RS65702B1 - Peptidne formulacije sa kontrolisanim otpuštanjem - Google Patents

Description

Opis

OBLAST PRONALASKA

[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na prekursore formulacije (predformulacije) za in situ generisanje kompozicija za kontrolisano oslobađanje peptidno aktivnih agenasa i metode lečenja takvim formulacijama. Konkretno, pronalazak se odnosi na predformulacije sa visokim optereć enjem amfifilnih komponenti i najmanje jednog peptidnog aktivnog agensa za parenteralnu primenu, koji prolaze kroz faznu tranziciju nakon izlaganja vodenim tečnostima, kao što su telesne tečnosti, čime se formira kompozicija sa kontrolisanim oslobađanjem.

POZADINA PRONALASKA

[0002] Mnogi bioaktivni agensi uključujuć i farmaceutske proizvode, hranljive materije, vitamine i tako dalje, imaju "funkcionalni prozor". To znači da postoji niz koncentracija u kojima se ovi agensi mogu posmatrati da bi pružili neki biološki efekat. Kada koncentracija u odgovarajuć em delu tela (npr. lokalno ili kao što je prikazano koncentracijom u serumu) padne ispod određenog nivoa, agensu se ne može pripisati nikakav povoljan efekat. Slično, generalno postoji gornji nivo koncentracije iznad kojeg se poveć anje koncentracije dalje koristi. U nekim slučajevima pove ć anje koncentracije iznad određenog nivoa dovodi do neželjenih ili čak opasnih efekata.

[0003] Neki bioaktivni agensi imaju dug biološki poluživot i/ili širok funkcionalni prozor i stoga se mogu davati povremeno, održavajuć i funkcionalnu biološku koncentraciju tokom značajnog vremenskog perioda (npr. 6 sati do nekoliko dana). U drugim slučajevima, stopa klirensa je visoka i/ili je funkcionalni prozor uzak, pa su za održavanje biološke koncentracije unutar ovog prozora potrebne redovne (ili čak kontinuirane) doze male količine. Ovo može biti posebno teško kada su neoralni načini primene (npr. parenteralna primena) poželjni ili neophodni, pošto samoprimena može biti teška i na taj način izazvati neprijatnosti i/ili lošu usklađenost. U takvim slučajevima, bilo bi korisno da jedna administracija obezbedi aktivni agens na terapijskom nivou tokom čitavog perioda tokom kojeg je aktivnost potrebna.

[0004] Postoji ogroman potencijal u upotrebi peptida (uključujuć i proteine) za lečenje različitih bolesnih stanja, kao i u profilaksi i poboljšanju opšteg zdravlja i dobrobiti ispitanika. Međutim, učinak primenjenih peptidnih agenasa je generalno ograničen zbog slabe bioraspoloživosti, što je zauzvrat uzrokovano brzom razgradnjom peptida i proteina u biološkim tečnostima. Ovo poveć ava dozu koja se mora primeniti i u mnogim slučajevima ograničava efikasne puteve primene. Ovi efekti su dodatno pojačani često ograničenom propusnošć u peptida i proteina kroz biološke membrane.

[0005] Peptidi i proteini koji se daju telu sisara (npr. oralno, intramuskularno itd.) su podlo žni razgradnji od strane različitih proteolitičkih enzima i sistema prisutnih u celom telu. Dobro poznata mesta aktivnosti peptidaze uključuju želudac (npr. pepsin) i crevni trakt (npr. tripsin, himotripsin i drugi), ali druge peptidaze (npr. aminopeptidaze, karboksipeptidaze, itd.) se nalaze u celom telu. Nakon oralne primene, razgradnja želuca i creva smanjuje količinu peptida ili proteina koji se potencijalno mogu apsorbovati kroz crevnu površinu i na taj način smanjuje njihovu bioraspoloživost. Slično tome, slobodni peptidi i proteini u krvotoku sisara su takođe podložni enzimskoj degradaciji (npr. plazma proteazama itd.).

[0006] Neki pacijenti koji su podvrgnuti lečenju ć e obično zahtevati da se terapijska doza održava tokom značajnog perioda i/ili tretman koji je u toku tokom mnogo meseci ili godina. Tako bi depo sistem koji omoguć ava punjenje i kontrolisano oslobađanje ve ć e doze tokom dužeg perioda ponudio značajnu prednost u odnosu na konvencionalne sisteme za isporuku.

[0007] Peptidi se mogu isporučiti pomoć u sistema kao što je Alkermes Medisorb® sistem za isporuku koji se sastoji od mikrosfera biorazgradivih polimera. Takve formulacije polimernih mikrosfera se generalno moraju davati uz pomoć velike igle, obično od 20 ili više. Ovo je neophodno zbog prirode koriš ć enih sistema za doziranje polimera, koji su obično polimerne suspenzije.

[0008] Očigledno, bila bi prednost obezbediti sistem niskog viskoziteta, kao što je homogeni rastvor, disperzija finih čestica ili L2 faza, koji bi se mogao lako primeniti kroz usku iglu, čime bi se smanjila nelagodnost pacijenta tokom postupka. Ova lakoć a administracije je posebno zna čajna kada ć e pacijenti biti na režimu samoadministriranja i možda već sami sebi daju nekoliko puta dnevno. Obezbeđivanje trajne formulacije u trajanju od nekoliko dana, ali koja je dovoljno slo žena da bi se primenila da zahteva lečenje od strane zdravstvene ustanove ali neć e biti prednost za sve pacijente u odnosu na samoadministraciju dva puta dnevno ili dnevno i verovatno ć e biti skuplji. Obezbe đivanje formulacije koja daje dovoljno dugo trajanje da opravda posetu zdravstvenom radniku radi administracije i/ili preparata koji se može samostalno primeniti, i smanjenje vremena pripreme zdravstvenih radnika ili pacijenata pre stvarne primene su sve važna pitanja.

[0009] Polimeri polilaktata, poliglikolata i polilaktatakoglikolata koji se obično koriste za razgradnju formulacija sa sporim oslobađanjem su takođe uzrok neke iritacije kod najmanje nekih pacijenata. Posebno, ovi polimeri obično sadrže određeni deo nečistoć e sir ć etne kiseline, koja ć e iritirati mesto ubrizgavanja prilikom primene. Kada se polimer zatim razgrađuje, mlečna kiselina i glikolna kiselina su proizvodi razgradnje tako da se izaziva dalja iritacija. Kao rezultat kombinovanih efekata primene široke igle i iritantnog sadržaja, nelagodnost na mestu primene i formiranje vezivnog ožiljnog tkiva su već i nego što je poželjno.

[0010] Sa tačke gledišta isporuke leka, polimerne depo kompozicije generalno imaju nedostatak što prihvataju samo relativno nisko optereć enje lekom i imaju profil oslobađanja "prasak/kašnjenje". Priroda polimerne matrice, posebno kada se primenjuje kao rastvor ili predpolimer, izaziva po četni nalet oslobađanja leka kada se kompozicija prvi put primenjuje. Nakon toga sledi period niskog oslobađanja, dok počinje degradacija matrice, nakon čega sledi poveć anje brzine oslobađanja do željenog kontinuiranog profila. Ovaj profil prasak/kašnjenje oslobađanja može prouzrokovati da in vivo koncentracija aktivnog agensa pukne iznad funkcionalnog prozora odmah nakon primene, a zatim da padne nazad kroz dno funkcionalnog prozora tokom perioda kašnjenja pre nego što se postigne trajna funkcionalna koncentracija za period. Očigledno, sa funkcionalne i toksikološke tačke gledišta, ovaj profil otpuštanja prasak/kašnjenje je nepoželjan i može biti opasan. Takođe može ograničiti ravnotežnu koncentraciju koja se može obezbediti zbog opasnosti od štetnih efekata na „radnoj“ tački. Prisustvo prasak faze takođe može zahtevati dodatno doziranje sa ponovljenim injekcijama tokom po četnog perioda depo tretmana kako bi se održala terapijska doza dok su koncentracije aktivne supstance koje se dobijaju iz depoa subfunkcionalne. Naročito za određene polipeptide, bilo bi korisno da se minimizira trenutni efekat "prskanja" nakon davanja kompozicije da bi se izbegli neželjeni efekti kao što je hipoglikemija.

[0011] Jedna klasa peptidnih hormona koja posebno ima koristi od veoma "niskog praska", stabilne in vivo koncentracije su analozi somatostatina. In vivo testiranje sugeri še da su ovi peptidi posebno korisni kada se održavaju u stabilnoj koncentraciji u plazmi. Ovo ne samo da sugeri še da bi depo kompozicija bila prednost da se izbegnu "prasci" u koncentraciji nakon primene i/ili ponovljenog dnevnog doziranja, ve ć štaviše da takva depo kompozicija treba da ima što je moguć e ravniji profil oslobađanja tokom terapijskog perioda.

[0012] Formulacije sa kontrolisanim oslobađanjem se obično proizvode od biokompatibilnih polimera u obliku, na primer, implantata ili perlica za injekcije. Formulacije polimernih mikrosfera se generalno moraju davati uz pomoć velike igle, obično od 20 ili više. Ovo je neophodno zbog prirode koriš ć enih sistema za doziranje polimera, koji su tipično polimerne suspenzije. Prednost bi bila da se obezbedi sistem niskog viskoziteta, kao što je homogeni rastvor, disperzija finih čestica ili L2 faza, koji bi se mogao lako primeniti kroz usku iglu, čime bi se smanjila nelagodnost pacijenta tokom procedure. U slučaju pacijenata sa dijabetesom, bilo za dnevnu ili noć nu upotrebu, ova lako ć a administracije je posebno zna čajna jer ć e već ina pacijenata često sami sebi davati lek. Pružanje trajne formulacije koja može sprečiti ili smanjiti rizik od hipoglikemije (posebno noć ne hipoglikemije), ali koja je dovoljno slo žena da bi se primenila da zahteva lečenje od strane zdravstvenog radnika, malo je verovatno da ć e biti uspe šno, jer poreme ć aj životnog stila povezan sa tako složenim administracijama, kao i troškovi koji su uključeni bili bi preveliki. Obezbeđivanje formulacije koja se može samostalno primeniti i koja je dovoljno direktna i bezbolna da se primeni da ne utiče štetno na stanje pacijenta, veoma je potrebno za takve situacije.

[0013] Proizvodnja PLGA mikrozrnaca i suspenzija je dodatno značajna poteškoć a sa određenim postojeć im sistemima depoa. Konkretno, pošto su kuglice čestice, a polimeri začepljuju membrane, oni se generalno ne mogu sterilno filtrirati i štaviše, pošto se PLGA kopolimer topi na oko 40°C, ne mogu se termički obrađivati radi sterilnosti. Kao rezultat, kompleksan proizvodni proces mora da se odvija u uslovima visoke sterilnosti.

[0014] Dalji problemi sa biorazgradivim polimernim mikrosferama uključuju kompleksnu rekonstituciju pre ubrizgavanja i ograničenu stabilnost skladištenja, zbog agregacije i degradacije sistema za isporuku i/ili aktivacije.

[0015] Kompozicija sa sporim oslobađanjem zasnovana na lipidima je opisana u WO2006/131730 za GLP-1 i njegove analoge. Ovo je veoma efikasna formulacija, ali je koncentracija aktivnog agensa koja mo že biti uključena u formulaciju ograničena njegovom rastvorljivošć u. Očigledno, ve ć a koncentracija aktivnog agensa omoguć ava mogu ć nost depo proizvoda dužeg trajanja, proizvoda koji održavaju viši sistem koncentracije, i proizvode koji imaju manju zapreminu ubrizgavanja, od kojih su svi faktori od velike prednosti pod odgovarajuć im okolnostima. Stoga bi bilo od velike vrednosti ustanoviti na čin na koji bi se ve ć e koncentracije aktivnih agenasa mogle uključiti u depo formulaciju na bazi lipida.

[0016] WO 2006/075124 se odnosi na predformulacije za in situ generisanje kompozicija za kontrolisano oslobađanje analoga somatostatina. Predformulacije sadrže mešavinu niske viskoznosti od najmanje jednog diacil glicerola, najmanje jednog fosfatidil holina, najmanje jednog organskog rastvara ča koji sadrži kiseonik i najmanje jednog analoga somatostatina.

[0017] US 2009/155193 se odnosi na topikalne bioadhezivne formulacije koje sadrže nisko viskozne, netečne kristalne smeše: a) najmanje jednog neutralnog diacil lipida i/ili najmanje jednog tokoferola; b) najmanje jednog fosfolipida; c) najmanje jednog biokompatibilnog organskog rastvara ča niskog viskoziteta koji sadrži kiseonik; pri čemu je najmanje jedno bioaktivno sredstvo rastvoreno ili dispergovano u sme ši niske viskoznosti.

[0018] WO 2009/024795 opisuje nevodenu predformulaciju koja sadrži mešavinu niskog viskoziteta: i) nepolimerne matrice sa sporim oslobađanjem, ii) najmanje jednog biokompatibilnog organskog rastvarača, iii) najmanje jednog peptidnog aktivnog agensa ; i iv) najmanje jednu kiselinu rastvorljivu u lipidima.

[0019] Sadašnji pronalazači su sada ustanovili da obezbeđivanjem predformulacije prema patentnom zahtevu 1 u niskoj fazi viskoziteta, kao što je molekularni rastvor ili L2 (obrnuta micelarna) faza, može se napraviti predformulacija koja se bavi mnogim nedostacima poznatih depo formulacija, i koja se mo že primeniti da obezbedi kontrolisano oslobađanje peptidnog aktivnog agensa. Korišć enjem specifičnih komponenti u pažljivo odabranim odnosima, a posebno sa mešavinom alkohola i polarnog rastvarača, može se stvoriti depo formulacija koja ima kombinaciju svojstava koja prevazilazi performanse čak i poznatih kompozicija sa kontrolisanim oslobađanjem lipida.

