RS66041B1 - Derivati aminopiridina i njihova upotreba kao selektivnih alk-2 inhibitora - Google Patents

Derivati aminopiridina i njihova upotreba kao selektivnih alk-2 inhibitora

Info

Publication number
RS66041B1
RS66041B1 RS20241041A RSP20241041A RS66041B1 RS 66041 B1 RS66041 B1 RS 66041B1 RS 20241041 A RS20241041 A RS 20241041A RS P20241041 A RSP20241041 A RS P20241041A RS 66041 B1 RS66041 B1 RS 66041B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
amino
phenyl
nicotinamide
azabicyclo
hexan
Prior art date
Application number
RS20241041A
Other languages
English (en)
Inventor
Jialiang Li
Luca Arista
Sreehari Babu
Jianwei Bian
Kai Cui
Michael Patrick Dillon
Rene Lattmann
Lv Liao
Rita Ramos
Nikolaus Johannes Stiefl
Thomas Ullrich
Peggy Usselmann
Xiaoyang Wang
Liladhar Murlidhar Waykole
Sven Weiler
Yubo Zhang
Yizong Zhou
Tingying Zhu
Dimitrios Lizos
Original Assignee
Novartis Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novartis Ag filed Critical Novartis Ag
Publication of RS66041B1 publication Critical patent/RS66041B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/81—Amides; Imides
    • C07D213/82—Amides; Imides in position 3
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D411/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D411/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D419/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen, oxygen, and sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/10—Spiro-condensed systems
    • C07D491/107—Spiro-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D491/20—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/07—Optical isomers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)

