RO112995B1

RO112995B1 - Medicinal product for colon therapy

Info

Publication number: RO112995B1
Application number: RO97-01479A
Authority: RO
Inventors: Rodica Teodorescu
Original assignee: Rodica Teodorescu
Priority date: 1997-08-05
Filing date: 1997-08-05
Publication date: 1998-03-30
Also published as: AU8754098A; WO1999007393A1

Abstract

The medicinal product, according to the invention, is constituted of 0,093650 parts mixture of 4 strains: Lactobacillus acidophylus - LAR, Lactobacillus casei - LC, Lactobacillus plantarum - LPI and Streptococcus lactis - SLR, registered under numbers 31, 27, 10 and 36 in the Biosan Centre Collection (0,5 : 0,5 : 2,5 : 0,5), 40 parts of vitamin B1, 10 parts of vitamin B2, 100 parts of vitamin B6, 200 parts of calcium panthotenate and 6000 parts of L-lysine hydrochloride, the parts being expressed in weight. The Lactobacillus acidophylus - LAR no.31 strain is a non-spinning strain, with an acid power of 148 DEG T and ferments, at maximum efficiency, the raffinose and trehalose. The Lactobacillus casei - LC no.27 strain has an acid power of 185 DEG T and ferments the rhamnose. The Lactobacillus plantarum - LPI no.10 strain coagulates the milk without eliminating the whey, forms a rich deposit on a synthetic medium, has an acid power of 150 DEG T, ferments the xylose. The Streptococcus lactis - SLR no.36 strain ferments the esculin.

Description

Prezenta invenție se referă la un produs medicamentos pentru terapia colonului, cu efecte deosebite în tratamentul postoperator al cancerului de colon.The present invention relates to a medicinal product for colon therapy, with special effects in the post-operative treatment of colon cancer.

□dată cu introducerea antibioticelor și chimioterapicelor, s-au obținut rezultate foarte bune în ceea ce privește agentul patogen al diferitelor maladii. Urmările, însă, în cazurile de administrare prelungită sau repetată utilizare a antibioticelor au fost din cele mai neplăcute.□ With the introduction of antibiotics and chemotherapies, very good results have been obtained regarding the pathogen of different diseases. The consequences, however, in cases of prolonged or repeated administration of antibiotics were among the most unpleasant.

Este cunoscut faptul că, în timpul folosirii antibioticelor pe cale orală, în tulburările digestive, cu germeni precizați și neprecizați, apar fenomene de rezistență a acestora. Ca urmare, efectul antibioticului scade, flora intestinală normală este distrusă, iar flora de putrefacție și germenii patogeni se dezvoltă în continuare.It is known that, during the use of antibiotics orally, in digestive disorders, with specified and unspecified germs, phenomena of their resistance appear. As a result, the effect of the antibiotic decreases, the normal intestinal flora is destroyed, and the rotting flora and pathogenic germs continue to develop.

Cercetările pentru găsirea de remedii naturale au luat o mare amploare pe plan mondial. Instituții de prestigiu ca “Centrul Experimental al Laptelui” și “Institutul Provincial pentru Protecția Infantilă” din Milano au publicat studii privind variația florei lactice si bifide intestinale. Acestea au demonstrat ca lactobacilii din iaurt supraviețuiesc trecerii prin tractul digestiv, împiedicând dezvoltarea florei de putrefacție, ajutând înmulțirea florei lactice și bifide, autohtone.The research for finding natural remedies has taken on a great deal worldwide. Prestigious institutions such as the "Experimental Milk Center" and the "Provincial Institute for Child Protection" in Milan have published studies on the variation of lactic and bifid intestinal flora. They have shown that yogurt lactobacilli survive the passage through the digestive tract, preventing the development of rotting flora, helping to multiply the lactic and bifid, native flora.

Problema utilizării anumitor specii de lactobacili în distrugerea florei de putrefacție s-a pus, deci, cu foarte mulți ani în urmă. Elementul activ în această acțiune este acidul lactic și alte substanțe specifice cu acțiune antibiotică de tipul nisinului. Nisinul se caracterizează printr-o acțiune de inhibare puternică a speciilor ce aparțin microflorei de putrefacție [Aerobacter sp., Escherichia sp., Proteus sp., Stafilococcus sp.], fie prin blocarea respirației și metabolismului acestora, fie prin stoparea diviziunii celulare.The problem of the use of certain species of lactobacilli in the destruction of the rot flora, therefore, was raised many years ago. The active element in this action is lactic acid and other specific substances with antibiotic action such as nisin. Nisin is characterized by a strong inhibitory action of the species belonging to the rotten microflora [Aerobacter sp., Escherichia sp., Proteus sp., Stafilococcus sp.], Either by blocking their respiration and metabolism, or by stopping cell division.

Ga urmare; lactobacilii au fost folosiți în terapia afecțiunilor intestinale, ca preparate conținând culturi mono2 microbiene, asociate sau nu cu alte substanțe medicamentoase.Therefore; lactobacilli have been used in the therapy of intestinal disorders, as preparations containing mono-microbial cultures, whether or not associated with other medicinal substances.

Cercetările efectuate in Centrul “Biosan” au avut rezultate în obținerea de produse biologice bazate pe diferite combinații de lactobacili specifici tractului digestiv.The researches carried out in the “Biosan” Center have had results in obtaining biological products based on different combinations of lactobacilli specific to the digestive tract.

Experimentarea clinica și apoi utilizarea clinică a produselor Centrului “Biosan” a demonstrat că eubioticele au la bază tulpini de mare vitalitate si putere enzimatică, constituie un mijloc terapeutic de valoare indiscutabila, care reprezintă o terapie de substituție microbiologică intestinală de mare eficienta De aici necesitatea unor reguli precise pentru producerea si controlul acestor preparate.The clinical experimentation and then the clinical use of the products of the “Biosan” Center have shown that eubiotics are based on strains of high vitality and enzymatic power, they are a therapeutic means of indisputable value, which represents a highly efficient intestinal microbiological substitution therapy. precise rules for the production and control of these preparations.

Eubioticele sunt culturi pure (Ui bacterii lactice, în special tulpini selecționate de Lactobacillus acidop'T/lus. care trăiesc în mod obișnuit, in tulm digestiv, și Lactobacillus casei care se află în salivăEubiotics are pure cultures (Ui lactic bacteria, especially strains selected from Lactobacillus acidop'T / lus. Which commonly live in digestive tract, and Lactobacillus housei in saliva

In cercetările efectuate de Centrul “Biosan” au fost preparate, si apoi fabricate, trei generații de eubiotice. produse medicamentoase în care au fost asociate tulpini selecționate de Lactobacillus ac/dophylus, Lactobacillus casca și Lactobacillus plantarum.In the research carried out by the “Biosan” Center, three generations of eubiotics were prepared, and then manufactured. medicinal products in which selected strains of Lactobacillus ac / dophylus, Lactobacillus casca and Lactobacillus plantarum have been associated.

Sunt cunoscute compoziții farmaceutice care conțin diferite tulpini ale Lactobacillus și care sunt utilizate iu medicina umana pentru tratarea diferitelor maladii.Pharmaceutical compositions containing different strains of Lactobacillus are known and are used in human medicine to treat various diseases.

Cercetările privind obținerea unor eubiotice de înaltă eficacitate au urmărit obținerea unor produse noi. având putere mărită de acidifiere. care sa asigure distrugerea florei de putrefacție si realizarea unor condiții optime pentru dezvoltarea florei saprofite normale. S-a urmărit, de asemenea, obținerea, prin selecție. a unor tulpini de Lactobacillus care să elibereze în mediu cantităti sporite de substanțe de tip antibiotic cuie ar fi lactobacilina, lactocitina. precum s ergoni, care au efecte benefice asupra celulei vii, stimulând funcția divcrscm sisteme endogene si sporind capacitatea vitală.Research into obtaining high-efficiency eubiotics has sought to obtain new products. having increased acidification power. to ensure the destruction of the rotten flora and to achieve optimal conditions for the development of normal saprophytic flora. It was also pursued through selection. of strains of Lactobacillus that release into the environment increased amounts of antibiotic substances such as lactobacillin, lactocytin. as well as ergonomics, which have beneficial effects on the living cell, stimulating the function of endogenous systems and increasing vital capacity.

