RU2015116883A - Применение ионообменной мембраны для удаления примесей из конъюгатов клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом - Google Patents

Применение ионообменной мембраны для удаления примесей из конъюгатов клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом Download PDF

Info

Publication number
RU2015116883A
RU2015116883A RU2015116883A RU2015116883A RU2015116883A RU 2015116883 A RU2015116883 A RU 2015116883A RU 2015116883 A RU2015116883 A RU 2015116883A RU 2015116883 A RU2015116883 A RU 2015116883A RU 2015116883 A RU2015116883 A RU 2015116883A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
mixture
cell
agent
cytotoxic agent
binding agent
Prior art date
Application number
RU2015116883A
Other languages
English (en)
Inventor
Синьфан Ли
Вэньцзе ЧЭНЬ
Original Assignee
Иммуноджен, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Иммуноджен, Инк. filed Critical Иммуноджен, Инк.
Publication of RU2015116883A publication Critical patent/RU2015116883A/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/06—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from serum
    • C07K16/065—Purification, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2878—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered

Abstract

1. Способ получения очищенного конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом, включающий приведение в контакт смеси, содержащей конъюгат клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом и одну или более примесей, с ионообменной хроматографической мембраной для удаления из смеси по меньшей мере части примесей с получением, таким образом, очищенного конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом.2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что способ последовательно повторяют два, три или четыре раза.3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что способ включает стадии:(a) приведения в контакт клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом с получением первой смеси, содержащей клеточносвязывающий агент и цитотоксический агент, затем приведения в контакт первой смеси с бифункциональным сшивающим реагентом, содержащим линкер, в растворе, имеющем pH от около 4 до около 9, с получением второй смеси, содержащей конъюгат клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом, который содержит клеточносвязывающий агент, химически связанный через линкер с цитотоксическим агентом, и одну или более примесей;(b) приведение второй смеси в контакт с ионообменной хроматографической мембраной для удаления из смеси по меньшей мере части примесей с получением, таким образом, очищенной второй смеси конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом; и(c) обработки очищенной второй смеси после стадии (b), используя методы тангенциальной поточной фильтрации, селективного осаждения, неадсорбционной хроматографии, адсорбционной фильтрации, адсорбционной хроматографии или их комбинации, для

Claims (91)

