Claims (39)
1. Способ предотвращения или снижения опосредованного Т-клетками иммунного ответа у индивидуума, включающий выбор индивидуума, в отношении которого установлено наличие или риск достижения состояния, характеризующегося чрезмерньм или нежелательным опосредованным Т-клетками иммунным ответом; и введение индивидууму мультимерного соединения, которое связывается с, по меньшей мере, двумя PSGL-1 белками на поверхности Т-клетки, причем мультимерное соединение содержит две полипептидные цепи, каждая полипептидная цепь включает (i) связывающий домен, который связывается с PSGL-1, и (ii) гетерологичную аминокислотную последовательность, причем полипептидные цепи соединены гетерологичной аминокислотной последовательностью с образованием мультимерного соединения, причем связывание мультимерного соединения с, по меньшей мере, двумя PSGL-1 белками на поверхности Т-клетки индуцирует особый путь трансдукции сигнала, который приводит к гибели Т-клетки, тем самым предотвращая опосредованный Т-клетками иммунный ответ или снижая его уровень у индивидуума.1. A method of preventing or decreasing a T-cell mediated immune response in an individual, comprising selecting an individual with respect to whom the presence or risk of achieving a condition characterized by an excessive or undesired T-cell mediated immune response has been established; and administering to the individual a multimeric compound that binds to at least two PSGL-1 proteins on the surface of the T cell, the multimeric compound containing two polypeptide chains, each polypeptide chain comprising (i) a binding domain that binds to PSGL-1, and (ii) a heterologous amino acid sequence, wherein the polypeptide chains are connected by a heterologous amino acid sequence to form a multimeric compound, wherein the binding of the multimeric compound to at least two PSGL-1 cells on the surface of the T cell induces a special signal transduction pathway that leads to the death of the T cell, thereby preventing the T cell mediated immune response or reducing its level in the individual.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что мультимерное соединение является гомомультимерным соединением.2. The method according to claim 1, characterized in that the multimeric compound is a homomultimeric compound.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что мультимерное соединение является гетеромультимерным соединением.3. The method according to claim 1, characterized in that the multimeric compound is a heteromultimeric compound.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что гетерологичная аминокислотная последовательность включает область, связывающую рецептор клеточной поверхности.4. The method according to claim 1, characterized in that the heterologous amino acid sequence includes a region that binds to a cell surface receptor.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что связывающий домен включает экстрацеллюлярный домен Р-селектина или его PSGL-1-связывающий фрагмент.5. The method according to claim 1, characterized in that the binding domain includes the extracellular domain of P-selectin or its PSGL-1 binding fragment.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что связывающий домен включает экстрацеллюлярный домен Е-селектина или его PSGL-1-связывающий фрагмент.6. The method according to claim 1, characterized in that the binding domain includes the extracellular domain of E-selectin or its PSGL-1 binding fragment.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что связывающий домен включает экстрацеллюлярный домен L-селектина или его PSGL-1-связывающий фрагмент.7. The method according to claim 1, characterized in that the binding domain includes the extracellular domain of L-selectin or its PSGL-1 binding fragment.
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что связывающий домен включает антигенсвязывающий домен специфичного к PSGL-1 антитела или его фрагмент.8. The method according to claim 1, characterized in that the binding domain comprises an antigen binding domain of a PSGL-1 specific antibody or fragment thereof.
9. Способ по п.1, отличающийся тем, что связывающий домен включает PSGL-1-связывающий полипептид, выбранный из библиотеки фагового дисплея.9. The method according to claim 1, characterized in that the binding domain includes a PSGL-1 binding polypeptide selected from a phage display library.
10. Способ по п.1, отличающийся тем, что полипептидные цепи ковалентно соединены гетерологичной аминокислотной последовательностью с образованием мультимерного соединения.10. The method according to claim 1, characterized in that the polypeptide chains are covalently linked by a heterologous amino acid sequence to form a multimeric compound.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что ковалентная связь является дисульфидной связью.11. The method according to claim 10, characterized in that the covalent bond is a disulfide bond.
12. Способ по п.1, отличающийся тем, что гетерологичная аминокислотная последовательность включает константную область тяжелой цепи иммуноглобулина.12. The method according to claim 1, characterized in that the heterologous amino acid sequence includes a constant region of the heavy chain of immunoglobulin.
13. Способ по п.1, отличающийся тем, что он дополнительно включает стадию введения субъекту средства, которое связывает мультимерное соединение с помощью гетерологичной аминокислотной последовательности и способствует поперечному сшиванию ряда PSGL-1 антигенов на поверхности Т-клетки.13. The method according to claim 1, characterized in that it further comprises the step of introducing to the subject an agent that binds a multimeric compound using a heterologous amino acid sequence and promotes the crosslinking of a number of PSGL-1 antigens on the surface of a T cell.
14. Способ по п.1, отличающийся тем, что включает выбор индивидуума, в отношении которого установлено наличие воспалительного заболевания.14. The method according to claim 1, characterized in that it includes the selection of the individual in respect of whom the presence of an inflammatory disease has been established.
