RU158294U1 - Иммунохроматографическая тест-система - Google Patents

Иммунохроматографическая тест-система Download PDF

Info

Publication number
RU158294U1
RU158294U1 RU2014145141/15U RU2014145141U RU158294U1 RU 158294 U1 RU158294 U1 RU 158294U1 RU 2014145141/15 U RU2014145141/15 U RU 2014145141/15U RU 2014145141 U RU2014145141 U RU 2014145141U RU 158294 U1 RU158294 U1 RU 158294U1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
test
monoclonal
antibodies specific
sample
cardiac
Prior art date
Application number
RU2014145141/15U
Other languages
English (en)
Inventor
Рахимджан Ахметджанович Розиев
Валерий Александрович Соколов
Ирина Вячеславовна Орешкина
Анна Яковлевна Гончарова
Юлия Сергеевна Касмынина
Борис Борисович Дзантиев
Надежда Алексеевна Бызова
Анатолий Виталиевич Жердев
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "ОФК-Кардио"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "ОФК-Кардио" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "ОФК-Кардио"
Priority to RU2014145141/15U priority Critical patent/RU158294U1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU158294U1 publication Critical patent/RU158294U1/ru

Links

Images

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

Иммунохроматографическая тест-система для определения раннего маркера инфаркта миокарда - сБСЖК и позднего маркера инфаркта миокарда - тропонина I, содержащая кассету с окнами для внесения образца и наблюдения за результатом теста, внутри которой размещена тест-полоска из листового полипропилена, на определенные участки которой наклеены фильтр для впитывания и сепарации исследуемого образца биоматериала, мембрана с нанесенными и высушенными конъюгатами коллоидного золота с моноклональными антителами, нитроцеллюлозная мембрана и адсорбционная бумага для впитывания компонентов образца биоматериала, на нитроцеллюлозную мембрану нанесены одна контрольная и две тестовые линии, отличающаяся тем, что контрольная линия нанесена из раствора поликлональных козьих антител против иммуноглобулинов мыши, первая тестовая линия нанесена из раствора первых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному белку, связывающему жирные кислоты, клон F9, вторая тестовая линия нанесена из раствора первых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному тропонину I, клон IC19, на мембрану для нанесения конъюгата нанесена смесь из конъюгатов с коллоидным золотом вторых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному белку, связывающему жирные кислоты, клон F5, и вторых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному тропонину I, клон IC4.