Description

Opis
Stanje tehnike
[0001] ALK-2, takođe poznat kao aktivin A receptor, tip I (ACVR1) ili kao receptor serin treonin protein kinaze R1 (SKR1) je protein kinaza koja je kod ljudi kodirana genom ACVR1.
[0002] ALK-2 je BMP receptor tipa I koji je široko eksprimiran. Sastoji se od domena za vezivanje ekstracelularnog liganda i regulisanog intracelularnog domena serin/treonin kinaze, oba neophodna za transdukciju signala.
[0003] Morfogeni proteini kostiju (BMP) su multifunkcionalni faktori rasta koji su članovi superfamilije transformišućeg faktora rasta β (TGFβ). BMP signalizacija igra ulogu u razvoju srca, nerva i hrskavice, kao i u postnatalnom formiranju kostiju. BMP ektopično indukuju formiranje endohondralne kosti i igraju ključnu ulogu u morfogenezi skeleta i zglobova (Urist, Science 110:893-899 (1965); Olsen et al, Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 16:191-220 (2000) Kronenberg, Nature 423:332-336 (2003); Thomas et al, Nat. Genet. 12:315-317 (1996); Thomas et al, Nat. Genet. 17:58-64 (1997); Polinkowsky et al, Nat. Genet., 17:18-19 (1997), Storm et al., Nature 368:639-643 (1994) i Wozney, Prog. Growth Factor Res. 1:267-280 (1989)).
[0004] BMP signalizacija se kontroliše na mnogim nivoima, uključujući preko ekstracelularnih antagonista kao što je noggin (Massague, Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 1:169-178 (2000)). Pretpostavlja se da neblagovremena ili neželjena aktivacija signalnih puteva osnovnih za normalan razvoj može podstaći procese bolesti kao što su spondiloartropatije. Takođe su opisani efekti BMP signalizacije na inicijaciju i napredovanje artritisa transferom gena noggina (Lories et al, J. Clin. Invest., 115, 1571-1579 (2005)). Fiziološke uloge BMP i signalizacije BMP receptora u normalnom formiranju kostiju, uključujući razvoj skeleta i udova, proučavane su i predstavljene u Zhao, Genetics 35:43-56 (2003).
[0005] Eksperimenti sa BMP antagonistima pokazuju da je regulacija BMP signalnih proteina centralna za formiranje kosti in vivo (Devlin et al., Endocrinology 144:1972-1978 (2003) i Wu et al., J. Clin. Invest., 112 : 924 (2003)).
[0006] Fibrodisplasia ossificans progressiva (FOP) je redak i onesposobljavajući genetski poremećaj koji se karakteriše urođenim malformacijama velikih prstiju na nogama i progresivnom heterotopskom endonhodralnom osifikacijom u predvidivim anatomskim obrascima. Ektopična ekspresija BMP4 je uočena kod pacijenata sa FOP (Gannon et al., Hum. Pathol. 28:339-343 (1997) i Xu et al, Clin. Genet. 58:291-298 (2000)). Pokazalo se da pacijenti sa FOP imaju aktivirajuće mutacije u ALK-2 (Shore et al., Nat. Genet., 38(5):525-7 (2006)).
[0007] Utvrđeno je da prekomerna BMP signalizacija dovodi do brojnih stanja opisanih gore. WO2008033408 i WO2009114180 opisuju inhibitore BMP signalnog puta. Ipak, još uvek postoji stalna potreba da se pronađu alternativni načini na koje se BMP signalizacija može regulisati.
[0008] Takva potreba se može zadovoljiti projektovanjem selektivnih inhibitora ALK-2.
[0009] Specifična ALK-2 antitela su opisana na primer u WO1994011502 i WO2008030611. Osteogeni proteini koji se vezuju za ALK-2 opisani su u WO2012023113 i WO2012077031.
[0010] WO2007123896 opisuje metod lečenja patologije povezane sa heterotopskom osifikacijom primenom specifične siRNA protiv nukleinske kiseline koja kodira mutirani ALK-2.
[0011] WO2014160203 i WO2014138088 opisuju inhibitore BMP puta. WO2015152183 opisuje ALK-2 inhibitore za lečenje FOP. Inhibitori ALK-2 su takođe opisani u WO2014151871.
Suština pronalaska
[0012] Postoji stalna potreba za razvojem novih ALK-2 inhibitora koji su dobri kandidati za lek. Takvi kandidati bi našli primenu između ostalog u lečenju progresivne fibrodisplazije ossificans (FOP) ili nenasledne heterotopične osifikacije (HO).
[0013] Pronalazak obezbeđuje jedinjenja, njihove farmaceutski prihvatljive soli, njihove farmaceutske kompozicije, koja su jedinjenja ALK-2 inhibitori. Jedinjenja pronalaska, koja su definisana patentnim zahtevima, korisna su u postupcima lečenja, prevencije ili ublažavanja progresivne fibrodisplazije (FOP) ili nenasledne heterotopične osifikacije (HO) koja se sastoji od davanja efikasne količine inhibitora ALK-2 subjektu kome je to potrebno.
[0014] Ovde su opisana različita izvođenja prema pronalasku.
[0015] U okviru određenih aspekata, ovde je obezbeđeno jedinjenje formule (I) u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli.
[0016] U drugom aspektu, pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži terapeutski efikasnu količinu jedinjenja formule (I) kako je ovde definisano u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, ili njegove podformule (Ia), (II) (IIa), (IIb) i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih nosača.
[0017] Jedinjenja pronalaska, kako su definisana u patentnim zahtevima, korisna su u postupku inhibicije aktivnosti ALK-2 receptora kod subjekta, pri čemu postupak obuhvata davanje subjektu terapeutski efikasne količine jedinjenja formule (I) kako je ovde definisano u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, ili njihove podformule (la), (II), (IIa), (IIb).
[0018] Jedinjenja pronalaska, kako su definisana u patentnim zahtevima, korisna su u postupku lečenja poremećaja ili bolesti izabranih od heterotopske osifikacije ili fibrodisplazije ossificans progressiva, koji obuhvata davanje subjektu terapeutski efikasne količine jedinjenja formule (I) kako je ovde definisano u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, ili njihove podformule (la), (II), (IIa), (IIb).
[0019] Jedinjenja prema pronalasku pokazuju povoljna farmakokinetička svojstva, nisu toksična i pokazuju malo neželjenih efekata. Posebno, jedinjenja prema pronalasku su selektivni inhibitori ALK-2 u odnosu na druge receptore. Štaviše, idealan kandidat za lek biće u obliku koji je stabilan, nehigroskopan i lako se formuliše.
Slike
[0020]
Slika 1 prikazuje µCT kvantifikaciju heterotopične kosti formirane u desnoj zadnjoj nozi miševa 6 nedelja posle indukcije FOP-a sa adenovirusom/CTX i pokazuje efekat tretmana jedinjenjem A tokom 6 nedelja na formiranje HO. Srednja vrednost /- SEM. *: p < 0.05, **: p < 0.01, ***: p < 0.01 u odnosu na one tretirane pomoću nosača; jednosmerna ANOVA sa Dunnett’s post-hoc testom.
Slika 2 prikazuje µCT kvantifikaciju heterotopične kosti formirane u desnoj zadnjoj nozi miševa 8 nedelja posle indukcije FOP-a sa adenovirusom/CTX i pokazuje efekat tretmana jedinjenjem A tokom 6 nedelja na formiranje HO. Srednja vrednost /- SEM. *: p < 0.05, **: p < 0.01, ***: p < 0.01 u odnosu na one tretirane pomoću nosača; T-test Slika 3 prikazuje oblik difrakcije X-zraka u prahu kristalnog slobodnog oblika Modifikacije HAkristalnog jedinjenja A. Slika 4 prikazuje je dijagram diferencijalne skenirajuće kalorimetrije kristalnog slobodnog oblika Modifikacije HAkristalnog jedinjenja A.
Slika 5 prikazuje dijagram termogravimetrijske analize kristalnog slobodnog oblika Modifikacije HAkristalnog jedinjenja A.
Slika 6 prikazuje dijagram infracrvene spektroskopije sa Furijeovom transformacijom slobodnog oblika Modifikacije HAkristalnog jedinjenja A.
Slika 7 prikazuje oblik difrakcije X-zraka u prahu kristalnog slobodnog oblika Modifikacije A jedinjenja A.
Slika 8 prikazuje dijagram diferencijalne skenirajuće kalorimetrije kristalnog slobodnog oblika Modifikacije A jedinjenja A.
Slika 9 prikazuje dijagram termogravimetrijske analize kristalnog slobodnog oblika Modifikacije A jedinjenja A.
Slika 10 prikazuje dijagram infracrvene spektroskopije sa Furijeovom transformacijom kristalnog slobodnog oblika Modifikacije A jedinjenja A.
Slika 11 prikazuje oblik difrakcije X-zraka u prahu kristalne soli fumarata Modifikacije HAkristalnog jedinjenja A.
Slika 12 prikazuje je dijagram diferencijalne skenirajuće kalorimetrije kristalne soli fumarata Modifikacije HAjedinjenja A.
Slika 13 prikazuje dijagram termogravimetrijske analize kristalne soli fumarata Modifikacije HAjedinjenja A.
Slika 14 prikazuje dijagram infracrvene spektroskopije sa Furijeovom transformacijom kristalne soli fumarata Modifikacije HAjedinjenja A.
Slika 15 prikazuje dijagram Dinamičke sorpcije vlage kristalne soli fumarata Modifikacije HAjedinjenja A na 25 °C, metoda 50%-0%-90% relativne vlažnosti (RH).
Slika 16 prikazuje dijagram Dinamičke sorpcije vlage kristalne soli fumarata Modifikacije HAjedinjenja A na 40 °C, metoda 50%-0%-90% relativne vlažnosti (RH).
Slika 17 prikazuje oblik difrakcije X-zraka u prahu kristalne fosfatne soli jedinjenja A.
Slika 18 prikazuje oblik difrakcije X-zraka u prahu kristalnog slobodnog oblika anhidrata (Primer 89 C)).
Slika 19 prikazuje oblik difrakcije X-zraka u prahu kristalnog slobodnog oblika trhidrata (Primer 89 D)).
Detaljan opis pronalaska
[0021] Konkretno, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule (I) u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutske prihvatljive soli,
pri čemu je
<L veza, (CH>2)n, -CH(CH3)-, -O-(CH2)n-, -C(O)-, -C(O)-NH-(CH2)n-
n je 1, 2, 3;
R1je izabran od C3-C7cikloalkila opciono supstituisanog jednom ili više puta sa supstituentom nezavisno odabranim od hidroksila, halogena, C1-C3alkila; premošćeni C5-C10cikloalkil opciono supstituisan jednom ili više puta sa supstituentom nezavisno odabranim od hidroksila, hidroksiC1-C3alkila;
R2i R3su nezavisno izabrani od H, halogena, C1-C3alkila;
R4je heterociklični ne-aromatični prsten koji sadrži N koji opciono sadrži jedan ili više dodatnih heteroatoma izabranih između N, O ili S, pri čemu je pomenuti prsten opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7;
R7je nezavisno izabran između C1-C3alkil, hidroksiC1-C3alkil, haloC1-C3alkil, C1-C3alkoksiC1-C3alkil, haloC1-C3alkoksiC1-C3alkil, C2-C4alkinil, cijanoC1-C3alkil-, (R8);
m je 0, 1, 2 ili 3;
R8je nezavisno izabran između
4-, 5- ili 6-članog zasićenog ili nezasićenog ne-aromatičnog heterocikličnog prstena koji sadrži jedan ili više heteroatoma izabranih između N, O ili S, pri čemu je pomenuti prsten opciono supstituisan jednom ili više puta sa supstituentom koji se nezavisno bira od okso, SO2C1-C3alkil, haloC1-C3alkil; i
- C3-C6cikloalkil opciono supstituisan jednom ili više puta sa halo.
[0022] Osim ako nije drugačije naznačeno, termin "jedinjenja ovog pronalaska" ili "jedinjenja pronalaska" odnosi se na jedinjenja formule (I), (Ia), (II), (IIa), (IIb) i njihove soli, kao i sve stereoizomere (uključujući dijastereoizomere i enantiomere), rotamere, tautomere i izotopski obeležena jedinjenja (uključujući zamene deuterijuma), kao i inherentno formirane delove.
[0023] Kako se ovde koristi, termin "C1-C3alkil" se odnosi na ravni ili razgranati ugljovodonični lanac radikala koji se sastoji isključivo od atoma ugljenika i vodonika, koji ne sadrži nezasićenje, ima od jednog do tri atoma ugljenika, i koji je vezan za ostatak molekula jednostrukom vezom. Primeri C1-C3alkila uključuju metil, etil, n-propil, 1-metiletil (izo-propil).
[0024] Kako se ovde koristi, termin "hidroksi C1-C3alkil" se odnosi na radikal formule -Ra-OH, gde je RaC1-C3 alkil kao što je gore definisano.
[0025] Kako se ovde koristi, termin "C3-C7cikloalkil" se odnosi na zasićene monociklične ugljovodonične grupe od 3-7 atoma ugljenika. Primeri C3-C7cikloalkila uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil.
[0026] Kako se ovde koristi, termin "C1-C3alkoksi" se odnosi na radikal formule -ORagde je RaC1-C3alkil radikal kao što je generalno definisano gore. Primeri C1-C3alkoksi uključuju, ali nisu ograničeni na, metoksi, etoksi, propoksi, izopropoksi, butoksi, izobutoksi, pentoksi i heksoksi.
[0027] Kako se ovde koristi, izraz "C1-C3alkoksi C1-C3alkil" se odnosi na radikal formule -Rb-O-Ragde je RaC1-C3alkil radikal i Rbje C1-C3alkil radikal kao što je gore definisano. Atom kiseonika može biti vezan za bilo koji atom ugljenika u bilo kom alkil radikalu. Primeri C1-C3alkoksi C1-C3alkila uključuju, na primer, metoksi-metil, metoksi-etil, etoksi-etil.
[0028] "Halogen" ili "halo" se odnosi na bromo, hloro, fluoro ili jodo.
[0029] Kako se ovde koristi, termin "halogen C1-C3alkil" ili "halo C1-C3alkil" se odnosi na C1-C3alkil radikal, kao što je gore definisano, supstituisan sa jednim ili više halo radikala, kao što je gore definisano. Primeri halogena C1-C3alkil uključuju, na primer, trifluorometil, difluorometil, fluorometil, trihlorometil, 2,2,2-trifluoroetil, 1-fluorometil-2-fluoroetil, 3-bromo-2-fluoropropil i 1-bromometil-2-bromoetil.
[0030] Kako se ovde koristi, termin "C1-C3alkoksi C1-C3alkil" se odnosi na radikal formule -Rb-O-Ragde je RaC1-C3alkil radikal i Rbje halo C1-C3alkil radikal kao što je definisano gore.
[0031] Kako se ovde koristi, izraz "heterociklični nearomatični prsten koji sadrži N koji opciono sadrži jedan ili više dodatnih heteroatoma izabranih između N, O ili S" u odnosu na R4odnosi se na zasićeni ili nezasićeni nearomatični prsten ili sistem prstena, koji je 4-, 5-, 6- ili 7-člani monociklični prsten koji sadrži 1, 2 ili 3 heteroatoma izabranih između O, S i N pri čemu je najmanje jedan heteroatom N, a 6 -, 7-, 8-, 9-, 10-, 11- ili 12-člani biciklični sistem prstenova koji sadrži 1, 2, 3, 4 ili 5 heteroatoma izabranih između O, S i N pri čemu je najmanje jedan heteroatom N, ili 10-, 11-, 12-, 13-, 14- ili 15-člani triciklični prstenasti sistem koji sadrži 1, 2, 3, 4, 5, 6 ili 7 heteroatoma izabranih između O, S i N pri čemu je najmanje jedan heteroatom N, pri čemu N i S takođe mogu opciono biti oksidovani u različita oksidaciona stanja. Heterociklični nearomatični prsten koji sadrži N može biti vezan preko heteroatoma ili atoma ugljenika. Heterociklični nearomatični prsten koji sadrži N može uključivati spojene ili premošćene prstenove, kao i spirociklične prstenove. U poželjnoj varijanti, "heterociklični nearomatični prsten koji sadrži N koji opciono sadrži jedan ili više dodatnih heteroatoma izabranih između N, O ili S" je 5-člani zasićeni monociklični prsten koji sadrži N, 6 -člani zasićeni monociklični ili biciklični prsten, 7-člani zasićeni spirociklični prsten koji sadrži N. Primeri heterocikličnog nearomatičnog prstena koji sadrži N uključuju morfolin, piperazin, piperidin, imidazolidin, imidazolin, pirolin, pirolidin, tiomorfolin, 3-azabiciklo[3.1.0]heksan.
[0032] Kako se ovde koristi, izraz "5-člani heterociklični nearomatični prsten koji sadrži N koji opciono sadrži jedan ili više dodatnih heteroatoma izabranih između N, O ili S" u odnosu na R4uključuje, kao primere, pirolidin , 2,3-dihidropirol, oksazolidin, imidazolidin. U poželjnom izvođenju, odnosi se na pirolidin. Prsten je vezan za ostatak molekula preko atoma ugljenika u prstenu.
[0033] Kako se ovde koristi, izraz "6-člani heterociklični nearomatični monociklični ili biciklični prsten koji sadrži N koji opciono sadrži jedan ili više dodatnih heteroatoma izabranih između N, O ili S" u odnosu na R4uključuje, kao što je primeri, morfolin, tiomorfolin, piperidin, piperazin, 3-azabiciklo[3.1.0]heksan. U poželjnom izvođenju, odnosi se na 3-azabiciklo[3.1.0]heksan. Prsten je vezan za ostatak molekula preko atoma ugljenika u prstenu.
[0034] Kako se ovde koristi, termin "petočlani prsten koji opciono sadrži jedan dodatni heteroatom izabran između N, O ili S" u vezi sa izvođenjem gde R5i R6zajedno sa N atomom za koji su vezani formiraju pomenuti prsten, uključuje kao primere pirolidin, 2,3-dihidropirol, oksazolidin, imidazolidin. U poželjnom izvođenju, odnosi se na pirolidin.
[0035] Kako se ovde koristi, izraz "šestočlani prsten koji opciono sadrži jedan dodatni heteroatom izabran između N, O ili S" u odnosu na varijante gde R5i R6zajedno sa N atomom za koji su vezani formiraju pomenuti prsten , uključuje kao primere piperidinil, morfolinil, piperazinil.
[0036] Kako se ovde koristi, izraz "7-člani spirocikl koji opciono sadrži jedan dodatni heteroatom izabran između N, O ili S" u odnosu na izvođenja gde R5i R6zajedno sa N atomom za koji su vezani formiraju pomenuti prsten, uključuje kao primere, 2-azaspiro[3.3]heptan, 2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan.
[0037] Kako se ovde koristi, izraz "premošteni C5-C10cikloalkil" se odnosi na zasićeni biciklični ili triciklični sistem prstena koji sadrži najmanje jedan most. Primeri premošćenog C5-C10cikloalkila uključuju, na primer, biciklo[1.1.1]pentan, bicikloklo[2.2.2]oktan, biciklo[2.2.1]heptan, triciklo-[3.3.1.1<3,7>] dekan.
[0038] Kako se ovde koristi, termin "C2-C4alkinil" se odnosi na radikalnu grupu ravnog lanca koja se sastoji isključivo od atoma ugljenika i vodonika, koja sadrži najmanje jednu trostruku vezu, koja ima od dva do četiri atoma ugljenika, i koja je vezana za ostatak molekula jednostrukom vezom. Primeri C2-C4alkinila uključuju, na primer, etinil, prop-1-inil, but-1-inil.
[0039] Kako se ovde koristi, izraz "cijanoC1-C3alkil" se odnosi na radikal formule -Ra-CN, gde je RaC1-C3alkil kao što je gore definisano.
[0040] Kako se ovde koristi, izraz "4-, 5- ili 6-člani zasićeni ili nezasićeni ne-aromatični heterociklični prsten koji sadrži jedan ili više heteroatoma izabranih između N, O ili S" uključuje, kao primere, tetrahidropiran, morfolin, piperidin, oksetan. U poželjnom izvođenju, to je tetrahidropija.
[0041] Kako se ovde koristi, termin "ALK-2" se odnosi na receptor aktivina A, tip I (ACVRI), takođe poznat kao ACVRLK2; SKR1; ACVR1A; aktivin receptor tipa I; kinaza 2 slična aktivin receptoru; Receptor serin/treonin-protein kinaze R1; TGF-B superfamilija receptor tip I; ACTRI; TSRI; aktivin A receptor, tip II slična kinaza 2; aktivin receptor tip-1; hidroksialkil-protein kinaza; ACTR-I; TSR-I.
[0042] Ovde su opisane različite realizacije pronalaska. Biće poznato da se karakteristike navedene u svakom aspektu mogu kombinovati sa drugim specificiranim karakteristikama da bi se obezbedile dalje realizacije ovog pronalaska.
[0043] Izvođenje 1. Jedinjenje formule (I) u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli
pri čemu
L je veza, (CH2)n, -CH(CH3)-, -O-(CH2)n-, -C(O)-, -C(O)-NH-(CH2)n-;
n je 1, 2, 3;
R1je izabran od C3-C7cikloalkila opciono supstituisanog jednom ili više puta sa supstituentom nezavisno odabranim od hidroksila, halogena, C1-C3alkila; premošćeni C5-C10cikloalkil opciono supstituisan jednom ili više puta sa supstituentom nezavisno odabranim od hidroksila, hidroksiC1-C3alkila;
R2i R3su nezavisno izabrani od H, halogena, C1-C3alkila;
R4je heterociklični ne-aromatični prsten koji sadrži N koji opciono sadrži jedan ili više dodatnih heteroatoma izabranih između N, O ili S, pri čemu je pomenuti prsten opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7;
R7je nezavisno izabran između C1-C3alkil, hidroksiC1-C3alkil, haloC1-C3alkil, C1-C3alkoksiC1-C3alkil, haloC1-C3alkoksiC1-C3alkil, C2-C4alkinil, cijanoC1-C3alkil-, (CH2)m-(R8);
m je 0, 1, 2 or 3;
R8je izabran između
- 4-, 5- ili 6-članog zasićenog ili nezasićenog ne-aromatičnog heterocikličnog prstena koji sadrži jedan ili više heteroatoma izabranih između N, O ili S, pri čemu je pomenuti prsten opciono supstituisan jednom ili više puta sa supstituentom nezavisno izabranim od okso, SO2C1-C3alkil, haloC1-C3alkil; ili
- C3-C6cikloalkil opciono supstituisan jednom ili više puta sa halo.
[0044] Izvođenje 2. Jedinjenje prema izvođenju 1 formule (Ia) u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli
[0045] Izvođenje 3. Jedinjenje prema bilo kom od izvođenja 1 ili 2, u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, gde je R4NR5R6gde R5i R6zajedno sa N atomom za koji su vezani formiraju 5-člani prsten koji opciono sadrži jedan dodatni heteroatom izabran između N, O ili S, opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7.
[0046] Izvođenje 4. Jedinjenje prema bilo kom od izvođenja 1 ili 2, u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, gde je R4NR5R6gde R5i R6zajedno sa N atomom za koji su vezani formiraju 6-člani prsten koji opciono sadrži jedan dodatni heteroatom izabran između N, O ili S, opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7.
[0047] Izvođenje 5. Jedinjenje prema bilo kom od izvođenja 1 ili 2, u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, gde je R4NR5R6gde R5i R6zajedno sa N atomom za koji su vezani formiraju 7-člani spirocikl koji opciono sadrži jedan dodatni heteroatom izabran između N, O ili S, opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7.
[0048] Izvođenje 6. Jedinjenje prema bilo kom od izvođenja 1 ili 2 u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je R45-člani heterociklični nearomatični prsten koji sadrži N koji opciono sadrži jedan ili više dodatnih heteroatoma izabranih od N, O ili S gde je pomenuti prsten opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7i gde je pomenuti prsten vezan za ostatak molekula preko atoma ugljenika u prstenu.
[0049] Izvođenje 7. Jedinjenje prema bilo kom od izvođenja 1 ili 2 u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je R46-člani heterociklični nearomatični monociklični ili biciklični prsten koji opciono sadrži jedan ili više dodatnih heteroatoma izabranih od N, O ili S, pri čemu je pomenuti prsten opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7i gde je pomenuti prsten vezan za ostatak molekula preko atoma ugljenika u prstenu.
[0050] Izvođenje 8. Jedinjenje prema bilo kom od brojeva 1, 2 ili 7 formule (II) u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli,
pri čemu je R7nezavisno izabran između C1-C3alkil, hidroksiC1-C3alkil, haloC1-C3alkil, C1-C3alkoksiC1-C3alkil, haloC1-C3alkoksiC1-C3alkil, C2-C4alkinil, cijanoC1-C3alkil- (CH2)m-R8;
m je 0, 1, 2 ili 3.
[0051] Izvođenje 9. Jedinjenje prema izvođenju 8 formule (IIa) u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli
[0052] Izvođenje 10. Jedinjenje prema izvođenju 8 formule (IIb) u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli
[0053] Izvođenje 11. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih realizacija u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu
R7je (CH2)m-R8;
R8je 6-člani heterociklični prsten koji sadrži jedan ili više heteroatoma izabranih između N, O ili S, pri čemu je pomenuti prsten opciono supstituisan jednom ili više puta sa supstituentom nezavisno izabranim od okso, SO2C1-C3alkil, haloC1-C3alkil;
m je 0, 1, 2 ili 3.
[0054] Izvođenje 12. Jedinjenje prema izvođenju 11 u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je R8nesupstituisani tetrahidropiran i m je 0.
[0055] Izvođenje 13. Jedinjenje prema izvođenju 11 u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je R8nesupstituisani morfolin i m je 2 ili 3.
[0056] Izvođenje 14. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih realizacija u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je R1cikloheksil opciono supstituisan jednom ili više puta sa supstituentom nezavisno odabranim od hidroksila, halogena, C1-C3alkila.
[0057] Izvođenje 15. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih realizacija u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je R1
[0058] Izvođenje 16. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih realizacija u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, gde R1i
[0059] Izvođenje 17. Jedinjenje prema bilo kom od izvođenja 1 do 13 u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je R1biciklično[2.2.2]oktanil supstituisan jednom sa hidroksilom.
[0060] Izvođenje 18. Jedinjenje prema izvođenju 17 u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je R1
[0061] Izvođenje 19. Jedinjenje prema izvođenju bilo kom od brojeva 1 do 13 u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je R1biciklični[1.1.1]pentanil supstituisan sa hidroksimetilom.
[0062] Izvođenje 20. Jedinjenje prema izvođenju 19 u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je R1
[0062] Izvođenje 21. Jedinjenje prema izvođenju 1, u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli koje se bira između
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
5-(4-(-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(3-morfolinopropil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-(-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil) nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-(-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il )fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(2-fluoro-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-(-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(1-izopropilpirolidin-3-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-(-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-(-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-(-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(3,3,3-trifluoropropil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(pirolidin-3-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil )nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(3-fluoro-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
5-(4-(2-azaspiro[3.3]heptan-2-ilmetil)fenil)-2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-(-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-(-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(oksetan-3-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-(-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabicikl-10[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(2-fluoro-4-(piperazin-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-(3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-(-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamid;
2-amino-5-(4-(-3-(but-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil) nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(oksetan-3-ilmetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan -1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(2-(2,2,2-trifluoroetoksi)etil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il )fenil)nikotinamid; 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-(piperidin-1-il)propoksi)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-(-3-(1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(- 4-hidroksi-cikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(4-metilpiperazin-1-karbonil)fenil)nikotinamid 2-amino-5-(3-fluoro-4-(2-metil-pirolidin-1-il)metil )fenil)-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-cikloheksil-5-(4-morfolinofenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-(-3-(2,2-difluoropropil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-(-3-(2-cijanoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-morfolinopropoksi)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(3-(prop-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
5-(4-(-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)-2-hlorofenil)-2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-5-(2-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-(-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1 -il)nikotinamid; 2-amino-5-(4-(-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid;
5-(4-(-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(piperidin-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-(3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il )fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-(-3-(oksetan-3-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1 -il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-((2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)karbamoil)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(2,2,2-trifluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
5-(4-(-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-(-3-hidroksiadamantan-1-il)nikotinamid;
2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(morfolin-4-karbonil)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(2,3-difluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil-4-d)-5-(4-(-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(4-metilpiperazin-1-karbonil)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(2-hloro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-(3-(2-hidroksipropan-2-il)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-(-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il))-3-azabicikllo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-cikloheksil-5-(3-(morfolin-4-karbonil)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(3-hloro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid;
5-(4-(-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-(-4-hidroksi-1-metilcikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(2-metil-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid;
i
2-amino-N-cikloheksil-5-(3-(4-(2-hidroksietil)piperazin-1-karbonil)fenil)nikotinamid.
[0064] Izvođenje 22. Jedinjenje prema realizaciji 21 u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, koje se bira između
2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)-3-azabiciklo- [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) nikotinamid; 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil )nikotinamid;
5-(4-((S)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil )nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(3-morfolinopropil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( (1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(2-fluoro-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)-N-((lr,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4S)- 4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-((lr,4r)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(1-izopropilpirolidin-3-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3- azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan -1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(3,3,3-trifluoropropil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((lr,4r)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(pirolidin-3-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1R,3S,4R)-3-fluoro-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)- 3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1s,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-
1
il)fenil)nikotinamid;
5-(4-(2-azaspiro[3.3]heptan-2-ilmetil)fenil)-2-amino-N-((lr,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R) )-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(oksetan-3-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan- 1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4S) )-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il) -3-azabicikllo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(2-fluoro-4-(piperazin-1-il)fenil)-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
2-amino-N-(3-(hidroksimetil) )biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan- 1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((lr,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3- azabiciklo[3.1.0]heks-an-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4-hidroksibiciklo-10[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamid;
2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan -1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(but-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( (1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(oksetan-3-ilmetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan- 1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin-4-il) -3-azabicikllo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(2-(2,2,2-trifluoroetoksi)etil)-3-azabiciklo [3.1.0]heks-an-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3- azabiciklo[3.1.0]heks-an-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fe- nil)-N-((lr,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-5-(3-fluoro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(3,3,3-trifluoropropil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)- 4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(2,2-difluoropropil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R) )-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-cijanoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4S)- 4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(prop-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(prop-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)-2-hlorofenil)-2-amino-N-((1r,4R)- 4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-5-(2-fluoro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4-hidroksibiciklo[2.2. 2]oktan-1-il)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4S) )-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid;
5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi -4-metilcikloheksil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(but-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( (1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3- azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(oksetan-3-il)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(oksetan-3-il)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-cikloheksil-5-(4-((2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)karbamoil)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(1,3difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( (1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(2,2,2-trifluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1R,3R)-3-hidroksiadamantan -1-il)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(oksetan-3-ilmetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan- 1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1s,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1,0]heksan-1-il)fenil) nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1S,SR)-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4-hidroksibiciklo[2.2. 2]oktan-1-il)nikotinamid;
2-amino-5-(2,3-difluoro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilkloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2,2-difluoropropil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4S) )-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(2,2,2-trifluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil-4-d)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1- il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1s,4s)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(4-metilpiperazin-1-karbonil)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4-hidroksibiciklo-10[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamid;
2-amino-5-(2-hloro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid;
2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R) )-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid;
2-amino-N-(3-(2-hidroksipropan-2-il)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-) piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid;
2-amino-5-(3-hloro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid;
5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi -1-metilcikloheksil)nikotinamid; i 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(2-metil-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid.
[0065] Izvođenje 23. Farmaceutska kompozicija koja sadrži terapeutski efikasnu količinu jedinjenja prema bilo kom od prethodnih izvođenja u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih nosača.
[0066] Izvođenje 24. Kombinacija koja sadrži terapeutski efikasnu količinu jedinjenja prema bilo kojoj od realizacija 1 do 22 u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli i jednog ili više terapeutski aktivnih agenasa.
[0067] Izvođenje 25. Jedinjenje prema bilo kojoj od realizacija 1 do 22 u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, za upotrebu kao lek.
[0068] Izvođenje 26. Jedinjenje prema bilo kojoj od realizacija 1 do 22 u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, za upotrebu u lečenju poremećaja ili bolesti odabranih od heterotopske osifikacije i fibrodisplasia ossificans progressiva.
[0069] Izvođenje 27. 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4) -il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid u slobodnom obliku, posebno u slobodnom obliku Modifikacija HA, posebno (i) koja ima2Theta vrednosti u refleksiji XRPD prvih 2, prvih 3, prvih 4, prvih 5, prvih 6, prvih 8, posebno prvih deset ili posebnosve 2Theta vrednosti date u tabeli A ispod; ili (ii) prikazivanje DSC dijagrama kao što je prikazano na Slici 4; ili (iii) ima TGAdijagram kao što je prikazano na slici 5; ili (iv) ima FT-IR dijagram kao što je prikazano na Slici 6; ili imaju dva ili tri ili posebno sve od upravo pomenutih svojstava (i) do (iv); ili posebno sa XRPD dijagramom kao što je prikazano na slici 3.
[0070] Izvođenje 28. 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4) -il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid u slobodnom obliku, posebno u obliku Modifikacije A, posebno (i) koji ima 2Theta vrednosti u refleksiji XRPD prvih 2, prva 3, prvih 4, prvih 5, prvih 6, prvih 8, posebno prvih deset ili svih 2Theta vrednosti datih u tabeli B ispod; ili (ii) prikazivanje DSC dijagrama kao što je prikazano na Slici 8; ili (iii) ima TGA dijagram kao što je prikazano na slici 9; ili (iv) ima FT-IR dijagram kao što je prikazano na Slici 10; ili ima dve ili tri ili posebno sve osobine (i) do (iv) upravo pomenute; ili posebno sa XRPD dijagramom kao što je prikazano na slici 7.
[0071] Izvođenje 29. 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4) -il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid kao anhidrat u slobodnom obliku, posebno sa XRPD dijagramom kao što je prikazano na slici 18.
[0072] Izvođenje 30. 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4) -il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid kao trihidrat u slobodnoj formi, posebno sa XRPD dijagramom kao što je prikazano na slici 19.
[0073] Izvođenje 31. 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4) -il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid u obliku fumaratne soli, posebno sa molarnim odnosom od 1:1 jedinjenja A prema fumarnoj kiselini, posebno u obliku fumarata sol Modifikacija HA, posebno (i) ima 2Theta vrednosti u refleksiji XRPD prvih 2, prvih 3, prvih 4, prvih 5, prvih 6, prvih 8, posebno prvih deset ili posebno svih 2Theta vrednosti date u tabeli C ispod; ili (ii) prikazivanje DSC dijagrama kao što je prikazano na Slici 12; ili (iii) ima TGA dijagram kao što je prikazano na slici 13; ili (iv) ima FT-IR dijagram kao što je prikazano na Slici 14; ili (v) ima DVS dijagram na 25°C kao što je prikazano na sl. 15; ili (vi) ima DVS dijagram na 40°C kao što je prikazano na slici 16; ili imaju dva ili tri ili četiri ili pet ili posebno sva svojstva (i) do (iv) upravo pomenuta; ili posebno sa XRPD dijagramom kao što je prikazano na slici 11.
[0074] Izvođenje 32. 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4) -il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid u amorfnom obliku fumaratne soli, varijanta 1, posebno sa molarnim odnosom 1:1 jedinjenja A prema fumarnoj kiselini, posebno pokazuje staklenu tranziciju na oko 143 °C, kada se analizira pomoću modulisanog DSC pri brzini zagrevanja od 1 K/min, amplituda temperature 1 K, period 60 sekundi.
[0075] Izvođenje 33. 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4) -il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid u amorfnom obliku fumarata, varijanta 2, posebno sa molarnim odnosom 1:1 jedinjenja A prema fumarnoj kiselini, posebno pokazuje staklenu tranziciju na oko 78°C kada se analizira pomoću DSC pri brzini zagrevanja od 10K/min.
[0076] Izvođenje 34. 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4) -il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid u obliku fosfatne soli, posebno sa molarnim odnosom od 1:1,5 jedinjenja A prema fosfornoj kiselini, posebno (i) koji ima 2Theta vrednosti u refleksiji XRPD prva 2, prva 3, prva 4, prvih 5, prvih 6, prvih 8, posebno prvih deset ili posebno svih 2Theta vrednosti datih u Tabeli D ispod; ili posebno sa XRPD dijagramom kao što je prikazano na slici 17.
[0077] Izvođenje 35. Jedinjenje u obliku prema bilo kojoj od realizacija 27 do 34 za upotrebu kao lek.
[0078] Izvođenje 36. Jedinjenje u obliku prema bilo kojoj od realizacija 27 do 34 za upotrebu u lečenju poremećaja ili bolesti odabranih od heterotopske osifikacije ili fibrodisplazije ossificans progressiva.
[0079] Kada je 2Theta vrednost (ili u tabelama ispod "Ugao") data u ovom pronalasku, to označava redsled vrednosti ± 0,2, ili samu vrednost.
[0080] Kada se koristi izraz "Modifikacija", ovo se odnosi na amorfne forme ili posebno na kristalne polimorfe (tj. oblike kristalnih struktura), uključujući i pseudopolimorfe, kao što su solvati ili posebno hidrati, slobodnih oblika ili soli, redom.
[0081] U zavisnosti od izbora polaznih materijala i postupaka, jedinjenja mogu biti prisutna u obliku čistih optičkih izomera, ili kao smeše izomera, kao što su racemati i smeše dijastereoizomera, u zavisnosti od broja asimetričnih atoma ugljenika. Predviđeno je da ovaj pronalazak uključi sve takve moguće izomere, uključujući racemske smeše, dijasteriomerne smeše i optički čiste oblike. Optički aktivni (R)- i (S)- izomeri mogu biti pripremljeni korišćenjem hiralnih sintona ili hiralnih reagenasa, ili razdvojeni korišćenjem konvencionalnih tehnika. Ako jedinjenje sadrži dvostruku vezu, supstituent može biti E ili Z konfiguracije. Ako jedinjenje sadrži disupstituisani cikloalkil, cikloalkil supstituent može imati cis- ili trans-konfiguraciju. Svi tautomerni oblici takođe treba da budu uključeni.
[0082] Kako se ovde koristi, termini "so" ili "soli" se odnose na kiselinsku ili baznu adicionu so jedinjenja prema pronalasku. "Soli" obuhvataju posebno "farmaceutski prihvatljive soli". Izraz "farmaceutski prihvatljive soli" odnosi se na soli koje zadržavaju biološku efikasnost i svojstva jedinjenja ovog pronalaska i koje tipično nisu biološki ili na drugi način nepoželjne. U mnogim slučajevima, jedinjenja iz ovog pronalaska su sposobna da formiraju kisele soli na osnovu prisustva baznog aminopiridinskog dela. Kada se pominje "slobodni oblik", ovo se odnosi na oblik bez dodatnih kiselina i/ili baza, odnosno jedinjenje kao takvo (koje međutim može formirati unutrašnje soli ako jedinjenje sadrži bazne i kisele grupe).
[0083] Farmaceutski prihvatljive kisele adicione soli mogu se formirati sa neorganskim kiselinama i organskim kiselinama.
[0084] Neorganske kiseline iz kojih se mogu dobiti soli obuhvataju, na primer, hlorovodoničnu kiselinu, bromovodoničnu kiselinu, sumpornu kiselinu, azotnu kiselinu, fosfornu kiselinu i slično.
[0085] Organske kiseline iz kojih se mogu dobiti soli uključuju, na primer, sirćetnu kiselinu, propionsku kiselinu, glikolnu kiselinu, oksalnu kiselinu, maleinsku kiselinu, malonsku kiselinu, sukcinsku kiselinu, fumarnu kiselinu, vinsku kiselinu, limunsku kiselinu, benzoevu kiselinu, mandelinska kiselinu, metansulfonsku kiselinu, etansulfonsku kiselinu, toluensulfonsku kiselinu, sulfosalicilnu kiselinu i slično.
[0086] U drugom aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenja prema pronalasku u acetatu, askorbatu, adipatu, aspartatu, benzoatu, bezilatu, bromidu/hidrobomidu, bikarbonatu/karbonatu, bisulfatu/sulfatu, kamforsulfonatu, kapratu, hloridu/hidrofilohloridu, hlorteofilonatu, citratu, etandisulfonatu, fumaratu, gluceptatu, glukonatu, glukuronatu, glutamatu, glutaratu, glikolatu, hipuratu, hidrojodidu/jodidu, izetionatu, laktatu, laktobionatu, laurilsulfatu, malatu, maleatu, malonatu, mandelatu, mezilatu, metilsulfatu, mukatu, naftoatu, napsilatu, nikotinatu, nitratu, oktadekanoatu, oleatu, oksalatu, palmitatu, pamoatu, fosfatu/hidrogen fosfatu/ dihidrogen fosfatu, poligalakturonatu, propionatu, sebakatu, stearatu, sukcinatu, sulfosalicilatu, sulfatu, tartaratu, tozilat trifenatatu, trifluoroacetatu ili ksinafoatu.
[0087] Bilo koja formula data ovde je takođe namenjena da predstavlja neobeležene oblike kao i izotopski obeležene oblike jedinjenja. Izotopski obeležena jedinjenja imaju strukture koje su prikazane ovde datim formulama osim što je jedan ili više atoma zamenjeno atomom koji ima odabranu atomsku masu ili maseni broj. Primeri izotopa koji se mogu inkorporirati u jedinjenja pronalaska uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora i hlora, kao što su<2>H,<3>H,<11>C,<13>C,<14>C,<15>N,<18>F<31>P,<32>P,<35>S ,<36>Cl,<123>I,<124>I,<125>I redom. Pronalazak obuhvata različita izotopski obeležena jedinjenja kao što je ovde definisano, na primer ona u kojima su prisutni radioaktivni izotopi, kao što su<3>H i<14>C, ili ona u kojima su prisutni ne-radioaktivni izotopi, kao što su<2>H i<13>C. Takva izotopski obeležena jedinjenja su korisna u metaboličkim studijama (sa<14>C), studijama hemijske kinetike reakcija (sa, na primer<2>H ili<3>H), tehnikama detekcije ili snimanja, kao što je pozitronska emisiona tomografija (PET) ili jednofotonska emisiona kompjuterska tomografija (SPECT), uključujući testove distribucije leka ili supstrata u tkivu, ili u radioaktivnom lečenju pacijenata. Naročito,<18>F obeleženo jedinjenje može biti posebno poželjno za PET ili SPECT studije. Izotopski obeležena jedinjenja formule (I) se generalno mogu pripremiti konvencionalnim tehnikama poznatim stručnjacima ili procesima analognim
1
onima opisanim u pratećim Primerima korišćenjem odgovarajućih izotopski obeleženih reagenasa umesto prethodno korišćenih neobeleženih reagenasa.
[0088] Dalje, supstitucija sa težim izotopima, posebno deuterijumom (tj.,<2>H ili D) može da pruži određene terapeutske prednosti koje proizilaze iz veće metaboličke stabilnosti, na primer, produženi poluživot in vivo ili smanjeni zahtevi za doziranje ili poboljšanje terapeutskog indeksa. . Podrazumeva se da se deuterijum u ovom kontekstu smatra supstituentom jedinjenja formule (I). Koncentracija tako težeg izotopa, posebno deuterijuma, može se definisati faktorom obogaćivanja izotopom. Termin "faktor obogaćivanja izotopom" kako se ovde koristi označava odnos između izotopskog izobilja i prirodnog izobilja određenog izotopa. Ako je supstituent u jedinjenju ovog pronalaska označen kao deuterijum, takvo jedinjenje ima izotopski faktor obogaćivanja za svaki označeni atom deuterijuma od najmanje 3500 (52,5% inkorporacije deuterijuma na svakom označenom atomu deuterijuma), najmanje 4000 (60% inkorporacije deuterijuma), najmanje 4500 (67,5% inkorporacije deuterijuma), najmanje 5000 (75% inkorporacije deuterijuma), najmanje 5500 (82,5% inkorporacije deuterijuma), najmanje 6000 (90% inkorporacije deuterijuma), najmanje 6333,3% (inkorporacije deuterijuma 90%), najmanje 6466,7 (97% inkorporacije deuterijuma), najmanje 6600 (99% inkorporacije deuterijuma), ili najmanje 6633,3 (99,5% inkorporacije deuterijuma).
[0089] Farmaceutski prihvatljivi solvati u skladu sa pronalaskom uključuju one u kojima rastvarač kristalizacije može biti izotopski supstituisan, npr. D2O, d6-aceton, d6-DMSO.
[0090] Jedinjenja prema pronalasku koja sadrže grupe sposobne da deluju kao donori i/ili akceptori za vodonične veze mogu biti sposobna da formiraju ko-kristale sa odgovarajućim ko-kristalima. Ovi ko-kristali se mogu dobiti iz jedinjenja formule (I) poznatim postupcima formiranja ko-kristala. Takvi postupci uključuju mlevenje, zagrevanje, ko-sublimiranje, ko-topljenje ili kontaktiranje u rastvoru jedinjenja formule (I) sa ko-kristalnim materijalom pod uslovima kristalizacije i izolovanje ko-kristala koji se tako formira. Pogodni ko-kristalni materijali uključuju one opisane u WO 2004/078163. Stoga pronalazak dalje obezbeđuje ko-kristale koji sadrže jedinjenje pronalaska.
[0091] Kako se ovde koristi, izraz "farmaceutski prihvatljiv nosač" uključuje sve rastvarače, disperzione medije, obloge, surfaktante, antioksidante, konzervanse (npr. antibakterijska sredstva, antifungalne agense), izotonične agense, agense za odlaganje apsorpcije, soli, konzervanse, stabilizatori lekova, veziva, ekscipijenti, agensi za dezintegraciju, maziva, zaslađivači, agensi za ukus, boje i slično i njihove kombinacije, kao što bi bilo poznato stručnjacima u ovoj oblasti (videti, na primer, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed Mack Printing Company, 1990, str. 1289-1329). Osim u meri u kojoj bilo koji konvencionalni nosač nije kompatibilan sa aktivnim sastojkom, razmatra se njegova upotreba u terapeutskim ili farmaceutskim kompozicijama.
