PT98513A - Processo para a preparacao estereosselectiva de delta-lactonas 5-susbstituidas e de composicoes farmaceuticas que as contem - Google Patents

Description

f

Descrição referente a patente de invenção de HOECHáT AKTIENGtóSEL-L3CHAFT, alemã, industrial e comercial, com sede em D-6230 Frankfurt am Main 80, República Federal Alemã, (inventores* Dr . Peter Hammann, Dr. Susanne Grabley» Dr* Ernold Granzer e Yvonne Romeyke, residentes na Alemanha), para* "PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO ESTEREOS SKLECTIVA DÊ X -LACTONAS 5-SUBSTITUÍDAS B DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE AS CONTÊM".

Descrição A presente invenção refere-se a um processo para a preparação estereosselectiva de £-lactonas a novas X -lactonas 5-substituídas e a novos produtos intermediários, bem corno a sua utilização especialmente como medicamentos com aetividade inibidora da síntese de colesterol, aromas e sabori-zantes. Já foi preparada de forma enantiosselecti-va uma £ -lactona 3R5R 5-substituída, da fórmula Ia

5ia qual .ti1 representa pentilo (llemiet e Ivtiijht, Keterocycles 29» (1989) 639)· A matéria prima era metil-3-oxo~5-Hexenoal, o qual foi reduzido de modo assimétrico com o auxílio de leveduras. 0 rendimento foi de 22^, com uma pureza enantiomérica de 70. O objeeto da presente invençSo é o desenvolvimento de um processo com o qual seja possível preparar todos os estereoisómeros das £-lactonas da fórmula Ia com um alto grau de pureza enantiomérica. Para matéria prima seleccionou -se um estreptenol da fórmula

0 OH

Este composto já foi descrito (Keller--Schierlein, Helvetiea Chimica Acta, 66, (1983), 1253) e pode ser preparado por exemplo por um processo microbiológico por es» treptomicetes (EP-A 90 103 4ll*6| Mitzutani, J* Antibiotics, XLII (1989), 952). A presente invenção refere-se por conseguinte a um processo para a preparação estereosselectiva de 6 --lactonas 3R5R, 3R5S, 3S5S e 3S5R das fórmulas Ia, Ib, Ic ou Id,

OH OH

OH OH

em que Π representa 3

1) nn ^rupo alquilo linear ou ramificado com 3 a 15 átomos cie carbono, 2) um grupo alcenilo linear ou ramificado com 3 a 15 átomos de carbono e 1 a 7 ligaçSes duplas G-C, ou 3) uro grupo CH^OH, caracterizado por a) se transformar um composto da fórmula lia

l) Por reduçSe diastereosselectiva de modo a obter um composto da fórmula Illa ou Illb,

(Illa) (illb) 2) por oxidação regiosselectiva de modo a obter um composto da fórmula Ia ou Tb,

K 3 = ί

e eventualmente 3) hidrogenarem-se as ligaçSes duplas da cadeia alquilénica, ou b) transformar-se um composto da fórmula lia l) por acetalizaçSo de modo a obter um composto da fórmula IVa ou IVb,

2) por oxidaçSo de modo a obter um composto da fórmula V,

CH3 3} por reduçto diastereosselectiva de modo a obter um composto da fórmula IVcf

« h =

5) por reduçío dlastereosselectiva de modo a obter um composto da formula IIIc ou IIIdt

(Illc) (llld), 6) por oxidaçSo regiosseleciiva de modo a obter um composto da fórmula Ic ou Idf

rA 0 0

í, A (Id)

R * 5 =

?i hidrogonaron·** a» iàgaç&o» duplas da ca'.«fia nlqullátiica, ou c) tran*for«ar-ea u» composto da fór«ul* Iat lb# Ic ou Adf «m

qu» uA li rtpraaenta u» grupo alquilo linear ou ramificado cow 3 a 15 atowoa d· carbono 2J representa u» grupo aicenilo linear ou raedfiçado coiu 3 a 15 áto^o» do carbono « 1 a 7 IfgtiçSes dupla» €»c# l) por reecçflo cow n» compoeto da fómul* R'»<v do modo a obter ua eoeroeto da íortrul <*

* d *

em que Iv representa um tjrupo alnuilc coru 1 a 5 átomos de carbono, 2) por cetalizaçSo com acetona ou dimetoxipropano de modo a obter um composto <3a fórmula Via, VXb, VIc ou VId,

(VIb)

(VIc) ΐ

(VId) 3) por oxldap&o com ozono de modo a obter um composto da fór-nula Vila, VIIbf VIIc ou VIIdr

H3G GH3 (Vila) (Vllb)

0

H„e CH« >3

G-R' (Vlld) 4) de modo a obter um composto da fórmula Io, Ib, 1c ou Id em eme R^ representa CH^OH,

Os símbolos 3? e S designam as configurações absolutas nos átomos de carbono, R significa direita (re-tus) e 8 significa esquerda (sinister), lodos os resíduos de alquilo e alcenilo mencionados com mais tíe 3 átomos de carbono podem ser de cadeia linear ou ramificada,

Consideram-se incluídos no objeeto da pre sente invenção também o» compostos de fórmula Ia, Ib, Ic ou Id, com a excepção do composto da formula Ia em que ϊ*Α representa uma cadeia de alquilo com 5 átomos de carbono.

Um outro objecto da presente invento é constituído pelos compostos das fórmulas 11b, Illa, .TIIc ou IIId, que são apropriados como intermediários, $ ainda objecto da presente invenção um processo para a preparação dos compostos Ilb, III.n, Illb, 111c ou llld.

Os compostos das fórmulas Vila, Vllb,

Vllc ou Vlld são apropriados como precursores para a preparação de inibidores da biosíntese do colesterol (US 4 970 313)· São preferidos os compostos das fórmulas Ia a Id em que R representa um alquilo ou alcenilo com 3 a 10 átomos de carbono e em que a cadeia de alcenilo apresenta 1 a 5 duplas ligação C-C,

Dentre estes compostos são ainda especial- » 9 -

, ente preferidos os compostos cias fórmulas la a Xd eti que lv representa alquilo ou alcenilo com 5 átomos de carbono e a cadeia de alcenilo contém uma ou duas duplas ligação C-C,

Os compostos da fórmula lia necessários para a preparação dos compostos das fórmulas Ia a Id podem ser prepa, rados pelo processo divulgado no pedido de Patente Europeia NS. 90 103 411.6 - a que se faz aqui referência expressa. Neste pedido de latente o composto da fórmula lia é produzido num meio de cultura que contém uma fonte de carbono e uma fonte de azoto, bom como os sais inorgânicos habituais, jior un >treptomyces, de preferência pela estirpe DbVI 4356. Em vez da estirpe DSN 4356 pn d em também ser utilizados os respectivos mutantes e variantes desde que sintetizem o referido composto. íí. formação do composto da fórmula lia decorre especialmente bem num meio de cultura que contém farinha de soja e manitol ambos em concentraçães de 0,5 a 6$, de preferência de 1 a 4$, com referência ao peso total do meio de cultura. A fermentação é efec cuada por via aaróbica, ou seja por exemplo por fermentação submersa em balões cónicos em agitador orbital ou em ferrnentadores com agitação, eventual-mente com borbulhamento de ar ou de oxigénio. A fermentação pode ser efectuada numa gama de temperatura desde cerca de 18 a 35° 0, de preferência desde cerca de 28 a 30e C. 0 microorganis-· mo é cultivado sob as condiçães referidas até se atingir um estado estacionário, durante cerca de 60 a 120 horas, de preferên-· cia de 70 a 75 horas. £ vantajoso efectuar a cultura em várias fases, isto é, leva-se a efeito em primeiro lugar uma pré-cultura numa ou em várias fases num meio nutriente e utiliza-se esta pré-cultura para inocular o meio de produção propriamente dito, a cultura principal, por exemplo numa proporção em volume de lílO. A pré-cultura é obtida por exemplo inoculando o micélio csporulado num meio de cultura e deixando crescer durante cerca de 48 n 72 horas. 0 micélio esporulado pode ser obtido deixando crescer a estirpe durante cerca de 7 dias â superfície de uma j bnse nutriente sólida ou líquida, por exemplo levedura-malte-• -agar. * 10 =

