Claims (4)
1. Способ получения препарата коллагеназы, включающий гомогенизацию исходного коллагенсодержащего сырья, отделение экстракта центрифугированием, хроматографическую очистку на ионообменном сорбенте и последующие элюцию активных ферментов, диализ элюата и лиофильную сушку препарата, отличающийся тем, что в качестве исходного коллагенсодержащего сырья используют личинки жуков-кожеедов рода Dermestes, гомогенизацию проводят в растворе хлорида натрия с добавлением азида натрия при объемном соотношении биомассы и раствора 1:2-2,5, при этом хроматографическую очистку ведут на ДЕАЕ-сефарозе, уравновешенной MES-буфером с добавлением 0,005М хлорида кальция, а элюцию - трисовым буфером с добавлением хлорида натрия, хлорида кальция и этилового спирта.1. A method for producing a collagenase preparation, including homogenizing the initial collagen-containing raw material, separating the extract by centrifugation, chromatographic purification on an ion-exchange sorbent and subsequent elution of the active enzymes, dialysis of the eluate and freeze drying of the preparation, characterized in that larvae of the skin-borne beetles genus are used as the initial collagen-containing raw material Dermestes, homogenization is carried out in a solution of sodium chloride with the addition of sodium azide at a volume ratio of biomass and solution of 1: 2-2.5, with chromium Atographic purification is carried out on DEAE-Sepharose, equilibrated with a MES buffer with the addition of 0.005 M calcium chloride, and elution with Tris buffer with the addition of sodium chloride, calcium chloride and ethyl alcohol.
2. Способ получения препарата коллагеназы по п.1, отличающийся тем, что гомогенизацию проводят в 3-4% растворе хлорида натрия с добавлением 1-5 мкМ/л азида натрия при рН 6-7.2. The method of producing the collagenase preparation according to claim 1, characterized in that the homogenization is carried out in a 3-4% sodium chloride solution with the addition of 1-5 μM / L sodium azide at a pH of 6-7.
3. Способ получения препарата коллагеназы по п.1, отличающийся тем, что элюцию ведут буферным раствором, содержащим 1,5 М хлорида натрия, 0,005 М хлорида кальция, и 20% по объему этилового спирта.3. The method of producing a collagenase preparation according to claim 1, characterized in that the elution is carried out with a buffer solution containing 1.5 M sodium chloride, 0.005 M calcium chloride, and 20% by volume of ethyl alcohol.
4. Способ получения препарата коллагеназы по п.1, отличающийся тем, что диализ осуществляют в 0,005 М растворе хлорида натрия при 2-6°С.4. The method of producing the collagenase preparation according to claim 1, characterized in that the dialysis is carried out in a 0.005 M sodium chloride solution at 2-6 ° C.