RU2008589C1 - Method for contact drying microorganisms - Google Patents
Method for contact drying microorganisms Download PDFInfo
- Publication number
- RU2008589C1 RU2008589C1 SU5042104A RU2008589C1 RU 2008589 C1 RU2008589 C1 RU 2008589C1 SU 5042104 A SU5042104 A SU 5042104A RU 2008589 C1 RU2008589 C1 RU 2008589C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- microorganisms
- suspension
- drying
- sorbent
- survival
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к технологии производства препаратов, а именно к производству сухих микробных препаратов. The invention relates to a technology for the production of drugs, namely the production of dry microbial preparations.
Высушивание является наиболее популярным методом консервации микроорганизмов при приготовлении препаратов широкого применения, пpедназначенных для хранения в обычном бытовом холодильнике (0. . . 4оС) или при комнатной температуре. Изредка в практике музейного хранения культур микроорганизмов используется также метод консервации под слоем масла, которое обеспечивает защиту от воздействия кислорода. Однако препараты, полученные таким способом, хранятся хуже сухих и менее удобны в работе.Drying is the most popular method of preservation of microorganisms in the preparation of broad application ppednaznachennyh for storage in a conventional household refrigerator (0... 4 ° C) or at room temperature. Occasionally, in the practice of museum storage of cultures of microorganisms, the conservation method under a layer of oil is also used, which provides protection against oxygen. However, preparations obtained in this way are stored worse than dry and less convenient to use.
Ряд известных способов приготовления сухих препаратов включает стадию диспергирования высушиваемого объекта в гидрофобной жидкости с целью увеличения поверхности испарения и повышения эффективности теплоотвода, а в случае сублимационной сушки - увеличения скорости замораживания при диспергировании в холодной жидкости. Тепловые методы сушки, в том числе с использованием микроволнового нагрева, мало пригодны для получения микробных биопрепаратов, так как приводят к сильной инактивации микроорганизмов. Основной недостаток сублимационной сушки - высокая сложность аппаратурного оформления; кроме того, полученный препарат обычно обладает очень высокой гигроскопичностью. Наконец, все методы этой группы связаны с определенными потерями высушиваемого вещества и гидрофобной жидкости в ходе сушки, а также существенными энергетическими затратами. A number of known methods for preparing dry preparations include the step of dispersing the dried object in a hydrophobic liquid in order to increase the evaporation surface and increase the heat removal efficiency, and in the case of freeze-drying, to increase the freezing rate when dispersed in a cold liquid. Thermal drying methods, including using microwave heating, are not very suitable for obtaining microbial biological products, since they lead to a strong inactivation of microorganisms. The main disadvantage of freeze-drying is the high complexity of the hardware; in addition, the resulting preparation usually has a very high hygroscopicity. Finally, all methods of this group are associated with certain losses of the dried substance and hydrophobic liquid during drying, as well as significant energy costs.
В производстве сухих микробных препаратов широко используется метод контактной сушки, суть которого состоит в смешивании высушиваемого объекта (например, суспензии микроорганизмов) с сорбентом влаги. In the production of dry microbial preparations, the contact drying method is widely used, the essence of which is to mix the dried object (for example, a suspension of microorganisms) with a moisture sorbent.
В пищевой промышленности для приготовления контактно-высушенных препаратов в качестве сорбентов применяются сухие крахмал, мука. В практике музейного хранения штаммов микроорганизмов наиболее популярным сорбентом является силикагель. Упомянутые препараты характеризуются низким уровнем биологической концентрации. В первом случае это обусловлено тем, что для высушивания требуется большое количество крахмала или муки на единицу высушиваемой суспензии, и препарат получается сильно разбавленным. В случае высушивания на силикагеле существенный вклад в падение концентрации вносит инактивация микроорганизмов в ходе сушки. In the food industry, dry starch and flour are used as sorbents for the preparation of contact-dried preparations. In the practice of museum storage of microorganism strains, the most popular sorbent is silica gel. The mentioned preparations are characterized by a low level of biological concentration. In the first case, this is due to the fact that drying requires a large amount of starch or flour per unit of the dried suspension, and the preparation is highly diluted. In the case of drying on silica gel, a significant contribution to the decrease in concentration is made by the inactivation of microorganisms during drying.