0 isolamento do οοωροβίο da fórmula IIa (es-irrptcnol) do caldo de cultura 4 efectuado de acordo com métodos conhecidos tendo em consideração as propriedades químicas, físicas e biológicas do produto· 0 composto da fórmula IIa fica no micélio e no caldo de cultura. Pode ser extraído a partir do caldo de cultura não filtrado com um solvente não rniscível ou pouco rniscível com a água, como clorofórmio ou acetato de etilo, Ima vez que se encontra no micélio apenas uma pequena parte é vantajoso separar o caldo de cultura do micélio, por exemplo por centrifugação ou por filtração, de preferência com adição de um adjuvante de filtração· 0 composto da fórmula IIa pode en tão ser isolado a partir do sobrenadanie ou do filtrado, de modo conveniente a um pH ligeiramente ácido ou neutro, de preferencia a pJ! entre 6 e 7* Para este fim, pode-se usar um solvente orgânico pouco rniscível ou imiscível com a água, especialmen te um hidrocarboneto clorado, como clorofórmio ou cloreto de me tileno, ou um éster, como o acetato de etilo, ou acetona. 0 estreptenol pode ser isolado do caldo de cultura por adsorção numa resina de adsorção comercial, em vez de ser por extracção. Tambér se considera válido secar o conteú do integral do fermentador, por exemplo por secagem por pulveri zação ou por liofilização· Λ fim de isolar o estreptenol puro é possível usar as operaçães habituais, como cromatografia ou filtração por gel· Terificou-se ser particularmer.te vantajoso efec-t-uar uma croma tograf ia através de gel de sílica, utilizando-se como eluente uma mistura de acetato de etilo e hexano numa proporção em volume de por exemplo 1.2» F/in seguida descrevem-se mais em pormenor os processos a), b) e c) que permitem a preparação estereosselecti va das S-lactonas 5-suhatituídtís das fórmulas Ia, Jb, Ic e Id.

Na fase processual al procede-se à complexa-ção cio jrupo p -hidroxi-cetona do composto lia com um ácido de Levis e reduz-se com um alcoxidialquilborano, eventualmente num solvente inerte com éter dietilico ou tetra-hidrofurano e firta^ ] mente reduz-se de forma diastereosselectlva com NaBH^ de modo a = 11

obter ura composto da fórmula Tila.

Na preparação do composto da fórmula 111a procecie-ββ à redução do composto XXa num solvente apropriado, como acetonitrilo, éter ou em misturas de acetonitrilo com ácido acético glacial ou de éter com ácido acético glacial, com KHf|HJj(*lA-e)o de modo ess èereosselect.ivo de modo a

NalíBÇOÁc)^ ou olter um composto da fórmula IIJb, A temperatura de reasção deve situar-se nesta reacçSo entre -70 °C e +4o°C, de preferência entre -70°0 e -2ϋ°υ, u tempo de reacção é de uma a 10 horas, de preferencia de duas a 4 horas, 0 momento em que a reacçSo se pode dar por terminada pode ser determinado por exemplo por cromatografia em camada fina.

Os redutores necessários para estas fas es de reacçSo podem ser adquiridos no mercado ou entSo podem ser preparados de modo fácil por meio de prócersos publicados na literatura. Deste modo, por exemplo o dietil—meioxiborano pode scr preparado a partir de trietilborano e metanol e o NaKB-(ΐτλο)^ a partir de NaBÍI^ e ácido acético glacial.

Para a fase processual a2 procede-se à oxidação do composto IXIa ou IXXb da fase processual al com um complexo de ruténio (Murahasi, Tetrahedron Lett., 22, (1981), .1005), especialmente com (PPh„)«JdiCln, num solvente orgânico como por exemplo CHCl^, CH^Glp, acetona ou benzeno de modo re^iosselectivo de modo a obter uma 6-lactona da fórmula Ia ou Xb ou à oxidação num catalisador de platina ou de paládio na presença de oxigénio de acordo com métodos conhecidos, A reacção pode ser efectuada com quantidades equimolares ou eventualmente na presença de oxidantes como por exemplo n-metilmor-folina-N-óxid© também com quantidades catalíticas do complexo de ruténio.

As temperaturas de reacçSo situam-se nesta fase entre -70°C e +70°C, de preferência, quando se usa um solvente, entre 0 ponto de fusão e o ponto de ebulição do solvente especialmente entre -20°C e +3G°C, õs tempos de reacção situam--se entre 5 e 6O horas, de preferência entre 20 e 40 horas, 0 momento em que a reacção se pode dar por terminada pode ser 12 *

deteriainado por exemplo por cxoc,&t ogra fia eia camada tina»

Na fase processual «3 procede-** a transfor-maçSo dos compostos Ia ou Ib core resíduos tle alcenilo lineare* ou ramificados eventuclraenie mire solvente inerte coroo por exemplo metanol, etsnol, isopropanol ou acetato da etilo ou numa mistura dantes solventes ou nume mistura aquosa destes solventes, na presença de um catalisador de ftidrogenação adequado de acordo coro métodos conhecidos da literatura com hidrogénio, no uompo^to correspondente du fórmula ia ou 1b core resíduos de ai-iiiio lineares ou raiiif içados. dito catalisadores de hi irogena-ç3o adequados por exemplo elementos do grupo ò, como a platina, α ’ i-ádío ou tambói.i o níquel, norn-ulmente depositados sobre un .uporte por exemplo de carvão activo, de oióxido de silício ou de óxido de alumínio com o fim de aumentar n superfície reactl-va. "egvtndo o catalisador usado a reaeçUo pode > r «feetuada cara ou sem uma sobrepressHo de hidrogénio, por exemplo até 1 .atmosfera* As tempera curas de reacçfo situam-se tmtre d° C e 4θ° Ç, de preíerênei a e temperatura ambiente* Os te :no« de reaeçffo dependera d*#: quantidade* em jogo e da concentração do composto que se pretende redusrir, ι era a fase processual bl procede-se a fcrans f ír.w.jóo do composto TI a em quantidade* equimolares ou até um excesso de 50 vexes de ura álcool como por exemplo metanol, sta-not ou isopropauol na presença de uma quantidade catalítica de um ácido de L#w:,s num composto da fórmula TVa ou IVb, a reacçSn rode também ser eventuairaente ©fectuada num solvente com© cloro T trmlo, cloreto o> me ti leno, ΤΚΓ, acetcto de etilo ou dioxsno. 0 ácido de Lenis pode ser un hu.logeneto de cobre, de ferro ou do lítio, especialmente CuGl,,, Fetl.j ou LiBr. A concentração do ácido de Lewie - em rela-qf! i ó do composto da forrei»la II a - deve ser de 0,1 a yf era peso, de preferencie de 0,1 a V>. em peso* as temperaturas de reacçfio ' situai-se nesta fase entre -h0e C e +1· '° çt especialraente en-fcre 0 e 30 0, de preferencia quando se usa um solvente *n- • tre o ponto de fusão e o nonto de ebulição do solvente, ospeei-d. \ mente sntre 0° C e 3υ° U. us tempos de reacçSo situam-se entre * 13 *

'1 e Ιώί' aiinutos, tíe preferência entre 5 ε 60 minutos. i* .lomento pn que a reacçgo se pode dar por terminada pode ser determinado por exemplo por cr o rn a to. *r af i a em camada fina.