Description

Полезная модель относится к диагностической медицине и может быть использована для выявления инфаркта миокарда на ранних и поздних стадиях, как в домашних условиях, так и врачами скорой помощи. Иммунохроматографическая тест-система предназначена для оснащения стационарных медицинских учреждений (приемный покой, лечебные отделения: реанимация, отделение кардиологии, терапии и т.д.), а также для оснащения медработников на догоспитальном этапе (при обследовании больного на дому, на приеме в поликлинике, в машине скорой медицинской помощи, в клинико-диагностической лаборатории), в общественном транспорте (предрейсовые осмотры, аптечки на железнодорожном и автотранспорте), в личном автотранспорте (аптечка автомобилиста), в домашних условиях для самодиагностики, когда возникает наибольшее количество трудностей в дифференциальной диагностике острого коронарного синдрома.
Исходя из сложившейся в современной диагностической медицине практики, для диагностики острого инфаркта миокарда рекомендуется одновременно использовать два маркера некроза миокарда - "ранний" и "поздний". В качестве раннего маркера, отвечающего современным требованиям, используют сердечную форму белка, связывающего жирные кислоты (сБСЖК). БСЖК - цитоплазматический низкомолекулярный (14-15 кДа) белок, связывающий жирные кислоты, который в норме отвечает за их транспортировку внутрь клетки. При остром инфаркте миокарда, когда происходит гибель кардиомиоцитов, сБСЖК быстро попадает в кровоток, достигая диагностически значимых концентраций через 1-2 часа после начала болевого приступа. Его кинетика подобна миоглобину, но БСЖК обладает большей специфичностью к сердечной мышце. Значительное повышение концентрации этого белка в крови (~ 200-500 нг/мл) наступает через 3 ч после острого инфаркта миокарда и возвращается к нормальным значениям (~ 5 нг/мл) через 12-24 ч. Указанные особенности белка сБСЖК делают его определение исключительно удобным инструментом для ранней диагностики инфаркта миокарда. Более поздним маркером является маркер тропонин I. Сердечный тропонин I при остром инфаркте миокарда обычно достигает в крови больных диагностически значимого уровня через 6 ч после начала симптомов, повышенный его уровень сохраняется в дальнейшем в течение 7-14 сут, что делает сердечный тропонин I удобным для поздней диагностики инфаркта миокарда. Из-за высокой специфичности и чувствительности определение сердечных тропонинов стало "золотым стандартом" в биохимической диагностике инфаркта миокарда. Выявление одновременно двух этих маркеров на одном тесте позволит увеличить период диагностирования острого инфаркта миокарда от 1 до 72 часов от начала симптомов заболевания, при этом сохраняя высокую диагностическую ценность во врачебной практике каждого отдельно взятого маркера.
Известно иммунохроматографическое диагностическое устройство (патент РФ на полезную модель RU 107364, G01N33/53, 30.11.2010) для определения белка, связывающего жирные кислоты (БСЖК), для экспресс-диагностики инфаркта миокарда, содержащее помещенную в разъемный защитный корпус тестовую полоску, состоящую из комбинации пористых материалов и биологических компонентов, таких как подушка конъюгата, содержащая антитела, конъюгированные с коллоидным золотом, нитроцеллюлозная мембрана с тестовой и контрольной линиями с иммобилизованными антителами, подушка для внесения образца и адсорбирующая подушка, причем в разъемном защитном корпусе выполнено два отверстия, одно из которых расположено над тестовой и контрольной линиями, а другое - над подушкой для внесения образца. Указанное диагностическое устройство отличается тем, что разъемный защитный корпус выполнен с направляющими элементами, предназначенными для пространственной фиксации тестовой полоски, а также снабжен крышкой, размещаемой над отверстием, расположенным над подушкой для внесения образца, причем указанная крышка выполнена с поршнем, входящим в отверстие, причем торец поршня выполнен скошенным так, что его максимальная высота обращена к ближайшему краю тестовой полоски, а минимальная высота обращена к тестовой и контрольной линиям. Благодаря данной конструкции системы уменьшается время тестирования, уменьшается вероятности контакта оператора с кровью пациента и уменьшается количество забираемой у пациента крови.
Данная тест-система является моно тест-системой, что не позволяет выявлять поздний маркер тропонин I, уровень данного кардиомаркера повышается в крови через 6-8 часов после начала развития заболевания.
Известно изобретение (по международной заявке WO2003044531, G01N 33/543, 20.11.2002), которое относится к картриджам и используется для быстрой диагностики инфаркта, основанной на иммунотесте для обнаружения сердечной формы белка, связывающего жирные кислоты (сБСЖК), для личного использования, хранения и анализа биологических жидкостей, в частности, образцов крови. Однако недостатком данной тест-системы является то, что она представлена в виде планшеты, которая содержит две отдельные тест-полоски для определения сБСЖК в течение некоторого времени. Маркер сБСЖК закрывает временной диапазон до 12 часов от начала инфаркта. Определение более поздних стадий инфаркта с помощью данной системы невозможно.
Таким образом, практический интерес представляют быстрые иммунодиагностические системы, которые наряду с определением раннего маркера ОИМ - БСЖК - позволяют контролировать маркеры, присутствующие в крови в течение длительного времени после ОИМ.
Наиболее близким аналогом является тест-система для иммунохроматографического определения сердечного белка, связывающего жирные кислоты, и тропонина I в цельной крови для экспресс-диагностики инфаркта миокарда (RU патент 2464572, G01N33/558, 20.12.2010). Тест-система содержит иммунологическую планшету с окном для внесения исследуемого образца крови и окном для просмотра результатов, внутри которой размещена подложка для ламинирования пористых материалов. На данной подложке последовательно по длине и внахлестку расположены:
- подушка с конъюгатами для нанесения исследуемого образца крови,
- фильтрационная подушка для сепарации исследуемого образца крови,
- пористая мембрана для проведения иммунохроматографической реакции,
- абсорбционная подушка для создания тока жидкости.
На подушке с конъюгатами и поперек последней сформированы первая полоса конъюгата частиц коллоидного золота с первыми моноклональными мышиными антителами, специфичными к сердечному белку, связывающему жирные кислоты, и вторая полоса конъюгата частиц коллоидного золота с первыми мышиными моноклональными антителами, специфичными к тропонину I. На пористой мембране поперек последней сформированы:
- конкурирующая полоса, содержащая слой адсорбированных первых или вторых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному белку, связывающему жирные кислоты,
- первая тестовая полоса, содержащая адсорбированные вторые моноклональные мышиные - вторая тестовая полоса, содержащая адсорбированные вторые моноклональные антитела к тропонину I,
- контрольная полоса, содержащая адсорбированные моноспецифичные поликлональные кроличьи антитела против иммуноглобулинов мыши (RAM).
Однако данная тест-система определяет наличие кардиомаркеров только в цельной венозной крови. Забор цельной крови из вены всегда должен проводить квалифицированный персонал, обученный процедуре забора венозной крови в специализированных условиях (клинико-диагностические лаборатории, лечебно-профилактические учреждения и т.д.). Необходимо отметить, что из-за использования в качестве биологического материала венозной крови увеличивается время для подготовки к анализу.
Технический результат предлагаемой полезной модели заключается в упрощении процедуры проведения анализа, уменьшении времени подготовки к анализу и расширении вариантов тестируемого биоматериала.
Указанный технический результат достигается тем, что предлагается иммунохроматографическая тест-система для определения раннего маркера инфаркта миокарда - сБСЖК и позднего маркера инфаркта миокарда - тропонина I. Тест-система содержит кассету с окнами для внесения образца и наблюдения за результатом теста. Внутри тест-системы размещена тест-полоска из листового полипропилена, на определенные участки которой наклеены фильтр для впитывания и сепарации исследуемого образца биоматериала, мембрана с нанесенными и высушенными конъюгатами коллоидного золота с моноклональными антителами, нитроцеллюлозная мембрана и адсорбционная бумага для впитывания компонентов образца биоматериала. На нитроцеллюлозную мембрану нанесены одна контрольная и две тестовые линии. Отличительной особенностью заявленного устройства является то, что контрольная линия нанесена из поликлональных козьих антител против иммуноглобулинов мыши. Первая тестовая линия нанесена из раствора первых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному белку, связывающему жирные кислоты, клон F9. Вторая тестовая линия нанесена из первых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному тропонину I, клон IC19. На мембрану для нанесения конъюгата нанесена смесь из конъюгатов с коллоидным золотом из вторых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному белку, связывающему жирные кислоты, клон F5, и вторых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному тропонину I, клон IC4.
На прилагаемом чертеже (фиг.1) представлено заявляемое устройство, где 1 - полоска из листового пропилена, 2- мембрана из нитрата целлюлозы, 3 - адсорбционная бумага, 4 - мембрана с нанесенными и высушенными конъюгатами коллоидного золота с моноклональными антителами против сБСЖК и сTnI, 5 - фильтр для впитывания и сепарации исследуемого образца биоматериала, 6 - пластиковая кассета, 7 - окно для внесения образца, 8- окно для просмотра результата, А - контрольная линия из поликлональных козьих антител против иммуноглобулинов мыши, В и С - первая и вторая тестовые линии из моноклональных антител, специфичных к сБСЖК и сTnI.
Устройство работает следующим образом. Образец биоматериала вносят в окно для внесения образца (7) пластиковой кассеты (6). Маркер инфаркта миокарда (сБСЖК или/и сTnI), присутствующий в биообразце (венозной или капиллярной крови, плазме крови, сыворотке крови), реагирует с конъюгатом коллоидного золота с антителами, специфичными к сБСЖК или/и сTnI, нанесенным на мембрану (4). В результате образуется окрашенный комплекс антиген-антитело. Образовавшийся комплекс продвигается под действием капиллярных сил вдоль мембраны из нитрата целлюлозы (2) и взаимодействует с иммобилизованными на нитрате целлюлозы специфическими моноклональными антителами (В, С). В результате, если в биообразце присутствует сБСЖК, то в результате иммунной реакции тестовая линия 1 окрашивается в розовый цвет, если в биообразце присутствует сTnI, то происходит окрашивание 2 тестовой линии. Окрашивание только первой тестовой (В) линии информирует о выявлении «раннего» маркера инфаркта миокарда сБСЖК, и соответственно о раннем начале развития заболевания. Окрашивание только второй тестовой (С) линии информирует о выявлении «позднего» маркера инфаркта миокарда сTnI, и, соответственно, о длительном времени, прошедшем от начала заболевания. Также возможен вариант, при котором в биобразце присутствуют оба кардиомаркера, в таком случае окрашиваются в розовый цвет обе тестовых линии (В и С). Не связавшиеся на первой и второй тестовых линиях конъюгаты коллоидного золота мигрируют далее вдоль мембраны из нитрата целлюлозы (2) и взаимодействуют с иммобилизованными на контрольной линии (А) антимышиными козьими поликлональными антителами. В результате реакции проявляется окрашенная контрольная полоса. Контрольная полоса должна проявляться всегда, независимо от присутствия кардиомаркеров в образце. Контрольная полоса является внутренним контролем работоспособности теста. Отсутствие контрольной полосы показывает, что тест-система неработоспособна. Оценка результата тестирования осуществляется визуально, через окно результата в пластиковой кассете (8) с тест-полоской (1).

