RU1836029C - Кормова добавка дл жвачных животных - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к кормопроизводству . Сущность: кормова  добавка дл  жвачных животных включает биологически- активное вещество и наполнитель, в качестве биологически-активного вещества добавка содержит полиметионил-полилизин с мол.м. 440000-850000 при соотношении метионин-лизин 0,4-2,0 в количестве 0,1-1,0% и наполнитель-остальное. 2 табл.

Description

Изобретение относите к кормопроизводству ..

Цель изобретени : повышение стабильнее™ добавки при рН около 6 и выделение

бк 2,

ологически активного вещества при рН

Изобретение иллюстрируетс  .следую- щ|1ми примерами.

Пример 1. Получение добавки пол- имериз.

N-карбоксиангидрид N-карбобензокси Ылизина полимеризуют в присутствии инициатора (метилата натри ) в диоксане при температуре 20°С, Исчезновение мономера из реакционной среды позвол ет следить за его полимеризацией. Полимеризаци  за- кгтчиваетс  через 75 часов. Полученный пЬлимер имеет вид в зкого продукта.

Полимер обрабатывают уксусной кислотой , насыщенной бромистоводородной кислотой , в течение 30 мин.

Полученный осадок промывают этиловым спиртом и высушивают. После растворени  в воде и диализа полученный поли L Л11зин выдел ют из раствора путем лиафиГ ;fлизации . Молекул рный вес составл ет пор дка 290000 дальтон.

Дезаминирование поли 1 лизина позвол ет проверить наличие свободных аминогрупп . После кислотного гидролиза анализ показывает один единственный пик, соответствующий наличию а-амино Ј-гидрокси- капроновой кислоты.

N-карбоксиангидрид N-карбобензокси L лизина получен путем барботировани  безводного фосгена в суспензии N-карбобензокси L лизина в безводном тетрагидро- фуране при температуре 45°С. После окончани  реакции барботирование безводного азота позвол ет удалить излишек фосгена .

После испарени  растворител  продув раствор етс  в этиилацетате. Растворитель испар етс , а остаток забираетс  этилаце- татом Операци  повтор етс  дважды. N- карбоксиангидрид N-карбобензокси L лизина кристаллизируетс  в результате медленного добавлени  гексана в его раствор в этилацетате до соотношени  1-1 (по объему),v

СО

с

с ы о о ю ю

со

Полученные кристаллы промываютс  смесью гексана с этилацетатом (в пропорции 9-1 по объему). Кристаллы плав тс  при 97°С.

Пример 2. Поли-Ышзин, растворенный в пропорции 5 мг/см буферного фосфата натри  (100 мМ) с рН 6,5, содержащего 150 мМ хлористого натри , выдерживают при температуре 4°С. При энергичном перемешивании и поддержании посто нного рН путем добавлени  щелочи натри  0,1 N добавл ют 1 моль N-карбоксиангидрида мети- онина на остаток лизина.

После выдерживани  в течение ночи при температуре 4°С продукт диализируют водой в течение 3 суток, после чего раствор лиофилизируют.

В результате получают поли L метио- нил-поли-1 -лизин, в котором соотношение метионин-лизин составл ет 0,55, а содержание остатков измененного лизина составл ет 27%.

Производительность фиксации составл ет пор дка 80%.

N-карбоксиангидрид L-метионина имеет вид масл нистого продукта и получаетс  в вышеописанных услови х дл  последующего получени  N-карбоксиангидрида N- карбобензокси L-лизина,

Пример 3. Действуют как было описано в примере 2, но используют 3 мол  N-карбоксиангидрида L-метионина на остаток лизина и получают поли L-метионил-по- ли L-лиэин, в котором соотношение метионин-лизин составл ет 1,90, а содержание остатков измененного лизина равно 49%. .

П р и м е р 4. Действуют как было описано в примере 3, но используют 5 молей N-карбоксиангидрида L-метионина на остаток лизина и получают поли-Ь-метионил-по- ли-Ь-лизин, в котором соотношение метионин-лизин составл ет 3,40, а содержание остатков измененного лизина составл ет 70%.

Пример 5. Поли-Ь-лизин раствор ют при температуре 4°С в буферном растворе бикарбоната натри  (100 мМ) при рН 10,2, содержащем 150 мМ хлористого натри . Добавл ют 1 моль N-карбоксиангидрйда L-метионина на остаток лизина. Дают температуре подн тьс  до 20°С, а рН реакционной смеси регулируют до рН 3-4 в течение 10 мин. После охлаждени  до 4°С продукт диализируют дистиллированной водой в течение 3 суток, после чего раствор лиофилизируетс .

Получают поли -метионил-поли-Ь-ли- зин, в котором соотношение метионин-лизин составл ет 0,45, а содержание остатков измененного лизина составл ет 45%.

Пример 6. Действуют как было описано в примере 5, но добавл ют 1,2 мол 

N-карбоксиангидрида L-метионина на остаток лизина и получают поли- -метионил-по- ли-1--лизин, в котором соотношение метионин-лизин составл ет 0.53, а содержание остатков измененного лизина составл ет50% .

Пример. Действуют как было описано в примере 5, но добавл ют 3 раза по 1 молю N-карбоксиангидрида L-метионина на остаток лизина и получают поли-1-метио5 нил-поли -лизин, в котором соотношение метионин-лизин составл ет 2,10, а содержание остатков измененного лизина составл ет 66%.