1. Способ получения очищенного конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом, включающий приведение в контакт смеси, содержащей конъюгат клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом и одну или более примесей, с ионообменной хроматографической мембраной для удаления из смеси по меньшей мере части примесей с получением, таким образом, очищенного конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что способ последовательно повторяют два, три или четыре раза.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что способ включает стадии:
(a) приведения в контакт клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом с получением первой смеси, содержащей клеточносвязывающий агент и цитотоксический агент, затем приведения в контакт первой смеси с бифункциональным сшивающим реагентом, содержащим линкер, в растворе, имеющем pH от около 4 до около 9, с получением второй смеси, содержащей конъюгат клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом, который содержит клеточносвязывающий агент, химически связанный через линкер с цитотоксическим агентом, и одну или более примесей;
(b) приведение второй смеси в контакт с ионообменной хроматографической мембраной для удаления из смеси по меньшей мере части примесей с получением, таким образом, очищенной второй смеси конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом; и
(c) обработки очищенной второй смеси после стадии (b), используя методы тангенциальной поточной фильтрации, селективного осаждения, неадсорбционной хроматографии, адсорбционной фильтрации, адсорбционной хроматографии или их комбинации, для дополнительной очистки конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом от примесей и получения, таким образом, очищенной третьей смеси конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом, которая содержит уменьшенное количество примесей, по сравнению с очищенной второй смесью.
4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что стадию (b) последовательно повторяют два, три или четыре раза до осуществления стадии (c).
5. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что на стадии (c) используют адсорбционную хроматографию.
6. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что адсорбционная хроматография выбрана из группы, состоящей из гидроксиапатитовой хроматографии, гидрофобной хроматографии с индукцией заряда (HCIC), хроматографии гидрофобного взаимодействия (HIC), ионообменной хроматографии, ионообменной хроматографии смешанного типа, металл-аффинной хроматографии (IMAC), хроматографии с лигандами-красителями, аффинной хроматографии, обращенно-фазовой хроматографии и их комбинаций.
7. Способ по п. 6, отличающийся тем, что адсорбционная хроматография представляет собой ионообменную хроматографию.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что ионообменная хроматография представляет собой хроматографию на керамическом гидроксиапатите (СНТ).
9. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что на стадии (c) используют тангенциальную поточную фильтрацию.
10. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что приведение в контакт на стадии (a) осуществляют путем подачи в реакционный сосуд клеточносвязывающего агента, добавления в реакционный сосуд цитотоксического агента с получением первой смеси, содержащей клеточносвязывающий агент и цитотоксический агент, а затем добавления к первой смеси бифункционального сшивающего реагента.
11. Способ по п. 3 или 4, дополнительно включающий выдерживание смеси между стадиями а-b или стадиями b-с для высвобождения нестабильно связанных линкеров из клеточносвязывающего агента.
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что смесь выдерживают в течение около 20 часов при температуре от около 2°С до около 8°С.
13. Способ по п. 3 или 4, дополнительно включающий заглушение второй смеси между стадиями (a)-(b) для полного погашения непрореагировавшего цитотоксического агента и/или непрореагировавшего бифункционального сшивающего реагента.
14. Способ по п. 13, отличающийся тем, что смесь заглушают приведением в контакт второй смеси с гасящим реагентом, который реагирует со свободным цитотоксическим агентом.