Claims (1)

  1. Иммунохроматографическая тест-система для определения раннего маркера инфаркта миокарда - сБСЖК и позднего маркера инфаркта миокарда - тропонина I, содержащая кассету с окнами для внесения образца и наблюдения за результатом теста, внутри которой размещена тест-полоска из листового полипропилена, на определенные участки которой наклеены фильтр для впитывания и сепарации исследуемого образца биоматериала, мембрана с нанесенными и высушенными конъюгатами коллоидного золота с моноклональными антителами, нитроцеллюлозная мембрана и адсорбционная бумага для впитывания компонентов образца биоматериала, на нитроцеллюлозную мембрану нанесены одна контрольная и две тестовые линии, отличающаяся тем, что контрольная линия нанесена из раствора поликлональных козьих антител против иммуноглобулинов мыши, первая тестовая линия нанесена из раствора первых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному белку, связывающему жирные кислоты, клон F9, вторая тестовая линия нанесена из раствора первых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному тропонину I, клон IC19, на мембрану для нанесения конъюгата нанесена смесь из конъюгатов с коллоидным золотом вторых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному белку, связывающему жирные кислоты, клон F5, и вторых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному тропонину I, клон IC4.
    Figure 00000001
RU2014145141/15U 2014-11-11 2014-11-11 Иммунохроматографическая тест-система RU158294U1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2014145141/15U RU158294U1 (ru) 2014-11-11 2014-11-11 Иммунохроматографическая тест-система

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2014145141/15U RU158294U1 (ru) 2014-11-11 2014-11-11 Иммунохроматографическая тест-система