[0020] Konkretno, predformulacija pokazuje veoma povoljan profil oslobađanja, laka je za proizvodnju, može se sterilno filtrirati, ima nizak viskoziteta (omoguć ava laku i manje bolnu administraciju obi čno kroz usku iglu), omoguć ava visok nivo bioaktivnog agensa koji treba da se ugradi ( što potencijalno omogu ć ava da se koristi manja količina kompozicije i/ili aktivnog agensa), zahteva plitku injekciju i/ili formira željenu nelamelarnu depo kompoziciju in vivo koja ima profil oslobađanja "nepucanja". Kompozicije su takođe formirane od materijala koji su netoksični, biotolerantni i biorazgradivi, koji se mogu primeniti i.m., ili s.c. i pogodni su za samoupravljanje. Predformulacija može dodatno da ima veoma nizak nivo iritacije pri ubrizgavanju i u poželjnim slučajevima ne izaziva iritaciju na mestu injekcije (uključujuć i prolaznu iritaciju).

[0021] Određene formulacije ovog pronalaska stvaraju nelamelarnu tečnu kristalnu fazu nakon primene. Upotreba nelamelarnih faznih struktura (kao što su tečne kristalne faze) u isporuci bioaktivnih agenasa je sada relativno dobro uspostavljena. Najefikasniji lipidni depo sistem je opisan u WO2005/117830, a veoma poželjan lipidni depo je opisan u tom dokumentu. Međutim, ostaje prostor za postizanje depo formulacija koje imaju poboljšane performanse u nekoliko aspekata.

[0022] Prednosti kompozicija ovog pronalaska u odnosu na polimerne formulacije, kao što su PLGA sfere, uključuju lakoć u proizvodnje (uključuju ć i sterilizaciju), rukovanje i svojstva upotrebe u kombinaciji sa niskim početnim oslobađanjem („profil bez pucanja“) aktivnog agensa. .Ovo se može definisati tako da je površina ispod koncentracije u plazmi u odnosu na vreme krive tokom prva 24 sata jednomese čnog perioda doziranja manja od 20 % površine ispod krive za celu krivu (mereno ili ekstrapolirano od vremena 0 do beskonačnosti ili od vremena 0 do poslednje vremenske tačke uzorkovanja), poželjnije manje od 15 % i najpoželjnije manje od 10 %. Ovo se posebno odnosi na aspekte pronalaska acil saharida i lipida i detaljnije se razmatra u WO 2005/117830. Štaviše, može se definisati tako da maksimalna koncentracija aktivnog agensa u plazmi in vivo nakon injekcije predformulacije (Cmax) nije više od 10 puta, poželjno ne više od 8 puta i najpoželjnije ne više od 5 puta od proseka koncentracije u plazmi tokom terapijskog perioda (Cave).

SUŠTINA PRONALASKA

[0023] Ovaj pronalazak obezbeđuje farmaceutsku formulaciju koja sadrži odgovarajuć u kombinaciju lipidnih ekscipijenata, organskog alkoholnog rastvarača, polarnog rastvarača, peptidnog aktivnog agensa i određenih opcionih komponenti, koje se mogu koristiti kao formulacija depo-prekursora (ovde se radi kratkoć e pominje kao predformulacija) za rešavanje jedne ili više napred opisanih potreba.

[0024] U prvom aspektu, pronalazak stoga obezbeđuje predformulaciju koja sadrži mešavinu niskog viskoziteta:

a. 20-80 % težine najmanje jednog diacil glicerola i/ili tokoferola;

b. 20-80 % težine najmanje jednog fosfatidil holina (PC);

c. 5-20 % težine najmanje jednog biokompatibilnog, organskog mono-alkoholnog rastvarača koji sadrži etanol;

d. 1,2 do 20 % težine polarnog rastvarača izabranog između vode, propilen glikola ili njihovih smeša; i

e. najmanje jedan analog somatostatina;

f. opciono najmanje jednog antioksidansa;

pri čemu je odnos komponenti a:b u opsegu od 40:60 do 54:46;

pri čemu predformulacija ima viskozitet u opsegu od 0,1 do 5000 mPas na 20 °C;

pri čemu predformulacija formira, ili je sposobna da formira, najmanje jednu strukturu te čne kristalne faze u kontaktu sa viškom vodenog fluida.

[0025] Takve kompozicije ć e poželjno sadržati GDO, etanol, vodu/propilen glikol i/ili EDTA kao komponente a), c), d) i f) respektivno. Komponenta e) je najmanje jedan analog somatostatina, kao što je ovde opisano.

[0026] U drugom aspektu, pronalazak shodno tome obezbeđuje proces za formiranje predformulacije prema patentnom zahtevu 20.

[0027] Predformulacije su veoma korisne za kontrolisano i produženo oslobađanje aktivnog peptida, posebno one koje zahtevaju ili imaju koristi od veoma ravnog profila oslobađanja i/ili minimalnog "pucanja" nakon primene.

[0028] Peptidni aktivni agensi u formulacijama ovog pronalaska su poželjno farmaceutski aktivni. To znači da obezbeđuju terapeutski, palijativni i/ili profilaktički efekat kada se daju pogodnom subjektu (obično kome je takav efekat potreban).

[0029] U skladu sa tim, u daljem aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje predformulaciju za upotrebu prema patentnom zahtevu 22.

[0030] Određeni peptidni aktivni agensi imaju prednosti koje su vi še kozmetičke nego (ili kao dodatak) terapijske prirode. Takvi efekti uključuju gubitak težine i/ili suzbijanje gladi, kao i kontrolu pigmentacije kože ili kose, rasta dlake itd. Ovaj pronalazak stoga dodatno obezbeđuje metod kozmetičkog tretmana čoveka ili subjekta sisara koji nije čovek koji se sastoji od davanja navedenom subjektu predformulacija kao što je ovde opisano. Takav kozmetički metod neć e biti metod terapije (tj. ne ć e imati terapeutsku ili medicinsku korist).

[0031] Jedna od prednosti formulacija ovog pronalaska u odnosu na mnoge druge kompozicije sa kontrolisanim oslobađanjem je da su stabilne za skladištenje u svom konačnom obliku i stoga je potrebna mala ili nikakva priprema u vreme primene. Ovo omoguć ava da predformulacije budu spremne za primenu i da se isporuče u prikladnom, spremnom obliku. U daljem aspektu, pronalazak stoga obezbeđuje prethodno napunjen uređaj za davanje koji sadrži predformulaciju kao što je ovde opisano. Takav uređaj ć e generalno obezbediti ili jednu ili višestruku administraciju kompozicije koja ć e isporučiti, na primer, dozu aktivnog sredstva u opsegu od 1 mg do 5 mg/dan.

[0032] U daljem aspektu, pronalazak obezbeđuje komplet koji sadrži navedeni uređaj za administraciju prema pronalasku.

[0033] Komplet može opciono da sadrži uputstva za subkutanu ili intramuskularnu primenu navedene kompozicije. Sve kompozicije opisane ovde su pogodne za upotrebu u takvom kompletu i stoga mogu biti sadržane u njemu.

[0034] Kompleti pronalaska mogu opciono da sadrže dodatne komponente za davanje kao što su igle, brisevi i slično i opciono ć e sadržati uputstva za primenu.

KRATAK SADRŽAJ PRILOŽENIH SLIKA

[0035]

Slika 1a. IVR profil formulacija od 911 do 918

Slika 1b. IVR profil formulacija 1006, 1007 i 1010.

Slika 2: Sadržaj i čistoć a peptida (izraženi kao % odgovaraju ć ih vrednosti dobijenih za referentne uzorke čuvane na <-15°C) nakon čuvanja formulacija G i H tokom 7 dana na 70°C.

Slika 3. PK-11-413, normalizovana doza

Slika 4: PK-11-425, koncentracija leuprolida u plazmi u odnosu na vreme tokom 21 dana za formulacije 49 i 50. (nije prema ovom pronalasku)

DETALJAN OPIS PRONALASKA

[0036] Formulacije ovog pronalaska stvaraju nelamelarnu tečnu kristalnu fazu nakon primene. Upotreba nelamelarnih faznih struktura (kao što su tečne kristalne faze) u isporuci bioaktivnih agenasa je sada relativno dobro uspostavljena. Najefikasniji lipidni depo sistem je opisan u WO2005/117830, a pogodan lipidni matriks za upotrebu u predmetnom pronalasku je opisan u istom dokumentu, čiji je potpuni opis ovde uključen kao referenca. Za opis najpovoljnijih faznih struktura ovakvih formulacija, pa žnja se skreć e na opis u WO2005/117830 i posebno na njegovu stranu 29.

[0037] Svi % su ovde navedeni po težini, osim ako nije drugačije naznačeno. Štaviše, naznačeni težinski % je procenat ukupne predformulacije uključujuć i sve komponente navedene ovde. Predformulacije mogu opciono da se sastoje od suštinski samo ovde navedenih komponenti (uključujuć i gde je prikladno dodatne opcione komponente navedene u nastavku i u priloženim patentnim zahtevima) i u jednom aspektu se u potpunosti sastoje od takvih komponenti.

[0038] Sistemi zasnovani na lipidima koji su ovde opisani obuhvataju lipidne komponente a) i b), plus organski monoalkoholni rastvarač (c), polarni rastvarač (d), peptidno aktivno sredstvo (e) i opcione komponente antioksidansa (f).

[0039] Poželjno je da predformulacija prema pronalasku ima strukturu L2 faze. Poželjno, predformulacija formira nelamelarnu (npr. tečnu kristalnu) fazu nakon primene.

[0040] Pronalazači iz ovog pronalaska su sada iznenađujuć e ustanovili da odgovaraju ć im izborom tipova, apsolutnih količina i odnosa lipidnih komponenti zajedno sa peptidnim aktivnim agensom i najmanje dva rastvarača uključujuć i alkohol i najmanje jedan polarni rastvarač, svojstva oslobađanja depo kompozicije formirane od predformulacija pronalaska mogu biti veoma povoljne. Konkretno, kori šć enjem mešavine alkohola i polarnog rastvarača (posebno u odnosima blizu 1:1 opisanim ovde), prednosti rastvarača alkohola na profilu oslobađanja mogu da se održe, dok druga svojstva kao što je lagodnost pri davanju i/ili viskoznost formulacije može biti poboljšana. Alternativno ili kao dodatak ovome, profil otpuštanja aktivnog agensa može biti izuzetno nivelisan, sa maksimalnom koncentracijom u plazmi in vivo je samo mali višekratnik prosečne ili čak minimalne koncentracije tokom perioda doziranja. Takve prednosti va že čak i u poređenju sa drugim lipidnim depo kompozicijama, koje same po sebi nude standarde za kontrolisano oslobađanje koji se ranije nisu mogli postić i.

[0041] Važno je, posebno sa određenim peptidno aktivnim agensima, kao što su analozi somatostatina, da se kontroliše radna koncentracija (Cmax) leka u plazmi do nivoa jednakog ili manjeg od onog koji se podnosi subjektu, na primer da bi se izbegle nuspojave kao što su crvenilo ili jaka mučnina, dok se obezbeđuje ili postiže terapeutski efikasan nivo tokom željenog perioda oslobađanja. Generalno, prosečna koncentracija tokom perioda oslobađanja pre nego što se primeni sledeć a doza, Cave, spada u terapijski opseg. Kontrola nad maksimalnim (Cmax) i minimalnim (Cmin) koncentracijama je tako đe važna kako bi se postigao željeni tretman tokom vremena. U jednom aspektu, početni burst nije Cmax profila oslobađanja.

[0042] Bez obzira da li je početni burst takođe Cmax, poželjno je da je odnos Cmax/Cave manji od 50, poželjno manji ili jednak 15, poželjnije manji ili jednak 10, još poželjnije manji ili jednak 5. Štaviše, poželjno je da odnos Cave/Cmin nije već i od 50, poželjno manji ili jednak 15, poželjnije manji ili jednak 10, još poželjnije manji ili jednak 5. Cmax je definisan kao što je poznato u stanju tehnike, kao radna ili maksimalna koncentracija u plazmi primeć ena tokom perioda oslobađanja pre nego što se primeni slede ć a doza, a Cave je definisan kao prosečna koncentracija u plazmi tokom tog perioda oslobađanja. Cmin je prema tome minimalna koncentracija tokom tog perioda. Cave se mo že izračunati izračunavanjem leka prisutnog u plazmi kao površine ispod krive (AUC) tokom izabranog vremenskog perioda, generalno tokol celog perioda oslobađanja pre primene sledeć e doze, i deljenjem sa tim vremenskim periodom.

Komponenta a) - Diacil Glicerol

[0043] Opsezi za komponentu a) su 20-80 % težine , poželjno 30-70 % težine, poželjnije 33-60 % težine (npr. 43-60 %), posebno od 38 do 43 %. Opseg komponente b) je 20-80 % težine, poželjno 30-70 % težine, poželjnije 33-55 % (npr. 35-55 %), posebno od 38 do 43 %.

[0044] Odnosi a:b su od 40:60 do 54:46. Odnosi od oko 50:50 (npr.62) su veoma efikasni.

[0045] Komponenta "a" kako je ovde naznačeno je poželjno najmanje jedan diacil glicerol (DAG) i stoga ima dve nepolarne "repne" grupe. Dve nepolarne grupe mogu imati isti ili razli čit broj atoma ugljenika i svaka može nezavisno biti zasić ena ili nezasi ć ena. Primeri nepolarnih grupa uklju čuju C6-C32alkil i alkenil grupe, koje su obično prisutne kao estri dugolančanih karboksilnih kiselina. Oni se često opisuju pozivanjem na broj atoma ugljenika i broj nezasić enosti u lancu ugljenika. Dakle, CX:Z ozna čava ugljovodonični lanac koji ima X atoma ugljenika i Z nezasić enosti. Primeri posebno uklju čuju lauroil (C12:0), miristoil (C14:0), palmitoil (C16:0), fitanoil (C16:0), palmitoleoil (C16:1), stearoil (C18:0), oleoil (C18:1), elaidoil (C18:1), linoleoil (C18:2), linolenoil (C18:3), arahidonoil (C20:4), behenoil (C22:0) i lignoceroil (C24:9) grupe. Dakle, tipični nepolarni lanci se zasnivaju na masnim kiselinama prirodnih estarskih lipida, uključujuć i kaproinsku, kaprilnu, kaprinsku, laurinsku, miristinsku, palmitinsku, fitansku, palmitolnu, stearinsku, oleinsku, elaidinsku, linoleinsku, linolensku, arahidonsku, beheni čnu ili linolensku kiselinu, ili odgovarajuce alkohole. Poželjni nepolarni lanci su palmitinska, stearinska, oleinska i linolna kiselina, posebno oleinska kiselina.