Para a fase processual b2 deixa-se reagir o composto da fórmula IYa em quantidades equimolares ou com um ex cesso de até 30 vezes, eventualmente num solvente inerte como clorofórmio, tetracloreto de carbono, cloreto de metileno ou he xano com um oxidante como ciorocromato de piridinio, dicromato de piridxnio, rutenato de tetrapropllamónio ou lilibO na presença de anidrido acético, cloreto de oxaiilo ou anidrido trifluoroa-eótico até dar por terminnca a reacção, as ter «pera turas dc reacção situam-se nesta fase entre -70° C e +100° 0, de preferencia quando se utilizo um solvente entre o ponto de fusão e o ponto de ebulição do sol vente, especialmente entre -70o C e *40° C. Os tempos de reac-ção situam-se entre uma e l8o horas, de preferência entre uma e 48 horas e de raodo especialmente preferido entre uma e 2ií horas. 0 momento em que a reacção se pode dar por terminada pode ser determinado por exemplo por croma tografia em camada fina (COF). ns oxidantes para a fase processual b2 são oxidaates comerciais.

Para a fase processual b3 procede-se a redução estereosselectiva do conposto da fórmula V da fase processual b2 com um borato alcalino ou alcalino-terroso, por exemplo com NaBK^ num solvente, de preferência num álcool como me-cm:ol, etanol ou isopropanol, ou num éter como tetra-hidrofura-no, fSo redutores especialmente preferidos os boranatos de al-Cuilo, co«ro por exemplo LS-Selectride^(AlddLch, Steinhelm, kfa) . '-9 temperaturas de reacçfío situam-se nesta fase entre -70° C e +10'° C, de preferência entre o ponto de fu são e o ponto de ebulição do solvente, especialmente entre -70° C e ι-IO0 C, 0· tempos de reacçSo sii-uam-se entre uma e 60 horas, de preferência entre 5 e 20 horas. 0 momento em que a reacção • se pode dar por terminada pode ser determinado por exemplo por *14*

nrr r f ;; .-roce ^sunl In foz-se reagir o composto da fórmula IVe com unia tiuantidade equimolar ou com um excesso de até 50 vezes de umn mistura de álcool-água, especial jonte uma mistura de isopropanol-água9 eventualmente num solven te inerte como por exemplo clorofórmio, cloreto de metileno, ΪΙΙΓ, acetato de etilo ou dioxaro, na presença de uma quantidade catalítica de um ácido de J ewis ate terminar a reacção. 0 ácido de Lewis pode ser por exemplo um halegeneto de cobre, de ferro ou de lítio, especialmente CuCl^, PeCl^ ou LiBr. A concentração do ácido de Ouvis - em rela-yuo coai a do composto da fórmula IVc - é de 0,1 a 5% em peso, de preferencia de 0,1 a em peso. As temperaturas de reacção situam-se nesta fase entre ~A0° C e ' 100° C, especialmente entre 0° C e 30® C, de preferência no caso de se usar xim solvente entre o ponto de fusão e o ponto de ebulição do solvente, es-peciaimente entre 0® 0 e 30° C. Ha tempos de reacção situam-se entre 1 e 180 minutos, de preferência entre 5 e 60 minutos, 0 momento om que a reacção se pode dar por terminada pode ser determinado por exemplo por ciumatografia em camada fina.

Para a fase processual b5 procede-se de modo análogo ao da fase -processual al anteriormente descrita, leduz--se de modo diastereosselectivo o composto da fórmula Ilb com uí nlcoxidialouilborano e NaDHj^ de modo a obter um compoato da fórmula IIIc ou com NaHB(OAc)^ ou ΝΗ^ΗΒ(θΑο)^ de modo a obter um composto da fórmula Illd.

Na. fase processual b6 procede-se de modo aná logo no da fase processual a2 anteriormente descrita. Oxida-se o composto da fórmula TIJc ou Illd na presença de um complexo de ruténio de modo regioespecífico de modo a obter uma 4-lactona da fórmula Ic ou Id. iva fase processual b7 , rocede-so de modo análogo ao da fase processual a3 anteriormente descrita. Faz-se reagir o composto da fórmula Ic ou Id com um resíduo de alceni-lo de cadeia linear ou ramificada conforme descrito na fase processual a3 com hidrogénio de modo a obter o composto correspondente do fórmula Ic ou Id com u resíduo de alquilo de cadeia * 15 *

linear ou ramificada.

Na fase processual cl) procede-se a esterifi w 1 cagão dos conposios Ia, Ib, Ic ou Id em qus L· representa um grupo alquilo ou alcenilo de cadeia linear ou ra.iificatia Com 3 a 15 átomos de carbono com um álcool na presença de hidreto de sódio de :odo a obter os compoatos correspondentes das fórmulas

Vn, Vb, Vc ou Vd.

As temperaturas de reacção situam-se nesta fase entre o ponto de fusão e o ponto de ebulição do solvente, especialmente entre -20° C e +30° C. Os tempos de reacçâo situara-se entre 3 e 10 hoi’as, 0 momento era que a reacçâo se pode ar i-or terminada pode ser determinado por exemplo por eromato-grafia em camada fina (cor).

Na fase processual c2) procede-se a cetalizja ção dos compostos das fórmulas Va, Vb, Vc ou Vd da faea processual 1 com acetona ou dimetoxipropano na presença de cloreto de zinco de modo a obter os compostos correspondentes das fórmulas Via, VIb, VIc ou VId.

As temperaturas de reacçâo situam-se nesta fase entre 20° C e 70° C. Os tempos de reacçâo situam-se entre 5 e 60 horas, de preferência entre e 20 horas.

Na fase processual c3) procede-se ao encurtamento da cadeia lateral de alquilo dos composto» Via, Vlb, VIc ou VId por ozonólise e adição de boro-hidreto de sódio ao grupo me til-hldroxi. A ozonólise é efectuada de acordo com método? conhecidos (Crganikum, 14* edição, 1975» pág. 295t VEB-Ver-lag.

Os compostos das fórmulas Ia, Ib, Ic ou Id em que representa um grupo metil-hidroxi são obtidos a partir dos compostos correspondentes Vila, Vllb, VIIc e Vlld por hidrólise ácida dos grupos proteetores* Bsta operação é efectua da por exemplo com ácido trifluoroacético num solvente inerte. O prolongamento da cadeia lateral de alquilo • R é efechiado a partir do composto da fórmula lia de acordo t • com métodos conhecidos da literatura. 0 prolongamento da cadeia = ló -

$ víccfcti^do por exemplo por ozonolise do '-edo a obter um aldeído seguida de carbonil-olefinação, por exemplo pela reacção de •ittig (Organikum, VP-B-Verlag, 1975» págs. 295 e ^-3¾). A purificação, o isolamento e o processamento final das substâncias obtidas são efectuados de acordo com rétodos conhecidosj por exemplo é possível purificar os produtos da reacção por cromatografia através de uma fase estacionária polar como gel de sílica ou Sephndex^^ LH 20 com solventes como álcoois inferiores, por exemplo metanol, como clorofórmio, dicloromeiano ou acetato de etilo ou misturas metanol/clorofór-: do ou acetato de etilo/hexano, mas também por métodos extracti. vos corno por exemplo extracção líquido/líçuido ou extracção só-lido/líquido.