15. Способ по п. 14, отличающийся тем, что гасящий реагент выбран из группы, состоящей из 4-малеимидомасляной кислоты, 3-малеимидопропионовой кислоты, N-этилмалеимида, йодацетамида и йодацетамидопропионовой кислоты.
16. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что способ включает стадии:
(a) приведения в контакт клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом с получением первой смеси, содержащей клеточносвязывающий агент и цитотоксический агент, затем приведения в контакт первой смеси с бифункциональным сшивающим реагентом, содержащим линкер, в растворе, имеющем pH от около 4 до около 9, с получением второй смеси, содержащей конъюгат клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом, который содержит клеточносвязывающий агент, химически связанный через линкер с цитотоксическим агентом, и одну или более примесей;
(b) приведения в контакт смеси с ионообменной хроматографической мембраной для удаления из смеси по меньшей мере части примесей с получением, таким образом, очищенной второй смеси конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом;
(c) заглушения очищенной второй смеси после осуществления стадии (b) для полного погашения непрореагировавшего цитотоксического агента и/или непрореагировавшего бифункционального сшивающего реагента;
(d) приведения в контакт заглушенной смеси после осуществления стадии (c) с ионообменной хроматографической мембраной для удаления из смеси по меньшей мере части примесей с получением, таким образом, очищенной третьей смеси конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом;
(e) выдерживания очищенной третьей смеси для высвобождения нестабильно связанных линкеров из клеточносвязывающего агента;
(f) приведения в контакт очищенной третьей смеси после осуществления стадии (c) с ионообменной хроматографической мембраной для удалении из смеси по меньшей мере части примесей с получением, таким образом, очищенной четвертой смеси конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом; и
(g) обработки очищенной четвертой смеси после осуществления стадии (f), используя методы тангенциальной поточной фильтрации, селективного осаждения, неадсорбционной хроматографии, адсорбционной фильтрации, адсорбционной хроматографии или их комбинации, для дополнительной очистки конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом от примесей и получения, таким образом, очищенной третьей смеси конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом, которая содержит уменьшенное количество примесей, по сравнению с очищенной второй смесью.
17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что на стадии (g) используют тангенциальную поточную фильтрацию.
18. Способ по п. 1, отличающийся тем, что способ включает стадии:
(a) приведения в контакт клеточносвязывающего агента с бифункциональным сшивающим реагентом для ковалентного присоединения линкера к клеточносвязывающему агенту и получения, таким образом, первой смеси, содержащей клеточносвязывающие агенты, имеющие связанные с ними линкеры,
(b) обработки первой смеси, используя методы тангенциальной поточной фильтрации, селективного осаждения, неадсорбционной хроматографии, адсорбционной фильтрации, адсорбционной хроматографии или их комбинации и получения, таким образом, очищенной первой смеси клеточносвязывающих агентов, имеющих связанные с ними линкеры,
(c) конъюгации цитотоксического агента с клеточносвязывающими агентами, имеющими связанные с ними линкеры, в очищенной первой смеси путем приведения в контакт клеточносвязывающих агентов, имеющих связанные с ними линкеры, с цитотоксическим агентом в растворе, имеющем pH от около 4 до около 9, с получением второй смеси, содержащей конъюгат клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом, который содержит клеточносвязывающий агент, химически связанный с цитотоксическим агентом через линкер, и одну или более примесей,
(d) приведения в контакт смеси с ионообменной хроматографической мембраной для удаления по меньшей мере части примесей с получением, таким образом, очищенной второй смеси конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом; и