[0046] Smeše bilo kog broja diacil lipida mogu se koristiti kao komponenta a). Poželjno je da ova komponenta uključuje najmanje deo C18 lipida (npr. DAG koji ima jednu ili vi še C18:0, C18:1, C18:2 ili C18:3 nepolarnih grupa), kao što je glicerol dioleat (GDO) i/ili glicerol dilinoleat (GDL). Veoma poželjan primer je DAG koji sadrži najmanje 50 %, poželjno najmanje 80 % i čak sadrži suštinski 100 % GDO.

[0047] Pošto su GDO i drugi diacil gliceroli proizvodi dobijeni iz prirodnih izvora, generalno postoji određeni udeo "zagađivača" lipida koji ima druge dužine lanaca itd. U jednom aspektu, GDO kako se ovde koristi se stoga koristi za označavanje bilo koje komercijalne klase GDO sa prateć im nečisto ć ama (tj. GDO komercijalne čistoć e). Ove nečisto ć e se mogu odvojiti i ukloniti prečiš ć avanjem, ali pod uslovom da je kvalitet konzistentan, ali to je retko potrebno. Ako je potrebno, međutim, "GDO" može biti suštinski hemijski čist GDO, kao što je najmanje 80 % čist, poželjno najmanje 85 % čist i još poželjnije najmanje 90 % čist GDO.

Komponenta b) - Fosfatidil holin

[0048] Komponenta "b" u lipidnim matricama ovog pronalaska je najmanje jedan fosfatidil holin (PC). Kao i kod komponente a), ova komponenta sadrži polarnu grupu glave i najmanje jednu nepolarnu repnu grupu. Razlika između komponenti a) i b) leži uglavnom u polarnoj grupi. Nepolarni delovi mogu na taj način biti na odgovarajuć i način izvedeni iz masnih kiselina ili odgovaraju ć ih alkohola razmatranih napred za komponentu a. Kao i kod komponente a), PC ć e sadržati dve nepolarne grupe. Opet, C18 grupe su poželjne i mogu se kombinovati sa bilo kojom drugom pogodnom nepolarnom grupom, posebno C16 grupama.

[0049] Deo fosfatidil holina, čak i pogodniji od bilo kojeg dela diacil glicerola, može biti dobijen iz prirodnog izvora. Pogodni izvori fosfolipida su jaja, srce (npr. goveđe), mozak, jetra (npr. goveđe) i biljni izvori uključujuć i soju. Takvi izvori mogu da obezbede jedan ili više sastojaka komponente b, koja može da sadrži bilo koju smešu fosfolipida. Može se koristiti bilo koji pojedinačni PC ili mešavina PC-ja iz ovih ili drugih izvora, ali su veoma pogodne mešavine koje sadrže PC ili PC za jaja. PC komponenta poželjno sadrži najmanje 50 % PC soje ili PC jaja, poželjnije najmanje 75 % PC soje ili PC jaja i najpoželjnije suštinski čiste PC ili PC jaja od soje.

[0050] Komponenta b) je PC. Poželjno je da se PC dobije od soje. Poželjno, PC sadrži 18:2 masne kiseline kao primarnu komponentu masne kiseline sa 16:0 i/ili 18:1 kao sekundarne komponente masnih kiselina. Oni su poželjno prisutni u PC-u u odnosu između 1,5:1 i 6:1. PC koji ima približno 60-65 % 18:2, od 10 do 20 % 16:0, od 5 do 15 % 18:1, sa ravnotežom pretežno ostalih 16 ugljenikovih i 18 ugljenikovih masnih kiselina je poželjan i tipičan je za PC od soje.

[0051] U alternativnom, ali jednako poželjnom izvođenju, PC komponenta može da sadrži sintetički dioleoil PC. Veruje se da ovo obezbeđuje poveć anu stabilnost i tako ć e biti posebno poželjno za kompozicije koje treba da budu stabilne kod dugotrajnog skladi štenja, i/ili imaju dug period oslobađanja in vivo. U ovom izvođenju PC komponenta poželjno sadrži najmanje 50 % sintetičkog dioleoil PC, poželjnije najmanje 75 % sintetičkog dioleoil PC i najpoželjnije suštinski čistog sintetičkog dioleoil PC. Bilo koji preostali PC je poželjno PC od soje ili jaja kao napred.

[0052] Pošto predformulacije pronalaska treba da se daju subjektu za kontrolisano oslobađanje peptidnog aktivnog agensa, važno je da komponente budu biokompatibilne. U tom pogledu, po željne lipidne matrice za upotrebu u predformulacijama ovog pronalaska imaju veliku prednost po što se i PC i DAG dobro tolerišu i razlažu se in vivo na komponente koje su prirodno prisutne u telu sisara.

[0053] Sintetički ili visoko prečišć eni PC, kao što je dioleoil fosfatidiholin (DOPC) su veoma prikladni kao cela ili deo komponente b). Sintetički dioleoil PC je najpoželjnije 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfoholin, a druge sintetičke PC komponente uključuju DDPC (1,2-didekanoil-sn-glicero-3-fosfoholin); DEPC(1,2-dierukoil-sn-gliko-ero-3-fosfoholin); DLOPC(1,2-dilinoleoil-sn-glicero-3-fosfoholin); DLPC(1,2-dilauroil-snglicero-3-fos-foholin);DMPC(1,2-dimirstoil-sn-glicero-3-fosfoholin);DOPC(1,2-dioleoil-sn-glicero-3 fosfoholin); DPPC(1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoholin); DSPC(1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfoholin); MPPC(1-Miristoil-2-palmitoil-sn-glicero 3-fosfoholin); MSPC (1-miristoil-2-stearoil-sn-glicero-3-fosfoholin); PM-PC(1-palmitoil-2-miristoil-sn-glicero-3-fosfoholin); POPC(1-palmitoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfoholin); PSPC(1-palmitoil-2-stearoil-sn-glicero-3-fosfoholin); SMPC(1-stearoil-2-miristoil-sn-glicero-3-fosfoholin); SOPC(1-stearoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfoholin); i SPPC(1-stearoil-2-palmitoil-sn-glicero-3-fosfoholin), ili bilo koja njihova kombinacija.

[0054] U nekim okolnostima, kao što je odsustvo konzervansa kao što je EDTA, upotreba sintetičkih ili visoko prečišć enih PC (npr. DOPC) može obezbediti ve ć u stabilnost aktivnog agensa u formulacijama. Tako u jednom aspektu, komponenta b) može da sadrži (npr. može da sadrži najmanje 75 %) sintetičkih ili visoko prečišć enih (npr. čisto ć a >90 %) PC (npr. DOPC). Ovo naročito može biti u odsustvu helatnih agenasa kao što je EDTA. U alternativnoj varijanti, komponenta b) može da sadrži (npr. sadrži najmanje 75 %) PC prirodnog porekla, kao što je PC od soje ili PC jaja. Ovo ć e posebno biti slučaj kada je najmanje jedna stabilizujuć a komponenta (kao što je antioksidant, helator itd.) uključena u formulaciju prekursora.

[0055] Posebno preferirana kombinacija komponenti a) i b) su GDO sa PC, posebno GDO sa sojinim PC i/ili DOPC. Odgovarajuć e količine svake komponente pogodne za kombinaciju su one količine navedene ovde za pojedinačne komponente u bilo kojoj kombinaciji. Ovo se takođe odnosi na sve kombinacije komponenti koje su ovde naznačene, naravno gde je to moguće.

[0056] Odnos komponenti a:b je u opsegu od 40:60 do 54:46. Poželjno je da je odnos a:b u opsegu 45:55 do 54:46, poželjnije 47:53 do 53:47. Najpoželjnije da je odnos a:b približno 50:50.

Komponenta c) - organski monoalkoholni rastvarač

[0057] Komponenta c) predformulacija pronalaska je najmanje jedan biokompatibilni organski monoalkoholni rastvarač koji sadrži etanol. Pošto predformulacija ima ulogu da stvori depo kompoziciju nakon primene (npr. in vivo), obično nakon kontakta sa viškom vodene tečnosti, poželjno je da ovaj rastvarač bude tolerantan za subjekta i da može da se meša sa vodenom tečnošć u, i/ ili difuziju ili rastvaranje iz predformulacije u vodenu tečnost. Stoga su poželjniji rastvarači oni koji imaju u najmanjem umerenu rastvorljivost u vodi.

[0058] Komponenta c) sadrži etanol. U jednom aspektu, komponenta c) sadrži smešu etanola sa propanolom i/ili izpropanolom. Najpoželjnije komponenta c) se sastoji od etanola.

[0059] U poželjnoj varijanti, rastvarač je takav da relativno mali dodatak smeši koja sadrži a) i b) (tj. poželjno ispod 15 %) daje velika smanjenja viskoziteta, od jednog reda veličine ili više. Kao što je ovde opisano, dodavanje 10 % organskog monoalkoholnog rastvarača može dovesti do smanjenja viskoziteta za dva ili više reda veličine u odnosu na kompoziciju bez rastvarača, ili preko depoa koji sadrži samo polarni rastvarač kao što je voda ili glicerol.

[0060] Količina komponente c) u prethodnoj formulaciji ć e imati značajan uticaj na nekoliko karakteristika. Konkretno, viskozitet i brzina (i trajanje) oslobađanja ć e se značajno promeniti sa nivoom rastvarača. Količina rastvarača ć e stoga biti u najmanjem dovoljna da obezbedi smešu niskog viskoziteta, ali ć e se dodatno odrediti tako da obezbedi željenu brzinu oslobađanja. Ovo se može utvrditi rutinskim metodama obzirom na niže navedene primere. Nivo od 5 do 16 % (npr. od 6 do 14 %) je poželjniji, a količina od oko 8 % (npr. 8 ± 2 %) je veoma efikasna.

[0061] Kao što je napred navedeno, količina komponente c) u prethodnim formulacijama pronalaska ć e biti u najmanjem dovoljna da obezbedi mešavinu niskog viskoziteta (npr. molekularni rastvor, videti napred) komponenti a), b), c ) i d) i opciono f) i lako ć e se odrediti za svaku odre đenu kombinaciju komponenti standardnim metodama.

[0062] Fazno ponašanje se može analizirati tehnikama kao što su vizuelno posmatranje u kombinaciji sa mikroskopijom polarizovane svetlosti, tehnikama rasejanja rendgenskih zraka i difrakcije, nuklearnom magnetnom rezonancom i krio-transmisionim elektronskim mikroskopom (krio-TEM) da se tra že rešenja, L2ili L3faze, ili tečne kristalne faze ili kao u slučaju krioTEM, dispergovani fragmenti takvih faza. Viskoznost se može meriti standardnim direktnim sredstvima. Kao što je napred opisano, odgovarajuć i praktičan viskozitet je onaj koji se može efikasno ubrizgati u špric i posebno sterilno filtrirati. Ovo ć e se lako proceniti kako je ovde naznačeno.

[0063] Tipični organski monoalkoholni rastvarači pogodni za upotrebu u pronalasku u kombinaciji sa etanolom obuhvataju najmanje jedan rastvarač izabran između propanola, izopropanola i benzil alkohola.

[0064] Veoma poželjna kombinacija za komponente a), b) i c) je soja PC, GDO i etanol. Kao što je napred navedeno, odgovarajuć e količine svake komponente pogodne za kombinaciju su one količine navedene ovde za pojedinačne komponente, u bilo kojoj kombinaciji.

[0065] Poželjno je da malo ili ništa od komponente c) ne sadrži ugljovodonike supstituisane halogenom pošto oni imaju tendenciju da imaju nižu biokompatibilnost.

[0066] Komponenta c) kako se ovde koristi može biti jedan rastvarač ili mešavina pogodnih rastvarača, ali ć e generalno biti niskog viskoziteta. Ovo je važno jer je jedan od ključnih aspekata sadašnjeg pronalaska da on obezbeđuje predformulacije koje su niskog viskoziteta i primarna uloga odgovarajuć eg rastvara ča je da smanji ovaj viskozitet. Ovo smanjenje ć e biti kombinacija efekta ni žeg viskoziteta rastvarača i efekta molekularnih interakcija između rastvarača i kompozicije lipida. Jedno zapažanje sadašnjih pronalazača je da ovde opisani rastvarači koji sadrže kiseonik niskog viskoziteta imaju veoma povoljne i neočekivane molekularne interakcije sa lipidnim delovima kompozicije, čime se obezbeđuje nelinearna redukcija viskoziteta uz dodatak male zapremine rastvarača.

[0067] Viskoznost komponente rastvarača "niskog viskoziteta" c) (pojedinačni rastvarač ili smeša) obično ne bi trebalo da bude veći od 18 mPas na 20°C. Ovo je poželjno ne više od 15 mPas, poželjnije ne više od 10 mPas i najpoželjnije ne više od 7 mPas na 20°C.

Komponenta d) - Polarni rastvarač

[0068] Neke od posebnih prednosti kompozicija ovog pronalaska dolaze kroz neočekivanog otkrić a da upotreba rastvarača alkohola u kombinaciji sa polarnim rastvaračem kao što je diol ili voda omoguć ava značajno poboljšanje performansi određenih kompozicija lipida zasnovanih na kontrolisanom oslobađanju. Konkretno, primeć eno je da dodatak diola, kao što je propilen glikol ili voda, smanjuje viskozitet formulacije lipida/alkohola/aktivnog agensa bez negativnog uticaja na profil otpu štanja aktivnog agensa i/ili dozvoljava povećanje proporcije alkohola bez negativnog uticaja na profil oslobađanja i/ili omoguć ava poboljšanje profila oslobađanja. Pod "štetnim uticajem na profil oslobađanja" se želi ukazati na to da je odnos Cmax/Cave poveć an i/ili je pove ć an odnos Cmax/Cmin (na primer pove ć an za faktor od najmanje 1,2). Slično, poboljšanje profila oslobađanja ukazuje na to da je odnos Cmax/Cave i/ili Cmax/Cmin smanjen (npr. smanjen za faktor od najmanje 1,2.)