[0092] Termin "terapeutski efikasna količina" jedinjenja iz ovog pronalaska odnosi se na količinu jedinjenja iz ovog pronalaska koja će izazvati biološki ili medicinski odgovor subjekta, na primer, smanjenje ili inhibiciju enzima ili aktivnost proteina, ili ublažavanje simptoma, ublažavanje stanja, usporavanje ili odlaganje progresije bolesti, ili sprečavanje bolesti, itd. U jednom neograničavajućem izvođenju, termin "terapeutski efikasna količina" odnosi se na količinu jedinjenja iz ovog pronalaska koja je, kada se daje subjektu, efikasna da (1) barem delimično ublaži, inhibira, spreči i/ili poboljša stanje, ili poremećaj ili bolest (i) posredovanu pomoću ALK-2, ili (ii) povezane sa ALK-2 aktivnošću, ili (iii) koje karakteriše aktivnost (normalna ili abnormalna) ALK-2; ili (2) smanjuju ili inhibiraju aktivnost ALK-2; ili (3) smanjiti ili inhibirati ekspresiju ALK-2. U drugom neograničavajućem izvođenju, izraz "terapeutski efikasna količina" odnosi se na količinu jedinjenja ovog pronalaska koja je, kada se daje u ćeliju, ili tkivo, ili nećelijski biološki materijal, ili medijum, efikasna da barem delimično redukuje ili inhibiranje aktivnosti ALK-2; ili bar delimično smanjujući ili inhibirajući ekspresiju ALK-2.
[0093] Kako se ovde koristi, termin "subjekat" se odnosi na čoveka.
[0094] Kako se ovde koristi, termin "inhibicija", "umanjenje" ili "ublažavanje" odnosi se na smanjenje ili supresiju datog stanja, simptoma ili poremećaja, ili bolesti, ili značajno smanjenje osnovne aktivnosti biološke aktivnosti ili procesa.
[0095] Kako se ovde koristi, termin "lečenje", "tretman" ili "tretiranje" bilo koje bolesti ili poremećaja odnosi se na jednu varijantu, za ublažavanje bolesti ili poremećaja (tj. usporavanje ili zaustavljanje ili smanjenje razvoja bolesti ili bar jednog od njenih kliničkih simptoma). U drugom aspektu, "lečenje", "tretiranje" ili "tretman" se odnosi na ublažavanje ili poboljšanje najmanje jednog fizičkog parametra uključujući one koje pacijent možda ne može uočiti. U još jednom aspektu, "lečenje", "tretman" ili "tretiranje" se odnosi na modulaciju bolesti ili poremećaja, bilo fizički, (npr. stabilizacija uočljivog simptoma), fiziološki, (npr. stabilizacija fizičkog parametra), ili oboje. U još jednom izvođenju, "lečenje", "tretman" ili "tretiranje" se odnosi na sprečavanje ili odlaganje početka ili razvoja ili progresije bolesti ili poremećaja.
[0096] Kako se ovde koristi, subjektu je "potreban" tretman ako bi takav subjekt imao biološki, medicinski ili kvalitet života od takvog lečenja.
[0097] Kako se ovde koristi, termin "jedan", "ovaj", "taj" i slični termini koji se koriste u kontekstu ovog pronalaska (posebno u kontekstu zahteva) treba da se tumače tako da pokrivaju i jedninu i množinu, osim ako je drugačije naznačeno ovde ili ako kontekst ukazuje drugačije.
[0098] Sve metode koje su ovde opisane mogu se izvesti u bilo kom odgovarajućem redosledu osim ako je drugačije naznačeno ovde ili ako kontekst ukazuje drugačije. Upotreba bilo kog i svih primera, ili primernog jezika (npr. „kao što je“) ovde datog je namenjena samo da bolje osvetli pronalazak i ne predstavlja ograničenje obima pronalaska na koji se inače odnosi.
[0099] Bilo koji asimetrični atom (npr. ugljenik ili slično) jedinjenja prema ovom pronalasku može biti prisutan u racemski ili enantiomerno obogaćenim, na primer (R)-, (S)- ili (R,S). )-konfiguracijama. U određenim izvođenjima, svaki asimetrični atom ima najmanje 50% enantiomernog viška, najmanje 60% enantiomernog viška, najmanje 70% enantiomernog viška, najmanje 80% enantiomernog viška, najmanje 90% enantiomernog viška, najmanje 95% enantiomernog viška, ili najmanje 99% enantiomernog viška u (R)- ili (S)- konfiguraciji. Supstituenti kod atoma sa nezasićenim dvostrukim vezama mogu, ako je moguće, biti prisutni u cis- (Z)- ili trans- (E)- obliku.
[0100] Shodno tome, kako se ovde koristi, jedinjenje prema ovom pronalasku može biti u obliku jednog od mogućih izomera, rotamera, atropizomera, tautomera ili njihovih smeša, na primer, kao suštinski čisti geometrijski (cis ili trans) izomeri, dijastereomeri, optički izomeri (antipodi), racemati ili njihove smeše.
[0101] Sve dobijene smeše izomera mogu se razdvojiti na osnovu fizičko-hemijskih razlika sastojaka, na čiste ili suštinski čiste geometrijske ili optičke izomere, dijastereomere, racemate, na primer, hromatografijom i/ili frakcionom kristalizacijom.
[0102] Bilo koji rezultujući racemati konačnih proizvoda ili intermedijera mogu se razdvojiti u optičke antipode poznatim metodama, na primer, odvajanjem njihovih dijastereomernih soli, dobijenih sa optički aktivnom kiselinom ili bazom, i oslobađanjem optički aktivnog kiselog ili baznog jedinjenja. Konkretno, bazni deo se stoga može koristiti za razdvajanje jedinjenja iz ovog pronalaska u njihove optičke antipode, npr. frakcionom kristalizacijom formirane soli sa optički aktivnom kiselinom, npr. vinskom kiselinom, dibenzoil vinskom kiselinom, diacetil vinskom kiselinom, di-O,O'-p-toluoil vinskom kiselinom, mandelinskom kiselinom, jabučnom kiselinom ili kamfor-10-sulfonskom kiselinom. Racemski proizvodi se takođe mogu rastvoriti hiralnom hromatografijom, na primer, tečnom hromatografijom visokog pritiska (HPLC) korišćenjem hiralnog adsorbenta.
[0103] Dalje, jedinjenja prema ovom pronalasku, uključujući njihove soli, takođe mogu da se dobiju u obliku njihovih hidrata, ili da uključuju druge rastvarače koji se koriste za njihovu kristalizaciju. Jedinjenja prema ovom pronalasku mogu inherentno ili po dizajnu da formiraju solvate sa farmaceutski prihvatljivim rastvaračima (uključujući vodu); stoga je namera da pronalazak obuhvati i solvatne i nesolvatne forme. Termin "solvat" se odnosi na molekularni kompleks jedinjenja iz ovog pronalaska (uključujući njegove farmaceutski prihvatljive soli) sa jednim ili više molekula rastvarača. Takvi molekuli rastvarača su oni koji se obično koriste u farmaceutskoj struci, za koje je poznato da su bezopasni za primaoca, npr. voda, etanol i slično. Termin "hidrat" se odnosi na kompleks u kome je molekul rastvarača voda.
[0104] Jedinjenja prema ovom pronalasku, uključujući njihove soli, hidrate i solvate, mogu inherentno ili po dizajnu da formiraju polimorfe.
[0105] Tipično, jedinjenja formule (I) mogu da se pripreme u skladu sa šemama datim infra.
[0106] Korak 1: Jedinjenje formule (III) u kome su R2, R3, R4i L kao što su ovde definisani u odnosu na jedinjenje formule (I) može se dobiti kuplovanjem jedinjenja formule (IV), gde je B(OR)2deo formira derivat boronske kiseline (na primer gde je R vodonik ili pinakol) sa jedinjenjem formule (V) gde su R2, R3, R4i L kao što je ovde definisano u odnosu na jedinjenje formule (I) u prisustvu pogodnog rastvarača, kao što je npr dioksan ili 2-metil-2-butanol, baze kao što je kalijum karbonat i odgovarajućeg katalizatora, poželjno katalizatora na bazi paladijuma kao što je npr. [1,1’ bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II). Jedinjenja formula IV, V, III i II mogu se koristiti u slobodnom obliku ili u obliku njihovih soli.
[0107] Korak 2: Jedinjenje formule (II) gde su R2, R3, R4i L kao što su ovde definisani u odnosu na jedinjenje formule (I) može se pripremiti tretiranjem jedinjenja formule (III) gde su R2, R3, R4i L kao što je definisano ovde u odnosu na jedinjenje formule (I) sa odgovarajućom bazom kao što je npr. litijum hidroksid ili natrijum hidroksid u prisustvu pogodnog rastvarača kao što je npr. tetrahidrofuran ili alkanol, kao što je metanol. Dodatak kiseline, kao što je HCl, dovodi do odgovarajuće soli, npr. hidrohloridnu so jedinjenja formule II.
[0108] Korak 3: Jedinjenje formule (I) gde su R1, R2, R3, R4i L kao što su ovde definisani može se pripremiti kuplovanjem jedinjenja formule (II) gde su R2, R3, R4i L kao što je definisano ovde u odnosu na jedinjenje formule (I) sa pogodnim aminom koji ima formulu R1-NH2 gde je R1kao što je ovde definisano u odnosu na jedinjenje formule (I),
1
kao što je npr. trans-4-aminocikloheksanol, pogodan reagens za kuplovanje amida kao što je npr. O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat, i baza kao što je npr. N-metilmorfolin ili trietilamin u prisustvu pogodnog rastvarača kao što je npr. N,N-dimetilformamid ili acetonitril.
[0109] Jedinjenja formule (IV) i (V) se mogu dobiti kao što je opisano u primerima dalje u nastavku.
Šema 2
[0110] Korak 1: Jedinjenje formule (VII) gde je R1kao što je ovde definisano u odnosu na jedinjenje formule (I) može se dobiti tretiranjem jedinjenja formule (VIII) sa odgovarajućim aminom formule R1-NH2, kao što je npr. trans-4-aminocikloheksanol, pogodan reagens za kuplovanje amida kao što je npr. O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorfosfat, i baza kao što je npr. N-metilmorfolin u prisustvu pogodnog rastvarača kao što je npr. N,N-dimetilformamid.
[0111] Korak 2: Jedinjenje formule (VI) gde je R1kao što je ovde definisano u odnosu na jedinjenje formule (I) i B(OR)2deo formira derivat boronske kiseline (na primer gde je R vodonik ili pinakol) se može dobiti kuplovanjem jedinjenja formule (VII) gde je R1kao što je ovde definisano u odnosu na jedinjenje formule (I) sa jedinjenjem bora kao što je npr. bis(pinakolato)dibor u prisustvu pogodnog rastvarača, kao što je npr. dioksan, so kao što je kalijum acetat i odgovarajući katalizator, poželjno katalizator na bazi paladijuma kao što je npr. [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II).
[0112] Korak 3: Jedinjenje formule (I) gde su R1, R2, R3, R4i L kao što su ovde definisani može se dobiti kuplovanjem jedinjenja formule (VI) gde je R1kao što je definisano ovde u odnosu na jedinjenje formule (I) i B(OR)2deo formira derivat boronske kiseline (na primer gde je R vodonik ili pinakol) sa jedinjenjem formule (V) gde su R2, R3, R4i L kao što su ovde definisani u odnosu na jedinjenje formule (I) u prisustvu pogodnog rastvarača, kao što je npr dioksan, baza kao što je natrijum hidroksid i odgovarajući katalizator, poželjno katalizator na bazi paladijuma kao što je npr.
[1,1’bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II).
1
[0113] Korak 1: Jedinjenje formule (VIII) gde su R2, R3, L, R4kao što je ovde definisano u odnosu na jedinjenje formule (I) i B(OR)2deo formira derivat boronske kiseline (za primer gde je R vodonik ili pinakol) može se dobiti kuplovanjem jedinjenja formule (V) gde su R2, R3, L, R4kao što je ovde definisano u odnosu na jedinjenje formule (I) sa jedinjenjem bora kao što je npr. bis(pinakolato)dibor u prisustvu pogodnog rastvarača, kao što je na primer dioksan, so kao što je kalijum acetat i odgovarajući katalizator, poželjno katalizator na bazi paladijuma kao što je npr.
[1,1'bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum (II), ili alternativno u odgovarajućem rastvaraču kao što je tetrahidrofuran i jaka baza, kao što je n-butillitijum ili izopropilmagnezijum hlorid ili smeša njih sa jedinjenjem bora kao npr. Trimetilboronat.
[0114] Korak 2: Jedinjenje formule (I) gde su R1, R2, R3, R4i L kao što su ovde definisani može se dobiti kuplovanjem jedinjenja formule (VIII) gde su R2, R3, L, R4kao što je definisano ovde u odnosu na jedinjenje formule (I) i B(OR)2deo formira derivat boronske kiseline (na primer gde je R vodonik ili pinakol) sa jedinjenjem formule (VII) gde je R1kao što je ovde definisano u odnosu na jedinjenje formule (I), u prisustvu pogodnog rastvarača kao što je npr. dioksan, baze kao što je kalijum karbonat i odgovarajućeg katalizatora, poželjno katalizator na bazi paladijuma kao što je npr. [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II).
Šema 4
[0115] Korak 1: Jedinjenje formule (IX) gde su R2i R3kao što je definisano ovde u odnosu na jedinjenje formule (I) može se dobiti tretiranjem jedinjenja formule (X) gde su R2i R3kao što je definisano ovde u odnosu na jedinjenje formule (I) sa N-metil iminodijasirćetnom kiselinom u prisustvu pogodnog rastvarača, kao što je npr. DMF.
1
[0116] Korak 2: Jedinjenje formule (VIII-1) gde su R1, R2, R3, R4i L kao što su ovde definisani može se dobiti tretiranjem jedinjenja formule (IX) gde su R2i R3kao što je definisano ovde u u odnosu na jedinjenje formule (I) sa pogodnim aminom sa odgovarajućim redukcionim agensom, kao što je npr. natrijum triacetoksiborohidrid, i kiselina kao što je sirćetna kiselina, u prisustvu pogodnog rastvarača, kao što je npr. THF.
[0117] Korak 3: Jedinjenje formule (I) gde su R1, R2, R3, R4i L kao što su ovde definisani može se dobiti kuplovanjem jedinjenja formule (VIII-1) gde su R2, R3, L, R4kako je ovde definisano u odnosu na jedinjenje formule (I) sa jedinjenjem formule (VII) gde je R1kao što je ovde definisano u odnosu na jedinjenje formule (I), u prisustvu pogodnog rastvarača kao što je npr. dioksan, baze kao što je kalijum fosfat i odgovarajućeg katalizatora, poželjno katalizator na bazi paladijuma kao što je npr. (2-dicikloheksilfosfino-2’,4’,6’-triizopropil-1,1’-bifenil)[2-(2-aminoetil)fenil)]paladijum(II) hlorid.
[0118] Jedinjenje formule (I), kao što je jedinjenje prema pronalasku, u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, može se pripremiti postupkom koji obuhvata sledeće korake:
a) kuplovanje jedinjenja formule (II) kako je ovde definisano sa jedinjenjem formule R1-NH2kako je ovde definisano da da jedinjenje formule (I);
b) obnova tako dobijenog jedinjenja formule (I) u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli.
[0119] Jedinjenje formule (I), kao što je jedinjenje prema pronalasku, u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, može se pripremiti postupkom koji obuhvata sledeće korake:
a) kuplovanje jedinjenja formule (VI) kako je ovde definisano sa jedinjenjem formule (V) kako je ovde definisano da bi se dobilo jedinjenje formule (I);
b) obnova tako dobijenog jedinjenja formule (I) u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli.
[0120] U daljem aspektu, pronalazak se odnosi na postupak za pripremu jedinjenja formule (I), u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, koji obuhvata korake:
a) kuplovanje jedinjenja formule (VIII) ili jedinjenja formule (VIII-1) kako je ovde definisano sa jedinjenjem formule (VII) kako je ovde definisano da bi se dobilo jedinjenje formule (I);
b) obnova tako dobijenog jedinjenja formule (I) u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli [0121] Pronalazak dalje uključuje bilo koju varijantu predstavljenih procesa, u kojima se kao početni materijal koristi intermedijarni proizvod koji se može dobiti u bilo kojoj fazi, a preostali koraci se sprovode, ili u kojima se početni materijali formiraju in situ u reakcionim uslovima, ili u kojima se reakcione komponente koriste u obliku njihovih soli ili optički čistog materijala.
[0122] Jedinjenja prema pronalasku i intermedijeri takođe mogu da se konvertuju jedno u drugo prema metodama koje su opšte poznate stručnjacima u ovoj oblasti.
[0123] U drugom aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i farmaceutski prihvatljivi nosač. U daljem izvođenju, kompozicija sadrži najmanje dva farmaceutski prihvatljiva nosača, kao što su oni koji su ovde opisani. Za potrebe ovog pronalaska, osim ako nije drugačije naznačeno, solvati i hidrati se generalno smatraju kompozicijama. Poželjno, farmaceutski prihvatljivi nosači su sterilni. Farmaceutska kompozicija se može formulisati za određene puteve primene, kao što je oralna primena, parenteralna primena, rektalna primena, transdermalna primena, itd. Pored toga, farmaceutske kompozicije ovog pronalaska mogu biti napravljene u čvrstom obliku (uključujući bez ograničenja kapsule , tablete, pilule, granule, praškaste materije ili supozitorije), ili u tečnom obliku (uključujući bez ograničenja rastvore, suspenzije ili emulzije). Farmaceutske kompozicije mogu biti podvrgnute konvencionalnim farmaceutskim operacijama kao što je sterilizacija i/ili mogu da sadrže konvencionalne inertne razblaživače, agense za podmazivanje ili puferske agense, kao i pomoćne supstance, kao što su konzervansi, stabilizatori, sredstva za vlaženje, emulgatori i puferi, itd.
[0124] Tipično, farmaceutske kompozicije su tablete ili želatinske kapsule koje sadrže aktivni sastojak zajedno sa jednim ili više od:
a) razblaživača, npr. laktoza, dekstroza, saharoza, manitol, sorbitol, celuloza i/ili glicin;
b) maziva, npr. silicijum dioksid, talk, stearinska kiselina, njena magnezijumova ili kalcijumova so i/ili polietilenglikol; takođe za tablete
c) veziva, npr. magnezijum aluminijum silikat, skrobna pasta, želatin, tragakant, metilceluloza, natrijum karboksimetilceluloza i/ili polivinilpirolidon; ako je poželjno
d) dezintegranata, npr. skrob, agar, alginska kiselina ili njena natrijumova so, ili šumeće smeše; i
1
e) apsorbenata, boja, aroma i zaslađivača.
[0125] Tablete mogu biti ili obložene filmom ili enterički obložene prema metodama poznatim u tehnici.
[0126] Pogodne kompozicije za oralnu primenu uključuju efikasnu količinu jedinjenja prema pronalasku u obliku tableta, pastila, vodenih ili uljanih suspenzija, disperzibilnih praškova ili granula, emulzija, tvrdih ili mekih kapsula, ili sirupa ili eliksira. Kompozicije namenjene za oralnu upotrebu pripremaju se prema bilo kom postpuku poznatom u tehnici za proizvodnju farmaceutskih kompozicija i takve kompozicije mogu sadržati jedan ili više agenasa izabranih iz grupe koju čine zaslađivači, agensi za ukus, agensi za bojenje i konzervansi kako bi se obezbedili farmaceutski elegantni i ukusni preparati. Tablete mogu da sadrže aktivni sastojak u mešavini sa netoksičnim farmaceutski prihvatljivim pomoćnim supstancama koje su pogodne za proizvodnju tableta. Ove pomoćne supstance su, na primer, inertni razblaživači, kao što su kalcijum karbonat, natrijum karbonat, laktoza, kalcijum fosfat ili natrijum fosfat; sredstva za granulaciju i dezintegraciju, na primer, kukuruzni skrob ili alginska kiselina; vezivna sredstva, na primer, skrob, želatin ili bagrem; i sredstva za podmazivanje, na primer magnezijum stearat, stearinska kiselina ili talk. Tablete su neobložene ili obložene poznatim tehnikama da bi se odložila dezintegracija i apsorpcija u gastrointestinalnom traktu i na taj način obezbedilo produženo dejstvo tokom dužeg perioda. Na primer, može se koristiti materijal za odlaganje vremena kao što je gliceril monostearat ili gliceril distearat.
[0127] Formulacije za oralnu upotrebu mogu biti predstavljene kao tvrde želatinske kapsule u kojima je aktivni sastojak pomešan sa inertnim čvrstim razblaživačem, na primer, kalcijum karbonatom, kalcijum fosfatom ili kaolinom, ili kao meke želatinske kapsule gde je aktivni sastojak pomešan sa vodom ili uljanim medijumom, na primer, ulje od kikirikija, tečni parafin ili maslinovo ulje.
[0128] Jedinjenja formule (I) u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, pokazuju vredna farmakološka svojstva, npr. ALK-2 modulirajuća svojstva, npr. kao što je naznačeno in vitro i in vivo testovi kao što je dato u sledećim odeljcima, i stoga su indikovana za terapiju ili za upotrebu kao istraživačke hemikalije, npr. kao jedinjenja alata.
[0129] Jedinjenja prema pronalasku mogu biti korisna u lečenju indikacija koje se biraju između: heterotopske osifikacije ili fibrodisplazije ossificans progressiva.
[0130] Bez želje za vezivanjem za teoriju, smatra se da jedinjenja prema pronalasku kao selektivni inhibitori ALK2 smanjuju/inhibiraju BMP signalizaciju i abnormalni oporavak tkiva koji je povezan sa tim.
[0131] Prema tome, kao dodatno izvođenje, ovaj pronalazak obezbeđuje upotrebu jedinjenja prema pronalasku u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli u terapiji. U dodatnom izvođenju, terapija je izabrana za bolest koja se može lečiti inhibicijom ALK-2 receptora. U drugom izvođenju, bolest je izabrana između heterotopne osifikacije ili fibrodisplazije ossificans progressiva.
[0132] Prema tome, jedinjenje pronalaska, kako je definisano patentnim zahtevima, može biti za upotrebu u terapiji. U daljem izvođenju, terapija je izabrana od bolesti koja se može lečiti inhibicijom ALK-2 receptora. U drugom aspektu, bolest je izabrana između heterotopične osifikacije ili fibrodisplazije ossificans progressiva.
[0133] Jedinjenja pronalaska, kako su definisana u patentnim zahtevima, korisna su u postupku lečenja bolesti koja se leči inhibicijom ALK-2 receptora koji obuhvata davanje terapeutski prihvatljive količine jedinjenja formule (I) ili njihove podformule (la), (II), (IIa), (IIb) u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli. U daljem izvođenju, bolest je izabrana između heterotopne osifikacije ili fibrodisplazije ossificans progressiva.
[0134] Prema tome, kao dalje izvođenje, ovaj pronalazak obezbeđuje upotrebu jedinjenja formule (I) ili njegovih podformula (Ia), (II), (IIa), (IIb) u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli za proizvodnju leka. U daljem izvođenju, lek je za lečenje bolesti koje se može lečiti inhibicijom ALK-2 receptora. U drugom aspektu, bolest se bira između heterotopne osifikacije ili fibrodisplazije ossificans progressiva.
[0135] U jednom izvođenju ovog pronalaska, obezbeđen je 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-(3-(tetrahidro-2H-piran) -4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid u slobodnom obliku ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, posebno u jednoj od modifikacija pomenutih ovde, za upotrebu u lečenju heterotopične kosifikacije ili fibrodisplasia ossificans progressiva.
[0136] U jednom izvođenju, obezbeđen je 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H) -piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid u slobodnom obliku ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, posebno u jednoj od modifikacija pomenutih ovde, za upotrebu u lečenju heterotopna osifikacija ili fibrodisplasia ossificans progressiva.
[0137] U jednom izvođenju, obezbeđen je 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H) piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid u slobodnoj formi ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, posebno u jednoj od ovde pomenutih modifikacija, za upotrebu u lečenju heterotopa okoštavanje ili fibrodisplasia ossificans progressiva. Sledeći primeri su namenjeni da ilustruju pronalazak i ne treba ih tumačiti kao ograničenja. Temperature su date u stepenima Celzijusa. Ako nije drugačije navedeno, sva isparavanja se vrše pod sniženim pritiskom, obično između oko 15 mm Hg i 100 mm Hg (= 20-133mbar). Struktura finalnih proizvoda, Intermedijera i polaznih materijala potvrđena je standardnim analitičkim metodama, na primer, mikroanalizom i spektroskopskom karakterizacijom, npr. MS, IR, NMR. Skraćenice koje se koriste su one uobičajene u struci.
[0138] Svi polazni materijali, blokovi, reagensi, kiseline, baze, agensi za dehidrataciju, rastvarači i katalizatori koji se koriste za sintezu jedinjenja prema ovom pronalasku su ili komercijalno dostupni ili se mogu proizvesti metodama organske sinteze poznatim stručnjacima u ovoj oblasti ili opisanim procesima ili analogno onima u Primerima. Dalje, jedinjenja ovog pronalaska se mogu proizvesti metodama organske sinteze koje su poznate stručnjaku u ovoj oblasti kao što je prikazano u sledećim primerima.
1
Primeri
Skraćenice
[0139]
δ hemijska pomeranja
AcOH sirćetna kiselina
aq rr aq. akvatičan
APCI-MS masena spektrometrija sa hemijskom jonizacijom na atmosferskom pritisku BH3DMS kompleks boran dimetil sulfida
Brine zasićeni rastvor natrijum hlorida
n-BuLi n-butillitijum
DCM dihlorometan
DMAP 4-(dimetilamino)piridin
DMF N,N-dimetilformamid
DIPEA diizopropiletilamin
DMSO dimetilsulfoksid
DSC Diferencijalna skenirajuća kalorimetrija
DVS Dinamička sorpcija pare
eq ekvivalent(i)
Et etil
Et3N trietilamin
EtOAc etilacetat
EtOH etanol
ESI-MS masena spektrometrija sa elektrosprej jonizacijom
FIA-MS protočno-injektirajuća masena spektrometrija
FT-IR Infracrvena spektroskopija sa Furijeovom transformacijom
h sat
HATU O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’ tetrametiluronijumheksafluorofosfat HPLC tečna hromatografija visokih performansi
HRMS masena spektroskopija visoke rezolucije
IPA izopropanol
IPAc izopropil acetat
i-PrOH izopropanol
IT unutrašnja temperatura
K2CO3kalijum karbonat
K3PO4kalijum fosfat
KOAc kalijum acetat
L litar
LC-MS tečna hromatografija-masena spektrometrija
LiAlH4litijum aluminijum hidrid
LiOH litijum hidroksid
M molar
MCC mikrokristalna celuloza
mg miligram
mM milimolar
MeOH metanol
min minut
mL mililitar
MgSO4magnezijum sulfat
MHz megaherc
MTBE metil terc.-butil etar
N normalno
Na2SO4natrijum sulfat
NaHCO3natrijum bikarbonat
NaHMDS natrijum-bis(trimetilsilil))amid
NaOH natrijum hidroksid
NH4Cl amonijum hlorid
NH4OH amonijum hidroksid
NH4OAc amonijum acetat
NMR nuklearna magnetna rezonanca
PdCl2(dppf) ili Pd(dppf)Cl2[1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)
2
PdCl2(PPh3)2bis(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorid
prep. HPLC preparativna tečna hromatografija visokih performansi
ppm milioniti deo
RT ili r.t. sobna temperatura (23 6 3°C)
sat. zasićeni
SFC superkritična tečna hromatografija
SPE ekstrakcija čvrste faze
TEA trietilamin
TFA trifluorosirćetna kiselina
THF tetrahidrofuran
TGA termogravimetrijska analiza
tRvreme zadržavanja (retenciono vreme)
UPLC-MS tečna hromatografija ultra-visokih performansi-masena spektroskopija
XPhos Pd (2-dicikloheksilfosfino-2’,4’,6’-triizopropil-1,1’-bifenil)[2-(2-aminoetil)fenil)]paladijum(II) hlorid XRPD rendgenska difrakcija praha
ANALITIČKE METODE
1H-NMR
[0140] Merenja su obavljena na Bruker Ultrashield<TM>400 (400 MHz), Bruker Ultrashield<TM>600 (600 MHz), 400 MHz DRX Bruker CryoProbe (400 MHz) ili 500 MHz DRX Bruker CryoProbe (500 MHz) koristeći ili ne trimetil kao interni standard. Hemijska pomeranja (δ-vrednosti) su iskazane u ppm u odnosu na tetrametil-silan, obrazac cepanja spektra je označen kao singlet (s), dublet (d), triplet (t), kvartet (k), multiplet, nerazdvojeni ili više preklapajućih signala (m), razvučeni signal (bs). Rastvarači su dati u zagradama.
UPLC-MS
[0141] Kolona: Waters Acquity HSS T3, C18, 1,8 mm, 2,1 k 50 mm, peć na 60°C. Protok: 1,0 mL/min. Gradijent: 5% do 98% B za 1,40 min, zatim 98% B za 0,40 min, 98% do 5% B za 0,10 min, 5% B za 0,10 min; A = voda 0,05% mravlja kiselina 3,75 mM NH4OAc, B = acetonitril 0,04% mravlja kiselina. Detekcija UV/VIS (DAD), ESI (+/-). Opseg masenog spektrometra: 100-1200 Da.
[0142] Na primer 46, 56, 74, 81, 85 i 87:
Kolona: Waters Acquity BEH, C18, 1,7 mm, 2,1 k 50 mm, peć na 50°C. Protok: 1,0 mL/min. Gradijent: 2% do 98% B za 4,40 min, zatim 98% B za 0,75 min, 98% do 2% B za 0,04 min; A = voda 0,1% mravlja kiselina, B = acetonitril 0,1% mravlja kiselina. Detekcija UV/VIS (DAD), ESI (+/-). Opseg masenog spektrometra: 100-1200 Da.
UPLC-HRMS:
[0143] Waters Acquity SDS, C18, 1,7 µm, 2,1 k 50 mm, peć na 50°C. Gradijent: 5% do 98% B za 7,50 min, zatim 98% B za 0,40 min, 98% do 5% B za 0,15 min; A = voda 5 mM NH4OH, B = acetonitril 5 mM NH4OH. Detekcija UV/VIS (DAD), ESI (+/-). Opseg masenog spektrometra: 100-1200 Da.
HPLC-MS
[0144] Kolona: Waters Simmetry C8, 3,5 mm, 2,1k50 mm, peć na 50°C Protok: 1,0 mL/min.
[0145] Gradijent: 10% do 95% B za 2 min, zatim 95% B tokom 1 min, 95% do 10% B za 0,5 min, 10% B za 0,50 min; A = voda 0,1% TFA, B = acetonitril 0,1% TFA. Detekcija UV/VIS (DAD), APCI (+). Opseg masenog spektrometra: 100-1200 Da.
Optičko merenje rotacije
[0146] Optička rotacija je merena korišćenjem polarimetra Perkin Elmer PE241 serije br. 5325 koji radi na 589nm koristeći hloroform kao rastvarač.
METODE PREČIŠĆAVANJA
Prep. HPLC
[0147] Gilson GX-281, pumpe 331/332.
Kolona: Waters Sunfire C18, 30x100 mm, 5 mm. Protok: 30 mL/min.
Mobilna faza: Voda (koja sadrži 0,1% TFA) i acetonitril (Metoda 1a)
ili:
Kolona: X-Bridge C18, 30x50 mm, 5 mm. Protok: 75 mL/min
Mobilna faza: Voda (koja sadrži 5 mM NH4OH) i acetonitril (Metoda 1b)
Fleš hromatografija normalne faze
[0148] Teledyne ISCO CombiFlash::
Kolona: Redisep Rf Silica Flash
Mobilna faza: cikloheksan/EtOAc (Metoda 2a) ili DCM/MeOH (Metoda 2b).
Biotage Flash-Master II:
Kolona: Prethodno napunjena silika gelom 60 (40-63 mm) od Merck-a
Mobilna faza: DCM i MeOH (koji sadrži 7,3 mM NH4OH) (Metoda 2c).
Fleš hromatografija obrnute faze:
[0149] Teledyne ISCO CombiFlash
Kolona Redisep Rf Gold C18 visokih performansi, 15,5 g, 50 g ili 240 g prethodno pakovane kolone, 20-40 µm, 100A
Mobilna faza: voda i acetonitril (koji sadrži 7,3 mM NH4OH) (metod 3a) ili voda (koji sadrži 0,1% TFA) i acetonitril (Metoda 3b).
Primer 1: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)-3 -azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0150]
[0151] U rastvor 5-(4-((1R,5S)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4 -hidroksiciklkloheksil)nikotinamid TFA soLI (Intermedijer 1a, 80 mg, 0,158 mmol) u DCM (4 mL) je dodat 1-(metilsulfonil)pip-eridin-4-on (30,8 mg, 0,174 mmol) i AcOH (0,018 mmol) 0,316 mmol) u atmosferi azota na ST. Reakciona smeša je mešana na 45°C 30 min. Natrijum triacetoksiborohidrid (84 mg, 0,395 mmol) je dodat na ST i reakciona smeša je mešana na 45°C tokom 1 h. Reakciona smeša je zatim razblažena sa zas. ak. rastvorOM NaHCO3 i pomešanA sa EtOAc. Nakon odvajanjafaza, ak. sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen normalno faznom hromatografijom (Metoda 2b) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna čvrsta supstanca. 'H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 8,39 (d, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,24 (d, 2H), 7,12 (s, 2H) , 4,58 (d, 1H), 3,80-3,63 (m, 1H), 3,45-3,36 (m, 4H), 3,15 (dd, 1H), 2,89-2,83 (m, 5H), 2,65 (dd, 1H), 2,35 -2,29 (m, 1H), 1,98-1,81 (m, 7H), 1,57-1,18 (m, 8H), 0,83-0,70 (m, 1H). (UPLC-MS) tR 0,49 min; ESI-MS 554 [M+H]<+>.
Intermedijer 1a: 5-(4-((1R,5S)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamide
[0152] U rastvor (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)fe- nil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1b, 940 mg, 1,55 mmol) u dioksanu (10 mL) je dodat 4M rastvor HCl u dioksanu (1,55 mL, 6,20 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 65°C tokom 5 h, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao hidrohloridna so. Povremeno je jedinjenje iz naslova dalje prečišćeno prep. HPLC (Metoda 1a) da bi se dobila TFA so posle uparavanja rastvarača. (UPLC-MS) tR0,45 min; ESI-MS 393 [M+H]<+>.
Intermedijer 1b: (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)fenil)-3azabiciklo[3.1 .0]heksan-3-karboksilat
[0153] U rastvor 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c, 630 mg, 1,59 mmol) u DMF (10 mL) je dodat trans-4-aminocikloheksanol (290 mg, 1,91 mmol), HATU (909 mg, 2,39 mmol) i N-metilmorfolin (0,53 mL, 4,78 mmol) na ST. Reakciona smeša je mešana 2 h, razblažena sa zas. ak. rastvorom NaHCO3i ekstrahovana tri puta sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen prep. HPLC (Metoda 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna čvrsta supstanca. (UPLC-MS) tR1,00 min; ESI-MS 493 [M+H]<+>.
Intermedijer 1c: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina
[0154] U rastvor (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3-azabicikl-10[3.1.0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1d, 1,00 g, 2,44 mmol) u THF (15 mL) je dodat 2M vodeni rastvor LiOH (3,66 mL, 7,33 mmol) na ST. Reakciona smeša je mešana na 65°C tokom 2 h, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen prep. HPLC (Metod 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. (UPLC-MS) tR0,92 min; ESI-MS 396 [M+H]<+>.
[0155] Intermedijer 1d: (1R,5S)-terc-butil-1-(4-(6-amino-5-(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat
[0156] Racemski terc-butil-1-(4-(6-amino-5-(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3-aza-biciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat ( Intermedijer 1e, 13,5 g, 33,0 mmol) je razdvojen hiralnom preparativnom SFC (Vaters SFC 200, Vaters SFC 200, CHIRALPAK AD-H 5 mm 30*250 mm, mobilna faza CO2/i-PrOH 70:30, brzina protoka 120 g /min; UV detekcija na 278 nm). Jedinjenje iz naslova je dobijeno kao sivo bela čvrsta supstanca nakon koncentrovanja pod sniženim pritiskom. Hiralni analitički SFC (CHIRALPAK AD-33 mm 2*100 mm, mobilna faza CO2/MeOH 0,1% DEA 60:40, brzina protoka 1 mL/min; UV detekcija na 274 nm): tR2,30 min, ee = 98,6%, [α]D<20>= 90°.
Intermedijer 1e: terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat
[0157] U rastvor terc-butil 1-(4-bromofenil)-3-aza-biciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (pripremljen analogno opisu u WO2007/022935) (3,34 g, 9,38 mmol) u dioksanu (75 mL) dodat je metil 2-amino-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)nikotinat (pripremljen analogno opisu u WO2012/087938) (3,91 g, 14,1 mmol). A 2M ak. rastvor K2CO3(9,38 mL, 18,8 mmol) i adukt Pd(dppf)Cl2-DCM (0,766 g, 0,938 mmol) su dodati u atmosferi azota i smeša je zagrevana do 80°C u atmosferi azota tokom 18 h. Reakciona smeša je razblažena sa 150 mL vode i ekstrahovana tri puta sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je bio prečišćen normalno faznom hromatografijom (Metod 2b) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova u obliku prljavo-bele čvrste supstance. (UPLC-MS) tR 1.29 min; ESI-MS 410 [M+H]<+>.
Primer 2: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0158]
[0159] U rastvor TFA soli 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 2a, 117 mg, 0,259 mmol) u DMF (3 mL) dodat je trans-4-aminocikloheksanol hidrohlorid (39,3 mg, 0,259 mmol), HATU (148 mg, 0,389 mmol) i N-metilmorfolin (0,085 mmol.70 mmol). ) na ST. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h i zatim razblažena sa zasićenim ak. rastvorom NaHCO3i pomešan sa EtOAc. Nakon odvajanja faza, ak. sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen prep. HPLC (Metoda 1a) da bi se
2
dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (d, IH), 8,31 (d, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,58 (d, 2H), 7,23 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,58 (d, 1H), 3,82 - 3,66 (m, 1H), 3,48 - 3,34 (m, 3H), 3,07 (d, 1H), 2,64 - 2,55 (m, 2H), 1,96 - 1,77 (m, 5H), 1,50-1,19 (m, 5H), 1,04 (dd, 6H), 0,75 (dd, 1H). (UPLC-MS) tR0,50 min; ESI-MS 435 [M+H]<+>.
Intermedijer 2a: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina TFA soli [0160] U rastvor metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinata (Intermedijer 2b, 660 mg, 1.22 mmol) u THF (10 mL) je dodat 2M vodeni rastvor. rastvor LiOH (1,22 mL, 2,44 mmol) na ST. Reakciona smeša je mešana na 65°C tokom 2 h i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen prep. HPLC (Metod 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. (UPLC-MS) tR0,37 min; ESI-MS 338 [M+H]<+>.
Intermedijer 2b: metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinat
[0161] U rastvor metil 2-amino-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)nikotinata (pripremljen analogno opisu u WO 2012/087938) (462 mg, 1.663 mmol) u acetonitrilu (7 mL) je dodat (1R,5S)-1-(4-bromofenil)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan (Intermedijer 2c, 466 mg, 1.66 mmol ), 2M ak. K2CO3(1,66 mL, 3,33 mmol) i adukt PdCl2(dppf)-DCM (67,9 mg, 0,083 mmol) na ST. Reakciona smeša je zatvorena i zagrevana u mikrotalasnoj pećnici na 120°C tokom 10 min, zatim ohlađena, filtrirana preko celita, razblažena sa zas. ak. rastvorom NaHCO3i pomešan sa EtOAc. Nakon odvajanja faza, ak. sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je korišćen bez daljeg prečišćavanja. (UPLC-MS) tR0,62 min; ESI-MS 352 [M+H]<+>.
Intermedijer 2c: (1R,5S)-1-(4-bromofenil)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan
[0162] U rastvor (1R,5S)-1-(4-bromofenil)-3 azabiciklo[3.1.0]heksana (pripremljen analogno opisu u WO2007/022935) (525 mg, 2,21 mmol) u acetonitrilu ( 10 mL) je dodat 2-jodopropan (0,420 mL, 2,65 mmol) i K2CO3(609 mg, 4,41 mmol) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota. Reakciona smeša je mešana na 65°C tokom 3 h, zatim razblažena sa EtOAc i pomešana sa zas. ak. rastvor NaHCO3.Nakon odvajanja faza, ak. faza je ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao sivobela čvrsta supstanca. (UPLC-MS) tR0,72 min; ESI-MS 280/282 [M+H]<+>.
Primer 3: 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1r,4R) -4-hidroksiciklkloheksil)nikotinamid
[0163]
[0164] U rastvor (6-amino-5-(((1r,4r)-4 hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)borne kiseline (Intermedijer 3a, 300 mg, 0,645 mmol) u dioksanu (5 mL ) je dodat (R)-6-(1-(4-bromofenil)etil)-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan (Intermedijer 3b, 420 mg, 0,774 mmol), PdCl2(dppf) (23,6 mg, 0,032 mmol) i 2N ak. NaOH (0,645 mL, 1,29 mmol) u atmosferi azota na ST. Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 2 h, zatim razblažena sa EtOAc i vodom. Posle dve ekstrakcije sa EtOAc, organski slojevi su isprani zas. ak. rastvorom NaHCO3i slanim rastvorom, respektivno, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je rastvoren u MeOH i propušten kroz silicijum-tiol ketridž (punjenje od 500 mg; prethodno kondicioniran sa MeOH) da bi se uklonio paladijum. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen normalno faznom hromatografijom (Metoda 2b) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braonkasta čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,37 (d, 1H), 8,27 (d, 1H), 8,09 -8,14 (m, 1H), 7,57 (bs, 2H), 7,33 (bs, 2H), 7,12 ( bs, 2H), 4,54 - 4,58 (m, 1H), 4,51 - 4,66 (m, 3H), 3,55 - 3,81 (m, 1H), 3,35 -3,54 (m, 2H), 3,20 - 3,24 (m, 1H), 3,20-3,27 (m, 2H), 3,15 (bs, 1H), 1,78-1,91 (m, 4H), 1,14-1,41 (m, 5H), 1,11 (bs, 3H). (UPLC-MS) tR0,45 min; ESI-MS 437 [M+H]<+>.
Intermedijer 3a: (6-amino-5-(((1r,4r)-4 hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)borna kiselina.
[0165] U rastvor 2-amino-5-bromo-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamida (Intermedijer 3c, 1,00 g, 2,67 mmol) u dioksanu (25 mL) je dodat bis(pinakolato)dibor (0,815 g, 3,21 mmol), PdCl2(dppf) (0,098 g, 0,134 mmol) i KOAc (0,525 g, 5,35 mmol) u atmosferi azota. Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 18 h, hlađena, filtrirana kroz sloj celita i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pinakolat estar je hidrolizovan pod reakcionim uslovima) kao sirova braonkasta čvrsta supstanca koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja.(UPLC-MS) tR0,32 min; ESI-MS 280 [M+H]<+>.
Intermedijer 3b: (R)-6-(1-(4-bromofenil)etil)-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan.
[0166] U rastvor (R)-1-(4-bromofenil)etanamina (0,216 mL, 1,499 mmol) u DMF (7 mL) dodat je DIPEA (0,524 mL, 3,00 mmol) i 3,3-bis(bromometil) )oksetan (439 mg, 1.80 mmol) u atmosferi azota na ST. Reakciona smeša je mešana na 100°C tokom 5 h, ohlađena i razblažena vodom i EtOAc. Posle odvajanja faza, vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa EtOAc, a kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. (UPLC-MS) tR0,52 min; ESI-MS 282/284 [M+H]<+>.
Intermedijer 3c: 2-amino-5-bromo-N-((lr,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid.
[0167] U rastvor 2-amino-5-bromonikotinske kiseline (2,00 g, 9,22 mmol) u DMF (30 mL) dodat je trans-4-aminocikloheksanol (1,68 g, 11,1 mmol), HATU (7,01 g, 18,4 mmol) i N-metilmorfolin (4,05 mL, 36,9 mmol) na ST. Posle mešanja tokom 2 h, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i zas. ak. rastvor NaHCO3. The ak. faza je ekstrahovana dva puta sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen normalno faznom hromatografijom (Metod 2a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca. (UPLC-MS) tR0,62 min; ESI-MS 314/316 [M+H]<+>.
Primer 4: 5-(4-((S)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1r,4R) -4-hidroksiciklkloheksil)nikotinamid
[0168]
[0169] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6 azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino -N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 3) osim što je (S)-6-(1-(4-bromofenil)etil)-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan (Intermedijer 4a) korišćen umesto (R)-6-(1-(4-bromofenil)etil)-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptana (Intermedijer 3b). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,37 (d, 1H), 8,27 (d, 1H), 8,09 - 8,14 (m, IH), 7,57 (bs, 2H), 7,33 (bs, 2H), 7,12 ( bs, 2H), 4,54 - 4,58 (m, 1H), 4,51 - 4,66 (m, 3H), 3,55 - 3,81 (m, 1H), 3,35 - 3,54 (m, 2H), 3,20 - 3,24 (m, 1H), 3,20-3,27 (m, 2H), 3,15 (bs, 1H), 1,78-1,91 (m, 4H), 1,14-1,41 (m, 5H), 1,11 (bs, 3H). (UPLC-MS) tR 0,45 min; ESI-MS 437 [M+H]<+>.
Intermedijer 4a: (S)-6-(1-(4-bromofenil)etil)-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan
[0170] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa (R)-6-(1-(4-bromofenil)etil)-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptanom (Intermedijer 3b) osim što je (S )-1-(4-bromfenil)etanamin korišćen umesto (R)-1-(4-bromofenil)etanamina. (UPLC-MS) tR0,55 min; ESI-MS 282/284 [M+H]<+>.
Primer 5: 2-amino-N-((lr,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(3-morfolinopropil)-3-azabicikl-lo[3.1. 0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0171]
2
[0172] U rastvor 5-(4-((1S,5R)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-((1r,4S)-4 -hidroksiciklkloheksil)nikotinamid TFA so (Intermedijer 5a, 70 mg, 0,138 mmol) u acetonitrilu (3 mL) je dodat K2CO3 (47,7 mg, 0,345 mmol) i 4-(3 bromopropil)morfolin (47,9 mg, 6 mmol) ST. Reakciona smeša je mešana na 65°C tokom 2 h. Reakciona smeša je zatim razblažena sa zas. ak. rastvor NaHCO3i pomešan sa EtOAc. Nakon odvajanja faza, ak. sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen prep. HPLC (Metoda 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (d, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,11 (d, IH), 7,58 (d, 2H), 7,22 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,58 (d, 1H), 3,82 - 3,67 (m, 1H), 3,61 - 3,50 (m, 4H), 3,41 (s, 2H), 3,05 (d, IH), 2,48 -2,24 (m, 9H) , 1,93-1,76 (m, 5H), 1,61 (m, 2H), 1,46-1,17 (m, 6H), 0,76 (dd, 1H). (UPLC-MS) tR0,40 min; ESI-MS 520 [M+H]<+>.
Intermedijer 5a: 5-(4-((1S,5R)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0173] U rastvor (1S,5R)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)fenil) -3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (Intermedijer 5b, 1,18 g, 1,95 mmol) u dioksanu (10 mL) je dodat 4M rastvor HCI u dioksanu (1,95 mL, 7,78 mmol) na ST. Reakciona smeša je mešana na 65°C tokom 5 h, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao hidrohloridna so. Povremeno je proizvod bio dalje prečišćavan prep. HPLC (Metoda 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so posle uparavanja rastvarača. (UPLC-MS) tR0,45 min; ESI-MS 393 [M+H]<+>.
Intermedijer 5b: (1S,5R)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)fenil)- 3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat
[0174] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin- 3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1,0]heksan-3-karboksilatom (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 5c) korišćena umesto 2 -amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c). (UPLC-MS) tR1,00 min; ESI-MS 493 [M+H]<+>.
Intermedijer 5c: 2-amino-5-(4-((lS,5R)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina
[0175] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il )fenil)nikotinskom kiselinom (Intermedijer 1c) osim što je (1S,5R)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0 ]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 5d) korišćen umesto (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3- azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (Intermedijer 1d). (UPLC-MS) tR0,92 min; ESI-MS 396 [M+H]<+>.
Intermedijer 5d: (1S,5R)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5 (metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat
[0176] Racemski terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3-aza-biciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1e, 13,5 g, 33,0 mmol) je razdvojen hiralnom preparativnom SFC (CHIRALPAK AD-H 5 µm 30*250 mm, mobilna faza CO2/i-PrOH 70:30, brzina protoka 120 g/min; UV detekcija na 278 nm). Jedinjenje iz naslova je dobijeno kao sivo bela čvrsta supstanca nakon koncentrovanja pod sniženim pritiskom. Hiralna analitička HPLC (CHIRALPAK AD-3 3 µm 2*100 mm, mobilna faza CO2/MeOH 0,1% DEA 60:40, brzina protoka 1 mL/min; UV detekcija na 274 nm): tR2,90 min, ee = 98,7% , [α]D<20>= -87°.
Primer 6: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) -N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0177]
2
[0178] U rastvor 5-(4-((1R,5S)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil) nikotinamida TFA so (Intermedijer 1a, 70 mg, 0,138 mmol) u acetonitrilu (3 mL) je dodat K2CO3(38,2 mg, 0,276 mmol) i 1,3-difluoropropan-2-il trifluorometansulfonat 78 mg. 0,166 mmol) na ST. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, zatim razblažena sa zasićenim ak. rastvorom NaHCO3i pomešan sa EtOAc. Nakon odvajanja faza, ak. sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen prep. HPLC (Metod 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,41 (d, 1H), 8,37 (d, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,62 (s, 2H), 7,35 (d, 1H), 7,25 (m, 3H), 4,64 (d, 3H), 3,74 (m, 4H), 2,89 (d, 4H), 1,87 (t, 5H), 1,34 (m, 6H), 0,82 (s, 1H). (UPLC-MS) tR0,68 min; ESI-MS 471 [M+H]<+>.
Intermedijer 6a: 1,3-difluoropropan-2-il trifluorometansulfonat
[0179] U rastvor 1,3-difluoropropan-2-ola (300 mg, 3,12 mmol) u DCM (8 mL) dodat je DMAP (26,7 mg, 0,219 mmol) i TEA (0,522 mL, 3,75 mmol) u atmosferi azota na ST. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C i dodat je trifluorometansulfonski anhidrid (0,630 mL, 3,75 mmol). Posle mešanja na 0°C tokom 60 min i na ST tokom 3 h, reakciona smeša je razblažena sa DCM. Organski sloj je ispran vodom, dva puta sa ak. Rastvorom limunske kiseline i dva puta sa zas. ak. rastvorom NaHCO3, osušen preko MgSO4i koncentrovan na 500 mbar. Jedinjenje iz naslova je dobijeno kao sirovo ulje koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Primer 7: 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[ 3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0180]
[0181] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4 hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3 -il)fenil)-3 azabiciklo[3.1,0]heksan-3-karboksilatom (Intermedijer 1b) osim što je 2- amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 7a) korišćena umesto 2 -amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c) i 4-aminobiciklo [2.2.2]oktan-1-ol hidrohlorid je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen prvo prep. HPLC (Metoda 1a), a zatim reverzno faznom fleš hromatografijom (Metoda 3a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,34 (d, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,57 (d, 2H), 7,21 (d, 2H), 6,92 (s, 2H), 4,32 (s, 1H), 3,45 (t, 2H), 3,41 - 3,29 (m, 2H), 3,27 (s, 3H), 3,08 (d, 1H), 2,68 - 2,51 (m, 3H), 2,07 - 2,03 (m, 6H), 1,83 - 1,79 (m, 1H), 1,65 - 1,61 (m, 6H), 1,33 (t, 1H), 0,77 (bs, IH). (UPLC-MS) tR0,52 min; ESI-MS 477 [M+H]<+>.
Intermedijer 7a: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1- il)fenil)nikotinska kiselina
2
[0182] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il )fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 2c) osim metil 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinat (Intermedijer 7b) je korišćen umesto (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1d). (UPLC-MS) tR0,32 min; ESI-MS 354 [M+H]<+>.
Intermedijer 7b: metil 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinat
[0183] U rastvor metil 5-(4-((1S,5R)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-aminonikotinata hidrohlorida (Intermedijer 7c, 210 mg, 0,607 mmol ) u acetonitrilu (6 mL) je dodat K2CO3(168 mg, 0,729 mmol) i 1-bromo-2-metoksietan (0,068 mL, 0,729 mmol) na ST. Reakciona smeša je mešana na 65°C tokom 3 h. Reakciona smeša je zatim razblažena sa zas. ak. rastvorom NaHCO3i pomešana sa EtOAc. Nakon odvajanja faza, ak. sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. (UPLC-MS) tR0,62 min; ESI-MS 368 [M+H]<+>.
