Claims (24)
1. Способ получения мономера изопрена, включающий:1. The method of producing isoprene monomer, including:
1) культивирование изопрен-синтезирующего микроорганизма в присутствии ростового агента в достаточной концентрации для роста изопрен-синтезирующего микроорганизма;1) the cultivation of an isoprene-synthesizing microorganism in the presence of a growth agent in a sufficient concentration for the growth of an isoprene-synthesizing microorganism;
2) снижение достаточной концентрации ростового агента для индукции синтеза мономера изопрена изопрен-синтезирующим микроорганизмом; и2) a decrease in a sufficient concentration of a growth agent for the induction of the synthesis of isoprene monomer by an isoprene-synthesizing microorganism; and
3) культивирование изопрен-синтезирующего микроорганизма для синтеза мономера изопрена.3) the cultivation of an isoprene-synthesizing microorganism for the synthesis of isoprene monomer.
2. Способ по п. 1, в котором изопрен-синтезирующий микроорганизм обладает способностью синтезировать изопрен в зависимости от промотора, который обратным образом зависит от ростового агента.2. The method according to p. 1, in which the isoprene-synthesizing microorganism has the ability to synthesize isoprene depending on the promoter, which inversely depends on the growth agent.
3. Способ по пп. 1, в котором ростовым агентом является кислород.3. The method according to PP. 1, in which the growth agent is oxygen.
4. Способ по п. 3, в котором изопрен-синтезирующий микроорганизм является аэробным микроорганизмом.4. The method of claim 3, wherein the isoprene synthesizing microorganism is an aerobic microorganism.
5. Способ по п. 2, в котором промотор является микроаэробно индуцируемым промотором.5. The method of claim 2, wherein the promoter is a microaerobically inducible promoter.
6. Способ по п. 5, в котором микроаэробно индуцируемый промотор является промотором гена, кодирующего лактатдегидрогеназу, или промотором гена, кодирующего α-ацетолактат-декарбоксилазу.6. The method of claim 5, wherein the microaerobically inducible promoter is a promoter of a gene encoding a lactate dehydrogenase, or a promoter of a gene encoding an α-acetolactate decarboxylase.
7. Способ по п. 3, включающий дополнительно:7. The method according to p. 3, further comprising:
1′) подачу кислорода в жидкую фазу, содержащую изопрен-синтезирующий микроорганизм, в системе, включающей газовую фазу и жидкую фазу, для роста изопрен-синтезирующего микроорганизма в присутствии растворенного кислорода в достаточной концентрации;1 ′) the supply of oxygen to the liquid phase containing the isoprene-synthesizing microorganism in a system comprising the gas phase and the liquid phase for the growth of the isoprene-synthesizing microorganism in the presence of dissolved oxygen in a sufficient concentration;
2′) снижение концентрации растворенного кислорода в жидкой фазе для индукции синтеза мономера изопрена изопрен-синтезирующим микроорганизмом в жидкой фазе;2 ′) a decrease in the concentration of dissolved oxygen in the liquid phase to induce the synthesis of isoprene monomer by an isoprene-synthesizing microorganism in the liquid phase;
3′) культивирование изопрен-синтезирующего микроорганизма в жидкой фазе для синтеза мономера изопрена; и3 ′) cultivation of an isoprene-synthesizing microorganism in the liquid phase for the synthesis of isoprene monomer; and
4′) сбор мономера изопрена.4 ′) collection of isoprene monomer.
8. Способ по п. 7, в котором концентрация кислорода в газовой фазе контролируется в зависимости от концентрации растворенного кислорода в жидкой фазе, и в котором концентрация растворенного кислорода в жидкой фазе уменьшается, чтобы избежать взрыва изопрена в газовой фазе.8. The method according to claim 7, in which the concentration of oxygen in the gas phase is controlled depending on the concentration of dissolved oxygen in the liquid phase, and in which the concentration of dissolved oxygen in the liquid phase is reduced to avoid isoprene explosion in the gas phase.
9. Способ по п. 7, в котором концентрация растворенного кислорода в жидкой фазе на стадиях 2′) и 3′) в п. 7 составляет 0,34 ч/млн или меньше.9. The method of claim 7, wherein the concentration of dissolved oxygen in the liquid phase in steps 2 ′) and 3 ′) in step 7 is 0.34 ppm or less.
