруксусной кислотами и органическими растворителями, очисткой от балластных веществ электрофорезом при рН 9 с последующей десорбцией соляной кислотой и фотоколориметрированием окрашенных растворов [2ъ. The closest to the described by technical essence and the achieved results is a method for determining procainamide in biological objects by treating the analyzed sample with acetic and trichloroacetic acids and organic solvents, purification from ballast substances by electrophoresis at pH 9, followed by desorption with hydrochloric acid and photocolorimetry of colored solutions [2b.

Недостатком способа является малая точность и большая продолжительность определения - около 25 ч. The disadvantage of this method is the low accuracy and the long duration of the determination is about 25 hours

Целью изобретения является повышение точности способа и сокращение времени определения. The aim of the invention is to improve the accuracy of the method and reduce the time of determination.

Поставленная цель достигается описываемым способом определения новокаинамида в объектах биологического происхождения путем обработки анализируемой пробы 1 н.хлорной кислотой, очистке от балластных веществ на хроматографической колонке с силикагелем при рН 6-11 при соотношении массы силикагеля в граммах и объему крови в мл (0,4-0,5):(5-6) при содержании новокаинамида от 10 до 100 мкг с последующим фотоколориметрированием окрашенного раствора. This goal is achieved by the described method for determining novocainamide in biological objects by treating the analyzed sample with 1 N. chloric acid, purification from ballast substances on a chromatographic column with silica gel at pH 6-11 at a ratio of silica gel mass in grams and blood volume in ml (0.4 -0.5) :( 5-6) when the content of procainamide is from 10 to 100 μg, followed by photocolorimetry of the colored solution.

Отличительным признаком способа является последовательное осуществление всех приведенных выше стадий. A distinctive feature of the method is the consistent implementation of all the above stages.

Примеры осуществления способа
Построение калибровочного графика.
Examples of the method
Construction of a calibration graph.

В мерные колбы на 25 мл с помощью микропипетки вносят по 0,01; 0,02; 0,03...0,40 мл стандартного раствора новокаинамида с исходной концентрацией 100 мкг/мл, а затем во все колбы прибавляют 1 н. соляную кислоту до 1 мл. К растворам в мерных колбах прибавляют по 1 мл 0,1%-ного раствора нитрита натрия, по 1 мл 0,1%-ного раствора 3- α,γ -дикарбоксипропилроданина в 95%-ном этиловом спирте. Жидкость во всех колбах взбалтывают и объемы растворов в них доводят до метки боратной буферной смесью. Содержимое колб тщательно перемешивают и измеряют оптическую плотность окрашенных в красный цвет растворов с помощью фотоколориметра КФЕ-2 светофильтр λэфф = 490±10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50 мм. В качестве растворов сравнения используют смесь всех реактивов взятых в указанных количествах. рН растворов аэроданина должен находиться в интервале значений 10,7-12,1.0.01 ml in a 25 ml volumetric flask using a micropipette; 0.02; 0.03 ... 0.40 ml of a standard solution of novocainamide with an initial concentration of 100 μg / ml, and then 1 N was added to all flasks. hydrochloric acid up to 1 ml. 1 ml of a 0.1% solution of sodium nitrite and 1 ml of a 0.1% solution of 3-α, γ-dicarboxypropylrodanine in 95% ethanol are added to the solutions in volumetric flasks. The liquid in all the flasks is shaken and the volumes of the solutions in them are adjusted to the mark with a borate buffer mixture. The contents of the flasks are thoroughly mixed and the optical density of the solutions colored in red is measured using a KFE-2 photocolorimeter, λ eff = 490 ± 10 nm color filter in a cuvette with a working layer thickness of 50 mm. A mixture of all reagents taken in the indicated amounts is used as comparison solutions. The pH of aerodanine solutions should be in the range of 10.7-12.1.

Боратную буферную смесь получают смешиванием 0,1 н. раствора гидроксила натрия с боратным буферным раствором в соотношении 1:0,975. Боратный буферный раствор готовят путем смешивания 0,05 М раствора буры с 0,1 н. раствором гидроксида натрия в соотношении 1:1 (рН 11,02). The borate buffer mixture is obtained by mixing 0.1 n. sodium hydroxyl solution with borate buffer solution in a ratio of 1: 0.975. Borate buffer solution is prepared by mixing a 0.05 M solution of borax with 0.1 N. a solution of sodium hydroxide in a ratio of 1: 1 (pH 11.02).