Intermedijer 7c: metil 5-(4-((1S,5R)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-aminonikotinat hidrohlorid
[0184] U rastvor (1S,5R)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5 (metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksana-3 -karboksilata (Intermedijer 5d, 500 mg, 1.22 mmol) u dioksanu (7 mL) je dodat 4M rastvor HCl u dioksanu (1.22 mL, 4.88 mmol) na ST. Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 3 h i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao hidrohloridna so. (UPLC-MS) tR0,58 min; ESI-MS 310 [M+H]<+>.
Primer 8: 2-amino-5-(2-fluoro-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0185]
[0186] U rastvor 2-amino-5-bromo-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamida (Intermedijer 3c, 230 mg, 0,731 mmol) u dioksanu (4 mL) dodat je 1-( 3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-4-izopropilpiperazin (Intermedijer 8a, 463 mg, 0,731 mmol), 2N ak. K2CO3(0,73 mL, 1,46 mmol) i adukt PdCl2(dppf)-DCM (29,9 mg, 0,037 mmol) u atmosferi azota na ST. Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 60 min, zatim razblažena sa EtOAc i ak. NaHCO3. Nakon odvajanja faza, ak. sloj je ekstrahovan sa EtOAc. Organski slojevi su isprani sa zas. ak. rastvorom NaHCO3i slanim rastvorom, redom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen prep. HPLC (Metoda 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,24 - 8,16 (m, 2H), 7,95 (d, 1H), 7,39 (t, 1H), 7,06 (s, 2H), 6,86 (d, 2H), 4,54 ( d, IH), 3,69 (m, 1H), 3,41 - 3,33 (m, 2H), 3,15 (s, 3H), 2,66 (k, 3H), 1,82 (m, 4H), 1,42 - 0,88 (m, 10H) . (UPLC-MS) tR0,48 min; ESI-MS 456 [M+H]<+>.
Intermedijer 8a: 1-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2 dioksaborolan-2-il)fenil)-4-izopropilpiperazin
[0187] U rastvor 1-(4-bromo-3-fluorofenil)-4-izopropilpiperazina (Intermedijer 8b, 212 mg, 0,662 mmol) u dioksanu (8 mL) dodat je bis(pinakolato)dibor (202 mg, 0,794). mmol), KOAc (130 mg, 1,323 mmol) i adukt PdCl2(dppf)-DCM (27 mg, 0,033 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 90°C tokom 2 h, zatim filtrirana kroz sloj celita i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez ikakvog daljeg prečišćavanja. (UPLC-MS) tR0,79 min; ESI-MS 349 [M+H]<+>.
Intermedijer 8b: 1-(4-bromo-3-fluorofenil)-4-izopropilpiperazin
[0188] Rastvoru 1-(4-bromo-3-fluorofenil)piperazina (Intermedijer 8c, 215 mg, 0,797 mmol) u acetonitrilu (7 mL) dodat je 2-jodopropan (0,095 mL, 0,956 mmol) i K2CO3220 mg, 1.593 mmol) na ST. Reakciona smeša je mešana na 65°C tokom 4 h, zatim razblažena sa EtOAc i vod. NaHCO3. Nakon odvajanja faza, ak. sloj je ekstrahovan sa EtOAc. Organski
2
slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. (UPLC-MS) tR0.66 min; ESI-MS 302 [M+H]<+>.
Intermedijer 8c: 1-(4-bromo-3 fluorofenil)piperazin
[0189] U rastvor terc-butil 4-(4-bromo-3 fluorofenil)piperazin-1-karboksilata (300 mg, 0,835 mmol) u dioksanu (8 mL) dodat je 4N HCl u dioksanu (0,84 mL, 3,34 mmol). ) u atmosferi azota na ST. Reakciona smeša je mešana 2 h, zatim razblažena sa EtOAc i vod. NaHCO3. Nakon odvajanja faza, ak. sloj je ekstrahovan sa EtOAc. Organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez ikakvog daljeg prečišćavanja. (UPLC-MS) tR0,60 min; ESI-MS 260 [M+H]<+>.
Primer 9: 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0190]
[0191] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4R)-4 hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamidom (Primer 2) osim što je 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1,0]heksan-1 -il)fenil)nikotinska kiselina TFA soli (Intermedijer 9a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) )fenil)nikotinske kiseline TFA soli (Intermedijer 2a). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (d, IH), 8,31 (d, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,58 (d, 2H), 7,23 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,58 (d, IH), 3,82 -3,66 (m, 1H), 3,48 - 3,34 (m, 3H), 3,07 (d, 1H), 2,64 - 2,55 (m, 2H), 1,96 - 1,77 (m, 5H), 1,50-1,19 (m, 5H), 1,04 (dd, 6H), 0,75 (dd, 1H). (UPLC-MS) tR 0,50 min; ESI-MS 435 [M+H]<+>.
Intermedijer 9a: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina TFA soli [0192] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinskom kiselinom TFA soli (Intermedijer 2a) osim što je metil 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinat (Intermedijer 9b) korišćen umesto metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinata (Intermedijer 2b). (UPLC-MS) tR0,37 min; ESI-MS 338 [M+H]<+>.
Intermedijer 9b: metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinat
[0193] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) nikotinatom (Intermedijer 2b) osim (1S,5R)-1-(4-bromofenil)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksana (Intermedijer 9c) je korišćen umesto (1R,5S)-1-( 4-bromofenil)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan (Intermedijer 2c). (UPLC-MS) tR0,62 min; ESI-MS 352 [M+H]<+>.
Intermedijer 9c: (1S,5R)-1-(4-bromofenil)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan
[0194] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa (1R,5S)-1-(4-bromofenil)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksanom (Intermedijer 2c) osim što je (1S,5R) -1-(4-bromofenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan (pripremljen analogno opisu u WO2007/022935) korišćen umesto (1R,5S)-1-(4-bromofenil)-3-azabiciklo [3.1.0]heksana. (UPLC-MS) tR0,70 min; ESI-MS 280/282 [M+H]<+>.
Primer 10: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0195]
2
[0196] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 6) osim što je 4-(2-brometil)morfolin korišćen umesto 1,3-difluoropropan-2-il trifluorometansulfonata (Intermedijer 6a), a reakciona smeša je mešana na 65°C tokom 1 h. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (d, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,22 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,59 (d, 1H), 3,84 - 3,67 (m, 1H), 3,63 - 3,51 (m, 4H), 3,46 - 3,39 (m, 2H), 3,09 (d, 1H), 2,71 - m, 2,57. 3H), 2,42 (s, 6H), 1,95-1,75 (m, 5H), 1,53-1,15 (m, 5H), 0,77 (d, 1H). (UPLC-MS) tR0,49 min; ESI-MS 506 [M+H]<+>.
Primer 11: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r) ,4S)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0197]
[0198] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4 hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 5) osim što je 1-bromo-2-fluoroetan korišćen umesto 4-(3-bromopropil)morfolina, a reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 5 h. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (d, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,22 (d, 2H), 7,13 (s, 2H), 4,59 (d, 2H), 4,50 (s, IH), 3,73 (d, 1H), 3,41 (d, 3H), 2,83 - 2,78 (m, 3H), 1,85 (t, 5H), 1,47 - 1,16 (m, 6H), 0,78 (s, 1H). (UPLC-MS) tR 0,47 min; ESI-MS 439 [M+H]<+>.
Primer 12: 2-amino-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(1-izopropilpirolidin-3-il)fenil)nikotinamid
[0199]
[0200] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(2-fluoro-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil )nikotinamidom (Primer 8) osim što je 1-izopropil-3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)pirolidin (Intermedijer 12a) korišćen umesto 1-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-4-izopropilpiperazina (Intermedijer 8a). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,36 (d, IH), 8,26 (d, 1H), 8,09 (d, 1H), 7,62 - 7,51 (m, 2H), 7,37 - 7,28 (m, 2H), 7,09 (s, 2H), 4,55 (d, 1H), 3,70 (dk, 1H), 3,44 - 3,34 (m, 2H), 3,03 (d, 1H), 2,75 (s, 2H), 2,29 - 2,06 (m, 2H), 1,87-1,68 (m, 5H), 1,42-1,17 (m, 5H), 1,06 (t, 6H). (UPLC-MS) tR 0,48 min; ESI-MS 423 [M+H]<+>.
[0201] Intermedijer 12a: 1-izopropil-3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)pirolidin Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 1-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-4-izopropilpiperazin (intermedijer 8a) osim 3-(4-bromofenila )-1-izopropilpirolidin (Intermedijer 12b) je korišćen umesto 1-(4-bromo-3-fluorofenil)-4-izopropilpiperazina (Intermedijer 8b). (UPLC-MS) tR0,79 min; ESI-MS 316 [M+H]<+>.
Intermedijer 12b: 3-(4-bromofenil)-1-izopropilpirolidin
[0202] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 1-(4-bromo-3-fluorofenil)-4-izopropilpiperazinom (Intermedijer 8b) osim što je 3-(4-bromofenil)pirolidin hidrohlorid korišćen umesto 1-(4-bromo-3-fluorofenil)piperazina (Intermedijer 8c). (UPLC-MS) tR0,62 min; ESI-MS 269 [M+H]<+>.
Primer 13: 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabicikl-10 [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0203]
[0204] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 5) osim što je 4-(2-bromoetil)morfolin korišćen umesto 4-(3-bromopropil)morfolina. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (d, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,22 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,59 (d, IH), 3,84 - 3,67 (m, 1 H), 3,63 - 3,51 (m, 4H), 3,46 -3,39 (m, 2H), 3,09 (d, 1H), 2,71 - 2,57 (m, 3H), 2,42 (s, 6H), 1,95 - 1,75 (m, 5H), 1,53 - 1,15 (m, 5H), 0,77 (d, IH). (UPLC-MS) tR0,49 min; ESI-MS 506 [M+H]<+>.
Primer 14: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0205]
[0206] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1,0]heksan-3-karboksilatom (Intermedijer 1b) osim što je 2-
1
amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 14a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c), a trans-4-amino-1-metilcikloheksanol je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen prep. HPLC (Metod 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,53 (d, 1H), 8,46 (d, 1H), 8,35 (s, 1H), 7,72 (d, 2H), 7,71 (bs, 2H), 7,41 (d, 2H), 4,06 (dd , 1H), 3,98 (dd, 2H), 3,85 - 3,43 (m, 5H), 3,27 (t, 2H), 2,26 (dd, 1H), 1,99 (d, 2H), 1,83 - 1,76 (m, 4H), 1,68-1,56 (m, 3H), 1,51-1,45 (m, 5H), 1,21-1,13 (m, 5H). (UPLC-MS) tR0,51 min; ESI-MS 491 [M+H]<+>.
Intermedijer 14a: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (TFA so)
[0207] U rastvor metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1- il)fenil)nikotinata (Intermedijer 14b, 1,30 g, 2,97 mmol) u anhidrovanom THF (16 mL) je dodat 2M vodeni rastvor LiOH (4,46 mL, 8,92 mmol) na ST. Reakciona smeša je mešana na 65°C tokom 140 min, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen reverzno faznom hromatografijom (Metoda 3b). Čiste frakcije su koncentrovane i liofilizovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao sivo bela TFA so. (UPLC-MS) tR0,40 min; ESI-MS 380 [M+H]<+>.
Intermedijer 14b: metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) nikotinat
[0208] U rastvor metil 5-(4-((1R,5S)-3azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-aminonikotinat hidrohlorida (Intermedijer 14c, 1,18 g, 3,28 mmol) u DCM (16 mL) je dodat dihidro-2H-piran-4(3H)-on (0.33 mL, 3.60 mmol) i AcOH (0.38 mL, 6.55 mmol) na ST. Reakciona smeša je mešana na 45°C tokom 30 min. Na ST je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (1,74 g, 8,19 mmol) i reakciona smeša je mešana na 45°C tokom 1 h. Reakciona smeša je zatim razblažena sa zas. rastvorom NaHCO3i pomešana sa EtOAc. Nakon odvajanja faza, ak. sloj je ekstrahovan ponovo sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. (UPLC-MS) tR0,67 min; ESI-MS 394 [M+H]<+>.
Intermedijer 14c: metil 5-(4-((1R,5S)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-aminonikotinat hidrohlorid
[0209] U rastvor (1R,5S)-terc-butil-1-(4-(6-amino-5-(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksana -3-karboksilata (Intermedijer 1d, 1.50 g, 3.66 mmol) u dioksanu (25 mL) je dodat 4M rastvor HCl u dioksanu (3.66 mL, 14.7 mmol) na ST. Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 3 h, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao hidrohloridna so. (UPLC-MS) tR0,58 min; ESI-MS 310 [M+H]<+>.
Primer 15: 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[ 3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0210]
[0211] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4 hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3 -il)fenil)-3-azabiciklo[3.1,0]heksan-3-karboksilatom (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 15a) korišćena umesto 2 -amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c), a 4-aminobiciklo[2.2.2]oktan-1-olhidrohlorid je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen prvo prep. HPLC (Metoda 1a), a zatim reverzno faznom fleš hromatografijom (Metoda 3a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,34 (d, 1H), 7,98 (d, 1H),
2
7,79 (s, 1H), 7,56 (d, 2H), 7,21 (d, 2H), 6,92 (s, 2H), 4,31 (s, 1H), 3,58-3,56 (m, 4H), 3,09 (d, 1H), 2,64-2,62 (m, 2H), 2,59-2,41 (m, 9H), 2,07-2,04 (m, 6H), 1,82-1,79 (m, IH), 1,65-1,61 (m, 6H), 1,31 (t, 1H), 0,75 (dd, IH). (UPLC-MS) tR0,53 min; ESI-MS 532 [M+H]<+>.
Intermedijer 15a: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina
[0212] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il )fenil)nikotinskom kiselinom (Intermedijer 2c) osim što je metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinat (Intermedijer 15b) korišćen umesto (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-3-karboksilata (Intermedijer 1d). (UPLC-MS) tR0,39 min; ESI-MS 409 [M+H]<+>.
Intermedijer 15b: metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinat
[0213] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa metil 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinatom (Intermedijer 7b) osim što je metil 5-(4-((1R,5S)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil )-2-aminonikotinat hidrohlorid (Intermedijer 14c) korišćen umesto metil5-(4-((1S,5R)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-aminonikotinata hidrohlorida (Intermedijer 7c), a 4-(2-bromoetil)morfolin je korišćen umesto 1-bromo-2-metoksietana. (UPLC-MS) tR0,62 min; ESI-MS 423 [M+H]<+>.
Referentni primer 16: 2-amino-N-(3 (hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.
0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0214]
[0215] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamidom (Primer 2) osim što je 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1,0]heksan-1 -il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 9a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline TFA soli (Intermedijer 2a) i (3-aminobiciklo[1.1 .1]pentan-1-il)metanol (Intermedijer 16a) korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanol hidrohlorida. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,05 (s, 1H), 8,41 (d, IH), 8,18 (d, 1H), 7,61 (d, 2H), 7,48 (dd, 1H), 7,33 - 7,17 ( m, 4H), 4,55 (t, 1H), 3,51 (d, 3H), 3,31 (s, 2H), 3,08 (s, 2H), 2,07 - 1,99 (m, 1H), 1,41 - 1,22 (m, 3H) , 1,17-0,98 (m, 9H), 0,79 (d, 1H). (UPLC-MS) tR0,54 min; ESI-MS 433 [M+H]<+>.
Intermedijer 16a: (3-aminobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metanol
[0216] U rastvor metil 3-aminobiciklo[1.1.1]pentan-1-karboksilat HCI soli (218 mg, 1,23 mmol) u THF (7 mL) je dodat LiAlH4(140 mg, 3,68 mmol) u malim porcijama na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h i kvenčovana na 0°C sa mešavinom THF i vode, zatim filtrirana kroz sloj celita, i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova u obliku žutog ulja koje je korišćeno bez dalje prečišćavanje. FIA-MS 114 [M+H]<+>.
Referentni primer 17: 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(3,3,3-trifluoropropil)-3-azabiciklo[ 3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0217]
[0218] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4 hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 5) osim što je 3,3,3-trifluoropropil trifluorometansulfonat korišćen umesto 4-(3-bromopropil)morfolina, a reakciona smeša je mešana na ST tokom 60 min. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (d, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,60 (d, 2H), 7,23 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,59 (d, 1H), 3,79 - 3,66 (m, 1H), 3,39 (m, 3H), 3,09 (s, 1H), 2,72 - 2,59 (m, 4H), 1,86 (m, 5H), 1,52 - 1,18 (m, 6H), 0,79 (s, 1H). (UPLC-MS) tR0,59 min; ESI-MS 489 [M+H]<+>.
Primer 18: 2-amino-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(pirolidin-3-il)fenil)nikotinamid
[0219]
[0220] U rastvor terc-butil 3-(4-(6-amino-5-(((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksilat (Intermedijer 18a, 120 mg, 0,140 mmol) u dioksanu (3 mL) je dodat 4N HCl u dioksanu (0,210 mL, 0,839 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi i dobijena smeša je mešana 4h. Posle koncentrovanja pod sniženim pritiskom, sirovi proizvod je prečišćen reverzno-faznom hromatografijom (Metoda 3a). Čiste frakcije su podeljene između<zas. ak. rastvor NaHCO>3i EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao smeša dijastereomera. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,26 (d, IH), 8,09 (d, 1H), 7,57 (d, 2H), 7,35 - 7,29 (m, 2H), 7,09 (s, 2H), 4,55 ( d, 1H), 3,77 -3,69 (m, 2H), 3,22 - 3,15 (m, 2H), 3,12 - 2,91 (m, 2H), 2,74 - 2,62 (m, 2H), 2,24 - 2,07 (m, 1H), 1,83 (dd, 4H), 1,42-1,16 (m, 5H). (UPLC-MS) tR0,42 min; ESI-MS 381 [M+H]<+>.
Intermedijer 18a: terc-butil 3-(4-(6-amino-5-(((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksilat
[0221] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(2-fluoro-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 8) osim što je terc-butil 3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)pirolidin-1-karboksilat (Intermedijer 18b) korišćen umesto 1-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-4-izopropilpiperazina (Intermedijer 8a). (UPLC-MS) tR0,95 min; ESI-MS 481 [M+H]<+>.
Intermedijer 18b: terc-butil 3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)pirolidin-1-karboksilat
[0222] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 1-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-4- izopropilpiperazinom (Intermedijer 8a) osim što je terc-butil 3-(4-bromofenil)pirolidin-1-karboksilat (Intermedijer 18c) korišćen umesto 1-(4-bromo-3-fluorofenil)-4-izopropilpiperazina (Intermedijer 8b). (UPLC-MS) tR1,43 min; ESI-MS 374 [M+H]<+>.
4
Intermedijer 18c: terc-butil 3-(4-bromofenil)pirolidin-1-karboksilat
[0223] U rastvor 3-(4-bromofenil)pirolidina (200 mg, 0,885 mmol) u DCM (7 mL) dodat je di-terc-butil dikarbonat (0,308 mL, 1,327 mmol) i TEA (0,247 mL, 69) . mmol) u atmosferi azota na ST. Reakciona smeša je mešana 2h. Reakciona smeša je zatim razblažena sa zas. ak. rastvorom NaHCO3i pomešana sa DCM. Nakon odvajanja faza, ak. sloj je ponovo ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. (UPLC-MS) tR1,33 min; ESI-MS 270 [M+H]<+>.
Primer 19: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0224]
[0225] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(1-(metilsulfonil)) )piperidin-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamidom (Primer 1) osim što je dihidro-2H-piran-4(3H)-on korišćen umesto 1-(metilsulfonil) )piperidin-4-ona. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (s, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,62 (dd, 2H), 7,25 (s, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,59 (d, 1H), 3,97 - 3,63 (m, 4H), 3,40 (m, 2H), 3,31 (m, 2H), 3,19 - 3,03 (m, 2H), 1,99 - 1,65 (m, 8H) 1,51-1,16 (m, 8H). (UPLC-MS) tR 0,48 min; ESI-MS 477[M+H]<+>.
Primer 20: 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0226]
[0227] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4 hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 5) osim što je 1-bromo-2-metoksietan korišćen umesto 4-(3-bromopropil)morfolina, a reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 4 h. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,22 (d, 2H), 7,13 (s, 2H), 4,60 (d, 1H), 3,73 (d, 1H), 3,54-3,36 (m, 4H), 3,27 (s, 3H), 2,64 (m, 4H), 1,87 (m, 6H), 1,40-1,27 (m, 6H), 0,76 (s, IH). (UPLC-MS) tR 0,49 min;ESI-MS 451 [M+H]<+>.
Primer 21: 2-amino-N-((1R,3S,4R)-3-fluoro-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4) -il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0229] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1,0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 14a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c) i (1R,2S,4R)-4-amino-2-fluorocikloheksanol hidrohlorid (Intermedijer 21a) je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen prep. HPLC (Metod 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,60 (bs, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,35 (d, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,64 (bs, 2H), 7,36 (bs, 2H), 7,14 (s, 2H), 4,94 (t, 1H), 4,80 (d, 1H), 4,16 - 3,82 (m, 4H), 3,81 - 3,45 (m, 4H), 3,30 - 3,25 (m, 4H) , 2.15 (bs, 1H), 1,88-1,85 (m, 2H), 1,65-1,59 (m, 5H), 1,76-1,27 (m, 3H), 1,18 (bs, 1H). (UPLC-MS) tR0,48 min; ESI-MS 495 [M+H]<+>.
Intermedijer 21a: (1R,2S,4R)-4-amino-2-fluorocikloheksanol hidrohlorid
[0230] U rastvor benzil ((1R,3S,4R)-3-fluoro-4-hidroksicikloheksil)karbamata (Intermedijer 21b, 376 mg, 1,41 mmol) u EtOH (20 mL) dodat je paladijum na aktivnom uglju (10%) (80 mg, 0,075 mmol) u atmosferi azota. Reakcioni sud je prečišćen tri puta azotom, a zatim dva puta prečišćen vodonikom. Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 17 h, reakciona smeša je propuštena kroz sloj celita i filter papir je ispran sa EtOH da bi se dobio bezbojni rastvor. Polako je dodata hlorovodonična kiselina (1,25 M u EtOH, 14 mL, 17,5 mmol) i smeša je mešana na ST tokom 5 h. Koncentrovanjem pod sniženim pritiskom je dobijeno jedinjenje iz naslova u obliku prljavo-bele higroskopne čvrste supstance. FIA ESI-MS 134 [M+H]<+>.
Intermedijer 21b: benzil ((1R,3S,4R)-3-fluoro-4-hidroksicikloheksil)karbamat
[0231] U rastvor benzil ((1R,3S)-3-fluoro-4-oksocikloheksil)karbamata (Intermedijer 21c, 768 mg, 2,90 mmol) u MeOH (15 mL) je u porcijama dodat NaBH4(274 mg, 7.24 mmol) na 0 °C. Posle mešanja tokom 30 min na 0°C reakcija smeša je razblažena sa zas. ak. rastvor NH4Cl i ostavljen da dostigne sobnu temperaturu. Rastvarač je uklonjen pod redukovanim pritiskom i dodaju se DCM i voda. Nakon odvajanja faza, ak. sloj je ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Sirovi proizvod je prečišćen normalno faznom hromatografijom (metod 2b) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna čvrsta supstanca. (UPLC-MS) tR0,76 min; ESI-MS 268 [M+H]<+>. Apsolutna konfiguracija kao što je prikazano potvrđeno je rendgenskom kristalografijom.
Intermedijer 21c: benzil ((1R,3S)-3-fluoro-4-oksocikloheksil)karbamat
[0232] U rastvor benzil ((1R,3S,4S)-3-fluoro-4-hidroksicikloheksil)karbamata (Intermedijer 21d, 710 mg, 2,66 mmol) u DCM (26 mL) dodat je piridinijum hlorohromat (859 mg, 3.98 mmol). Reakciona smeša je mešana 6 h na ST. Dodat je još jedan deo piridinijum hlorohromata (573 mg, 2,66 mmol) i reakciona smeša je mešana još 18 h. Nakon dodavanja DCM i zas. ak. rastvora NaHCO3, obe faze su odvojene, ak. sloj je ekstrahovan dva puta sa DCM, a kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen normalno faznom hromatografijom (Metoda 2b) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje. (UPLC-MS) tR0,82 min; ESI-MS 266 [M+H]<+>.
Intermedijer 21d: benzil ((1R,3S,4S)-3-fluoro-4-hidroksicikloheksil)karbamat
[0233] Vijala je napunjena benzil(1R,3R,6S)-7-oksabiciklo[4.1.0]heptan-3-ilkarbamatom (Intermedijer 21e, 1,50 g, 6,07 mmol) i dodat je TEA trihidrofluorid (4,94 mL, 30,3 mmol). Vijala je zatvorena i mešana na 100°C tokom 2 h. Posle hlađenja, reakciona smeša je polako sipana u mešani rastvor K2CO3(5,87 g, 42,5 mmol) u vodi (400 mL) i ekstrahovana tri puta sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani vodom i slanim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen normalno-faznom hromatografijom (Metoda 2b) da bi se dobila smeša regioizomera, koja je razdvojena preparativnom hiralnom HPLC (kolona: ChiralPak AD, 20 mm, 50 k 5 cm, brzina protoka: 90 mL/min, talasna dužina detekcije: 220 nm, mobilna faza: n-heptan:EtOH 90:10 do t = 52 min, 85:15 do t = 69 min, zatim 80:20). Jedinjenje iz naslova je izolovano kao bezbojno ulje i okarakterisano pomoću UPLC-MS (SK13, kolona: Acquity HSS T31,8 mm 2,1 k 50 mm na 60°C, eluent A: voda 0,05 % mravlja kiselina 3,75 mM NH4OAc, eluent B : acetonitril 0,04 % mravlja kiselina, gradijent: od 5 do 98 % B za 1,4 min, protok 1,0 mL/min, tR0,81 min; ESI-MS 268 [M+H]<+>.
Intermedijer 21e: (1R,3R,6S)-7-oksabiciklo[4.1.0]heptan-3-ilkarbamat
[0234] Sin-benzil (7-oksabiciklo[4.1.0]heptan-3-il)karbamat (pripremljen kako su opisali Gomez-Sanchez et al, Tetrahedron 2005, 61(5), 1207-1219) je razdvojen preparativnom hiralnom HPLC (kolona: ChiralPak AY, 10 um, 25 k 5 cm, brzina protoka: 30 mL/min, talasna dužina detekcije: 214 nm, mobilna faza: n-heptan:izopropanol 80:20). Jedinjenje iz naslova je izolovano kao bezbojno ulje i okarakterisano hiralnom HPLC (ChiralPak AY-H, 5 um, 15 k 0,46 cm, brzina protoka: 1mL/min, talasna dužina detekcije: 214 nm, mobilna faza: heksan:izopropanol 70:30, tR2,24 min, 99,2% ee). (UPLC-MS) tR 0,90 min; ESI-MS 248 [M+H]<+>.
Primer 22: 2-amino-N-((1s,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0235]
[0236] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin- 3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1,0]heksan-3-karboksilatom (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3 azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (intermedijer 14a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c), a cis-4-aminocikloheksanol je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću prep. HPLC (Metoda 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,50 (bs, 1H), 8,41 - 8,33 (m, 2H), 8,17 (d, 1H), 7,62 (bs, 2H), 7,26 (bs, 2H), 7,14 ( s, 1H), 4,42 (d, 1H), 4,05 -3,79 (m, 5H), 3,34 - 3,24 (m, 4H), 3,11 (bs, 1H), 2,70 - 2,50 (m, 1H), 1,83 - 1,71 ( m, 7H), 1,62-1,47 (m, 7H), 1,35-1,29 (m, 1H). (UPLC-MS) tR 0,52 min; ESI-MS 477 [M+H]<+>.
Primer 23: 5-(4-(2-azaspiro[3.3]heptan-2 ilmetil)fenil)-2-amino-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0237]
[0238] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(2-fluoro-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil )nikotinamidom (Primer 8) osim što je 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzil)-2-azaspiro[3.3]heptan (Intermedijer 23a) korišćen je umesto 1-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-4-izopropilpiperazina (Intermedijer 8a). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,40 (d, 1H), 8,30 (d, 1H), 8,14 (d, 1H), 7,61 (d, 2H), 7,33 (d, 2H), 7,14 (s, 2H), 4,58 (d, 1H), 3,79 - 3,66 (m, 1H), 3,55 (s, 2H), 3,41 (dt, 1H), 3,14 (s, 3H), 2,07 (t, 4H), 1,94 - 1,72 (m, 6H), 1,47 - 1,20 (m, 5H) (UPLC-MS) tR 0,51 min; ESI-MS 421 [M+H]<+>.
Intermedijer 23a: 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzil)-2-azaspiro[3.3]heptan
[0239] U rastvor 2-(4-(bromometil)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (300 mg, 1,01 mmol) u acetonitrilu (8 mL) je dodat 2-azaspiro[3.3]heptan (148 mg, 1.11 mmol) i cezijum karbonat (428 mg, 1.31 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 60 min, zatim razblažena sa zasićenim ak. rastvorom NaHCO3i EtOAc. Nakon odvajanja faza, ak. sloj je ekstrahovan sa EtOAc i kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja (UPLC-MS) tR0,82 min; ESI-MS 314 [M+H]<+>.
Referentni primer 24: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0240]
[0241] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamidom (Primer 2) osim što je trans-4-amino-1-metilcikloheksanol korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola hidrohlorida. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.43 (d, 1H), 8.34 (d, 1H), 8.16 (d, 1H), 7.68 (d, 2H), 7.39 (d, 2H), 4.06 (dd, 1H), 3.86 - 3.41 (m, 9H), 2.26 (dt, 1H), 1.78 (d, 2H), 1.68 - 1.55 (m, 2H), 1.47 (t, 4H), 1.33 (dd, 6H), 1.18 (s, 4H). (UPLC-MS) tR 0.53 min; ESI-MS 449 [M+H]<+>.
Primer 25: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( (1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0242]
[0243] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(1-(metilsulfonil)))piperidin-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid (Primer 1) osim što je 4,4-difluorocikloheksanon korišćen umesto 1-(metilsulfonil)piperidin-4-ona. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (d, 1H), 8.32 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 7.59 (d, 2H), 7.23 (d, 2H), 7.13 (s, 2H), 4.59 (d, 1H), 3.73 (d, 1H), 3.39 (d, 2H), 3.09 (d, 1H), 2.68 2.55 (m, 2H), 2.37 (d, 2H), 2.00 (s, 2H), 1.84 (d, 8H), 1.64 (d, 2H), 1.46 - 1.16 (m, 5H), 0.78 (s, 1H). (UPLC-MS) tR0.56 min; ESI-MS 511 [M+H]<+>.
Primer 26: 2-amino-N-((lr,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(oksetan-3-il)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0244]
[0245] U rastvor 5-(4-((1S,5R)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-((1r,4S)-4 -hidroksicikloheksil)nikotinamid TFA so (Intermedijer 5a, 70 mg, 0,138 mmol) u DCM (4 mL) je dodat oksetan-3-on (12,0 mg, 0,166 mmol) i AcOH (0,012 mL, 0,207 mmol u atmosferi azota) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 45°C tokom 30 min. Dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (58,6 mg, 0,276 mmol) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je mešana na 45°C tokom 3 h. Reakciona smeša je zatim razblažena zas. aq. rastvorom NaHCO3 i pomešan saEtOAc. Nakon odvajanja faza, aq. sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen prvo prep. HPLC (Metoda 1a), a zatim reverzno faznom fleš hromatografijom (Metoda 3a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna čvrsta supstanca. (UPLC-MS) tR0.48 min; ESI-MS 449 [M+H]<+>.
Primer 27: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( (1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0246]
[0247] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(oksetan-3-) il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid (Primer 26) osim što je 4,4-difluorcikloheksanona korišćen umesto oksetan-3-ona. Posle prečišćavanja jedinjenje iz naslova je dobijeno kao TFA so.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.50 (bs, 1H), 8.38 (d, 1H), 8.32 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 7.59 (d, 2H), 7.23 (d, 2H), 7.13 (s, 2H), 4.59 (d, 1H), 4.12 (bs, 1H), 3.73 (d, 1H), 3.39 (d, 2H), 3.09 (d, 1H), 2.68 - 2.55 (m, 2H), 2.37 (d, 2H), 2.00 (s, 2H), 1.84 (d, 8H), 1.64 (d, 2H), 1.46 - 1.16 (m, 5H). (UPLC-MS) tR 0.56 min; ESI-MS 511 [M+H]<+>.
Primer 28: 2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran4-) il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0249] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin- 3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran- 4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 28a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3- (terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c) i (3-aminobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metanol (Intermedijar 16a) je korišćen umesto trans4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen prvo prep. HPLC (Metod 1a), a zatim reverzno faznom fleš hromatografijom (Metod 3a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,35 (bs, 1H), 9,06 (s, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,19 (s, IH), 7,68 (d, 2H), 7,37 (d, 2H), 7,26 (bs, 2H), 4,57 (t, 1H), 4,12 (d, 1H), 3,97 (bs, 1H), 3,80 - 3,56 (m, 2H), 3,51 (d, 2H), 3,35 - 3,20 (m, 6H), 2,29 - 2,23 (m, 1H), 2,11 - 2,05 (m, 1H), 1,99 (bs, 1H), 1,97 (s, 6H), 1,67 - 1,61 (m, 1H), 1,19 - 1,14 (bs, 1H). (UPLC-MS) tR 0.50 min; ESI-MS 475[M+H]<+>.
Intermedijer 28a: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina
[0250] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il )fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 2c) osim što je metil 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksana -1-il)fenil)nikotinat (Intermedijer 28b) korišćen umesto (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)- 3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1d). (UPLC-MS) tR0.37 min; ESI-MS 380 [M+H]<+>.
Intermedijer 28b: metil 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) nikotinat
[0251] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2Hpiran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]) heksan-1-il)fenil)nikotinat (Intermedijer 14b) osim metil 5-(4-((1S,5R)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-aminonikotinata hidrohlorida (Intermedijer 7c) je korišćen umesto metil 5-(4-((1R,5S)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-aminonikotinata hidrohlorida (Intermedijer 14c). (UPLC-MS) tR0.62 min; ESI-MS 394 [M+H]<+>.
Primer 29: 2-amino-5-(2-fluoro-4-(piperazin-1-il)fenil)-N-((lr,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0252]
[0253] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-
4
(pirolidin-3-il)fenil)nikotinamidom (Primer 18) osim što je terc-butil 4-(4-(6-amino-5-(((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)-3-fluorofenil)piperazin-1-karboksilat (intermedijer 29a) korišćen umesto 3-(4-(6-amino-5-(((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksilata (Intermedijer 18a). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.29 - 8.16 (m, 2H), 7.95 (d, 1H), 7.38 (t, 1H), 7.06 (s, 2H), 6.88 - 6.75 (m, 2H), 4.54 (d, 1H), 3.69 (m,1H), 3.42 - 3.32 (m, 2H), 3.17 (dd, 4H), 2.92 (dt, 4H), 1.88 - 1.73 (m, 4H), 1.43 1.15 (m, 4H). (UPLC-MS) tR0.42 min; ESI-MS 414 [M+H]<+>.
Intermedijer 29a: terc-butil 4-(4-(6-amino-5-(((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)-3-fluorofenil)piperazin-1-karboksilat
[0254] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 1-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-4- izopropilpiperazin (Primer 8) osim što je terc-butil 4-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)piperazin-1-karboksilata (intermedijer 29b) korišćen umesto 1-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-4-izopropilpiperazina (Intermedijer 8a). Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 60 min, a prečišćavanje je obavljeno normalno faznom hromatografijom (Metoda 2b) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braonkasta čvrsta supstanca. (UPLC-MS) tR0.96 min; ESI-MS 514 [M+H]<+>.
Intermedijer 29b: terc-butil 4-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)piperazin-1-karboksilat
[0255] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa terc-butil 4-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil) piperazin-1-karboksilat (Intermedijer 8a) osim što je terc-butil 4-(4-bromo-3-fluorofenil)piperazin-1-karboksilat korišćen umesto 1-(4-bromo-3-fluorofenil)piperazina (Intermedijer 8b). (UPLC-MS) tR1.38 min; ESI-MS 407 [M+H]<+>.
Primer 30: 2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran4-) il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0256]
[0257] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin- 3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran- 4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 14a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3- (terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c) i (3-aminobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)metanol (Intermedijar 16a) je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen prvo prep. HPLC (Metoda 1a), a zatim reverzno faznom fleš hromatografijom (Metoda 3a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.05 (s, 1H), 8.41 (d,1H), 8.18 (d,1H), 7.61 (d, 2H), 7.24 - 7.22 (m, 4H), 4.55 (t, 1H), 3.87 - 3.84 (m, 2H), 3.51 (d, 2H), 3.48 - 3.25 (m, 2H), 3.10 (bs, 1H), 2.56 - 2.47 (m, 4H), 1.97 (s, 6H), 1.96 - 1.74 (m, 3H), 1.39 - 0.30 (m, 3H), 0.77 (bs, 1H). (UPLC-MS) tR0.51 min; ESI-MS 475 [M+H]<+>.
Primer 31: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid
[0258]
[0259] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(2-fluoro-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil )nikotinamid (Primer 8) osim što je (R)-(4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)borne kiseline (Intermedijer 31a) korišćena umesto 1-(3-fluoro-4-(4) ,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-4-izopropilpiperazin (Intermedijer 8a). Prečišćavanje je obavljeno normalno faznom hromatografijom (Metoda 2b) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.75 (d, 1H), 8.65 (d, 1H), 8.48 (d, 1H), 7.81 (dd, 2H), 7.63 (d, 2H), 4.52 (dd, 1H), 4.18 (dd, 1H), 3.69 (ddt, 1H), 3.51 - 3.31 (m, 2H), 3.25 - 3.04 (m, 3H), 2.19 (ddt, 1H), 1.82 (td, 6H), 1.64 - 1.52 (m, 1H), 1.39 - 1.15 (m, 7H). (UPLC-MS) tR0.44 min; ESI-MS 409 [M+H]<+>.
Intermedijer 31a: (R)-(4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)borna kiselina
[0260] U rastvor (4-(bromometil)fenil)borne kiseline (125 mg, 0,582 mmol) u acetonitrilu (4 mL) dodat je K2CO3(161 mg, 1,164 mmol) i (R)-2-metilpirolidin (54,5). mg, 0,640 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 60 min, a zatim filtrirana kroz sloj celita. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja. (UPLCMS) tR0.33 min; ESI-MS 220 [M+H]<+>.
Primer 32: 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0261]
[0262] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid (Primer 2) osim što je 2-amino5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1,0]heksan-1-il )fenil)nikotinska kiselina TFA soli (Intermedijer 9a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil )nikotinske kiseline TFA so (Intermedijer 2a) i trans-4-amino-1-metilcikloheksanol je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanol hidrohlorida. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.43 (d, 1H), 8.34 (d, 1H), 8.16 (d, 1H), 7.68 (d, 2H), 7.39 (d, 2H), 4.06 (dd, 1H), 3.86 - 3.41 (m, 9H), 2.26 (dt, 1H), 1.78 (d, 2H), 1.68 - 1.55 (m, 2H), 1.47 (t, 4H), 1.33 (dd, 6H), 1.18 (s, 4H). (UPLC-MS) tR 0.50 min; ESI-MS 449 [M+H]<+>.
Primer 33: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( (1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0264] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(oksetan-3-) il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid (Primer 26) osim što je umesto oksetan-3-ona korišćen dihidro-2H-piran-4(3H)-on. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.39 (s, 1H), 8.31 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 7.62 (dd, 2H), 7.25 (s, 2H), 7.12 (s, 2H), 4.59 (d, 1H), 3.97 - 3.63 (m, 4H), 3.40 (m, 2H), 3.31 (m, 2H), 3.19 - 3.03 (m, 2H), 1.99 - 1.65 (m, 8H), 1.51 - 1.16 (m, 8H). (UPLC-MS) tR 0.47 min; ESI-MS 477 [M+H]<+>.
Primer 34: 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il) -3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid (ovde se takođe naziva jedinjenje A).
[0265]
[0266] U rastvor 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il )fenil)nikotinska kiselina TFA soli (Intermedijer 14a, 4.10 g, 8.14 mmol) i 4-aminobiciklo[2.2.2]oktan-1-ol hidrohlorid (2.17 g, 12.2 mmol) u anhidrovanom DMF (60 mL) je dodat N- metilmorfolin (2,24 mL, 20,4 mmol) i HATU (4,64 g, 12,2 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 2 h, a zatim razblažena zas. aq. rastvorom NaHCO3 iekstrahovan tri puta sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen reverzno faznom hromatografijom (Metoda 3b). Čiste frakcije su tretirane zas. aq. rastvorom NaHCO3i ekstrahovan tri puta sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova u obliku beličaste čvrste supstance. Apsolutna konfiguracija kao što je prikazana je potvrđena rendgenskom kristalografijom jedinjenja iz naslova u kompleksu sa domenom ALK-2 kinaze. 1H NMR (400 MHz, DMSOd6) δ 8.34 (d, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.57 (d, 2H), 7.23 (d, 2H), 6.92 (s, 2H), 4.31 (s, 1H), 3.91 - 3.78 (m, 2H), 3.40 (bs, 1H), 3.33 - 3.24 (m, 2H), 3.11 (d, 1H), 2.57 (bs, 1H), 2.50 2.34 (m, 1H), 2.34 (bs, 1H), 2.12 - 1.94 (m, 6H), 1.90 - 1.72 (m, 3H), 1.71 - 1.51 (m, 6H), 1.51 - 1.34 (m, 2H), 1.31 (t, 1H), 0.82 - 0.68 (m, 1H). (UPLC-MS) tR 0.54 min; ESI-MS 503 [M+H]<+>. Hiralna HPLC (ChiralPak Id, 5 mm, protok: 1 mL/min, detekciona talasna dužina : 270 nm, mobilna faza: heptan:izopropanol 60:40 (+ 0.1% dietilamin)): tR 18.7 min, 92.3% ee.
[0267] Alternativni primer 34A: U rastvor 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksana -1-il)fenil)nikotinske kiseline hidrohlorid (1 kg, 1.683 mol) i 4-aminobiciklo[2.2.2]oktan-1-ol hidrohlorid (343.9 g, 1.935 mol) u DMF (3500 mL) dodat je Et3N (681.2). g, 6,732 mol) i HATU (767,9 g, 2,019 mol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na ST tokom 1 h. Smeša je zagrejana do IT=45°C, dodat je 5% rastvor NH3.H2O (5200 g). Mešano oko 30 min, dodat je još 5% rastvor NH3.H2O (1800 g). Smeša je zagrevana do IT=45°C tokom 2 h. Smeša je ohlađena na IT=22°C. Filtriran, vlažni talog na filter papiru je ispran sa H2O (1500 mL x 3). Vlažni talog na filter papiru je sušen pod vakuumom na 45°C tokom 24 h. Sirovi proizvod je rastvoren u acetonu (3000 mL), zatim filtriran da bi se uklonio deo nerastvorene čvrste supstance. Filtrat je zagrejan do IT=50°C. Dodata je H2O (2000 mL). Smeša je mešana
4
na IT=50°C 30 min dok se nije formirao beli talog. Polako je dodavana H2O (4000 mL). Smeša je mešana na IT=50°C 2 h. Smeša je ohlađena do IT=22°C za 2 h, filtrirana, vlažni talog na filter papiru je ispran smešom aceton: H2O =1:2 (v/v, 1000 mL x 2). Vlažni talog na filter papiru je sušen pod vakuumom na 45°C tokom 24 h. dobijeno je ukupno 760 g bele čvrste supstance (89% prinos, 99,4% ee)
[0268]<1>H NMR (DMSO-d6) δ: 8.32 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.97 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.54 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.20 (d, J=8.4 Hz, 2H), 6.90 (s, 2H), 4.31 (s, 1H), 3.82 (m, 2H), 3.29 (m, 2H), 3.07 (d, J=8.5 Hz, 1H), 2.54 (d, J=8.3 Hz, 1H), 2.44 (dd, J=8.5, 3.5 Hz, 1H), 2.37 (m, 1H), 2.31 (td, J=10.2, 5.0 Hz, 1H), 2.04 (m, 6H), 1.80 (dt, J=7.9, 3.8 Hz, 1H), 1.71 (d, J=12.3 Hz, 1H), 1.65 (d, J=11.5 Hz, 1H), 1.62 (m, 6H), 1.38 (m, 1H), 1.34 (m, 1H), 1.29 (t, J=3.9 Hz, 1H), 0.73 (dd, J=7.9, 3.6 Hz, 1H).
[0269]<13>C NMR (DMSO-d6) δ: 167.80, 157.69, 148.28, 141.27, 134.91, 134.79, 126.40, 125.66, 123.53, 111.01, 66.22, 65.59, 59.10, 55.46, 52.04, 33.72, 31.92, 31.77, 30.59, 29.61, 24.14, 17.20.
[0270] MS(ESI-TOF): 503.3018 [M+H]<+>.
[0271] Početni materijal (hidrohloridna so) je dobijen na sledeći način:
Metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2Hpiran-4-il)-3-azabiciklo[3.1,0]heksan-1-il)fenil)nikotinat dihidrohlorid (10 g 19,5 mmol, 1,0 ekv.) je suspendovan u MeOH (31,7 g). Zatim je dodat rastvor NaOH (2,9 g, 72,2 mmol, 3,7 ekv.) u H2O(10 g). Reakciona smeša je zagrejana do 45±5°C i mešana više od 3 h, dajući suspenziju.
[0272] U drugi balon koji sadrži aceton (200 g), dodat je 5~6 N HCl u i-PrOH (14,8 g, 97,6 mmol, 5 ekv.). Rastvor je zagrejan do 47±3 °C. Zatim je gorenavedena suspenzija MeOH dodata u smešu kap po kap i mešana na 47±3°C tokom 3 h. Smeša je ohlađena na 23±3°C i mešana 3 h. Posle filtracije, vlažni talog na filter papiru je ispran acetonom (40 g). Vlažni talog na filter papiru je sušen pod vakuumom na 55°C tokom 8h. 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina hidrohlorid (12,3 g, 99,3% HPLC čistoće, 62,1% prinos) je dobijena kao sivobela čvrsta supstanca.
[0273]<1>H NMR (DMSO-d6) δ: 11.53 (br s, 1H), 8.64 (br s, 1H), 8.54 (br s, 1H), 7.72-8.42 (m, 2H), 7.64 (br d, J=7.9 Hz, 2H), 7.38 (br d, J=7.8 Hz, 2H), 3.85-4.04 (m, 3H), 3.40-3.73 (m, 4H), 3.15-3.33 (m, 2H), 2.18 (br d, J=3.9 Hz, 1H), 1.95-2.12 (m, 4H), 1.88 (br d, J=10.0 Hz, 1H), 1.05 (br t, J=6.4 Hz, 1H).
[0274]<13>C NMR (DMSO-d6) δ: 167.2, 155.8, 144.3, 142.0, 139.6, 133.8, 127.7, 126.3, 124.1, 110.0, 65.8, 62.5, 55.7, 53.2, 29.9, 28.8, 28.7, 23.5, 16.6.
[0275] MS(ESI-TOF): 380.1974 [M+H]<+>.
[0276]Početni materijal,2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) )fenil)nikotinat dihidrohlorid, dobija se na sledeći način:
U balon sa okruglim dnom od 500 mL dodat je 1R,5S)-1-(4-bromofenil)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-ijum hlorid (20 g, 1 ekv.), EA (200 mL) i 25% K2CO3(62 g). Smeša je mešana 30 min dok se sve čvrste materije ne rastvore. Posle odvajanja faza, organski sloj je koncentrovan. Dodat je 2-metil-2-butanol (48 g, 60 mL). Organski sloj je koncentrovan. Dodat je 2-metil-2-butanol (144 g, 180 mL).
[0277] Smeša je prebačena u Redlay od 500 mL. Dodati su K2CO3(18,8 g, 2,5 ekv.) i metil 2-amino-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)nikotinat (16,8 g, 1,04 ekv.; videti Intermedijer 1e ). Smeša je degazirana sa N2tri puta. Smeša je zagrevana do IT = 50±5°C u toku 1 h. Doda se Pd(dppf)Cl2(1,2 g, 0,03 ekv.). Smeša je zagrejana do IT = 70±3°C i mešana 2 h. Posle hlađenja na 22 °C, dodati su H2O (120 g) i EA (180 g) i rastvor se meša 30 min. Dodat je MCC (6 g) i smeša je filtrirana kroz MCC. Kolač je ispran sa EA (54 g). Posle odvajanja faza, organski sloj je ispran sa 5% NaCl (124 g). Zatim je u organski sloj dodat Kuadrasil MP (hvatač teških metala kompanije Johnson Matthey, 6 g). Smeša je zagrevana do IT = 55°C tokom 8 h, filtrirana kroz MCC i isprana sa EA (54 g). U organski sloj je dodat Quadrasil MP (2 g). Smeša je zagrevana do IT = 55°C tokom 6 h, filtrirana kroz CMC i isprana sa EA (54 g). Organski sloj je koncentrovan. Dodat je aceton (158 g, 200 mL). Posle mešanja na IT = 22±3°C tokom 30 min, smeša je zagrejana do IT = 40±3 °C. 15,5% HCl (38,4 g) je dodata kap po kap sa IT < 50 °C. Smeša je mešana na IT = 45±3°C 1 h. Smeša je ohlađena na 22±3 °C. Smeša je mešana na 22±3°C 1 h i filtrirana. Vlažni talog na filter papiru je ispran acetonom (32 g x 2). Vlažni talog na filter papiru je sušen pod vakuumom na 50 ° C najmanje 8 h. Dobijen je početni materijal, dobijeno je 22,5 g bele čvrste supstance (97,1 % HPLC čistoća, 5,2 % sadržaj vode, 87 % prinos).
[0278]<1>H NMR (DMSO-d6) δ: 11.43 (br d, J=5.7 Hz, 1H), 8.62-8.80 (m, 2H), 7.85-8.58 (m, 2H), 7.67 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.39 (d, J=8.4 Hz, 2H), 3.85-4.06 (m, 6H), 3.60-3.69 (m, 2H), 3.50-3.59 (m, 1H), 3.44 (br d, J=7.7 Hz, 1H), 3.14-3.31 (m, 2H), 2.21 (dt, J=8.4, 4.2 Hz, 1H), 1.94-2.12 (m, 4H), 1.76-1.93 (m, 1H), 1.07 (br t, J=7.1 Hz, 1H).
[0279]<13>C NMR (DMSO-d6) δ: 165.0, 154.0, 143.5, 142.0, 140.1, 132.8, 127.7, 126.5, 124.2, 110.7, 65.8, 62.5, 55.6, 53.3, 53.3, 29.9, 28.9, 28.8, 23.6, 16.8.
[0280] MS(ESI-TOF): 394.2071 [M+H]<+>.
[0281]Početni materijal, 1R,5S)-1-(4-bromofenil)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-ijum hlorid, bio je dobijeno na sledeći način:
Redlay od 1 L napunjen je (1R,5S)-1-(4-bromofenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-ijum hlorid (30 g, 1 ekv.), dihidro2H-piran-4(3H )-on (13,13 g, 1,2 ekv.) i THF (300 mL). Smeša je mešana na IT = 22±5°C 1 h. NaBH(OAc)3(30,1 g, 1,3 ekv.) je dodat u porcijama uz održavanje IT < 30 °C. Smeša je mešana na IT = 22±5°C tokom 2 h. Dodata je 6,2% HCl (93 g, 90 ml, 1,5 ekv.) uz održavanje IT < 30°C i pH < 2. Smeša je mešana 10 min. Dodato je 25% K2CO3(259 g, 210 mL) da bi se podesio pH = 8 - 9. Dodat je IPAc (300 mL). Smeša je mešana 10 min. Posle odvajanja faza, organskom sloju je dodata H2O (150 g). Smeša je mešana 10 min. Posle odvajanja faza, organski sloj je koncentrovan pod vakuumom (50 - 100 mbar, 50°C vodeno kupatilo). Dodat je IPA (120 g, 150 mL). Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom (50 - 100 mbar, 50°C vodeno kupatilo). Dodata je IPA (144 g, 180 mL). Smeša je filtrirana kroz CMC. Vlažni talog na filter papiru ispran sa IPA (24 g x 2). U organski sloj je dodata H2O (5 g). 31% HCl (19,3 g) je dodata u kapima sa IT < 35 °C. Smeša je mešana na IT = 22±5°C tokom 2 h i filtrirana. Vlažni talog na filter papiru je ispran sa IPA (48 g x 2). Vlažni talog na filter papiru je sušen pod vakuumom na 50 ° C najmanje 6 h. Željeni proizvod (31,4 g, 98% HPLC čistoća, 78% prinos) je dobijen kao bela čvrsta supstanca.
[0282]<1>H NMR (DMSO-d6 and D2O) δ: 7.46 (br d, J=8.4 Hz, 2H), 7.15 (br d, J=8.4 Hz, 2H), 3.90 (br d, J=7.8 Hz, 3H), 3.62 (br s, 1H), 3.51 (br s, 2H), 3.16-3.38 (m, 3H), 2.05-2.21 (m, 1H), 1.93 (br s, 2H), 1.49-1.71 (m, 2H), 1.05-1.30 (m, 1H).
[0283]<13>C NMR (DMSO-d6) δ: 138.3, 131.9, 129.2, 120.4, 65.5, 62.3, 56.2, 53.9, 29.1, 28.9, 24.8, 23.0.
MS(ESI-TOF): 322.0761 [M+H]<+>.
[0284] Kompletan način proizvodnje Alternativnog Primera 34 A je prikazan u sledećoj Reakciji
