RU1831498C

RU1831498C - Способ контактной сушки микроорганизмов

Info

Publication number: RU1831498C
Application number: SU915000377A
Authority: RU
Inventors: Сергей Николаевич Вирясов; Владимир Владимирович Перелыгин; Юлия Сергеевна Биркина
Original assignee: С.Н.Вир сов. В.В.Перелыгин и Ю.С.Биркина
Priority date: 1991-08-15
Filing date: 1991-08-15
Publication date: 1993-07-30

Abstract

Использование: микробиологическа промышленность, производство сухих микробных препаратов. Сущность изобретени : способ контактной сушки микроорганизмов предусматривает смешивание их суспензии с адсорбентом влаги, перед окончательным смешиванием с этим адсорбентом его и/или суспензию смешивают с промежуточным адсорбентом влаги, имеющим меньшую сорбционную способность к влаге, чем основной адсорбент. Ё

Description

Изобретение относитс к технологии производства препаратов, а именно к производству сухих микробных препаратов.

В производстве сухих микробных препаратов широко используетс метод контактной сушки, суть которого состоит в смешивании высушиваемого объекта (например , суспензии микроорганизмов)с адсорбентом влаги.

Целью изобретени вл етс сохранение нативных свойств микроорганизмов и повышение их жизнеспособности.

Кроме того, получаемый высушенный препарат микроорганизмов позвол ет после длительного хранени переводить его в суспензию при сохранении физиологических свойств клеток.

Это достигаетс путем предварительного смешивани суспензии микроорганизмов и(или) адсорбента влаги с веществом (веществами), также вл ющимс адсорбентом , но св зывающим воду в меньшей степени , чем основной адсорбент. В данном случае это вещество или комбинаци веществ (промежуточный) адсорбент) играет роль буфера при переходе влаги из биокомпонента в высоковлагоемкий адсорбент; процесс обезвоживани происходит в более

00 CJ

Ј ю

00

GJ

м гких услови х, что приводит к снижению степени инактивации микроорганизмов . Кроме того, частицы промежуточного адсорбента преп тствуют слипанию микроорганизмов с высоковлагоемким адсорбентом , что позвол ет при необходимости отделить последний от биокомпонента и получить, удобные дл применени формы биопрепаратов.

П р и м ер 1. В качестве высоковлагоемкого адсорбента используетс высушенна до остаточной влажности менее 1 % ионообменна смола КБ-4П2, в качестве промежуточного адсорбента - высушенна до остаточной влажности менее 1% порошкообразна окись алюмини . Высушиванию подвергаетс техническа жидкость на основе S.enteritidls, v.lssathenko, представл юща собой смесь защитной среды (сахароза 25%, глутамат натри 20,5%, тио- мочевииа 0,8%, пептон 0,8%, дистиллированна вода 70,9%) с концентрированной суспензией микроорганизмов, выращенных методом глубинного культивировани на питательной среде на основе сернокислотного гидролизата рыбокостной муки и сконцентрированных методом сепарировани . Компоненты смешиваютс в соотношении: 2 части концентрированной суспензии на 1 часть защитной среды.

Смола КБ-4П2 и окись алюмини в соотношении 1 весова часть окиси алюмини на 4 весовые части КБ-4П2 внос тс в цилиндрическую емкость, Производитс перемешивание путем вращени емкости.

20 г смеси помещаетс в металлический пенал с шарами, пенал помещаетс в сушильный шкаф, производитс досушивание при температуре (105 ± 3)°С в течение 4 часов, затем пенал охлаждаетс до температуры минус 7°С, В пенал вводитс 4 мл технической жидкости. Производитс перемешивание встр хиванием в течение ТО мин. затем образец выдерживаетс в течение 22 часов в холодильнике при температуре 4°С и производитс тестирование. 0,5 г образца разводитс в 9,5 мл охлажденной до 4°С среды культивировани , интенсивно встр хиваетс , и производитс высев на плотную питательную среду, разлитую в чашки Петри. После инкубировани подсчитываетс число колоний.