15. Способ по п.1, отличающийся тем, что он включает выбор индивидуума, в отношении которого установлено наличие аутоиммунного заболевания.15. The method according to claim 1, characterized in that it includes the selection of the individual in respect of whom the presence of an autoimmune disease has been established.
16. Способ по п.1, отличающийся тем, что он включает выбор индивидуума, которому пересажен или будет пересажен аллогенный или ксеногенный трансплантат.16. The method according to claim 1, characterized in that it includes the selection of an individual to whom an allogeneic or xenogenic transplant is transplanted or will be transplanted.
17. Способ по п.1, отличающийся тем, что он включает выбор индивидуума, в отношении которого установлено наличие аллергического заболевания.17. The method according to claim 1, characterized in that it includes the selection of the individual in respect of whom the presence of an allergic disease has been established.
18. Способ по п.1, отличающийся тем, что он включает выбор индивидуума, в отношении которого установлено наличие Т-клеточного рака.18. The method according to claim 1, characterized in that it includes the selection of an individual in respect of whom the presence of T-cell cancer is established.
19. Способ по п.1, отличающийся тем, что Т-клетка представляет собой активированную Т-клетку.19. The method according to claim 1, characterized in that the T cell is an activated T cell.
20. Способ по п.1, отличающийся тем, что включает в себя определение количества Т-клеток в первой биологической пробе, взятой у индивидуума перед введением мультимерного соединения, и сравнение результатов с количеством Т-клеток во второй биологической пробе, взятой у индивидуума после введения мультимерного соединения.20. The method according to claim 1, characterized in that it includes determining the number of T cells in the first biological sample taken from the individual before the introduction of the multimeric compound, and comparing the results with the number of T cells in the second biological sample taken from the individual after introducing a multimeric compound.
21. Способ по п.1, отличающийся тем, что включает в себя определение биологической активности Т-клеток в первой биологической пробе, взятой у индивидуума перед введением мультимерного соединения, и сравнение результатов с биологической активностью Т-клеток во второй биологической пробе, взятой у индивидуума после введения мультимерного соединения.21. The method according to claim 1, characterized in that it includes determining the biological activity of T cells in the first biological sample taken from the individual before the introduction of the multimeric compound, and comparing the results with the biological activity of T cells in the second biological sample taken from an individual after administration of a multimeric compound.
22. Способ по п.1, отличающийся тем, что введение мультимерного соединения приводит к истощению, по меньшей мере, 10% активированных Т-клеток у индивидуума.22. The method according to claim 1, characterized in that the introduction of a multimeric compound leads to the depletion of at least 10% of activated T cells in an individual.
23. Способ индуцирования гибели Т-клетки или природной клетки-киллера (NK), включающий использование Т-клетки или NK-клетки, экспрессирующей PSGL-1 на своей поверхности; контактирование Т-клетки или NK-клетки с мультимерным соединением, которое связывается с, по меньшей мере, двумя PSGL-1 белками на поверхности Т-клетки или NK-клетки, причем мультимерное соединение содержит две полипептидные цепи, каждая полипептидная цепь включает (i) связывающий домен, который связывается с PSGL-1, и (ii) гетерологичную аминокислотную последовательность, причем полипептидные цепи соединены гетерологичной аминокислотной последовательностью с образованием мультимерного соединения, причем связывание мультимерного соединения с, по меньшей мере, двумя PSGL-1 белками на поверхности Т-клетки или NK-клетки индуцирует особый путь трансдукции сигнала, который приводит к гибели Т-клетки или NK-клетки.23. A method of inducing the death of a T cell or natural killer cell (NK), comprising using a T cell or NK cell expressing PSGL-1 on its surface; contacting a T cell or NK cell with a multimeric compound that binds to at least two PSGL-1 proteins on the surface of a T cell or NK cell, the multimeric compound containing two polypeptide chains, each polypeptide chain comprising (i) a binding domain that binds to PSGL-1, and (ii) a heterologous amino acid sequence, wherein the polypeptide chains are joined by a heterologous amino acid sequence to form a multimeric compound, wherein the binding of the multimeric compound to, at least two PSGL-1 proteins on the surface of a T cell or NK cell induces a special signal transduction pathway that leads to the death of the T cell or NK cell.
24. Способ по п.23, отличающийся тем, что мультимерное соединение является гомомультимерным соединением.24. The method according to item 23, wherein the multimeric compound is a homomultimeric compound.
25. Способ по п.23, отличающийся тем, что мультимерное соединение является гетеромультимерным соединением.25. The method according to item 23, wherein the multimeric compound is a heteromultimeric compound.
26. Способ по п.23, отличающийся тем, что гетерологичная аминокислотная последовательность включает область, связывающую рецептор клеточной поверхности.26. The method according to item 23, wherein the heterologous amino acid sequence includes a region that binds to a cell surface receptor.
