JPS61216647A - 動物を飼育するための組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は同化可能な形態にあるリシン又はメチオニン及
びリシンを含有する、動物に飼料として与える丸めの組
成物に関する。

リシン及びメチオニンは動物の成長を促進する必須アミ
ノ酸であシ、そしてこれらのアミノ酸の１つ又は両方を
含有し且つ動物中で該アミノ酸を放出する組成物を動物
餌料に補充することがしばしば必要である。反芻動物の
場合に、有利な効果を及ぼすことができるこれらのアミ
ノ酸に対して、これらのアミノ酸はこぶ胃（デ５ｍｇ５
）において安定で、１そして腸において該アミノ酸又は
同化可能なオリがペグチドを放出する形態で与えられる
べきことが重要である。

ポリリシン及び／又はポリメチオニルポリリシンの形態
でリシン及び／又はメチオニンを動物飼料に補充するこ
とができることが今回見出された。

従って、本発明は、ポリリシン及び／又はポリメチオニ
ルポリリシンを含有して成る動物飼料組成物を提供する
。更に、本発明は、リシン又はリシン及びメチオニンの
動物飼料の要求量（ｄｉｅｔαデＶｒａｑｓｉｒａｍｅ
％ｔｓ）の実質的すべてを含有する飼料（ｄｉｅｔ　）
を提供するのに十分な量の４リリシン、ポリメチオニル
ポリリシン又は両者を含む飼料を動物に与えることより
成る動物を飼育する方法を提供する。

本発明に使用することができるポリリシン及びポリメチ
オニルポリリシンは一般に、１，０００〜１．０００，
０００ダルトン、好ましくは２０．０００〜２００，０
００ダルトンの分子量を有している。

−リリシンは、開始剤の役割を果たすジエチルアミン又
はナトリウムメチラートの如き非プロトン性塩基の存在
下に２０℃の領域の温度でジオキサンの如き有機溶媒中
でＮ−カルボベンゾキシリシンＮ−カルボキシ無水物を
重合させることにょシ得ることができる。使用する開始
剤とリシン誘導体の割合を制御するととＫよシ生成され
る重合体の分子量を変えることが可能である。

Ｎ−カルボベンゾキシ保護基は、酢酸中の臭化水素酸を
使用してペン　イシャイ及びベーが−（Ｂｕｎ　Ｉａｈ
ａｔ　ａｎｄ　Ｅｇｒｇａｒ　）　ｙヤーナル　オンオ
ルがニック　ケきストリー　第１７巻、１５６４−１５
７０頁　（Ｊ、　０デｇ、　　Ｃｈａ倶、　　１　７　
　、　　ｐＦ　　１５６４−１５７０）（１９５９）の
方法によシ除去することができる。沈殿したポリリシン
を分離し、次いでそれを水に溶解した後透析にょシ精製
する。

ポリリシンはその水溶液の凍結乾燥によシ分離される。

そのようにして得られた重合体を使用して、保護基の除
去（トリプシンによる加水分解にょるα−アミノ−ε−
ヒドロキシカプロン酸への転化によシ）を監視すること
が可能である。得られた４リリシンの分子量は分析用超
遠心分離によシ測定された沈降係数から又は比粘度を測
定することによって決定することができる。

ポリメチオニルポリリシンは、ＩリメチオニルタンＡり
質を製造するためのｒルトナー（Ｇａ−デーｔｍａｒ　
）及びビュイグサーバー（ｐｓｉｇｓｅｒｖｔｔｒ　）
（ジャーナル　オツ　アグリカルチエラル　アンド　７
ツド　ケミストリー、第３２巻、１３７１−１３７６頁
（Ｊ、　Ａｇｒｉｃ、　Ｆｏｏｄ、　Ｃｈａｍ、　３２
　會ｐｐ１３７１−１５７６）（１９８１）の方法に従
ってポリリシンとメチオニンＮ−カルボキシ無水物　（
ｔｒＬＩＩｔｈｉｏｓｔｎｇ　　Ｎ−ｃａｒｂｏｙａｙ
ａｎｈｙｄｒｔｄｇ　）の反応によって製造することが
できる。

ポリリシンとメチオニンＮ−カルボキシ無水物の反応は
緩衝された媒体中６乃至１１のｐＨで且つリシン残基に
対して過剰そルのメチオニンＮ−カルボキシ無水物を使
用して行なうことができる。

反応は４℃の領域の温度で一般に行なわれる。

約６、例えば６．５のｐＨでのメチオニンＮ−カルボキ
シ無水物の使用はポリマーの７ミノ基へのこのアミノ酸
の重合を促進する。この場合に１メチオニンＮ−カルボ
キシ無水物はリシン残基に対して１乃至５０モル過剰に
おいて一般に使用される。