[0069] Iako je ranije sugerisano da kompozicije sa kontrolisanim oslobađanjem lipida treba da budu formulisane u velikoj meri u odsustvu vode, kako bi se izbegla konverzija u tečne kristalne faze visokog viskoziteta, sada je dalje utvrđeno da mala i pažljivo kontrolisana količina polarnog rastvarača kao što je voda može pružiti značajne koristi. Konkretno, uključivanje ovog polarnog rastvarača (poželjno sadrži vodu) omoguć ava dalja poboljšanja u kontroli početnog oslobađanja aktivnog agensa, omogu ć ava ve ć e stabilno punjenje nekih peptidnih aktivnih agenasa, obezbeđuje brže formiranje depoa i/ili obezbeđuje dalje smanjenje nelagodnosti nakon injekcije. Bilo koji od ovih faktora potencijalno pru ža značajno poboljšanje u kontekstu terapijske isporuke lekova, zdravlja pacijenata i/ili pridržavanja propisa.

[0070] Predformulacije ovog pronalaska moraju tako da sadrže i polarni rastvarač, komponentu d). Pogodan iznos ć e biti 1,2 -20 % težine, posebno 2-18 % težine. Poželjnije je da je komponenta d) prisutna u opsegu 5-15 % težine, posebno 6-12 % težine. Komponenta d) se bira između vode, propilen glikola ili njihovih smeša. U jednom poželjnom aspektu, predformulacije pronalaska sadrže etanol kao komponentu c) sa vodom i/ili propilen glikolom kao komponentom d).

[0071] U jednom aspektu preformulacija sadrži najmanje 1,5 % (npr. najmanje 4,5 %) vode kao deo komponente d) (po težini ukupne kompozicije) sa ostatkom propilen glikola. Poželjno je najmanje 5 % vode sa balansom komponente d) koji je PG. Komponenta d) može da sadrži ili da se sastoji od vode.

[0072] U alternativnoj varijanti, komponenta d) može da sadrži ili se sastoji od propilen glikola.

[0073] Poželjno da ukupan nivo komponenti c) i d) nije već i od 35 % težine, poželjno ne više od 30 % težine, poželjno 10-30 % težine, najpoželjnije 12-25 % težine.

[0074] Odnos komponenti c) i d) ć e takođe imati potencijalne prednosti u kompozicijama pronalaska. Konkretno, uključivanjem nekog polarnog rastvarača koji se može mešati sa monoalkoholnom komponentom (posebno vodom), blagi oseć aj koji može biti izazvan na mestu ubrizgavanja od sadržaja alkohola može se u velikoj meri eliminisati. Tako, u jednom aspektu, odnos komponenti c):d) mo že biti u opsegu 30:70 do 70:30, poželjnije 40:60 do 60:40. U jednom aspektu, količina alkoholne komponente c) po težini nije već a od količine polarnog rastvarača d). Odnosi c):d) u rasponu od 30:70 do 50:50 su stoga odgovarajuć i u takvoj realizaciji. Približno jednake količine komponenti c) i d) su veoma prikladne.

[0075] Veoma poželjna kombinacija za aspekt lipidnog matriksa je soja PC, GDO, etanol i voda/propilen glikol ili njihove smeše. Kao što je napred navedeno, odgovarajuć e količine svake komponente pogodne za kombinaciju su one količine navedene ovde za pojedinačne komponente, u bilo kojoj kombinaciji.

Komponenta e) – Peptidni aktivni agens

[0076] Predformulacije ovog pronalaska sadrže jedan ili više analoga somatostatina.

[0077] Somatostatin ima dva aktivna oblika proizvedena alternativnim cepanjem jednog preproteina: jedan od 14 amino kiseline, drugi od 28 aminokiseline. Somatostatin 1-14 je ciklični peptidni hormon koji ima sekvencu Ala-Gly-Cys- Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys, pri čemu su dva cistinska ostatka povezana disulfidnim mostom za generisanje β-okreta tipa II na ključnoj sekvenci vezivanja Phe-Trp-Lys-Thr. Somatostatin je prirodni peptidni hormon poznat i kao faktor inhibicije osloba đanja hormona rasta i ima ulogu antagonista insulina, glukogena i nekih drugih hormona u oslobađanju somatotropina (humanog hormona rasta). Biološki poluživot prirodnog somatostatina je veoma kratak (1-3 minuta) i sam po sebi ga je teško formulisati kao održivi terapeutik. Međutim, kompozicije depo lipida iz ovog pronalaska su visoko efikasne za kratkotrajne aktivne agense i sve već i broj analoga somatostatina postaje dostupan sa ve ć om aktivnoš ć u i/ili dužim vremenom klirensa in vivo.

[0078] Analozi somatostatina, kao što su oktreotid, lanreotid, vapreotid, pasireotid (SOM 230) i srodni peptidi, koriste se ili su indikovani u lečenju različitih stanja pri čemu se obično primenjuju tokom dužeg perioda.

[0079] Oktreotid, na primer, je sintetički oktapeptid sa sekvencom D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Throl (2-7 disulfidni most) i obično se primenjuje kao acetatna so. Nekoliko kliničkih studija takođe sadrži oktreotid pamoat. Ovaj derivat zadržava ključni Phe-(D)Trp-Lys-Thr β-okret, ali, za razliku od prirodnog hormona, ima terminalni poluživot od oko 1,7 sati. Oktreotid se koristi u lečenju stanja uključujuć i karcinoidne tumore i akromegaliju, a nakon početne doze se obično daje tokom dugotrajnog perioda od nekoliko nedelja, ili češć e mnogo meseci ili godina. Pored toga, analozi somatostatina su indikovani u lečenju mnogih karcinoma, jer je otkriveno da veliki broj tumora ekspresuje somatostatinske receptore. Od posebnog interesa su oni koji eksprimiraju "sst(2)" i/ili "sst(5)" receptor.

[0080] Najčešć a "jednostavna" formulacija oktreotida je "Sandostatin" (RTM) kompanije Novartis. Ovo je rastvor za subkutanu (sc) injekciju i doza od 100 mg dostiže radnu koncentraciju od 5,2 ng/ml 0,4 sata nakon injekcije. Trajanje delovanja može biti do 12 sati ali s.c. doziranje se obično sprovodi svakih 8 sati. Očigledno, s.c. injekcija 3 puta dnevno tokom meseci ili godina nije idealan re žim doziranja.

[0081] Da bi se izbegla potreba za višestrukim dnevnim injekcijama oktreotida, dostupna je sledeć a formulacija; „Sandostatin LAR“(RTM), opet iz Novartisa. Ovo je formulacija oktreotida u mikrosferama polimlečne koglikolne kiseline koja se, nakon resuspenzije, može primeniti intramuskularnom (i.m.) injekcijom.

[0082] Karcinoidni tumori su tumori creva koji nastaju iz specijalizovanih ć elija sa parakrinim funkcijama (APUD ć elije). Primarni tumor je obično u slepom crevu, pri čemu je klinički benigni. Sekundarni, metastatski, karcinoidni tumori creva luče prevelike količine vazoaktivnih supstanci, uključujuć i serotonin, bradikinin, histamin, prostaglandine i polipeptidne hormone. Klini čki rezultat je karcinoidni sindrom (sindrom epizodnog crvenila kože, cijanoze, grčeva u stomaku i dijareje kod pacijenata sa valvularnom bolešć u srca i, ređe, astmom i artropatijom). Ovi tumori mogu rasti bilo gde u gastrointestinalnom traktu (i u pluć ima) sa približno 90 % u slepom crevu. Ostatak se javlja u ileumu, želucu, debelom crevu ili rektumu. Trenutno, lečenje karcinoidnog sindroma počinje i.v. bolus injekcijom prać enom i.v. infuzijom. Kada se utvrdi dovoljan efekat na simptome, zapo činje tretman depo formulacijom oktreotida formulisanog u mikrosferama mlečne-ko-glikolne kiseline (PLGA). Međutim, tokom prve dve nedelje ili više nakon injekcije depoa, dnevno s.c. preporučuju se injekcije oktreotida da bi se nadoknadilo sporo oslobađanje iz PLGA sfera.

[0083] Akromegalija je redak hronični i podmukli hormonski poremeć aj koji se javlja kada hipofiza proizvodi višak hormona rasta (GH). Najčešć e pogađa odrasle osobe srednjih godina i može dovesti do prerane smrti.

[0084] Dijabetes melitus, hipertenzija i poveć an rizik od kardiovaskularnih bolesti su najte že zdravstvene posledice akromegalije. Pored toga, pacijenti sa akromegalijom imaju poveć an rizik od razvoja polipa debelog creva, koji mogu postati kancerogeni. Prevalencija akromegalije je oko 60 slu čajeva na milion stanovnika, a incidencija je 3,3 nova slučaja na milion godišnje. Reč akromegalija potiče od grčkih reči za "ekstremitete" (aero) i "veliko" (megalija), jer je jedan od najčešć ih simptoma ovog stanja nenormalan rast šaka i stopala.

[0085] Akromegalija je uzrokovana produženom prekomernom proizvodnjom hormona rasta (GH) i prekomernom proizvodnjom insulina sličnog faktora rasta-I (IGF-I). U 98 procenata slučajeva, prekomerna proizvodnja GH je uzrokovana adenomom hipofize. Brzina proizvodnje GH i agresivnost tumora variraju od pacijenta do pacijenta. Generalno, agresivniji tumori se primeć uju kod mla đih pacijenata.

[0086] Akromegalija je teška bolest koja se često dijagnostikuje kasno. Stope morbiditeta i mortaliteta su visoke, posebno zbog povezanih kardiovaskularnih, cerebrovaskularnih i respiratornih poremeć aja i maligniteta.

[0087] Lečenje akromegalije započinje periodom s.c. injekcije tri puta dnevno (optimalna dnevna doza = 300 mg oktreotida). Nakon poslednjeg s.c. primeć uje se doza i obezbeđivanje odgovaraju ć eg efekta, a zatim se započinje tretman sa depo formulacijom oktreotida formulisanog u mikrosferama poli mle čne-koglikolne kiseline (PLGA). Prilagođavanje doze se vrši nakon merenja biomarkera (HG i IGF-1), obično nakon oko 3 meseca.

[0088] Postojeć a formulacija oktreotida sa sporim oslobađanjem se oslanja na dobro utvrđen tip depo formulacije degradirajuć eg polimera. Obično su takve formulacije zasnovane na biorazgradivom polimeru kao što je poli (mlečna kiselina) (PLA) i/ili poli (mlečna-ko-glikolna kiselina) (PLGA) i mogu biti u obliku rastvora u organskom rastvaraču, predpolimer pomešan sa inicijatorom, inkapsulirane polimerne čestice ili (kao u slučaju oktreotida) polimerne mikrosfere.

[0089] U jednom tipičnom izvođenju, analog somatostatina ć e generalno biti formulisan kao od 0,02 do 12 % težine od ukupne formulacije. Tipične vrednosti ć e biti od 0,1 do 10 %, poželjno od 0,2 do 8 %, poželjnije od 0,5 do 6 % (npr. od 1 do 3%). Ovi nivoi se mogu primeniti na sve aspekte pronalaska, gde kontekst dozvoljava. Za oktreotid, dalji poželjni opseg je između od 0,5 do 4 % težine, poželjnije od 1 do 3 % težine, a najpoželjnije od 1,5 do 2,5 % težine.

[0090] U srodnoj realizaciji, peptidni aktivni agens može biti formulisan na nivou koji se ne može lako postić i u odsustvu polarne komponente rastvarača u smeši. U takvom izvođenju, sadržaj analoga somatostatina je tipično najmanje 0,7 %, poželjno najmanje 1 %, još poželjnije najmanje 1,8 % ili najmanje 2 % težine formulacije. Nivoi od najmanje 3 % i najmanje 4 % se mogu postić i ovim pronalaskom, kao i nivoi optereć enja do 8, 10 ili 12 %. Takve kompozicije ovog pronalaska tipično ne samo da sadrže veoma visok nivo analoga somatostatina, npr. oktreotida, kao što je naznačeno, ali su dodatno stabilni na skladištenje bez gubitka ili degradacije aktivnog agensa tokom značajnih perioda, kao što je ovde naznačeno. Takvi periodi ć e generalno biti najmanje mesec dana na 25°C ili najmanje mesec dana na 5°C, poželjno najmanje 3 meseca, a poželjnije najmanje 6 meseci na 5°C ili alternativno na 25°C. Ovi stepeni stabilnosti su primenljivi na sve aspekte pronalaska, gde kontekst dozvoljava i odnosi se na stabilnost i aktivnog agensa i faznog ponašanja predformulacije.

[0091] U srodnoj varijanti, u situaciji kada je peptidno aktivno sredstvo visoko rastvorljivo u alkoholnoj komponenti, može biti prednost ograničiti ovu rastvorljivost ovog sredstva. Bez vezivanja teorijom, smatra se da prekomerna rastvorljivost u ovoj alkoholnoj komponenti može dovesti do toga da alkohol transportuje značajnu količinu aktivnog agensa iz depo kompozicije dok se formira in vivo. Prema tome, u jednom aspektu ovog pronalaska, polarni rastvarač se koristi za kontrolu rastvorljivosti aktivnog sredstva u prethodnoj formulaciji, tako da pomaže u kontroli profila oslobađanja.