27. Способ по п.23, отличающийся тем, что связывающий домен включает экстрацеллюлярный домен Р-селектина или его PSGL-1-связывающий фрагмент.27. The method according to item 23, wherein the binding domain includes the extracellular domain of P-selectin or its PSGL-1-binding fragment.
28. Способ по п.23, отличающийся тем, что связывающий домен включает экстрацеллюлярный домен Е-селектина или его PSGL-1-связывающий фрагмент.28. The method according to item 23, wherein the binding domain includes the extracellular domain of E-selectin or its PSGL-1-binding fragment.
29. Способ по п.23, отличающийся тем, что связывающий домен включает экстрацеллюлярный домен L-селектина или его PSGL-1-связывающий фрагмент.29. The method according to item 23, wherein the binding domain includes the extracellular domain of L-selectin or its PSGL-1-binding fragment.
30. Способ по п.23, отличающийся тем, что связывающий домен включает антигенсвязывающий домен специфичного к PSGL-1 антитела или его фрагмент.30. The method according to item 23, wherein the binding domain includes an antigen-binding domain specific for PSGL-1 antibodies or a fragment thereof.
31. Способ по п.23, отличающийся тем, что связывающий домен включает PSGL-1-связывающий полипептид, выбранный из библиотеки фагового дисплея.31. The method according to item 23, wherein the binding domain includes a PSGL-1 binding polypeptide selected from a phage display library.
32. Способ по п.23, отличающийся тем, что полипептидные цепи ковалентно соединены гетерологичной аминокислотной последовательностью с образованием мультимерного соединения.32. The method according to item 23, wherein the polypeptide chains are covalently linked by a heterologous amino acid sequence to form a multimeric compound.
33. Способ по п.32, отличающийся тем, что ковалентная связь является дисульфидной связью.33. The method according to p, characterized in that the covalent bond is a disulfide bond.
34. Способ по п.23, отличающийся тем, что гетерологичная аминокислотная последовательность включает константную область тяжелой цепи иммуноглобулина.34. The method according to item 23, wherein the heterologous amino acid sequence includes a constant region of the heavy chain of immunoglobulin.
35. Способ по п.23, включающий дополнительно контактирование мультимерного соединения (и) средства, которое связывается с мультимерным соединением с помощью гетерологичной аминокислотной последовательности и способствует поперечному сшиванию ряда PSGL-1 антигенов на поверхности Т-клетки.35. The method according to item 23, further comprising contacting the multimeric compound (s) of the agent that binds to the multimeric compound using a heterologous amino acid sequence and promotes the crosslinking of a number of PSGL-1 antigens on the surface of the T cell.
36. Способ по п.23, включающий индуцирование гибели активированной Т-клетки.36. The method according to item 23, including the induction of death of activated T cells.
37. Способ по п.23, отличающийся тем, что включает оценку жизнеспособности Т-клетки или NK-клетки после контактирования с мультимерным соединением.37. The method according to p. 23, characterized in that it includes assessing the viability of a T cell or NK cell after contact with a multimeric compound.
38. Способ по п.23, отличающийся тем, что включает оценку биологической активности Т-клетки или NK-клетки после контактирования с мультимерным соединением.38. The method according to item 23, wherein the assessment of the biological activity of a T cell or NK cell after contact with a multimeric compound.
39. Набор, включающий мультимерное соединение, которое связывается с, по меньшей мере, двумя PSGL-1 белками на поверхности Т-клетки, причем мультимерное соединение включает две полипептидных цепи, каждая полипептидная цепь включает (i) связывающий домен, который связывается с PSGL-1 и (ii) гетерологичную аминокислотную последовательность, причем полипептидные цепи соединены гетерологичной аминокислотной последовательностью с образованием мультимерного соединения, а связывание мультимерного соединения с, по меньшей мере, двумя PSGL-1 белками на поверхности Т-клетки индуцирует особый путь трансдукции сигнала, который приводит к гибели Т-клетки; и инструкции по применению соединения для лечения состояния, связанного с чрезмерным или нежелательным опосредованным Т-клетками иммунным ответом или чрезмерной или нежелательной пролиферацией Т-клеток, например, воспаления, аутоиммунитета, отторжения трансплантата, аллергического состояния или Т-клеточного рака.39. A kit comprising a multimeric compound that binds to at least two PSGL-1 proteins on the surface of a T cell, the multimeric compound comprising two polypeptide chains, each polypeptide chain comprising (i) a binding domain that binds to PSGL- 1 and (ii) a heterologous amino acid sequence, wherein the polypeptide chains are connected by a heterologous amino acid sequence to form a multimeric compound, and the binding of the multimeric compound to at least two PSGL-1 proteins in surface of T-cells induces a particular signal transduction pathway that results in the death of T-cells; and instructions for using the compound to treat a condition associated with an excessive or undesired T-cell mediated immune response or excessive or undesired proliferation of T cells, for example, inflammation, autoimmunity, transplant rejection, an allergic condition, or T-cell cancer.