１１の領域のＰＨｓ例えば１ａ、２のｐＨで行なう場合
には、メチオニンＮ−カルボキシ無水物の継続的添加（
ａｓａｏｇａｔｖｅ　ａｄｄｉｔｉｏｎｓ　）　Ｉｃよ
って進行させてグラフトしたメチオニン残基のより良好
な分布を得ることが好ましい。上記試薬の各添加の間に
１冬場合にリシン残基に対して１乃至１．５のモル過剰
の試薬を使用して、反応混合物を室温に到らしめ、そし
てそのｐＨを約３−４に下げて、中間体カルバメートの
脱カルボキシル化が起こることを可能とし、そして遊離
アミノ基への試薬の更なる結合が起こることを可能とす
る。

ポリリシンの遊離アミノ基に対する過剰なメチオニンＮ
−カルボキシ無水物は最終生成物におけるメチオニン及
びリシンの相対的割合の決定を可能とする。メチオニン
／リシン割合は一般に０．４乃至４である。

ポリメチオニル−リリシンは前もって透析されているそ
の水性溶液の凍結乾燥によシ単離するととができる。

本発明において使用される重合体の製造のために使用さ
れるＮ−カルボベンゾキシリシン及びメチオニンＮ−カ
ルボキシ無水物は、無水テトラヒドロフランの如き不活
性有機溶媒中のアミノ酸の懸濁液に対して３０−６０℃
、好ましくは約４５℃の温度で無水ホスゲンを作用させ
ることによっテ、バーシュマン等（Ｈ４ｒｓａｈｔｎａ
ｎ　ａｔ　ａｌ　）ジャーナル　オツ　アメリカン　ケ
ミカル　ソサイエテイー、第９５巻、２７４６−２７５
４頁（Ｊ。

血−デ、Ｃｈａｍ、ＳｏＣ，９３ｔ　　ＦＦ　　２７４
６−　２７５４）（１９７１）の方法によシ製造するこ
とができる。

下記する実施例は本発明に使用される重合体の製造を説
明する。

実施例１ Ｎ−カルボキシベンゾキシ−Ｌ−リシンＮ−カルボキシ
無水物は２０℃でジオキサン中で作用する開始剤（ナト
リウムメチレート）の存在下に重合する。反応媒体から
のモノマーの消失はその重合を追跡することを可能とす
る。重合は７５時間後に完了する。得られる重合体は粘
性の生成物の形態をとる。

重合体を臭化水素酸で飽和した酢酸で３０分間処理する
。生成した沈殿はりエチルエーテルで洗浄しそして乾燥
する。水に可溶化し続いて透析した後、得られたポリ−
ニーリシンを凍結乾燥によってその溶液から分離する。

分子量は２９０，０００ダルトンの領域にある。

ポリ−ニーリシンの脱アミノ化は遊離アミノ基の存在が
証明されることを可能とする。酸加水分解の後、クロマ
トグラフィー分析はα−アミノ−８−ヒドロキシカブロ
ン酸の存在に対応する１つのピークを示す。

Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−リシンＮ−カルボキシ無水
物は、無水テトラヒドロ７−）ン中のＮ６−カルポペン
ゾキシーＬ−リシンの懸濁液に４５℃で無水ホスダンを
吹き込むことによシ得られる。

反応が完了すると、無水窒素を吹かせて、過剰のホスダ
ンを除去する。溶媒の蒸発の後、生成物を酢酸エチル中
に溶解する。溶媒を蒸発させそして残留物を酢酸エチル
で処理する。この操作を２回繰返ス。Ｎ−カルボベンゾ
キシ−Ｌ−リシンＮ−カルボキシ無水物は酢酸エチル中
のその溶液に１：１の割合（容量で）までＮ−ヘキサン
をゆつくシと加えると結晶化する。得られる結晶はへキ
サン／酢酸エチル（９：１容量）で洗浄する。それらは
９７℃で溶融する。

実施例２ １５０ミリモルの塩化ナトリウムを含有するｐ　Ｈ６，
５のリン酸ナトリウム緩衝液（１００ミリモル）中の５
キ／−の溶液のＩリーＬ−リシンを４℃に保持する。激
しく攪拌しセしてＣＬＬＭ水酸化ナトリウムを加えるこ
とによｈｐＨを一定に保持して、リシン残基当シ１モル
のメチオニンＮ−カルボキシ無水物を加える。混合物を
４℃で一夜放置した後、生成物を３日間水に対して透析
し次いで溶液を凍結乾燥する。

得られたポリーＬ−メチオニルポリーＬ−リシンは、０
．５５のメチオニン／リシン割合を有しておシ、そして
２７％の変性されたリシン残基を含有する。結合収率は
８０％の領域にある。

油状の生成物の形を取るＬ−メチオニンＮ−カルボキシ
無水物は、Ｎ−カルボベンゾΦシーＬ−リシンＮ−カル
ボキシ無水物を得るための上記した条件下にＬ−メチオ
ニンにホスダンを作用させるととＫよシ得られる。