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU158294U1 true RU158294U1 (ru) 2015-12-27

Family

ID=55023654

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2014145141/15U RU158294U1 (ru) 2014-11-11 2014-11-11 Иммунохроматографическая тест-система

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU158294U1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109709339A (zh) * 2018-12-28 2019-05-03 河北省科学院生物研究所 检测牛或羊骨骼肌肌钙蛋白i的胶体金免疫层析试纸条及应用

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109709339A (zh) * 2018-12-28 2019-05-03 河北省科学院生物研究所 检测牛或羊骨骼肌肌钙蛋白i的胶体金免疫层析试纸条及应用
CN109709339B (zh) * 2018-12-28 2022-03-15 河北省科学院生物研究所 检测牛或羊骨骼肌肌钙蛋白i的胶体金免疫层析试纸条及应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108254562B (zh) 检测myo的时间分辨荧光免疫层析试纸条、试剂盒及其制备方法
US20060240569A1 (en) Semi-quantitative immunochromatographic device
US20120308444A1 (en) Lateral Flow Immunoassay for Detecting Cardiac Troponin I and Myoglobin
US20080241958A1 (en) Method for Determining HCG Levels in Fluid Samples
US20080311591A1 (en) Differential Immunoassay
CN102841207A (zh) 定量检测肌钙蛋白i的荧光免疫层析试纸条及其制备方法
CN102830234A (zh) 一种检测人心力衰竭新型标志物st2的快速诊断试剂盒
CN109239335A (zh) 联检试纸条及其制备方法
DE69403961T3 (de) Verfahren zur bestimmung der von blutplättchen abstammenden mikrovesikel
CN208060389U (zh) 一种用于心肌梗塞快速定量检测的多指标时间分辨荧光免疫层析试剂盒
EA013943B1 (ru) Тест-система "кардиотест" для иммунохроматографического определения сердечного белка, связывающего жирные кислоты, и тропонина i в образце цельной крови для экспресс-диагностики инфаркта миокарда
CN105785028A (zh) 一种检测人心力衰竭新型标志物st2的快速诊断试剂盒
RU113847U1 (ru) КОМБИНИРОВАННАЯ ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКАЯ ТЕСТ-СИСТЕМА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ-МАРКЕРОВ ИНФАРКТА МИОКАРДА сБСЖК И ТРОПОНИНА I В ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ
RU158294U1 (ru) Иммунохроматографическая тест-система
RU169868U1 (ru) Тест-система для иммунохроматографического определения прокальцитонина в образцах цельной крови, сыворотке или плазме с целью экспресс-диагностики сепсиса
CN207992246U (zh) 一种检测25-羟基维生素d的荧光层析试剂盒
KR100976327B1 (ko) 소변 내의 인간 융모 생성샘 자극호르몬 농도 준 정량분석검출방법 및 그 검출기구
RU87262U1 (ru) Тест-система "кардиобсжк" для иммунохроматографического определения сердечного белка, связывающего жирные кислоты в образце цельной крови для экспресс-диагностики инфаркта миокарда
CN103439517A (zh) 一种系统性红斑狼疮自身抗体检测装置
RU2464572C1 (ru) Тест-система для иммунохроматографического определения сердечного белка, связывающего жирные кислоты, и тропонина i в образце цельной крови для экспресс-диагностики инфаркта миокарда (варианты)
CN202735352U (zh) 一种检测人心力衰竭新型标志物st2的快速诊断试剂盒
CN204462152U (zh) 一种心脏功能标志物联合检测装置
RU2668534C1 (ru) Диагностический набор реагентов для выявления хронических патологий мозга ишемического генеза
DE10040904A1 (de) Verfahren und Mittel zum Nachweis einer Wahrscheinlichkeit zukünftigen Fortschreitens von Gefässerkrankungen
CN206772987U (zh) 一种用于急性肾损伤快速定量检测的多指标时间分辨荧光免疫层析试剂盒