По полученным данным строят калибровочный график, откладывая по оси абсцисс введенные в реакцию количества первичных ароматических аминов, а по оси ординат - соответствующие им величины оптической плотности. Светопоглощение окрашенных растворов подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в пределах концентраций 1-40 мкг. Based on the data obtained, a calibration graph is constructed, plotting the quantities of primary aromatic amines introduced into the reaction along the abscissa axis, and the corresponding optical densities along the ordinate axis. The light absorption of colored solutions obeys the Bouguer-Lambert-Beer law in the range of 1-40 μg.

Описание хроматографической колонки. Description of the chromatographic column.

Хроматографическая колонка представляет собой трубку длиной 70 мм с внутренним диаметром 13 мм, закрытую снизу перфорированной перегородкой (дно корпуса шприца одноразового использования с 5-6 отверстиями). Сверху на перфорированную перегоpодку кладут диск из фильтровальной бумаги "красная лента", затем вносят 0,5 г силикагеля марки 15/40, ЧССР, уплотняя его поршнем от шприца до упора. Сверху снова кладут диск фильтровальной бумаги и ставят прижимное кольцо из тефлона или полиэтилена. The chromatographic column is a tube 70 mm long with an internal diameter of 13 mm, closed at the bottom with a perforated partition (the bottom of the case of a single-use syringe with 5-6 holes). On top of the perforated partition, put a “red ribbon” filter paper disk, then add 0.5 g of 15/40 silica gel, Czechoslovakia, sealing it with a piston from the syringe to the stop. A filter paper disk is again placed on top and a pressure ring made of Teflon or polyethylene is placed.

Клейкой лентой размером 20 х 45 мм хроматографическая колонка соединяется снизу с приемником, представляющим собой стеклянную пробирку длиной 50 мм с внутренним диаметром 13 мм. В колонку вносят 6 мл буферного раствора рН которого соответствует рН нейтрализованной биопробы. Помещают колонку в центрифужный приемник и центрифугируют при 500 g в течение 7 мин. Приготовленная колонка рассчитана на проведение одного анализа. With an adhesive tape measuring 20 x 45 mm, the chromatographic column is connected from below to the receiver, which is a glass tube 50 mm long with an internal diameter of 13 mm. 6 ml of a buffer solution is added to the column, the pH of which corresponds to the pH of the neutralized bioassay. Place the column in a centrifuge receiver and centrifuge at 500 g for 7 minutes. The prepared column is designed for one analysis.

П р и м е р 1. Определение содержания свободного новокаинамида в ткани печени. PRI me R 1. Determination of the content of free procainamide in the liver tissue.

В центрифужные стаканы емкостью 250 мл помещают по 100 г мелкоизмельченной печени трупа человека, погибшего в результате травмы. В каждый стакан вносят по 5 мл раствора новокаинамида в буферном растворе с рН 7,4, исходная концентрация которого 100 мкг/мл. In a centrifuge cup with a capacity of 250 ml, 100 g of the finely chopped liver of a corpse of a person who died as a result of an injury are placed. 5 ml of novocainamide solution in a buffer solution with a pH of 7.4, the initial concentration of which is 100 μg / ml, is added to each glass.

Содержимое стаканов оставляют стоять при периодическом перемешивании в течение суток, затем к содержимому каждого стакана прибавляют по 100 мл 1 н. хлорной кислоты, настаивают в течение 2 ч и центрифугиpуют 5 мин при 500 g. Надосадочные жидкости сливают с твердых частиц биоматериала и операцию изолирования осуществляют новыми порциями 1 н. хлорной кислоты еще 3 раза. Вытяжки объединяют и измеряют объем полученного извлечения. The contents of the glasses are left to stand with periodic stirring throughout the day, then 100 ml of 1N are added to the contents of each glass. perchloric acid, insist for 2 hours and centrifuged for 5 minutes at 500 g. The supernatants are drained from the solid particles of the biomaterial and the isolation operation is carried out in new portions of 1 N. perchloric acid 3 more times. Hoods are combined and the volume of the obtained extract is measured.