RO 112995 BlRO 112995 Bl

Produsul medicamentos conform invenției este constituit din 0,093650 părți amestec de 4 tulpini : Lactobacillus acidophylus - LAR, Lactobacillus casei LC, Lactobacillus plantarum - LPI și Streptococcus lactis - SLR înregistrate sub numerele 31, 27, 10 și 36 și Colecția Centrului Biosan (0,5 : 0,5 :The medicinal product according to the invention consists of 0.093650 parts mixture of 4 strains: Lactobacillus acidophylus - LAR, Lactobacillus casei LC, Lactobacillus plantarum - LPI and Streptococcus lactis - SLR registered under Nos. 31, 27, 10 and 36 and the Biosan Center Collection (0 , 5: 0.5:

2,5 : 0,5], 40 părți vitamina B_v 10 părți vitamina B₂, 100 părți vitamina B₆, 200 părți pantotenat de calciu și 6000 părți L-lizină clorhidrat, părțile fiind exprimate în greutate.2,5: 0.5], 40 parts vitamin B _v 10 parts vitamin B ₂ , 100 parts vitamin B ₆ , 200 parts calcium pantothenate and 6000 parts L-lysine hydrochloride, the parts being expressed by weight.

Tulpina de Lactobacillus acidophylus - LAR nr.31 este o tulpină nefilantă, cu o putere acidifiantă de 148°T și fermentează cu randament maxim rafinoza și trehaloza.The strain of Lactobacillus acidophylus - LAR no.31 is a nonfiltrating strain, with an acidifying power of 148 ° T and fermenting with the maximum yield of refining and trehalose.

Tulpina Lactobacillus casei - LC nr. 27, are o putere acidifiantă de 185° T și fermentează ramnoza.Lactobacillus casei strain - LC no. 27, has an acidifying power of 185 ° T and ferments the rhamnose.

Tulpina Lactobacillus plantarum LPI nr.10 coagulează laptele fără eliminare de zer, formează un depozit bogat pe mediu sintetic, are o putere acidifiantă de 150° T, fermentează xiloza.The strain Lactobacillus plantarum LPI no.10 coagulates milk without the elimination of whey, forms a rich deposit on synthetic medium, has an acidifying power of 150 ° T, ferments xylose.

Tulpina Streptococcus lactis - SLR nr. 36 fermentează aesculina.Streptococcus lactis strain - SLR no. 36 aesculin is fermented.

Avantajele produsului medicamentos, conform invenției, sunt următoarele:The advantages of the medicinal product according to the invention are the following:

- acidifiază mediul cu efect prelungit;- acidifies the environment with prolonged effect;

- inhibă efectul hialuronidazei, oprind difuzarea bacteriilor patogene, influențând permeabilitatea mucoasei intestinale;- inhibits the effect of hyaluronidase, stopping the spread of pathogenic bacteria, influencing the permeability of the intestinal mucosa;

reduce activitatea gluconronidazei, azoreductazei si nitrureductazei, substanțe care au acțiune omogenă asupra celulei;reduces the activity of gluconronidase, azoreductase and nitrureductase, substances that have a homogeneous action on the cell;

- stimulează mitoza celulară neoncogenă, cu rol în regenerarea mucoasei intestinale.- Stimulates noncogenic cell mitosis, with a role in the regeneration of the intestinal mucosa.

Se dă în continuare un exemplu de realizare a invenției.An example of the invention is given below.

Pentru obținerea a 100 g produs medicamentos, în conformitate cu prezenta invenție, se asociază următoarele componente: 93,650 g pulbere liofilizată, obținută din amestecul celor 4 tulpini bacteriene (raport de asociere 0,5 : 0,5 : 2,5 : 0,5], se amesteca la rece cu 40 mg vitamina B_v 10 mg vitamina B₂, 100 mg vitamina B... 200 mg pantotenat de calciu si 6000 mg L-lizma clorhidrat.In order to obtain 100 g of medicinal product, according to the present invention, the following components are combined: 93,650 g lyophilized powder obtained from the mixture of the 4 bacterial strains (association ratio 0.5: 0.5, 2.5: 0.5: 0.5 ], mix cold with 40 mg of vitamin B _v 10 mg of vitamin B ₂ , 100 mg of vitamin B ... 200 mg of calcium pantothenate and 6000 mg of L-lysine hydrochloride.

Adăugarea si amestecul ingredientelor se efectuează în condiții de protecție împotriva higroscopicitătii, iar ambalarea se face în recipienti ele culoare închisă cu pulberi sicative. în sistemul de închidere care trebuie sa fie etanș.Adding and mixing the ingredients is done under conditions of protection against hygroscopicity, and the packaging is made in containers dark color with dry powders. in the locking system which must be sealed.

Modul de obținere a tulpinilor.How to obtain the stems.

a) Lactobacillus acidophylusa) Lactobacillus acidophylus

Tulpina pură de Lactobacillus acidophylus a fost obținută prin dispersii si izolări repetate, care s-au efectuat in modul următor: proba din care vrem sa izolăm tulpina de lactobacili a fost introdusă in mediu MRS lichid ai stermostatat la 37°C timji rin 24 -î'-îThe pure Lactobacillus acidophylus strain was obtained by repeated dispersions and isolations, which were performed as follows: the sample from which we want to isolate the lactobacillus strain was introduced into liquid MRS medium and sterolized at 37 ° C. 'him

h.h.

Modul de lucruWay of working

In 10 eprubete sterile s-a introdus apa peptonată 1%o: în prima eprubeta 10 ml, iar în celelalte câte 9 ml. Se ia cu o ansă din mediul însămânțat anterior, introducându-se în prima eprubeta Cu o pipetă de 1 ml s-a omogenizat foarte bine si s-au făcut dilutn succesive dtim: tehnica cunoscuta. Pentru a onnne colonii izolate s-a mers până la dilutia 6-7. din care s-a pus câte 1 ml în cate o placă Petri, peste care s-au turnat 15... 20 ml mediu MRS agarizat la 45%. S-a omogenizat foarte bine pentru a se obține colonii dispersate uniform. După ce mediul s-a solidificat, placa Petri a fost introdusă în termostat la 37 C. cu capacul în jos. timp de 48 h. Cu o ansa fără buclă, au fost izolate coloniile care ne interesau, ținând cont ca aspectul coloniilor este specific speciei de loc*; bacillus acidophylus. Tulpinile izolate au fost introduse în eprubete cu mediu MRS lichid, care are următoarea compoziție 10 %o, triptona. 10°% extract de carne. 10%o extract de drojdie - pH = 6 6.5.In 10 sterile tubes, 1% o was added to the water: in the first tube 10 ml and in the other 9 ml. It is taken with a strainer from the previously sown medium, being introduced into the first tube. With a 1 ml pipette it was very well homogenized and the following dilutions were made: the known technique. To isolate isolated colonies, proceed to dilution 6-7. of which was placed 1 ml in each Petri dish, over which were poured 15 ... 20 ml agarized MRS medium at 45%. It was homogenized very well to obtain uniformly dispersed colonies. After the environment solidified, the Petri dish was introduced into the thermostat at 37 C. with the lid down. for 48 h. With a loopless loop, the colonies that we were interested in were isolated, taking into account that the appearance of the colonies is specific to the species of place *; bacillus acidophylus. The isolated strains were introduced into tubes with liquid MRS medium, which has the following composition 10% o, tryptone. 10% meat extract. 10% yeast extract - pH = 6 6.5.

20%c glucoza. î% Tween SC 2' fosfat dipotasic, 5.h> acetat cie sodit.. 2%o citrat de amoniu. 0.2'’ sulmt, c '20% c glucose. In% Tween SC 2 'dipotassium phosphate, 5.h> sodium acetate .. 2% ammonium citrate. 0.2 '' sulmt, c '

RO 112995 Bl magneziu,RO 112995 Magnesium Bl.

0,05 %o sulfat de mangan. Se sterilizează 20 mm. la o atmosferă.0.05% manganese sulphate. Sterilize 20 mm. to an atmosphere.

b) Lactobacillus caseib) Lactobacillus casei

Tulpina pură de Lactobacillus casei a fost obținută prin dispersii și izolări repetate, care s-au efectuat în modul următor: proba din care vrem să izolăm tulpina de lactobacili a fost introdusă în MRS lichid și s-a termostatat la 37°C timp de 24 ... 48 h.The pure strain of Lactobacillus casei was obtained by repeated dispersions and isolations, which were performed as follows: the sample from which we want to isolate the lactobacillus strain was introduced into liquid MRS and thermostated at 37 ° C for 24 hours. 48 hrs.