Šema 34A:
[0285] Prvo jedinjenje u ovoj šemi, A1, može se dobiti na sledeći način:
Korak 1-2 Sinteza 1c i 1d
[0286]
Šema 34A1
[0287] Postupak reakcije (videti takođe o Xu, Feng et al., Org. Lett. Vol 8, No.17, 2006, pages 3885-3888):
NaHMDS (2.0 M u THF, 19.2L, 38.4mol, 2.5ek) je dodat u kapima u rastvor 1a (3.00 kg, 15.3mol, 1.0ek, koji se može dobiti npr. od Sigma-Aldrich) i 1b(1.80 kg, 19). 1,27 ek; može se dobiti npr. od Sigma-Aldrich) u THF (30L) na -15-20°C pod N2tokom 5h. Reakciona smeša je mešana još 3 h na -15°C, zatim zagrejana do s.t. postepeno i reakciona smeša je mešana 16h. HPLC analiza je pokazala da je 4-bromfenilacetonitril u potpunosti potrošen.
[0288] BF3.Et2O je dodat polako na 20~40°C. Posle dodavanja, polako se dodaje BH3.DMS (19.2L, 38.4mol, 2.5ek) na 20~40°C. Posle dodavanja, smeša je mešana na 50-55°C tokom 16h. HPLC analiza je pokazala da je intermedijer u potpunosti potrošen.
[0289] Smeša je ohlađena na -5-0 °C, polako je dodavan AcOH (4,5 kg, 74,4 mol, 4,86 ekv.). Nakon toga, polako se dodaje 3 N HCl (36 kg). Smeša je mešana 1 sat i većina THF je uklonjena pod vakuumom na 40-45°C. Zatim je ostatak
4
ekstrahovan sa MTBE (3x10L). MTBE faza je isprana sa 3N HCl (4 x 5L). Kombinovani vodeni sloj je ohlađen na 0°C. Zatim je vodeni sloj neutralizovan sa 30% NaOH do pH >10, ekstrahovan sa IPAc (3x15 kg), ispran slanim rastvorom (5L), uparen pod vakuumom da bi se dobilo sirovo jedinjenje 1d (3,71 kg) koje je direktno korišćeno za sledeći korak.
Korak 3-4 Sinteza 1e i 1f
[0290]
Šema 34A2
Postupak reakcije:
[0291] IPAc(12L) je ohlađen na 0°C i dodat je SOCl2(5,46 kg, 45,9 mol, 1,5 ekv.), održavajući temperaturu na 0-4°C. Posle dodavanja, polako je dodat rastvor sirovog jedinjenja 1d (7,46 kg, dve serije kombinovane od 6 kg 1a) u IPAc (24L). Posle dodavanja, smeša je mešana 1 h na 0°C, zatim zagrejana do sobne temperature i mešana 4 h. HPLC analiza je pokazala da je intermedijer u potpunosti potrošen.
[0292] Smeša je ohlađena na -5-0°C i kvenčovana vodom (30 L), zatim je polako dodat 30% vodeni rastvor NaOH da bi se pH podesio na 8,5~9 i mešana preko noći na 0-5°C . HPLC analiza je pokazala da je intermedijer u potpunosti potrošen.
[0293] 30% vodeni rastvor NaOH je dodat polako da se pH podesi na 11~12 na 0-10°C i mešan na sobnoj temperaturi 30 min. Nakon razdvajanje faza, vodeni sloj je ekstrahovan sa IPAc (10 kg), kombinovana organska faza je isprana slanim rastvorom (5L), osušena preko Na2SO4i filtrirana. Filtrat je zatim ohlađen na 0-5°C. 4M HCl\IPA (8,0 kg, 151 mol) je polako dodat na 0-5°C. Posle dodavanja, reakciona smeša je mešana 4 h na 0-5°C. Smeša je filtrirana, čvrsta supstanca je sakupljena, isprana MTBE (6L) i osušena pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje 1f (3,10 kg, analiza 98%, prinos 37%).
Alternativni primer 34B:
[0294] Početni materijal A5 u šemi 34A može se, kao alternativa, takođe dobiti na sledeći način (reakciona šema 34B), a zatim se može koristiti kao što je prikazano u Alternativnom primeru 34A iznad:
[0295] Detaljno, postupak je sledeći:
4
[0296] U boci sa tri grla od 100 mL, rastvor (1R,5S)-1-(4 bromofenil)-3 tetrahidropiran 4-il-3 azabiciklo[3.1.0 heksana (5,00 g, 15,52 mmol, 1,00 ekv.) u anhidrovanom THF (50.00 mL) je ohlađen na -78°C pod N2. n-BuLi (2,5 M u heksanu, 7,45 mL, 1,20 ekv.) je dodat u kapima na -78°C i mešan 1 h na -78 °C. Rastvor trimetil borata (4.84 g, 46.56 mmol, 5.26 mL, 3.00 ekv.) u anhidrovanom THF (10.00 mL) je dodat u kapima na -78 °C. Posle dodavanja, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na 25°C i mešana na 25°C tokom 16 h. Nakon što je početni materijal potpuno konzumiran, usledilo je praćenje pomoću LC-MS i primećeno je 74,23% ciljnog jedinjenja. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C u ledenom kupatilu i kvenčovana zasićenim rastvorom NH4CI (50 mL). pH smeše je podešen na 12-13 rastvorom NaOH (1 M) i ekstrahovan sa EtOAc (30 mL x 3). Vodeni sloj je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio ostatak (18 g). Ostatak je prečišćen prep-HPLC (TFA uslov) da bi se dobila [4-[(1R,5S)-3-tetrahidropiran-4-il-3 azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il]fenil]borna kiselina ( 4,60 g, 11,47 mmol, 73,88% prinos, TFA so) kao bela čvrsta supstanca.
[0297]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.72 (d, 2H), 7.24 (d, 2H), 4.13 (d, 1H), 4.06-4.03 (m, 2H), 3.86 (d, 1H), 3.70-3.67 (m, 2H), 3.45-3.32 (m, 3H), 2.26-2.23 (m, 1H), 2.11-2.05 (m, 2H), 1.81-1.77 (m, 2H), 1.34-1.20 (m, 2H). ESIMS 288 [M+H]<+>.
[0298] Smeša [4-[(1R,5S)-3-tetrahidropiran-4-il-3 azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il]fenil]borne kiseline (500,00 mg, 1,25 mmol, 1,00 ekv. , TFA so), metil 2-amino-5-bromo-piridin-3-karboksilat (433,22 mg, 1,88 mmol, 1,50 ekv.), Pd(dppf)Cl2(91,46 mg, 0,125 mmol, 0,10 ekv.) K2CO3(518.29 mg , 3,75 mmol, 3,00 ekv.) u dioksanu (5,00 mL) i H20 (1,00 mL) je zagrejano na 100°C i mešano 16 h na 100°C pod N2. Reakciona smeša je ohlađena na 30°C i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen prep-HPLC (neutralno stanje) da bi se dobio metil 2-amino-5-[4-[(1R,5S)-3-tetrahidropiran-4-il-3 azabiciklo[3.1.0]heksan-1 il ]fenil]piridin-3-karboksilat (100,00 mg, 20,02% prinos, 98,47% HPLC čistoća) kao braon čvrsta supstanca<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,49 (d, 1H), 8,35 (d, 1H) , 7,46 (d, 2H), 7,24 (d, 2H), 4,01-3,98 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,47-3,41 (m, 3H), 3,19 (d, 1H), 2,65 (d , 1H), 2,50-2,55 (m, 1H), 2,45-2,35 (m, 1H), 1,81-1,76 (m, 3H), 1,64-1,46 (m, 2H), 1,45-1,40 (m, IH), 0,86-0,83 (m, 1H). ESI-MS 394 [M+H]<+>.
Primer 35: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4 difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4 -hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamid
[0299]
4
[0300] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4 hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il) fenil)-3 azabiciklo[3.1,0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[ 3.1.0]heksan-1 il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 35a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3 azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c) i 4 aminobiciklo[2.2.2]oktan-1-ol hidrohlorid je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen prep. HPLC (Metod 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,05 (bs, 1H), 8,42 (d, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,69 (d, 2H), 7,50 (bs, 2H), 7,39 (d, 2H), 4,83 (bs, 1H), 4,08 (dd, 1H), 3,80 - 3,25 (m, 6H), 2,31 - 2,09 (m, 4H), 2,09 - 1,99 (m, 6H) , 1,98-1,71 (m, 4H), 1,70-1,56 (m, 6H), 1,42-1,40 (m, IH), 1,10 (t, 1H). (UPLC-MS) tR0,62 min; ESI MS 537 [M+H]<+>.
Intermedijer 35a: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4 difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina
[0301] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1 il) fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 2c) osim što je metil-2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinat (Intermedijer 35b) korišćen umesto (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3 azabiciklo[3.1.0 ]heksan-3 karboksilata (Intermedijer 1d). (UPLC-MS) tR0,46 min; ESI-MS 414 [M+H]<+>.
Intermedijer 35b: metil 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinat
[0302] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2Hpiran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]) heksan-1-il)fenil)nikotinat (Intermedijer 14b) osim što je metil 5-(4-((1S,5R)-3 azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-aminonikotinat hidrohlorid (Intermedijer 7c ) korišćen umesto metil 5-(4-((1R,5S)-3 azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-aminonikotinata hidrohlorida (Intermedijer 14c) i 4,4-difluorocikloheksanona je korišćen umesto dihidro-2H-piran-4(3H)-ona. (UPLC-MS) tR0,73 min; ESI-MS 428 [M+H]<+>
Primer 36: 2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1) .0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0303]
[0304] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid (Primer 2) osim što je (3 aminobiciklo[1.1.1]pentan-
4
1 il)metanol (Intermedijer 16a) korišćen umesto trans-4 aminocikloheksanol hidrohlorida. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,05 (s, 1H), 8,41 (d, IH), 8,18 (d, 1H), 7,61 (d, 2H), 7,48 (dd, 1H), 7,33 - 7,17 ( m, 4H), 4,55 (t, 1H), 3,51 (d, 3H), 3,31 (s, 2H), 3,08 (s, 2H), 2,07 - 1,99 (m, 1H), 1,41 - 1,22 (m, 3H) , 1,17-0,98 (m, 9H), 0,79 (d, 1H). (UPLC-MS) tR0,54 min; ESI MS 433 [M+H]<+>.
Primer 37: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(but-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1 il)fenil)- N-((1r,4S)-4 hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0305]
[0306] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4 hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 5), osim što je 1-bromobut-2-in korišćen umesto 4-(3-bromopropil)morfolina, a reakciona smeša je mešana na ST tokom 30 min. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (s, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,21 (s, 2H), 7,13 (s, 2H), 4,60 (d1H), 3,72 (s, 1H), 3,39 (s, 3H), 3,21 (s, IH), 2,98 - 2,58 (m, 3H), 1,84 (dd, 8H), 1,49 - 1,17 (m , 5H), 0,78 (s, 1H). (UPLCMS) tR 0,54 min;ESI-MS 445 [M+H]<+>.
Primer 38: 2-amino-N-((lr,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(oksetan-3-ilmetil)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0307]
[0308] Pomenuto jedinjenje je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan- 1 il)fenil)-N-((1r,4R)-4 hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 5) osim što je 3-(jodometil)-oksetan korišćen umesto 4-(3 bromopropil)morfolina, a reakciona smeša je mešana na 60° C 60 min. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (d, 1H), 8,30 (d, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,22 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,73 - 4,61 (m, 2H), 4,58 (d, 1H), 4,29 (s, 2H), 3,84 - 3,67 (m, 1H), 3,52 - 3,38 (m, 2H), 3,27 - 3,12 (m, 2H), 2,94 (d, 1H), 2,80 (s, 2H), 1,95-1,76 (m, 5H), 1,54-1,14 (m, 6H), 0,76 (s, 1H). (UPLC-MS) tR0,49 min; ESI-MS 463 [M+H]<+>.
Primer 39: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin- 4-il)-3 azabiciklo[3.1.0]heksan-1 il)fenil)nikotinamid
4
[0310] Pomenuto jedinjenje je pripremljeno na analogan način sa 2 amino-N-((1r,4R)-4 hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3 (1-(metilsulfonil)piperidin-4-il) )-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1 il)fenil)nikotinamid (Primer 1) osim što je 1-(2,2,2 trifluoroetil)piperidin-4-on korišćen umesto 1 (metilsulfonil)piperidin-4- jedan. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (d, 1H), 8,31 (d, IH), 8,11 (d, 1H), 7,58 (d, 2H), 7,23 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,55 (bs, 1H), 3,80 - 3,62 (m, 1H), 3,20 - 3,04 (m, 3H), 2,88 (d, 2H), 2,57 (d, 1H), 2,46 (dd, 1H), 2. – 2,29 (m, 2H), 2,15 (t, 1H), 1,99 – 1,69 (m, 8H), 1,49 – 1,17 (m, 7H), 1,15 (t, 1H), 0,75 (dd, 1H). (UPLC-MS) tR0,62 min; ESI-MS 558 [M+H]<+>.
Primer 40: 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(2-morfolinoetil)-3 azabiciklo[3.1 .0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0311]
[0312] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4 hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 5) osim što je 5-(4-((1S,5R)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-(4 hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamidska HCI so (Intermedijer 40a) korišćena umesto 5-(4-((1S,5R)-3)-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamida (Intermedijer 5a), a korišćen je 4-(2-bromoetil)morfolin umesto 4-(3 bromopropil)morfolina, i reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 3 h. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,34 (d, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,57 (d, 2H), 7,21 (d, 2H), 6,92 (s, 2H), 4,32 (s, 1H), 3,65 - 3,49 (m, 4H), 3,08 (d, 1H), 2,61 (t, 2H), 2,59 - 2,39 (m, 9H), 2,15 - 1,98 (m, 6H) , 1,85-1,73 (m, IH), 1,70-1,54 (m, 6H), 1,31 (t, IH), 0,75 (dd, 1H). (UPLC-MS) tR0,52 min; ESI-MS 532 [M+H]<+>.
Intermedijer 40a: 5-(4-((1S,5R)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1 -il)nikotinamid
[0313] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 5-(4-((1S,5R)-3 azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid (Intermedijer 5a) osim što je (1S,5R)-terc-butil 1-(4-(6-amino5-((4 hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)karbamoil) piridin-3-il)fenil)-3 azabiciklo[3.1.0]heksan-3 karboksilat (Intermedijer 40b) korišćen umesto (1S,5R)-terc-butil1-(4-(6-amino-5-)(((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin3-il)fenil)-3 azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (Intermedijer 5b). Jedna frakcija jedinjenja iz naslova dobijena je kao hidrohloridna so posle uparavanja dioksana; druga frakcija je dobijena kao TFA so posle dodatnog prečišćavanja pomoću prep. HPLC (Metoda 1a). (UPLC-MS) tR0,48 min; ESI-MS 419 [M+H]<+>
Intermedijer 40b: (1S,5R)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-((4 hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1 il)karbamoil)piridin-3-il)fenil)-3 azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat
[0314] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4 hidroksicikloheksil)karbamoil)piri in- 3-il)fenil)-3 azabiciklo[3.1,0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(terc-butoksikarbonil)-3- azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (intermedijer 5c) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3) azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c) i 4-aminobiciklo[2.2.2]oktan-1-ol hidrohlorid je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. (UPLC-MS) tR1,05 min; ESI-MS 519 [M+H]<+>.
Primer 41: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4 ((1R,5S)-3-(2-(2,2,2 trifluoroetoksi)etil)-3 -azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0315]
[0316] Pomenuto jedinjenje je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N((1r,4R)-4hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 6) osim što je 2-(2,2,2-trifluoroetoksi)etil trifluorometansulfonat (Intermedijer 41a) korišćen umesto 1,3-difluoropropan-2-iltrifluorometansulfonata (Intermedijer 6a). Posle prečišćavanja, jedinjenje iz naslova je dobijeno kao TFA so. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,15 (bs, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,63 (d, 2H), 7,23 (s, 2H), 7,13 (s, 2H), 4,59 (d, 1H), 4,11 (s, 2H), 3,80 - 3,63 (m, 3H), 3,40 (m, 4H), 2,75 - 2,60 (m, 3H), 1,86 (m, 5H), 1,51-1,15 (m, 6H). (UPLCMS) tR0,60 min; ESI-MS 519 [M+H]<+>.
Intermedijer 41a: 2-(2,2,2-trifluoroetoksi)etil trifluorometansulfonat
[0317] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 1,3-difluoropropan-2-il trifluorometansulfonatom (intermedijer 6a) osim što je 2-(2,2,2-trifluoroetoksi)etanol korišćen umesto 1,3-difluoropropana -2-ol, a dobijeno je kao sirovo ulje koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Primer 42: 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0318]
1
[0319] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N((1r,4R)-4hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(1-(metilsulfonil)piperidin 4il)-3azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid (Primer 1) osim što je 5-(4-((1S,5R)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1 -il)fenil)-2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamidska HCI so (Intermedijer 40a) korišćena umesto 5-(4-((1R,5S)- 3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-aminoN-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamida (Intermedijer 1a) i dihidro-2H-piran-4(3H)-on je korišćen umesto 1-(metilsulfonil)piperidin-4-ona. Posle prečišćavanja pomenuto jedinjenje je dobijeno kao TFA so. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,62 (bs, 1H), 8,38 (d, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,65 (d, 2H), 7,37 (d, 2H), 6,95 (s, 2H), 4,33 (s, 1H), 4,06 - 3,97 (m, 3H), 3,75 - 3,43 (m, 4H), 3,29 - 3,26 (m, 2H), 2,28 - 2,19 (m, 1H), 2,07 - 2,03 (m, 6H), 2,03 - 1,96 (m, 2H), 1,75 - 1,63 (m, 1H), 1,63 - 1,61 (m, 6H), 1,63 - 1,61 (m, 1H), 1. 1,17 (m, IH). (UPLC-MS) tR0,52 min; ESI-MS 503 [M+H]<+>.
Primer 43: 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-(piperidin-1-il)propoksi)fenil)nikotinamid
[0320]
[0321] U rastvor 2-amino-5-bromo-N-cikloheksilnikotinamida (intermedijer 43a, 50 mg, 0,168 mmol) u 2 mL DMF/EtOH/vode (2:1:1) je dodat 1-(3 -(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)propil)piperidin (60,9 mg, 0,168 mmol), K2CO3(69,5 mg, 0,503 mmol) i PdCl2 (PPh3)2 (11,8 mg, 0,017 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 min na 80 °C, zatim ohlađena i razblažena sa 5 mL EtOAc i filtrirana preko sloja Na2SO4. Posle koncentrovanja pod sniženim pritiskom, sirovi proizvod je prečišćen pomoću prep. HPLC (Metoda 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,34 (d, 1H), 8,33 (d, 1H), 8,09 (d, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,06 (s, 2H), 7,01 (d, 2H), 4,03 (t, 2H), 3,75 (s, 1H), 2,50 - 2,22 (m, 6H), 1,95 - 1,65 (m, 6H), 1,62 (d, 1H), 1,52 - 1,48 (m, 4H) , 1,46-1,34 (m, 6H), 1,32-1,15 (m, 1H). (HPLC-MS) tR1,46 min; APCI-MS 437,3 [M+H]<+>.
Intermedijer 43a: 2-amino-5-bromo-N-cikloheksilnikotinamid
[0322] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin- 3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-bromonikotinska kiselina korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R),5S)-3-(terc butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c), i cikloheksanamin je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je korišćen bez daljeg prečišćavanja. (HPLC-MS) tR0,98 min; ESI-MS 208/300 [M+H]<+>.
Primer 44: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan1-il) fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0323]
2
[0324] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid (Primer 1) osim što je dihidro-2H-tiopiran-4(3H)-on 1,1-dioksid korišćen umesto 1-(metilsulfonil)piperidin-4-ona. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (d, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,24 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,58 (d, 1H), 3,82 - 3,65 (m, 1H), 3,48 -3,35 (m, 2H), 3,19 - 2,91 (m, 5H), 2,62 - 2,51 (m, 2H), 2,17 - m, 4H), 1,89-1,83 (m, 5H), 1,45-1,19 (m, 6H), 0,81 (dd, 1H). (UPLC-MS) tR0,48 min; ESI-MS 525 [M+H]<+>.
Primer 45: 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(4-metilpiperazin-1-karbonil)fenil)nikotinamid
[0325]
[0326] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-(piperidinil)propoksi)fenil)nikotinamidom (Primer 43) osim što je (4-metilpiperazin-1). -il)(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)metanon korišćen umesto 1-(3-(4-(4,4, 5,5 tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)propil)piperidin. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,46 (d, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,21 (d, 1H), 7,76 (d, 2H), 7,47 (d, 2H), 7,22 (s, 2H), 3,82 - 3,55 (m, 1H), 3,35 (t, 4H), 2,31 - 2,22 (t, 4H), 2,21 (s, 3H), 1,90 - 1,80 (m, 2H), 1,80 - 1,70 (m, 2H), 1,70-1,55 (m, IH), 1,35-1,29 (m, 4H), 1,28-1,05 (m, 1H). (HPLC-MS) tR1,29 min; APCI-MS 422 [M+H]<+>.
Primer 46: 2-amino-5-(3-fluoro-4-(((R)-2 metilpirolidin-1 il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil )nikotinamid
[0327]
[0328] Mikrotalasna vijala je napunjena sa 2-amino-5-bromo-N-((1r,4r)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamidom (Intermedijer 59b, 33 mg, 0,10 mmol), (R)- 2-(3-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1,3,6,2-dioksazaborokan-4,8-dion (Intermedijer 46a, 38,3 mg, 0,11 mmol) i XPhos Pd (7,39 mg, 0,01 mmol). Dioksan (1 mL) je dodat, a zatim 3N ak. rastvor K3PO4(0,10 ml, 0,30 mmol). Reakciona smeša je pročišćena strujom azota tokom 5 minuta, a zatim ozračena u mikrotalasnom reaktoru na 120°C tokom 30 minuta. Posle hlađenja, reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečišćena prep. HPLC (Metod 1b) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. UPLCHRMS tR3,21 min; ESI 441,26 [M+H]<+>.
Intermedijer 46a: (R)-2-(3-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1,3,6,2-dioksazaborokan-4,8-dion
[0329] Rastvor 2-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso-1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehida (Intermedijer 46b, 112 mg, 0,40 mmol), ( R)-(2)-metilpirolidin (37,5 mg, 0,44 mmol) i sirćetne kiseline (2,4 mg, 0,040 mmol) u THF (2 mL) su mućkani 2 h na ST, a dodat je natrijum triacetoksiborhidrid (110 mg, 0,52 mmol). Dobijena reakciona smeša je mućkana 18 h, a zatim filtrirana kroz SPE karbonatni ketridž, a zatim ispirana sa THF. Filtrat i rastvori za ispiranje su koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS 349 [M+H]<+>.
Intermedijer 46b: 2-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso-1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehid
[0330] Rastvor (3-fluoro-4-formilfenil)borne kiseline (67 mg, 0,40 mmol) i N-metil iminodijasirćetne kiseline (65 mg, 0,44 mmol) u DMF (2 mL) je mešan na 90°C tokom 18 č. Reakciona smeša je ohlađena i filtrirana kroz SPE karbonatni ketridž, nakon čega je isprana tri puta acetonitrilom. Filtrat i rastvori za ispiranje su koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS 558 [2M+H]<+>.
Primer 47: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(3,3,3-trifluoropropil)-3-azabiciklo[ 3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0331]
[0332] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan- 1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 6) osim što je 3,3,3-trifluoropropil trifluorometansulfonat korišćen umesto 1,3-difluoropropan-2-il trifluorometansulfonata (Intermedijer 6a).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (s, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,60 (d, 2H), 7,23 (d, 2H), 7,13 (s, 2H), 4,59 (d, 1H), 3,74 (m, 1H), 3,40 (m, 3H), 3,09 (m, 1H), 2,72 - 2,64 (m, 4H), 1,86 (m, 5H), 1,49 - 1,14 (m, 6H), 0,78 (s, 1H). (UPLCMS) tR0,60 min; ESI-MS 489 [M+H]<+>.
Primer 48: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r) ,4R)-4-hidroksicikloheksil) nikotinamid
[0333]
[0334] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 6), osim što je 1-bromo-2-fluoroetan korišćen umesto 1,3-difluoropropan-2-il trifluorometansulfonata (Intermedijer 6a), i reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 3 h. Posle prečišćavanja jedinjenje iz naslova je dobijeno kao TFA so. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,95 (bs, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,32 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,70 - 7,57 (m, 2H), 7,36 ( bs, 2H), 7,16 (s, 2H), 4,80 -4,62 (m, 2H), 4,59 (d, 1H), 4,08 (bs, 1H), 3,77 - 3,52 (m, 4H), 3,51 - 3,35 (m, 3H), 2,24 (bs, IH), 1,87 (t, 4H), 1,59-1,13 (m, 6H). (UPLC-MS) tR0,46 min; ESI-MS 439 [M+H]<+>.
Primer 49: 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-morfolinofenil)nikotinamid
4
[0336] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-(piperidin-1-il)propoksi)fenil)nikotinamidom (Primer 43) osim što je 4-(4). -(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)morfolin korišćen umesto 1-(3-(4-(4,4,5,5-tetrametil) -1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)propil)piperidina. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,35 (d, 1H), 8,34 (s, 1H), 8,08 (d, 1H), 7,55 (d, 2H), 7,03 (d, 2H), 7,03 (s, 2H), 3,85 - 3,65 (m, 1H), 3,77 (t, 4H), 3,14 (t, 4H), 1,90 - 1,80 (m, 2H), 1,80 - 1,70 (m, 2H), 1,80 (dd, 1H) , 1,38-1,20 (m, 4H), 1,19-1,05 (m, 1H). (HPLC-MS) tR1,60 min; APCI-MS 381 [M+H]<+>.
Primer 50: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(2,2-difluoropropil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( (1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0337]
[0338] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan- 1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 6) osim što je 2,2-difluoropropil trifluorometansulfonat korišćen umesto 1,3-difluoropropan-2-il trifluorometansulfonata (Intermedijer 6a) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 min. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,32 - 7,11 (m, 4H), 4,58 ( bs, 1H), 3,74 (bs, 1H), 3,11 (bs, 1H), 3,00 - 2,66 (m, 5H), 1,86 (bs, 5H), 1,63 (t, 3H), 1,48 - 1,18 (m, 6H) , 0,81 (bs, 1 H). (UPLC-MS) tR0,81 min; ESI-MS 471 [M+H]<+>.
Primer 51: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-cijanoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r) ,4S)-4-hidroksicikloheksil) nikotinamid
[0339]
[0340] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 5), osim što je 3-bromopropannitril korišćen umesto 4-(3-bromopropil)morfolina, a reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 24 h. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (d, 1H), 8,30 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,60 (d, 2H), 7,23 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,59 (d, 1H), 3,73 (d, 1H), 3,18 (d, 1H), 3,09 (d, 1H), 2,81 - 2,62 (m, 6H), 1,99 - 1,78 (m, 4H), 1. - 1,18 (m, 6H), 0,80 (dd, 1H). (UPLC-MS) tR0,50 min; ESI-MS 446 [M+H]<+>.
Primer 52: 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-morfolinopropoksi)fenil)nikotinamid
[0341]
[0342] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-(piperidin-1-il)propoksi)fenil)nikotinamidom (Primer 43) osim 4-(3 -(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)propil)morfolin je korišćen umesto 1-(3-(4-(4,4, 5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)propil)piperidin.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,35 (d, 1H), 8,34 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,06 (s, 2H), 7,01 (d, 2H), 4,04 (t, 2H), 3,82 - 3,68 (m, 1H), 3,58 (t, 4H), 2,50 - 2,22 (m, 6H), 1,90 - 1,78 (m, 4H), 1,78 - 1,69 (m, 2H), 1,63 (dd, IH), 1,38 - 1,20 (m, 4H), 1,19 - 1,05 (m, 1 H). (HPLC-MS) tR1,40 min; APCI-MS 439 [M+H]<+>.
Primer 53: 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(prop-2-in-1-il)-3- azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) fenil)nikotinamid
[0343]
[0344] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(3-morfolinopropil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid (Primer 5), osim što je 3-bromoprop-1-in korišćen umesto 4-(3-bromopropil)morfolina. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (d, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,21 (d, 2H), 7,13 (s, 2H), 4,59 (d, 1H), 3,73 (d, 1H), 3,52 - 3,38 (m, 2H), 3,21 (d, 1H), 2,93 (d, 1H), 2,83 (d, 1H), 2,72 (d , 1H), 2,40 (s, 3H), 1,95-1,75 (m, 4H), 1,44-1,19 (m, 5H), 0,80 (dd, 1H). (UPLCMS) tR0,49 min; ESI-MS 431 [M+H]<+>.
Primer 54: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(prop-2-in-1-il)-3- azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) fenil)nikotinamid
[0346] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 6), osim što je 3-bromoprop-1-in korišćen umesto 1,3-difluoropropan-2-il trifluorometansulfonata (Intermedijer 6a). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (d, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,21 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,59 (d, IH), 3,76 - 3,70 (m, 1H), 3,46 (s, 2H), 3,45 - 3,37 (m, 1H), 3,22 (d, 1H), 2,83 (d, 1H), 2,72 (d, 1H), 2,71-2,69 (m, 2H), 1,92-1,77 (m, 5H), 1,51-1,17 (m, 5H), 0,80 (dd, 1H). (UPLC-MS) tR0,52 min; ESI-MS 431 [M+H]<+>.
[0347]
[0348] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino -N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 3) osim što je (R)-6-(1-(4-bromo-3-hlorofenil)etil)-2-oksa-6-azaspiro[3.3 ]heptan (Intermedijer 55a) korišćen umesto (R)-6-(1-(4-bromofenil)etil)-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptana (Intermedijer 3b). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,17 (m, 2H), 8,00 (s, 1H), 7,42 - 7,44 (m, 2H), 7,40 (m, 1H), 7,34 (bs, 2H), 4,62 ( s, 3H), 4,55 -4,57 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 3,35 - 3,54 (m, 4H), 3,20 - 3,24 (m, 2H), 3,15 (bs, 1H), 1,78 - 1,88 ( m, 4H), 1,20-1,41 (m, 4H), 1,11 (bs, 3H). (UPLC-MS) tR0,47 min; ESI-MS 471/473 [M+H]<+>.
Intermedijer 55a: (R)-6-(1-(4-bromo-3-hlorofenil)etil)-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan
[0349] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način kao (R)-6-(1-(4-bromofenil)etil)-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan (Intermedijer 3b) osim što je (R)-1 -(4-bromo-3-hlorofenil)etanamin korišćen umesto (R)-1-(4-bromofenil)etanamina. (UPLC-MS) tR0,63 min; ESI-MS 316/318 [M+H]<+>.
Primer 56: 2-amino-5-(2-fluoro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil) nikotinamid
[0350]
[0351] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(3-fluoro-4-(((R)-2-metilpirolidinil)metil)fenil)-N-((1r,4R) )-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid (Primer 46) osim što je (R)-2-(2-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1,3,6,2-dioksazaborokan-4,8-dion (Intermedijer 56a) korišćen umesto (R)-2-(3-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)- 6-metil-1,3,6,2-dioksazaborokan-4,8-diona (Intermedijer 46a). UPLC-HRMS tR3,22 min; ESI 441,26 [M+H]<+>.
Intermedijer 56a: (R)-2-(2-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1,3,6,2-dioksazaborokan-4,8-dion
[0352] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način (R)-2-(3-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1,3,6 ,2-dioksazaborokan-4,8-dion (Intermedijer 46a) osim što je 3-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehid (Intermedijer 56b) korišćen umesto 2-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehida (Intermedijer 46b). ESI-MS 349 [M+H]<+>.
Intermedijer 56b: 3-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso-1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehid
[0353] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso-1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehidom (Intermedijer 46b) osim što je (2-fluoro-4-formilfenil)borna kiselina korišćena umesto (3-fluoro-4-formilfenil)borne kiseline. ESI-MS 576 [2M+H20+H]<+>.
Primer 57: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4- hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamid
[0354]
[0355] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan- 1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 6) osim što je 5-(4-((1R,5S)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1- il)fenil)-2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamidska HCI so (Intermedijer 34a) korišćena umesto 5-(4-((1R,5S)-3) -azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamida (Intermedijer 1a), a 1-bromo-2-fluoroetan je korišćen umesto 1,3-difluoropropan2-il trifluorometansulfonata (Intermedijer 6a). Posle prečišćavanja jedinjenje iz naslova je dobijeno kao TFA so. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.00 (bs, 1H), 8.38 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.77 (d, 2H), 7.35 (d, 2H), 7.08 (s, 2H), 4.83 (td, 2H), 4.74 (bs, 1H), 4.08 (bs, 1H), 3.89 - 3.57 (m, 4H), 3.18 (d, 1H), 2.24 (bs, 1H), 2.13 - 1.97 (m, 6H), 1.74 -1.53 (m, 6H), 1.48 (bs, 1H), 1.17 (bs, 1H). (UPLC-MS) tR0.53 min; ESI-MS 465 [M+H]<+>.
Primer 58: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( (1r,4S)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid
[0357] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način kao (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il )fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3- azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (intermedijer 35a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3) -azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c), a trans-4-amino-1-metilcikloheksanol je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen prep. HPLC (Metoda 1a) i propušten kroz jonoizmenjivački kertridž (PL-HCO3) za odsoljavanje da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (d, 1H), 8,29 (d, 1H), 8,10 (d, IH), 7,59 (d, 2H), 7,25 (d, 2H), 7,10 (s, 2H), 4,33 (s, 1H), 3,81 (bs, 1H), 3,39 (d, 2H), 2,62 - 2,56 (m, 1H), 2,00 (bs, 2H), 1,88 - 1,76 (m, 8H), 1,67 -1,53 (m, 4H), 1,50-1,43 (m, 4H), 1,30 (t, 1H), 1,17 (s, 3H), 0,86-0,68 (m, 1H). (UPLC-MS) tR0,61 min; ESIMS 525 [M+H]<+>.
Primer 59: 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1r,4R) -4-hidroksi-4-metilcikloheksil) nikotinamid
[0358]
[0359] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino -N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 3) osim što je (6-amino-5-(((1r,4r)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)karbamoil)piridin-3-il )borna kiselina (Intermedijer 59a) korišćena umesto (6-amino5-(((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)borne kiseline (Intermedijer 3a). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (s, 1H), 8,25 (bs, 1H), 8,11 (d, 1H) 7,71 - 7,54 (m, 2H), 7,49 - 7,28 (m, 12H), 7. (bs, 2H), 4,61 (bs, 4H), 4,31 (s, 1H), 3,89 -3,68 (m, 2H), 3,31 (s, 15H), 3,27 - 2,99 (m, 2H), 1,86 - 1,69 (m , 2H), 1,66-1,52 (m, 2H), 1,51-1,35 (m, 5H), 1,16 (s, IH), 1,30-0,95 (m, 2H). (UPLC-MS) tR0,47 min; ESI-MS 451 [M+H]<+>.
Intermedijer 59a: (6-amino-5-(((1r,4r)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)borna kiselina
[0360] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način (6-amino-5-(((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)borne kiseline (Intermedijer 3a) osim što je 2-amino -5-bromo-N-((1r,4r)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid (intermedijer 59b) korišćen umesto 2-amino-5-bromo-N-((1r,4r)-4 -hidroksicikloheksil)nikotinamid (Intermedijer 3c). (UPLC-MS) tR0,33 min; ESI-MS 394 [M+H]<+>.
Intermedijer 59b: 2-amino-5-bromo-N-((1r,4r)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid
[0361] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-bromo-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamidom (intermedijer 3c) osim što je trans-4-amino-1-metilcikloheksanol korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. (UPLC-MS) tR0,68 min; ESI-MS 328/330 [M+H]<+>.
Primer 60: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(but-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) -N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil) nikotinamid
[0362]
[0363] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0) ]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 6), osim što je 1-bromobut-2-in korišćen umesto 1,3-difluoropropan-2-il trifluorometansulfonata (Intermedijer 6a). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (d, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,21 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,58 (d, IH), 3,77 - 3,71 (m, 1H), 3,43 -3,37 (m, 3H), 3,22 (d, 1H), 2,92 (d, 1H), 2,80 (d, 1H), 1,93 - 1,78 (m, 8H), 1,44-1,19 (m, 6H), 0,79 (dd, 1H). (UPLC-MS) tR 0,54 min; ESI-MS 445 [M+H]+.
Primer 61: 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(piperidin-1-il)fenil)nikotinamid
[0364]
[0365] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-(piperidin-1-il)propoksi)fenil)nikotinamidom (Primer 43) osim što je 4-(piperidina -1-il)fenilborna kiselina korišćena umesto 1-(3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)propil)piperidina. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,33 (d, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,08 (d, 1H), 7,51 (d, 2H), 7,01 (s, 2H), 7,00 (d, 2H), 3,82 - 3,68 (m, 1H), 3,17 (t, 4H), 1,90 - 1,78 (m, 2H), 1,78 - 1,69 (m, 2H), 1,68 - 1,49 (m, 7H), 1,38 - 1. m, 4H), 1,19-1,05 (m, IH). (HPLC-MS) tR1,40 min; APCI-MS 379 [M+H]<+>.
Primer 62: 2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran4-) il)-3-azabiciklo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0366]
[0367] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin- 3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran- 4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 28a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3- (terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c), a trans-4-amino-1-metilcikloheksanol je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen prvo prep. HPLC (Metoda 1a), a zatim fleš hromatografijom reverzne faze (Metoda 3a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,92 (d, 1H), 8,46 (s, 1H), 8,22 (s, IH), 7,61 (d, 2H), 7,25 (d, 2H), 7,18 (s, 2H), 4.15-4.09 (m, 1H), 3.88-3.82 (m, 2H), 3.42-3.36 (m, 3H), 3.10 (bs, 1H), 2.65-2.34 (m, 12H), 1.85-1. m, 3H), 1,45-1,31 (m, 6H), 0,77 (bs, 1H). (UPLC-MS) tR0,49 min; ESI-MS 491 [M+H]<+>.
Primer 63: 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(oksetan-3-il)-3- azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0368]
[0369] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(1-(metilsulfonil)) )piperidin-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid (Primer 1) osim što je 5-(4-((1S,5R)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamid HCI so (intermedijer 40a) korišćena umesto 5-(4-((1R, 5S)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-aminoN-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamida (Intermedijer 1a), a umesto njega korišćen je oksetan-3-on 1-(metilsulfonil)piperidin-4-ona. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,34 (d, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,57 (d, 2H), 7,22 (d, 2H), 6,92 (s, 2H), 4,61 - 4,56 (m, 2H), 4,52 - 4,48 (m, 2H), 4,32 (s, 1H), 3,80 - 3,74 (m, 1H), 3,03 (d, 1H), 2,57 - 2,51 (m, 3H), 2,14-1,98 (m, 6H), 1,88-1,85 (m, IH), 1,71-1,55 (m, 6H), 1,45-1,35 (m, 1H), 0,83-0,80 (m, 1H). (UPLC-MS) tR0,51 min; ESI-MS 475 [M+H]<+>.
Primer 64: 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(oksetan-3-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0370]
[0371] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(1-(metilsulfonil)) )piperidin-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid (Primer 1) osim što je 5-(4-((1R,5S)-3-azabiciklo[3.1.0]) heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamid HCI so (Intermedijer 34a) korišćena umesto 5-(4-((1R, 5S)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-aminoN-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamida (Intermedijer 1a), a umesto njega korišćen je oksetan-3-on 1-(metilsulfonil)piperidin-4-ona. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,34 (d, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,57 (d, 2H), 7,22 (d, 2H), 6,92 (s, 2H),
1
4,61 - 4,56 (m, 2H), 4,52 - 4,48 (m, 2H), 4,31 (s, 1H), 3,81 - 3,76 (m, 1H), 3,03 (d, 1H), 2,57 - 2,51 (m, 3H), 2,07-2,03 (m, 6H), 1,88-1,85 (m, IH), 1,65-1,61 (m, 6H), 1,45-1,35 (m, 1H), 0,83-0,80 (m, 1H). (UPLC-MS) tR0,55 min; ESI-MS 475 [M+H]<+>.
Primer 65: 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-((2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)karbamoil)fenil)nikotinamid
[0372]
[0373] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin- 3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1b) osim što je 4-(6-amino-5-(cikloheksilkarbamoil)piridin-3-il)benzojeve kiseline (Intermedijer 65a) korišćeno umesto 2-amino5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c), i 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanamin je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen normalno faznom hromatografijom (Metoda 2c) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao sivobela čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSOd6) δ 8,50 (d, 1H), 8,42 (t, 1H), 8,37 (d, 1H), 8,23 (d, 1H), 7,91 (d, 2H), 7,80 (d, 2H) , 7,25 (s, 2H), 3,82 - 3,65 (m, 1H), 3,40 (k, 2H), 3,32 - 3,13 (m, 3H), 2,99 - 2,83 (m, 1H), 2,43 - 2,31 (m, 6H) , 2,17 (s, 3H), 1,90 - 1,80 (m, 2H), 1,80 - 1,70 (m, 2H), 1,70 - 1,55 (m, 1H), 1,40 - 1,25 (m, 4H), 1,20 - 1,10 1H). (HPLC-MS) tR1,28 min; APCI-MS 465 [M+H]<+>.
Intermedijer 65a: 4-(6-amino-5-(cikloheksilkarbamoil)piridin-3-il)benzoeva kiselina
[0374] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-(piperidin-1-il)propoksi)fenil)nikotinamidom (Primer 43) osim što je 4-(4). ,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzojeva kiselina korišćena umesto 1-(3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3) ,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)propil)piperidina. Sirovi proizvod je triturisan sa 2-propanolom da bi se dobila braonkasta čvrsta supstanca koja je prečišćena prep. HPLC (Metod 1a). Čiste frakcije su sakupljene i koncentrovane pod sniženim pritiskom, zatim bazifikovane sa Na2C03 na koje se naslovno jedinjenje istaloži kao bezbojna čvrsta supstanca koja se odfiltrira i osuši pod sniženim pritiskom. (HPLC-MS) tR1,52 min; ESI-MS 340 [M+H]<+>.
Primer 66: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) -N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0375]
[0376] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0] ]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 5) osim što je 1,3-difluoropropan-2-il trifluorometansulfonata (Intermedijer 6a) korišćen umesto 4-( 3-bromopropil)morfolina. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (d, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,24 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,68 (t, 2H), 4,57 (dd, 3H), 3,81 - 3,65 (m, 1H), 3,46 - 3,35 (m, 2H), 3,08 (d, 1H), 2,93 (d, 1H), 2. (dd, 1H), 2,05-1,76 (m, 5H), 1,53-1,16 (m, 6H), 0,78 (dd, 1H). (UPLC-MS) tR0,68 min; ESI-MS 471 [M+H]<+>.
2
Primer 67: 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(2,2,2-trifluoroetil)-3-azabiciklo[ 3.1.0]heksan-1-il) fenil)nikotinamid
[0377]
[0378] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0) ]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid (Primer 5) osim što je korišćen 2,2,2-trifluoroetil trifluorometansulfonat umesto 4-(3-bromopropil)morfolina. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,46 - 8,31 (m, 2H), 8,18 (bs, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,29 (bs, 1H), 7,23 (d, 2H), 3,83 - 3,54 (m, 1H), 3,51 - 3,24 (m, 5H), 3,11 (d, 1H), 2,92 (d, 1H), 2,86 (m, 1H), 1,92 - 1,77 (m, 5H), 1,29 - 1,21 ( m, 1H), 1,42-1,18 (m, 4H), 1,14 (bs, 1H), 0,85-0,79 (m, 1H). (UPLC-MS) tR1,04 min; ESI-MS 475 [M+H]<+>.
Primer 68: 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1r,3R) -3-hidroksiadamantan-1-il) nikotinamid
[0379]
[0380] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino -N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 3) osim što je (6-amino-5-(((1r,3r)-3-hidroksiadamantan-1-il)karbamoil)piridin-3-il )borna kiselina (Intermedijer 68a) korišćena umesto (6-amino-5-(((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)borne kiseline (Intermedijer 3a). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,65 (bs, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 7,87 (d, 2H), 7,59 (d, 2H), 4,73 (dd, 2H), 4,65 - 4,54 (m, 4H), 4,45 - 4,39 (m, 1H), 4,16 -4,10 (m, 1H), 3,98 (s, 1H), 3,90 (bs, 1H), 2,21 (s, 2H) , 2,04-1,94 (m, 6H), 1,60 (bs, 2H), 1,49-1,43 (m, 3H). (UPLCMS) tR0,56 min; ESI-MS 489 [M+H]<+>.
Intermedijer 68a: 6-amino-5-(((1r,3r)-3-hidroksiadamantan-1-il)karbamoil)piridin-3-il)borna kiselina
[0381] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa (6-amino-5-(((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il)bornom kiselinom (intermedijer 3a) osim što je 2-amino -5-bromo-N-((1r,3r)-3-hidroksiadamantan-1-il)nikotinamid (Intermedijer 68b) korišćen umesto 2-amino-5-bromo-N-((1r,4r)-4 -hidroksicikloheksil)nikotinamida (Intermedijer 3c). (UPLC-MS) tR0,47min; ESI-MS 332 [M+H]<+>.
Intermedijer 68b: 2-amino-5-bromo-N-((1r,3r)-3-hidroksiadamantan-1-il)nikotinamid
[0382] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-bromo-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid intermedijerom 3c), osim što je 3-amino-1-adamantanol korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. (UPLC-MS) tR0,82 min; ESI-MS 366/368 [M+H]<+>.
Primer 69: 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(morfolin-4-karbonil)fenil)nikotinamid
[0383]
[0384] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-(piperidin-1-il)propoksi)fenil)nikotinamidom (Primer 43) osim što je 4-(morfolina -4-karbonil)fenilborna kiselina korišćena umesto 1-(3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)propil)piperidina. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,47 (d, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,30 (d, 1H), 7,78 (d, 2H), 7,51 (d, 2H), 7,49 (s, 2H), 3,85 - 3,70 (m, 1H), 3,70 -3,50 (m, 8H), 1,90 - 1,80 (m, 2H), 1,80 - 1,70 (m, 2H), 1,70 - 1,55 (m, 1H), 1,30 1,29 (m, 4H), 1,28-1,05 (m, 1H). (HPLC-MS) tR1,51 min; APCI-MS 409 [M+H]<+>.
Primer 70: 2-amino-N-((lr,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(oksetan-3-ilmetil)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-il) fenil)nikotinamid
[0385]
[0386] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0) ]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 6) osim što je oksetan-3-ilmetil trifluorometansulfonata (Intermedijer 70a) korišćen umesto 1,3-difluoropropan-2 -il trifluorometansulfonata (Intermedijer 6a), i reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 3 h. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (d, 1H), 8,30 (d, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,58 (d, 2H), 7,21 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,66 (dt, 2H), 4,58 (d, 1H), 4,28 (t, 2H), 3,90-3,66 (m, 1H), 3,43-3,35 (m, 1H), 3,25 (dd, 1H), 3,19 - 3,09 (m, 1H), 2,97 (d, 1H), 2,79 (d, 2H), 2,62 - 2,51 (m, 2H), 1,98 - 1,75 (m, 5H), 1,48 - 1,13 (m, 5H), 0. (dd, IH). (UPLC-MS) tR0,46 min; ESI-MS 463 [M+H]<+>.
Intermedijer 70a: oksetan-3-ilmetil trifluorometansulfonat
[0387] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 1,3-difluoropropan-2-il trifluorometansulfonatom (intermedijer 6a), osim što je oksetan-3-ilmetanol korišćen umesto 1,3-difluoropropan-2-ola, i dobijeno je kao sirovo ulje koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Primer 71: 2-amino-N-((1s,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan1-il) fenil) nikotinamid
4
[0389] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin- 3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilatom (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1 .0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 71a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[ 3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c) i cis-4-aminocikloheksanol hidrohlorid je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen prep. HPLC (Metoda 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,49 - 8,34 (m, 2H), 8,17 (s, 1H), 7,67 (s, 2H), 7,36 (s, 2H), 7,16 (s, 2H), 4,43 ( d, 1H), 3,81 (s, 2H), 3,81-3,59 (m, 4H), 1,88 - 1,62 (m, 5H), 1,61 - 1,44 (m, 5H), 1,35 (s, 6H), 1,16 (s, 2H). (UPLC-MS) tR0,52 min; ESI-MS 435 [M+H]<+>.
Intermedijer 71a: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina
[0390] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il )fenil)nikotinskom kiselinom (Intermedijer 1c) osim što je metil 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinata (Intermedijer 71b) korišćen umesto (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3- karboksilata (Intermedijer 1d). (UPLC-MS) tR0,40 min; ESI-MS 338 [M+H]<+>.
Intermedijer 71b: metil 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinat
[0391] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa metil 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1- il)fenil)nikotinatom (Intermedijer 7b) osim što je 2-jodopropan korišćen umesto 1-bromo2-metoksietana. (UPLC-MS) tR0,65 min; ESI-MS 352 [M+H]<+>.
Primer 72: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid
[0392]
[0393] U rastvor (4-(bromometil)fenil)borne kiseline (73,1 mg, 0,340 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodat je (R)-2-metilpirolidin (29,0 mg, 0,340 mmol) i K2CO3(78). mg, 0,567 mmol) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota i dobijena bela suspenzija je mešana na 60°C tokom 2 h. Dodata je voda (1 mL) na sobnoj temperaturi, nakon čega je usledilo dodavanje 2-amino-5-bromo-N-((1r,4r)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamida (Intermedijer 59b, 150 mg, 0,283 mmol) u acetonitrilu (2 mL). Zatim je dodat PdCl2(dppf) (10,37 mg, 0,014 mmol) i reakciona smeša je mešana na 90°C tokom 60 min. Posle filtriranja kroz sloj celita i koncentrovanja pod sniženim pritiskom, sirovi proizvod je razblažen sa zas. ak. rastvorom NaHC03i EtOAc. Nakon odvajanja faza, ak. sloj je ekstrahovan sa EtOAc i kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen prvo prep. HPLC (Metoda 1a), a zatim hromatografijom normalne faze (Metoda 2b) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,75 (d, 1H), 8,52 (t, 1H), 8,41 (d, 1H), 8,27 (d, 1H), 7,85 (d, 2H), 7,66 (d, 2H), 7,38 (bs, 2H), 4,67 - 4,53 (m, 1H), 4,25 (dd, 1H), 3,85 (s, 1H), 3,58 - 3,49 (m, 1H), 3,37 - 3,18 (m, 3H) , 2,29 (m, 1H), 2,06 - 1,88 (m, 2H), 1,83 (s, 2H), 1,65 (dd, 2H), 1,51 (d, 4H), 1,39 (dd, 3H), 1,22 (d, 3H) ). (UPLC-MS) tR 0,47 min; ESI-MS 423 [M+H]<+>.