40 мл безбелковой вытяжки, исследуемой на содержание новокаинамида, вносят в мерную колбу на 50 мл, доводят рН кислотного извлечения до рН 6-8-40%-ным раствором гидроксида натрия и прибавляют дистиллированную воду до метки, после чего в четыре предварительно приготовленные как указано выше хроматографические колонки с оптимальным содержанием силикагеля (0,4-0,5 г для 5-6 мл пробы) вносят определенные, точно отмеренные объемы биопробы с рН 6-8. 40 ml of protein-free extract, tested for the content of procainamide, is introduced into a 50 ml volumetric flask, the pH of the acid extraction is adjusted to pH 6-8-40% with sodium hydroxide solution and distilled water is added to the mark, after which it is prepared in four previously prepared as indicated above chromatographic columns with an optimal silica gel content (0.4-0.5 g for a 5-6 ml sample) add certain, precisely measured volumes of a bioassay with a pH of 6-8.

Колонки с приемниками помещают в центрифугу и центрифугируют при 500 g в течение 7 мин. Приемники освобождают от центрифугатов, вносят в каждую колонку по 5 мл фосфатного буферного раствора с рН 6-8 и центрифугируют как указано выше. Промывание колонки новыми порциями буферного раствора 6-8 проводят еще два раза, центрифугаты отбрасывают, после чего препарат элюируют из колонок. С этой целью в колонки вносят по 3 мл 2 н. соляной кислоты и приступают к центрифугированию в режиме, описанном выше. Промывание колонок новыми порциями 2 н. соляной кислоты (объемом по 3 мл) повторяют еще два раза. Элюаты, полученные с четырех колонок, объединяют, собирая их в мерную колбу емкостью 50 мл, объем жидкости содержимого в колбе доводят до метки дистиллированной водой и после перемешивания определяют содержание новокаинамида. Columns with receivers are placed in a centrifuge and centrifuged at 500 g for 7 minutes. The receivers are freed from centrifuges, 5 ml of a phosphate buffer solution with a pH of 6-8 are introduced into each column and centrifuged as described above. Washing the column with new portions of buffer solution 6-8 is carried out two more times, the centrifugates are discarded, after which the preparation is eluted from the columns. For this purpose, 3 ml of 2 N are added to the columns. hydrochloric acid and begin centrifugation in the mode described above. Rinse columns with new portions of 2 N. hydrochloric acid (3 ml each) is repeated two more times. The eluates obtained from the four columns are combined, collecting them in a 50 ml volumetric flask, the volume of the liquid in the flask is adjusted to the mark with distilled water, and after mixing, the content of procainamide is determined.

Для этого в четыре мерные колбы емкостью 25 мл вносят точно отмеренные объемы полученных элюатов. В первые три колбы прибавляют по 1 мл 0,1%-ного раствора нитрата натрия, затем по 1 мл 0,1%-ного раствора 3- α,γ -дикаpбоксипропилроданина. После перемешивания к содержимому колбы прибавляют 10% -ный раствор гидроксида натрия до появления розово-красного окрашивания. После перемешивания объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой. Для получения раствора сравнения к содержимому в 4-й колбе прибавляют 10%-ный раствор гидроксида натрия в таком объеме, какой был добавлен в первые три колбы для получения розово-красного окрашивания, затем прибавляют 1 мл 0,1%-ного раствора 3- α,γ-дикарбоксипропилроданина, после чего 1 мл 0,1% -ного раствора нитрита натрия. После перемешивания объемы жидкостей во всех колбах доводят дистиллированной водой до 25 мл. To do this, precisely measured volumes of the obtained eluates are introduced into four volumetric flasks with a capacity of 25 ml. In the first three flasks, 1 ml of a 0.1% solution of sodium nitrate is added, then 1 ml of a 0.1% solution of 3-α, γ-dicarboxypropylprodanine is added. After stirring, a 10% sodium hydroxide solution is added to the contents of the flask until a pink-red color appears. After stirring, the volume of the solution in the flask was adjusted to the mark with distilled water. To obtain a comparison solution, a 10% sodium hydroxide solution is added to the contents in the 4th flask in the volume that was added to the first three flasks to obtain a pink-red color, then 1 ml of a 0.1% solution of 3- α, γ-dicarboxypropylrodanine, followed by 1 ml of a 0.1% sodium nitrite solution. After stirring, the volumes of liquids in all flasks were adjusted with distilled water to 25 ml.