Cs compostos do. fórmula X e os seus sois fi-53ologicament· aceitáveis são apropriados para a utilização como medicamentos em virtude das suas propriedades farmacológicas valiosas.

Por conseguinte consideram—se abrangida» pelo âmbito da presente invenção as contposiçães farmacêuticas que contêm pelo menos um composto das fórmulas Ia, Tb, Xc ou Id. Λ» composiçSes farmacêuticas são apropriadas ris preferência para a profilaxia e/ou a terapia de perturbações do metabolismo do colesterol e das substâncias aparentadas com o colesterol.

As composições farmacêuticas da presente invenção são em geral administradas por via oral ou parentérica, .mas também é possível em princípio a aplicação rectal. São forcas galénicas de apresentação apropriadas sólidas ou líquidas por exemplo grânulos, vós, comprimidos, drapeias, (micro)-eapsjT ias, pastilhas, xaropes, emulsões, suspensões, aerossóis, gotas ou soluções injectáveis sob a forma de ampolas bem como prepara dos com libertação da substância activa retardada, em cuja preparação se podem utilizar substâncias veiculares e aditivos habituais e/ou adjuvantes como desintegrantes, agloinerantes, revestimentos, dilatadores, deslizantes ou lubrificantes, aromati zantes, edulcorantes ou solubilizantes. Como substâncias veicu-. lares e adjuvantes mais correntemente utilizados podem referir-* -se carbonato de magnésio, dióxido de titânio, lactose, manitol * 17 -

e outros açúcares, talco, caseína, gelatina, amido, vitaminas, celulose e derivados, óleos de origem vegetal e animal, polie-tilenoglicóia e solventes, como por exemplo água estéril, álcoois, glicerina e poliálcoois.

De preferência as composiçSes farmacêuticas sSo preparadas e administradas em unidades de dosagem, nas quais cada unidade contém como ingrediente activo uma dose determinada de pelo menos um dos compostos das fórmulas Xa, Ib,

Ic ou Xd. Nas unidades de dosagem sólidas, como comprimidos, cápsulas e supositórios, esta dose pode ser até cerca de 500 mg, de preferência no entanto de cerca de 50 a 300 mg, e nas soluçSes injactáveis sob a forma de ampolas até cerca de 150 mg, de preferência no entanto de cerca de 10 até cerca de 100 mg.

Para o tratamento de pacientes em estado de vigília sSo indicadas - de acordo com a actividade do composto da fórmula Xa, Xb, Xc ou Xd em seres humanos - doses diárias de cerca de 20 a 500 mg de substância activa, de preferência cerca de 50 a 300 mg, para administraçSo oral e de cerca de 5 a 300 mg, de preferência cerca de 10 a 100, para administraçSo por via intravenosa. Em certas circunstâncias podem no entanto administrar-se doses diárias mais elevadas ou mais baixas. A aç ministraçSo da dose diária pode ser feita numa única vez sob a forma de uma única unidade de dosagem ou entSo em várias unidades de dosagem mais pequenas ou também era doses parciais tomadas em várias vezes a intervalos regulares.

As composiçães farmacêuticas da presente invenção são preparadas por incorporaçSo numa forma ou em formas de apresentaçSo adequadas de pelo menos um composto da fórmula Ia, Ib, Ic ou Xd em conjunto com substâncias veiculares habituais bem como eventualmente com aditivos e/ou adjuvantes.

Os compostos da fórmula Xa apresentam uma actividade muito elevada como inibidor da biossíntese do colesterol. Estes compostos podem por conseguinte ser utilizados como redutores dos lípidos. Em virtude das suas propriedades farmacológicas os compostos da fórmula Xa são adequados para o trji = 18 = tamento e para a profilaxia das perturbaçSes do metabolismo do colesterol e das substâncias aparentadas ao colesterol*

Para além disso os compostos das fórmulas Ia, Ib, Ic e Id podem ser utilizados como aromatizantes e como fragâncias.

Os exemplos que se seguem destinam-se a elu cidar mais completamente a presente invenção*

Todos os compostos obtidos nos exemplos que se seguem foram caracterizados por meio de analises de ^H-NMR e/ou de ^C-NMR e/ou de IV e/ou análise elementar de C e H e/ou espectro de maesa*

Preparação do composto da fórmula II& a) PreparaçSo de uma suapensSo de esporos da estirps produtora DMS 4356* Inocularam-se com a sstirps 100 ml de meio de fer mentaçSo (4 g de extracto de levedura, 10 g de extracto de malte, 4 g de glucose, 1 1 de água da torneira, valor do pH antes da estsrilizaçSo 7,3} num balSo de Erlenmeyer de 500 ml e incubou-se durante J2 horas a 27° C e a 120 rpm num agitador orbital* Em seguida distribuiram-se de modo unifor me 20 ml do caldo de cultura num balSo de Erlenmeyer de 500 ml cem uma base nutriente sólida da composiç&o anterior mente definida a que se adicionaram 20 g de agar-agar/l para solidificaçSo, e decantou-se* Incubaram-se as culturas durante 10 a 14 dias a 27°C. Após este tempo arrastaram-se os esporos obtidos num balSo com 500 ml de água desionizada contendo uma gota de um agente tensio-activo n&o iónico, retiraram-se do balSo e utilizaram-se imediatamente ou guar daram-ββ a -22°C. b) PreparaçSo de uma cultura ou précultura de uma estirpe produtora em balSes de Erlenmeyer* Inoculou-se um balSo de Erlenmeyer de 500 ml com 100 ml de um meio de fermentaçfo constituído por 2% de farinha de carne, 10$> de extracto de malte, 1$ de carbonato de cálcio e água até 100$ (pH 7»2 antes de esterilizar em autoclave) com uma cul. tura obtida em tubos com meio em cunha ou com 0,2 ml de uma suspensSo de esporos e incubou-se num agitador orbital a * 19 «

120 rpm e a 27°C, A produção máxima cia substancia pretendida foi obtida após f2 horas. Inocularam-se fermentadores de 10 e de 100 1 com JjL de uma cultura submersa de 48 dias de idade no mesmo meio de fermentação, c) lreparação do composto da fórmula lia:

Garregou-se um fermentador de 10 1 com a seguinte composição: íeio de cultura: Tempo de incubação: Temperatura de inctibaçãoí Velocidade da agitação: Arejamento 2% de manitol 2'l de farinha de soja PH 7,2 72 horasPc 250 rpm 4 1 de ar/min i/or meio de adiç8es repetidas de algumas gotas de solução etanólxca de um poliol foi possível reduzir a formação de espuma. 0 máximo de produção foi alcançado após cerca de 72 horas (pií = 5*3)· Os rendimentos situa-rani-se em cerca de 20 mg/l.

d) Isolamento do composto da fórmula II após a fermentação da estirpe produtora filtrou-se o caldo de fermentação depois de se ter adicionado de celite para adjuvante de filtração, tóxtraiu-se o micllio com acetato de etilo e evaporou-se a fase orgânica à secura, .--qcou--se o filtrado da cultura e extraiu-se o resíduo com acetato de etilo· lurificou-se o produto bruto por cromatografia numa coluna de gel de sílica (gel de sílica 60, *acborey--Xagel) com acetato de etilo/hexano (l*2t v*v).

Exemplo 1 (h5R# 8K)-lf3*5-Tri-hidroxi-3-deceno (composto 3?)