Для получения высококонцентрированных биопрепаратов используются высоковлагоемкие сорбенты (ионообменные смолы, цеолит, окись алюминия), обеспечивающие достижение оптимального для хранения уровня остаточной влажности биокомпонента при минимальном содержании сорбента в биопрепарате. Однако использование таких сорбентов для высушивания микроорганизмов обычно приводит к значительной инактивации последних из-за резкого обезвоживания, разогрева смеси в ходе сушки. To obtain highly concentrated biological products, highly moisture-resistant sorbents (ion-exchange resins, zeolite, alumina) are used, which ensure the achievement of an optimal storage level of residual moisture of the biological component with a minimum sorbent content in the biological product. However, the use of such sorbents for drying microorganisms usually leads to significant inactivation of the latter due to severe dehydration, heating the mixture during drying.
Известен способ консервации микроорганизмов путем смешивания с сухим силикагелем. Пробирки (13х100 мм) наполовину заполняют силикагелем, затыкают хлопковыми пробками, подвергают сухой стерилизации при 180оС в течение 1,5 ч и помещают в контейнеры для остывания. По 0,5 мл суспензии микроорганизмов вносят в каждую пробирку, равномерно распределяя по объему. После выдерживания в течение недели при комнатной температуре отбирают небольшое количество содержимого каждой пробирки для тестирования, хлопковую пробку заменяют на пленку "Парафильм" и хранят пробирки при 5оС.A known method of preservation of microorganisms by mixing with dry silica gel. The tubes (13h100 mm) half filled with a silica gel plug cotton plugs, was subjected to dry sterilization at 180 ° C for 1.5 hours and placed in containers to cool. 0.5 ml of a suspension of microorganisms are added to each tube, evenly distributed throughout the volume. After storage for one week at room temperature, collected a small amount of the contents of each test tube, a cotton plug is replaced by a film "Parafilm" tubes and stored at 5 ° C.
Положительным результатом считается наличие в пробирке живых микроорганизмов. Их выживаемость в ходе сушки не определяется. A positive result is the presence of live microorganisms in vitro. Their survival during drying is not determined.
Данный способ имеет следующие недостатки:
выживаемость микроорганизмов в ходе сушки очень низка, поэтому данный способ не может широко использоваться для приготовления биопрепаратов;
микроорганизмы прилипают к поверхности частиц, полученная таким способом форма биопрепарата неудобна для применения в большинстве практических случаев.This method has the following disadvantages:
the survival of microorganisms during drying is very low, so this method cannot be widely used for the preparation of biological products;
microorganisms adhere to the surface of the particles; the form of a biological product obtained in this way is inconvenient for use in most practical cases.
Цель изобретения - повышение выживаемости микроорганизмов при контактной сушке. The purpose of the invention is to increase the survival of microorganisms in contact drying.
Это достигается путем предварительного смешивания суспензии микроорганизмов и/или сорбента влаги с гидрофобной жидкостью, содержащей или не содержащей стабилизатор суспензии (эмульсии). При этом гидрофобная жидкость обеспечивает эффективный теплоотвод из зоны контакта высушиваемого объекта с осушителем, облегчает перемешивание, замедляет влагоперенос и предохраняет суспензию микроорганизмов от воздействия кислорода и других повреждающих факторов. В целом это приводит к повышению выживаемости микроорганизмов в ходе контактной сушки по сравнению с известным способом. Полученный препарат имеет жидкий или пастообразный вид, удобен в применении и хорошо хранится. При использовании съедобных компонентов способ пригоден для производства препаратов, предназначенных для приема внутрь животными или людьми. This is achieved by pre-mixing a suspension of microorganisms and / or a moisture sorbent with a hydrophobic liquid, with or without a suspension stabilizer (emulsion). In this case, the hydrophobic liquid provides effective heat removal from the contact area of the dried object with the desiccant, facilitates mixing, slows down moisture transfer and protects the suspension of microorganisms from oxygen and other damaging factors. In General, this leads to increased survival of microorganisms during contact drying compared with the known method. The resulting preparation has a liquid or pasty appearance, is convenient to use and well stored. When using edible components, the method is suitable for the manufacture of preparations intended for oral administration by animals or people.
Для повышения биологической концентрации препарата после сушки гидрофобная жидкость может быть полностью или частично удалена. To increase the biological concentration of the drug after drying, the hydrophobic liquid can be completely or partially removed.
