RU2004144C1 - Способ отбора селекционных форм кукурузы с повышенной биологической ценностью - Google Patents

Description

Продолжение табл. 1

Таблица 2

Таблица 3

Таблица 4

исследуемой (А 204 о2/о2) форм кукурузы посто нно встр хивают с равными объемами (по 5 мл) растворов едкого кали различной мол рной концентрации (0,05-0,5 М), при комнатной температуре в течение 5 мин, фильтруют и измер ют оптическую плотность белковых экстрактов при 350 нм на спектрофотометре Спекорд М - 40 в 0,5 см кювете. Дл  оценки контрастности различий рассчитывают отношение измеренных величин исследуемой и исходной форм. Результаты определени  оптических плотностей экстрактов, полученных при различных концентраци х растворов едкого кали, приведены в табл. 1 (данные статически достоверны, ошибка измерений не более 5%).

Аналогично анализируют образцы размолотого зерна исследуемых и исходных форм кукурузы с использованием растворов различной концентрации едкого натра (табл. 2).

Полученные результаты показывают, что оптимальной концентрацией щелочи, обеспечивающей контрастность различий 35-71%,  вл етс  интервал 0,01-0,5 М. При использо- вании растворов с концентрацией ниже 0,01 М различи  незначительны (10%), а возрастание концентрации выше 0,5 М значительно удлин ет врем  фильтрации суспензии,

П р и м е р 2. Аналогично примеру 1 провод т отбор кукурузы с повышенной биологической ценностью (W 155 о2/о2, А 619 о2/о2) в сравнении с обычными аналогами с использованием 0,1 М раствора едкого кали (табл. 3).

П р и м е р 3. Определ ют значени  сравнительного показател  аналогично примеру 1 (концентраци  едкого кали - 0,1 М) дл  двойных эндоспермовых мутантов типа o2/su2 на основе различных обычных аналогов (табл, 4). В качестве показател  контрольного образца используют усредненное значение ,68 дл  исходных линий А204, W155, А 619 (примеры 1,2).

П р и м е р 4. Аналогично примеру 1 провод т определение оптической плотности белковых экстрактов зерна гетерогенно

0

5

0

5

0

0

5

5

го селекционного материала (0,1 М раствор едкого кали). В данном случае были использованы семьи третьего года самоопылени  (5з), которые получены во ВНИИ кукурузы из 16 линейных синтетиков кукурузы, содержащих в своем генотипе мутантный ген опейк- 2 (табл. 5). В качестве показател  исходной формы используют усредненное Осрз50 0,68.

Полученные результаты показывают, что предложенный сравнительный показатель дифференцирует не только контрастные эндоспермовые мутанты, но и синтетики, позвол ющие создавать на основе мутантов селекционные формы с комплексом хоз йственно ценных признаков.

Использование предлагаемого способа в сравнении с прототипом позволит существенно упростить и ускорить проведении отбора путем исключени  длительных и трудоемких операций по количественной экстракции и определению белка. Способ исключает использование дефицитных биохимических препаратов и основан на применении разбавленных растворов доступных щелочных реагентов. При этом определение оптической плотности белкового экстракта в качестве маркерного признака  вл етс  простым приемом, доступным дл  любой лаборатории .

Способ позволит проводить экспресс- отбор форм кукурузы с повышенной биологической ценностью при использовании в селекционной практике генетических приемов , направленных на улучшение качества зерна.

(56).Неудачин В. П,, Лебедев А. В. Прикладна  биохими  и микробиологи . - 1984, т. 20, вып. 2, с. 267-272.

Gentinetta Е. ет al. МаусПса, 1975, v. 20, п. 3, р. 145-164.

Misra P.S. et al. Cer. Chem., 1973, v. 50, n. 2, p. 184-190.

Esen A. J. Agric Food Chem., 1980, v. 28, n. 3, p. 529-532.

Wallace J. C. et al. Cer. Chem,, 1990, v. 92, n. 1, p. 191-196.

Таблица 1

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   СПОСОБ ОТБОРА СЕЛЕКЦИОННЫХ ФОРМ КУКУРУЗЫ С ПОВЫШЕННОЙ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ЦЕННОСТЬЮ, включающий экстракцию белков размолотого зерна исследуемых образцов и контрольных исходных форм в щелочной среде, измерение величины оптической плотности и

   Таблица 5

   идентификацию селекционных ценных форм, отличающийс  тем, что экстракцию

   , белков провод т 0,01 - 0,5 М раствором щелочи, величину оптической плотности измер ют при 350 нм и ценные селекционные формы идентифицируют по превышению данного показател  в 1,3-2,1 раза у

   , исследуемых образцов над его значением у контрольных исходных форм.