(e) обработки очищенной второй смеси после осуществления стадии (d), используя методы тангенциальной поточной фильтрации, селективного осаждения, неадсорбционной хроматографии, адсорбционной фильтрации, адсорбционной хроматографии или их комбинации, для дополнительной очистки конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом от примесей и получения, таким образом, очищенной третьей смеси конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом, которая содержит уменьшенное количество примесей, по сравнению с очищенной второй смесью.
19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что стадию (d) последовательно повторяют два, три или четыре раза до осуществления стадии (e).
20. Способ по п. 18 или 19, отличающийся тем, что на стадиях (b) и (d) используют адсорбционную хроматографию.
21. Способ по п. 18 или 19, отличающийся тем, что на стадии (b) используют тангенциальную поточную фильтрацию, а на стадии (d) используют адсорбционную хроматографию.
22. Способ по п. 18 или 19, отличающийся тем, что на стадии (b) используют адсорбционную хроматографию, а на стадии (d) используют тангенциальную поточную фильтрацию.
23. Способ по п. 18 или 19, отличающийся тем, что адсорбционная хроматография выбрана из группы, состоящей из гидроксиапатитовой хроматографии, гидрофобной хроматографии с индукцией заряда (HCIC), хроматографии гидрофобного взаимодействия (HIC), ионообменной хроматографии, ионообменной хроматографии смешанного типа, металл-аффинной хроматографии (IMAC), хроматографии с лигандами-красителями, аффинной хроматографии, обращенно-фазовой хроматографии и их комбинаций.
24. Способ по п. 23, отличающийся тем, что адсорбционная хроматография представляет собой ионообменную хроматографию.
25. Способ по п. 24, отличающийся тем, что ионообменная хроматография представляет собой хроматографию на керамическом гидроксиапатите (СНТ).
26. Способ по п. 18 или 19, отличающийся тем, что на стадиях (b) и (d) используют тангенциальную поточную фильтрацию.
27. Способ по п. 18 или 19, отличающийся тем, что на стадиях (b) и (d) используют неадсорбционную хроматографию.
28. Способ по п. 18 или 19, отличающийся тем, что раствор на стадии (c) содержит сахарозу.
29. Способ по п. 18 или 19, отличающийся тем, что раствор на стадии (c) содержит буферный агент, выбранный из группы, состоящей из цитратного буфера, ацетатного буфера, сукцинатного буфера и фосфатного буфера.
30. Способ по п. 18 или 19, отличающийся тем, что раствор на стадии (c) содержит буферный агент, выбранный из группы, состоящей из HEPPSO (N-(2-гидроксиэтил)пиперазин-N′-(2-гидроксипропансульфоновой кислоты)), POPSO (пиперазин-1,4-бис-(2-гидроксипропансульфоновой кислоты) дегидрата), HEPES (4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-этансульфоновой кислоты), HEPPS (EPPS) (4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-пропансульфоновой кислоты), TES (N-[трис(гидроксиметил)метил]-2-аминоэтансульфоновой кислоты) и их комбинаций.
31. Способ по п. 18 или 19, дополнительно включающий стадию:
(f) по меньшей мере одного выдерживания смеси между осуществлением стадий a-b, стадий b-c, стадий c-d и стадий d-e для высвобождения нестабильно связанных линкеров из клеточносвязывающего агента.
32. Способ по п. 1, отличающийся тем, что способ включает стадии:
(a) приведения в контакт клеточносвязывающего агента с бифункциональным сшивающим реагентом для ковалентного присоединения линкера к клеточносвязывающему агенту и получения, таким образом, первой смеси, содержащей клеточносвязывающие агенты, имеющие связанные с ними линкеры,
(b) конъюгации цитотоксического агента с клеточносвязывающими агентами, имеющими связанные с ними линкеры, в первой смеси путем приведения в контакт клеточносвязывающих агентов, имеющих связанные с ними линкеры, с цитотоксическим агентом с получением второй смеси, содержащей конъюгат клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом, который содержит клеточносвязывающий агент, химически связанный через линкер с цитотоксическим агентом, и одну или более примесей,
(c) приведения второй смеси в контакт с ионообменной хроматографической мембраной для удаления по меньшей мере части примесей с получением, таким образом, очищенной второй смеси конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом; и
