RU2005106244A

RU2005106244A - Связывающие молекулы

Info

Publication number: RU2005106244A
Application number: RU2005106244/04A
Authority: RU
Inventors: Удо ХАБЕРЛЬ (DE); Удо Хаберль; Кристиан ФРОШ (DE); Кристиан ФРОШ; Ханс-Георг ФРАНК (DE); Ханс-Георг Франк; Андреас РИБКА (DE); Андреас Рибка; Раймунд ВИЗЕР (DE); Раймунд ВИЗЕР
Original assignee: Аплаген Гмбх (De); Аплаген Гмбх
Priority date: 2002-08-06
Filing date: 2003-08-05
Publication date: 2006-02-27

Claims

1. Связывающая молекула, состоящая из структуры-носителя, которая состоит по меньшей мере из одной циклической молекулярной субъединицы и по меньшей мере из двух субъединиц боковой цепи, и отличающаяся тем, что в ней указанные субъединицы боковой цепи представляют собой полипептидные цепи, состоящие из природных и/или неприродных D- и/или L-аминокислот, и/или полинуклеотидные цепи, причем указанные субъединицы боковой цепи ковалентно связаны со структурой-носителем.

2. Связывающая молекула по п.1, отличающаяся тем, что указанная циклическая молекулярная субъединица представляет собой циклический полипептид, синтезированный из природных или неприродных D- и/или L-аминокислот, ароматического кольца, ароматической кольцевой системы, полилактона, полилактама, бензолтриамида, трилактона или трилактама.

3. Связывающая молекула по п.2, отличающаяся тем, что аминокислоты, образующие циклический полипептид, связаны полипептидными связями.

4. Связывающая молекула по п.3, отличающаяся тем, что указанная циклическая молекулярная субъединица представляет собой циклический полипептид, а указанные по меньшей мере две субъединицы боковой цепи связаны с циклической молекулярной субъединицей посредством боковых групп аминокислот, таких как лизин, серин, треонин, глутамат, аспарагин и/или аспартат циклической молекулярной субъединицы.

5. Связывающая молекула по п.4, отличающаяся тем, что указанный циклический полипептид состоит из 2-10, предпочтительно из 2, 3, 4 или 6 аминокислот.

6. Связывающая молекула по п.1, отличающаяся тем, что она имеет одну из структур

а) бензолтриамид

b) циклогексапептид

или циклогексапептид с последовательностью DKDKDK, имеющей от одной до трех пептидных последовательностей (Seq) боковой цепи;

с) трилактон

d) трилактам

е) структура-носитель на основе тригидроксибензойной кислоты

f) циклический дипептид: цикло-L-Ala-L-Lys, дериватизированный последовательностью Seq, где Seq или Pep представляют собой субъединицы боковой цепи или -ОН.

7. Связывающая молекула по меньшей мере по одному из пп.1-6, отличающаяся тем, что указанные полипептидные цепи имеют одинаковые аминокислотные последовательности.

8. Связывающая молекула по меньшей мере по одному из пп.1-6, отличающаяся тем, что указанные полипептидные цепи состоят из 5-60, предпочтительно из 10-50, в частности, из 12-40 аминокислот.

9. Связывающая молекула по меньшей мере по одному из пп.1-6, отличающаяся тем, что указанные субъединицы боковой цепи связаны со структурой-носителем посредством спейсерных молекулярных субъединиц (спейсеров), состоящих, в частности, из углеводов или нуклеиновых кислот.

10. Связывающая молекула по меньшей мере по одному из пп.1-6, отличающаяся тем, что неприродные аминокислоты имеют формулу NH₂(СН₂)_nСООН, где n=2-8, в частности, NH₂(CH₂)₂СООН, NH₂(СН₂)₂СООН или NH₂(CH₂)₄COOH.

11. Связывающая молекула по меньшей мере по одному из пп.1-6, где указанные субъединицы боковой цепи связаны со структурой-носителем, имеющей по меньшей мере одну из последовательностей:

• APTSSSTKKT₁QLQLEHX¹X²X³X⁴X⁵QMILNGINN (SC1) или • TIVX⁶FLNRWITFX⁷QSX⁸ISTLT₁ (SC2), или • TKETQQQLEQLLLDLRLLLNGVNNPE (SC3), или • TKETEQQMEQLLLDLQLLLNGVNNYE (SC4), или • NYDDETATIVEFLNKWITFAQSIFSTLT (SC5), или • EYDDETATITEFLNKWITFAQSIFSTLT (SC6),

где X¹ выбран из I или L,

X² выбран из I или L,

X³ выбран из V, L или М,

X⁴ выбран из Е, D или К,

X⁵ выбран из L или F,

X⁶ выбран из Е или D,

X⁷ выбран из A, G или С,

X⁸ выбран из А или I;

где в положении треонина T₁, стандартная защитная группа, предпочтительно углеводная группа, предпочтительно выбранная из глюкозы, маннозы, N-ацетилглюкозамина или N-ацетилгалактозамина, которая необязательно и соответствующим образом ковалентно связана и служит в качестве защиты от протеолитической деградации; где защита от действия экзопептидаз необязательно достигается путем связывания двух D-аминокислотных остатков у свободного С- и/или N-конца; где указанные последовательности необязательно модифицированы путем замены отдельных остатков на остатки с SH-группой(ами) для образования дисульфидного мостика между полипептидными боковыми цепями после присоединения к структуре-носителю; и связывающие молекулы, где указанные субъединицы боковой цепи имеют последовательности, гомологичные известным последовательностям по меньшей мере на 80%; а также фрагменты вышеуказанных последовательностей, которые укорочены максимально на 6 аминокислот от N- или С-конца.

