RU1832188C - Способ количественного определени вещества, содержащего хлоралкильные группы - Google Patents

Abstract

Сущность: дл  количественного определени  п-бис-(|3-хлорэтил)-аминофенилуксус- ной кислоты в присутствии цитоста- тиков-производных п-бис- З-хлорэтил}- амина готов т пробу путем растворени  анализируемого вещества в этилацетате, добавл ют к полученному раствору 20%- ный раствор никотиновой кислоты в 25%- ном водном растворе гидроксида кали  до концентрации никотиновой кислоты в фото- метрируемом растворе 8%. Полученный раствор нагревают на кип щей вод ной бане до удалени  этилацетата, охлаждают раствор , добавл ют уксусную кислоту до концентрации 3% и этанол до концентрации 20-25% в фотометрируемом растворе. Фо- тометрирование раствора провод т при 510 нм. сл с

Description

Изобретение относитс  к фармацевтической и аналитической химии, преимущественно к анализу промежуточных продуктов, получаемых при синтезе цито- статиков и может быть использовано как при синтезе, так и в контроле чистоты лекарственных препаратов.

Цель изобретени  -разработка способа количественного определени  БХФК, отличающегос  возможностью селективного определени  его в присутствии цитостатиков - производные БХЭА, а также увеличени  точности определени .

Сущность способа заключаетс  в образовании полиметинового красител  при нагревании БХФК с никотиновой кислотой и

гидроксидом кали . Продукт реакции имеет малиновую окраску (Дтах 510 нм), не измен ющуюс  в течение нескольких суток; интенсивность окраски пропорциональна концентрации БХФК в исходном растворе. Нар ду с полиметиновым красителем в растворе образуетс  глутаконовый альдегид (Дтах 365 нм), который также может использоватьс  дл  селективного количественного определени  БХФК; интенсивность поглощени  глутаконового альдегида в максимуме полосы поглощени  в 6 раз больше интенсивности поглощени  полиметинового красител . Дл  других производных БХЭА по вление окраски в услови х этой реакции не характерно. Поскольку цитостасо со

ю

д

со

00

тики, производные БХЭА, при нагревании с производными пиридина в щелочной среде не окрашиваютс , а окраска БХФК, полученна  в этих услови х, интенсивна и устойчива во времени, мы использовали это свойство дл  определени  БХФК в присутствии цитостатиков как точного, селективного метода. Стабилизатором окрашивани   вл етс  уксусна  кислота. При необходимости , определение БХФК можно проводить при двух длинах волн - 365 и 510 нм.

По сравнению с известными способами определени  веществ с хлоралкильными группами, данный способ позвол ет надежно определ ть БХФК в чистом виде, в технических образцах, и что  вл етс  совершенно новым - определ ть его как примесь в кор- тифене.тестифене и др. производных БХЭА.

Определение осуществл етс  следующим образом: навеску препарата (с точностью до 0,0002 г) раствор ют в этилацетате. К аликвоте раствора анализируемого образца в пробирке прибавл ют 20% раствор никотиновой кислоты в 25% растворе гидроксида кали  и нагревают ее на кип щей вод ной бане до испарени  этилацета- та. После охлаждени  в пробирку прибавл ют уксусную кислоту, перенос т смесь в мерную пробирку и довод т общий объем раствора этанолом до 5 мл. Измер ют поглощение окрашенного раствора не спектрофотометре при длине волны 510 нм или на фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром (490 нм) в кюветах 1 см, расчет концентрации провод т по калибровочному графику или по известной формуле с учетом поглощени  стандартного раствора БХФК. При анализе чистого препарата измерение поглощени  провод т при длине волны 365 или 510 нм.

Закон Бугера-Бера соблюдаетс  в пределах от 0,1 до 3 мг/мл дл  прлиметиновых красителей (Яшах 510 нм) и дл  глутаконового альдегида $тах 365 нм) в пределах от 8 до 40 мкг/мл. Относительна  ошибка метода составл ют ±0,7%.

В примерах 1-3 были использованы образцы БХФ К серии 911089.

П р и м е р 1. Определение БХФК. Точную навеску 0,1280 г БХФК внесли в мерную колбу, вместимостью 25 мл, растворили в 10 мл эти л ацетата и довели этим же растворителем объем раствора в колбе до метки. Тщательно перемешали содержимое, перенесли в 3 пробирки по 0,25 мл полученного раствора, прибавили по 2 мл 20% раствора никотиновой кислоты в25% растворе гидроксида кали , пробирки нагрели на кип щей вод ной бане до испарени  этилацетата.

После охлаждени  в пробирки внесли по 0,15 мл уксусной кислоты, содержимое пробирок перенесли в мерные пробирки на 10 мл и смыли остатки с помощью 40% этанола

в мерные пробирки. Общий объем довели этим же этанолом до 5 мл, перемещали и измер ли поглощение на спектрофотометре при 510 нм. В расчетах использовал и средние значени  из 3 измерений. Параллельно

0 проводили определение со стандартным раствором БХФК с известной концентрацией . Раствором сравнени  служила смесь реактивов, без исследуемого вещества, используема  дл  получени  окрашенного

5 раствора БХФК.