Биологическа концентраци составила 31,0 ±3,0 млрд колониеобразующих единиц на грамм препарата (КРЕ/г); в контрольном образце (при использовании в качестве адсорбента 20 г КБ-4П2 без применени промежуточного адсорбента - окиси алюмини )

0

5

0

5

0

5

0

5

0

5

13,0 ± 3,0 млрд КОЕ/г, выживаемость 41% и 17% соответственно.

Таким образом, по сравнению с контрольным образцом наблюдаетс увеличение выживаемости в 2,4 раза.

Прим-ер 2. Юг высушенной до остаточной влажности менее 1 % окиси алюмини помещаетс в металлический пенал с шарами; пенал помещаетс в сушильный шкаф, производитс досушивание при температуре (105 ± 3)°С в течение 4 часов, затем пенал охлаждаетс до температуры минус 6°С. В пенал вводитс 10 мл технической жидкости на основе S.enteritidls, v.lssathenko приготовленной по технологии, описанной в примере 1.

Производитс перемешивание встр хиванием в течение 10 минут, затем пенал вновь охлаждаетс до минус 6°С, и в него вноситс 40 г охлажденной до минус 6°С сухой (остаточна влажность менее 1%) смеси смолы и окиси алюмини в соотношении 10:1, приготовленной по технологии, описанной в примере 1. Производитс перемешивание встр хиванием в течение 10 минут, затем образец выдерживаетс в течение 21 часа в холодильнике при температуре 4°С, и производитс тестирование по методу, описанному в примере 1.

Биологическа концентраци составила 27,5 ±3,2 млрд КОЕ/г; в контрольном образце , приготовленном, как и в примере 1, без применени окиси алюмини - 13,0 ±.3,2 млрд КОЕ/г, выживаемость 36% и 17% соответственно .

Таким образом, по сравнению с контрольным образцом наблюдаетс увеличение выживаемости в 2,1 раза.

П р и м ер 3, В качестве основного адсорбента используетс порошкообразна окись алюмини , в качестве промежуточного адсорбента - смесь поролоновых частиц с аэросилом.

Поролоновые частицы объемом (3...5) мм кажда дл подсушивани выдерживаютс в эксикаторе с сухим силикагелем в течение б часов. 300 мг поролоновых частиц и 50 мг аэросила А-380 внос тс в металлический пенал с шарами. Производитс пере- мешивание встр хиванием в течение 2 минут.

В пенал вноситс 4 мл технической жидкости на основе S.enterltldis, v.lssathenko приготовленной по технологии, описанной в примере 1. Производитс перемешивание встр хиванием в течение 3 минут. Пенал охлаждаетс о температуры минус 6°С, затем в него вноситс 20 г охлажденной до минус 6°С сухой окиси алюмини (остаточна влажность менее 1 %). Производитс перемешивание встр хиванием в течение 10 минут,.образец выдерживаетс в течение 22 часов в холодильнике при температуре 4°С и производитс тестирование по методу, описанному в примере 1,

Биологическа концентраци составила 34,0 ±3,2 млрд КОЕ/г, в контрольном образец (при использовании в качестве адсорбента 20 г окиси алюмини , без применени смеси поролоновых частиц с аэросилом) - 22 ± 3,0 млрд КОЕ/г, выживаемость 44% и 29% соответственно.

Таким образом, наблюдаетс увеличение выживаемости по сравнению с контрольным образцом в 1,5 раза.

После удалени окиси алюмини при помощи просеивани через сито был получен препарат, большую часть которого составл ют поролоновые частицы, пропитанные высушенной технической жидкостью на основе S.enteritidis. Биологическа концентраци составила 39,0 ± 4,0 млрд КОЕ/г. Данна форма препарата может успешно примен тьс дл борьбы с мышевид- ными грызунами, которые поедают содержащие пищевые добавки (компоненты защитной среды) частицы, и вместе с ними - патогенные дл грызунов микроорганизмы S.enteritidis. v.issathenko. При скармливании мышам данного препарата наблюдалась гибель 70% особей на прот жении 10 суток наблюдени .