П р и м е р 1. В качестве сорбента влаги используется высушенная до остаточной влажности менее 0,1% порошкообразная окись алюминия, в качестве гидрофобной жидкости - кукурузное масло. Высушиванию подвергается суспензия микроорганизмов Bifidobacterium bifidum шт. 1, содержащая 10% лактозы, полученная путем глубинного культивирования микроорганизмов, центрифугирования культуральной жидкости и последующего суспендирования осадка в 20% -ном растворе лактозы в соотношении 1 мл раствора на 1 г осадка. PRI me R 1. As a moisture sorbent, powdered alumina dried to a residual moisture content of less than 0.1% is used, and corn oil is used as a hydrophobic liquid. A suspension of microorganisms Bifidobacterium bifidum pcs. 1, containing 10% lactose, obtained by deep cultivation of microorganisms, centrifugation of the culture fluid and subsequent suspension of the precipitate in a 20% lactose solution in the ratio of 1 ml of solution per 1 g of sediment.
100 мл кукурузного масла помещают в емкость гомогенизатора со стальным вращающимся ножом. При перемешивании вводят 30 г окиси алюминия. После достижения ее равномерного распределения в масле при продолжающемся перемешивании вводят 2 мл суспензии микроорганизмов. Продолжают перемешивание в течение 10 мин, затем образец переносят в колбу и помещают в холодильник с температурой 4оС. Через сутки проводят тестирование, 0,5 мл смеси помещают в 50 мл физиологического раствора (0,15 М хлористого натрия), содержащего 1% поверхностно-активного вещества Твин-20. Производят перемешивание пипеткой, затем подвергают встряхиванию в течение 15 мин и высевают в пробирки с полужидким агаром (среда Блаурокка с 1,5% добавкой агара). После инкубирования подсчитывают число колоний.100 ml of corn oil is placed in a homogenizer container with a steel rotating knife. With stirring, 30 g of alumina is introduced. After achieving its uniform distribution in oil with continued stirring, 2 ml of a suspension of microorganisms are introduced. Stirring was continued for 10 min, then the sample was transferred to a flask and placed in a refrigerator at 4 ° C. After one day conduct testing, 0.5 ml was placed in a 50 ml saline (0.15 M NaCl) containing 1% surfactant tween-20. Mix with a pipette, then shake for 15 minutes and seeded in tubes with semi-liquid agar (Blaurock medium with 1.5% agar supplement). After incubation, the number of colonies is counted.
Биологическая концентрация составила 1,3±0,3 ˙108 живых клеток на 1 г смеси, выживаемость 61% . В контрольном образце, полученном путем смешивания суспензии микроорганизмов с окисью алюминия без использования масла, выживаемость составила 8% . Таким образом, в данном случае благодаря применению предлагаемого способа наблюдается повышение выживаемости в 7,6 раза. После хранения в течение месяца при температуре 20оС жизнеспособность сохранили 85% микроорганизмов, что подтверждает эффективность высушивания. В дополнение, для подтверждения того факта, что микроороганизмы действительно находятся в высушенном состоянии, методом прямого определения давления водяного пара была измерена активность воды в смеси, составившая 0,15, что соответствует сухому состоянию.The biological concentration was 1.3 ± 0.3 ˙ 10 8 living cells per 1 g of the mixture, the survival rate of 61%. In the control sample obtained by mixing a suspension of microorganisms with aluminum oxide without the use of oil, the survival rate was 8%. Thus, in this case, due to the application of the proposed method, there is an increase in survival by 7.6 times. After storage for one month at 20 ° C viability retained 85% of the microorganisms, which confirms the efficiency of drying. In addition, to confirm the fact that microorganisms are indeed in a dried state, the activity of water in the mixture was measured by directly determining the pressure of water vapor, which amounted to 0.15, which corresponds to the dry state.
П р и м е р 2. В качестве сорбента влаги используется высушенная до остаточной влажности менее 0,1% гранулированная окись алюминия, размер гранул 0,7. . . 1,5 мм, в качестве гидрофобной жидкости - кукурузное масло. Высушиванию подвергается суспензия микроорганизмов Salmonella enteritidis шт. 2 Исаченко, содержащая 10% лактозы, приготовленная аналогично тому, как это описано в примере 1. PRI me R 2. As a moisture sorbent is used, dried to a residual moisture content of less than 0.1%, granular alumina, granule size of 0.7. . . 1.5 mm, as a hydrophobic liquid - corn oil. A suspension of Salmonella enteritidis microorganisms is exposed to drying. 2 Isachenko, containing 10% lactose, prepared in the same way as described in example 1.