Primer 73: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4- hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamid
[0394]
[0395] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 5) osim što je 5-(4-((1S,5R)-3-azabiciklo[3.1.0]heksana -1-il)fenil)-2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamid HCI so (Intermedijer 40a) korišćena umesto 5-(4-((1S,5R) )-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamida (intermedijer 5a) i 1-bromo-2-fluoroetan je korišćen umesto 4-(3-bromopropil)morfolina, i reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 3 h. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,35 (d, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,57 (d, 2H), 7,22 (d, 2H), 6,92 (s, 2H), 4,55 (td, 2H), 4,31 (s, 1H), 3,38 (d, 1H), 3,10 (d, 1H), 2,84 (t, 1H), 2,76 (t, 1H), 2,64 (d, 1H) ), 2,54-2,51 (m, 1H), 2,13-1,96 (m, 6H), 1,83 (dd, 1H), 1,73-1,54 (m, 6H), 1,34 (t, 1H), 0,78 (dd, 1H). (UPLC-MS) tR0,51 min; ESI-MS 465 [M+H]<+>.
Primer 74: 2-amino-5-(2,3-difluoro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil) nikotinamid
[0396]
[0397] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(3-fluoro-4-(((R)-2-metilpirolidinil)metil)fenil)-N-((1r,4R) )-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamidom (Primer 46) osim što je (R)-2-(2,3-difluoro4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1, 3,6,2-dioksazaborokan-4,8-dion (Intermedijer 74a) korišćen umesto (R)-2-(3-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)- 6-metil-1,3,6,2-dioksazaborokan-4,8-diona (Intermedijer 46a). (UPLC-MS) tR0,76 min; ESI-MS 459 [M+H]<+>.
Intermedijer 74a: (R)-2-(2,3-difluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1,3,6,2-dioksazaborokan-4,8 -dione
[0398] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa (R)-2-(3-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1,3,6 ,2-dioksazaborokan-4,8-dionom (Intermedijer 46a) osim što je 2,3-difluoro-4-(6-metil-4,8-diokso1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehid (Intermedijer 74b ) korišćen umesto 2-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehida (Intermedijer 46b). ESI-MS 367 [M+H]<+>.
Intermedijer 74b: 2,3-difluoro-4-(6-metil-4,8-diokso-1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehid
[0399] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso-1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehidom (Intermedijer 46b) osim što je (2,3-difluoro-4-formilfenil)borna kiselina korišćena umesto (3-fluoro-4-formilfenil)borne kiseline. ESI-MS 595 [2M+H]<+>.
Primer 75: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0400]
[0401] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0)]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 6), osim što je 1-bromo-2-metoksietan korišćen umesto 1,3-difluoropropan-2-il trifluorometansulfonata (Intermedijer 6a), i reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 3 h. Posle prečišćavanja jedinjenje iz naslova je dobijeno kao TFA so. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,70 (bs, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,66 - 7,60 (m, 2H), 7,30 ( bs, 2H), 7,14 (s, 2H), 4,59 (d, 1H), 3,81 - 3,38 (m, 8H), 3,31 (s, 3H), 2,75 - 2,25 (m, 4H), 1,86 (t, 4H) 1,50-1,21 (m, 6H). (UPLC-MS) tR0,48 min; ESI-MS 451 [M+H]<+>.
Primer 76: 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2,2-difluoropropil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( (1r,4S)-4-hidroksicikloheksil) nikotinamid
[0402]
[0403] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0)]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 5) osim što je 2,2-difluoropropil trifluorometansulfonat korišćen umesto 4-(3-bromopropil)morfolina. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (d, 1H), 8,33 (d, 1H), 8,14 (d, 1H), 7,60 (d, 2H), 7,32 - 7,09 (m, 4H), 4,59 ( bs, 1H), 3,74 (bs, 1H), 3,11 (d, 1H), 2,98 -2,63 (m, 5H), 1,89 - 1,83 (m, 5H), 1,63 (t, 3H), 1,42 - 1,25 (m, 6H), 0,81 (bs, 1H). (UPLC-MS) tR0,82 min; ESI-MS 471 [M+H]<+>.
Primer 77: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(2,2,2-trifluoroetil)-3-azabiciklo[ 3.1.0]heksan-1-il) fenil)nikotinamid
[0405] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0) ]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamidom (Primer 6) osim što 2,2,2-trifluoroetil trifluorometansulfonat korišćen umesto 1,3-difluoropropan-2-il trifluorometansulfonata (Intermedijer 6a), i reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 1 h. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (d, 1H), 8,32 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,60 (d, 2H), 7,24 (d, 2H), 7,16 (s, 2H), 4,58 (s, 1H), 3,73 (dt, 1H), 3,41 (m, 4H), 3,13 (d, 1H), 2,93 (d, 1H), 2,84 (dd, 1H), 1,92 - 1,77 (m , 5H), 1,51-1,15 (m, 5H), 0,84 (dd, 1H). (UPLC-MS) tR1,03 min; ESI-MS 475 [M+H]<+>.
Primer 78: 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil-4-d)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il)fenil) nikotinamid
[0406]
[0407] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin- 3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilatom (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1 .0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 71a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[ 3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c) i trans-4-aminocikloheksan-1-d-1-ol hidrohlorid (Intermedijer 78a) je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen prvo prep. HPLC (Metoda 1a), a zatim fleš hromatografijom reverzne faze (Metoda 3a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,38 (d, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,58 (d, 2H), 7,22 (d, 2H), 7,12 (s, 2H), 4,56 (s, 1H), 3,73 (dt, 1H), 3,37 (s, 1H), 3,06 (d, 1H), 2,57 (d, 1H), 2,49 - 2,41 (m, 2H), 1,93 - 1,73 (m, 5H), 1,31 (m, 5H), 1,04 (dd, 6H), 0,74 (dd, 1H). (UPLC-MS) tR0,50 min; ESI-MS 436 [M+H]<+>.
Intermedijer 78a: trans-4-aminocikloheksan-1-d-1-ol hidrohlorid
[0408] Deuterisani aminocikloheksil polazni materijali se mogu pripremiti korišćenjem metoda sličnih onima poznatim u tehnici (npr. Quirante, J. et al, J. Org. Chem. 67(7): 2323-2328 (2002)). Na primer, terc-butil benzil(4-oksocikloheksil)-karbamat se može redukovati sa NaBD4da bi se dobio deuterovani terc-butil benzil((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)karbamat koji se, nakon uklanjanja zaštite terc-butiloksikarbonila i benzil zaštitne grupe, može ugraditi ovde opisanim metodama sinteze.
Primer 79: 2-amino-N-((1s,4s)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(4-metilpiperazin-1-karbonil)fenil)nikotinamid TFA so [0409]
[0410] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-(piperidin-1-il)propoksi)fenil)nikotinamidom (Primer 43) osim što je 2-amino- 5-bromo-N-((1s,4s)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid (intermedijer 79a) korišćen umesto 2-amino-5-bromo-N-cikloheksilnikotinamida (intermedijer 43a) i (4-metilpiperazin-1-il)(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)metanon je korišćen umesto 1-(3-(4-(4,4,5) ,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)propil)piperidina. Reakcija je izvedena u mikrotalasnom reaktoru (vreme zračenja 15 min na 80 °C). Naslovljeno jedinjenje je dobijeno kao TFA so. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,01 (s, 2H), 8,56 (d, 1H), 8,51 (d, 1H), 8,43 (d, 1H), 7,85 (d, 2H), 7,57 (d, 2H), 3,86 - 3,55 (m, 3H), 3,55 - 3,20 (m, 4H), 3,40 - 3,15 (m, 3H), 2,85 (s, 3H), 1,85 - 1,70 (m, 2H), 1,70 - 1. m, 2H), 1,65-1,40 (m, 4H). (HPLC-MS) tR0,35 min; ESIMS 438 [M+H]<+>.
Intermedijer 79a: 2-amino-5-bromo-N-((1s,4s)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid
[0411] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-bromo-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamidom (intermedijer 3c) osim što je cis-4-aminocikloheksanol korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. (UPLC-MS) tR0,53 min; ESI-MS 314/316 [M+H]<+>.
Primer 80: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( 4-hidroksibiciklo [2.2.2]oktan-1-il)nikotinamid
[0412]
[0413] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(1-(metilsulfonil))piperidin-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamidom (Primer 1) osim što je 5-(4-((1R,5S)-3-azabiciklo[3.1.0]) heksan-1-il)fenil)-2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamidska HCI so (Intermedijer 34a) korišćena umesto 5-(4-((1R,5S)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-2-aminoN-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamida (Intermedijer 1a) i 4,4-difluorocikloheksanon je korišćen umesto njega 1-(metilsulfonil)piperidin-4-ona. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,32 (d, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,55 (d, 2H), 7,21 (d, 2H), 6,88 (s, 2H), 4,28 (s, 1H), 3,36 (s, 1H), 3,07 (s, 1H), 2,55 (s, 1H), 2,45 (s, 1H), 2,32 (d, 1H), 2,30 - 1,95 (m , 8H), 1,77 (d, 5H), 1,70-1,32 (m, 8H), 1,27 (t, IH), 0,75 (s, 1H). (UPLC-MS) tR0,63 min; ESI-MS 537 [M+H]<+>.
Primer 81: 2-amino-5-(2-hloro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4 -metilcikloheksil) nikotinamid TFA so
[0414]
[0415] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(3-fluoro-4-(((R)-2-metilpirolidinil)metil)fenil)-N-((1r,4R) )-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamidom (Primer 46) osim što je (R)-2-(2-hloro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1, 3,6,2-dioksazaborokan-4,8-dion (Intermedijer 81a) korišćen umesto (R)-2-(3-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)- 6-metil-1,3,6,2-dioksazaborokan-4,8-diona (Intermedijer 46a). UPLC-HRMS tR3,45 min 457,24/459,24 [M+H]<+>.
Intermedijer 81a: (R)-2-(2-hloro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1,3,6,2-dioksazaborokan-4,8-dion [0416] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način kao (R)-2-(3-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1,3,6 ,2-dioksazaborokan-4,8-dion (Intermedijer 46a) osim što je 3-hloro-4-(6-metil-4,8-diokso1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehid (Intermedijer 81b) korišćen umesto 2-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehida (Intermedijer 46b). ESI-MS 365/367 [M+H]<+>.
Intermedijer 81b: 3-hloro-4-(6-metil-4,8-diokso-1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehid
[0417] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso-1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehidom (intermedijer 46b) osim što je (2-hloro-4-formilfenil)borna kiselina korišćena umesto (3-fluoro-4-formilfenil)borne kiseline. ESI-MS 313/315 [M+H20+H]<+>.
Primer 82: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( (1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid
[0418]
[0419] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način kao (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il )fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3- azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 82a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3) -azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c), a trans-4-amino-1-metilcikloheksanol je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen prep. HPLC (Metoda 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je dobijeno kao TFA so.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.37 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.09 (d,1H), 7.57 (d, 2H), 7.23 (d, 2H), 7.08 (s, 2H), 4.33 (s, 1H), 3.81 (bs, 1H), 3.39 (d, 2H), 2.62 - 2.56 (m, 2H), 2.00 (bs, 2H), 1.88 - 1.76 (m, 8H), 1.67 - 1.53 (m, 4H), 1.50 - 1.43 (m, 4H), 1.30 (t, 1H), 1.17 (s, 3H), 0.76 (bs, 1H). (UPLC-MS) tR0.61 min; ESI-MS 525 [M+H]<+>.
Intermedijer 82a: 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina
[0420] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) nikotinskom kiselinom (Intermedijer 2c) osim što je metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) nikotinat (Intermedijer 82b) korišćen umesto (1R,5S)-tercbutil 1-(4-(6-amino-5-(metoksikarbonil)piridin-3-il)fenil)-3-azabiciklo[3.1.0 ]heksan-3-karboksilata (Intermedijer 1d). (UPLC-MS) tR0.46 min; ESI-MS 414 [M+H]<+>.
Intermedijer 82b: metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinat
[0421] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa metil 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2Hpiran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1 -il)fenil)nikotinatom (Intermedijer 14b) osim što je 4,4-difluorocikloheksanon korišćen umesto dihidro-2H-piran-4(3H)-ona.(UPLC-MS) tR0.72 min; ESI-MS 428 [M+H]<+>.
Primer 83: 2-amino-N-(3-(2-hidroksipropan-2-il)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2Hpiran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid
[0422]
[0423] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način kao (1R,5S)-terc-butil 1-(4-(6-amino-5-(((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)karbamoil)piridin-3-il )fenil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat (Intermedijer 1b) osim što je 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il) )-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinska kiselina (Intermedijer 14a) korišćena umesto 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(tert- butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinske kiseline (Intermedijer 1c) i 2-(3-aminobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)propan-2-ol hidrohlorid (Intermedijer 83a) je korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanola. Sirovi proizvod je prečišćen prep.HPLC (Metod 1a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.98 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.57 (d, 2H), 7.20 (d, 2H), 7.18 (s, 2H), 4.15 (s, 1H), 3.85 - 3.79 (m, 2H), 3.38 (bs, 1H), 3.08 (bs, 1H), 2.55 - 2.25 (m, 5H), 1.90 (s, 6H), 1.89 - 1.71 (m, 3H), 1.39 - 1.22 (m, 3H), 1.06 (s, 6H), 0.75 (bs, 1H). (UPLC-MS) tR0.59 min; ESI-MS 503 [M+H]<+>.
Intermedijer 83a: 2-(3-aminobiciklo[1.1.1]pentan-1-il)propan-2-ol hidrohlorid
[0424] Terc-butil (3-(2-hidroksipropan-2-il)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)karbamat (Intermedijer 83b, 298 mg, 1,235 mmol) je mešan u etanolnom rastvoru zasićenom HCl (3,8 mL) ) tokom 29 h na ST. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao sirova hidrohloridna so koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja. 1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.51 (s, 3H), 1.78 (s, 6H), 1.03 (s, 6H).
Intermedijer 83b: terc-butil (3-(2-hidroksipropan-2-il)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)karbamat
[0425] U rastvor metil 3-((terc-butoksikarbonil)amino)biciklo[1.1.1]pentan-1-karboksilata (679 mg, 2,81 mmol) u anhidrovanom THF dodat je u kapima 3M metil magnezijum bromid u THF (4,13 mL, 12). mmol) na -78°C u atmosferi argona. Reakciona smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu i mešana je 4 h, a zatim polako razblažena sa 2 mL MeOH pod kontrolisanom temperature. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i sirovi proizvod je prečišćen normalno faznom hromatografijom (Metoda 2a) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. (UPLC-MS) tR0,22 min; ESI-MS 142 [M+H]<+>ukazuje na gubitak BOC grupe u uslovima jonizacije.
1
Primer 84: 2-amino-N-cikloheksil-5-(3-(morfolin-4-karbonil)fenil)nikotinamid
[0426]
[0427] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-(piperidin-1-il)propoksi)fenil)nikotinamidom (Primer 43) osim što je 3-(morfolin-4-). karbonil)fenilborna kiselina je korišćena umesto 1-(3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)propil)piperidina. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.45 (s, 1H), 8.38 (d, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.52 (t, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.20 (s, 2H), 3.85 - 3.70 (m, 1H), 3.70 - 3.50 (m, 8H), 1.90 - 1.80 (m, 2H), 1.80 - 1.70 (m, 2H), 1.70 - 1.55 (m, 1H), 1.35 - 1.29 (m, 4H), 1.28 - 1.05 (m, 1H). (HPLC-MS) tR1.52 min; APCI-MS 409 [M+H]<+>.
Primer 85: 2-amino-5-(3-hloro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4 – metilcikloheksil) nikotinamid
[0428]
[0429] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(3-fluoro-4-(((R)-2-metilpirolidinil)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4 -hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamidom (Primer 46) osim što je (R)-2-(3-hloro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1,3,6 ,2-dioksazaborokan-4,8-dion (Intermedijer 85a) korišćen umesto (R)-2-(3-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil -1,3,6,2-dioksazaborokan-4,8-diona (Intermedijer 46a). (UPLC-MS) tR0.79 min; ESI-MS 457/459 [M+H]<+>.
Intermedijer 85a: (R)-2-(3-hloro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1,3,6,2-dioksazaborokan-4,8-dion [0430] Naslovljeno jedinjenje je pripremljeno na analogan način (R)-2-(3-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1,3,6,2- dioksazaborokan-4,8-dion (Intermedijer 46a) osim što je 2-hloro-4-(6-metil-4,8-diokso1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehida (Intermedijer 85b) korišćen umesto 2-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehida (intermedijer 46b). ESI-MS 365/367 [M+H]<+>.
Intermedijer 85b: 2-hloro-4-(6-metil-4,8-diokso-1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehid
[0431] Naslovljeno jedinjenje je pripremljeno na analogan način sa 2-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso-1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehidom (Intermedijer 46b) osim što je (3- hloro-4-formilfenil) borna kiselina korišćena umesto (3-fluoro-4-formilfenil) borne kiseline. ESI-MS 591 [2M+H]<+>.
Primer 86: 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1r,4R) -4-hidroksi-1-metilcikloheksil) nikotinamid
2
[0433] U rastvor 2-amino-5-bromo-N-((1r,4r)-4-hidroksi-1-metilcikloheksil)nikotinamida (Intermedijer 86a, 100 mg, 0,152 mmol) u dioksanu (3 mL) je dodat (R. )-6-(1-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)etil)-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan (Intermedijer 86b, 100 mg, 0,152 mmol), PdCl2(dppf) (5,57 mg, 7,62 mmol) i 2N aq. NaOH (0,152 mL, 0,305 mmol) u atmosferi azota na ST. Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 2 h, a zatim razblažena sa EtOAc i vodom. Posle dve ekstrakcije sa EtOAc, kombinovani organski slojevi su isprani zas. aq. rastvor NaHCO3i rastvorom soli, redom. Posle sušenja preko MgSO4, filtriranja i koncentracije pod sniženim pritiskom, sirovi proizvod je prečišćen normalno faznom hromatografijom (Metoda 2b) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.37 (s, 1H), 8.05 (bs, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.62 (bs, 2H), 7.38 (bs, 2H), 6.92 (bs, 2H), 4.62 (s, 4H), 4.47 (s, 1H), 3.48 3.42 (m, 1H), 3.40 - 3.35 (m, 4H), 3.27 - 3.20 (m, 2H), 3.15 (bs, 1H), 1.60 (m, 2H), 1.65 - 1.16 (m, 13H). (UPLC-MS) tR0.52 min; ESI-MS 451 [M+H]<+>.
Intermedijer 86a: 2-amino-5-bromo-N-((1r,4r)-4-hidroksi-1-metilcikloheksil)nikotinamid
[0434] Naslovljeno jedinjenje je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-bromo-N-((1r,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid intermedijerom 3c) osim što je trans-4-amino-4-metilcikloheksanol korišćen umesto trans-4-aminocikloheksanol. (UPLC-MS) tR0.70 min; ESI-MS 328/330 [M+H]<+>.
Intermedijer 86b: (R)-6-(1-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)etil)-2-oksa-6-azaspiro [3.3]heptan [0435] Naslovljeno jedinjenje je pripremljeno na analogan način sa 1-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-4-izopropilpiperazinom (intermedijer 8a) osim što je (R)-6-(1-(4-bromofenil)etil)-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan (Intermedijer 3b) korišćen umesto 1-(4-bromo-3-fluorofenila) )-4-izopropilpiperazina (Intermedijer 8b). (UPLC-MS) tR0.70 min; ESI-MS 330 [M+H]<+>.
Primer 87: 2-amino-N-((lr,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(2-metil-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil )fenil)nikotinamid [0436]
[0437] Naslovljeno jedinjenje je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-5-(3-fluoro-4-(((R)-2-metilpirolidinil)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4 -hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamidom (Primer 46) osim što je (R)-6-metil-2-(2-metil-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-1,3,6 ,2-dioksazaborokan-4,8-dion (Intermedijer 87a) korišćen umesto (R)-2-(3-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil -1,3,6,2-dioksazaborokan-4,8-diona (Intermedijer 46a). (UPLC-MS) tR0.65 min; ESI-MS 437 [M+H]<+>.
Intermedijer 87a: (R)-6-metil-2-(2-metil-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-1,3,6,2-dioksazaborokan-4,8-dion
[0438] Naslovljeno jedinjenje je pripremljeno na analogan način sa (R)-2-(3-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-6-metil-1,3,6,2- dioksazaborokan-4,8-dionom (Intermedijer 46a) osim što je 3-metil-4-(6-metil-4,8-diokso1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehid (Intermedijer 87b) korišćen umesto 2-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehida (Intermedijer 46b). ESI-MS 345 [M+H]<+>.
Intermedijer 87b: 3-metil-4-(6-metil-4,8-diokso-1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehid
[0439] Naslovljeno jedinjenje je pripremljeno na analogan način sa 2-fluoro-4-(6-metil-4,8-diokso-1,3,6,2-dioksazaborokan-2-il)benzaldehid (intermedijer 46b) osim što je (4- formil-2-metilfenil)borna kiselina korišćena umesto (3-fluoro-4-formilfenil)borne kiseline..ESI-MS 568 [2M+H2O+H]<+>.
Primer 88: 2-amino-N-cikloheksil-5-(3-(4-(2-hidroksietil)piperazin-1-karbonil)fenil)nikotinamid
[0440]
[0441] Naslovljeno jedinjenje je pripremljeno na analogan način sa 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-(piperidin-1-il)propoksi)fenil)nikotinamidom (Primer 43) osim što je 3-(4-(2). -hidroksietil)piperazin-1-karbonil)fenilborna kiselina korišćena umesto 1-(3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)propil )piperidina. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.44 (s, 1H), 8.38 (d, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.51 (t, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.19 (s, 2H), 4.44 (t, 1H), 3.85 - 3.70 (m, 1H), 3.70 -3.58 (m, 2H), 3.58 - 3.48 (m, 2H), 3.48 - 3.35 (m, 2H), 2.50 - 2.32 (m, 6H), 1.90 - 1.80 (m, 2H), 1.80 - 1.70 (m, 2H), 1.70 - 1.55 (m, 1H), 1.35 - 1.29 (m, 4H), 1.28 - 1.05 (m, 1H). (HPLC-MS) tR1.31 min; APCI-MS 452 [M+H]<+>.
Primer 89 Soli, amorfni oblici i kristalni polimorfi i pseudopolimorfi jedinjenja iz Primera 34:
[0442]
A) Slobodna forma Modifikacije HA:800 g 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2Hpiran-4-il)-3-azabiciklo[ 3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamida u slobodnoj formi rastvoren je u 3 litra acetona. Dobijeni rastvor je mešan na 50°C i postepeno je dodato 2 litra vode. Smeša je mešana na 50°C tokom 30 min, a zatim je postepeno dodato 4 litra vode. Smeša je mešana na 50°C tokom 2 sata i ohlađena na 22°C tokom perioda od 2 sata. Čvrsta supstanca je odvojena filtracijom pod vakuumom, isprana dva puta sa jednom litrom 1:2 aceton:voda, i sušena na 45°C tokom 24 sata bez vakuuma. Oko 660 g 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il) )-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid u slobodnoj formi Modifikacije HAje dobijena kao bela čvrsta supstanca. Slobodna forma Modifikacije HAje monohidrat.
Slika 3 prikazuje XRPD dijagram za slobodnu formu Modifikacije HA.U sledećoj tabeli A, odgovarajući pikovi i njihove 2Theta vrednosti („Uglovi“) su detaljno dati, zajedno sa njihovim relativnim intenzitetima (sve 2Theta vrednosti su /-0.2):
Tabela A:
4
Slika 4 prikazuje dijagram diferencijalne skenirajuće kalorimetrije (DSC) otvorene vijale, slobodne forme Modifikacije HA. Prvi endotermni pik na DSC dijagramu odgovara dehidrataciji slobodnog oblika Modifikacije HA. Drugi endotermni pik odgovara topljenju anhidrovanog oblika koji je rezultat dehidracije.
Slika 5 prikazuje dijagram termogavimetrijske analize (TGA) slobodne forme Modifikacije HA. TGA rezultat pokazuje da slobodna forma Modifikacije HAsadrži oko 3,5% vode po masi, što odgovara oko 1 molekulu vode.
Slika 6 je FT-IR dijagram slobodne forme Modifikacije HA. Pronađeni pikovi su: Talasni broj (izražen u cm<-1>): 3481 (w), 3328(m), 2931 (m), 2886(w), 2863(w), 2787(w), 1632(s), 1617(m), 1584(w), 1524(s), 1459 (s), 1242(m), 1090(m), 885(m), 769(m). (s=jak, m=srednji, w=slab).
B) Slobodna forma Modifikacije A: 0,5 g 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2Hpirana) -4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid u slobodnoj formi Modifikacije HAje dodato u 3,5 mL acetona. Smeša je mešana na 40°C tokom 1 sata i ohlađena na 22 °C. Čvrsta supstanca je filtrirana i sušena na 40°C tokom 12 sati. Dobijeno je oko 0,4 g slobodne forme Modifikacije A kao bela čvrsta supstanca.
Slika 7 prikazuje XRPD dijagram slobodne forme Modifikacije A. Sledeća tabela B detaljno definiše odgovarajuće pikove i njihove 2Theta vrednosti („Uglove“), zajedno sa njihovim relativnim intenzitetima (sve 2Theta vrednosti su /- 0,2):
Tabela B:
Slika 8 prikazuje dijagram diferencijalne skenirajuće kalorimetrije (DSC) otvorene vijale modifikacije A.
Slika 9 prikazuje dijagram termogavimetrijske analize (TGA) slobodne forme modifikacije A. TGA rezultat sugeriše da je modifikacija slobodne forme A anhidrat.
Slika 10 je FT-IR dijagram slobodne forme Modifikacije A. Pronađeni pikovi su: Talasni broj (izražen u cm<-1>): 3480(w), 3436(w), 3401 (w), 3301 (m), 2944(w), 2864(w), 2805(w), 1644(s), 1615(m), 1583(w), 1520(s), 1459(m), 1247(m), 1098(m), 883(m), 801 (m). (s=jak, m=srednji, w=slab)
C) Anhidrat u slobodnoj formi: 100 mg 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran4-) il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamida u slobodnoj formi Modifikacija HAje izložena atmosferi N2na 25°C tokom 6 sati. Dobijena čvrsta supstanca je karakterisana XRPD u struji N2. Čvrsta supstanca je u slobodnoj formi anhidrat 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-pirana)-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan1-il)fenil)nikotinamida.
Slika 18 prikazuje XRD dijagram anhidrovanog oblika.
D) Trihidrat u slobodnom obliku: 100 mg 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran4-) il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamida u slobodnom obliku Modifikacija HAje izloženo relativnoj vlažnosti od 80% na 25°C preko noći. Čvrsta supstanca je karakterisana XRPD-om pri 80% relativne vlažnosti na 25 °C. Čvrsta supstanca je trihidrat u slobodnom obliku 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-pirana) -4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid.
Slika 19 prikazuje XRD dijagram trihidratnog oblika.
E) Fumaratna so Modifikacije HA: U 3,03 g 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamida u slobodnom obliku dodato je 30 mL smeše aceton:voda (80:20, v/v). Smeša je mešana na 50°C 30min i dobijen je bistar rastvor. U rastvor je polako dodat rastvor od 708,4 mg fumarne kiseline u 15 mL smeše aceton:voda (80:20, v/v). Dobijena suspenzija je postepeno ohlađena na 25°C i mešana 12 sati. Čvrsta supstanca je odvojena filtracijom pod vakumom, jednom isprana sa 10 mL acetona i izložena ambijentalnom okruženju (oko 25°C, 50% relativne vlažnosti) preko noći. 3,3 g 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il) -3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid fumaratne soli Modifikacije HAje dobijeno kao bela čvrsta supstanca. Fumaratna so Modifikacija HAje dihidrat.
Slika 11 prikazuje XRPD dijagram fumaratne soli Modifikacije HA.
Sledeća tabela C detaljno definiše odgovarajuće pikove i njihove 2Theta vrednosti („Uglove“), zajedno sa njihovim relativnim intenzitetima (sve 2Theta vrednosti su /- 0,2):
Tabela C
Slika 12 prikazuje DSC dijagram fumaratne soli Modifikacije HA. Široki endotermni pik pre 150°C odgovara dehidrataciji fumaratne soli Modifikacije HA.
Slika 13 prikazuje dijagram termogavimetrijske analize (TGA) fumaratne soli Modifikacije HA. Reuzultat TGA pokazuje da fumaratna so Modifikacija HAsadrži oko 5,9% vode po masi, što odgovara oko 2 molekula vode.
Slika 14 je FT-IR dijagram fumaratne soli Modifikacije HA. Pronađeni pikovi su: Talasni broj (izražen u cm<-1>): 3241(m), 2951(w), 2867(w), 1669(m), 1538(m), 1456(w), 1355(m), 1249(m), 1087(w), 979(w), 885(w), 797(w). (s=jak, m=srednji, w=slab).
Slika 15 prikazuje DVS dijagram fumaratne soli Modifikacije HAna 25 °C. Iz ovoga se može zaključiti da je fumaratna so Modifikacije HAfizički stabilna najmanje od 0% do 90% relativne vlažnosti na 25 °C.
Slika 16 prikazuje DVS dijagram fumaratne soli Modifikacije HAna 40 °C. Iz ovoga se može zaključiti da je fumaratna so Modifikacija HAfizički stabilna najmanje od 10% do 90% relativne vlažnosti na 40 °C. Treba napomenuti da je fumaratna so Modifikacije HAstabilna u širem opsegu vlažnosti od polimorfnog slobodnog oblika ( podaci nisu prikazani).
F) Amorfni oblik fumaratne soli (varijanta 1): Dodato je 500 mg 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3- (tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabi-ciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamidske fumaratne soli Modifikacije HAu 10 mL etanola na 25°C da bi se formirao bistar rastvor. Zatim je u rastvor dodato 3 mL heptana. Istaložena je bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je odvojena filtracijom pod vakuumom i osušena na 40°C pod vakuumom preko noći.
380 mg amorfnog oblika fumaratne soli 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2Hpiran-) 4-il)-3-azabi-ciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamida je dobijen kao bela čvrsta supstanca. Amorfna forma pokazuje staklenu tranziciju na oko 143°C kada se analizira moduliranom DSC pri brzini zagrevanja od 2K/min, amplituda temperatura od 1K, period 60 sekundi.
G) Amorfni oblik fumaratne soli (varijanta 2): 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-) piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-nikotinamid fumaratna so Modifikacije HAje zagrevana pomoću DSC na 150°C pri 10K/min, a zatim ohlađena na -20°C pri 20K /min. Dobijeni materijal je bio amorfni oblik 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il) )-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid fumaratne soli koji je bela čvrsta supstanca i pokazuje staklenu tranziciju na oko 78°C kada se analizira pomoću DSC pri brzini zagrevanja od 10K/min .
H) Fosfatna so: U 3,01g slobodnog oblika 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran4-) il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamida je dodato 30 mL aceton:voda (75:25, v/v). Dobijena smeša je mešana na 50°C 30min i dobijen je bistar rastvor. U rastvor je polako dodat rastvor od 695,2 mg u 10 mL aceton:voda (95:5, v/v). Dobijena suspenzija je postepeno ohlađena na 25°C i mešana 24 sata. Dodato je 1,5 mL vode u suspenziju. Smeša je mešana na 50°C tokom 12 sati i polako ohlađena na 25 °C. Čvrsta supstanca je odvojena filtracijompod vakuumom, jednom isprana sa 10 mL aceton:voda (90:10, v/v) i izložena ambijentalnim uslovima (oko 25°C, 50% RH) preko noći. 2,7 g 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il) -3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid fosfatne soli je dobijeno kao bela čvrsta supstanca.
Slika 17 prikazuje XRPD dijagram fosfatne soli.
Sledeća tabela D detaljno definiše odgovarajuće pikove i njihove 2Theta vrednosti („Uglove“), zajedno sa njihovim relativnim intenzitetima (sve 2Theta vrednosti su /- 0,2):
Tabela D
FeSSIF [0443]
FaSSIF
[0444]
FaSSIF priprema pufera
[0445]
SGF
[0446]
[0447] J) Laktatna so, so vinske kiseline i so jabučne kiseline jedinjenja A mogu se dobiti analognim postupcima predstavljenim gore.
[0448] K) Različiti solvati se mogu dobiti iz mnogih soli i oblika soli jedinjenja A pomenutih gore (detalji nisu prikazani).
[0449] Gde je pomenuto u prethodnim primerima, XRPD, TGA, DSC, FT-IR i DVS podaci su dobijeni korišćenjem sledećih metoda:
a) TGA metod
Instrument TA Discovery, TA Discovery, New Castle, DE, USA
Temperaturni opseg 30 do 300°C
Brzina skeniranja 10°C/min
Protok azota 20 mL/min
Masa uzorka ~2-10 mg
b) DSC metod
Instrument TA Discovery
Opseg temperature 30 do 250 ili 300°C
Brzina skeniranja 10°C/min
Protok azota 50 mL/min
Masa uzorka ~2 mg
c) XRPD metod: Svi XRPD dijagrami su dobijeni u režimu refleksije.
(i) XRPD metoda 1 (sl. 3, 11, 17)
Instrument Bruker D8 Advance (Bruker, Bruchsal, Germany))
Detektor LYNXEYE (1D režim), otvoreni ugao: 1.996°
Radijacija CuKa (0.15406 nm)
Monohromator Niklov filter
Snaga generatora X zraka 40 kV, 40 mA
Veličina koraka, rezolucija 0.041 stepen
Opseg skeniranja 2° do 45° (2 theta vrednost)
Vreme skeniranja 36 min
Primarni prorezi: fiksna osvetljena veličina uzorka 5 mm, sekundarni prorez: 5 mm, aksijalni soler: 2,5 ° (ii) XRPD metoda 2 (slika 7)
Instrument Bruker D8 Advance
Detector LYNXEYE (1D režim), otvoreni ugao: 1.996°
Zračenje CuKa (0.15406 nm)
Monohromator Niklov filter
Snaga generatora X zraka 40 kV, 40 mA
Veličina koraka, rezolucija 0,041 stepen
Opseg skeniranja 2° do 45° (2 theta vrednost)
Vreme skeniranja 330 sekundi
Primarni prorezi: fiksni osvetljeni uzorak veličine 5 mm, sekundarni prorez: 5 mm, aksijalni soler: 2,5 XRPD metod 3 (Sl. 18, 19)
Instrument Bruker D8 Advance XRPD sa Cry-RH komorom (Bruker, Bruchsal, Germany)
Detektor VANTEC-1 (1D detektor)
Radijacija CuKa (0.15406 nm)
Monohromator Niklov filter
Snaga generatora X zraka 40 kV, 40 mA
Veličina koraka, rezolucija 0.0165 stepeni
Opseg skeniranja 2° do 45° (2 theta vrednost)
Vreme skeniranja 17 min
Divergentni prorez: V12, prorez protiv rasejanja: 10,0 mm, prorez detektora: 17,43 mm, primarni soler prorez: 2. °, sekundarni prorez: 2,5°
d) DVS
Instrument Advantage (Sistemi za merenje površine, London, UK)
Masa uzorka ~10 mg
Temperatura 25°C
dm/dt 0.002%/min
e) FT-IR
Thermo Fisher Nicolet 6700 sa prigušenom ukupnom refleksijom (ATR), Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA
Biohemijski testovi (primeri 90 i 91)
[0450] Za sve biohemijske testove, humani rekombinantni proteini su eksprimirani i prečišćeni iz ćelija insekata transficiranih bakulo virusom. Konstrukti su sadržali GS-domen i kinazni domen divljeg tipa ALK2 (aa172-499), ALK2 FOP mutant (aa172-499 R206H), ALK3 (aa198-525), ALK5 (aa162-503) i ALK2 (aa162-503) i AL68 ).
Primer 90: In vitro inhibicija enzima korišćenjem biohemijskog testa autofosforilacije (test aktivnosti ADPGlo kinaze zasnovan na luminiscenciji) – „ADPGlo test
[0451] Panel selektivnosti kinaze koji meri autofosforilaciju korišćenjem ADP-Glo™ kinaznog testa (Promega, V9101) je postavljen za divlji tip ALK2 (aa172-499) i ALK3 (aa198-525).
[0452] Testovi su izvedeni u mikrotitarskim pločama za analizu sa 384 bunarčića male zapremine u konačnoj reakcionoj zapremini od 6 ul. Krive doze-odgovor su generisane inkubacijom 10 nM svake kinaze u 50 mM Hepes pH 7,5, 0,02% Tween 20, 0,02% BSA, 1 mM DTT, 10µm Na3VO4, 10 mM β-glicerolfosfata, 1 mM MgCl2,12mM i 15µm ATP tokom 60 minuta na 32°C u prisustvu ili odsustvu jedinjenja razblaženog u DMSO. Količina generisanog ADP je mera aktivnosti kinaze i kvantifikovana je korišćenjem ADP-Glo™ kinaznog testa (Promega) prema uputstvima proizvođača. ADP se pretvara u ATP dodavanjem 3 ul ADP-Glo™ reagensa i inkubacijom na 32°C tokom 60 min. ATP se zatim konvertuje u bioluminiscentni signal dodavanjem reagensa za test od 6ul luciferaze (pufer za detekciju kinaze supstrat za detekciju kinaze (Promega)) i dalje inkubacije na 32°C tokom 60 min. Za merenje luminiscencije korišćen je PHERAstar™ Multilabel Reader u intervalu merenja od 0,1 sekunde (optički modul za merenja luminiscencije u opsegu talasnih dužina od 230 nm do 750 nm). Luminescentni signal pozitivno korelira sa aktivnošću kinaze.
[0453] Specifične aktivnosti su prikazane u tabeli ispod.
1
Primer 91: In vitro inhibicija enzima korišćenjem biohemijskog testa fosforilacije peptida - "Caliper test"
[0454] Panel selektivnosti kinaze koji meri fosforilaciju peptida supstrata je postavljen za divlji tip ALK2 (aa172-499), ALK2 FOP mutant (aa172-499 R206H), ALK1 (aa166-493), ALK2-5036 i ALK6 (aa168-495). Tehnologija koja se koristi za opisani test zasniva se na razdvajanju i kvantifikaciji supstrata i proizvoda u električnom polju. U toku kinazne reakcije peptidni supstrat je fosforilisan kinazom. Prenos fosfatnog ostatka takođe izaziva uvođenje dva dodatna negativna naelektrisanja, a samim tim i promenu neto naelektrisanja fosfopeptida u poređenju sa nefosforilisanim peptidom. Zbog ove razlike u naelektrisanju, fosforilovani i nefosforilovani peptidi migriraju različitim brzinama u električnom polju.
[0455] U primenjenoj metodi, ovo razdvajanje se odvija unutar čipa koji sadrži složen kapilarni sistem za istovremenu analizu 12 uzoraka („12-sipper chip“, Caliper Technologies Corp., Mountain View, USA). Da bi se omogućila detekcija i kvantifikacija peptida u kapilarnom sistemu, peptidi nose fluorescentnu oznaku (fluorescein). Sa ovom oznakom, peptidi se mogu kvantifikovati intenzitetom fluorescencije preko instrumenta lasera i sistema za detekciju (LC3000, Caliper Life Sciences).
[0456] Testovi su izvedeni u mikrotitarskim pločama za analizu sa 384 bunarića male zapremine u konačnoj reakcionoj zapremini od 9 ul. Krive doze-odgovor su generisane inkubacijom 10 nM svake kinaze zajedno sa 2µm fluorescentno obeleženog supstratnog peptida 5-Fluo-Ahx-KKIQAEEN-T-IDEIENKK-amida (10 mM matičnog rastvora u DMSO) u 50 mM Hepes pH 7.5, Tween 20, 0,02% BSA, 1 mM DTT, 10 µm Na3VO4, 10 mM β-glicerolfosfata, 1 mM MgCl2, 12 mM MnCl2(ALK1 i ALK6 7mM) i 15 µm ATP jedinjenja u trajanju od 60 minuta na 30°C u prisustvu ili odsustvu jedinjenja razblaženog u DMSO.
[0457] Reakcija kinaze je prekinuta dodavanjem 15 ul STOP pufera (100 mM HEPES pH 7,5, 5% DMSO, 0,1% reagensa za oblaganje Caliper, 10 mM EDTA i 0,015% Brij35.
[0458] Ploče sa prekinutim reakcijama kinaze prenete su na Caliper LC3000 radnu stanicu (Caliper Technologies Corp., Mountain View, USA) radi čitanja. Relativna količina fosforilisanog peptida r je izračunata korišćenjem visine pika supstrata, s, i pika proizvoda, p: r = p/(p+s).
[0459] Specifične aktivnosti su prikazane u tabeli ispod.
2
Primer 92: BMP signalni reporter gen test
[0460] Ćelijska linija hepatocelularnog karcinoma humane jetre (HuH7) stabilno transfektovana sa reporterskim plazmidom koji se sastoji od elementa BMP odgovora (BRE) iz Id1 promotora fuzionisanog sa reporterskim genom luciferaze generisana je lentivirusnom transdukcijom.
[0461] Ćelije su održavane u DMEM (GIBCO # 41965 visoka glukoza plus L-glutamin), 10% FCS (Amimed # 2-01F10-I), 1% Pen/Strp (Amimed # 4-01F00) i 5 ug/ml blastidicina (InvivoGen # ant-bl-1) na 37°C, 5% CO2. Testovi su izvedeni na polistirenskim mikrotitarskim pločama sa 384 bunarića (tretirane ćelijskom kulturom) sa sterilnim poklopcem. Ćelije su istrošene izmenom medijuma u medijumu bez blasticidina i FCS 16 h pre testa. Pre testa, ćelije su odvojene od boce za skladištenje korišćenjem tripsina/EDTA i prebrojane. Pripremljena je suspenzija ćelija u istom medijumu bez blasticidina i FCS. 2 X 10<4>ćelija u ukupnoj zapremini od 40 ul dodato je u svaki bunarić ploče koja već sadrži serijska razblaženja svakog jedinjenja u DMSO (konačna koncentracija DMSO 0,5%). Ćelije i jedinjenje se inkubiraju 1 h na 37°C, 5% CO2pre stimulacije sa 5 ul/bunariću rekombinantnog BMP6 (R&D Sistems # 507-BP/CF) u konačnoj koncentraciji od 100 ng/ml. Ploče za ispitivanje su inkubirane još 5 sati na 37°C, 5% CO2pre merenja nivoa luciferaze.
[0462] Količina izražene luciferaze je kvantifikovana korišćenjem Steady-Glo® Luciferase Assay Sistem (Promega # E2520). 5 ul Steady-Glo® reagensa je dodato u svaki bunarić, uzorci su pomešani kroz snažno protresanje ploče pre merenja luminesecencije u PHERAstar™ Multilabel Reader-u u trajanju od 1 sekunde po bunariću (optički modul za merenje luminiscencije na 230 nm do opseg talasnih dužina od 750 nm).
[0463] Dalje specifične aktivnosti jedinjenja prema pronalasku su opisane u tabeli ispod.
4
Primer 93: In vivo efikasnost u pedijatrijskom FOP (fibrodisplasia ossificans progressiva) modelu miša
[0464] Sveprisutna heterozigotna ekspresija FOP koja izaziva mutant Alk2 R206H receptora BMP tipa I kod miševa rezultira perinatalnom smrtnošću (Chakkalakal et al., 2012).
[0465] Za proučavanje postnatalne uloge Alk2(R206H) u juvenilnom organizmu kao pretkliničkog modela miša za FOP, inducibilnog Alk2(R206H) mutantnog miša (Prof. D. Goldhamer, UConn, ASBMR apstrakt, 2013) potrebna je umetnuta floksirana stop kaseta uzvodno od mutantnog egzona, što čini ekspresiju mutantnog alela zavisnom od Cre-rekombinaze. Oni su ukršteni sa Rosa26-CreERt2 miševima, omogućavajući vremenski i prostorno definisanu heterozigotnu ekspresiju Alk2 (R206H).
[0466] Ovde su korišćeni sveprisutni inducibilni Alk2(R206H) heterozigotni miševi sa tamoksifen (tam)-inducibilnom CreER-loxP tehnologijom. Uspešna indukcija ekspresije Alk2(R206H) se postiže nakon davanja tamoksifena mužjaku i ženki Alk2(R206H) starim 1 nedelju; Rosa26-CreERt2 miševi.
[0467] Pojava FOP-a se indukuje kroz duboku povredu mišića lokalnom intramuskularnom (im.) injekcijom kardiotoksina (CTX) i istovremenom intramuskularnom injekcijom adenovirusa da bi se stvorilo lokalno izbijanje FOP zavisno od Alk2(R206H). CTX indukuje povredu skeletnih mišića kroz inhibiciju Ca/Mg-ATPaze u ćelijskoj membrani i indukciju oslobađanja kalcijuma iz sarkoplazmatskog retikuluma.
[0468] Na početku eksperimenta i dnevno nakon toga je merena telesna težina muške i ženske štenadi starosti jedne nedelje Alk2(R206H); Rosa26-CreERt2. Svi štenci su tretirani jednom dnevno potkožno (sc.) sa 20 mg/kg tamoksifena (baza bez tamoksifena (Sigma T5648), rastvorenog u 10% apsolutnog etanola, 90% suncokretovog ulja (Sigma S5007) na 8 mg/ml) počevši od prve nedelje starosti pa narednih 10 dana.
[0469] Trećeg dana injekcije tamoksifena, svi štenci su bili podvrgnuti lokalnoj povredi mišića jednom intramuskularnom injekcijom 100 ul adenovirusa kardiotoksina (CTX) u gastroknemiusni mišić desne zadnje noge vodeći računa da se ne ubrizga u krvne sudove a da se iglom ne dotiču kosti. U tu svrhu, 90 ul adenovirusa (Ad-GFP-2AiCre, kat. br. 1772, Vector Biolabs; Titar: 1 X 10<10>PFU (jedinice koje formiraju plak)/mL) je pomešano sa 10 µl osnovnog rastvora kardiotoksina od 100 µm (pripremljenog iz Cardiotok-a). , kataloški broj L8102, latoksan ili kardiotoksin, kat. br. C9759, Sigma, korišćenjem sterilnog fiziološkog rastvora). Životinje su anestezirane inhalacijom male doze izoflurana, desna zadnja noga je obrijana i koža dezinfikovana betaseptikom pre intramuskularne injekcije, što je urađeno polako i pažljivo pomoću insulinskog šprica.
[0470] Terapijski b.i.d. oralni tretman Alk2(R206H) heterozigotnih miševa je započet 3 dana nakon povrede mišića sa 2, 5, 10 i 25 mg/kg jedinjenja A (jedinjenje iz primera 34 = 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabicikl-lo[3.1.0]heksan-1-il )fenil)nikotinamid) ili odgovarajućeg nosača tokom 6 nedelja. Heterotopska osifikacija je procenjivana svake dve nedelje radiografijom celog tela i zadnjih nogu (Faxitron uređaj) i in vivo mikrokompjuterskom tomografijom (µCT) sa početkom 2 nedelje nakon primene Ad/CTX kod svih miševa.
[0471] Prilikom obdukcije, desne zadnje noge su sakupljene za ex vivo mikro-CT snimanje da bi se odredio pun obim HO. Cela desna zadnja noga sa pričvršćenim mišićem je secirana što je brže moguće i prebačena u 70% etanol na 4°C. Posle 24 h, uzorci su prebačeni u svež 70% etanol za µCT snimanje visoke rezolucije korišćenjem µCT40 uređaja kompanije Scanco Medical (veličina voksela: 16µm, vreme integracije: 250 ms, srednja rezolucija, 55 E(kVp), 145 µA, režim: kontinuirana rotacija konusnog snopa, threshold 275, Gauss-filter: Sigma 0,7, podrška 1). Određena je ukupna zapremina (mm<3>) ektopične kosti zadnje noge. Rezultati su prikazani na slici 1. Slika pokazuje da jedinjenje A (jedinjenje iz primera 34) potiskuje zapreminu kosti desne zadnje noge ex vivo.
[0472] Da bi se istražio efekat jedinjenja A (jedinjenje iz primera 34) na progresiju heterotopične osifikacije nakon pokretanja procesa, Alk2(R206H) heterozigotnim miševima je na sličan način ubrizgan adenovirus od 100 ul kardiotoksin (CTX), ali im je dozvoljeno da razviju heterotopičnu kost za 2,5 nedelje. Nakon potvrde formiranja HO posle 2 nedelje, štenad su randomizovana na osnovu prisustva HO, genetske pozadine i pola. Lečenje je započeto 2,5 nedelje nakon povrede nosačem ili 10 mg/kg b.i.d. jedinjenja A i nastavljeno tokom 6 nedelja. Heterotopna osifikacija je procenjivana svake dve nedelje radiografijom celog tela i zadnjih nogu (Faxitron uređaj) i in vivo mikro-kompjuterskom tomografijom (µCT) sa početkom 2 nedelje nakon primene Ad/CTX kod svih miševa.
[0473] Prilikom obdukcije, desne zadnje noge su sakupljene za ex vivo mikro-CT snimanje da bi se odredio pun obim HO. Cela desna zadnja noga sa pričvršćenim mišićem je secirana što je brže moguće i prebačena u 70% etanol na 4°C. Posle 24 h, uzorci su prebačeni u svež 70% etanol za µCT snimanje visoke rezolucije korišćenjem µCT40 uređaja kompanije Scanco Medical (veličina voksela: 16 µm, vreme integracije: 250 ms, srednja rezolucija, 55 E(kVp), 145 µA, režim: kontinuirana rotacija konusnog snopa, threshold 275, Gauss-filter: Sigma 0,7, podrška 1). Određena je ukupna zapremina (mm<3>) ektopične kosti zadnje noge. Rezultati su prikazani na slici 2. Rezultati pokazuju da jedinjenje A (jedinjenje iz primera 34) sprečava progresiju zapremine kosti desne zadnje noge ex vivo.
[0474] Rezultati prikazani na slikama 1 i 2 pokazuju da jedinjenje pronalaska (jedinjenje A) potiskuje heterotopičnu osifikaciju kada se dozira rano nakon povrede mišića i sprečava dalje napredovanje heterotopne osifikacije kod ALK2(R206H) mladunaca miša, u poređenju sa doziranjem nakon što je heterotopsko okoštavanje već počelo.
Primer 94: Heterotopna osifikacija izazvana tenotomijom srednje tačke Ahila kod pacova
[0475] Da bi se testiralo da li su jedinjenja prema pronalasku sposobna da spreče traumom izazvanu heterotopičnu osifikaciju (HO) mekog tkiva, može se koristiti terapeutska efikasnost u modelu jednostrane Ahilove tenotomije srednje tačke kod pacova (Rooney et al., Matrix 12 : 274-281, 1992). U tom cilju, leva Ahilova tetiva 8-nedeljnih ženki Wistar pacova (telesne težine između 190-265 g) je potpuno presečena korišćenjem sterilnog skalpela (oštrica broj 11) pod inhalacionom narkozom izoflurana uz istovremeni analgetički tretman primenom 0,03 mg/ kg buprenorfina 48 sati svakih 10-12 h potkožno. Preventivni oralni tretman sa jedinjenjem prema pronalasku (10 mg/kg kd) ili nosačem (natrijum karboksimetil celuloza:voda:Tween 80, 0,5:99:0,5) se daje tokom 10 nedelja počevši od dana operacije (n = 11- 12 pacova po grupi). Pacovi su smešteni pojedinačno 3-4 dana nakon operacije, a zatim su smešteni u grupe od dve životinje po kavezu na 25°C sa ciklusom svetlo-mrak od 12:12 h i hranjeni su standardnom ishranom za glodare koja sadrži 18,2% proteina i 3,0% masti sa energetskim sadržajem od 15,8 MJ/kg (3890, Provimi Kliba SA) sa hranom i vodom obezbeđenim adlibitum. Efikasnost lečenja se procenjuje longitudinalno snimanjem radiografa operisane distalne noge (Faxitron LX-60 sistem) 4 i 10 nedelja nakon tenotomije. Heterotopni volumen kosti je kvantifikovan in vivo mikrokompjuterskom tomografijom (mikro-CT) pod inhalacionom narkozom izoflurana (vivaCT40 instrument, Scanco Medical AG; rezolucija 17,5 µm) 6 i 9 nedelja nakon operacije.