Modul de lucruWay of working

In 10 eprubete sterile s-a introdus apă peptonată 1 %₀, în prima eprubetă 10 ml, iar în celelalte câte 9 ml.In 10 sterile tubes, 1% ₀ peptonate water was introduced, 10 ml in the first tube and 9 ml in the other ones.

Se ia cu o ansă din mediul însămânțat anterior, introducându-se în prima eprubetă. Cu o pipetă de 1 ml s-a omogenizat foarte bine si s-au făcut diluții succesive după tehnica cunoscută. Pentru a obține tulpini izolate s-a mers până la diluția 6 - 7, din care s-a pus câte 1 ml în câte o placă Petri, peste care s-au turnat 15 ... 20 ml mediu MRS organizat la 45°C. S-a omogenizat foarte bine pentru a se obține colonii dispersate uniform. După ce mediul s-a solidificat, placa Petri a fost introdusă în termostat la 37°C, cu capacul în jos, timp de 48 h.It is taken with a handle from the previously sown environment, entering the first tube. With a 1 ml pipette it was homogenized very well and successive dilutions were made according to the known technique. To obtain isolated strains we went to dilution 6-7, of which 1 ml was placed in a Petri dish, over which were poured 15 ... 20 ml MRS medium organized at 45 ° C. It was homogenized very well to obtain uniformly dispersed colonies. After the medium solidified, the Petri dish was placed in the thermostat at 37 ° C, with the lid down, for 48 hours.

Cu o ansă fără buclă au fost izolate coloniile care ne interesau, ținând cont că aspectul coloniilor este specific speciei de Lactobacillus casei.With a loopless loop, the colonies we were interested in were isolated, considering that the appearance of the colonies is specific to the species of Lactobacillus casei.

Tulpinile izolate au fost introduse în eprubete cu mediu MRS lichid (mediu de Man, Rogoza, Sharpe) cu compoziția cunoscută.Isolated strains were introduced into tubes with liquid MRS medium (Man medium, Rogoza, Sharpe) with known composition.

c) Lactobacillus plantarumc) Lactobacillus plantarum

Tulpina pură de Lactobacillus plantarum a fost obținută prin dispersii și izolări repetate, care s-au efectuat în modul următor: proba din care vrem să izolăm tulpina de lactobacili a fost introdusă în MRS lichid și s-a termostatat la 37°C timp de 24 ... 48 h.The pure strain of Lactobacillus plantarum was obtained by repeated dispersions and isolations, which were performed as follows: the sample from which we want to isolate the lactobacillus strain was introduced into liquid MRS and thermostated at 37 ° C for 24 hours. 48 hrs.

Modul de lucruWay of working

In 10 eprubete sterile s-a introdus apă peptonată 1 %□; în prima eprubetă ml, iar în celelalte câte 9 ml. Se ia cu o ansă din mediul însămânțat anterior, introducându-se în prima eprubetă. Cu o pieptă de 1 ml s-a omogenizat foarte bine și s-au făcut diluții succesive după tehnica cunoscută. Pentru a obține colonii izolate s-a mers până la dilutic 6 ...7, din care s-a pus câte 1 ml in cate o placă Petri, peste care s-au turnat 1 5 ... 20 ml mediu MRS agarizat. la 45 C S-a omogenizat foarte bine pentru a se obține colonii dispersate uniform După ce mediul s-a solidificat, placa Petri a fost introdusă în termostat. cu capacul în jos, timp de 48 h. Cu o ansa fără buclă au fost izolate coloniile care ne interesau, ținând cont că aspectul coloniilor este specific speciei de Lootobacillus plantarum.In 10 sterile tubes 1% peptonate water was introduced □; in the first tube ml and in the other 9 ml. It is taken with a handle from the previously sown environment, entering the first tube. With a 1 ml breast it was homogenized very well and successive dilutions were made according to the known technique. In order to obtain isolated colonies, 6 to 7 were diluted, of which 1 ml was placed in each Petri dish, over which 1 5 ... 20 ml agarized MRS medium was poured. At 45 C It was homogenized very well to obtain uniformly dispersed colonies. After the medium solidified, the Petri dish was introduced into the thermostat. with the lid down, for 48 h. With a loopless loop, the colonies that we were interested in were isolated, considering that the appearance of the colonies is specific to the Lootobacillus plantarum species.

Tulpinile izolate au fost introrlus*în eprubete cu mediu MRS lichid, cu compoziția cunoscută.Isolated strains were intruded into tubes with liquid MRS medium, with known composition.

d) Streptococcus lactisd) Streptococcus lactis

Tulpina pură de Streptococccc lactis a fost obținută prin dispersii ai izolări repetate, care s-au efectuat modul următor. Proba din cărei vrern s. * izolăm tulpina de streptococi lactici a fost introdusă în lapte hidrolizat cu extract de drojdie (LHD) si s-a termostatat la 24°C timp de 24 ... 48 h.The pure strain of Streptococccc lactis was obtained by repeated isolation dispersions, which were performed the following way. The sample from which we isolate the strain of lactic streptococci was introduced into hydrolyzed milk with yeast extract (LHD) and thermostated at 24 ° C for 24 ... 48 h.

Modul de lucru:Way of working:

In 10 eprubete sterile s-a introdus apă peptonată 1%o; în prima eprubetă 10 ml, iar celelalte câte 9 ml. Se ia cu o ansă din mediul însămânțat anterior, introducându-se în prima eprubetă Cu c pipetă de 1 ml s-a omogenizat foarte bine si s-au făcut diluții succesive după tehnica cunoscută. Pentru a obține colonii izolate s-a mers până la diluție 6 .In 10 sterile tubes, 1% o peptonate water was introduced; in the first tube 10 ml and the other 9 ml. It is taken with a strainer from the previously sown medium, being introduced into the first tube. With a 1 ml pipette c was homogenized very well and successive dilutions were made according to the known technique. To obtain isolated colonies, dilution 6 was used.

7, din care s-a pus câte 1 ml în câte o placă Petri, peste care s-au turnat 1 5 ml mediu LHD agarizat. la 45 C S-a omogenizat foarte bine pentru a s>' obține colonii dispersate uniform Duiai ce mediul s-a solidificat, placa Petri . fost introdusă în termostat la 24 C. cu capacul în jos, timp de 48 h. Cu o ansa fără buclă au fost izolate coloniile care ne interesau, ținând cont că aspectul coloniilor este specific speciei de Streptococcus lactis.7, of which 1 ml was placed in a Petri dish, over which were poured 1 5 ml agarized LHD medium. At 45 C It was homogenized very well to obtain uniformly dispersed colonies Duiai as the environment solidified, Petri dish. was introduced in the thermostat at 24 C. with the lid down, for 48 h. With a loopless loop, the colonies of interest were isolated, considering that the colonies aspect is specific to the species of Streptococcus lactis.

Tulpinile izolate au fost introduse în eprubete cu mediu LHD lichid, car*'·Isolated strains were inserted into tubes with liquid LHD medium, which * '·

RO 112995 Bl are următoarea compoziție: 100 ml lapte hidrolizat concentrat pH = 6,5 ...RO 112995 Bl has the following composition: 100 ml concentrated hydrolyzed milk pH = 6.5 ...

6,8, 100 ml apă distilată,5 gr autolizat de drojdie, 1 gr. acetat de sodiu. Se sterilizează 15 min. la 1 20°C. 56.8, 100 ml distilled water, 5 g autolysed yeast, 1 g sodium acetate. Sterilize for 15 minutes. at 1 20 ° C. 5

Se prezintă în continuare caracteristicile tulpinilor izolate si identificate, în comparație cu tulpinile comune ale speciilor respective.The characteristics of the isolated and identified strains, as compared to the common strains of the respective species, are presented below.