При определении суммарного содержания новокаинамида (включая и ацетилированную форму новокаинамида) технология сорбционной очистки не меняется. В этом случае солянокислые центрифугаты переносят в колбу на 50 мл и подвергают гидролизу при нагревании на кипящей водяной бане в течение 20 мин. После этого содержимое колб охлаждают, добавляют объем в колбе до метки дистиллированной водой и проводят фотометрический анализ как указано. When determining the total content of novocainamide (including the acetylated form of novocainamide), the sorption purification technology does not change. In this case, hydrochloric acid centrifugates are transferred to a 50 ml flask and subjected to hydrolysis by heating in a boiling water bath for 20 minutes. After that, the contents of the flasks were cooled, the volume in the flask was added to the mark with distilled water, and photometric analysis was performed as indicated.

Результаты определения новокаинамида в ткани печени приведены в табл.1. Ошибка способа определения новокаинамида составляет ±3,76%. The results of determination of procainamide in liver tissue are given in table 1. The error in the method for determining procainamide is ± 3.76%.

Содержание новокаинамида в ткани печени рассчитывают по формуле
y =

Figure 00000001
, где Y - содержание новокаинамида в 100 г биоматериала
Y1 - суммарный объем кислотного извлечения (мл)
Y2 - объем кислотного извлечения, взятый на нейтрализацию (мл);
Y3 - объем полученной нейтрализованной биовытяжки (мл);
Y4 - объем нейтрализованной биовытяжки, внесенный на колонку (мл);
Y5 - суммарный объем солянокислых элюатов (мл);
Y6 - объем солянокислого элюата, взятый на проведение реакции (мл);
Х - количество (мкг) новокаинамида в 25 мл фотометрируемого раствора, найденное по калибровочному графику;
n - число колонок.The content of procainamide in the liver tissue is calculated by the formula
y =
Figure 00000001
where Y is the content of procainamide in 100 g of biomaterial
Y 1 - the total volume of acid extraction (ml)
Y 2 is the volume of acid extraction taken for neutralization (ml);
Y 3 is the volume of the obtained neutralized bioextraction (ml);
Y 4 is the volume of neutralized bioextraction introduced onto the column (ml);
Y 5 - the total volume of hydrochloric acid eluates (ml);
Y 6 is the volume of hydrochloric eluate taken for the reaction (ml);
X is the amount (μg) of procainamide in 25 ml of photometric solution, found according to the calibration graph;
n is the number of columns.

Для конкретного примера Y = 0,26 х Y1.For a specific example, Y = 0.26 x Y 1 .

П р и м е р 2. Определение свободного новокаинамида в крови. PRI me R 2. Determination of free procainamide in the blood.

В мерную колбу емкостью 100 мл прибавляют 10 мл раствора новокаинамида в буферном растворе с рН 7,4 и исходной концентрацией 100 мкг/мл. После этого доводят донорской кровью человека объем жидкости в колбе до метки. Содержимое колбы перемешивают и инкубируют в течение 24 ч. По истечении указанного времени из колбы отбирают пробу объемом 10 мл, внося ее в центрифужную пробирку и прибавляют туда же 10 мл дистиллированной воды. In a 100 ml volumetric flask, 10 ml of procainamide solution in a buffer solution with a pH of 7.4 and an initial concentration of 100 μg / ml is added. After that, the volume of liquid in the flask is adjusted to the mark with donor blood of a person. The contents of the flask are mixed and incubated for 24 hours. At the end of the indicated time, a 10 ml sample is taken from the flask, introduced into a centrifuge tube and 10 ml of distilled water are added thereto.