Claims (17)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I):
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; pri čemu L je veza, (CH2)n, -CH(CH3)-, -O-(CH2)n-, -C(O)-, ili -C(O)-NH-(CH2)n-; n je 1, 2 ili 3; R1je izabran od C3-C7cikloalkila opciono supstituisanog jednom ili više puta sa supstituentom koji je nezavisno izabran od hidroksila, halogena i C1-C3alkila; i premošćeni C5-C10cikloalkil je opciono supstituisan jednom ili više puta sa supstituentom nezavisno izabranim od hidroksila i hidroksi C1-C3alkila; R2i R3su nezavisno izabrani od H, halogena i C1-C3alkila; R4je heterociklični nearomatični prsten koji sadrži N koji opciono sadrži jedan ili više dodatnih heteroatoma izabranih između N, O i S, pri čemu je navedeni prsten zasićeni ili nezasićeni nearomatični prsten ili sistem prstena, koji je 4-, 5-, 6- ili 7-člani monociklični prsten koji sadrži 1, 2 ili 3 heteroatoma(a) izabranih od O, S i N pri čemu je najmanje jedan heteroatom N, 6-, 7-, 8-, 9-, 10-, 11- ili 12-člani biciklični prstenasti sistem koji sadrži 1, 2, 3, 4 ili 5 heteroatoma izabranih od O, S i N pri čemu je najmanje jedan heteroatom N ili 10-, 11-, 12-, 13-, 14- ili 15-člani triciklični prstenasti sistem koji sadrži 1, 2, 3, 4, 5, 6 ili 7 heteroatoma izabrana od O, S i N pri čemu je najmanje jedan heteroatom N; gde N i S takođe mogu opciono biti oksidovani u različita oksidaciona stanja; i prsten može biti spojen, premošćen ili spirocikličan prsten; i gde je navedeni prsten opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7; svaki R7je nezavisno izabran od C1-C3alkila, hidroksiC1-C3alkila, haloC1-C3alkila, C1-C3alkoksija, C1-C3alkila, haloC1-C3alkoksija, C1-C3alkila, C2-C4alkinila, cijanoC1-C3alkila, I (CH2)m-R8; m je 0, 1, 2 ili 3; R8je izaban od 4-, 5- ili 6-članog zasićenog ili nezasićenog nearomatičnog heterocikličnog prstena koji sadrži jedan ili više heteroatoma(a) izabranih od N, O i S, pri čemu je navedeni prsten opciono supstituisan jednom ili više puta sa supstituentom nezavisno izabranim od okso, SO2C1-C3alkila i haloC1-C3alkila; i C3-C6cikloalkil opciono supstituisan jednom ili više puta sa halo.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je R4izabran od NR5R6; 5-člani heterociklični nearomatski prsten koji sadrži N koji opciono sadrži jedan ili više dodatnih heteroatoma izabranih od N, O i S, pri čemu je navedeni prsten opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7i pri čemu je navedenii prsten je vezan za ostatak molekula preko atoma ugljenika u prstenu; i 6-člani heterociklični nearomatični monociklični ili biciklični prsten koji sadrži N koji opciono sadrži jedan ili više dodatnih heteroatoma izabranih od N, O i S, pri čemu je navedeni prsten opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7i pri čemu je navedeni prsten vezan za ostatak molekula preko atoma ugljenika u prstenu; R5i R6zajedno sa atomom N za koji su vezani formiraju 5-člani prsten koji opciono sadrži jedan dodatni heteroatom izabran između N, O i S, opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7; 6-člani prsten koji opciono sadrži jedan dodatni heteroatom izabran između N, O i S, opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7; ili 7-člani spirocikl koji opciono sadrži jedan dodatni heteroatom izabran između N, O i S, opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7.
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili 2, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu R2i R3su vodonik; L je veza; R4je 6-člani heterociklični nearomatični biciklični prsten koji sadrži N koji opciono sadrži jedan ili više dodatnih heteroatoma izabranih između N, O i S pri čemu je navedeni prsten opciono supstituisan jednom ili više puta sa R7i pri čemu je navedeni prsten je vezan za ostatak molekula preko atoma ugljenika u prstenu, R7je (CH2)m-R8; m je 0, 1, 2 ili 3; R8je 6-člani zasićeni ili nezasićeni nearomatični heterociklični prsten koji sadrži jedan ili više heteroatoma izabranih od N, O i S, pri čemu je navedeni prsten opciono supstituisan jednom ili više puta sa supstituentom nezavisno izabranim od okso, SO2C1-C3alkilom i haloC1-C3alkilom.
  4. 4. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 3, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je R1cikloheksil supstituisan jednom sa hidroksilom.
  5. 5. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 3, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je R1biciklo[2.2.2]oktanil supstituisan sa hidroksilom.
  6. 6. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 3, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je R1biciklo[1.1.1]pentanil supstituisan sa hidroksimetilom.
  7. 7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 koje je odabrano od: 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 5-(4-(-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(3-morfolinopropil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-(-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksiciklo- kloheksil) nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-(-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) fenil) nikotinamid; 2-amino-5-(2-fluoro-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-(-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(1-izopropilpirolidin-3-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-(-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1- il) fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-(-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) fenil) nikotinamid; 2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-(-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) fenil) nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(3,3,3-trifluoropropil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(pirolidin-3-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) fenil) nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(3-fluoro-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il ) fenil) nikotinamid; 5-(4-(2-azaspiro[3.3]heptan-2-ilmetil)fenil)-2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-(-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-(-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(oksetan-3-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-(-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabicikl-10 [3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(2-fluoro-4-(piperazin-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-(3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-(-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)nikotinamid; 2-amino-5-(4-(-3-(but-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil) nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(oksetan-3-ilmetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(2-(2,2,2-trifluoroetoksi)etil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) nikotinamid; 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-(piperidin-1-il)propoksi)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-(-3-(1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(- 4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(4-metilpiperazin-1-karbonil)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(3-fluoro-4-(2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil )-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-morfolinofenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-(-3-(2,2-difluoropropil)-3-azabiciklo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-(-3-(2-cijanoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(3-morfolinopropoksi)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(3-(prop-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 5-(4-(-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)-2-hlorofenil)-2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-5-(2-fluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-(-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1 -il)nikotinamid; 2-amino-5-(4-(-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil) nikotinamid; 5-(4-(-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(piperidin-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-(3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il )fenil) nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-(-3-(oksetan-3-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1 -il)fenil) nikotinamid; 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-((2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)karbamoil)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(-3-(2,2,2-trifluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 5-(4-(-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-(-3-hidroksiadamantan-1-il)nikotinamid; 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-(morfolin-4-karbonil)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(2,3-difluoro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil-4-d)-5-(4-(-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(4-metilpiperazin-1-karbonil)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(2-hloro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(3-(2-hidroksipropan-2-il)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-(-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il) )-3-azabiciklo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-cikloheksil-5-(3-(morfolin-4-karbonil)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(3-hloro-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid; 5-(4-(-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-(-4-hidroksi-1-metilcikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(2-metil-4-((2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid; i 2-amino-N-cikloheksil-5-(3-(4-(2-hidroksietil)piperazin-1-karbonil)fenil)nikotinamid; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  8. 8. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 koje je izabrano od: 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)-3-azabiciklo- [3.1.0] heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil )nikotinamid; 5-(4-((S)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil )nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(3-morfolinopropil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( (1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(2-fluoro-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)-N-((lr,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1- il) fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4S)- 4-hidroksicikloheksil) nikotinamid; 2-amino-N-((lr,4r)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(1-izopropilpirolidin-3-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1- il) fenil) nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(3,3,3-trifluoropropil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((lr,4r)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(pirolidin-3-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil) nikotinamid; 2-amino-N-((1R,3S,4R)-3-fluoro-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)- 3-azabiciklo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1s,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 5-(4-(2-azaspiro[3.3]heptan-2-ilmetil)fenil)-2-amino-N-((lr,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1- il) fenil) nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R) )-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(oksetan-3-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) fenil) nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1,0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4S) )-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il) -3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(2-fluoro-4-(piperazin-1-il)fenil)-N-((lr,4r)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il) -3-azabi-ciklo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((lr,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1- il) fenil) nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4-hidroksibiciklo- 10 [2.2.2]oktan-1-il)nikotinamid; 2-amino-N-(3-(hidroksimetil)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) fenil) nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(but-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(1r,4S)-4-hidroksicikloheksil) nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(oksetan-3-ilmetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan- 1-il) fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin-4-il) -3-azabicikllo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(2-morfolinoetil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(2-(2,2,2-trifluoroetoksi)etil)-3-azabicikl – 10 [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3- azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((lr,4R)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-5-(3-fluoro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(3,3,3-trifluoropropil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R)- 4-hidroksicikloheksil) nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(2,2-difluoropropil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R) )-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-cijanoetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4S)- 4-hidroksicikloheksil) nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(prop-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) 1 fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(prop-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)-2-hlorofenil)-2-amino-N-((1r,4R)- 4-hidroksicikloheksil) nikotinamid; 2-amino-5-(2-fluoro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil )nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4-hidroksibiciklo[2.2. 2]oktan-1-il) nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1,0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4S) )-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid; 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil) nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(but-2-in-1-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(1r,4R)-4-hidroksicikloheksil) nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3- azabiciklo [3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1S,5R)-3-(oksetan-3-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(oksetan-3-il)-3-azabiciklo[3.1. 0]heksan-1-il)fenil) nikotinamid; 2-amino-N-cikloheksil-5-(4-((2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)karbamoil)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(1,3-difluoropropan-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-( (1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-(2,2,2-trifluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il) fenil)nikotinamid; 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1R,3R)-3-hidroksiadamantan-1-il)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(oksetan-3-ilmetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan- 1-il) fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1s,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2-fluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4-hidroksibiciklo[2.2. 2]oktan-1-il) nikotinamid; 2-amino-5-(2,3-difluoro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metil - hloheksil) nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(2-metoksietil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1- il) fenil) nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1S,5R)-3-(2,2-difluoropropil)-3-azabiciklo[3.1,0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4S) )-4-hidroksicikloheksil) nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-((1R,5S)-3-(2,2,2-trifluoroetil)-3-azabiciklo[3.1.0] heksan-1-il) fenil) nikotinamid; 2-amino-N-((1r,4S)-4-hidroksicikloheksil-4-d)-5-(4-((1S,5R)-3-izopropil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1- il)fenil) nikotinamid; 2-amino-N-((1s,4s)-4-hidroksicikloheksil)-5-(4-(4-metilpiperazin-1-karbonil)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-(4-hidroksibiciklo- 10 [2.2.2]oktan-1-il)nikotinamid; 2-amino-5-(2-hloro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid; 2-amino-5-(4-((1R,5S)-3-(4,4-difluorocikloheksil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)-N-((1r,4R) )-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid; 2-amino-N-(3-(2-hidroksipropan-2-il)biciklo[1.1.1]pentan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-) piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid; 2-amino-5-(3-hloro-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)nikotinamid; 5-(4-((R)-1-(2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)etil)fenil)-2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi-1-metilcikloheksil) nikotinamid; i 2-amino-N-((1r,4R)-4-hidroksi-4-metilcikloheksil)-5-(2-metil-4-(((R)-2-metilpirolidin-1-il)metil)fenil)nikotinamid; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  9. 9. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 3, 5, 7 i 8, pri čemu je jedinjenje formule (I) 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il) fenil) nikotinamid fumarat, ili njegov hidrat.
  10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 9 koje je 2-amino-N-(4-hidroksibiciklo[2.2.2]oktan-1-il)-5-(4-((1R,5S)-3-(tetrahidro) -2H-piran-4-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-il)fenil)nikotinamid fumarat dihidrat.
  11. 11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 9 ili 10 koje je kristalno. 2
  12. 12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 11, naznačeno time što je difrakciona šema rendgenskih zraka na prahu koja ima najmanje jedan od sledećih pikova izraženih u stepenima-2-teta pod uglovima (± 0.2 stepena): 7.0, 14.2, 15.6, 16.2, 18.0, 19.2 i 25.1.
  13. 13. Farmaceutska kompozicija koja sadrži terapeutski efikasnu količinu jedinjenja prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 12, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih nosača.
  14. 14. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 12, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu kao lek.
  15. 15. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 12, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju poremećaja ili bolesti izabranih od heterotopske osifikacije i progresivna osifikans fibrodisplazija.
  16. 16. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 15, pri čemu je bolest ili poremećaj heterotopska osifikacija.
  17. 17. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 15, pri čemu je bolest ili progresivna osifikans fibrodisplazija.
RS20241041A 2016-07-20 2017-07-18 Derivati aminopiridina i njihova upotreba kao selektivnih alk-2 inhibitora RS66041B1 (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662364620P 2016-07-20 2016-07-20
EP21202619.9A EP3971177B1 (en) 2016-07-20 2017-07-18 Aminopyridine derivatives and their use as selective alk-2 inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS66041B1 true RS66041B1 (sr) 2024-11-29