Концентрацию анализируемого вещества Сх (в %) рассчитывали по формуле: DX Сет а 100

Lx

ст Р

0 где Dx - поглощение анализируемого раствора; равное 0,29;

DCT - поглощение стандартного раствора БХФК. 100% чистоты равное 0,30;

Сет - концентраци  стандартного рас5 твора, равна  0,00025 г/мл;

а - разведение препаратов, равное 1:500;

р - навеска анализируемого препарата - 0,1260 г.

0 Расчет показал, что во вз той навеске содержитс  95,87% БХФК.

П р и м е р 2. Определение БХФК по глутаконовому альдегиду. Навеску 0,0220 г БХФК внесли в мерную колбу вместимостью

5 25 мл, растворили в 10 мл этилацетата и довели этим же растворителем содержимое колбы до метки. После перемешивани  отобрали по 1 мл раствора в 3 пробирки, прибавили по 2 мл 20% раствора никотиновой

0 кислоты в 25% растворе гидроксида кали  и нагревали пробирки на кип щей вод ной бане до испарени  этилацетата. После охлаждени  к содержимому пробирок прибавили по 0,15 мл уксусной кислоты и по 3 мл

$ 40% этанола, размещали и перенесли раствор в мерные колбы вместимостью 25 мл, довели объем содержимого колб до метки, перемешали и измерили поглощение раствора при 365 нм. В расчетах использовали

0 средние значени  результатов из 3 измерений . Параллельно проводили определение со стандартным раствором БХФК. Раствором сравнени  служила смесь реактивов без исследуемого вещества,5 Концентрацию анализируемого вещества (в %) рассчитывали по формуле, приведенной в примере 1.

Концентраци  стандартного раствора равна 0,00004 г/мл;

Поглощение анализируемого раствора равно 0,59;

Поглощение стандартного раствора равно 0,69;

Разведение растворов равно 1:625;

Концентраци  БХФК во вз той навеске равна 97,16%.

П р и м е р 3. Определение содержани  БХФК в смеси с гормоноцитостатиком кор- тифеном. Навески 0,0204 г БХФК и 0,9520 г кортифена внесли в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворили в 20 мл этилаце- тата и довели этим же растворителем содержимое колбы до метки. После перемешивани  в 3 пробирки из колбы отобрали по 1 мл полученного раствора, прибавили по 2 мл 20% раствора никотиновой кислоты в 25% растворе гидроксида кали  и нагревали пробирки на кип щей вод ной бане до испарени  этилацетата. После охлаждени  в пробирки внесли по 0,15 мл уксусной кислоты , перенесли содержимое в мерные пробирки на 10 мл и смыли остатки с помощью 40% этанола в мерные пробирки; общий объем довели этим же этанолом до 5 мл, перемешали и измерили поглощение на спектрофотометре при 510 нм. В расчетах использовали средние значени  результатов из 3 измерений. Параллельно проводили определение со стандартным раствором БХФК с известной концентрацией. Раствором сравнени  служила смесь реактивов без исследуемого вещества.

Содержание БХФК (в г) рассчитывали

по формуле: Хг °х Сст а

D,

ст

Поглощение анализируемого раствора равно 0,198;

Поглощение стандартного раствора равно 0,20;

Концентраци  стандартного раствора равна 0,00016 г/мл;

Разведение равно 1:125;

Содержание БХФК равно 0,0198 г, что соответствует 97,05% от вз той навески.

Результаты определени  БХФК, полученные в примерах 1-3, имеют хорошую сходимость, что свидетельствует о правильности полученных результатов.

Claims (1)

1. Формула изобретени  Способ количественного определени  вещества, содержащего хлоралкильные группы, заключающийс  в том, что готов т пробу образца, добавл ют к пробе производное пиридина в водном растворе щелочи , нагревают полученный раствор, охлаждают его и фотометрируют, отличающийс  тем, что, с целью возможности селективного определени  п-бис- 8-хлорэ- тил)-аминофенилуксусной кислоты в присутствии цитостатиков - производных п-бис- 5- хлорэтил)-амина, а также увеличени  точности определени , пробу готов т, раствор   анализируемое вещество в этилацетате, добавл ют в качестве производного пиридина 20%-ный раствор никотиновой кислоты в 25%-ном растворе гидроксида кали  до концентрации никотиновой кислоты в фотомет- рируемом растворе 8%, а полученный раствор нагревают на кип щей вод ной бане до удалени  этилацетата, затем добавл ют уксусную кислоту и этанол до концентрации 3% уксусной кислоты и 20- 25% этанола в фотометрируемом растворе и фотбметрируют раствор при 510 нм.