Смесь перемешивают и через 5 мин в пробирку вносят 5 мл раствора 5,0 н. хлорной кислоты. Содержимое пробирки центрифугируют при 500 g в течение 5 мин. Центрифугат переносят в мерную колбу на 50 мл. К осадку в центрифужной пробирке прибавляют еще 5,0 мл 5 н. хлорной кислоты и центрифугируют 5 мин. Центрифугаты объединяют и доводят рН раствора до рН 6-8 40%-ным раствором гидроксида натрия, объем содержимого в колбе доводят до метки дистиллированной водой. После тщательного перемешивания нейтрализованных извлечений проводят сорбционную очистку пробы как указано в примере 1, затем фотометрический анализ элюатов. The mixture is stirred and after 5 minutes 5 ml of a solution of 5.0 N are added to the tube. perchloric acid. The contents of the tube are centrifuged at 500 g for 5 minutes. The centrifuge is transferred to a 50 ml volumetric flask. A further 5.0 ml of 5 N was added to the pellet in a centrifuge tube. perchloric acid and centrifuged for 5 minutes The centrifugates are combined and the pH of the solution is adjusted to pH 6-8 with a 40% sodium hydroxide solution, the volume of contents in the flask is adjusted to the mark with distilled water. After thoroughly mixing the neutralized extracts, sorption purification of the sample is carried out as described in example 1, followed by photometric analysis of the eluates.

Результаты определения новокаинамида в крови представлены в табл.2. Ошибка способа определения новокаинамида в крови составляет ±3,64%. The results of determination of procainamide in the blood are presented in table.2. The error in the method for determining procainamide in the blood is ± 3.64%.

Расчет содержания новокаинамида в крови проводят по формуле:
y =

Figure 00000002
, где Y1 - объем крови, затравленной новокаинамидом (мл);
Y2 - объем крови, содержащей новокаинамид, взятой для проведения анализа (мл);
Y3 - объем нейтрализованного кислотного извлечения (мл);
Y4 - объем нейтрализованного кислотного извлечения, внесенный на колонку (мл);
Y5 - суммарный объем солянокислых элюатов (мл);
Y6 - объем солянокислого элюата, взятый на проведение реакции (мл);
Х - количество (мкг) новокаинамида в 25 мл фотометрируемого раствора, найденное по калибровочному графику;
n - число колонок.The calculation of the content of procainamide in the blood is carried out according to the formula:
y =
Figure 00000002
where Y 1 is the volume of blood inoculated with novocainamide (ml);
Y 2 - the volume of blood containing procainamide taken for analysis (ml);
Y 3 is the volume of neutralized acid recovery (ml);
Y 4 is the volume of neutralized acid extraction introduced onto the column (ml);
Y 5 - the total volume of hydrochloric acid eluates (ml);
Y 6 is the volume of hydrochloric eluate taken for the reaction (ml);
X is the amount (μg) of procainamide in 25 ml of photometric solution, found according to the calibration graph;
n is the number of columns.

Для конкретного примера Y - 104,17 х, Y6 = 10 мл.For a specific example, Y is 104.17 x, Y 6 = 10 ml.

П р и м е р 3. Определение свободного новокаинамида в моче. PRI me R 3. Determination of free procainamide in urine.

В мерную колбу на 50 мл вносят 5 мл раствора новокаинамида в буферном растворе с рН 7,4 и исходной концентрацией 100 мкг/мл, а затем в колбу добавляют 30 мл донорской мочи человека. После этого рН раствора доводят до рН 6-8 10%-ным раствором гидроксида натрия, объем содержимого в колбе доводят до метки дистиллированной водой. После тщательного перемешивания содержимого колбы, проводят сорбционную очистку пробы как указано в примере 1, а затем проводят фотометрический анализ элюатов. In a 50 ml volumetric flask, add 5 ml of novocainamide solution in a buffer solution with a pH of 7.4 and an initial concentration of 100 μg / ml, and then 30 ml of human donor urine is added to the flask. After this, the pH of the solution was adjusted to pH 6-8 with a 10% sodium hydroxide solution, the volume of contents in the flask was adjusted to the mark with distilled water. After thoroughly mixing the contents of the flask, sorption purification of the sample is carried out as described in example 1, and then a photometric analysis of the eluates is carried out.

Результаты определения новокаинамида в моче представлены в табл.3. Ошибка способа определения новокаинамида в моче составляет ±3,40%. The results of the determination of procainamide in urine are presented in table 3. The error in the method for determining procainamide in urine is ± 3.40%.