Family

ID=60991950

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20241041A RS66041B1 (sr) 2016-07-20 2017-07-18 Derivati aminopiridina i njihova upotreba kao selektivnih alk-2 inhibitora
RS20211582A RS62819B1 (sr) 2016-07-20 2017-07-18 Derivati aminopiridina i njihova upotreba kao selektivnih alk-2 inhibitora

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20211582A RS62819B1 (sr) 2016-07-20 2017-07-18 Derivati aminopiridina i njihova upotreba kao selektivnih alk-2 inhibitora

Country Status (25)

Country Link
US (3) US10710980B2 (sr)
EP (3) EP3487851B1 (sr)
JP (3) JP7030776B2 (sr)
KR (7) KR102454129B1 (sr)
CN (2) CN114014844B (sr)
AR (1) AR109108A1 (sr)
AU (5) AU2017298187B2 (sr)
CY (1) CY1124967T1 (sr)
DK (2) DK3971177T3 (sr)
EA (2) EA037520B1 (sr)
ES (2) ES2902521T3 (sr)
FI (1) FI3971177T3 (sr)
HR (2) HRP20241015T1 (sr)
HU (2) HUE057328T2 (sr)
LT (2) LT3487851T (sr)
MX (2) MX388518B (sr)
PL (2) PL3971177T3 (sr)
PT (2) PT3971177T (sr)
RS (2) RS66041B1 (sr)
RU (1) RU2747318C2 (sr)
SI (2) SI3971177T1 (sr)
SM (2) SMT202400335T1 (sr)
TW (5) TW202509017A (sr)
UY (1) UY37331A (sr)
WO (1) WO2018014829A1 (sr)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10710980B2 (en) * 2016-07-20 2020-07-14 Novartis Ag Aminopyridine derivatives and their use as selective ALK-2 inhibitors
JP7717065B2 (ja) 2019-11-22 2025-08-01 インサイト コーポレーション Ａｌｋ２阻害剤及びｊａｋ２阻害剤を含む併用療法
CN111170893B (zh) * 2020-01-19 2022-04-26 郑州依米花手性药物研究有限公司 Lefamulin的中间体化合物及其在Lefamulin制备中的应用
AU2021292484A1 (en) * 2020-06-16 2023-01-19 Incyte Corporation ALK2 inhibitors for the treatment of anemia
KR102913358B1 (ko) * 2020-10-29 2026-01-14 주식회사 엘지화학 중수소화 화합물의 분석방법, 소자 제조용 중수소화 화합물의 선별방법 및 전자 소자의 제조방법
US12115154B2 (en) 2020-12-16 2024-10-15 Srx Cardio, Llc Compounds for the modulation of proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9)
CN116478145B (zh) * 2022-04-13 2024-02-02 杭州邦顺制药有限公司 Alk2激酶抑制剂

Family Cites Families (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5077290A (en) 1990-10-11 1991-12-31 Merck & Co., Inc. Morpholine derivatives compositions and use
CA2149441C (en) 1992-11-17 2004-03-02 Kohei Miyazono Activin receptor-like kinases, proteins having serine threonine kinase domains and their use
TW530054B (en) 1997-09-24 2003-05-01 Duphar Int Res New piperazine and piperidine compounds
SE0102439D0 (sv) 2001-07-05 2001-07-05 Astrazeneca Ab New compounds
US6914058B2 (en) 2002-01-18 2005-07-05 Dr. Reddy's Laboratories, Limited Antibacterial compounds: process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
JP4901102B2 (ja) 2002-05-03 2012-03-21 エクセリクシス， インク． プロテインキナーゼモジュレーターおよびその使用方法
US7015227B2 (en) 2002-06-21 2006-03-21 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Certain amino-substituted monocycles as kinase modulators
US20040067985A1 (en) 2002-10-04 2004-04-08 Fortuna Haviv Method of inhibiting angiogenesis
SE0203753D0 (sv) 2002-12-17 2002-12-17 Astrazeneca Ab New compounds
FR2850652B1 (fr) * 2003-01-31 2008-05-30 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives d'uree cyclique, leur preparation et leur utilisation pharmaceutique comme inhibiteurs de kinases
CA2514733A1 (en) 2003-02-28 2004-09-16 Transform Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical co-crystal compositions of drugs such as carbamazepine, celecoxib, olanzapine, itraconazole, topiramate, modafinil, 5-fluorouracil, hydrochlorothiazide, acetaminophen, aspirin, flurbiprofen, phenytoin and ibuprofen
CA2521766A1 (en) 2003-04-11 2004-10-28 Sgx Pharmaceuticals, Inc. Compound libraries and methods for drug discovery
AU2005247699A1 (en) 2004-05-27 2005-12-08 Pfizer Inc. Aminopyridine derivatives as selective dopamine D3 agonists
SA05260265A (ar) 2004-08-30 2005-12-03 استرازينيكا ايه بي مركبات جديدة
BRPI0607913A2 (pt) 2005-04-08 2010-03-23 Eisai R&D Man Co Ltd agente terapÊutico para discinesia
WO2007011760A2 (en) 2005-07-15 2007-01-25 Kalypsys, Inc. Inhibitors of mitotic kinesin
GB0517175D0 (en) 2005-08-22 2005-09-28 Glaxo Group Ltd Compounds
PE20071241A1 (es) * 2006-01-17 2008-01-14 Schering Corp Compuestos derivados de hidantoina para el tratamiento de trastornos inflamatorios
US8895711B2 (en) 2006-04-18 2014-11-25 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Mutated ACVR1 for diagnosis and treatment of Fibrodyplasia Ossificans Progressiva (FOP)
WO2008002671A2 (en) 2006-06-29 2008-01-03 Alantos Pharmaceuticals Holding, Inc. Metalloprotease inhibitors
EA200970250A1 (ru) 2006-09-05 2010-02-26 Медарекс, Инк. Антитела к костным морфогенетическим белкам и их рецепторам и способы их применения
JP2010503383A (ja) 2006-09-12 2010-02-04 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション 細胞シグナリングをモジュレートする化合物を同定するための方法およびこのような化合物を使用する方法
UA97813C2 (uk) * 2006-12-05 2012-03-26 Янссен Фармацевтика Н.В. Фумаратна сіль (альфа s, бета r)-6-бром-альфа-[2-(диметиламіно)етил]-2-метоксі-альфа-1-нафталеніл-бета-феніл-3-хінолінетанолу
JP5638961B2 (ja) 2008-03-13 2014-12-10 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション Ｂｍｐシグナル伝達経路のインヒビター
CN102203074A (zh) 2008-06-20 2011-09-28 麦它波莱克斯股份有限公司 芳基gpr119激动剂及其用途
CN103079585B (zh) 2010-08-20 2015-09-30 惠氏有限责任公司 经设计的成骨蛋白
CA2819955A1 (en) 2010-12-06 2012-06-14 Piramal Enterprises Limited Substituted imidazoquinoline derivatives
WO2012087938A1 (en) 2010-12-20 2012-06-28 Glaxosmithkline Llc Quinazolinone derivatives as antiviral agents
WO2012088438A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Eutropics Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods useful for treating diseases
BR112013029640A2 (pt) 2011-05-23 2017-06-13 Merck Patent Gmbh derivados de piridina e pirazina
EP3567029A1 (en) 2011-09-09 2019-11-13 Lantheus Medical Imaging, Inc. Compositions, methods, and systems for the synthesis and use of imaging agents
DK2900238T3 (en) 2012-09-28 2018-03-12 Univ Vanderbilt CONDENSED HETEROCYCLIC COMPOUNDS AS SELECTIVE BMP INHIBITORS
EP2964651A4 (en) * 2013-03-04 2016-11-30 Brigham & Womens Hospital BMP HEMMER AND METHOD OF USE THEREOF
RU2693480C2 (ru) * 2013-03-14 2019-07-03 Толеро Фармасьютикалз, Инк. Ингибиторы jak2 и alk2 и способы их использования
US9682983B2 (en) 2013-03-14 2017-06-20 The Brigham And Women's Hospital, Inc. BMP inhibitors and methods of use thereof
RU2019131017A (ru) 2013-10-21 2019-11-25 Мерк Патент Гмбх Соединения гетероарила в качестве ингибиторов btk и их применение
JP6601687B2 (ja) 2014-03-31 2019-11-06 大日本住友製薬株式会社 進行性骨化性線維異形成症の予防剤及び治療剤
ES2907461T3 (es) 2015-01-20 2022-04-25 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Compuestos antihelmínticos, composiciones y procedimientos de uso de los mismos
EP3344613B1 (en) 2015-08-31 2020-03-04 Dong-A Socio Holdings Co., Ltd. Heteroaryl compounds and their use as therapeutic drugs
US10710980B2 (en) * 2016-07-20 2020-07-14 Novartis Ag Aminopyridine derivatives and their use as selective ALK-2 inhibitors
JP7030775B2 (ja) 2016-07-20 2022-03-07 キャベンディッシュ・キネティックス・インコーポレイテッド Ｄｖｃを用いてアンテナを調整する方法
WO2018106820A1 (en) 2016-12-07 2018-06-14 Kura Oncology, Inc. Methods of promoting beta cell proliferation

Also Published As

Publication number Publication date
FI3971177T3 (fi) 2024-07-30
JP2022078137A (ja) 2022-05-24
DK3487851T3 (da) 2021-12-20
KR20220021023A (ko) 2022-02-21
TW202220969A (zh) 2022-06-01
US20200299265A1 (en) 2020-09-24
CN109641871A (zh) 2019-04-16
PL3487851T3 (pl) 2022-04-11
US20210155606A1 (en) 2021-05-27
PT3487851T (pt) 2022-01-07
JP2019521167A (ja) 2019-07-25
EA202190285A1 (ru) 2021-08-31
MX2021014852A (es) 2022-01-18
AU2023200265A1 (en) 2023-02-16
MX388518B (es) 2025-03-19
AU2021201424B2 (en) 2022-10-20
JP7584553B2 (ja) 2024-11-15
AU2021201424A1 (en) 2021-03-25
TW202336011A (zh) 2023-09-16
PT3971177T (pt) 2024-07-30
RU2021111037A3 (sr) 2022-02-10
WO2018014829A1 (en) 2018-01-25
KR20190026917A (ko) 2019-03-13
EP3487851B1 (en) 2021-10-20
AU2024205058A1 (en) 2024-08-15
TWI755255B (zh) 2022-02-11
TW202509017A (zh) 2025-03-01
TWI806385B (zh) 2023-06-21
US12466808B2 (en) 2025-11-11
AU2017298187B2 (en) 2019-11-14
AU2021201424C1 (en) 2023-02-02
KR102719881B1 (ko) 2024-10-23
CA3030332A1 (en) 2018-01-25
US10947218B2 (en) 2021-03-16
JP7253086B2 (ja) 2023-04-05
RU2747318C2 (ru) 2021-05-04
SI3971177T1 (sl) 2024-10-30
KR20220143770A (ko) 2022-10-25
US20190161474A1 (en) 2019-05-30
KR102281550B1 (ko) 2021-07-27
RU2019104609A3 (sr) 2020-09-30
JP2025032086A (ja) 2025-03-11
KR102359707B1 (ko) 2022-02-09
AU2017298187A1 (en) 2018-12-20
JP2023089012A (ja) 2023-06-27
CY1124967T1 (el) 2023-01-05
CN114014844B (zh) 2024-10-01
DK3971177T3 (da) 2024-07-15
EP3487851A4 (en) 2019-12-25
SI3487851T1 (sl) 2022-03-31
SMT202100723T1 (it) 2022-01-10
MX2019000837A (es) 2019-07-04
EA037520B1 (ru) 2021-04-07
AU2023200265B2 (en) 2024-08-15
KR20210094138A (ko) 2021-07-28
KR102667331B1 (ko) 2024-05-21
UY37331A (es) 2018-02-28
HRP20241015T1 (hr) 2024-11-08
LT3487851T (lt) 2021-12-27
JP7030776B2 (ja) 2022-03-07
HUE067992T2 (hu) 2024-12-28
ES2984746T3 (es) 2024-10-30
KR20240074904A (ko) 2024-05-28
BR112019000941A2 (pt) 2019-04-30
KR20230117248A (ko) 2023-08-07
EA201990343A1 (ru) 2019-06-28
PL3971177T3 (pl) 2024-10-28
SMT202400335T1 (it) 2024-09-16
KR102559539B1 (ko) 2023-07-26
TWI851226B (zh) 2024-08-01
CN114014844A (zh) 2022-02-08
RU2019104609A (ru) 2020-08-20
TWI712598B (zh) 2020-12-11
CN109641871B (zh) 2021-10-22
HUE057328T2 (hu) 2022-05-28
RS62819B1 (sr) 2022-02-28
TW202134228A (zh) 2021-09-16
EP4442317A2 (en) 2024-10-09
EP3971177A1 (en) 2022-03-23
ES2902521T3 (es) 2022-03-28
AU2019246857B2 (en) 2020-12-24
EP4442317A3 (en) 2025-01-01
HRP20211868T1 (hr) 2022-03-04
EP3487851A1 (en) 2019-05-29
KR20240155367A (ko) 2024-10-28
KR102454129B1 (ko) 2022-10-14
TW201805277A (zh) 2018-02-16
RU2021111037A (ru) 2021-05-13
AR109108A1 (es) 2018-10-31
LT3971177T (lt) 2024-08-26
AU2019246857A1 (en) 2019-10-31
US10710980B2 (en) 2020-07-14
EP3971177B1 (en) 2024-06-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7584553B2 (ja) アミノピリジン誘導体およびそれらの選択的ａｌｋ－２阻害剤としての使用
RU2826177C1 (ru) Производные аминопиридина и их применение в качестве селективных ингибиторов alk-2
HK40117528A (en) Aminopyridine derivatives and their use as selective alk-2 inhibitors
HK40069664B (en) Aminopyridine derivatives and their use as selective alk-2 inhibitors
HK40069664A (en) Aminopyridine derivatives and their use as selective alk-2 inhibitors
CA3030332C (en) Aminopyridine derivatives and their use as selective alk-2 inhibitors
HK40007022B (en) Aminopyridine derivatives and their use as selective alk-2 inhibitors
EA045493B1 (ru) Производные аминопиридина и их применение в качестве селективных ингибиторов alk–2
EA049492B1 (ru) Производные аминопиридина и их применение в качестве селективных ингибиторов alk–2