Caracteristicile tulpinei de Lactobacillus acidophylus folosită în produs, conform invenției, comparativ cu cele ale tulpinilor comune de Lactobacillus acidophylusCharacteristics of the Lactobacillus acidophylus strain used in the product, according to the invention, compared to those of the common Lactobacillus acidophylus strains

Nr. crt. Nr. crt. Caracteristici Characteristics Tulpina comună de Lactobacillus acidophylus Common Lactobacillus acidophylus strain Tulpina LAR Nr 31 Stem LAR No. 31 1. 1. Caracteristici morfologice Morphological characteristics bastonașe cu capete rotunjite, gram-pozitivi, organizați în formațiuni filamentoase de dimensiuni variabile care dau aspect filamentos sau mucilaginos rods with rounded heads, gram-positive, organized in filamentous formations of variable dimensions giving a filamentous or mucilaginous appearance bacili lungi, gram pozitivi colorați intermitent 1111011::1 formează lanî.i ηί a·: ;i .· · bacilli long, gram positive colored intermittently 1111011 :: 1 form chains and ηί a ·:; i. · · 2. 2. Caractere culturale - creșterea pe lapte turnesolat Cultural characters - growing on sunflower milk coagulează laptele coagulates milk coagulează laptele coagulates milk - creșterea pe MRS lichid - increase on liquid MRS tulbură mediul disturb the environment tulbură mediul cu forma: :’ de sediment. disturbs the environment with the form: sediment. - creșterea pe MRS solid - growth on solid MRS colonii vâscoase, lungi, încurcate cu proiecții piriforme, pufose sau în profunzime unde coloniile sunt mici, neregulate cu prelungiri fine viscous, long colonies, tangled with pyriform, fluffy or deep projections where the colonies are small, irregular with fine extensions colonii mici, aibicioa.m a vâscoase, cu marq:rnr neregulate small colonies, aibicioa.m of viscous, with irregular marking 3. 3. Temperatura de dezvoltare Development temperature Minim Optim Maxim 20°C 37°C 45°C Minimum Optimum Maxim 20 ° C 37 ° C 45 ° C Minim Optim Maxim 20 0 37°C 47 C Minimum Optimum Maxim 20 0 37 ° C 47 C 4. 4. Rezistență la substanțe inhibitoare 2% NaCl 4% 6% 8% Resistance to inhibitory substances 2% 4% NaCl 6% 8% se dezvoltă se dezvoltă nu se dezvoltă nu se dezvoltă it develops it develops it does not develop it does not develop se dezvolta se dezvolta dezvoltare foarte slaba nu dezvoltă grow develop very weak development does not develop 2% taurocolat 3% de sodiu 4% 2% taurocolat 3% 4% sodium se dezvoltă se dezvoltă nu se dezvoltă it develops it develops it does not develop se dezvolta se dezvoltă se dezvoltă slab to develop, to develop, to develop weakly

RO 112995 BlRO 112995 Bl

1010

Tabel [continuare!Table [continue!

0,3 % fenol 0,4 % 0,6 % 0,8 % 0.3% phenol 0.4% 0.6% 0.8% se dezvoltă se dezvoltă nu se dezvoltă nu se dezvoltă it develops it develops it does not develop it does not develop se dezvolta se dezvolta nu se dezvolta nu se dezvolta it develops it develops it does not develop it does not develop 5. i 1 5. and 1 Rezistență la temperaturi înalte 30' - 60°C 60’ - 60°C 90' - 60°C 15' - 65°C 60' - 65°C 90' - 65°C High temperature resistance 30 '- 60 ° C 60' - 60 ° C 90 '- 60 ° C 15' - 65 ° C 60 '- 65 ° C 90' - 65 ° C se dezvoltă nu se dezvoltă nu se dezvoltă dezvoltare slabă nu se dezvoltă nu se dezvoltă develops do not develop does not develop weak development does not develop does not develop se dezvolta nu se dezvolta nu se dezvolta se dezvolta nu se dezvolta nu se dezvoltă i I grow it does not develop it does not develop grow it does not develop does not develop I 6. 6. Puterea de acidifiere Aciditate finală Aciditate limită Power of acidification Final acidity Limiting acidity 140°T 1,2 % acid lactic 140 ° T 1.2% lactic acid 1 48^CT 1,8% acid lactic1 48 ^C T 1.8% lactic acid 7. 7. Reducerea mtraților Reduction of transfers nu reduce nitrații does not reduce nitrates nu reduce nitratii does not reduce nitrates 8. 8. Producerea amoniacului din arginină Production of ammonia from arginine nu produce amoniac din arginină does not produce ammonia from arginine nu produce amoniac m· argmina does not produce ammonia m · argmina 9- 9- Producerea C0₂ din glucozăC0 ₂ production of glucose nu produce C0₂ din glucozădoes not produce CO ₂ from glucose nu produce CO din mc- does not produce CO from mc- 10. 10. Gelatinoliza Gelatinoliza nu lichefiază gelatina does not liquefy gelatin nu lichefiază gelatina does not liquefy gelatin 11. 11. Producerea de cataloză Catalysis production sunt catalazo negativi are catalazo negative sunt catalazo negam·' i am catalazo negam · ' 12. 12. Producerea de indol Production of indole nu produc îndoi they do not produce bends nu produc incioi they do not produce slopes . 13. . 13. Reacția cu roșu de metil Reaction with methyl red - reacție pozitivă - positive reaction - reacție pozitiva - positive reaction 14. 14. Reacția Voges Praskauer Voges Praskauer reaction reacție pozitivă positive reaction reacție pozitiva positive reaction 15. 15. Creștere pe mediu cu citrați Growth on the environment with citrates reacție negativă negative reaction reacție negativa negative reaction 16. 16. Fermentarea hidraților de carbon Fermentation of carbohydrates fermentează fructoza, manoza, galactoza,. zaharoza, maltoza, glucoza, lactoza ferments fructose, mannose, galactose. sucrose, maltose, glucose, lactose fermentează glucoza, zaharoza. lactoza.frimm'm’ maltoza. manoza. galacm.m. rafinoza si trehaloza ferment glucose, sucrose. lactose.frimm'm 'malt. mannose. galacm.m. refines and trehalose

RO 112995 BlRO 112995 Bl

1212

Caracteristicile tulpinei de Lactobacillus casei folosită în produs, conform invenției comparativ cu cele ale tulpinilor comune de Lactobacillus caseiCharacteristics of the Lactobacillus casei strain used in the product, according to the invention compared to those of the common Lactobacillus casei strains

Nr. crt Nr. No. Caracteristici Characteristics Tulpina comună de Lactobacillus casei Common Lactobacillus strain house Tulpina LC Nr. 27 | Stem LC Nr. 27 | 1. 1. Caracteristici morfologice și tinctoriale Morphological and dye characteristics bacili lungi sau scurți, imobili, gram-pozitivi, ce formează lanțuri scurte sau lungi bacilli long or short, immobile, gram-positive, forming short or long chains bacili lungi, gram pozitivi, imobili, ce formează lanțuri lungi și foarte lungi, puternic colorați bacilli long, gram positive, immobile, forming long and very long chains, strongly colored 2. 2. Caractere culturale - lapte degresat steril cu extract de drojdie, glucoza și turnesol Cultural characters - sterile skimmed milk with yeast, glucose and sunflower extract acidifiază și coagulează laptele, reduce turnesolul acidifies and coagulates milk, reduces turnesol acidifiaza si coagulează laptele, reduce turnccm acidifies and coagulates milk, reduces turnccm - lapte în amestec cu MRS lichid - milk mixed with liquid MRS coagulare cu eliminare de zer whey elimination coagulation coagulează fara eliminare de zer coagulates without removing whey - MRS lichid - MRS liquid tulbură mediul la 24 h și formează depozit după 48 h disturbs the environment at 24 hours and forms a deposit after 48 hours tulbura mediul ia 24 a formează depozit doct, a 48 h the disturbed environment takes 24 hours to form a medical deposit, 48 hours - MRS solid - MRS solid colonii albe-cenusii netede, vâscoase, rotunde cu marginile regulate white-gray, smooth, viscous, round colonies with regular margins colonii aibe-ceni isir τ rotunde cu marriiniC regulate aibe-ceni colonies becomes τ round with regular marriiniC 3. 3. Temperatura de dezvoltare Development temperature Minim Optim Maxim 15°C 35°C 40°C Minimum Optimum Maxim 15 ° C 35 ° C 40 ° C Minim Optim Maxim 15°C 35'C 45 C Minimum Optimum Maxim 15 ° C 35'C 45 C 4. 4. Rezistență la substanțe inhibitoare 2% NaCI 4% 6% 8% Resistance to inhibitory substances 2% NaCI 4% 6% 8% se dezvoltă se dezvoltă nu se dezvoltă nu se dezvoltă it develops it develops it does not develop it does not develop se dezvolta se dezvolta se dezvolta slab nu se dezvolta grow grow it develops poorly it does not develop 2% taurocolat 3% de sodiu 4% 2% taurocolat 3% 4% sodium se dezvoltă se dezvoltă nu se dezvoltă it develops it develops it does not develop se dezvolta se dezvolta dezvoltare foarte slaba grow very weak development is developing □,3 fenol 0,4 0,6 □ ,8 □ 3 phenol 0.4 0.6 □, 8 se dezvoltă se dezvoltă nu se dezvoltă nu se dezvoltă it develops it develops it does not develop it does not develop se dezvolta se dezvolta se dezvolta nu se dezvolta it develops it develops it develops it does not develop