Расчет содержания новокаинамида в моче проводят по формуле:
y =

Figure 00000003
, где Y1 - объем нейтрализованной мочи, взятой на исследование содержания новокаинамида (мл);
Y2 - объем нейтрализованной пробы, внесенный на колонку (мл);
Y3 - объем солянокислых элюатов суммарный (мл)
Y4 - объем солянокислого элюата, взятый на проведение реакции (мл)
х - количество (мкг) новокаинамида в 25 мл фотометрируемого раствора, найденное по калибровочному графику.The calculation of the content of procainamide in urine is carried out according to the formula:
y =
Figure 00000003
where Y 1 is the volume of neutralized urine taken for the study of the content of procainamide (ml);
Y 2 is the volume of the neutralized sample deposited on the column (ml);
Y 3 - total hydrochloric eluate volume (ml)
Y 4 - the volume of hydrochloric eluate taken for the reaction (ml)
x is the amount (μg) of novocainamide in 25 ml of photometric solution, found according to the calibration graph.

n - число колонок. n is the number of columns.

Для конкретного примера Y = 20,833х, Y4 = 5 мл.For a specific example, Y = 20.833x, Y 4 = 5 ml.

В табл. 4 приведена зависимость эффективности разделения новокаинамида на колонке с сорбентом от рН элюента, в табл.5 - от массы сорбента, в табл. 6 - от массы новокаинамида в анализируемой пробе,
Как видно из таблиц оптимальными условиями проведения определения являются следующие: рН 6-11, соотношение массы силикагеля (г) к объему крови (мл) (0,4-0,5): (5-6) при массе новокаинамида в анализируемой пробе 10-100 мкг.
In the table. Figure 4 shows the dependence of the separation efficiency of novocainamide on a column with a sorbent on the pH of the eluent, in table 5 - on the mass of the sorbent, in table. 6 - by weight of procainamide in the analyzed sample,
As can be seen from the tables, the optimal conditions for the determination are as follows: pH 6-11, the ratio of the mass of silica gel (g) to blood volume (ml) (0.4-0.5): (5-6) with the mass of novocainamide in the analyzed sample 10 -100 mcg.

Сравнение времени анализа новокаинамида в объектах биологического происхождения известным и описываемым способами представлено в табл.7. A comparison of the analysis time of procainamide in biological objects by known and described methods is presented in table 7.

Как видно из табл.1-3, 7 описываемый способ позволяет повысить точность определения новокаинамида в объектах биологического происхождения:
в ткани печени - на 49%
в крови - на 52%
в моче - на 43% и сократить время анализа на 17,2 ч.
As can be seen from tables 1-3, 7, the described method allows to increase the accuracy of determination of procainamide in objects of biological origin:
in liver tissue - by 49%
in blood - by 52%
in urine - by 43% and reduce analysis time by 17.2 hours

Claims (1)

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НОВОКАИНАМИДА В ОБЪЕКТАХ БИОЛОГИЧЕСКОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ путем обработки анализируемой пробы раствором кислоты, очистки от балластных веществ и фотокалориметрирования окрашенного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа и сокращения времени определения, обработку анализируемой пробы ведут 1 н хлорной кислотой, очистку от балластных веществ ведут на хроматографической колонке с силикагелем при pH 6 - 11 при соотношении массы силикагеля (г) и объема пробы (мл) 0,4 - 0,5 : 5 - 6 при содержании новокаинамида 10 - 100 мкг. METHOD FOR DETERMINING NOVOCAINAMIDE IN OBJECTS OF BIOLOGICAL ORIGIN by treating an analyzed sample with an acid solution, cleaning from ballast substances and photocalorimetry of a colored solution, characterized in that, in order to increase the accuracy of the method and reduce the time of determination, the analyzed sample is treated with 1 n of chloric acid, substances are carried out on a chromatographic column with silica gel at pH 6 - 11 with a ratio of silica gel mass (g) and sample volume (ml) of 0.4 - 0.5: 5 - 6 with the content of novocainamide and 10 - 100 mcg.
SU4853999 1990-07-23 1990-07-23 Method of novocainamide assay in the objects of biological origin RU2018113C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU4853999 RU2018113C1 (en) 1990-07-23 1990-07-23 Method of novocainamide assay in the objects of biological origin