Agitou-se 1 g (5*4 mmol) do composto da fór- 1 *n.ilc lia, em que R representa 2-penteno, em 50 ml de tetra-hi-drofurano com 8,6 ml de uma solução 1 molar de trietilborano em tetra-hidrofuraiio (8,6 mol) durante 15 minutos a temperatura * ambiente. pos nrrefecer r.te -70°*J adicf.onaram-ae 4,3 ml de *a 20 »

- metanol e 0,4 g (10,7 mmol) de boro-hidreio de sódio e agitou--se a mistura reaccional mais 3 h a mesma temperatura. Para isolamento adicionam-se 30 ml de uma solução saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e extraiu-se tres vezes com 100 ml de cada vez de acetato de etilo. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio, Após filtração, eliminou-se o solvente por destilação sob vácuo e obteve-se um produto oleoso. Tratou—se este produto cinco vezes com metanol e destilou-se sob vácuo a fim de eliminar o excesso de borano. Purificou-se o resíduo restante através de gel de sílica com acetona-hexano (2i3/ e obteve-se o com posto 3a num rendimento de 0,82 g (8Γ ) sob a fornia de um óleo incolor,

Rf ** 0,40 lCH2Cl2tCH?OlV$*l)i /XJ'g0e + ^° (c*l, CHgOlg) ;

Análise para (188,27): calculados C 63,8* H 10,7* determinado* C 63,9f H 10,7*

Sl-KPR (400 .Hz) ζ - 1,5 - 1,7 (m, d-2, H-4, II-6, H-10)i 2,1 (m, 211, 11-7) í 3,75 (m, 3Π, Ιϊ-l, ÍI-5); 4,1 (m, ia, H-3) ? 5,45 (m, 2H, H-8, II-9)| i3C-M (100 MHz) £- 17,8 (t-io); 28,4 (C-?b 37,7 (C-6)j 39,0 (0-2)í 43,0 (C-4)j 60,4 (C-l); 71,5 (0-5)? 72,0 (0-3)} 125,35 (0-9)? 130,7 (0-8); IV (0IIC13) m * 3200 - 3600 (OH), bxemplo 2 { r)-Ç 3&»53,8Γ )-1,3,5-Tri-hic’roxi-8-deceno (composto 3b) Λ uma suspensão de 9&ò mg (23,8 mmol) de bo-ro-liidreto de sódio em 25 ml de tetra-hidrofurano adicionaram-se gota a gota a -70° 0 num período de 1G min 4,3 ml de ácido acéti co glaciai e agitou-se durante duas horas à mesma temperatura, Após adição de L e (5,½ m r>ol) do composto da fórmula lia, em que representa 2-penteno, cu 5 ml ríe tetra-hidrofureno adiciona-rrr-se gota a gota num período de 30 min mais 20 ml de ácido :,cético glacial e agitou-se a mistura reaccional a mesma temperatura durante riais duas horas, úepois de se ter verificado por CGF que a • reneção estava completa, tratou-se a iiistura com 10 ml de água 21 - 4

e 30 ml de urna solução saturada de bidrogenocorbonato de pódio e ertraiu-se três vezes com 100 ml de cada vez de ocetato de ettlo. Lavou-se a fase orgânica t-rêo vezes com 50 ml de água e;n cada lavagem e em seguida secou-se sobre sulfato de sódio4 Anós eliminação do solvente por destilação sob vácuo purificou-se o resíduo por cromato,grafia através de gel de sílica com acetona íhexano (2i3) e obteve-se o composto 3b com um rendimento de 78% (0,8 g). Aí* - 3»37 (OH*Cl^íCHo0H/9;l) S Γ^TV·” *9,5° (c~l, OIMÍl.J; .aiáiise para C10H20Ú3 (188,27); calculado; C 63,8} Η 1 ,7; determinado; 0 63,7» d 1C ,5j ^H-NiiR (400 mz) £* 1,65 - 1,85 (m, 9H, H-2, H-4, H-6, F-10)j 2,1 (m, 2H, H-7) 5 3,9 (m, 3Π, H-l) ,· 4,0 (m, III, íí-5); 4,2 (m, 1H, H-3)í 3,45 (ηι, 2H, H-8, li-q) j 13C-KíR (100 MHz) £ = 17,9 (c-io)í 29,0 (0-7)} 37,0 (c-6)j 38,3 (0-2)j 42,6 (c-4)5 61,9 (o-l)? 69,15 (0-5)J 69,8 (0-3)} 125,6 (0-9)i 130,7 (0.8)5 IV ÍCHCl^) m « 3200 - 360c (oh). xeniplo 3 (* )-(3R,5ft,8E)-3-Hidroxi-5-dec-8-enolido (composto la)

Biseolveram-se 300 mg (l,59 mmol) do compos to 3a de acordo com o Kxemplo 1 em 15 ml de benzeno e trataram--se com 1,39 β (1,59 π»*’·οΐ) de cloreto de tris-(trifenilfosfina)·· -ruténio (li)· Agitou-se a mistura durante 3 dias à temperatura ambiente. Após eliminação do benzer o por destilação sob vácuo dissolveu-se β resíduo escuro com aspecto de chá em 2 ml de ace tona e puriíUcou-se em gel da sílica com acetato de etilo/hexa-no (ljl). 0 composto foi obtido sob a forma de um óleo incolor num rendimento de 68> (200 mg).

Rf - 0,51 (Acetato de etilo;hexano/3*l)5 r^JV^.s0 (o- -0,83, CÍI2C12) 1

Análise para (18*1,2*0* calculado; C 65,25 H 3,75; determinado* C 65,4j H 8,5?

ΧΗ-ΝΜΣΙ (**00 ΗΗζ) 1,6¾ (m, 4Η, J=5,5 Hz, J01,5 Hz, H-10, 11-¾)} 1*78 (ra, 2H, Η-Λ, H-6)| 1,95 (m, 1H, H-6), 2,15 («, 211 # H-7)í 2,61 (d,d, 1H, J=17 Hz, J=2,7 Hz, H-2ax)} 2,72 (d,d, J=17 Hz, J*kf7 HZ, H-2eq)} kt% (mf 1H, H-3*q)| M (m, 1H, H-5ax)} 5,¾ («, 1H, H-8)| 5^5 («*, 1», H-9) í 130-1?ΠΠ (100 MHz) 17,8 (C-10)j 27,8 (C-7)} 35,¾ (C-4)* 36,1 (0-6) * 38,7 (C-2) ϊ 62,7 (C-3) } 75,2 (C-5h 126,1 (C-9)i 129,75 (0-8)} 170,¾ (C-l)j IV (CHG13) m - 3200 - 3600 (OH), 17*0 (Lacton)

Exemplo ¾ (-)«(3R,5S,8E)-3-Hidroxi-5-dec-8-enolido (composto lb)

Prepararam-se 300 mg (l,59 mmol) do composto 3b do Exemplo 2 nas mesmas condiç5es do Exemplo 3·

Obteve—se a lactona (composto lb) numa quan tidade de 220 mg (75$) sob a forma de um óleo incolor.

