Claims (40)
1. Способ получения изопреноидного соединения, включающий:1. A method of producing an isoprenoid compound, comprising:
1) культивирование синтезирующего изопреноидное соединение микроорганизма в присутствии ростового агента в достаточной концентрации для роста синтезирующего изопреноидное соединение микроорганизма;1) the cultivation of an isoprenoid compound synthesizing microorganism in the presence of a growth agent in a sufficient concentration for the growth of an isoprenoid compound synthesizing microorganism;
2) снижение достаточной концентрации ростового агента для индукции синтеза изопреноидного соединения синтезирующим изопреноидное соединение микроорганизмом; и2) a decrease in a sufficient concentration of a growth agent to induce the synthesis of an isoprenoid compound by a microorganism synthesizing an isoprenoid compound; and
3) культивирование синтезирующего изопреноидное соединение микроорганизма для синтеза изопреноидного соединения.3) the cultivation of an isoprenoid compound synthesizing microorganism for the synthesis of an isoprenoid compound.
2. Способ по п. 1, в котором синтезирующий изопреноидное соединение микроорганизм обладает способностью синтезировать изопреноидное соединение в зависимости от промотора, активность которого обратным образом зависит от ростового агента.2. The method of claim 1, wherein the microorganism synthesizing the isoprenoid compound has the ability to synthesize the isoprenoid compound depending on the promoter, the activity of which inversely depends on the growth agent.
3. Способ по п. 1, в котором ростовым агентом является кислород.3. The method of claim 1, wherein the growth agent is oxygen.
4. Способ по п. 3, в котором синтезирующим изопреноидное соединение микроорганизмом является аэробный микроорганизм.4. The method according to p. 3, in which the isoprenoid-synthesizing compound is a microorganism is an aerobic microorganism.
5. Способ по п. 2, в котором промотором является микроаэробно индуцируемый промотор.5. The method of claim 2, wherein the promoter is a microaerobically inducible promoter.
6. Способ по п. 5, в котором микроаэробно индуцируемым промотором является промотор гена, кодирующего лактатдегидрогеназу, или промотор гена, кодирующего α-ацетолактат-декарбоксилазу.6. The method of claim 5, wherein the microaerobically inducible promoter is a promoter of a gene encoding lactate dehydrogenase, or a promoter of a gene encoding α-acetolactate decarboxylase.
7. Способ по любому из пп. 1-6, в котором изопреноидным соединением является линанол, а синтезирующим изопреноидное соединение микроорганизмом является синтезирующий линанол микроорганизм.7. The method according to any one of paragraphs. 1-6, in which the isoprenoid compound is linanol, and the isoprenoid compound synthesizing microorganism is a linanol synthesizing microorganism.
8. Способ по любому из пп. 1-6, в котором изопреноидным соединением является мономер изопрена, а синтезирующим изопреноидное соединение микроорганизмом является синтезирующий изопрен микроорганизм.8. The method according to any one of paragraphs. 1-6, in which the isoprenoid compound is isoprene monomer, and the isoprenoid compound synthesizing microorganism is an isoprene synthesizing microorganism.
9. Способ по любому из пп. 1-6, в котором синтезирующий изопреноидное соединение микроорганизм обладает способностью синтезировать диметилаллил-дифосфат по метилэритрит-фосфатному пути.9. The method according to any one of paragraphs. 1-6, in which the microorganism synthesizing an isoprenoid compound has the ability to synthesize dimethylallyl diphosphate along the methyryl erythritol phosphate pathway.
10. Способ по любому из пп. 1-6, в котором синтезирующий изопреноидное соединение микроорганизм обладает способностью синтезировать диметилаллил-дифосфат по мевалонатному пути.10. The method according to any one of paragraphs. 1-6, in which the microorganism synthesizing the isoprenoid compound has the ability to synthesize dimethylallyl diphosphate along the mevalonate pathway.
11. Способ по любому из пп. 1-6, в котором синтезирующий изопреноидное соединение микроорганизм представляет собой микроорганизм, принадлежащий к семейству Enterobacteriaceae.11. The method according to any one of paragraphs. 1-6, in which the isoprenoid compound synthesizing microorganism is a microorganism belonging to the Enterobacteriaceae family.
12. Способ по п. 11, в котором синтезирующий изопреноидное соединение микроорганизм представляет собой микроорганизм, принадлежащий к роду Pantoea, Enterobacter или Escherichia.12. The method of claim 11, wherein the isoprenoid-synthesizing microorganism is a microorganism belonging to the genus Pantoea, Enterobacter, or Escherichia.
13. Способ по п. 12, в котором синтезирующим изопреноидное соединение микроорганизмом являются Pantoea ananatis, Enterobacter aerogenes или Escherichia coli.13. The method of claim 12, wherein the isoprenoid-synthesizing microorganism is Pantoea ananatis, Enterobacter aerogenes, or Escherichia coli.
14. Способ получения мономера изопрена, включающий:14. A method of producing isoprene monomer, including:
1') подачу кислорода в жидкую фазу, содержащую изопрен-синтезирующий микроорганизм, в системе, содержащей газовую фазу и жидкую фазу, для роста изопрен-синтезирующего микроорганизма в присутствии растворенного кислорода в достаточной концентрации;1 ') the supply of oxygen to the liquid phase containing the isoprene-synthesizing microorganism in a system containing the gas phase and the liquid phase, for the growth of the isoprene-synthesizing microorganism in the presence of dissolved oxygen in a sufficient concentration;
2') снижение концентрации растворенного кислорода в жидкой фазе для индукции синтеза мономера изопрена изопрен-синтезирующим микроорганизмом в жидкой фазе;2 ') a decrease in the concentration of dissolved oxygen in the liquid phase to induce the synthesis of isoprene monomer by an isoprene-synthesizing microorganism in the liquid phase;
3') культивирование изопрен-синтезирующего микроорганизма в жидкой фазе для синтеза мономера изопрена; и3 ') cultivation of an isoprene-synthesizing microorganism in the liquid phase for the synthesis of isoprene monomer; and
4') сбор мономера изопрена.4 ') collection of isoprene monomer.