100 мл кукурузного масла помещают в емкость гомогенизатора со стальным вращающимся ножом. В масло добавляют 5 г стабилизатора эмульсии - поверхностно-активного вещества Спан-20 (лаурил-сорбитан). При перемешивании вводят 10 мл суспензии микроорганизмов. После получения гомогенной суспензии (через 2-3 мин), последнюю выливают в стакан, содержащий 150 г окиси алюминия, охлажденной до 4оС. Содержимое стакана тщательно перемешивают стеклянной палочкой и помещают на 23 ч в холодильник при 4оС; затем производят тестирование. Препарат суспендируют по схеме, изложенной в примере 1, и высевают на плотную питательную среду, разлитую в чашки Петри. После инкубирования подсчитывают число колоний.100 ml of corn oil is placed in a homogenizer container with a steel rotating knife. 5 g of emulsion stabilizer, the surfactant Span-20 (lauryl sorbitan), are added to the oil. With stirring, 10 ml of a suspension of microorganisms are introduced. After obtaining a homogeneous suspension (2-3 min), the latter is poured into a beaker containing 150 g of aluminum oxide, chilled to 4 ° C. The contents of the beaker is stirred thoroughly with a glass rod and placed in a refrigerator for 23 hours at 4 ° C; then produce testing. The drug is suspended according to the scheme described in example 1, and plated on a solid nutrient medium, poured into Petri dishes. After incubation, the number of colonies is counted.
Биологическая концентрация составила 6,7±0,4˙ 108 живых клеток на 1 г смеси, выживаемость 79% . В контрольном образце, полученном путем смешивания суспензии микроорганизмов с окисью алюминия в тех же условиях, но без использования масла, выживаемость составила 24% . Таким образом, применение предлагаемого способа дает увеличение выживаемости в 3,3 раза. После хранения в течение месяца при 20оС жизнеспособность сохранили 87% микроорганизмов.The biological concentration was 6.7 ± 0.4˙ 10 8 living cells per 1 g of the mixture, survival rate 79%. In the control sample obtained by mixing a suspension of microorganisms with aluminum oxide under the same conditions, but without the use of oil, the survival rate was 24%. Thus, the application of the proposed method gives an increase in survival by 3.3 times. After storage for one month at 20 ° C viability retained 87% of the microorganisms.
Данный препарат может успешно использоваться для борьбы с мышевидными грызунами. This drug can be successfully used to combat mouse rodents.
П р и м е р 3. В качестве сорбента влаги используется высушенный до остаточной влажности менее 0,1% порошкообразный цеолит, в качестве гидрофобной жидкости - полиэтилсилоксан. Высушиванию подвергается суспензия микроорганизмов Escherichia coli K-12, содержащая 10% сахарозы (30% -ный раствор сахарозы добавляли в соотношении 1: 2 к жидкой культуре микроорганизмов). PRI me R 3. As a moisture sorbent, powdered zeolite dried to a residual moisture content of less than 0.1% is used, and polyethylsiloxane is used as a hydrophobic liquid. A suspension of Escherichia coli K-12 microorganisms containing 10% sucrose is subjected to drying (a 30% sucrose solution was added in a ratio of 1: 2 to the liquid culture of microorganisms).
100 мл полиэтилсилоксана помещают в емкость гомогенизатора со стальным вращающимся ножом. В жидкость добавляют 5 г поверхностно-активного вещества Спан-80. При перемешивании вводят 10 мл суспензии микроорганизмов. После получения гомогенной суспензии добавляют 30 г предварительно охлажденного до -10оС цеолита. Перемешивание продолжают в течение 15 мин, затем образец помещают в холодильник при 4оС на 20 ч, после чего производится тестирование по методу, изложенному в примере 2.100 ml of polyethylsiloxane is placed in a homogenizer container with a steel rotating knife. 5 g of Span-80 surfactant are added to the liquid. With stirring, 10 ml of a suspension of microorganisms are introduced. After a homogeneous suspension was added 30 g of precooled to -10 ° C zeolite. Stirring was continued for 15 min, then the sample was placed in a refrigerator at 4 ° C for 20 hours, after which testing is performed by the method described in Example 2.