RO 112995 BlRO 112995 Bl

1414

Tabel (continuarelTable (continued)

5. 5. Rezistența la temperaturi înalte 30' - 60°C 60' - 60°C 90' - 60°C 1 5' - 65°C 30' - 65°C 90 - 65°C High temperature resistance 30 '- 60 ° C 60 '- 60 ° C 90 '- 60 ° C 1 5 '- 65 ° C 30 '- 65 ° C 90 - 65 ° C se dezvoltă nu se dezvoltă nu se dezvoltă nu se dezvoltă nu se dezvoltă nu sedezvoltă develop does not develop does not develop does not develop does not develop does not develop se dezvolta nu se dezvolta nu se dezvolta nu se dezvolta nu se dezvolta nu se dezvoltă Ș grow it does not develop it does not develop it does not develop it does not develop does not develop Ș 6. 6. Puterea de acidifiere Aciditate finală Aciditate limită Power of acidification Final acidity Limiting acidity 170°T 1,3% acid lactic 170 ° T 1.3% lactic acid 1 85°T 1,5% acid lactic I 1 85 ° T 1.5% lactic acid I 7. 7. Reducerea nitraților Nitrate reduction nu reduce nitrații does not reduce nitrates nu reduce mtratii , does not reduce the size, 8. 8. Producerea amoniacului din arginină Production of ammonia from arginine nu produce amoniac din arginină does not produce ammonia from arginine nu produce amoniac a n arginina does not produce ammonia of arginine 9. 9. Producerea C0₂ din glucozaProduction of C0 ₂ from glucose nu produce C0₂ din glucozadoes not produce CO ₂ from glucose nu produce CO din Cr _: does not produce CO from Cr _: 10. 10. Gelatinoliza Gelatinoliza nu lichefiază gelatina does not liquefy gelatin nu lichefiază gelatina does not liquefy gelatin 11. 11. Producerea de catalază Catalase production sunt cataiazo negativi they are negative cataracts nu cataiazo negatm do not cataiazo negatm 12. 12. Producerea de indol Production of indole nu produc îndoi they do not produce bends nu produc îndoi they do not produce bends 13. 13. Reacția cu roșu de metil Reaction with methyl red - reacție pozitivă - positive reaction - reacție pozitiva - positive reaction 14. 14. Reacția Voges Praskauer Voges Praskauer reaction reacție pozitivă positive reaction reacție pozitiva positive reaction 15. 15. Creștere pe mediu cu citrați Growth on the environment with citrates negativă negative negativa negative 16. 16. Fermentarea hidraților de carbon Fermentation of carbohydrates fermentează glucoza, fructoza, manoza, galactoza, maltoza, lactoza, manitolul și salicina. Fermentează slab zaharoza. ferment glucose, fructose, mannose, galactose, maltose, lactose, mannitol and salicin. Ferments low in sucrose. fermentează glucoza. ' fructoza. manoza. l galactoza. maltoza. lactoza manitolul. salicina si ί zaharoza. Fermentează vi i mare ușurința lactcza si ramnoza. ferment glucose. ' fructose. mannose. it galactose. maltose. lactose mannitol. salicin and ί sucrose. It enhances the ease of lactose and ramen.

Caracteristicile tulpmei de Lactobacillus plantarum folosită în produs, conform invenției, comparativ cu cele ale tulpinilor comune de Lactobacillus plantarumCharacteristics of the Lactobacillus plantarum strain used in the product, according to the invention, compared to those of the common Lactobacillus plantarum strains

Nr.c rt. Molar rt. Caracteristici Characteristics Tulpina comună de Lactobacillus plantarum Common strain of Lactobacillus plantarum Tulpina LP 3 Nr 10 Stem LP 3 No. 10 1. 1. Caracteristici morfologice Morphological characteristics bacili scurti, gram pozitivi, cu capete rotunjite, izolați sau în lanțuri scurte short bacilli, gram positive, with rounded heads, isolated or in short chains bacili scurti. gram- oⁿ''m capete rotunjim, as-':’ lanțuri scurte, in 'm'·': ' neprielnice au r.endin’.· ·: alungire.short bacilli. gram- o ⁿ '' m round heads, as- ':' short chains, in 'm' · ':' improper have r.endin '. · ·: elongation.

RO 112995 BlRO 112995 Bl

1616

Tabel [continuare]Table [continued]

2. 2. Caractere culturale - lapte cu extract de drojdie, glucoză și turnesol Cultural characters - milk with yeast extract, glucose and sunflower acidifiază și coagulează acidifies and coagulates acidifiază si coagulează acidifies and coagulates - lapte în amestec cu MRS lichid - milk mixed with liquid MRS coagulare cu eliminare de zer whey elimination coagulation coagulează fara eliminare de zer coagulates without removing whey - MRS lichid - MRS liquid la 24 h de tulbureală, apoi formează depozit 24 hours after the disorder, then form a deposit la 24 h de tulbureala, ape formează un depozit docar 24 hours after the disturbance, the waters form a docar deposit - MRS solid - MRS solid colonii mici, albe, netede, cu marginea neregulată small, white, smooth colonies, with irregular margin colonii de 2 - 3 mmm dimensiune, netede cu marginea neregulata colonies of 2 - 3 mmm size, smooth with irregular margin 3. 3. Temperatura de dezvoltare Development temperature Minim Optim Maxim 10°C 30°C 40°C Minimum Optimum Maxim 10 ° C 30 ° C 40 ° C Minim Optim Maxim 10’C 30 C --0 0 Minimum Optimum Maxim 10 C 30 C --0 0 4. 4. Rezistența la substanțe inhibitoare 2% NaCI 4% 6% 8% Resistance to inhibitory substances 2% NaCI 4% 6% 8% se dezvoltă se dezvoltă se dezvoltă nu se dezvoltă it develops it develops it develops it does not develop se dezvolta se dezvolta se dezvolta dezvoltare slaba weak develop weak develop 2% taurocolat 3% de sodiu 4% 2% taurocolat 3% 4% sodium se dezvoltă dezvoltare slabă nu se dezvoltă weak development does not develop se dezvolta se dezvolta nu se dezvolta grow grow it does not develop □,3 fenol 0,4 □,6 0,8 □ 3 phenol 0.4 □ 6 0.8 se dezvoltă se dezvoltă nu se dezvoltă nu se dezvoltă it develops it develops it does not develop it does not develop se dezvolta se dezvolta nu se dezvolta nu se dezvolta it develops it develops it does not develop it does not develop 5. 5. Rezistență la temperatură 15' - 60°C 30' - 60°C 60' - 60°C 15' - 65°C 30’ - 65°C 60' - 65°C Resistance to temperature 15 '- 60 ° C 30' - 60 ° C 60 '- 60 ° C 15 '- 65 ° C 30 '- 65 ° C 60 '- 65 ° C se dezvoltă nu se dezvoltă nu se dezvoltă se dezvoltă nu se dezvoltă nu se dezvoltă it develops it does not develop it does not develop it develops it does not develop it does not develop se dezvolta nu se dezvolta nu se dezvolta se dezvolta dezvoltare foarte slaba nu se dezvolta grow does not develop does not develop develop very weak development does not develop 6- 6 Puterea de acidifiere Aciditate finală Aciditate limită Power of acidification Final acidity Limiting acidity 1 70°T 1,2% acid lactic 1 70 ° T 1.2% lactic acid 190°T 1,6% acid lactic 190 ° T 1.6% lactic acid 7. 7. Reducerea nitraților Nitrate reduction nu reduce nitrații does not reduce nitrates nu reduce nitratii does not reduce nitrates 8. 8. Producerea amoniacului din arginină Production of ammonia from arginine nu produce amoniac din arginină does not produce ammonia from arginine nu produce amoniac, cm arginină does not produce ammonia, arginine cm 9. 9. Producerea 00 din glucoză Glucose 00 production nu produce C0_o din glucozădoes not produce C0 _a glucose nu produce 00 dm Mmm does not produce 00 dm Mmm