(d) обработки очищенной второй смеси после осуществления стадии (c), используя методы тангенциальной поточной фильтрации, селективного осаждения, неадсорбционной хроматографии, адсорбционной фильтрации, адсорбционной хроматографии или их комбинации, для дополнительной очистки конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом от примесей и получения, таким образом, очищенной третьей смеси конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом, которая содержит уменьшенное количество примесей, по сравнению с очищенной второй смесью.
33. Способ по п. 32, отличающийся тем, что первую смесь не подвергают очистке между осуществлением стадии (a) и (b).
34. Способ по п. 32 или 33, отличающийся тем, что стадию (c) последовательно повторяют два, три или четыре раза до осуществления стадии (d).
35. Способ по п. 32 или 33, отличающийся тем, что на стадии (d) используют адсорбционную хроматографию.
36. Способ по п. 35, отличающийся тем, что адсорбционная хроматография выбрана из группы, состоящей из гидроксиапатитовой хроматографии, гидрофобной хроматографии с индукцией заряда (HCIC), хроматографии гидрофобного взаимодействия (HIC), ионообменной хроматографии, ионообменной хроматографии смешанного типа, металл-афинной хроматографии (IMAC), хроматографии с лигандами-красителями, аффинной хроматографии, обращенно-фазовой хроматографии и их комбинаций.
37. Способ по п. 36, отличающийся тем, что адсорбционная хроматография представляет собой ионообменную хроматографию.
38. Способ по п. 37, отличающийся тем, что ионообменная хроматография представляет собой хроматографию на керамическом гидроксиапатите (СНТ).
39. Способ по п. 32 или 33, отличающийся тем, что на стадии (d) используют тангенциальную поточную фильтрацию.
40. Способ по п. 32 или 33, отличающийся тем, что на стадии (d) используют неадсорбционную хроматографию.
41. Способ по п. 32 или 33, отличающийся тем, что раствор на стадии (b) содержит сахарозу.
42. Способ по п. 32 или 33, отличающийся тем, что раствор на стадии (b) содержит буферный агент, выбранный из группы, состоящей из цитратного буфера, ацетатного буфера, сукцинатного буфера и фосфатного буфера.
43. Способ по п. 32 или 33, отличающийся тем, что раствор на стадии (b) содержит буферный агент, выбранный из группы, состоящей из HEPPSO (N-(2-гидроксиэтил)пиперазин-N′-(2-гидроксипропансульфоновой кислоты)), POPSO (пиперазин-1,4-бис-(2-гидрокси-пропан-сульфоновой кислоты) дегидрата), HEPES (4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-этансульфоновой кислоты), HEPPS (EPPS) (4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-пропансульфоновой кислоты), TES (N-[трис(гидроксиметил)метил]-2-аминоэтансульфоновой кислоты) и их комбинаций.
44. Способ по п. 32 или 33, дополнительно включающий стадию:
(e) по меньшей мере одного выдерживания смеси между осуществлением стадий a-b, стадий b-c и стадий c-d для высвобождения нестабильно связанных линкеров из клеточносвязывающего агента.
45. Способ по п. 1, отличающийся тем, что одна или более примесей выбраны из группы димеров цитотоксического агента, агрегатов конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом, свободного цитотоксического агента, неконъюгированного линкера и их смесей.
46. Способ по п. 45, отличающийся тем, что в качестве примеси смесь содержит димеры цитотоксического агента, и из смеси удаляют некоторую часть димеров цитотоксического агента с получением очищенного конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом.
47. Способ по п. 46, отличающийся тем, что димер цитотоксического агента содержит DM1-DM1.
48. Способ по п. 46, отличающийся тем, что димер цитотоксического агента содержит DM1-MCC-DM1.
49. Способ по п. 46, отличающийся тем, что димер цитотоксического агента содержит DM1-DM1 и DM1-MCC-DM1.
50. Способ по п. 45, отличающийся тем, что в качестве примеси смесь содержит агрегаты конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом, и из смеси удаляют некоторую часть агрегатов конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом с получением очищенного конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом.
