RU1780013C - Способ прогнозировани течени пиелонефрита - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине, е частности к клинической урологии и нефрологии. Цель изобретени  - повышение точ-'ности прогнозировани  течени  острого и хронического пиелонефрита. Поставленна  цель достигаетс  путем определени  степени снижени  истинной Са-АТФазной активности микросомной фракции коркового вещества почек интактных крыс под действием плазмы крови больных острым и хроническим пиелонефритом. При снижении истинной Са-АГФазной активности микро- сом в присутствии плазмы крови больного с острым пиелонефритом более чем на 40%предполагаетс  осложненное течение, по- требующее проведени  дополнительных вмешательств с возможным применением экстракорпоральных методов детоксика- ции. Снижение Са-АТФазной активности микросом почек крыс под действием плазмы крови больных с хроническим пиелонефритом более чем на 20% указывает на активность процесса, осложненность течени  и необходимость длительной терапии. Практическое применение за вленного способа в клинической практике облегчит или документально подтвердит степень т жести течени  пиелонефрита, поможет выбрать наиболее эффективный способ лечени , что позволит избежать развити  осложнений, улучшить результаты лечени  больных с острым и хроническим пиелонефритом. Примен емый способ принесет определенный экономический эффект за счет сокращени  времени дл  подбора наиболее эффективного способа лечени  больных. Возможно, что снижение Са-АТФазной активности микросом почек крыс может наблюдатьс  и при некоторых других воспалительных заболевани х.слс«ш,»

Description

Изобретение относитс  к области медицины , в частности к клинической урологии и нефрологии.

Среди наиболее распространенных методов определени  активности воспалительного заболевани  почек используютс  данные клинических анализов крови и мочи с подсчетом количества лейкоцитов в осадке мочи. К недостаткам способа относитс  приблизительность подсчета содержани  лейкоцитов в моче, отсутствие зависимости от

характера и т жести воспалительного процесса в почках при хроническом пиелонефрите св занной с наличием инфекции в нижних мочевых пут х. В св зи с вышесказанным , изменени  количества лейкоцитов в моче часто не коррелируют с т жестью течени  пиелонефрита и, кроме того, невоз-можно прогнозировать возможность развити  осложнений.

Известен также способ оценки выраженности воспалительного процесса в поч;;;:х пг;м остром и хроническом пиелоне:фри е по определению степени бактериурии. Хот  этот метод позвол ет характеризовать (e iiiocTb воспалени , он обладает 11|)рк141чес; и теми же недостатками, что и пре/1)-; Дуилмй.

Наиболее близким аналогом к за вл емому способу(прототипом) вллетс  способ опред лен /   т жести течени  воспалени  в почках 1 выраженности интоксикации по огределенмю уровн  средних молекул в кроки больнь х. Ыедостатком этого метода  вл етс  тот факт, что сама концепци  токС11ческого действи  средних молекул  вл етс  дискутабельной. Недостатком Э1О1Ч.) мет;,ца при его применении в клини-йской ;|ра;(тике дл  характеристики выражен мсхми остроты заболевани  и т жести i:ocioi H /i ; больного  вл етс  его недостагоч ;о  чупстсительность и специфичность к :.ОС;ииительным заболевани м.

1;ель:о изобретени   вл етс  повыше:11-:е lOii-iccTn прогнозировани  т жести гочемм  острого и хронического пиелонеф;оо осуществл етс  следующим обp: .JO.

i--ie более чем за 48 часов до момента )СЧ;пьзопан11  выдел лась стандартна  .-:кросомнл  фракци  из коркового вещестоа почек здоровых крыс. Микросомы сусги;м ,г1п:1ов /1и п 1-1,5 мл среды выделени  и замоиЕ;к1тали до момента использовани ,

Гчрогз-- больных вз та  натощак в пробирки с 0.3 мл 1,34% оксалата К центрифу Iiporia/jacb и плазма бралась дл  исследований,

Д.а  определени  вли ни  плазмы крови больпькх иг истинную Са-АТФазную актиомость микросом почек крыс брались стаканчикм объемом 3 мл с 1 м/f соответствуюш .ей среды инкубации и с добавлением суспензь микросом, добавл емых непосije/icrReHJio перед опредеинкубацией. СаА1С ззиV 0 активность микросомной o,QKi.,if-.-A Определ ли по образованию неорr;-jJi .:-i8CKaro фосфата и рассчитывали как pc.:3i iijci : между АТФазной активностью ми1фосор.1 в присутс1вии и в отсутствии в среде Сгг . В 1 ом и 2-ом стаканчиках среда иггкуоацш-; имела следующий состав; 100 NM kCL 4 мМ MoCl2, 40 мкМ CaCl2, 5 мМ 0.5 мМ узбамн, 10 мМ имидазол {рН - 7,2 при 37°С), а в 3-ем и 4-ом стаканчиках среда не содержала ионов Са и в среде инкубации вместо CaCi2 был добавлен 0,5 мМ ЗГТА. Перед инкубацией во все пробы добавл ли аламе1И..Н1Н (20 мкг./1мл). обеспечивающий опрь/ 8леиие истинной Са-АТФазной активности гиикросо-м (6). Содержание белка определ ли по биуретовой реакции. Работа Са-АТФазной системы микросом запускалась добавлением 3 м.моль АТФ.