12. Связывающая молекула по п.11, имеющая структуру

SCX - структура-носитель - SCY

где SCX (боковая цепь X) может быть любой из шести боковых цепей (SC1-6) по п.11, a SCY (боковая цепь Y) может быть любой из боковых цепей (SC1-6) по п.11.

13. Связывающая молекула по меньшей мере по п.12, где по меньшей мере одна субъединица боковой цепи имеет последовательность

SKNEKALGRKIX₁X₂X₃X₄SSRX₅GHSFLS

где X₁=N или L,

Х₂=S или Q, или L, или Е,

Х₃=W или L, или R, или А, или Y,

Х₄=Е или N, или А, или D, или Н,

X₅=S или А,

и связывающие молекулы, где указанные субъединицы боковой цепи имеют последовательности, гомологичные известным последовательностям по меньшей мере на 80%.

14. Связывающая молекула по п.1, отличающаяся тем, что она имеет одну из структурных формул

или

или

или

или

и связывающие молекулы, где указанные субъединицы боковой цепи имеют последовательность, гомологичную известным последовательностям по меньшей мере на 80%.

15. Способ получения связывающей молекулы по меньшей мере по одному из пп.1-14, где указанный способ осуществляют методом твердофазного синтеза, где пептид субъединицы боковой цепи связан с твердой фазой и в последующем наращивается соответствующими аминокислотами и, необязательно, присоединяется к структуре-носителю в последней стадии.

16. Пептид, имеющий структуру

• APTSSSTKKT₁QLQLEHX¹X²X³X⁴X⁵QMILNGINN или

• TIVX⁶LNRWITFX⁷QSX⁸ISTLT₁,

где X¹ выбран из I или L,

X² выбран из I или L,

X³ выбран из V, L или М,

X⁴ выбран из Е, D или К,

X⁵ выбран из L или F,

X⁶ выбран из Е или D,

X⁷ выбран из A, G или С,

X⁸ выбран из А или I,

17. Фармацевтическое средство, содержащее связывающие молекулы по любому из пп.1-14 и/или пептиды по п.16.

18. Диагностическое средство, содержащее связывающие молекулы по любому из пп.1-14 и/или пептиды по п.16.

19. Применение связывающих молекул по любому из пп.1-14 и/или пептидов по п.16 в целях получения фармацевтического или диагностического средства для лечения или выявления заболеваний иммунной системы, в частности, воспалений, процессов, протекающих при артритах, синдромов иммунодефицита, аутоиммунных синдромов и синдромов иммунодефицита, нарушения репродуктивных функций; для контрацепции или для профилактики вирусных инфекций, для лечения заболеваний, связанных с повышенной пролиферацией клеток, в частности, опухолевых заболеваний, карцинозов, сарком, лимфом и лейкозов; и/или инфекционных процессов у человека или животных.

20. Фармацевтическое средство по п.17 в виде микрокапсул, липосомных препаратов или депо-препаратов, содержащих подходящие добавки, носители, адъюванты и/или по меньшей мере одно дополнительное активное вещество.

21. Фармацевтическое средство по п.17, отличающееся тем, что в нем в качестве дополнительного активного вещества используют интерлейкин-12, связывающую и эффекторную молекулу, специфичную в отношении рецептора интерлейкина-12, или рекомбинантный IL-12.

22. Фармацевтическое средство по п.17, отличающееся тем, что в нем в качестве дополнительного активного вещества используют TRAIL (лиганд, индуцирующий TNF-ассоциированный апоптоз), связывающую и эффекторную молекулу, специфичную в отношении рецептора TRAIL, или рекомбинантный TRAIL.

23. Фармацевтическое средство по п.17, отличающееся тем, что в нем в качестве дополнительного активного вещества используют противовирусный агент, в частности, противовирусный агент, способный замедлять или блокировать проникновение вирусных частиц, в частности, ВИЧ-частиц, в клетки-мишени, в частности, в Т-лимфоциты.

24. Связывающая молекула по пп.1 и 12, отличающаяся тем, что в ней в точности две боковых цепи связаны со структурой-носителем и что указанная структура-носитель минимизирована до линейного пептида, состоящего из 2-10 аминокислот, содержащего по меньшей мере две различных аминокислоты, выбранные из G, Р, бета-аланина или NH₂(CH₂)_хСООН (где x=3-8).

25. Связывающая молекула по п.24, определяемая формулой

Х=D-аланин;

βAla=бета-аланин.