RO 112995 BlRO 112995 Bl

1818

Tabel [continuare]Table [continued]

10. 10. Gelatinoliza Gelatinoliza nu lichefiază gelatina does not liquefy gelatin nu lichefiază gelatina does not liquefy gelatin 11. 11. Producerea de catalază Catalase production sunt catalazo negativi are catalazo negative sunt catalazo negativi are catalazo negative 12. 12. Producerea de indol Production of indole nu produc îndoi they do not produce bends nu produc îndoi they do not produce bends 13. 13. Reacția cu roșu de metil Reaction with methyl red - reacție pozitivă - positive reaction - reacție pozitiva - positive reaction 14. 14. Reacția Voges Praskauer Voges Praskauer reaction - reacție negativă - negative reaction - reacție negativa - negative reaction 15. 15. Creștere pe mediu cu citrați Growth on the environment with citrates negativă negative negativă negative 16. 16. Fermentarea hidraților de carbon Fermentation of carbohydrates fermentează fructoza, manoza, galactoza, arabinoza, zaharoza, maltoza, rafinoza, salicina si mai puțin sorbitolul, manitolul. glicerolul fermented fructose, mannose, galactose, arabinose, sucrose, maltose, raffinose, salicin and less sorbitol, mannitol. glycerol fermentează fructoza. manzoza, galactoza, arabinoza. zaharoza. maltoza. rafinoza. salicina a mai puțin sorbitolul. manitolul. clextnna Cm' · si xiloza ferment the fructose. manzoza, galactoza, arabinoza. sucrose. maltose. raffinose. Salicine has less sorbitol. mannitol. clextnna Cm '· si xylose

Caracteristicile tulpinei de Streptococcus lactis folosită in produs, conform invenției, comparativ cu cele ale tulpinilor comune de Streptococcus lactisCharacteristics of the Streptococcus lactis strain used in the product, according to the invention, compared to those of the common Streptococcus lactis strains

Nr. crt. Nr. crt. Caracteristici Characteristics Tulpina comună de Streptococcus lactis Common Streptococcus lactis strain Tulpina SLR nr.36 SLR strain no.36 1. 1. Caracteristici morfologice Morphological characteristics germeni gram pozitivi sub formă de diplococi și lanțuri scurte Gram-positive germs in the form of diplococci and short chains germeni gram-pozm formează lanțuri scm· si medii gram-pozm germs form scm · and medium chains 2. 2. Caractere culturale - lapte smântânit cu 2 %o extract de drojdie Cultural characters - Milk sourced with 2% yeast extract coagulează laptele cu eliminare de zer coagulates whey milk coagulează laptele la însămânțare minima, fără eliminare de zer coagulates milk at minimum sowing, without elimination of whey I I - lapte turnesolat - sunflower milk produce aciditate si coagulează laptele, reduce turnesolul cu excepția unui inel de la suprafața culturii produces acidity and coagulates the milk, reduces turnesol except for a ring on the surface of the crop reduce turnesolul înainte de coagulare, produce aciditate si coagulează laptele lowers turnesol before it coagulates, produces acidity and coagulates milk - bulion dextrozat și lactozat - dextrose and lactose broth produce tulbureala mediului, apoi sediment slab dezvoltat produces environmental disturbance, then poorly developed sediment produce tulbureala mediului, apoi sediment bogat produces the disturbance of the environment, then rich sediment - lapte hidrolizat cu drojdie agarizat (LHD) - hydrolyzed milk with agarized yeast (LHD) colonii foarte mici, ușor gălbui, rotunde sau lenticulare cu marginea netedă colonies very small, slightly yellow, round or lenticular with a smooth margin colonii foarte mici, ușor gălbui, rotunde, cu marginea neteda colonies very small, slightly yellow, round, with a smooth border

RO 112995 BlRO 112995 Bl

Tabel [continuare ’Table [continue]

3. 3. Temperatura de dezvoltare Development temperature Minim Optim Maxim 10°C 24°C 40°C Minimum Optimum Maxim 10 ° C 24 ° C 40 ° C Minim Optim Maxim 10°C 24°C 42 C i I Minimum Optimum Maxim 10 ° C 24 ° C 42 C i I ! 4. i I ! 4. and I Rezistența la substanțe inhibitoare 2% NaCI 4% 6% Resistance to inhibitory substances 2% NaCI 4% 6% se dezvoltă se dezvoltă dezvoltare slabă weak development develops weak development I se dezvoltă se dezvoltă se dezvolta slab l I grow grow develops poorly l bila de bou 10% 40% bullet 10% 40% se dezvoltă se dezvoltă it develops it develops se dezvoltă i se dezvoltă develops i grow I I albastru de 0,1% metilen 0,2% 0,3% 0.1% blue methylene 0.2% 0.3% se dezvoltă se dezvoltă dezvoltare slabă weak development develops weak development se dezvolta se dezvolta se dezvolta it develops it develops it develops 5. 5. Rezistență la temperaturi înalte 30' - 60°C 60' - 60°C 90' - 60°C 15' - 65°C 30' - 65°C High temperature resistance 30 '- 60 ° C 60 '- 60 ° C 90 '- 60 ° C 15 '- 65 ° C 30 '- 65 ° C dezvoltare slabă nu se dezvoltă nu se dezvoltă dezvoltare foarte slabă nu se dezvoltă weak development does not develop does not develop very poor development does not develop Se dezvolta dezvoltare slaba nu se dezvolta se dezvolta nu se dezvolta It develops weak development does not develop it develops it does not develop 6. 6. Puterea de acidifiere - pH final în bulion dextrozat - aciditate finală în lapte steril - aciditate limită Power of acidification - final pH in dextrose broth - final acidity in sterile milk - limit acidity 3,85 - 4,0 145°T 1,13 % acid lactic 3.85 - 4.0 145 ° T 1.13% lactic acid 4,0-4.5 : f 1 50T 1,1 8% acid lactic 4.0-4.5: f 1 50T 1.1 8% lactic acid 7. 7. Curba de aciditate Acidity curve 6h 7h 76°T 83°T 6h 7h 76 ° T 83 ° T 6h 7h 78T 89 T 6h 7h 78T 89 T 8. 8. Producerea catalazei Catalase production catalazo negativă negative catalase catalazo negativa negative catalazo 9. 9. Gelatinoliza Gelatinoliza nu lichefiază gelatină does not liquefy gelatin nu lichefiază gelatina does not liquefy gelatin 10. 10. Hidroliza hipuratului de sodiu Hydrolysis of sodium hypurate nu hidrolizează does not hydrolyze nu hidrolizeaza does not hydrolyze 11. 11. Producerea amoniacului din arginină Production of ammonia from arginine produce amoniac din arginină produces ammonia from arginine produce amoniac din arginină produces ammonia from arginine 12. 12. Prezența compușilor aromatizați Presence of flavored compounds nu produce aromă does not produce aroma nu produce aroma does not produce aroma

RO 112995 BlRO 112995 Bl

2222

Tabel [continuarejTable [continued]

13. 13. Producerea de C0₂ Production of C0 ₂ nu produce C0₂ does not produce CO ₂ nu produce CO does not produce CO 14. 14. Fermentarea hidraților de carbon Fermentation of carbohydrates fermentează glucoza, levuloza, galactoza, manoza, lactoza, trehaloza, maltoza, dextrina și salicina. ferment glucose, levulose, galactose, mannose, lactose, trehalose, maltose, dextrin and salicin. Fermentează glucoza, levuloza. manoza. galactoza. maltoza. lactoza. trehaloza dextrina, salicina si aesculina Ferments glucose, levulose. mannose. galactose. maltose. lactose. dextrin, salicin and aesculin trehalose

Adaptarea tulpinilor de lactobaciii și streptococi, conform invenției, la diverse concentrații de antibiotice și chimioterapice.Adaptation of the strains of lactobacilli and streptococci, according to the invention, to various concentrations of antibiotics and chemotherapeutics.