51. Способ по п. 45, отличающийся тем, что в качестве примеси смесь содержит свободный цитотоксический агент, и из смеси удаляют некоторую часть свободного цитотоксического агента с получением очищенного конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом.
52. Способ по п. 45, отличающийся тем, что в качестве примеси смесь содержит неконъюгированный линкер, и из смеси удаляют некоторую часть неконъюгированного линкера с получением очищенного конъюгата клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом.
53. Способ по п. 1, отличающийся тем, что pH смеси, которую приводят в контакт с ионообменной хроматографической мембраной, составляет от около 4 до около 9.
54. Способ по п. 53, отличающийся тем, что pH смеси составляет от около 7 до около 8.
55. Способ по п. 54, отличающийся тем, что pH смеси составляет от около 7,3 до около 7,7.
56. Способ по п. 55, отличающийся тем, что pH смеси составляет около 7,5.
57. Способ по п. 53, отличающийся тем, что pH смеси составляет от около 4,5 до около 5,5.
58. Способ по п. 57, отличающийся тем, что pH смеси составляет около 4,8 или около 5.
59. Способ по п. 1, отличающийся тем, что из смеси удаляют по меньшей мере 50% одной или более примесей.
60. Способ по п. 1, отличающийся тем, что из смеси удаляют по меньшей мере 75% одной или более примесей.
61. Способ по п. 1, отличающийся тем, что из смеси удаляют по меньшей мере 90% одной или более примесей.
62. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ионообменная хроматографическая мембрана представляет собой анионообменную мембрану.
63. Способ по п. 62, отличающийся тем, что анионообменная мембрана представляет собой мембрану Q.
64. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ионообменная хроматографическая мембрана представляет собой катионообменную мембрану.
65. Способ по п. 64, отличающийся тем, что катионообменная мембрана представляет собой мембрану S.
66. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ионообменная хроматографическая мембрана представляет собой обменную мембрану для удаления эндотоксина.
67. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что приведение в контакт на стадии (a) происходит в растворе, имеющем pH от около 7 до около 9.
68. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что раствор на стадии (a) содержит буферный агент, выбранный из группы, состоящей из нитратного буфера, ацетатного буфера, сукцинатного буфера и фосфатного буфера.
69. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что раствор на стадии (a) содержит буферный агент, выбранный из группы, состоящей из HEPPSO (N-(2-гидроксиэтил)пиперазин-N′-(2-гидроксипропансульфоновой кислоты)), POPSO (пиперазин-1,4-бис-(2-гидрокси-пропан-сульфоновой кислоты) дегидрата), HEPES (4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-этансульфоновой кислоты), HEPPS (EPPS) (4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-пропансульфоновой кислоты), TES (N-[трис(гидроксиметил)метил]-2-аминоэтансульфоновой кислоты) и их комбинаций.
70. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что приведение в контакт на стадии (a) происходит при температуре от около 16°С до около 24°С.
71. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что приведение в контакт на стадии (a) происходит при температуре от около 0°С до около 15°С.
72. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что бифункциональный сшивающий реагент представляет собой кислотонеустойчивый линкер, дисульфид-содержащий линкер, фотолабильный линкер, пептидаза-лабильный линкер или эстераза-лабильный линкер.
73. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что бифункциональный сшивающий реагент представляет собой дисульфид-содержащий расщепляемый линкер.
74. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что бифункциональный сшивающий реагент представляет собой нерасщепляемый линкер.
75. Способ по п.3 или 4, отличающийся тем, что бифункциональный сшивающий реагент содержит фрагмент N-сукцинимидилового эфира, фрагмент N-сульфосукцинимидилового эфира, малеимидный фрагмент или галогенацетильный фрагмент.
76. Способ по п. 73, отличающийся тем, что бифункциональный сшивающий реагент выбран из группы, состоящей из N-сукцинимидил-3-(2-пиридилдитио)пропионата (SPDP), N-сукцинимидил-4-(2-пиридилдитио)бутаноата (SPDB), N-сукцинимидил-4-(2-пиридилдитио)пентаноата (SPP) и N-сукцинимидил-4-(2-пиридилдитио)-2-сульфобутаноата (сульфо-SPDB).