Rf 8 0,59 (Acetato de etilo*hexano/3*l)} 20~ -2^,17° (c«0,l46, CH2C12)|

Análise para ^10^2o°3 (^,2¾) i calculado* C 65,2} H 8,75» determinados C 65,6} H 8,8}

Exemplo 5 (+)-(3R,5S)-3-Hidroxi-5-decanolido (composto 6a)

Dissolveram-se 200 mg (l,l mmol) do composto la de acordo com o Exemplo 3 em 20 ml de acetato de etilo, trataram-se com 30 mg de Pd/carvão activo e hidrogensram-se à pressão atmosférica e à temperatura ambiente durante 8 horas. Após filtração lavou-se o catalisador com 20 ml de acetato de etilo} destilou-se a solução sob vácuo e purificou-se o resíduo resultante com acetato de etilo/hexano (l*l) em gel de sílica. Obtiveram-se 190 mg (94$) do produto (composto 6a) sob a forma de um óleo ineolor.

Rf * 0,5¾ (Acetato de etilo:hexano/3*l)} o** +35,07° (c= =1,5, ch2ci2)j

Análise para (l86,25)í calculado* C 64,5} H 9,7} determinado* C 64,9} H 8,1} = 23 =

H-NMR (360 MHz CDC13) S * 0,9 (t, 3H, J*6,9 Hz, H-IO), 1,2 - 1,74 (m, 4u, 8H, H-6, H-8, H-9), 1,98 (d,d,d,d, 1H, J=l4,4 Hz, J*4,0 Hz, J*2,9 Hz, J*l,7 Hz, H-4eq), 2,65 (d,dfd, ih, J*l7,6 Hz, J*3,7 Hz, J*i,7 Hz, H-2eq), 2,72 (d,d, 1H, J*i7,8 Hz, J*5,i Hz, H-2ax), 4,38 (m, 1H, H-3eq), 4,72 (m, 1H, H-5)I 1 ^ C-NJ1R (90,55 mz)S* 13,9 (C-10, 22,5 (C-9), 24,5 (C-7), 31,5 (c-8)$ 35,5 (c-6), 36,0 (c-4), 38,6 (c-2), 62,8 (c-3), 75,9 (C-5)| 170,6 (C-l), IV (CHC13) rn * 3200 - 3600 (oh), 1740 (lactona)

Exemplo 6 (—)—(3R,5S)—3-Hidroxi—5-decanolido (composto 6b)

Hidrogenaram-se e purificaram-se 200 mg (l,l mmol) do composto lb do Exemplo 4 conforme descrito no Exemplo 5. A lactona (composto 6b) precipitou sob a forma de um óleo incolor num rendimento de I85 mg (92$)

Rf a 0,53 (Acetato de etilo*hexano/3*l) J /©cT^O* -39,25° (c*0,91, CH2C12)j

Análise para C^HggO^ (l86,25)i calculado* C 64,5J H9,7í determinado* C 64,5j H8,5, 1H-NMR (400 MHz) Ç m 0,9 (t, 3H, J*6,9 Hz, H-ίο) , 1,32 (m, 4H, H-8, H-9)f 1,39 (», 1H, H-7)* 1*^9 (», 1H, H-7)| 1,57 (m, 1H, H-4eq)| 1,63 (», 1H, H-6), 1,73 (», 1H, H-6), 2,25 (d,d,d,d, 1Η, J«13,7 Hz, «1=5,5 Hz, J*3,0 Hz, J**l,4 Hz, H-4eq)} 2,45 (d,d, 1H, J*17,l Hz, J=7,9 Hz, H-2ax), 2,89 (d,d,d, 1Η, J*17,l Hz, J*5,9 Hz, J*l,4 Hz, H-2eq), 4,2 (m, 2H, H-3, H-5), 13C-NMR (99,55 MHz, C0C13) & a 13*9 (C-10), 22,5 (C-9), 24,5 (0-7)? 31,5 (C-8), 35,6 (C-6), 37,9 (c-4), 39,5 (C-2), 63,9 (C-3), 77,3 (C-5), 170,7 (C-l) 24 *

Exemplo 7 (+)-(2R,48)-4-Hxdroxi-2-metoxi~2~(3L-pentenil)-tetra-hidropira-no (composto 4a) (-)_(2R14s)-4-Hidroxi-2-metoxi-2-(3EUpentenll)-tetra-hidropira-no (composto 4b)

Agitaram-se 20 g (54 mmol) do composto da fórmula lia, em que R1 representa 2-penteno, em 500 ml de metanol cora 600 mg de FeCl^ durante 15 min à temperatura ambiente. Ajustou-se em seguida o valor do pH da mistura reaccional com uma solução de hidrogenoearbonato de sódio a pH 7 e concentrou-se, ior eromatografia era gel de sílica com acetato de etilo/he-xano/trietilamina (l*4*0,5) obteve-se o composto 4a a 65$ (7 g) e o composto 4b a 5$ (0*538 g).

Composto 4ai Hf * 0,36 (Acetato de et±lo*hexano/l*2)* + 82,6° (c*2,8, CílgClg) $

Análise para (200,28)* calculado* C 66,0* H 10,1* determinado* C 65*8* H 10,4* Composto 4b* Hf* 0,60 (Acetato de etiloshexnno/ls2)* £ -66,0° (c*3,0, CH2C12)*

Análise para σχιΗ2ο°3 (200,28)* calculados C 66,0* H 10,1* determinado* C 66,0* H 10,7*

Exemplo 8 (+)-(2S)—2—Metoxi-2—(3E-pentenil)-4-tetra-hidrapirona (composto 5)

Agitaram-se 7 g (32,7 mmol) do composto 4a do Exemplo 7 com 800 mg (2,3 mmol) de rutenato de tetrapropila-mónio (TFAP) e 8 g (68,3 mmol) de N-metilmorfolina-N-óxido em 200 ml de CH2C12 durante 8 horas. Diluiu-se a mistura reaccional com 300 ml de CílgClg e lavou-se duas vezes com 400 ml de uma solução de hidrogenossulfito de sódio a 10$ e cinco vezes com água. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio, fil-trou-se atra vós de celite e concentrou-se, 0 composto 5 precipjL tou com um rendimento de 5*8 g (89,6 $), • Rf - 0,73 (Acetato de etilo*hexano/3tl)í 20* +75*9° (c* • -1,3, CH2C12), = 25 =

Análise para C^gOj (19S,26)i calculado* C 66,65* H 9,15* determinado* C 66,8 * H 9»4*

Exemplo 9 (+ )-(3S, 4r) -4-Hidroxi-2-metoxi-2-(3E-pentenil)~tetra-hidropira-no (composto 4c)

Dissolveram-se 5,8 g (29,3 mmol) do composto 5 do Exemplo 8 a -70° C em 350 ml de isopropanol, adicionara.n- se 2,2 S (5,2 mmol) de boro-hidreto de sódio e agitou-se a esta temperatura durante 5 horas. A fim de destruir o excesso de NaBH^ adicionaram-se 10 ml de acetona seca sobre óxido de alumínio e agitou-se durante 15 min a temperatura ambiente. Separou-se o solvente da mistura por destilação sob vácuo* purifi co 11-se o resíduo resultante com acetato de etilo/hexano/trie-tiiaraina (l*4*0,5) em gel de sílica e obtiveram-se 4,8 g (82$) do composto 4e e 0,54 g (9,2$) do composto 4a (ver Exemplo 7)· Quando se usou LS-Selectride em vez de NaBH^ obteve-se apenas 4c.