Tulpinile care intră în componenta medicamentului, conform invenției, au fost adaptate la următoarele antibioticeThe strains that are part of the drug according to the invention have been adapted to the following antibiotics

- penicilină - penicillin - cloramfenicol - chloramphenicol - furazolidon - furazolidone - streptomicina - streptomycin - ampicilina - ampicillin - vibramicin - vibramycin - tetraciclină - tetracycline - kanamicina - kanamycin - neomicina - neomycin - eritomicina - erythromycin - oxacilina - oxacillin - nitrofurantoin - nitrofurantoin -colimicina -colimicina - neoxazo! - neoxazo! - propiomicin - propromycin - negamicina - negamycin - sulfametin - sulfametin - bacitracina - bacitracin - rifampicina - rifampicin - biseptol - biseptol - ftalilsulfatiazol - phthalylsulfatiazole - salazopirin - salazopyrin

S-au făcut pasaje alternative pe mediu MRS lichid, cu și fără antibiotice, în cantități progresive.Alternative passages were made on liquid MRS medium, with and without antibiotics, in progressive quantities.

Se dă un exemplu de adaptare pentru un antibiotic - penicilina.An example of an adaptation for an antibiotic - penicillin is given.

Se prepară o soluție de penicilin cu 1OO Ul/cc care se adaugă la medii, de bază steril, în cantitățile următoarePrepare a penicillin solution of 1OO Ul / cc which is added to sterile base media in the following quantities

pasaj I transient I □ ,5 Ul/cc □, 5 Ul / cc VIII VIII 4 Ul/cc 4 Ul / cc II II 1 Ul/cc 1 Ul / cc IX IX 4,5 Ul/cc 4.5 Ul / cc III III 1,5 Ul/cc 1.5 Ul / cc X X 5 Ul/cc 5 Ul / cc IV IV 2 2 XI XI 5,5 Ul/cc 5.5 Ul / cc V V 2,5 Ul/cc 2.5 Ul / cc XII XII 6 Ul/cc 6 Ul / cc VI VI 3UI/cc 3UI / cc XIII XIII 6.5 Ul/cc 6.5 Ul / cc VII ARE YOU COMING 3,5 Ul/cc 3.5 Ul / cc XIV XIV 7 Ul/cc 7 Ul / cc

antibiotice [7 Ul/cc]antibiotics [7 Ul / cc]

Se procedează la fel iientru tom antibioticeleAntibiotics are also taken in the near future

Pentru menținerea rezistentei la antibiotice, se fac pasaje în continuare pe mediul de bază cu doza maximă deTo maintain antibiotic resistance, passages are still made on the basic medium with the maximum dose of

RO 112995 BlRO 112995 Bl

Antibiorezistența se controlează prin antibiograma pe mediu de bază solidă cu microcomprimate uzuale. Mediul se însămânțează prin încorporare, se lasă să se solidifice, apoi se pun microcomprimatele la 37°C, 48 ... 72 h.Antibioresistance is controlled by antibiogram on solid base medium with usual microcompresses. The medium is seeded by incorporation, allowed to solidify, then put the microcompresses at 37 ° C, 48 ... 72 h.

Dacă în jurul microcomprimatelor nu apar zone clare, tulpinile sunt rezistente.If there are no clear areas around the micro-tablets, the stems are resistant.

Tulpinile izolate, identificate și antibiorezistente au fost înregistrate în colecția Centrului “Biosan” la numerele:Isolated, identified and anti-resistant strains were recorded in the collection of the “Biosan” Center at the numbers:

a) Lactobacillus acidophylusa) Lactobacillus acidophylus

- tulpina LAR nr. 31- LAR strain no. 31

b) Lactobacillus caseib) Lactobacillus casei

- tulpina LC nr. 27- LC strain no. 27

c) Lactobacillus plantarumc) Lactobacillus plantarum

- tulpina LPI nr. 1 □- LPI strain no. 1 □

d) Streptococcus lactisd) Streptococcus lactis

- tulpina SLR nr.36- SLR strain no.36

Tulpinile izolate se întrețin pe medii sintetice, cum ar fi MRS și LHD a căror compoziție este în sine cunoscută.Isolated strains are maintained on synthetic media, such as MRS and LHD, the composition of which is itself known.

Periodic, tulpinile sunt supuse la cele mai importante teste cunoscute pentru identificare, în vederea stabilirii rezistenței în timp a caracteristicilor, precum și a vitezei lor de îmbătrânire.Periodically, the strains are subjected to the most important tests known for identification, in order to establish the resistance over time of the characteristics, as well as their aging speed.

Pentru revitalizare, tulpinile se trec periodic pe mediile solide cunoscute.For revitalization, the strains are periodically passed on the known solid media.

Pentru a pregăti tulpinile pentru faza de producție, acestea se multiplică, apoi se trec pe lapte degresat steril, în raportul lor de asociere din produsul conform invenției.To prepare the strains for the production phase, they multiply, then pass on sterile skimmed milk, in their association report from the product according to the invention.

Laptele degresat steril este și mediul protector utilizat pentru ultima fază a procedeului, și anume liofilizarea, Se va obține o cultură pură, polimicrobiană.Sterile skimmed milk is also the protective medium used for the last phase of the process, namely lyophilization. A pure, polymicrobial culture will be obtained.

Intre tulpinile de lactobacili nu s-au observat fenomene de antagonism, numărul de germeni viabili din cultura polimicrobiană fiind cel optim pentru produsul conform invenției.No antagonism phenomena were observed between the strains of lactobacilli, the number of viable germs in the polymicrobial culture being optimal for the product according to the invention.

Cultura polimicrobiană, obținută conform invenției, se coagulează laThe polymicrobial culture, obtained according to the invention, coagulates to

45°C; - 5D°C, după care începe liofilizarea propriu-zisă în vid de 3 torn, timp de 30 h, având ca mediu de protecție lapte degresat steril, conform cerințelor standardizate pentru laptele alimentar Pulberea liofilizată polimicrobiana prezintă următoarlee caracteristici:45 ° C; - 5D ° C, after which the lyophilization begins in a vacuum of 3 lathe, for 30 hours, having as protection medium sterile skimmed milk, according to the standardized requirements for food milk Polymicrobial lyophilised powder has the following characteristics:

- aspect - pulbere liofilizata, lipsita de impurități mecanice, higroscopica.- appearance - lyophilized powder, without mechanical impurities, hygroscopic.

- culoare - alb gălbuie,- color - yellowish white,

- miros - specific,- smell - specific,

- gust - acrișor caracteristic acid,- taste - characteristic sour acid,

- solubilitate - insolubilă în apa. dar se dispersează ușor, formând o dis persie omogenă,- solubility - insoluble in water. but it disperses slightly, forming a homogeneous dispersion,

- pH-ul suspensiei 1% în apa 3.8 .- pH of suspension 1% in water 3.8.

- conținut în clor %/g/g mam 1- Chlorine content% / g / g mamm 1

- conținut în calciu % g/g mm. u.E- calcium content% w / w mm. u.E

- conținut în azot % g/g min -LE- nitrogen content% w / w min -LE

- reziduu prin calcinare ma:< 1 .3- calcination residue ma: <1 .3

- metale grele absent.- heavy metals absent.

- număr de germeni viabili mm. 4 x 10⁷ germem/0.50 gr.- number of viable germs mm. 4 x 10 ⁷ germ / 0.50 gr.

Indicațiile terapeutice ale pm dusului, conform invenției:Therapeutic indications of pm shower according to the invention:

- rectita rădică severa:- severe rootitis:

- rectoragii si eliminări de mmm~- rectifications and deletions of mmm ~

- reglarea tranzitului intestina: s: r. durerilor cu tenesme rectale si a constipațiilor cu fenomene dureroase:- regulation of intestinal transit: s: r. pain with rectal tenesmus and constipation with painful phenomena:

- rectocolite ulcerohemoragice:- ulcerative hemorrhagic rectocolitis:

- boala lui Crohn localizată la colon;- Crohn's disease located in the colon;

- hipomotilitate;- hypomotility;

- constipatie severă:- severe constipation:

- diverticuloza colomca:- dove diverticulosis:

- stenoze benigne si maliqne:- benign and malignant stenoses:

- pancreatite acute, necrotm: operate;- acute pancreatitis, necrotm: operated;

- litiaze biliare cu angiocolita septică;- biliary lithiasis with septic angiocolitis;

- peritomte de diferite etiologn:- peritomites of different etiologn:

- enterocolite cu disbacterii:- enterocolitis with dysbacteria:

- malabsorbtii;- malabsorption;

- refacerea florei microbiene saprofite normale.- restoration of normal saprophytic microbial flora.