[0092] Kada peptidni aktivni agens sadrži analog somatostatina, (npr. oktreotid), pogodne doze za uključivanje u formulaciju, a samim tim i zapremina formulacije koja se koristi, zavisić e od brzine oslobađanja (kako se kontroliše, na primer, tipom rastvarača i korišć ena količina, sadržaj antioksidansa i tako dalje) i trajanje oslobađanja, kao i željeni terapeutski nivo, aktivnost specifičnog agensa i brzina klirensa određenog izabranog aktivnog sredstva. Tipično količina od oko 0,05 do 40 mg nedeljno trajanja depoa, poželjno 0,1 do 20 mg nedeljno (npr. 1 do 10 mg nedeljno) u trajanju od 1 do 24 nedelje, poželjno 2 do 16 (npr. 3, 4 , 8, 10 ili 12) nedelja. U alternativnom izvođenju, predformulacija može biti formulisana za doziranje nedeljno (npr. svakih 761 dan). Ukupna doza od 0,05 do 250 mg po dozi bi bila pogodna za obezbeđivanje terapijskog nivoa između 7 i 168 dana. Ovo ć e poželjno biti 0,1 do 192 mg, npr. 0,2 do 160 mg, 0,1 do 1,6 mg, 20 do 160 mg itd. Očigledno, stabilnost aktivne i linearnosti brzine oslobađanja ć e značiti da optereć enje i trajanje možda ne ć e biti linearna veza. Depo koji se primenjuje svakih 30 dana može imati, na primer, 0,2 do 20 mg ili depo od 90 dana ima 60 do 120 mg analoga somatostatina na primer. oktreotid. Očigledno je takođe, biološki poluživot specifičnog aktivnog sredstva bić e posebno važan. Poluvreme eliminacije somatostatina je manje od 5 minuta, tako da ć e za produ ženo oslobađanje biti potrebna relativno velika količina (npr. prema višem kraju opsega). Za analog kao što je oktreotid, sa mnogo dužim poluživotom, potrebna količina ć e očigledno biti niža. Stručnjaci ć e lako utvrditi odgovarajuć e nivoe za druge aktivne supstance pozivaju ć i se na poznati terapeutski nivo, željeno trajanje delovanja i zapreminu koja treba da se ubrizga. Dobar osnovni proračun bi bio da se obična dnevna doza aktivnog agensa pomnoži sa brojem dana trajanja depoa. Formulacija se zatim može testirati na linearnost oslobađanja i prilagoditi prema potrebi.

[0093] Izvanredan je razvoj sadašnjih formulacija da se aktivni agensi peptida sa veoma kratkim poluživotom, koji sadrže analoge somatostatina, mogu pripremiti i primeniti u depo prekursoru ovog pronalaska, i obezbedić e kontrolisano oslobađanje tokom nekoliko dana ili čak i nedeljama. Ovo je uprkos izuzetno kratkom biološkom poluživotu aktivnog sredstva (npr. manje od 1 sata, poželjno manje od 15 minuta, na primer manje od 5 minuta). Prema tome, u jednom aspektu, aktivni agens ima poluvreme manje od 1 sata, npr. manje od 15 minuta i formira se depo predformulacije koji obezbe đuje produženo oslobađanje najmanje 7 dana, poželjno najmanje 14 dana, poželjnije najmanje 28 dana.

[0094] Kao u suštini svi organski molekuli, lipidi i biološki aktivni agensi su termodinamički nestabilni na oksidaciju. Kao rezultat toga, mnoge formulacije lipida, uključujuć i one koje sadrže bioaktivne agense kao što su API, podložne su degradaciji pri skladištenju, posebno oksidacijom.

[0095] U veoma poželjnom izvođenju, aspekt lipidnog matriksa je soja PC, GDO, etanol i voda/propilen glikol ili njihove smeše, a peptidni aktivni agens je analog somatostatina. Kao što je napred navedeno, odgovarajuć e količine svake komponente pogodne za kombinaciju su one količine navedene ovde za pojedinačne komponente, u bilo kojoj kombinaciji.

Opciona komponenta f) - Antioksidans

[0096] Komponenta f) je antioksidans. Najpoželjnije se bira između askorbinske kiseline, etilendiamintetrasirć etne kiseline (EDTA) i limunske kiseline.

[0097] U svim aspektima pronalaska, komponenta f) je obično prisutna u težinskom odnosu antioksidansa prema aktivnom agensu peptida od 1:50 do 1:1500, poželjno 1:100 do 1:1300, a najpoželjnije 1:150 do 1:1250. Pošto su tipični antioksidansi niže molekularne težine od aktivnih peptidnih agenasa, udeo antioksidansa po težini može biti relativno mali. Na primer, sa malim regulatorom pH vrednosti molekulske težine (npr. manjim od 500 amu), 0,0001 do 0,5 % kompozicije može biti antioksidans, poželjno 0,0005 do 0,2 %, poželjnije 0,0008 do 0,1 %, npr.0,001 do 0,015 %.

[0098] Nažalost, mnogi uobičajeni antioksidanti nisu visoko kompatibilni sa lipidnim sistemima. Zaista, sadašnji pronalazači su prethodno ustanovili da neki antioksidansi koji se obično koriste u prethodnim sistemima mogu izazvati poveć anu degradaciju aktivnih agenasa u lipidnom sistemu. Ovo se posebno odnosi na peptidne aktivne agense. Sadašnji pronalazači su stoga analizirali niz potencijalnih antioksidansnih jedinjenja i klasa za upotrebu sa matričnim sistemima zasnovanim na lipidima i iznenađujuć e su otkrili da je jedna posebna klasa antioksidanata neobično pogodna za upotrebu u ovim sistemima.

[0099] Komponenta antioksidansa je generalno uključena u opsegu od 0,0001 do 0,5 % težine ukupne predformulacije. Oko 0,0005 do 0,015 % antioksidansa (posebno EDTA) je posebno poželjno, posebno u kombinaciji sa drugim poželjnim komponentama i rasponima koji su ovde navedeni iznad i ispod.

[0100] Podaci o stabilnosti koji koriste niz različitih antioksidanasa pokazuju da su EDTA antioksidanti iznenađujuć e efikasniji od drugih antioksidanata u suzbijanju oksidativne degradacije bioaktivnih agenasa. EDTA kao antioksidans takođe može pokazati sinergistički efekat u kombinaciji sa antioksidansima iz ovog pronalaska, u održavanju hemijske i fizičke stabilnosti peptidnog aktivnog agensa i kompletne predformulacije. EDTA ima stabilizujuć i efekat na aktivni agens.

[0101] Pod "stabilizacijom" je naznačeno poveć anje rastvorljivosti ili dispenzabilnost komponente (naročito aktivnog agensa) u sistemu za isporuku depoa, ili alternativno poveć anje stabilnosti kompozicije, posebno u pogledu fizičke i hemijske stabilnosti rastvorenog ili dispergovanog aktivnog sredstva. Poveć anje stabilnosti se stoga može pokazati rastvaranjem, disperzijom ili suspenzijom ve ć e količine aktivnog agensa u prisustvu antioksidansa nego što bi se postiglo ekvilibracijom, kao što je mešanje tokom dužeg perioda (npr. 5 dana na 25°C), u odsustvu antioksidansa. Jednako, poveć anje stabilnosti se mo že demonstrirati hemijskom i/ili fizičkom stabilnošć u peptidnog aktivnog agensa u lipidnoj formulaciji tokom dužeg perioda nego što bi to bilo uočeno u odsustvu antioksidansa. Ovo bi poželjno bilo testirano u uslovima tipičnog skladištenja, kao što su 0-5°C, 25°C i/ili temperatura okoline. Ovo je dalje opisano u nastavku.

Opcione dodatne komponente

[0102] U jednoj posebno poželjnoj realizaciji ovog pronalaska, kompozicije (predformulacije i rezultujuć i depoi) ne uključuju sredstva za fragmentaciju, kao što su polietilenoksid ili poli(etilen glikol) (PEG) agens za fragmentaciju, npr. PEG kalemljeni lipid i/ili surfaktant.

[0103] Na primer, komozicije poželjno ne uključuju agense za fragmentaciju kao što su polisorbat 80 (P80) ili drugi polisorbati (npr. polisorbat 20), PEGilovani fosfolipidi (PEG-lipidi kao što je DSPE-PEG(2000), DSPE-PEG(5000), DOPE-PEG(2000) i DOPE-PEG(5000)), Solutol HS 15, PEGilirane masne kiseline (npr. PEG-oleat), blok kopolimeri kao što su Pluronic<®>F 127 i Pluronic<®>F68, derivati etoksilovanog ricinusovog ulja (npr. Chremophores), PEGilovani estri gliceril masnih kiselina (kao što je TMGO-15 od Nikko Chemicals) i PEGilovani tokoferoli (kao što je d-alfa tokoferil poli(etilen glikol) 1000 sukcinat iz Eastman E TPGS.

[0104] Međutim, polipeptid je aktivan kao prah (npr. u kompletu prema pronalasku), kao i aktivni agens rastvoren u lipidnoj formulaciji, može dobiti stabilnost (i skladištenje i stabilnost in vivo) određenim stabilizujuć im aditivima. Takvi aditivi uključuju še ć ere (npr. saharozu, trehalozu, laktozu itd.), polimere (npr. poliole kao što je karboksi metil celuloza), aminokiseline (kao što su metionin, glutamat, lizin itd.), komponente kiselina rastvorljive u lipidima kao što su Hcl, lipidi anjonskih kiselina i/ili površinski aktivni agensi (kao što su dioleoil fosfatidil glicerol (DOPG), palmitoiloleoil fosfatidilglicerol (POPG) i oleinska kiselina (OA)).

[0105] Formati sa jednom dozom moraju ostati stabilni i moć ni u skladištenju pre upotrebe, ali se mogukoristiti za jednokratnu upotrebu. U jednom aspektu, format jedne doze je stabilan u uslovima hlađenja (npr. 0-5°C) najmanje 12 meseci. Štaviše, takva preformulacija može biti stabilna na sobnoj temperaturi (npr. 25°C) najmanje 12 meseci. Formati sa više doza ne samo da moraju ostati stabilni i čvrsti u skladištenju pre upotrebe, već takođe moraju ostati stabilni, čvrsti i relativno bez bakterija tokom perioda primene režima upotrebe više doza nakon prve upotrebe u kojoj su formati ugroženi. Iz tog razloga formati sa više doza često zahtevaju antimikrobno ili mikrobno-statičko sredstvo, npr. bakteriostatsko sredstvo, konzervans.

[0106] Međutim, proizvodnja konzerviranih farmaceutskih preparata koji sadr že proteinske ili peptidne aktivne supstance se često pokazala teškom, jer kada se koriste konzervansi, oni dovode do problema sa stabilnošć u. Često su proteini inaktivirani i formiraju se agregati, što ponekad može dovesti do prijavljene intolerancije na mestu injekcije ili imunogenosti. Ovo se može dodatno pogoršati dodatnim ekscipijentima ili komponentama formulacije.

[0107] U jednom aspektu, svaka od varijanti ovde opisanih može opciono da sadrži antimikrobno ili mikrobno-statičko sredstvo, koje uključuje bakteriostatske agense i konzervans. Takvi agensi uključuju benzalkonijum hlorid, m-krezol, benzil alkohol ili druge fenolne konzervanse. Mogu se koristiti tipi čne koncentracije poznate u stanju tehnike.

[0108] Međutim, iznenađujuć e je ustanovljeno da predmetne formulacije sa peptidnim aktivnim agensom ne zahtevaju dodatni konzervans, antimikrobno ili mikrobno-stati čko sredstvo, npr. bakteriostatik ili bakteriocid ili dodatnu količinu takvog agensa da bi se obezbedio format za višestruku upotrebu. Formulacije kao što su ovde opisane obezbeđuju efekat konzervacije sa prihvatljivom stabilnošć u peptida i stabilnošć u formulacije. Mogu se koristiti za jednokratnu i višedoznu upotrebu. S tim u vezi, poželjne formulacije date ovde za višenamenski format mogu sadržati etanol, propilen glikol, limunsku kiselinu i/ili EDTA kao što je opisano, poželjno u dovoljnim koncentracijama da ne samo da obezbede svoju primarnu korist kako je ovde navedeno, već i u dovoljnoj koncentraciji, bilo samostalno ili u bilo kojoj kombinaciji, da obezbedi efekat konzervacije uz održavanje stabilnosti aktivne supstance i formulacije.

[0109] Dodatne komponente iznad onih navedenih kao komponente od a) do f) ć e, tamo gde su uop šte prisutne, poželjno biti prisutne u količini od 0 do 5 % (npr. 0,01 % do 5 %) težine, poželjno ne više od 2 % težine, a poželjnije ne više od 1 % težine.

[0110] U jednom aspektu, komponente a) i b) (uzimajuć i u obzir bilo koju ne čisto ć u svojstvenu prirodi ovih komponenti) čine najmanje 95 % lipidnih komponenti kompozicije. Poželjno je da se najmanje 99 % ukupnog sadržaja lipida u prethodnoj formulaciji sastoji od komponenti a) i b). Po željno, lipidna komponenta predformulacije se u suštini sastoji od komponenti a) i b).

Administracija

[0111] Predformulacije ovog pronalaska su generalno formulisane za parenteralnu primenu. Ova primena generalno neć e biti intravaskularna metoda, ve ć ć e poželjno biti subkutana (s.c.), intrakavitarna ili intramuskularna (i.m.). Obično ć e se primena vršiti injekcijom, koja se ovde koristi za označavanje bilo kojeg metoda u kojem formulacija prolazi kroz kožu, kao što je iglom, kateterom ili injektorom bez igle (bez igle). Međutim, moguć e je iskoristiti prednost visokog optere ć enja i drugih korisnih karakteristika ove formulacije u neparenteralnim primenama, uključujuć i topikalnu ili sistemsku primenu na kožu, mukozne membrane, nazalnu, bukalnu i/ili oralnu šupljinu. Poželjno, takva neparenteralna primena je za lokalnu upotrebu.

[0112] Poželjna parenteralna primena je i.m ili s.c. injekcija, najpo željnije dubokom s.c. injekcija. Važna karakteristika kompozicije pronalaska je da se može primeniti i.m. i s.c. i drugim putevima bez toksičnosti ili značajnih lokalnih efekata. Takođe je pogodna za intrakavitalnu primenu. Duboka s.c. injekcija ima prednost što je manje duboka i manje bolna za subjekta od (duboke) i.m. injekcije koja se koristi za neke trenutne depoe i tehnički je najpogodnija u ovom slučaju jer kombinuje lakoć u ubrizgavanja sa malim rizikom od lokalnih neželjenih efekata. Iznenađujuć e je zapažanje sadašnjih pronalazača da formulacije obezbeđuju produženo oslobađanje aktivnog sredstva tokom predvidljivog vremenskog perioda i subkutanom i intramuskularnom injekcijom. Ovo stoga omoguć ava da se mesto injekcije u velikoj meri razlikuje i dozvoljava da se doza primeni bez detaljnog razmatranja dubine tkiva na mestu injekcije.