実施例３ リシン残基当シ３モルのＬ−メチオニンＮ−カルボキシ
無水物を使用して、実施例２の方法を用いて、メチオニ
ン／リシン割合＝　１．９０で、ｌ、且つ変性されたリ
シン残基４９％を含有するポリーＬ−メチオニルポリー
Ｌ−リシンが得られる。

実施例４ リシン残基当り５モルのＬ−メチオニンＮ−カルボキシ
無水物を使用し、実施例２の方法を用いて、メチオニン
／リシン割合＝　３．４０であシ且つ変性されたリシン
残基７０％を含有するポ１７　＋　Ｚ−メチオニルポリ
−Ｌ−リシンが得られる。

実施例５ １５０ミリモル塩化ナトリウムを含有するｐＨ１α２の
緩衝された炭酸水素す）　１７ウム溶液（１００ミリモ
ル）中にポリ−ニーリシンを４℃で溶解する。リシン残
基当り１モルのＬ−メチオニンＮ−カルボキシ無水物を
加える。温度を２０℃に上昇せしめそして反応混合物の
ｐＨを１０分間ｐＨ５−４に調節する。４℃に冷却した
後、生成物を５日間蒸留水に対して透析し、次いで溶液
を凍結乾燥する。

メチオニン／リシン割合＝０．４５であり、且つ変性さ
れたリシン残基４５％を含有するポリーＬ−メチオニル
ポリーＬ−リシンが得られる。

実施例６ リシン残基当シ１．２モルのＬ−メチオニンＮ−カルボ
キシ無水物を使用し、実施例５の方法に従って、メチオ
ニン／リシン割合＝　０．５３であり且つ変性されたリ
シン残基５０％を含有する／ＩＪ−Ｌ−メチオニルポリ
−Ｌ−リシンが得られる。

実施例７ リシン残基当シ１モルのＬ−メチオニンＮ−カルボキシ
無水物を３回使用し、実施例５の方法に従って、メチオ
ニン／リシン割合＝２．１０であシ且つ変性されたリシ
ン残基６６％を含有するポリ−ニーメチオニル４リーＬ
−リシンが得られる。

本発明において使用される重合体におけるリシン及びメ
チオニンの利用可能性は、例えば、ベグシン、膵液（ｐ
ａｎｏｒｇａｔｔａ　ｊｓｔａｍ　）及び腸内アミノペ
デチダーセ（ｔｓｔａｓｔｔｎａｌ　ｃｍｔｓｏｐａｐ
ｔｔ−ｄａａｇ　）の如き消化管中に存在する酵素を使
用して引き続く消化（ｓｓｅｃｇａａｉｖａ　ｄｉｇｅ
ｓｔｉｏｎｓ　）により生体外でｉ明することができる
。表Ｉは消化期間中に放出されたリシン及びメチオニン
の相対的量を示す。

使用された重合体のタイプに依存して、２つのア建ノ酸
利用性は非常に変動性である。一般に、比較的高いメチ
オニン含有率（実施例３）を有するｐＨ４５における重
合によシ得られる生成物は容易に加水分解され、これに
対して、相当な割合の変性゛されたリシン残基によシ特
徴づけられる（実施例７）、ｐＨ１α２で得られる生成
物はタンパク分解酵素に受は入れられるのかあまり容易
でない。更に、相当な割合の変性されたリシン残基を含
有するｐＨ４５で得られる重合体は、メチオニンＮ−カ
ルボキシ無水物の継続的添加によシｐＨ１α２で得られ
る重合体よシは容易に加水分解される。

一般に、満足すべき利用性はメチオニン／リシン割合が
２よル小さい、好ましくは約１である場合に得られ、こ
の割合はポリメチオニルポリリシンを製造するために使
用される方法に従って変えることができる。

本発明において使用される一すメチオニルーリリシンの
栄養価は、リシン及びメチオニンの不足した基本的飼料
（ｂαｔｉｅ　ｄｉｅｔ　）を摂取しているラットにお
いて証明された。

基本的飼料（以後ＵＡＲと呼ぶ）は下記成分（％）から
成る： 小麦グルテン（５０％のタンパ　　　１０り質） 植物油　　　　　　　　　　　　　　　５デンプン　　
　　　　　　　　　　　　５０デキストロース　　　　
　　　　　　２５必須ミネラル　　　　　　　　　　　
　４ビタミン　　　　　　　　　　　　　　　α５トリ
グト７アン　　　　　　　　　　　α３メチオニン及び
システィン　　　　　　α２５リシン　　　　　　　　
　　　　　　　　０．２８残シは吸着された水である。