Наличие лизина и метионина в полиме0 pax может быть вы влено опытным путем в результате последовательного переваривани  при помощи ферментов, имеющихс  в пищеварительном тракте, например, пепсина , поджелудочного сока, кишечной амино5 пептидазы.

В табл. 1 приведены относительные количества лизина и метионина, высвобождающиес  входе переваривани .

Результаты таблицы показывают, что

0 примеры 4 и 7 не гарантируют достаточного расщеплени  сополимера. В этих примерах цепь полилизина включает более 50% остатков модифицированного лизина (пример 4, где 70% звеньев лизина модифициро5 ваны и пример 7, где модифицированы 66% звеньев лизина).

Поэтому сополимеры, у которых максимально 50% структурных групп лизина в цепи полилизина замещены цепью

0 полиметионина,  вл ютс  эффективными.

В зависимости от типа используемого полимера уровень наличи  обеих аминокислот очень различен.

Обычно продукты, полученные в резуль5 тате полимеризации при рН 6,5 и имеющие относительно высокое содержание метионина (пример 3), легко гидролизуютс , тогда как продукты, полученные при рН 10,2 и отличающиес  высоким содержанием ос0 татков измененного лизина (пример 7), менее доступны дл  протеолитических ферментов. Кроме того, продукты, полученные при рН 6,5 и имеющие высокое содержание остатков измененного лизина,

5 гидролизуютс  легче, чем продукты, полученные при рН 10,2 путем последовательных добавлений N-карбоксиангидрида метионина,

Обычно удовлетворительно наличие обеспечиваетс  в случае, когда соотношение метионин-лизин равно 2 или более предпочтительно около 1, причем это соотношение может измен тьс  в зависимости от используемого метода получени  пол- иметионилполилизина.

Питательна  ценность полиметионил- полилизинов, используемых в композици х по насто щему изобретению, была вы влена на примере крысы, получавшей питание с недостаточным количеством лизина и ме- тионина. Например, использовали поли-L- лизин и поли-1 -метионил-поли-1 -лизин, в котором соотношение метионин-лизин составл ло пор дка 1, а содержание остатков измененного лизина составл ло 30%. Пол- ученные результаты представлены в табл. 2.

Из вышеприведенной таблицы следует, что добавка в базовой режим лизина и ме- тионина существенно увеличивает прирост животных и что прирост животных, получа- ющих режим с добавкой поли- -метионил- поли-Ь-лизина, не очень отличаетс  от прироста животных, режим питани  которых дополнен свободными аминокислотами . Кроме того, добавление лизина в виде поли-1 -лизина оказываетс  более эффективным , чем добавление свободного лизина .

Полиметионил-полилизин по насто щему изобретению растворимы, в рубце, но обладают стойкостью к бактериальному разложению. Например, поли- -метионил- поли-Ь-лизин (0,5 г) может быть помещен в нейлоновые мешочки, размер  чеек которых составл ет 300x300 микрон. Мешочки инкубируютс  в течение 48 часов в рубце овец с фистулами. Затем мешочки вынимаютс  и промываютс . Количество остаточного активного вещества определ етс  соответствующим методом, Количества L-лизина и L-метионина, оставшиес , в нейлоновых мешочках, составл ют соответственно 80 и 60% исходных количеств. Когда L-лизин и L-метионин принимаютс  в свободном виде, лишь мала  часть этих ами- нокислот избегает микробной ферментации .

Таким образом, полиметионил-полили- зин по насто щему изобретению представл ет собой очень хорошие добавки в рацион питани  жвачных животных.

Насто щее изобретение касаетс  композиций дл  кормлени  скота, содержащих достаточное количество полнметионил-пол- илизина.

Полиметионил-полмлизины могут добавл тьс  в готовые комбикорма.

Они могут добавл тьс  также в кормовые добавки, чаще всего вместе с другими веществами, например, витаминами и ми-. неральными сол ми. Эти кормовые добавки могут либо добавл тьс  в рацион, либо потребл тьс  отдельно в чистом виде и составл ют обычно от 5 до 20% кормового рациона.

Премиксы, используемые дл  приготовлени  кормовых добавок или кормов, содержат обычно от 1 до 20% полиметио- нил-полилизина.

Сами премиксы получаютс  обычно из концентратов, содержащих от 99,9 до 20% полиметионил-полилизина, к которому добавл ют , например, пищевые красители, амортизаторы, диспергирующие вещества и пищевые наполнители.

Концентраты и премиксы имеют обычно порошкообразную форму. Кормовые добавки и комбикорма могут быть либо в виде порошка, либо в виде гранул, полученных обычными способами,

П р и м е р 8. К 1000 г фуража равномерно ввод т диспергированием 20 г порошко- образного кормового концентрата, содержащего 10% полиметионил-полилизина , в котором соотношение метионин-лизин составл ет около 1.

Получают корм, который непосредственно усваиваетс  животными.

Claims (1)

1. Формула изобретени  Кормова  добавка дл  жвачных животных , включающа  биологически активное вещество и наполнитель, отличающа - с   тем, что, с целью повышени  стабильности добавки при рН около 6 и выделении биологически активного вещества при рН 2,5, в качестве биологически активного вещества добавка содержит полиметионил- полилизин с мол.м. 440000-850000 при соотношении метионил:лизин 0,4-2,0 в количестве 0,1-1,0% и наполнитель - остальное .

   .Таблица 1

   Таблица 2