[0113] Poželjne lipidne preformulacije ovog pronalaska obezbeđuju nelamelarnu tečnost tečne kristalne depo kompozicije nakon izlaganja vodenim tečnostima, posebno in vivo. Kako se ovde koristi, termin "nelamelarni" se koristi da označi normalnu ili obrnutu tečnu kristalnu fazu (kao što je kubična ili heksagonalna faza) ili L3fazu ili bilo koju njihovu kombinaciju. Termin tečni kristal označava sve heksagonalne, sve kubične tečne kristalne faze i/ili sve njihove mešavine. Heksagonal kako se ovde koristi označava "normalan" ili "obrnuti" heksagonal (poželjno obrnut), a "kubičan" označava bilo koju kubičnu tečnu kristalnu fazu osim ako nije drugačije naznačeno. Stručnjak u ovoj oblasti neć e imati poteško ć a da identifikuje one kompozicije koje imaju odgovarajuć e fazno pona šanje prema opisu i Primerima koji su ovde dati, i na WO2005/117830, ali najpoželjnija oblast kompozicije za fazno ponašanje je gde je odnos komponenti a:b u regionu od 40:60 do 70:30, poželjno od 45:55 do 55:45 i poželjnije od 40:60 do 54:46. Odnosi od oko 50:50 (npr. ± 2) su veoma poželjni, najpoželjnije oko 50:50.

[0114] Važno je shvatiti da su predformulacije ovog pronalaska niske viskoznosti. Kao rezultat toga, ove predformulacije ne smeju biti ni u jednoj masivnoj tečno-kristalnoj fazi jer sve tečne kristalne faze imaju viskozitet značajno već i nego što bi se moglo primeniti pomo ć u šprica ili sličnog dozatora za injektiranje. Prethodne formulacije ovog pronalaska ć e stoga biti u netečnom kristalnom stanju, kao što je rastvor, L2ili L3faza, posebno rastvor ili L2. L2faza kako se ovde koristi je poželjno "nabubrena" L2faza koja sadrži više od 5 % težine, poželjno više od 7 %, a najpoželjnije više od 9 % organskog mono-alkoholnog rastvarača (komponenta c) koji ima efekat smanjenja viskoziteta. Predformulacije pronalaska koje su u L2fazi formiraju jednu poželjnu grupu preformulacija i one ć e generalno sadržati najmanje 2 % vode kao polarnog rastvarača.

[0115] Kako se ovde koristi, termin "mešavina niskog viskoziteta" se koristi za označavanje smeše koja se može lako primeniti na subjekta i posebno se lako može primeniti pomoć u standardnog rasporeda šprica i igle. Ovo može biti naznačeno, na primer, moguć noš ć u da se dozira iz šprica za jednokratnu upotrebu od 1 ml kroz malu iglu. Poželjno, mešavine niskog viskoziteta mogu da se doziraju kroz iglu od 19 awg, poželjno iglu manju od 19 gauge, poželjnije 23 awg (ili najpoželjnije čak i 27 gauge) ručnim pritiskom. U posebno poželjnom rešenju, mešavina niske viskoznosti treba da bude smeša koja može da prođe kroz standardnu sterilnu filtracionu membranu kao što je filter šprica od 0,22 µm. Viskoznost predformulacije je u opsegu od 0,1 do 5000 mPas, poželjno 1 do 1000 mPas, poželjnije 10 do 750 mPas i najpoželjnije 25 do 500 mPas na 20°C.

[0116] Primeć eno je da dodavanjem malih količina organskog mono-alkoholnog rastvarača niskog viskoziteta, kao što je ovde naznačeno, može da se obezbedi veoma značajnu promenu viskoziteta. Na primer, dodavanje samo 5 % rastvarača mešavini lipida može smanjiti viskozitet 100 puta, a dodavanje 10 % može smanjiti viskozitet do 10.000 puta. Da bi se postigao ovaj nelinearni, sinergistički efekat u smanjenju viskoziteta, važno je da se koristi rastvarač odgovarajuć e niske viskoznosti i odgovaraju ć eg polariteta. Takvi rastvarači uključuju one koji su ovde opisani. Poželjne mešavine niske viskoznosti uključuju molekularne rastvore, uključujuć i disperzije peptidnog aktivnog agensa u molekularnom rastvoru drugih komponenti.

[0117] Nakon davanja, poželjne preformulacije zasnovane na lipidima iz ovog pronalaska prolaze kroz prelaznu faznu strukturu iz mešavine niskog viskoziteta u depo kompoziciju visokog viskoziteta (uglavnom prianjajuć i na tkivo). Generalno, ovo ć e biti prelaz iz molekularne sme še, nabubrele L2i/ili L3faze u jednu ili više (visokog viskoziteta) tečnih kristalnih faza kao što su normalne ili obrnute heksagonalne ili kubične tečne kristalne faze ili njihove smeše. Dalje fazne tranzicije se takođe mogu desiti nakon primene. Očigledno, potpuna fazna tranzicija nije neophodna za funkcionisanje pronalaska, ali ć e barem povr šinski sloj primenjene smeše formirati tečnu kristalnu strukturu. Generalno, ova tranzicija ć e biti brza u najmanjem za oblast površine primenjene formulacije (onaj deo u direktnom kontaktu sa vazduhom, telesnim površinama i/ili telesnim tečnostima). Ovo ć e najpoželjnije trajati nekoliko sekundi ili minuta (npr. od 1 sekunde do 30 minuta, poželjno do 10 minuta, poželjnije 5 minuta manje). Ostatak kompozicije može sporije promeniti fazu u tečnu kristalnu fazu difuzijom i/ili kako se površinski region disperguje.

[0118] Bez vezivanja teorijom, veruje se da nakon izlaganja višku vodene tečnosti, preformulacije pronalaska gube deo ili ceo organski rastvarač koji je u njima (npr. difuzijom) i uzimaju vodenu tečnost iz tela okruženja (npr. okruženje in vivo). Za preformulacije lipida, poželjno je da najmanje deo formulacije generiše nelamelarnu, posebno tečnu kristalnu faznu strukturu. U već ini slučajeva ove nelamelarne strukture su visoko viskozne i ne mogu se lako rastvarati ili dispergovati u in vivo okruženju. Rezultat je monolitni "depo" stvoren in vivo sa samo ograničenom površinom izloženosti telesnim tečnostima. Štaviše, pošto nelamelarna struktura ima velike polarne, apolarne i granične regione, lipidni depo je veoma efikasan u rastvorljivosti i stabilizaciji aktivnih agenasa kao što su peptidi i štiti ih od mehanizama degradacije. Kako se depo kompozicija formirana iz preformulacije postepeno razgra đuje tokom perioda dana, nedelja ili meseci, aktivni agens se postepeno oslobađa i/ili difunduje iz kompozicije. Pošto je okruženje u formulaciji depoa predformulacije pronalaska su veoma pogodne za aktivne agense sa relativno niskim biološkim poluživotom (videti gore).

[0119] Ugrađivanjem najmanje 10 % polarnog rastvarača (posebno najmanje 5 % vode) u predformulacije, veruje se da brzina faznog prelaza u nelamelarnu (npr. tečno kristalnu) fazu na površini ubrizgane predformulacije može biti poboljšana u poređenju sa kompozicijama koje sadrže organske rastvarače u značajnom odsustvu vode. Na taj način se poboljšava učinak rezultujuć eg depoa i postiže se dalja kontrola oslobađanja aktivnog sredstva.

[0120] Depo sistemi formirani formulacijama ovog pronalaska su visoko efikasni u zaštiti aktivnog sredstva od razgradnje i na taj način omoguć avaju produženi period oslobađanja. Formulacije pronalaska stoga mogu da obezbede in vivo depoe peptidnih aktivnih agenasa koji zahtevaju davanje samo jednom svakih od 5 do 90 dana, poželjno od 5 do 60 dana, poželjnije od 6 do 32. Očigledno, duži period stabilnog oslobađanja je poželjan za komociju pacijenta i usaglašenost, kao i zahtevanje manje vremena od zdravstvenih radnika ako kompozicija ne treba da se samostalno primenjuje. Tamo gde se kompozicija treba davati samostalno, usaglašenost pacijenata može biti potpomognuta nedeljnom (npr. svakih 7 dana, opciono 61 dan) ili mesečnom (npr. svakih 28 ili 30 dana (opciono ± 7 dana) primenom, tako da potreba za davanjem nije zapostavljena.

[0121] Značajna prednost depo prekursora ovog pronalaska je u tome što su oni stabilne homogene faze. To znači da se mogu čuvati duži vremenski period (poželjno najmanje 6 meseci) na sobnoj temperaturi ili temperaturi u frižideru, bez razdvajanja faza. Osim što omoguć ava povoljno skladištenje i laku administraciju, ovo omoguć ava dozu analoga somatostatina, npr. oktreotid koji se bira na osnovu vrste, starosti, pola, težine i/ili fizičkog stanja pojedinačnog subjekta, putem ubrizgavanja odabrane zapremine.

[0122] Ovaj pronalazak stoga obezbeđuje metode koje obuhvataju izbor količine doziranja specifične za pojedinca, posebno prema težini subjekta. Sredstvo za ovaj izbor doze je izbor zapremine primene.

[0123] U jednom poželjnom aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje predformulaciju koja sadrži komponente a), b), c), d), f) i najmanje jedan analog somatostatina, npr. oktreotid kao što je ovde naznačeno. Količine ovih komponenti ć e obično biti u opsegu 30-70 % a), 30-60 % b), 5-20 % c) i 0,1-20 % d), sa analogom somatostatina, npr. oktreotid koji je prisutan u količini od 0,01 % do 10 %, (kao što je 36-44 % a), 36-44 % b), 3-18 % c) i 5-18 % d) (poželjno uključujuć i najmanje 2 % vode), sa analogom somatostatina, npr. oktreotidom prisutnim u od 1 % do 3 %), pri čemu je odnos a:b u opsegu od 40:60 do 54:46.

[0124] Obično, komponenta f) je prisutna u molarnom odnosu antioksidansa i aktivnog agensa peptida od 1:50 do 1:1500, poželjno 1:100 do 1:1300, a najpoželjnije 1:150 do 1:1250. Pošto su tipični antioksidansi niže molekularne težine od analoga somatostatina, npr. oktreotida, težinski udeo antioksidansa može biti relativno mali. Na primer, sa regulatorom pH male molekulske težine (npr. manjim od 500 amu), 0,001 do 5 % kompozicije može biti antioksidans, poželjno od 0,002 do 2 %, poželjnije od 0,002 do 0,15 %, npr. od 0,002 do 0,015 %.

[0125] Predformulacije ovog pronalaska su veoma korisne po tome što su stabilne na produženo skladištenje u svom konačnom obliku "spremnom za primenu". Kao rezultat toga, mogu ih lako administrirati ili zdravstveni radnici ili pacijenti ili njihovi negovatelji, koji ne moraju biti potpuno obučeni zdravstveni radnici i možda nemaju iskustvo ili veštine za pravljenje složenih preparata. Ovo je posebno važno kod dugotrajnih bolesti sa sporom dejstvom kao što je dijabetes.

Uređaji

[0126] U još jednom aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje uređaj za davanje za jednokratnu upotrebu (koji takođe treba da uključi komponentu uređaja) prethodno napunjen izmerenom dozom predformulacije ovog pronalaska. Takav uređaj ć e obično sadržati jednu dozu spremnu za primenu, i generalno ć e biti sterilno upakovan tako da se kompozicija čuva u uređaju do primene. Odgovaraju ć i uređaji uključuju kertridže, ampule i posebno špriceve i cevi za špriceve, bilo sa integrisanim iglama ili sa standardnim (npr. luer) nastavcima prilagođenim za uzimanje odgovarajuć e igle za jednokratnu upotrebu.

[0127] Prethodno napunjeni uređaji pronalaska mogu takođe biti prikladno uključeni u komplet za administraciju, koji takođe čini dalji aspekt pronalaska. U daljem aspektu, pronalazak tako obezbeđuje komplet za primenu najmanje jednog peptidnog aktivnog agensa, pri čemu navedeni komplet sadrži izmerenu dozu formulacije pronalaska i opciono uređaj za primenu ili njegovu komponentu. Poželjno, doza ć e se držati unutar uređaja ili komponente, koja ć e biti pogodna za i.m. ili poželjno s.c. administraciju. Kompleti mogu uključivati dodatne komponente za davanje kao što su igle, brisevi, itd. i opciono i poželjno ć e sadržati uputstva za primenu. Takva uputstva ć e se obično odnositi na primenu putem kako je ovde opisano i/ili za lečenje bolesti naznačene napred u tekstu.

Kompleti

[0128] Pronalazak obezbeđuje prethodno napunjen uređaj za davanje kao što je ovde naznačeno i komplet kako je ovde naznačeno koji sadrži predformulaciju kao što je ovde opisano.

[0129] U alternativnom aspektu ovog pronalaska, "komplet" može da sadrži najmanje dve posude, od kojih prva sadrži mešavinu niskog viskoziteta komponenti od a) do d), kao što je ovde opisano, a druga koja sadrži izmerenu dozu najmanje jedan analog somatostatina kao što je ovde opisano. Antioksidativna komponenta f) može biti formulisana sa aktivnim agensom, ili poželjnije kao deo mešavine niskog viskoziteta, koja ć e tada sadržati komponente a) do d) i f).

