RU2016152555A - РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBiPr-ABIgA2m1F16-ht ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА А ИЗОТИПА IGA2m1 - Google Patents
РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBiPr-ABIgA2m1F16-ht ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА А ИЗОТИПА IGA2m1 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2016152555A RU2016152555A RU2016152555A RU2016152555A RU2016152555A RU 2016152555 A RU2016152555 A RU 2016152555A RU 2016152555 A RU2016152555 A RU 2016152555A RU 2016152555 A RU2016152555 A RU 2016152555A RU 2016152555 A RU2016152555 A RU 2016152555A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- recombinant plasmid
- plasmid dna
- human
- seq
- iga2m1
- Prior art date
Links
- 229940099472 immunoglobulin a Drugs 0.000 title 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims 5
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 claims 5
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 claims 4
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 claims 4
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 claims 4
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 claims 4
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 claims 4
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims 4
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 claims 4
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 claims 3
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 claims 3
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 claims 2
- 241000710188 Encephalomyocarditis virus Species 0.000 claims 2
- 101900159346 Influenza A virus Hemagglutinin Proteins 0.000 claims 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 2
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 claims 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 claims 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 claims 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 1
- 101150074155 DHFR gene Proteins 0.000 claims 1
- 102100024746 Dihydrofolate reductase Human genes 0.000 claims 1
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 claims 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims 1
- 241000701024 Human betaherpesvirus 5 Species 0.000 claims 1
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 claims 1
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 claims 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 claims 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 claims 1
- 108020001096 dihydrofolate reductase Proteins 0.000 claims 1
- 108010030074 endodeoxyribonuclease MluI Proteins 0.000 claims 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 claims 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 claims 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 claims 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1018—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Virology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Claims (19)
1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pBiPr-ABIgA2m1FI6-ht, кодирующая человеческое антитело к гемагглютинину вируса гриппа А человека изотипа IgA2m1, содержащая ген тяжелой цепи, находящейся под контролем промотора hEF1-HTLV и сигнала полиаденилирования бычьего гормона роста BGH polyA, и ген легкой цепи, находящийся под контролем промотора CMV и сигнала полиаденилирования тимидинкиназы вируса герпеса цепей антитела, а также селективный маркер, обеспечивающий отбор трансфецированных эукариотических клеток, при этом промоторы hEF1-HTLV и CMV размещены в последовательности, обеспечивающей однонаправленную транскрипцию.
2. Рекомбинантная плазмидная по п. 1, характеризующаяся тем, что она выполнена на базе плазмиды pOptiVEC™-TOPO®, включающей также внутренний сайт связывания рибосом (IRES) вируса энцефаломиокардита (EMCV), ген ДГФР, сайт начала репликации в Е. coli из плазмиды pUC, ген β-лактамазы, а также следующие модификации - единичный сайт узнавания рестриктазы MluI вместо сайта узнавания рестриктазы SalI в положении 23, единичные сайты узнавания рестриктаз NheI и XhoI после промотора CMV для клонирования ДНК легкой цепи антитела.
3. Рекомбинантная плазмидная по п. 1, характеризующаяся тем, что селективный маркер представляет собой ген ДГФР.
4. Рекомбинантная плазмидная по п. 1, характеризующаяся тем, что ген легкой цепи включает фрагменты ДНК, кодирующие вариабельный домен легкой цепи человеческого антитела к гемагглютинину вируса гриппа А человека и константный домен каппа-типа, фланкированные сайтами рестрикции NheI и XhoI;
5. Рекомбинантная плазмидная по п. 1, характеризующаяся тем, что ген тяжелой цепи содержит фрагменты, кодирующие вариабельный домен тяжелой цепи человеческого антитела к гемагглютинину вируса гриппа А человека и константный домен изотипа IgA2m1, фланкированные сайтами рестрикции NheI и XhoI
6. Рекомбинантная плазмидная ДНК по п. 1, характеризующаяся тем, что ген тяжелой цепи кодирует аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1.
7. Рекомбинантная плазмидная ДНК по п. 1, характеризующаяся тем, что ген тяжелой цепи имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 2.
8. Рекомбинантная плазмидная ДНК по п. 1, характеризующаяся тем, что ген легкой цепи кодирует аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3.
9. Рекомбинантная плазмидная ДНК по п. 1, характеризующаяся тем, что ген легкой цепи имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 4.
10. Рекомбинантная плазмидная ДНК по п. 1, характеризующаяся тем, что указанный промотор/энхансер ранних генов цитомегаловируса человека (CMV) имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 5.
11. Рекомбинантная плазмидная ДНК по п. 1, характеризующаяся тем, что указанный гибридный промотор hEF1-HTLV имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 6.
12. Рекомбинантная плазмидная ДНК по п. 1, характеризующаяся тем, что указанный сигнал полиаденилирования бычьего гормона роста BGH polyA имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 7.
13. Способ получения линии эукариотических клеток продуцентов человеческого антитела изотипа IgA2m1 к гемагглютинину вируса гриппа А (ВГА) путем трансфекции клеток рекомбинантными плазмидными ДНК по п. 1.
14. Способ получения по п. 13, характеризующийся тем, что для получения линий эукариотических клеток продуцентов используют линию клеток яичника китайского хомячка СНО.
15. Линия эукариотических клеток - продуцент человеческого антитела изотипа IgA2m1 к гемагглютинину вируса гриппа А (ВГА), полученная путем трансфекции рекомбинантной плазмидной ДНК по п. 1.