Composto 4et Hf * 0,60 (Acetato de etiloshexano/ 1*2)* r«_7V *6k,5° (cl,5, oh2ci2)í

Análise para C11H20°3 (200»2δ)* calculado* C 66,0* H 10,1* determinado* C 66,0* H 10,2*

Exemplo 10 {_)-.(3R,8E)-1,3-Di-hidroxi-8-deceno-5-ona (composto 2b)

Dissolveram-se 4,6 g (23,0 mmol) do composto 4c do Exemplo 9 com 45 mg de FeCl^ em 45 ml de isopropanol · 45 ml de água e agitou-se durante 30 min à temperatura ambiente. Ajustou-se o valor do pH da mistura reaccional a pH 7*0 a 8 com solução de hidrogenocarbonato de sódio e concentrou-se a mistura num evaporador rotativo até a consistência de um xarope. Eia solveu-se o resíduo resultante em 30 ml de CHgClg e filtrou-se; rendimento 3,9 g (92$) do composto 2b.

Rf * 0,48 (Acetato de etiloihexano/smetanol 2:1*0,l) * / eij ^q= -23° (cal, CH2C12)*

Análise para (186,25)1 calculado* C 64,5* H 9,7* determinado* C 64,2* H 10,0* = 2 6 a

hí-H-iH (300 ílHz) 1,6 (m, 4H, H-2, H-lo)| 2,25 (m, 1H, H-T)j 2,5 (t, 1H, J=*7 Hz, H-6) ; 2,6 (d, 1H, J*6,5 Hz, H-4)) 3,8 (t, 2H, J-5 Hz)) 4,3 (m, 1H, H-3); 5,^5 (m, 2H, H-8, H-9)) 13G-NwR (90,53 Miz) £* 17,7 (C-10)j 37,9 (C-2) % 43,3 (0-6)) 49,3 (0-4)* 60,7 (c-lh 67,4 (C-3b 126,1 (C-9)) 129,2 (0-8)» 211,2 (C-5)j

Exemplo 11 (-)-(3R*5S,8B)-l,3»5-Tri-hidroxi-8-deceno (compoeto 3c)

Agitou-se 1 g (5,4 mmol) do composto 2b do Exemplo 10 em 50 ml de tetra-hidrofurano com 8,6 ml de uma solu ção 1 molar de trietilborano em tetra-hidrofurano (8,6 mmol) du rante 15 min à temperatura ambiente· Âpós arrefecimento a -70°C adicionaram-se 4,3 ml de metanol e 0,4 g (10,7 mmol) de boro-há. dreto de sodio e agitou-se a mistura reaccional mais 3 horas à mesma temperatura. Para purificação adicionaram-se 30 ml de uma solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio e extraiu—se três vezes com 100 ml de cada vez de acetato de etilo. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio· Após filtração removeu--se o solvente por destilação sob vácuo, obtendo-se um produto oleoso· Tratou-se o produto obtido cinco vezes com metanol e destilou-se sob vácuo. Purificou-se o resíduo resultante em gel de sílica com acetona:hexano (2*3), obtendo-se o produto 3c com um rendimento de 0,84 g (83$) sob a forma de um óleo incolor.

Rf - 0,40 (CH2C12*CH30H/ 9*1)) ZXT^o' <c=1» CH2C12>*

Análise para C Η O (188,27)* calculado* 0 63,8; H 10,7) determinado* C 63,5) H 10,9)

Os dados espectroscópicos são Idênticos aos do composto 3» do Exemplo 1.

Exemplo 12 (-)-(3R,5R,8E)-l,3,5-Tri-hidroxi-8-deceno (composto 3d) A uma suspensão de 900 mg (23,8 mmol) de boro-hidreto de sódio em 25 ml de tetra-hidrofurano adicionaram -se gota a gota a -70° C num período de 10 min 4,3 ml de ácido . acético glacial e agitou-se durante duas horas à mesma tempera- - 27 = f

tura* Após adiçSo de 1 g (5,4 mmol) do composto 2b do Exemplo 10 era 5 ml de tetra-hidrofurano adicionaram-se gota a gota num período de 30 min mais 20 ml de ácido acético glacial e agitou--se a mistura reaccional a mesma temperatura durante mais duas horas*

Depois de se ter verificado por CCF que a reacçSo estava completa, tratou-se a mistura com 10 ml de água e 30 ml de uma soluçSo saturada de hidrogenocarbonato de sódio e extraiu-se três vezes com 100 ml de cada vez de acetato de «tilo* Lavou-se a fase orgânica tres vezea com 5° ml de água em cada lavagem e em seguida secou-se sobre sulfato de sódio. Após eliminaçSo do solvente por deetilaçSo sob vácuo purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica com acetona: íhexano (2:3) e obteve-se o composto 3d com um rendimento de 76# (0,78 g).

Kf - 0,37 (CH2C12:CH30H/9*1)í Γ°ί7Ώ20* “9*2° <ceíl* CH2C12)*

Análise para C^Hg^O^ (188,27): calculado: C 63,8} H 10,7} determinado: C 63,4} H 10,3}

Os dados espectroscópieos sSo idênticos aos do composto 3b do Exemplo 2.

Exemplo 13 (+)-(3S,5S,8E)-3-Hidroxi-5-dec-8-enolido (composto lc)

Dissolveram-se 300 mg (l,59 mmol) do compo£ to 3c do Exemplo 11 em 15 ml de benzeno e trataram-se com 1,39 é' (l,59 mmol) de cloreto de tris-(trifenilfosfina)-rutenio (li)* Agitou-se a mistura durante 3 dias à temperatura ambiente* Após eliminaçSo do benzeno por deetilaçSo sob vácuo dissolveu-se o resíduo escure com aspecto de chá em 2 ml de acetona e purifi-cou-se em gel de sílica com acetato de etilo/hexano (l*l). A lactona (composto lc) foi obtida sob a forma de um óleo incolor num rendimento de 72# (210 mg).

Rf — 0,51 (Acetato de etilo:hexano/3sl)} £ W -52,0° (c*0,92, CH2C12)} » 28 = 0 , „ ι ιαχιι. 10*10 3 Λ,;!, ^ΑΛ>*·1· Γ" calculado; determinados ó 65,2} I! õ,75i0 65,6} li 6,3í

Os dados espectroscópicos são idênticos aos do composto do Bxempio 3*

Exemplo l4 {-)-(3S,5R,8ii)-3~H±ároxi«5-dec-8-enol±cto (composto ld)

Trataram-se 300 mg (l,59 romol) do composto 3b do lixemplo 12 nas mesmas condiç5cs do lixemplo 13. A lactona obtida (composto ld) foi obtida num rendimento de 210 mg (73$>) sob a forma de um óleo incolor.

Rf = 0,49 (Acetato de etiioshexane»/3 * 1) } +25,5° (ce =0,14, Cri0Cl9)|

Análise para ^£^20^3 calculado: G 65,2} II 8,75; determinados 0 65,6} K 8,7} Os dados espectroscópicos são idênticos aos do composto lb do Bxerrplo 4* l-xemplo 15 (-i ;-(3S,5S)-3-Hidroxi-5-decanolido (composto 6c) bissolveram-se 200 mg (l,l mmol) do composto 1c do Lxemplo 13 em 20 ml de acetato de etilo, trataram-se com 30 mg de JPd/carvão activo e hidrogenaram-se a pressão atmoj» feriça e a temperatura ambiente durante 8 horas. Após filtração lavou-se o catalisador com 20 ml de acetato de etilo; destilou--se a solução sob vácuo e purificou-se o resíduo resultante cota acetato de etllo/hexano (isl) em gel de sílica. Obtiveram-se lóC mg (92>) do produto (composto 6c) sob a forma de uru óleo incolor.

