RO116207B1 - Procedeu de obţinere a unui produs microbian cu acţiune antifungică - Google Patents

Abstract

Invenţia se referă la un procedeu de obţinere a unui produs microbian, cu acţiune antifungică, cu microorganismul Bacillus subtilis, care cuprinde fazele de: dezvoltare a inoculului prin cultivarea tulpinii pe un mediu care conţine săruri minerale şi extract de porumb, la temperatura de 30...32°C, timp de 15...18 h, bioproces pentru dezvoltarea şi sporularea culturii în proporţie de peste 85%, separare şi uscare prin atomizare a biomasei bacteriene, în final, obţinându-se o pulbere brun deschis, care se aplică pe sămânţă împreună cu un adeziv de tip polizaharid înainte de însămânţare.

Description

RO 116207 B

Prezenta invenție se referă la un procedeu de obținere a unui produs microbian cu acțiune antifungică, cu un efect de prevenire și combatere a unor ciuperci saprofite, producătoare de micotoxine, în special aflatoxine care atacă cerealele: grâu, porumb, orz etc.

Efectul antifungic al produsului microbian realizat s-a studiat pe următoarele specii de ciuperci: Aspergillus flavus și Aspergillus ochraceus, Penicillium rubrum și Penicillium citrinum, Fusarium culmorum și Fusarium graminearum și Ălternaria tenuis.

In prezent, se cunosc procedee de obținere a produselor microbiene cu ajutorul microorganismelor, utilizând tulpini de Bacillus subtilis, B. cereus, Pseudomonas sp., Trichoderma sp. Cele mai multe procedee se referă la folosirea unor tulpini parentale sau mutagene de Bacilius subtilis.

Efectul antifungic al produsului se datorează metaboliților inhibitori [lipopeptide] produși de microorganism și difuzați în mediu.

Aceste lipopeptide sunt diferite antibiotice care produc acțiunea de inhibiție asupra ciupercilor care atacă plantele.

Procedeul de obținere a produsului microbian cu acțiune antifungică, conform invenției, constă în aceea că cuprinde fazele de: dezvoltare a inoculului prin cultivarea tulpinii pe un mediu care conține săruri minerale și extract de porumb, la temperatura de 30. ..32°C, timp de 15...18 h, bioproces pentru dezvoltarea și sporularea culturii în proporție de peste 85%, separare și uscare, prin atomizarea biomasei bacteriene, în final obținându-se o pulbere brun deschis, care se aplică pe sămânță împreună cu un adeziv de tip polizaharid, înainte de însămânțare.

Avantajul invenției constă în aceea că previne contaminarea unor produse agricole de bază, mai ales a celor din depozitele de cereale, cu ciuperci potențial producătoare de micotoxine.

Micotoxinele, cu preponderență aflatoxinele, sunt toxice și chiar cancerigene, pentru om și animale.

Produsele biologice obținute cu diferite microorganisme, comparativ cu produsele chimice, prezintă anumite avantaje, și anume:

- sunt inofensive pentru om și animale;

- nu poluează râurile și solul, deci flora și fauna acvatică și terestră.

Se prezintă, în continuare, un exemplu de realizare a invenției.

A] Obținerea inoculului dintr-un mediu compus din următoarele ingrediente: sulfat de amoniu 0,1 g, clorură de calciu sicc 0,01 g, sulfat de mangan 0,001 g, extract de porumb 1 g [50% s.u.] și apă comună ad. 100 ml, pH = 6,5...6,7 cu sol. NaOH 40%. Sterilizare 30' la 120°C.

Mediul s-a însămânțat cu o suspensie de Bacillus subtilis \r\ apă distilată sterilă.

După dezvoltarea culturii agitate la temperatura de 3O...32°C timp de 15...18 h, se obține o cultură de inocul care conține 50...60% spori, în rest bacili simpli și sporulați.

B] Obținerea culturii de bioproces [fermentație] dintr-un mediu format din: sulfat de amoniu 0,15 g, clorură de calciu sicc. 0,01 g, sulfat de mangan 0,005 g, extract de porumb 3,5 g [50% s.u.], apă comună ad. 100 ml.

pH = 6,5...6,7 cu sol. NaOH 40%. Sterilizare 30' la 125°C.

Claims (1)

1. RO 116207 B

   Mediul de bioproces s-a însămânțat cu inocul în raport de 1... 1,5% v/v și s-a cultivat timp de 25...30 h la parametrii stabiliți, în funcție de capacitatea și felul bioreactorului: temp. de 3O...32°C, p = 0,4...0,5 at, aer = 0,5...1 l/l med./min, agitare 100...200 rpm.

   C] Separarea biomasei bacteriene prin decantare sub răcire și/sau cu adaos 50 de adjuvant de separare (floculant).

   D) Uscarea biomasei prin atomizare la 165... 170°C temperatură de intrare și 65...70°C temperatură de ieșire. Produsul obținut se prezintă sub formă de pulbere brun deschis, nehidroscopică, cu gust și miros caracteristic. Biomasa uscată conține peste 85% spori, proteine, aminoacizi liberi, urme de acizi nucleici și metale grele sub 55 limita admisă.

   Supernatantul obținut după separarea biomasei se poate folosi ca atare, având efect antifungic mai slab, sau după precipitarea compușilor activi lipopeptidici cu sulfat de amoniu sau prin cromatografie de schimb ionic, utilizând ca adsorbant anionitul Amberlite XAD-7. eo

   Produsul obținut atât din biomasa microbiană, cât și din supernatant, se caracterizează printr-o activitate biologică ridicată, pentru distrugerea ciupercilor saprofite care atacă cerealele, diminuarea cu 50...80% a conținutului în aflatoxină B^ precum și față de unele ciuperci parazite care atacă legumele și cerealele.

   Revendicare

   Procedeu de obținere a unui produs microbian cu acțiune antifungică, cu microorganismul Bacillus subtilis ICCF_a4, tulpină izolată și selectată de pe plante cerealiere, caracterizat prin aceea că acesta cuprinde fazele de: dezvoltare a 70 inoculului prin cultivarea tulpinii pe un mediu care conține săruri minerale și extract de porumb, la temperatura de 3O...32°C, timp de 15...18 h, bioproces pentru dezvoltarea și sporularea culturii în proporție de peste 85%, separare și uscare prin atomizarea biomasei bacteriene, în final obținându-se o pulbere brun deschis, care se aplică pe sămânță împreună cu un adeziv de tip polizaharid, înainte de însămânțate. 75

   Președintele comisiei de examinare: chim. Hăulică Mariela

   Examinator: biochim. Crețu Adina

   Editare și tehnoredactare computerizată - OSIM

   Tipărit la: Oficiul de Stat pentru Invenții și Mărci