16. Линия клеток по п. 15, представляющая собой линию клеток яичника китайского хомячка СНО, полученную путем трансфекции линии клеток СНО DG44 рекомбинантной плазмидной ДНК по любому из п. 1.
17. Способ получения человеческого антитела изотипа IgA2m1 к гемагглютинину вируса гриппа А (ВГА), включающий:
культивирование в питательной среде линии клеток по п. 15,
выделение полученного целевого белка из культуральной жидкости.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016152555A RU2671477C2 (ru) | 2016-12-30 | 2016-12-30 | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBiPr-ABIgA2m1F16-ht ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА А ИЗОТИПА IGA2m1 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016152555A RU2671477C2 (ru) | 2016-12-30 | 2016-12-30 | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBiPr-ABIgA2m1F16-ht ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА А ИЗОТИПА IGA2m1 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2016152555A3 RU2016152555A3 (ru) | 2018-07-02 |
| RU2016152555A true RU2016152555A (ru) | 2018-07-02 |
| RU2671477C2 RU2671477C2 (ru) | 2018-10-31 |
Family
ID=62813998
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016152555A RU2671477C2 (ru) | 2016-12-30 | 2016-12-30 | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBiPr-ABIgA2m1F16-ht ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА А ИЗОТИПА IGA2m1 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2671477C2 (ru) |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101732056B1 (ko) * | 2008-07-25 | 2017-05-02 | 인스티튜트 포 리서치 인 바이오메드슨 | 중화 항-인플루엔자 ａ 바이러스 항체 및 이의 용도 |
| RU2555533C9 (ru) * | 2013-05-23 | 2016-03-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | Рекомбинантная плазмидная днк, кодирующая химерное антитело против фактора некроза опухоли-альфа человека, линия эукариотических клеток-продуцент химерного антитела и способ получения химерного антитела |
| EP3786181A1 (en) * | 2014-07-18 | 2021-03-03 | Nippi, Incorporated | Polymeric iga-type recombinant antibody and use thereof |
-
2016
- 2016-12-30 RU RU2016152555A patent/RU2671477C2/ru active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2016152555A3 (ru) | 2018-07-02 |
| RU2671477C2 (ru) | 2018-10-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8236530B2 (en) | Method for preparing monoclonal antibody | |
| US11046975B2 (en) | Bicistronic expression vector for antibody expression and method for producing antibody using same | |
| JP5432117B2 (ja) | 宿主細胞中の組換えタンパク質の発現を増進するための組換え発現ベクター要素（ｒＥＶＥ） | |
| JP5701061B2 (ja) | 哺乳類発現ベクター | |
| CN104718296B (zh) | 包含嵌合巨细胞病毒启动子和增强子序列的表达载体 | |
| CN114026224B (zh) | 具有sirt-1基因敲除的哺乳动物细胞系 | |
| EP3408397B1 (en) | Hybrid promoter and uses thereof | |
| CA2611946C (en) | Expression vector and methods of producing high levels of proteins | |
| US11634836B2 (en) | Randomized configuration targeted integration of nucleic acids | |
| RU2013123638A (ru) | Рекомбинантная плазмидная днк, кодирующая химерное антитело против фактора некроза опухоли-альфа человека, линия эукариотических клеток - продуцент химерного антитела и способ получения химерного антитела | |
| KR101411740B1 (ko) | 항체 발현용 바이시스트로닉 발현벡터 및 이를 이용한 항체의 생산 방법 | |
| US20110150861A1 (en) | Sorf constructs and multiple gene expression | |
| RU2016152555A (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBiPr-ABIgA2m1F16-ht ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА А ИЗОТИПА IGA2m1 | |
| WO2014102101A1 (en) | Novel intron sequences | |
| RU2016152550A (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBiPr-ABIgA1FI6-Intht ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА А ИЗОТИПА IgA1 | |
| RU2656142C1 (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBiPr-ABIgA1FI6-ht ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА А ИЗОТИПА IGA1 | |
| AU2011382454A1 (en) | Vectors and host cells comprising a modified SV40 promoter for protein expression | |
| KR102559149B1 (ko) | 재조합효소 매개 카세트 교환을 이용한 다중특이적 항체 스크리닝 방법 | |
| RU2016152258A (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pOptiVEC-MBP84-106-Fc, КОДИРУЮЩАЯ КОНСТАНТНЫЙ ФРАГМЕНТ ИММУНОГЛОБУЛИНА ЧЕЛОВЕКА, СЛИТНОГО С ФРАГМЕНТОМ ОСНОВНОГО БЕЛКА МИЕЛИНА, ЛИНИИ ЭУКАРИОТИЧЕСКИХ КЛЕТОК - ПРОДУЦЕНТОВ УКАЗАННОГО БЕЛКА И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БЕЛКА MBP84-106-Fc ДЛЯ ТЕРАПИИ РАССЕЯННОГО СКЛЕРОЗА | |
| RU2682884C2 (ru) | Оптимизированная экспрессионная кассета для экспрессии полипептида с высоким выходом | |
| US20240076405A1 (en) | Expression vectors for immunoglobulins and applications thereof | |
| RU2021113649A (ru) | Векторы для производства белков | |
| WO2023122246A1 (en) | Multi-vector recombinase mediated cassette exchange | |
| WO2015033086A1 (en) | Dna construct |