Пример 4. В качестве высоковлагоемкого адсорбента используетс выиушен- на до остаточной влажности менее 1 % ионообменна смола КБ-4П2. В качестве промежуточного адсорбента - высушенна до остаточной влажности менее 1 % порошкообразна окись алюмини .

Высушиванию подвергаетс техническа жидкость на основе E.coli M-17, представл юща собой смесь суспензии микроорганизмов, выращенной на питательной среде на основе м со-пептонного бульона, с 30% раствором сахарозы в соотношении 2:1.

Смесь сухих КБ-4П2 и окиси алюмини , приготовленна как описано в примере 1. в количестве 20 г помещаетс в металлический пенал с шарами, пенал помещаетс в сушильный шкаф и производитс досушивание при температуре (105 ± 3)°С в течение 4 часов, затем пенал охлаждаетс до температуры минус 8°С. В пенал вводитс 4 мл технической жидкости и производитс перемешивание встр хиванием в течение 10 минут. Затем образец выдерживаетс в течение 20 часов при температуре 4°С и производитс тестирование по методу, описанному в примере 1.

Биологическа концентраци составила 1,1 ±0,1 млрд КОЕ/г; в контрольном образ- 5 це (при использовании в качестве адсорбента 20 г КБ-4П2 без окиси алюмини ) - 0,78+0,08 млрд КОЕ/г, выживаемость 43% и 31% соответственно.

Таким образом, по сравнению с конт0 рольным образцом наблюдаетс увеличение выживаемости в 1,4 раза.

Пример 5. 20 г адсорбента, приготовленного по технологии, описанной в примере 1, вноситс в металлический пенал с

5 шарами. Производитс досушивание при температуре (105 ± 3)°С в течение 4 часов, затем пенал охлаждаетс до минус 8°С. В пенал сноситс 4 мл технической жидкости на основе тул ремийного вакцинного штам0 ма № 15, приготовленной по технологии, описанной в примере 1. Производитс перемешивание встр хиванием в течением 10 минут, затем образец выдерживаетс 20 часов в холодильнике при температуре 4°С и

5 производитс тестирование по методу, описанному в примере 1.

Биологическа концентраци составила 30,0 ± 4,2 млрд КОЕ/г; в контрольном образце (без применени окиси алюмини ) 0 20,0 ± 4,0 млрд КОЕ/г, выживаемость 33% и 22% соответственно.

После хранени в течение 1 мес ца при температуре (20 ± 3)°С биологическа концентраци составила21,6 ±4,0 млрд КОЕ/г,

5 в контрольном образце - 15,0 ± 3,0 млрд КОЕ/г, выживаемость 24% и 17% соответственно .

Таким образом, по сравнению с контрольным образцом наблюдаетс увеличе0 ние выживаемости в 1,4...1,5 раза.

Приведенные примеры показывают, что данный способ позвол ет повысить выживаемость микроорганизмов в составе препаратов , получаемых при помощи

5 контактной сушки в 1,4..,2,4 раза и получить формы биопрепаратов, удобные дл применени в музейном хранении микроорганизмов , сельском хоз йстве и других област х. Препараты данного типа легко развод тс в

0 воде и могут быть использованы как в порошкообразном виде, так и. после регидра- тации, в жидкой форме.

Claims

Формула изобретени 5 Способ контактной сушки микроорганизмов предусматривающий смешивзние суспензии микроорганизмов, полученной путем глубинного культивировани , с адсорбентом влаги, отличающийс тем, что.

718314988

перед смешиванием микроорганизмов с ад- точным адсорбентом влаги, имеющим мень- сорбентом последний и/или суспензию шую сорбцион ную способность по отноше- микроррганизмов смешивают с промежу- нию к влаге, чем основной адсорбент.