77. Способ по п. 74, отличающийся тем, что бифункциональный сшивающий реагент выбран из группы, состоящей из N-сукцинимидил-4-(малеимидометил)циклогексанкарбоксилата (SMCC), N-сукцинимидил-4-(N-малеимидометил)-циклогексан-1-карбокси-(6-амидокапроата) (LC-SMCC), N-сукцинимидилового эфира κ-малеимидоундекановой кислоты (KMUA), N-сукцинимидилового эфира γ-малеимидомасляной кислоты (GMBS), β-малеимидопропилокси-сукцинимидилового эфира (BMPS), N-гидроксисукцинимидного эфира ε-малеимидокапроновой кислоты (EMCS), м-малеимидобензоил-N-гидроксисукцинимидного эфира (MBS), N-(α-малеимидоацетокси)-сукцинимидного эфира (AMAS), сукцинимидил-6-(β-малеимидопропионамидо)гексаноата (SMPH), N-сукцинимидил-4-(n-малеимидофенил)-бутирата(SMPB) и N-(п-малеимидофенил)изоцианата (PMPI), сульфо-Mal, ПЭГ4-Mal и СХ1-1.
78. Способ по п. 1, отличающийся тем, что клеточносвязывающий агент выбран из группы, состоящей из антител, интерферонов, интерлейкина 2 (IL-2), интерлейкина 3 (IL-3), интерлейкина 4 (IL-4), интерлейкина 6 (IL-6), инсулина, EGF, TGF-α, FGF, G-CSF, VEGF, MCSF, GM-CSF и трансферрина.
79. Способ по п. 78, отличающийся тем, что клеточносвязывающий агент представляет собой антитело.
80. Способ по п. 79, отличающийся тем, что антитело представляет собой моноклональное антитело.
81. Способ по п. 80, отличающийся тем, что антитело представляет собой гуманизированное моноклональное антитело.
82. Способ по п. 78, отличающийся тем, что клеточносвязывающий агент представляет собой антитело, выбранное из группы, состоящей из huB4, huC242, трастузумаба, биватузумаба, сибротузумаба, huDS6, ритуксимаба, анти-CD33 антитела, анти-CD27L антитела, анти-Her2 антитела, анти-EGFR антитела, анти-EGFRvIII антитела, Cripto, анти-CD138 антитела, анти-CD38 антитела, анти-EphA2 антитела, интегрин-направленного антитела, анти-CD37 антитела, антитела антифолатного рецептора, анти-Her3 антитела, антитела В-В4 и анти-IGFIR антитела.
83. Способ по п. 1, отличающийся тем, что цитотоксический агент выбран из группы, состоящей из майтанзиноидов, таксанов и СС1065.
84. Способ по п. 83, отличающийся тем, что цитотоксический агент представляет собой майтанзиноид.
85. Способ по п. 84, отличающийся тем, что майтанзиноид содержит группу тиола.
86. Способ по п. 85, отличающийся тем, что майтанзиноид представляет собой N2′-дезацетил-N2′-(3-меркапто-1-оксопропил)-майтанзин (DM1) или N2′-дезацетил-N2′-(4-метил-4-меркапто-1-оксопентил)-майтанзин (DM4).
87. Способ по п. 1, отличающийся тем, что цитотоксический агент представляет собой DM1, бифункциональный сшивающий агент представляет собой SMCC, а клеточносвязывающий агент представляет собой антитело huCD37-3.
88. Способ по п. 1, отличающийся тем, что цитотоксический агент представляет собой DM1, бифункциональный сшивающий агент представляет собой SMCC, а клеточносвязывающий агент представляет собой антитело EGFR-7R.
89. Способ по п. 1, отличающийся тем, что цитотоксический агент представляет собой DM1, бифункциональный сшивающий агент представляет собой SMCC, а клеточносвязывающий агент представляет собой анти-EGFRvIII антитело.
90. Способ по п. 1, отличающийся тем, что цитотоксический агент представляет собой DM1, бифункциональный сшивающий агент представляет собой SMCC, а клеточносвязывающий агент представляет собой анти-CD27L антитело.
91. Способ по п. 1, отличающийся тем, что цитотоксический агент представляет собой DM1, бифункциональный сшивающий агент представляет собой SMCC, а клеточносвязывающий агент представляет собой трастузумаб.
RU2015116883A 2012-10-04 2013-10-04 Применение ионообменной мембраны для удаления примесей из конъюгатов клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом RU2015116883A (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261709871P 2012-10-04 2012-10-04
US61/709,871 2012-10-04
PCT/US2013/063503 WO2014055893A1 (en) 2012-10-04 2013-10-04 Use of an ion exchange membrane to remove impurities from cell-binding agent cytotoxic agent conjugates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2015116883A true RU2015116883A (ru) 2016-11-27