例えば、ポリ−ニーリシン（実施例１に記載の如き）並
びにメチオニン／リシン割合が１−α８５の領域にあシ
且つ３０％の変性されたリシン残基を含有する一す−Ｌ
−メチオニル４リーＬ−リシン（リシン残基癲シ１．３
モルのＬ−メチオニンＮ−カルボキシ無水物を使用して
、実施例２に記載の方法で得られた）を使用して、表■
に示した結果が得られた。

この表のデータは、遊離リシン及び遊離メチオニンによ
る基本飼料の補充は動物の成長を相当に改良すること及
びポリ−ニーメチオニルポリ−Ｌ−リシンで補充された
飼料を投与された動物の成長は遊離アミノ酸で補充され
た飼料を投与された動物の成長と有意な差はないことを
示す。更に、ポリ−ニーリシンの形態にあるリシンによ
る補充は遊離形態のリシンの場合よシも相当効率が良い
。

本発明に使用されたポリメチオニルポリリシンは反拐動
物のとぶ胃において可溶性であると共にバクテリアの分
解に対して抵抗性であるという格段の特性を有している
。例えば、ｄｅｌ）−Ｌ−メチオニルポリ−Ｌ−リシン
（０，５Ｍ）を３００×３０１の網目ロサイズ（ｍｅｓ
ｈ　ａｐｔｔｒｔｘｒａ　５ｉｚｅ）を有するナイロン
袋（８αｃｈｔｔｔ）に導入することができる。フイス
テルを取り付けた雌羊（Ｂａｔｕ−１ａｔａｄ　ａｍｅ
ｎ　）のこぶ胃において袋を４８時間インキュベートす
る。次いで袋を回収しそして洗浄する。残りの活性物質
を適当な方法によシ定量的に決定する。ナイロン袋にお
いて見出されたＬ−リシン及びＬ−メチオニンの量はそ
れぞれ最初の含有率の８０％及び６０％に相当する。ｚ
、　＋　１７シン及びＬ−メチオニンが遊離形態で摂取
されると、少しの割合のこれらのアミノ酸のみが微生物
醗酵を免れる。

故に、本発明に使用されるポリメチオニルポリリシンは
反協動物に与えるための上等の補助剤である。

動物に与えるための本発明の組成物は十分な量のポリリ
シン及び／又はポリメチオニルポリリシンを含有する。

Ｉリフチオニル４リリシンは完全な配合飼料において均
一なダイス・９−ノヨンとして分配することができる。

それは最も頻繁には、ビタミン及び鉱物塩の如き他の添
加剤と共に補充飼料中に分配することもできる。これら
の補充飼料は飼料配給量（ｆｅｅｄ　’ｌ”６１４０％
）と混合するか又はそのまま食べることができる。それ
らは通常は飼料配給量の５−２０％である。

補充飼料又は完全な飼料配給量を調合するために使用さ
れる″′グレミックス”は一般に、１−２０％のポリメ
チオニルポリリシンを含有する。

それらは飼料中の補助剤の均一な分配を促進する便利な
中間物を構成する。

“プレミックス”それ自体は、食べられる変性剤、例え
ば、飼料染料、香味料、分散剤又は凝集防止剤（αｎｔ
ｉ−ασｇｌｏ慨−デαｎｔｓ）、及び飼料充填剤（ｆ
ｅｅｄ　ｆｉｌｌｅテｓ　）が添加され、そして９９．
９−２０％のポリメチオニルポリリシンを含有する濃縮
物から一般に得られる。

濃縮物及びプレミックスは一般に粉末状である。

補充飼料及び完全配合飼料は粉末状であるか又は慣用の
方法により調製されたペレットの形態にあることができ
る。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ポリリシン及び／又はポリメチオニルポリリシンを
   含有して成る動物飼料組成物。 ２、リシン及び／又はメチオニン残基がＬ型である特許
   請求の範囲第１項記載の組成物。 ３、ポリリシン及び／又はポリメチオニルポリリシンが
   １，０００乃至１，０００，０００の分子量を有してい
   る特許請求の範囲第１又は２項記載の組成物。 ４、ポリリシン及び／又はポリメチオニルポリリシンが
   ２０，０００乃至２００，０００の分子量を有している
   特許請求の範囲第３項記載の組成物。 ５、ポリメチオニルポリリシンにおいて、メチオニン／
   リシン割合が０．４乃至４である特許請求の範囲第１−
   ４項の何れかに記載の組成物。 ６、メチオニン／リシン割合が２以下である特許請求の
   範囲第５項記載の組成物。 ７、リシン又はリシン及びメチオニンの動物飼料の要求
   量を実質的にすべて含有している飼料を提供するのに十
   分な量のポリリシン、ポリメチオニルポリリシン又はそ
   の両者を含む飼料を動物に与えることより成る動物を飼
   育する方法。 ８、該動物が反芻動物である、特許請求の範囲第７項記
   載の方法。