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU4853999 RU2018113C1 (en) 1990-07-23 1990-07-23 Method of novocainamide assay in the objects of biological origin

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2018113C1 true RU2018113C1 (en) 1994-08-15

Family

ID=21529171

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU4853999 RU2018113C1 (en) 1990-07-23 1990-07-23 Method of novocainamide assay in the objects of biological origin

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2018113C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2546294C1 (en) * 2013-12-19 2015-04-10 Владимир Камбулатович Шорманов Method of determining novocaine in biological material
CN117169392A (en) * 2023-11-03 2023-12-05 华润双鹤利民药业(济南)有限公司 Pretreatment method for detecting impurity content in nifedipine controlled release tablet, detection method and application thereof

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Гадаскина И.Д. Филов В.Д. Превращение и определение промышленных органических ядов в организме, Л., Мед., 1971, с.304. *
Песахович Л.В. Химико-токсикологическое доказательство новокаинамида, в книге "Современные методы исследования судебно-медицинских объектов, Рига", РМИ, 1977, с.114-117. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2546294C1 (en) * 2013-12-19 2015-04-10 Владимир Камбулатович Шорманов Method of determining novocaine in biological material
CN117169392A (en) * 2023-11-03 2023-12-05 华润双鹤利民药业(济南)有限公司 Pretreatment method for detecting impurity content in nifedipine controlled release tablet, detection method and application thereof
CN117169392B (en) * 2023-11-03 2024-01-26 华润双鹤利民药业(济南)有限公司 Pretreatment method for detecting impurity content in nifedipine controlled release tablet, detection method and application thereof

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Seligson et al. Alpha-keto acids in blood and urine studied by paper chromatography
Sweat Silica gel microcolumn for chromatographic resolution of cortical steroids
AU651617B2 (en) Disposable reactor vessel for solid-phase immune assays and process for measuring components detectable by immune reactions
Griffiths et al. Fluorimetric determination of plasma catecholamines: normal human epinephrine and norepinephrine levels
RU2431829C1 (en) Method for determination of chloramphenicol content in food products and sorbent for its implementation
RU2018113C1 (en) Method of novocainamide assay in the objects of biological origin
CN106198810A (en) A kind of quality determining method of the Chinese medicine composition with treatment tumor chemoradiotherapy bone marrow depression
Marquardt et al. Herbicide Determination, Determination of 2, 4-Dichlorophenoxyacetic Acid (2, 4-D) in Grain and Seed
Christensen et al. Automatic headspace gas chromatographic method for the simultaneous determination of trichloroethylene and metabolites blood and urine
US3814255A (en) Triglyceride cholesterol analysis
Clesceri et al. Thin Layer Chromatographic Separation of Orthophosphate and Pyrophosphate.
CN111579684B (en) Method for measuring content of total capsaicin in capsule wall material of capsule
SU1663516A1 (en) Method for determination of sulphanilamide drugs in objects of biological origin
DeWitt et al. Spectrophotometric Procedure for Quantitative Estimation of Vitamins D
JP2023516808A (en) Method for removing interfering components of liquid samples prior to application to chemical reagent test slides
RU2188416C1 (en) Method for carrying out quantitative blood phenol determination
RU2786509C1 (en) Method for determination of mass concentrations of phenol and pyrocatechol in blood by high performance liquid chromatography
CN116026971B (en) Kit and detection method for detecting full-spectrum fat-soluble vitamins and metabolites thereof in human serum and plasma
Cox et al. A comparison of a commercial microdiffusion method and gas chromatography for ethanol analysis
RU2416798C1 (en) Method of blood dichlorobromomethane measurement
Giri et al. Circular paper chromatographic method for estimation of thiamine and riboflavin in multivitamin preparations
RU2322674C1 (en) Method of determining 2,6-bis[bis(beta-hydroxyethyl)amino]-4,8-di-n-pyperidino-pyrimido(5,4-d)pyrimidine in biological material
SU1569651A1 (en) Method of determining sensibilization of organism to industrial allergens
SU830238A1 (en) Method of determining papaverine hydrochloride of medicinal mixtures
SU1631416A1 (en) Method of blood serum analysis for component substances