Family

ID=50435480

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015116883A RU2015116883A (ru) 2012-10-04 2013-10-04 Применение ионообменной мембраны для удаления примесей из конъюгатов клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом

Country Status (13)

Country Link
US (1) US20150307596A1 (ru)
EP (1) EP2903450A4 (ru)
JP (1) JP2015535215A (ru)
CN (1) CN105208876A (ru)
AU (1) AU2013326897A1 (ru)
CA (1) CA2886996A1 (ru)
HK (1) HK1213148A1 (ru)
IL (1) IL238111A0 (ru)
IN (1) IN2015DN03203A (ru)
MX (1) MX2015004258A (ru)
RU (1) RU2015116883A (ru)
SG (1) SG11201502430QA (ru)
WO (1) WO2014055893A1 (ru)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2399609B1 (en) 2005-08-24 2015-03-18 ImmunoGen, Inc. Process for preparing maytansinoid antibody conjugates
SG176068A1 (en) 2009-06-03 2011-12-29 Immunogen Inc Conjugation methods
RS58367B1 (sr) 2011-03-29 2019-03-29 Immunogen Inc Priprema konjugata antitela i majtanzinoida jednostepenim postupkom
RU2018122734A (ru) 2012-10-04 2018-07-24 Иммуноджен, Инк. Использование пвдф-мембраны для очистки конъюгатов клеточно-связывающий агент-цитотоксический агент
GB201616758D0 (en) * 2016-10-03 2016-11-16 Ge Healthcare Bio Sciences Ab Novel chromatography media
CN108549763B (zh) * 2018-04-09 2021-06-01 电子科技大学 一种用于离子推进器数值模拟的电荷交换碰撞mcc方法

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ533657A (en) * 2002-01-03 2008-01-31 Smithkline Beecham Corp Methods for the preparation of immunoconjugates, in particular maytansinoids conjugated to a monoclonal antibody
US20090068178A1 (en) * 2002-05-08 2009-03-12 Genentech, Inc. Compositions and Methods for the Treatment of Tumor of Hematopoietic Origin
US20060182750A1 (en) * 2005-02-11 2006-08-17 Immunogen, Inc. Process for preparing stable drug conjugates
US20110166319A1 (en) * 2005-02-11 2011-07-07 Immunogen, Inc. Process for preparing purified drug conjugates
EP2399609B1 (en) * 2005-08-24 2015-03-18 ImmunoGen, Inc. Process for preparing maytansinoid antibody conjugates
SG176068A1 (en) * 2009-06-03 2011-12-29 Immunogen Inc Conjugation methods
RS58367B1 (sr) * 2011-03-29 2019-03-29 Immunogen Inc Priprema konjugata antitela i majtanzinoida jednostepenim postupkom

Also Published As

Publication number Publication date
IN2015DN03203A (ru) 2015-10-02
AU2013326897A1 (en) 2015-05-07
CA2886996A1 (en) 2014-04-10
US20150307596A1 (en) 2015-10-29
EP2903450A1 (en) 2015-08-12
HK1213148A1 (zh) 2016-06-30
JP2015535215A (ja) 2015-12-10
SG11201502430QA (en) 2015-04-29
MX2015004258A (es) 2015-09-25
CN105208876A (zh) 2015-12-30
IL238111A0 (en) 2015-05-31
WO2014055893A1 (en) 2014-04-10
EP2903450A4 (en) 2016-05-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2015116882A (ru) Использование пвдф-мембраны для очистки конъюгатов клеточно-связывающий агент - цитотоксический агент
RU2015116883A (ru) Применение ионообменной мембраны для удаления примесей из конъюгатов клеточносвязывающего агента с цитотоксическим агентом
JP7269210B2 (ja) １段階の工程によるマイタンシノイド－抗体複合体の調製
JP2016502501A5 (ru)
HRP20190898T1 (hr) Postupci konjugacije
JP5350792B2 (ja) メイタンシノイド（ｍａｙｔａｎｓｉｎｏｉｄ）抗体複合体の調製方法
US20120259100A1 (en) Process for manufacturing conjugates of improved homogeneity
JP2009506032A5 (ru)
WO2012135517A2 (en) Preparation of maytansinoid antibody conjugates by a one-step process
EP2790724A1 (en) Use of n-hydroxysuccinimide to improve conjugate stability
BR112013025225B1 (pt) Preparação de conjugados de anticorpo de maitansinoide por processo de uma etapa
NZ616509B2 (en) Preparation of maytansinoid antibody conjugates by a one-step process

Legal Events

Date Code Title Description
FA93 Acknowledgement of application withdrawn (no request for examination)

Effective date: 20161005