Administrarea medicament i mAdministration of the drug and m

RO 112995 Bl conform invenției:According to the invention:

Produsul se administrează per os înainte cu 30 min. de cele trei mese principale, timp de 7 ... 20 zile, depinzând de gravitatea afecțiunii. Produsul se 5 poate administra singur sau asociat cu antibiotice, chimioterapice sau pansamente intestinale. Doza este de 50 ... 100 mg produs conform invenției.The product is administered by bone before 30 min. of the three main meals, for 7 ... 20 days, depending on the severity of the condition. The product may be administered alone or in combination with antibiotics, chemotherapies or intestinal dressings. The dose is 50 ... 100 mg produced according to the invention.

Acțiunea produsului medicamentos apare la dispariția colicilor, normalizarea consistenței și aspectului scaunelor, precum si o mai buna toleranta la unele alimente, care, înainte de tratament nu erau suportate.The action of the medicinal product appears in the disappearance of colic, the normalization of the consistency and appearance of the stools, as well as a better tolerance to some foods, which were not supported before treatment.

S-a urmărit efectul eubioticului in ₍afecțiuni de tip inflamator si degenerativ:The effect of the eubiotic in ₍ inflammatory and degenerative diseases was monitored:

Afecțiunea affection Nr. Nr. Sex Sex Vârsta Age cazuri cases B B F F 40-50 40-50 50-60 50-60 peste 70 over 70 eterocolite cu disbacterii heterocolitis with disbacteria 150 150 79 79 71 71 80 80 50 50 --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------1 -------------------------------------------------- -------------------------------------------------- ----------------------------------------1 insuficiență digestivă enzimatică enzyme digestive insufficiency 50 50 30 30 20 20 48 48 d d boala lui Crohn Crohn's disease 120 120 72 72 48 48 48 48 52 52 20 20 enterocolite ulcerohemoragice ulcerative hemorrhagic enterocolitis 200 two hundred 120 120 80 80 28 28 42 42 1 30 1 30

Diagnosticarea afecțiunilor s-a The diagnosis of the disorders was făcut în urma made behind - examen clinic - clinical exam 30% 30% - examen biochimic - biochemical examination 70% 70% - examen bacteriologic - bacteriological examination 80% 80% - examen imunologic - immunological examination 100% 100% - examen radiologie - radiology examination 70% 70% - examen irigoscopic - irigoscopic examination 100% 100%

Modul de administrareMethod of administration

Afecțiunea affection Nr. Cazuri Nr. Cases Doza Dose Ritm pace Timp Time enterocolite cu disbacterii enterocolitis with dysbacteria 150 150 1 50 mg/zi 1 50 mg / day 50 mg/8h 50 mg / 8h 30 zile 30 days insuficiență digestivă enzimatică enzyme digestive insufficiency 50 50 100 mg/zi 100 mg / day 50 mg/12h 50 mg / 12h 60 zile 60 days boala lui Crohn Crohn's disease 120 120 200 mg/zi 200 mg / day 50 mg/6li 50 mg / 6li oU 11pî oU 11pî enterocolite ulcero-hemoragice ulcer-hemorrhagic enterocolitis 200 two hundred 200 mg/zi 200 mg / day 50 mg/6h 50 mg / 6h 6C zile 6C days

RO 112995 BlRO 112995 Bl

Toleranța la medicamentTolerance to the drug

Afecțiunea affection Nr. cazuri Nr. cases F. Bună F. Hi Bună Hi Satisfacar Satisfacar eterocolite cu disbacterii heterocolitis with disbacteria 150 150 80% 80% 20% 20% insuficiență digestivă enzimatică enzyme digestive insufficiency 50 50 100% 100% boala lui Crohn Crohn's disease 120 120 75% 75% 25% 25% - - enterocolite ulcerohemoragice ulcerative hemorrhagic enterocolitis 200 two hundred 55% 55% 35% 35% 10% 10%

Scheme terapeuticeTherapeutic schemes

Afecțiunea affection Nr. cazuri Nr. cases Monoterapie monotherapy Cloranfenicol chloranphenical Salazapi- rina Salazapi- Rina Neomi- cma Neomi- shirt Metrooi- i ! r j ^;. i iMetro! rj ^; . ii eterocolite cu disbacterii heterocolitis with disbacteria 150 150 100 100 25 25 25 25 insuficiență digestivă enzimatică enzyme digestive insufficiency 50 50 25 25 Ή ΓΖ Ή ΓΖ boala lui Crohn Crohn's disease 120 120 95 95 25 25 - - - - enterocolite ulcerohemoragice ulcerative hemorrhagic enterocolitis 200 two hundred 100 100 50 50 25 25 TR E | TR E |

Evoluția foarte bună în urma tratamentului aplicat pe tip de afecțiuni în raport cu parametrii inițiali:Very good evolution following the treatment applied by type of conditions in relation to the initial parameters:

Afecțiunea affection Nr. cazuri Nr. cases Chimie Chemistry Biochimie Biochemistry Imunologie Immunology Radiologie Radiology Fibroecmm Fibroecmm eterocolite cu disbacterii heterocolitis with disbacteria 150 150 100% 100% 100% 100% 100% 100% ion·- ion·- insuficiență digestivă enzimatică enzyme digestive insufficiency 50 50 100% 100% 80% 80% 50% 50% 100 - 100 - boala lui Crohn Crohn's disease 120 120 75% 75% 75% 75% 80% 80% 75% 75% 50 50 enterocolite ulcerohemoragice ulcerative hemorrhagic enterocolitis 200 two hundred 50% 50% 38% 38% 40% 40% 35% 35% 35^: 35 ^:

In cursul experimentelor clinice s- 45 au constatat următoarele efecte benefice ale produsului, conform invenției.During the clinical experiments, the following beneficial effects of the product were found, according to the invention.

- epitalizarea leziunilor ulcerative în 72% din cazuri;- epitalization of ulcerative lesions in 72% of cases;

rezolvarea rapidă a unor 50 dizbacterioze postoperatorii sau a unor colopatii după tratament prelungit cu antibiotice;the rapid resolution of 50 postoperative dysbacteriosis or colopathies after prolonged treatment with antibiotics;

- îmbunătățire evidentă a apetitului manifestat la 100% din cazuri, cu ameliorare a stării generale a pacientilor si o creștem greutății poderale.- obvious improvement of the appetite manifested in 100% of the cases, with improvement of the general condition of the patients and we increase the potential weight.

- suprimarea zonelor de supratnfecție prin închiderea abceselor criptice;- suppression of over-infection areas by closing the cryptic abscesses;

- ameliorarea tranzitului in toate cazurile;- improving the transit in all cases;

- schimbarea profilului florei bacteriene:- changing the profile of the bacterial flora:

RO 112995 BlRO 112995 Bl

- de asemenea, s-a observat o toleranță foarte bună la medicament.- very good tolerance to the drug was also observed.

Claims

claims

1. Medicinal product for colon therapy, containing Lactobacillus, characterized in that it consists of 0.093650 parts of 4 strains: Lactobacillus acidophylus - LAR, Lactobacillus casei - LC, Lactobacillus plantarum - LPI and Streptococcus lactis - SLR, registered under the numbers 31, 27, 10 and 36 in the collection of the “Biosan” Center (0,5; 0,5; 2,5; 0,5], 40 parts 15 vitamin B _v 10 parts vitamin B ₂ , 100 parts vitamin Βθ, 200 parts calcium pantothenate and 6000 parts L-lysine hydrochloride, the parts being expressed by weight.

Medicinal product according to claim 1, characterized in that the Lactobacillus acido phylus-LAR strain is a nonfiltrating strain, with an acidifying power of 148 ° T and fermenting with maximum yield of raffinose and trehalose.

Medicinal product according to claim 1, characterized in that the Lactobacillus casei strain - LC no. 27 has an acidifying power of 185 ° T and fermentes rhamnose.

Medicinal product according to claim 1, characterized in that the Lactbacillus plantarum LPI no.1O strain coagulates the milk without the elimination of whey, forms a rich deposit on a synthetic medium, has an acidifying power of 150 ° T, ferments xylose.

Medicinal product according to claim 1, characterized in that the Streptococcus lactis SLR strain no. 36 aesculin is fermented.