[0130] Takav "dvokomponentni komplet" može da sadrži analog somatostatina kao formulaciju praha u jednoj bočici ili napunjenom špricu i komponente od a) do d) (i opciono f)) u drugoj bo čici ili napunjenom špricu. U slučaju dva šprica, pre ubrizgavanja, napunjeni špricevi se povezuju i prašak koji sadrži aktivno sredstvo se meša sa formulacijom matriksa pomeranjem šprica napred i nazad, formirajuć i rastvor ili suspenziju koja se ubrizgava. Alternativno, tečna formulacija lipida se izvlači iz jedne bočice ili se prethodno puni u špric i ubrizgava u bočicu koja sadrži peptidni prah. Ova formulacija se može naknadno mešati ručnim muć kanjem ili drugim pogodnim metodom rekonstitucije (npr. me šanje vorteksom itd.). Komponenta rastvarača može biti prisutna u jednom ili u obe posude (npr. bočice ili špricevi). Tamo gde je rastvarač u najmanjem delimično konstituisan sa aktivnim agensom, on ć e generalno biti u obliku rastvora ili suspenzije.

[0131] U ovom aspektu, pronalazak stoga obezbeđuje dvokomponentni komplet koji sadrži

i) prvi sud koji sadrži mešavinu niskog viskoziteta komponenti a) do d) kao što je ovde opisano; ii) drugi sud koji sadrži najmanje jedan analog somatostatina,

iii) komponentu antioksidansa f) opciono u treć oj posudi, po željno u drugoj posudi, ili najpoželjnije u prvoj posudi;

iv) opciono i poželjno najmanje jedno od:

1) najmanje jedan špric (koji može biti jedan ili obe navedene prva i druga posuda);

2) iglu za administraciju, kao što su one koje su ovde opisane;

3) uputstvo za dobijanje kompozicije pronalaska iz sadržaja prve i druge posude;

4) uputstva za primenu, pri čemu se formira depo kao što je ovde opisano.

Željene karakteristike i kombinacije

[0132] U kombinaciji sa karakteristikama i poželjnim karakteristikama koje su ovde naznačene, predformulacije pronalaska može imati jednu ili više od sledeć ih poželjnih karakteristika nezavisno ili u kombinaciji:

Komponenta a) sadrži, sastoji se u suštini od ili se poželjno sastoji od GDO;

Komponenta b) sadrži, sastoji se u suštini ili se prvenstveno sastoji od PC soje;

Komponenta c) se u suštini sastoji od ili poželjno sastoji se od etanola;

Komponenta d) se u suštini sastoji od ili poželjno sastoji se od polarnog rastvarača izabranog između vode, propilen glikola ili njihovih smeša;

Komponenta f) sadrži, sastoji se u suštini od ili se poželjno sastoji od askorbinske kiseline, etilendiamintetrasirć etne kiseline (EDTA) i/ili limunske kiseline;

Predformulacija sadrži oktreotid;

[0133] Predformulacija sadrži najmanje jedan analog somatostatina (kao što je ovde opisan) koji ima agonistički i/ili antagonistički efekat na najmanje jedan od SST(1) - SST(5) receptora (npr. kod ljudi).

[0134] Predformulacija ima nizak viskozitet kao što je ovde naznačeno.

[0135] Predformulacija sadrži forme tečne kristalne faze kao što je ovde naznačeno nakon primene in vivo.

[0136] Predformulacija generiše depo nakon primene in vivo, koji depo oslobađa najmanje jedan aktivni agens na terapijskom nivou tokom perioda od najmanje 7 dana, po željno najmanje 21 dan, poželjnije najmanje 28 dana.

[0137] Predformulacija ima već e optere ć enje analoga somatostatina, npr. oktreotida nego što je stabilno u istoj formulaciji u odsustvu komponente d).

[0138] Predformulacija ima već e optere ć enje analoga somatostatina, npr. oktreotid nego što se može dobiti ekvilibracijom na 25°C iste formulacije u odsustvu komponente f).

[0139] U kombinaciji sa karakteristikama i poželjnim karakteristikama koje su ovde naznačene, unapred napunjeni uređaji prema pronalasku mogu imati jednu ili više od sledeć ih poželjnih karakteristika nezavisno ili u kombinaciji:

Oni sadrže poželjnu formulaciju kako je ovde naznačeno;

Sastoje se od igle manje od 20 gauge, poželjno ne već e od 23 gauge;

Sadrže jednu dozu od 1 do 2000 mg analoga somatostatina, npr. oktreotid, poželjno 0,1 do 100 mg i poželjnije 1-50 mg, najpoželjnije 5-35 mg

[0140] Oni sadrže oktreotid ili eksenatid od oko 1 do 100 mg.

[0141] Oni sadrže homogenu smešu kompozicije pronalaska u obliku spremnom za ubrizgavanje.

[0142] Oni sadrže ukupnu zapreminu za davanje ne više od 5 ml, poželjno ne više od 3 ml, poželjnije ne više od 1,5 ml.

[0143] U kombinaciji sa karakteristikama i poželjnim karakteristikama koje su ovde naznačene, kompleti pronalaska mogu imati jednu ili više od sledeć ih poželjnih karakteristika nezavisno ili u kombinaciji: Oni sadrže poželjnu formulaciju kako je ovde naznačeno;

Oni sadrže unapred napunjen uređaj kao što je ovde naznačeno;

Oni sadrže iglu manju od 20 gauge, poželjno ne već u od 23 gauge;

Sadrže jednokratnu dozu od 1 do 200 mg analoga somatostatina, npr. oktreotid, po željno 1 do 100 mg i poželjnije 1-50 mg;

Sadrže analog somatostatina, npr. oktreotid, oko 1 do 100 mg;

Oni sadrže "dvokomponentni komplet" koji se sastoji od najmanje dve posude koje sadrže lipidnu formulaciju pronalaska i analog somatostatina, npr. oktreotidni prah, respektivno.

[0144] Oni sadrže ukupnu zapreminu za davanje ne veću od 5 ml, poželjno ne veću od 3 ml, poželjnije ne veću od 1,5 ml.

Oni sadrže uputstva za primenu putem i/ili učestalosti kako je ovde naznačeno;

[0145] Oni sadrže uputstva za primenu za upotrebu u postupku lečenja kako je ovde opisano.

[0146] Pronalazak ć e sada biti dalje ilustrovan pozivanjem na slede ć e neograničavaju ć e primere i priložene slike.

PRIMERI

Skra ć enice

[0147]

OCT(Cl) Oktreotid hidrohlorid (PoliPeptide Labs., SAD)

SOM(Ac) Somatostatin 1-14 acetat (PoliPeptide Labs.,SAD)

LEU(Ac) Leuprolid acetat (PoliPeptide Labs., SAD)

TTA Triptorelin acetat (Bachem, Švajcarska)

TTP Triptorelin pamoat (Bachem, Švajcarska)

SPC sojin fosfatidilholin (Lipoid, Nemačka)

GDO Glicerol dioleat (Danisco, Danska)

DOPC Dioleoil fosfatidilholin (NOF, Japan)

EtOH Etanol (99,5 % zapremine, Ph. Eur., USP)

PG propilen glikol (Ph. Eur., USP)

Primer 1: Proizvodnja proizvoda koji sadrže OCT

[0148]

Tabela 1. Kompozicija proizvoda koji sadrže OCT.

[0149] Depo prekursori sa kompozicijama predstavljenim u Tabeli 1 su proizvedeni tako što se prvo priprema peptidna zaliha, merenjem sastojaka kao što je opisano u Tabeli 2 i mešanjem na stolu za muć kanje (250-300 rpm) do rastvora homogene mase.

Tabela 2. Priprema matičnih rastvora peptida.

[0150] Za proizvodnju A, B i C, sledeć e količine (Tabela 3) SPC i GDO su ponderisane direktno u recipijent koji sadrži osnovni rastvor OCT(Cl).

Tabela 3. Količine SPC i GDO dodate za pripremu CAM2029-BP, -BR i -BU.

[0151] Smeše su zatim stavljene na sto za muć kanje (250-300 rpm) dok se ne dobiju homogeni rastvori.

[0152] Za proizvodnju formulacije D, pripremljen je lipidni temel me šanjem (sto za muć kanje (250-300 rpm)) 88,58 g SPC, 22,84 g EtOH i 88,58 g GDO do homogenog rastvora. Konačna formulacija je zatim dobijena kombinovanjem 87,56 g lipida i 12,44 g osnovnog rastvora peptida i mešanjem (sto za muć kanje (250-300 rpm)) do homogene mase.

[0153] Za proizvodnju formulacije E, pripremljena je lipidna sirovina me šanjem (sto za muć kanje (250-300 rpm)) 4,09 g SPC, 1,82 g EtOH i 4,09 g GDO do homogenog rastvora. Konačna formulacija je zatim dobijena kombinovanjem 8,26 g lipida i 1,74 g osnovnog rastvora peptida i me šanjem (sto za muć kanje (250-300 rpm)) do homogene mase.

Primer 2: In vitro oslobađanje iz proizvoda koji sadrže OCT

[0154] Formulacije sa kompozicijom predstavljenom u Tabeli 4 su proizvedene tako što su se prvo pripremili odgovarajuć i OCT(Cl) osnovni rastvori u EtOH, EtOH:PG smeši ili, respektivno, u vodi (kao što je opisano u Primeru 1 iznad), nakon čega je usledilo mešanje sa drugim komponentama dok se ne dobiju homogeni rastvori.

Tabela 4. Kompozicija proizvoda koji sadrže OCT procenjen u eksperimentu ubrzanog in vitro oslobađanja

(IVR).

[0155] Procena ubrzanog IVR OCT-a iz svake od formulacija predstavljenih napred je sprovedena ubrizgavanjem približno 100 mg (620 %) u staklenu bočicu koja sadrži 5 mL smeše fosfatnog pufera: acetonitril 85:15 (tež/tež). Bočice su zapečać ene i inkubirane na sobnoj temperaturi do 48 h. Uzimanje uzoraka je obavljeno u različitim vremenskim tačkama od početka eksperimenta, laganim izvlačenjem 0,2 mL vodene faze, koja je sakupljena direktno u HPLC polipropilensku bočicu od 0,3 mL. Analiza je izvedena pomoć u HPLC-UV koriste ć i analitičku kolonu (ACE-5 C18, 50 X 3,0 mm) sa gradijentom eluiranja (mobilna faza A: 0,1 % zapremine trifluorosirć etne kiseline (TFA) u vodi; mobilna faza B: 0,1 % zapremine u 95 % zapremine metanola, 5 % zapremine vode) i UV detekcija na 282 nm.

Dobijeni rezultati su prikazani na Slici 1 (a i b)

Primer 3: Stabilnost proizvoda koji sadrže OCT sa u odnosu na proizvode bez EDTA

[0156] Formulacija (veličina šarže 110 g) sa kompozicijom OCT(Cl)/SPC/GDO/EtOH 3,74/43,13/43,13/10,00 (sve u % težine) proizvedena je prvo rastvaranjem 4,114 g OCT(Cl) u 11.000 g EtOH, nakon čega sledi uzastopno dodavanje 47,433 g SPC i 47,433 g GDO i mešanje do homogenog rastvora (91).

[0157] Jedan uzorak (G) koji sadrži 3,37 % težine OCT(Cl) (približno 2,98 % težine OCT baze) mešanjem 0,9 g formulacije 91 sa 0,1 mg rastvora koji sadrži 0,1 % težine EDTA u vodi za HPLC.

[0158] Jedan uzorak (H) koji sadrži 3,37 % težine OCT(Cl) je pripremljen mešanjem 0,9 g formulacije 91 sa 0,1 mg vode za HPLC.

[0159] Uzorci su podeljeni u dva alikvota od oko 0,4 g/bočici; jedan alikvot/uzorak je inkubiran na 70°C, dok je drugi postavljen na <-15°C (referenca). Svi uzorci su analizirani nakon 7 dana inkubacije u napred navedenim uslovima koriš ć enjem HPLC normalne faze (analitička kolona LiChrospher Diol 5 µm, 25033,2 mm) UV/DAD analitičke metode za kvantifikaciju OCT i relativno određivanje OCT-srodne supstance. Prisustvo EDTA u vodenoj fazi značajno je poboljšalo stabilnost OCT u lipidnom matriksu, kao što je prikazano u rezultatima prikazanim na Slici 2.

Primer 4: Ubrizgavanje proizvoda koji sadrže OCT

[0160] Injektibilnost je ovde definisana kao brzina protoka procenjene te čnosti iz šprica (specifikovanog njegovom zapreminom i dizajnom) kroz iglu (određenu meračem i dužinom igle) podvrgnutu konstantnoj sili koja deluje protiv atmosferskog pritiska.

[0161] Za potrebe punjenja, poželjna je debela igla, npr. igla od 18G. Kada je špric napunjen potrebnom količinom formulacije, debela igla je zamenjena iglom za pregled. Pritiskom na klip sa novom iglom na mestu, zarobljeni vazduh je uklonjen. Višak formulacije je obrisan papirnom maramicom i izmerena je početna težina (grami) napunjenog šprica. Špric je zatim montiran u vertikalnom položaju pomoć u metalnog postolja sa držačem i sa iglom okrenutom nadole. Izbačena tečnost je sakupljena direktno u staklenu bočicu.

[0162] Teg od 20N je postavljen u centar klipa i tajmer je pokrenut kada teg i klip dođu u kontakt. Zatim je prać eno vreme pražnjenja šprica (sekunde). Nakon što je špric ispražnjen, izmerena je njegova konačna težina (grami). Obavljena su najmanje dva ponovljena merenja za svaki uzorak i tip igle.

[0163] Ubrizgavanje je izračunato korišć enjem slede ć e jednačine:

[0164] Moguć nost injektiranja nekoliko proizvoda koji sadrže OCT je predstavljena u Tabeli 5.

Tabela 5. Ubrizgavanje (mg formulacije/a) proizvoda koji sadrže OCT kroz 23 G tankog zida (Terumo Neolus NN- 2316R), odnosno 25 G tankog zida (Temmo Neolus NN-2516R) igle dužine 16 mm.

Korišć eni su špricevi BD 1 mL plast Luer-Lock (#309628).