Биологическая концентрация составила 5,4±0,5 х 108 живых клеток на 1 г смеси, выживаемость 35% . В контрольном образце (без использования гидрофобной жидкости) выживаемость составила 2,5% . Таким образом, наблюдается увеличение выживаемости в 14 раз.The biological concentration was 5.4 ± 0.5 x 10 8 living cells per 1 g of the mixture, the survival rate of 35%. In the control sample (without the use of hydrophobic fluid), the survival rate was 2.5%. Thus, there is an increase in survival by 14 times.
П р и м е р 4. В качестве сорбента влаги используется высушенная до остаточной влажности менее 1% ионообменная смола КБ-4П2, в качестве гидрофобной жидкости - перфтордекалин, в качестве стабилизатора эмульсии - аэросил АМ-1-300. Высушиванию подвергается суспензия микроорганизмов E. coli К-12, содержащая 10% сахарозы. PRI me R 4. As a moisture sorbent is used dried to a residual moisture content of less than 1% ion exchange resin KB-4P2, as a hydrophobic liquid - perfluorodecalin, as an emulsion stabilizer - Aerosil AM-1-300. A suspension of E. coli K-12 microorganisms containing 10% sucrose is subjected to drying.
В стакан с 50 мл перфтордекалина, предварительно охлажденный в водяной бане до температуры 3оС, вносят 2 мг аэросила. Производят перемешивание при помощи механической мешалки. При перемешивании добавляют 4 мл суспензии микроорганизмов; образуется равномерная эмульсия. К эмульсии добавляют 20 г ионообменной смолы КБ-4П2, предварительно высушенной в сушильном шкафу при температуре 105±3оС до остаточной влажности менее 1% и охлажденной до 0оС. Производится перемешивание малой интенсивности в течение 10 мин. Затем образец выдерживают в холодильнике при температуре 4оС в течение 20 ч, и производится тестиpование.The beaker with 50 ml perfluorodecalin, previously cooled in a water bath to a temperature of 3 ° C, made by Aerosil 2 mg. Mixing is carried out using a mechanical stirrer. With stirring, add 4 ml of a suspension of microorganisms; a uniform emulsion is formed. To the emulsion was added 20 g of CB-4n2 ion exchange resin, previously dried in an oven at 105 ± 3 ° C to a residual humidity of less than 1% and cooled to 0 ° C produced low intensity stirring for 10 min. The sample was then kept in a refrigerator at 4 ° C for 20 hours and produced testipovanie.
Нижнюю фракцию смеси, представляющую собой отслоившийся перфтордекалин, удаляют. Оставшуюся часть тщательно перемешивают, отбирают 0,5 мл и разводят в 9,5 мл охлажденной до 4оС среды культивирования, вновь тщательно перемешивают и производят высев на плотную питательную среду, разлитую в чашки Петри. После инкубирования подсчитывают число колоний.The lower fraction of the mixture, which is exfoliated perfluorodecalin, is removed. The remaining part was stirred thoroughly, is taken and diluted with 0.5 ml 9.5 ml chilled to 4 ° C the culture medium, and again mixed thoroughly to produce seeding dense nutrient medium poured into a Petri dish. After incubation, the number of colonies is counted.
Биологическая концентрация составила 3,3±0,3х108 живых клеток на 1 г, в контрольном образце (при непосредственном смешивании ионообменной смолы сначала с аэросилом, а затем с суспензией микроорганизмов в тех же количествах и при той же температуре бани) - около 1 млн живых клеток на 1 г; выживаемость 45% и около 0,05% соответственно.The biological concentration was 3.3 ± 0.3 × 10 8 living cells per 1 g, in the control sample (with direct mixing of the ion-exchange resin first with aerosil, and then with a suspension of microorganisms in the same quantities and at the same bath temperature) - about 1 million living cells per 1 g; survival rates of 45% and about 0.05%, respectively.
Таким образом, по сравнению с контрольным образцом наблюдается значительное увеличение выживаемости. Thus, compared with the control sample, there is a significant increase in survival.