15. Способ по п. 14, в котором концентрация кислорода в газовой фазе контролируется в зависимости от концентрации растворенного кислорода в жидкой фазе, и в котором концентрация растворенного кислорода в жидкой фазе уменьшается, чтобы избежать взрыва изопрена в газовой фазе.15. The method according to p. 14, in which the concentration of oxygen in the gas phase is controlled depending on the concentration of dissolved oxygen in the liquid phase, and in which the concentration of dissolved oxygen in the liquid phase is reduced in order to avoid isoprene explosion in the gas phase.
16. Способ по п. 14, в котором концентрация растворенного кислорода в жидкой фазе составляет 0,34 ppm или меньше чем в пп. 2') и 3') по п. 9.16. The method according to p. 14, in which the concentration of dissolved oxygen in the liquid phase is 0.34 ppm or less than in paragraphs. 2 ') and 3') according to claim 9.
17. Способ по п. 14, в котором скорость синтеза изопрена в фазе индукции составляет 80 ppm/vvm/ч или меньше.17. The method according to p. 14, in which the rate of synthesis of isoprene in the induction phase is 80 ppm / vvm / h or less.
18. Способ по п. 1, в котором ростовым агентом являются соединения фосфора.18. The method of claim 1, wherein the growth agent is phosphorus compounds.
19. Способ по п. 2, в котором промотором является индуцируемый фосфорным голоданием промотор.19. The method of claim 2, wherein the promoter is a phosphorus-starvation-induced promoter.
20. Способ по п. 19, в котором индуцируемым фосфорным голоданием промотором является промотор гена, кодирующего кислую фосфатазу, или промотор гена, кодирующего переносчик фосфора.20. The method of claim 19, wherein the phosphorus-starvation-induced promoter is a promoter of a gene encoding acid phosphatase, or a promoter of a gene encoding a phosphorus transporter.
21. Способ по п. 19, в котором синтез мономера изопрена изопрен-синтезирующим микроорганизмом индуцируется при общем содержании фосфора 50 мг/л или меньше.21. The method according to p. 19, in which the synthesis of isoprene monomer by an isoprene-synthesizing microorganism is induced with a total phosphorus content of 50 mg / l or less.
22. Способ по п. 19, в котором скорость синтеза изопрена в фазе индукции составляет 600 ppm/vvm/ч или меньше.22. The method according to p. 19, in which the rate of synthesis of isoprene in the induction phase is 600 ppm / vvm / h or less.
23. Способ по любому из пп. 14-22, в котором синтезирующий изопреноидное соединение микроорганизм обладает способностью синтезировать диметилаллил-дифосфат по метилэритрит-фосфатному пути.23. The method according to any one of paragraphs. 14-22, in which the microorganism synthesizing an isoprenoid compound has the ability to synthesize dimethylallyl diphosphate via the methyrylanth phosphate pathway.
24. Способ по любому из пп. 14-22, в котором синтезирующий изопреноидное соединение микроорганизм обладает способностью синтезировать диметилаллил-дифосфат по мевалонатному пути.24. The method according to any one of paragraphs. 14-22, in which the microorganism synthesizing an isoprenoid compound has the ability to synthesize dimethylallyl diphosphate along the mevalonate pathway.
25. Способ по любому из пп. 14-22, в котором синтезирующий изопреноидное соединение микроорганизм представляет собой микроорганизм, принадлежащий к семейству Enterobacteriaceae.25. The method according to any one of paragraphs. 14-22, wherein the isoprenoid-synthesizing microorganism is a microorganism belonging to the Enterobacteriaceae family.
26. Способ по п. 25, в котором синтезирующий изопреноидное соединение микроорганизм представляет собой микроорганизм, принадлежащий к роду Pantoea, Enterobacter или Escherichia.26. The method of claim 25, wherein the microorganism synthesizing the isoprenoid compound is a microorganism belonging to the genus Pantoea, Enterobacter or Escherichia.
27. Способ по п. 26, в котором синтезирующим изопреноидное соединение микроорганизмом являются Pantoea ananatis, Enterobacter aerogenes или Escherichia coli.27. The method according to p. 26, in which the isoprenoid-synthesizing microorganism is Pantoea ananatis, Enterobacter aerogenes or Escherichia coli.
28. Способ получения полимера изопрена, включающий в себя:28. A method of producing an isoprene polymer, including:
(I) синтез мономера изопрена способом по п. 8; и(I) synthesis of isoprene monomer by the method of claim 8; and
(II) полимеризацию мономера изопрена для образования полимера изопрена.(Ii) polymerizing an isoprene monomer to form an isoprene polymer.
29. Полимер, полученный из изопрена, полученного способом по п. 8.29. The polymer obtained from isoprene obtained by the method according to p. 8.
30. Композиция резины, содержащая полимер по п. 29.30. A rubber composition containing a polymer according to claim 29.
31. Шина, изготовленная с использованием композиции резины по п. 30.31. A tire made using a rubber composition according to claim 30.