Primer 5: In vivo PK studije na pacovima

Životinje i poreklo

[0165] U studijama su korišć eni mužjaci SPF Sprague-Dawley pacova (NTAC:SD) iz M&B Taconic Europe A/S (Ejbi, Danska). Po dolasku pacovi su bili stari od 8 do 9 nedelja, sa telesnom težinom u rasponu od 275 do 300 g. Dozvoljen je period aklimatizacije od najmanje 5 dana pre doziranja.

Smeštaj

[0166] Pacovi ć e se držati u parovima u providnim polikarbonatnim kavezima (Macrolon® tip III; Scanbur BK A/S, Karlslunde, Danska) sa površinom poda od 810 cm<2>. Za postelju je korišć eno seckano drvo Aspen (Tapvei Aspen Bedding, Tapvei Oy, Kortteinen, Finska). Kao obogać ivanje životne sredine koriš ć ena je drvena vuna za izgradnju gnezda (PM 90 L „Bobiggnadsmaterial“, Tapvei) i komad drveta („Gnagpinne medium“, Tapvei). Kompletna peletirana ishrana za glodare (Labfor R70, Kimstad, Švedska) i voda bili su dostupni ad libitum.

Doziranje

[0167] Životinje su dozirane prema Camurus internom standardnom operativnom postupku (SOP PK12-3). Ukratko, doziranje je izvedeno potkožnim injekcijama između lopatica pod laganom izofluranskom anestezijom, koristeć i Luer-Lock špric od 1 mL i iglu od 25 mm 23G.

Uzimanje krvi

[0168] Uzorci krvi su sakupljeni od budnih životinja podjezičnim krvarenjem. Vremenske tačke uzorkovanja bile su pre doze i 1 sat, 6 sati, 1 dan, 2 dana, 5 dana, 8 dana, 14 dana, 21 dan, 28 dana i 35 dana nakon doziranja. Krv je sakupljena u epruvete tretirane EDTA (Capiject 3T-MQK, Terumo Medical Corporation), stavljene na led odmah nakon sakupljanja. Posle centrifugiranja (pribli žno 15003 g, na 5 °C tokom 10 min) plazma je prebačena u nove epruvete i čuvana ispod -70 °C do analize.

Bioanaliza

[0169] Analiza OCT-Uzorci plazme su analizirani ELISA kompletom S-1275 (Bachem/Peninsula Laboratories) "Octreotide - EIA Kit, Host: Rabbit, High Sensitivity", prilagođen za analizu OCT u EDTA plazmi pacova. Rezultati

[0170] Farmakokinetički (PK) profili za formulacije 91, 911 i 912 su prikazani na Slici 3.

Primer 6: Proizvodnja formulacija koje sadrže leuprolid acetat (leuprorelin - LEU(Ac)) (nije prema ovom pronalasku)

[0171] Leuprolidne kompozicije prema pronalasku su pripremljene sa kompozicijama kako je nazna čeno u Tabeli 6. Formulacije su pripremljene tako što se prvo rastvara LEU(Ac) u EtOH, WFI i/ili PG komponentama, nakon čega su lipidne komponente dodavane uzastopno, počevši od SPC a zatim GDO. Konačne formulacije su mešane na stolu za muć kanje na 250-300 rpm dok se ne dobiju bistri i homogeni tečni rastvori. Formulacije su konačno podvrgnute sterilnoj filtraciji (0,2 µm sterilni PVDF filter iz Millipore-a) pod pritiskom azota od 2 bara.

Tabela 6. Kompozicija (% težine) formulacija leuprolid acetata (LEU(Ac)).

Primer 7: Proizvodnja formulacija koje sadrže triptorelin acetat (TTA) i triptorelin pamoat (TTP) (nije prema ovom pronalasku)

[0172] Kompozicije triptorelin acetata i pamoata prema pronalasku su pripremljene sa kompozicijama kako je naznačeno u Tabeli 7. Formulacije su pripremljene prvo mešanjem TTA ili TTP u EtOH i PG komponentama, nakon čega su lipidne komponente dodavane uzastopno, počevši od sa SPC i sledi GDO. Konačne formulacije su mešane na stolu za muć kanje na 250-300 rpm dok se ne dobiju bistri i homogeni tečni rastvori. Formulacije su konačno podvrgnute sterilnoj filtraciji (0,2 µm sterilni PVDF filter iz Millipore-a) pod pritiskom azota od 2 bara.

Tabela 7. Kompozicija (% težine) formulacija triptorelin acetata (TTA) i triptorelin pamoata (TTP).

Primer 8: Proizvodnja dodatnih formulacija koje sadrže oktreotid hlorid (OCT(Cl))

[0173] Oktreotidne kompozicije prema pronalasku su pripremljene sa kompozicijama kako je nazna čeno u Tabeli 8. Formulacije su pripremljene tako što se prvo rastvara OCT(Cl) u EtOH, WFI i/ili PG komponentama, nakon čega su lipidne komponente dodavane uzastopno, počevši od SPC a zatim GDO. Konačne formulacije su bile mešane na stolu za muć kanje na 250-300 obrtaja u minuti dok se ne dobiju bistri i homogeni tečni rastvori. Formulacije su konačno podvrgnute sterilnoj filtraciji (0,2 µm sterilni PVDF filter iz Millipore-a) pod pritiskom azota od 2 bara.

Tabela 8. Kompozicija (% težine) formulacija oktreotid hlorida (OCT(Cl)).

Primer 9: Proizvodnja formulacija koje sadrže somatostatin 1-14 acetat (SOM(Ac)) i somatostatin 1-14 hidrohlorid (SOM(Cl))

[0174] Kompozicije somatostatin (1-14) acetata (SOM(Ac)) i hidrohlorida (SOM(Cl)) prema pronalasku su pripremljene sa kompozicijama kako je navedeno u Tabeli 9. Hidrohloridna so, SOM(Cl), je bila pripremljena od acetatne soli hromatografskim procesom sa izmenom jona, nakon čega sledi liofilizacija rastvora peptida sušenjem zamrzavanjem. Potpuna razmena protiv jona je potvrđena HPLC. Formulacije su pripremljene prvo mešanjem lipidnih komponenti, SPC i GDO, sa EtOH i PG komponentama, a zatim mešanjem na stolu za muć kanje na 250-300 rpm da bi se formirali homogeni rastvori lipida. U rastvor lipida dodaju se odgovarajuć i praškovi leka SOM(Ac) i SOM(Cl) u potrebnoj količini. Finalne formulacije su mešane rotacijom od kraja do kraja na sobnoj temperaturi sve dok se ne dobiju bistri i homogeni te čni rastvori. Formulacije su konačno podvrgnute sterilnoj filtraciji (0,2 µm sterilni PVDF filter iz Millipore-a) pod pritiskom azota od 2 bara.

Tabela 9. Kompozicija (% težine) formulacija somatostatin 1-14 acetata (SOM(Ac)) i somatostatin 1-14 hidrohlorida (SOM(Cl)).

Primer 10: In vivo ispitivanja formulacija leuprolida kod pacova (nije prema ovom pronalasku)

[0175] Za opšte aspekte, videti Primer 5. Doziranje pacovima je izvedeno subkutanom injekcijom formulacije 49 i 50, respektivno (videti Tabelu 6).

Uzorci krvi za farmakokinetiku

[0176] Krv za farmakokinetiku je sakupljena pre doze i 1 sat, 4 sata, 10 sati, 1 dan, 2 dana, 3 dana, 5 dana, 7 dana, 14 dana i 21 dan nakon doziranja. Stvarne vremenske ta čke za uzorkovanje su izračunate kao razlika između vremena uzorkovanja i vremena doziranja. Prihvać eno je odstupanje od 610 % od nominalnog vremena.

Bioanaliza

[0177] Analiza leuprolida je izvedena korišć enjem (Des-Gly10, D-LEU6, Pro-NHEt9)-LHRH (Leuprolide) EIA kompleta visoke osetljivosti (S-1174, Bachem/Peninsula Laboratories) prilagođenog za analizu LEU u EDTA plazme pacova.

Rezultati

[0178] Farmakokinetički (PK) profili za formulacije 49 i 50 su prikazani na Slici 4.

Claims (22)

Patentni zahtevi

1. Predformulacija koja se sastoji od mešavine niskog viskoziteta:

a) 20-80 % težine najmanje jednog diacil glicerola i/ili tokoferola;

b) 20-80 % težine najmanje jednog fosfatidil holina (PC);

c) 5-20 % težine najmanje jednog biokompatibilnog, organskog monoalkoholnog rastvarača koji sadrži etanol;

d) 1.2 do 20 % težine polarnog rastvarača izabranog između vode, propilen glikola ili njihovih smeša; i

e) najmanje jednog analoga somatostatina;

pri čemu je odnos komponenti a:b u opsegu od 40:60 do 54:46;

pri čemu predformulacija ima viskozitet u opsegu od 0.1 do 5000 mPas na 20 °C;

pri čemu predformulacija formira, ili je sposobna da formira, najmanje jednu strukturu te čne kristalne faze u kontaktu sa viškom vodenog fluida.

2. Predformulacija prema patentnom zahtevu 1, pri čemu komponenta a) sadrži glicerol dioleat (GDO).

3. Predformulacija prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, pri čemu komponenta b) sadrži PC soje.

4. Predformulacija prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 3, pri čemu se komponenta d) sastoji od propilen glikola.

5. Predformulacija prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 4, pri čemu je navedeni analog somatostatina izabran između somatostatina 14, somatostatina 28, oktreotida, lanreotida, pasireotida i vapreotida.

6. Predformulacija prema patentnom zahtevu 5, pri čemu je navedeni analog somatostatina oktreotid.

7. Predformulacija prema bilo kojem od patentnih zahteva do 6, koja dodatno sadr ži antioksidans, poželjno odabran od askorbinske kiseline, EDTA ili limunske kiseline.

8. Predformulacija prema patentnim zahtevima od 1 do 7, pri čemu je komponenta a) prisutna u nivou od od 33 do 60 % težine.

9. Predformulacija prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 8, pri čemu je komponenta b) prisutna u nivou od 33 do 55 % težine.

10. Predformulacija prema patentnim zahtevima do 9, pri čemu je komponenta c) prisutna u nivou od 5 do 18 % težine, poželjno od 5 do 16 % težine ili od 8 do 15 % težine.

11. Predformulacija prema patentnim zahtevima od 1 do 10, pri čemu je komponenta d) prisutna u nivou od 5 do 20 % težine, poželjnije od 5 do 18 % težine, najpoželjnije od 8 do 15 % težine.

12. Predformulacija prema patentnim zahtevima od 1 do 11, pri čemu je komponenta e) prisutna u nivou od 1.8 % težine ili više.

13. Predformulacija prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 12 koja ima odnos komponenti c:d u opsegu od 40:60 do 70:30.

14. Predformulacija prema bilo kojem od patentnih zahteva do 13 pri čemu je odnos a:b u opsegu od 45:55 do 52:48, poželjno u opsegu od 48:52 do 52:48.

15. Predformulacija prema patentnom zahtevu 1 sadrži:

a) 36-44 % težine najmanje jednog diacil glicerola i/ili tokoferola;

b) 36-44 % težine najmanje jednog fosfatidil holina (PC);

c) 3-18 % težine najmanje jednog biokompatibilnog, organskog monoalkoholnog rastvarača koji sadrži etanol;

d) 5-18 % težine polarnog rastvarača izabranog između vode, propilen glikola ili njihovih smeša; i e) 0.5-4 % težine oktreotida.

16. Predformulacija prema patentnom zahtevu 15 koja sadrži od 1 do 3 % težine oktreotida.

17. Predformulacija prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 7, 10, 11 ili od 13 do 15, pri čemu predformulacija ima viskozitet u opsegu od 1 do 1000 mPas na 20 °C.

18. Predformulacija prema patentnom zahtevu 17, pri čemu predformulacija ima viskozitet u opsegu od 10 do 750 mPas na 20 °C.

19. Postupak za formiranje predformulacije prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 18 pogodan za administraciju peptidnog bioaktivnog agensa subjektu (poželjno sisaru), pri čemu se navedeni postupak sastoji od formiranja mešavine niskog viskoziteta:

a) 20-80 % težine najmanje jednog diacil glicerola i/ili tokoferola;

b) 20-80 % težine najmanje jednog fosfatidil holina (PC);

c) 5-20 % težine najmanje jednog biokompatibilnog, organskog monoalkoholnog rastvarača koji sadrži etanol;

d) 1.2-20 % težine polarnog rastvarača izabranog između vode, propilen glikola ili njihovih smeša; e) najmanje jednog analoga somatostatina; i

f) opciono najmanje jednog antioksidansa;

pri čemu je odnos komponenti a:b u opsegu od 40:60 do 54:46;

i rastvaranje ili dispergovanje najmanje jednog analoga somatostatina u me šavini niske viskoznosti, ili u najmanje jednoj od komponenti a), b), c), d) i opciono f) pre formiranja mešavine niske viskoznosti.

20. Predformulacija prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 18 za upotrebu u in vivo formiranju depoa za lečenje najmanje jednog stanja odabranog od akromegalije, raka, karcinoma, melanoma, tumora koji eksprimiraju najmanje jedan somatostatinski receptor, sst(2)-pozitivnih tumora, sst(5)-pozitivnih tumora, karcinoma prostate, gastro-entero-pankreasnih neuroendokrinih (GEP NE) tumora, karcinoidnih tumora, insulinoma, gastrinoma, tumora vazoaktivnog intestinalnog peptida (VIP) i glukagonoma, povišenog hormona rasta (GH), povišenog faktora rasta I (IGF-I) sličnog insulinu, krvarenja iz varičela (naročito espohagealnog), gastrointestinalnih problema izazvanih hemoterapijom (kao što je dijareja), limforeje, dijabetičke retinopatije, bolesti oka štitne žlezde, gojaznosti, pankreatitisa i srodnih stanja.

21. Prethodno napunjen uređaj za administraciju koji sadrži predformulaciju prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 18, opciono, pri čemu navedena predformulacija isporučuje dozu navedenog aktivnog sredstva u opsegu od 1 do 10 mg/nedeljno.

22. Komplet koji sadrži uređaj za administraciju prema patentnom zahtevu 21.