10. Способ по п. 1, в котором скорость синтеза изопрена в фазе индукции составляет 80 ч/млн/vvm/ч или меньше.10. The method according to p. 1, in which the rate of synthesis of isoprene in the induction phase is 80 ppm / vvm / h or less.
11. Способ по п. 1, в котором ростовым агентом являются соединения фосфора.11. The method of claim 1, wherein the growth agent is phosphorus compounds.
12. Способ по п. 11, в котором промотором является индуцируемый фосфорным голоданием промотор.12. The method of claim 11, wherein the promoter is a phosphorus-starvation-induced promoter.
13. Способ по п. 12, в котором индуцируемым фосфорным голоданием промотором является промотор гена, кодирующего кислую фосфатазу, или промотор гена, кодирующего переносчик фосфора.13. The method of claim 12, wherein the phosphorus-starvation-induced promoter is a promoter of a gene encoding acid phosphatase or a promoter of a gene encoding a phosphorus transporter.
14. Способ по п. 12, в котором синтез мономера изопрена изопрен-синтезирующим микроорганизмом индуцируется в присутствии общего фосфора в концентрации 50 мг/л или меньше.14. The method of claim 12, wherein the synthesis of isoprene monomer by an isoprene-synthesizing microorganism is induced in the presence of total phosphorus at a concentration of 50 mg / L or less.
15. Способ по п. 12, в котором скорость синтеза изопрена в фазе индукции составляет 600 ч/млн/vvm/ч или меньше.15. The method according to p. 12, in which the rate of synthesis of isoprene in the induction phase is 600 ppm / vvm / h or less.
16. Способ по п. 1, в котором изопрен-синтезирующий микроорганизм обладает способностью синтезировать диметилаллил-дифосфат по метилэритрит-фосфатному пути.16. The method according to p. 1, in which the isoprene-synthesizing microorganism has the ability to synthesize dimethylallyl diphosphate along the methyletol phosphate pathway.
17. Способ по п. 1, в котором изопрен-синтезирующий микроорганизм обладает способностью синтезировать диметилаллил-дифосфат по мевалонатному пути.17. The method according to p. 1, in which the isoprene-synthesizing microorganism has the ability to synthesize dimethylallyl diphosphate along the mevalonate pathway.
18. Способ по п. 1, в котором изопрен-синтезирующий микроорганизм представляет собой микроорганизм, принадлежащий к семейству Enterobacteriaceae.18. The method of claim 1, wherein the isoprene-synthesizing microorganism is a microorganism belonging to the Enterobacteriaceae family.
19. Способ по п. 18, в котором изопрен-синтезирующий микроорганизм представляет собой микроорганизм, принадлежащий к роду Pantoea, Enterobacter или Escherichia.19. The method according to p. 18, in which the isoprene-synthesizing microorganism is a microorganism belonging to the genus Pantoea, Enterobacter or Escherichia.
20. Способ по п. 18, в котором изопрен-синтезирующим микроорганизмом являются Pantoea ananatis, Enterobacter aerogenes или Escherichia coli.20. The method of claim 18, wherein the isoprene synthesizing microorganism is Pantoea ananatis, Enterobacter aerogenes, or Escherichia coli.
21. Способ получения полимера изопрена, включающий в себя:21. A method of producing an isoprene polymer, including:
(I) синтез мономера изопрена способом по любому из пп. 1-20; и(I) synthesis of isoprene monomer by the method according to any one of paragraphs. 1-20; and
(II) полимеризацию мономера изопрена с образованием полимера изопрена.(Ii) polymerizing an isoprene monomer to form an isoprene polymer.
22. Полимер, полученный из изопрена, полученного способом по любому из пп. 1-20.22. The polymer obtained from isoprene obtained by the method according to any one of paragraphs. 1-20.
23. Резиновая смесь, содержащая полимер по п. 22.23. A rubber composition containing a polymer according to claim 22.
24. Шина, изготовленная с использованием резиновой смеси по п. 23.
24. A tire made using a rubber composition according to claim 23.