П р и м е р 5. В качестве сорбента влаги используется высушенная до остаточной влажности менее 1% ионообменная смола КБ-4П2, в качестве гидрофобной жидкости - перфторгексан, в качестве стабилизатора суспензии - аэросил АМ-1-300. Высушиванию подвергается суспензия микроорганизмов E. coli К-12, содержащая 10% сахарозы. PRI me R 5. As a moisture sorbent, KB-4P2 ion-exchange resin dried to a residual moisture content of less than 1% is used, perfluorohexane is used as a hydrophobic liquid, and Aerosil AM-1-300 is used as a suspension stabilizer. A suspension of E. coli K-12 microorganisms containing 10% sucrose is subjected to drying.
В стакан с 50 мл перфторгексана, охлажденный в водяной бане до температуры 3оС, вносится 3 мг аэросила; производится перемешивание при помощи механической мешалки. При перемешивании добавляется 4 мл суспензии микроорганизмов, образуется равномерная эмульсия. К эмульсии при продолжающемся перемешивании добавляют 20 г сухой смолы КБ-4П2. Через 10 мин после введения смолы перемешивание прекращают и образец помещают в холодильник (4оС) на 21 ч. После выдерживания в холодильнике образец переносят в открытую чашку Петри и дают гидрофобной жидкости испариться при комнатной температуре, после чего производят тестирование образца по методу, описанному в примере 4.The beaker with 50 mL of perfluorohexane, cooled in a water bath to a temperature of 3 ° C, 3 mg of aerosil is introduced; mixing is carried out using a mechanical stirrer. With stirring, 4 ml of a suspension of microorganisms is added, a uniform emulsion is formed. To the emulsion, with continued stirring, add 20 g of dry resin KB-4P2. After 10 min after administration resins stirring was stopped and the sample was placed in a refrigerator (4 ° C) for 21 hours. After standing in a refrigerator sample was transferred to an open petri dish and allow the hydrophobic liquid to evaporate at room temperature, whereupon test sample by the method described in example 4.
Биологическая концентрация составила 1,2 ±0,1х109 живых клеток на 1 г, выживаемость 43% ; в контрольном образце (без использования гидрофобной жидкости) выживаемость составила менее 0,05% .The biological concentration was 1.2 ± 0.1 × 10 9 living cells per 1 g, survival rate 43%; in the control sample (without the use of hydrophobic fluid), survival was less than 0.05%.
Таким образом, по сравнению с контрольным образцом наблюдается значительное увеличение выживаемости. Thus, compared with the control sample, there is a significant increase in survival.
Как следует из приведенных примеров, предлагаемый способ позволяет существенно повысить выживаемость микроорганизмов в ходе контактной сушки и получить препараты, которые могут быть использованы в ветеринарии и медицине, в практике музейного хранения штаммов, для борьбы с грызунами и в других областях народного хозяйства. (56) 1. Бекер М. Е. Обезвоживание микробной биомассы, Рига, Зинатне, 1967, 361 с. As follows from the above examples, the proposed method can significantly increase the survival of microorganisms during contact drying and obtain preparations that can be used in veterinary medicine and medicine, in the practice of museum storage of strains, for rodent control and other areas of the national economy. (56) 1. Becker M.E. Dehydration of microbial biomass, Riga, Zinatne, 1967, 361 pp.
2. Калуцкий Л. В. , Сидякина Т. М. Сохранение жизнеспособности микроорганизмами в природе и основные подходы к консервированию коллекционных культур. Тезисы докладов 2-й Всесоюзной конференции по анабиозу, Рига, 16-18 октября 1984 г. , с. 19-20. 2. Kalutsky L. V., Sidyakina T. M. Preservation of viability by microorganisms in nature and the main approaches to the conservation of collection cultures. Abstracts of the 2nd All-Union Conference on suspended animation, Riga, October 16-18, 1984, p. 19-20.
3. Grivell A. R. Jackon J. F. Microbiol culture preservation with silica gell // J. Gen. Microbiol. , 1969, v. 58, N 3, p. 423-425. 3. Grivell A. R. Jackon J. F. Microbiol culture preservation with silica gell // J. Gen. Microbiol. , 1969, v. 58, N 3, p. 423-425.