Определение действи  плазмы крови

больных на Са-АТФазную активность микросом почек крыс.

В 1-ом и 3-ем стаканчиках определ ли активность Са-АТФазы в присутствии плазмы крови больных, дл  чего в каждый

0 из них добавл ли 0,05 мл исследуемой плазмы, микросом и инкубировали 3 минуты при 37°С, после чего реакцию запускали добавлением 3 м.моль АТФ. Во 2-ом и 4-ом стаканчиках определ ли истинную

5 Са-АТФазную активность микросом с добавкой , соответственно объему добавленной ранее в пробах 1,3 плазмы, среды инкубации. Пробы инкубировали 3 минуты и реакцию запускали 3 м.моль АТФ. Инкубацию проводили 1 минуту, останавливали реакцию трихлоруксусной кислотой. В дальнейшем определ ли во всех пробах количество образовавшегос  в результате гидролиза АТФ АТФазами неорганического

5 фосфора с помощью наборов фирмы Лахема ЧССР.

Принима  истинную Са-АТФазную активность микросом за 100%. определ ли % снижени  истинной Са-АТФазной активности микросом при добавках плазмы больных , В качестве контрол  об зательно в каждой серии исследований, нар ду с плазмой крови больных спиелонефритом, испытывали плазму крови здоровых людей.

5 Рассчитывали % снижени  Са-АТФазной активности микросом почек крыс при дейст ,вии плазмы крови больных с пиелонефритом , по отнощению к значени м активности определенной в присутствии плазмы здоро0 вых людей.

При добавлении в среду инкубации плазмы крови здоровых людей отмечалось некоторое снижение Са-АТФазной активности микросом почек крыс, однако это сниже5 нив не превышало 12% от исходной истинной Са-АТФазной активности микросом , тогда как плазма крови больных с пиелонефритом ингибировала эту активность в значительно большей степени. Особенно

0 .выраженным ингибирование отмеиено при остром пиелонефрите, причем степень ингибировани  коррелировала с т жесгью состо ни  больного,

П р и м е р 1. Больной К-ко поступил с

5 диагнозом пузырно-мочеточниковый рефлюкс , хронический пиелонефрит. После операции уретероцистоанастомоз разв илась атака острого пиелонефрита. Состо ние больного средней т жести, температура тела 37.8 С: 8 общем анализе крови лейкоцитоз , ускорение СОЭ (лейкоциты 15600, СОЭ-37 мм/час), в клиническом анализе мочи лейкоцитури  (лейкоциты покрывают все поле зрени ). Проведенное исследование ингибирующего вли ни  плазмы крови больного на Са-АТФазную активность микросомной системы почек крыс показало снижение Са-АТФазной активности микросом по сравнению с истинной активностью, котора  составл ла 38,9%. В контрольном исследовании с плазмой крови здорового донора ингибирование составл ло 5,9%. Концентраци  средних молекул в сыворотке крови, измеренна  при -254 нм - 0,405 усл.ед., а при -280 нм - 0,417 усл.ед., в то врем  как в контрольной сыворотке эти величины составл ли 0,249 усл.ед., 0,254 усл.ед. соответственно. Больному была проведена антибактериальна  терапи  и атака острого пиелонефрита была купирована.

Данным примером проиллюстрировано ингибирование Са-АТФазной активности микросомной фракции плазмой крови больного , которое меньше критического уровн  (40%) и которое сопровождаетс  неосложненным течением острого пиелонефрита.

П р и м е р 2. Больна  В-ва поступила в клинику с диагнозом двухсторонн   ахалази  мочеточников. После операции (уретероцистоанастомоз с обеих сторон) развилась атака острого пиелонефрита. Состо ние больной в момент исследовани  т желое , температура тела 38°С. В общем анализе крови лейкоцитоз, ускорение СОЭ (лейкоциты 16500, СОЭ-30). в клиническом анализе мочи лейкоцитури  (лейкоциты покрывают все поле зрени ). Проведено исследование ингибирующего действи  плазмы крови больной на Са-АТФазную активность микросом почек крысы, которое составило по сравнению с истинной Са-АТФазной активностью фракции 72,7%, а при контрольном исследовании с плазмой здорового донора - 6%. По сравнению с уровнем Са-АТФазной активностью в придутствии плазмы здорового донора, Са-АТФазна  активность микросом под действием плазмы больной снизилась на 71 %. Уровень средних молекул сыворотки составл л 0,44% усл. ед. при Я-254 нм,м и 0.461 усл.ед. при Я-280 нм.

Несмотр  на назначенную антибактериальную терапию, подобранную с учетом высе нной из мочи микрофлоры, состо ние больной ухудшалось, наростала гнойна  интоксикаци , в св зи с чем был проведен сеанс гемосорбции, после которого состо ние больной улучшилось,  влени  интоксикации значительно уменьшились. При

повторном исследовании ингибирующей активности плазмы крови больной на Са-АТФазную активность микросом почки крысы. снижение активности по сравнению с истинной Са-АТФазной активностью составило 37,1%, а по сравнению с активностью в присутствии контрольной плазмы на 30.4%. На фоне продолжающейс  антибактериальной терапии атака пиелонефрита была купирована в течение последующих нескольких дней.

Из данного примера видно, что резкое снижение Са-АТФазной активности микросом под действием плазмы крови больного

сопр жено с осложненным течением острого пиелонефрита, что про вл етс  в т желой интоксикации и неэффективности антибактериальной терапии.

Дл  клинической практики важно, что

на основании предлагаемого способа можно предполагать осложненное течение пиелонефрита с проведением экстракорпоральных методов детоксикации в более ранние сроки.

Сопоставл   диагностическую ценность за вл емого способа и метода-прототипа (по возрастанию уровн  средних молекул) можно отметить, что в 1-ом п 2-ом случа х увеличение концентрации средних

молекул в сыворотке крови было приблизительно однозначным. Общеприн тые тесты (температура тела, клинические анализы крови и мочи) также не документировали т жесть состо ни  больных. В то же врем .

предлагаемый способ вы вил существенную разницу в ингибирующей активности плазмы, более выраженной у больной Ввой . Таким образом, за вл емый способ наиболее точно отражает т жесть состо ни  и

необходимость проведени  более интенсивных методов лечени  у больных с атакой острого пиелонефрита.

П р и м е р 3. Больна  Г-ль поступила с диагнозом хронический пиелонефрит,

структура нижней трети правого мочеточника . Состо ние больной удовлетворительное. температура тела нормальна , в общем анализе крови - без патологии. В общем анализе мочи - лейкоцитури  (лейкоциты

покрывают все поле зрени ). Клиренс креатинина - 122 мл/мин.

Проведено исследование ингибирующего действи  плазмы крови больной на Са-АТФазную активность микросомной

фракции почек крысы. Ингибирование составило 12,2%, а при исследовании с контрольной плазмой - 9,4%. Концентраци  средних молекул сыворотки была при А -254 нм 0.154 усл.ед., а при А-280 нм - 0,192 усл.ед..

что в пределах нормы. Больной начато комплексное лечение уросептиками и в течение 15 дней признаки активности хронического пиелонефрита были ликвидированы.

П р и м е р 4. Больной Л-ри поступила с диагнозом хронический пиелонефрит, 2-х сторонний пузырно-мочеточниковый рефлюкс , нейрогенный мочевой пузырь. Состо ние больной в момент исследовани  удовлетворительное, температура тела нормальна , общий анализ крови - без патологии. В общем анализе мочи-лейкоцитури , эритроцитури  (лейкоциты покрывают в.се поле зрени ). Клиренс креатинина - 95 мл/мин. При обследовании обнаружено: отсутствие функции правой почки, у.ретерогидронефроз слева, нарушение проходимости пузырио-мочеточникового соусть  слева. Проведено исследование ингибирующего действи  плазмы крови больной на Са-АТФазную активность микросом почек крыс. Ингибирование ферментной активности по сравнению с истинной Са-АТФазной активностью микросом составило 26.4%, а по сравнению со значением АТФазной активности микросом в присутствии контрольной плазмы- 17%. Концентраци  средних молекул сыворотки при -254 нм -- 0,262 усл.ед., а при -280 нм - 0,290 усл.ед,, что в пределах нормы. После проведенного лечени  больна  выписана с нефростомическим дренажом , лейкоцитурией дл  продолжени  антибактериального лечени  по назначенной схеме и повторной госпитализацией после завершени  лечени .

Из данного примера видно, что при более значительном ингибировании плазмой

крови Са-АТФазной активности микросом почек крыс у больных хроническим пиелонефритом отмечаетс  более низка  эффективность противовоспалительной терапии и

требуетс  более тщательный подбор адекватных методов лечени ,

Представленные примеры показывают, что предлагаемый способ позвол ет прогнозировать выраженность и характер течени 

не только при остром, но и при хроническом пиелонефрите.

Практическое применение за вл емого способа в клинической практике облегчит или документально подтвердит степень т жести течени  пиелонефрита, поможет выбрать наиболее эффективный способ лечени , что позволит избежать развити  осложнений и улучшить результаты лечени  больных с острым и хроническим пиелонефритом .

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ прогнозировани  течени  пиелонефрита , включающий исследование плазмы крови, отличающийс  тем, что, с целью повышени  точности способа, плазму крови добавл ют в среду инкубации, содержащую стандартную микросомную систему коркового вещества почек крысы, определ ют Са-АТФазную активность микросом до и после инкубации с плазмой крови больного и при снижении относительно исходного уровн  у больных с острым пиелонефритом на 40% и более, а у больных с хроническим пиелонефритом на 24% и более прогнозируют осложненное течение болезни .