4. Perkins J. Preservation of Nenrospora stock cultures with anhydrous silica gel. //Can. J. Microbiol, 1962, v. 8, р. 591-594. 4. Perkins J. Preservation of Nenrospora stock cultures with anhydrous silica gel. // Can. J. Microbiol, 1962, v. 8, p. 591-594.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5042104 RU2008589C1 (en) | 1992-05-14 | 1992-05-14 | Method for contact drying microorganisms |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5042104 RU2008589C1 (en) | 1992-05-14 | 1992-05-14 | Method for contact drying microorganisms |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008589C1 true RU2008589C1 (en) | 1994-02-28 |
Family
ID=21604184
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU5042104 RU2008589C1 (en) | 1992-05-14 | 1992-05-14 | Method for contact drying microorganisms |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2008589C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004044186A1 (en) * | 2002-11-11 | 2004-05-27 | Zakrytoe Aktsionernoe Obschestvo 'kul' | Probiotic additive and the production method thereof |
| RU2629866C1 (en) * | 2012-06-28 | 2017-09-04 | Сычуань Юаньдашуян Фармасьютикал Ко., Лтд. | Method for final inactivation of pathogenic microorganisms |
| US10655152B2 (en) | 2014-09-30 | 2020-05-19 | Solenis Technologies, L.P. | Method for producing an amide |
-
1992
- 1992-05-14 RU SU5042104 patent/RU2008589C1/en active
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004044186A1 (en) * | 2002-11-11 | 2004-05-27 | Zakrytoe Aktsionernoe Obschestvo 'kul' | Probiotic additive and the production method thereof |
| RU2629866C1 (en) * | 2012-06-28 | 2017-09-04 | Сычуань Юаньдашуян Фармасьютикал Ко., Лтд. | Method for final inactivation of pathogenic microorganisms |
| US10655152B2 (en) | 2014-09-30 | 2020-05-19 | Solenis Technologies, L.P. | Method for producing an amide |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5139792A (en) | Method and system for dispensing live bacteria into animal feed and drinking water | |
| BRPI1013809B1 (en) | dry, stable powder composition, comprising biologically active microorganisms and / or bioactive materials and methods of manufacturing the same | |
| CN103932186A (en) | Bifidobacterium longum microcapsule and preparation method thereof | |
| UA74316C2 (en) | A consortium of bifidobacteria bifidobacterium bifidum vkpm аs-1688, bifidobacterium longum vkpm аs -1689, bifidobacterium adolescentis vkpm аs-1690, bifidobacteruim infantis vkpm аs -1692, bifidobacterum breve vkpm аs -1691, which are used for the preparation of sour and dairy, non-fermented products, biologically active additives, bifido-containing preparations, cosmetic and hygienic agents | |
| UA81225C2 (en) | Solid composition containing bacillus-type non-pathogenic bacterial spores | |
| RU2008589C1 (en) | Method for contact drying microorganisms | |
| CN110506884A (en) | A kind of double lysine antibacterial agents and preparation method and application | |
| CN109988753A (en) | The freeze drying protectant and its preparation method and application of Friedlander's bacillus bacteriophage | |
| Wang et al. | Synergistic effects of whey protein isolate and amorphous sucrose on improving the viability and stability of powdered Lactobacillus salivarius NRRL B-30514 | |
| CN103719535B (en) | A kind of bacteriophagic Bdellovibrio microcapsules and preparation method thereof | |
| RU2681285C1 (en) | Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation | |
| JP2003505024A (en) | Microbial, cell, and tissue storage | |
| KR20190129054A (en) | How to prepare a unit animal powder probiotic formulation | |
| JPS6363373A (en) | Granule containing useful microorganism and production thereof | |
| RU2123044C1 (en) | Method of the prolonged storage of natural symbiotic of human and animal microorganism associations | |
| CN106282304A (en) | The preprocess method of a kind of microencapsulation active bacteria formulation content and detection method based on preprocess method | |
| RU2084233C1 (en) | Method of probiotic preparing for veterinary science | |
| JPH0622746A (en) | Frozen dry substance on microorganism containing medium and its preparation | |
| CN107177045A (en) | A kind of collagen-lysozyme antibiotic film and preparation method thereof | |
| JP2885805B2 (en) | How to maintain microbial viability | |
| CN107177046A (en) | A kind of collagen-Herba Origani Vulgaris quintessence oil antibacterial film and preparation method thereof | |
| RU2415922C1 (en) | Nutrient medium for lactic acid bacilli cultivation | |
| CN110106114A (en) | A kind of freeze drying protectant and freeze-drying store method and application for Listeria monocytogenes standard substance | |
| RU2800372C1 (en) | Protective medium for drying of y. pestis ev strain cells | |
| RU2169574C1 (en) | Method of biopreparation preparing and dry biopreparation |