Rf = 0,54 (4cetato de etiloíhexano/3ϊl)} (c=l,5, CHsCla)| nálise para C10H1&03 (186,25)* calculado: C 64,5} H 9,7} determinado: C 64,8; H 8,9;

Os ciados espectroscópicos são idênticos ccs cio composto 6a do exemplo 5. = 29 - •f

Exemplo l6 (.)-,(33,5^)-3-Hidrox±«5-decanoiic!o (composto 6d)

Hidrogetiararn-se e purificaram-se 20C mg (1,l mmol) cio composto ld do 2-xemplo 14 conforme descrito no Exemplo 15· ' lactona (composto 6d) precipitou sob a forma de um óleo incolor num rendimento de 185 mg (92¾) Γη =· 0,53 (Acetato de etiloshexano/3*l); (e--l,0, CH2C12)í análise para C^H^gC^ (186,25)5 calculadoí G 64,5» H 9»?» determinado; 0 64,5; tí 8,9}

Os dados especcroscópicos sSo idênticos aos do composto 6b do Exemplo 6,

Exemplo 17 (33,5S,6Tí,8E)-l,3,5“fri-liic!roxi-6s3-d€cadieno (composto 3e)

Tratou-se 1 g (5,4 moí) 00 composto da fór mula lia, em que representa 2,4-dipenteno, de forma idêntica a do Juxemplo 1.

Análise para (1^6,27)* calculado; C 64,49» H 9,79; determinado; C 64,1; H 9t7; 1IÍ-Ni-ii (400 1Hz) í - 1,5-2,0 m? 3,9 (η, 2H, íi-l); 4,25 (m, 1H, H-3)? 4,55 (m, 1H, H-Ç)? 5,6-5,7 (*", 3H); 6,1 (m, 1H> 5 6,25 (m, 1H) r.xenplo 18 3~>,5^,6,>,8.u)-3-Aidroxi-5-deca-6,8-dienolido (composto le)

Trataram-se 300 mg do composto 3« do Exem-pio 17 de forna idêntica a do Exemplo 3*

. Tiáliee para (lB2,22)í calculado; C 6.5,92; H 7,7;M determinado; 0 65,8; H 7,6; 13G-A.. A (130 mz) / - 18,0 (a-l); 36,4 (C-9); 38,7 (C-2); 62,55 (5-3); 76,0 (0-5); 127,0; 153,1; 131,8; 133,0 (C-H); 17',13 ( -1) 30 « 19 i3^,5s>“3»6-I>i-h±droxi-5-hexanol±t!o (composto 1 í)

Dissolveu-se 1 g do composto le de acordo com o Jixemplo 18 em 30 ml de metanol, tratou-se com 80 mg de hi. ôreto de sódio e agitou-se a 25° 0 durante 5 horas. Neutralizou -se com HC1 2 Ν', evaporou-se à secura em evaporador rotativo e dissolveu-se em 30 ml de acetona. Tratou-se a solução com uma pequena quantidade de 2nCl„ e aqueceu-se a refluxo durante 12 fm· horas. íim seguida extraiu-se com uma mistura de água e acetato de etilo (l*l, 100 ml de cada). Secou-se a fase orgânica com sulfato de sódio e após ter evaporado à secura num evaporador rotativo retomou-se em 150 ml do metanol. i fectuou-se uma ozo-nolise a -70° C (Organikuuà, 14 ’ edipSo, 1975, pág. 295i V:,B--Yerlag). 2m seguida adicionou-se 1 g de e agitou-se du rante duas horas. fvaporou-se a mistura reaccional num evapo rador rotativo e extraiu-se com uma mistura de água e cloreto de metxleno (l*l, 150 ml de cada). .Cm .seguida concentrcu-se nun evaporador rotativo e purificou-se 0 concentrado numa coluna de gel de sílica (acetato de etilo/hexano, 1*10 a 10*l). Obtiveram -se 150 mg de (3R,5S)-3,5-0—±sopropii±deno-3t5»6—tri—hidroxi—5--hexanoato ce metilo. dnxlise para C^Hj(218,25) í calculado* G 55,03} fl 8,31; determinado* G 55*1} H 6,2}

Transformou-se o (3^,5^)^3,5-0-150^^00111^ no-3,5,6-tri-hidroxi-5-3iexanoato de metilo em (3R,5S)-3,ó-di--hidroxi-5-hexanolido com ácido trifluoroacético em 15 equivalentes de diclorometano a 23° G durante 24 horas (US 4 $>7t> 313). I xemplo 20 2ré-i^cubou-se durante uma hora uma nonoca-· η ida de células ΙΙΕΓ-G;,1 iura : ôio nutriente isento de lipoproteí-nas com concentrações apropriadas caí- substâncias a ensaiar dos Lxemplos 3 e 5* ápós adição do precursor de biosxntese marcado j(| —jjj, M- ^ com 0 £ C/-ace fcnto de sódio centínuou-ae a incubação durante tr*? ’όι’'·?. τ;« svp:uidr* ser.onific·:1 0—se nr.a parte das células com

álcali após prévia adirão atrairá.-se os lípidos d r^ do clorofórmio/meteuol <5 de i·.: : H'y. ; interno d·': V-cd.r í. orol, aa células'. ?.·:· ^r; os com uma nistu • · tonarou-se esto '"Istura do lípidos ' '« adição d· tora sub«t3r o ia veicular de colesterol nor cro---to^rrfia em camada finn preparotivr , i^olou-se a banda de coles torci depois de coin-Vt ê deter,'inc-tvoc y.ov cintiloarafic a quan 1 íj. tida.de de ' C-colesterol formado a nnrtir do precursor narcado 14 com C. Numa fraeção alíquota das células de terminou» se n pro teína celular, de tal modo rrue foi oossívcl calcular a mantida s h de O-colesterol formado a partir precursor marcado com na unidade celular por mg de pi-oteína celular, λ fim de com .· rar a actividade de inibição de un preparado a ensaiar ad±ci£ nado usou-se um branco, de tal modo que ê possível indicar a ini : iplía dirccta da Mossinte.se de colesterol a uma determinada concentração molar do preparado a ensaiar no meio, Em fracçSes lly i.otics da cultura celular avaliou-se a proporção de células intactas na cultura e a ausência de danificação das células pr£ vocada pelo efeito morfológico do preparado (microscopia óptica) e r ectiu-se por via bioquímica por determinação da libertação de ciesidrogenase de lactato no meio de incubação. Iara preparado padrão utilizou-se lovostatina. Os resultados são apresentados no quadro 1. duadro 1

Concentração Colesterol

Composto CJ em percentagem do branco la IO*"5 56 ia 1C-7 72 να ΙνΓ5 b5 óa 10-7 61 3e 10“6 30 le lv“6 30

Claims (1)

1. I V 1 - 1·:; » . iooeòsv para a preparação eetereosseiecti va de ^-lactonas 3R5R, 31-5·.»* 3353 e 3-·.*5*· 5*"subs-;itu:íaas das fórmulas Ia, Itof Xç e Xó, OH ui OH

   1 i-r·. que 1; representa l) uv grupo alquilo linear ou ramificado com 3 a 15 átomos He carbono, £> um grupo alcenilo linear ou ramificado com 3 a 15 átomos de carbono e 1 a 7 ligaySos duplas 0-0, ou 3) um grupo Οίί,,ΟΗ, ctiraccerizado por a) se transformar um composto da formula JXa R1

   (lia) 1} por redução diastereosselectiva de modo a obter um compo^ to da formula Iliu ou 111b, = 33 =*

   (illb] por oxidaçSo regiosselectiva cie modo a obter urr composto da formula Ia ou Ib, OH

   (la) Oli

   A Λ .1 0 (ib) e ever tualraente o) hidrogertarem-se as lipactíes dublas da cadeia alc;iiilénica, ou T:l transformar-se uv couprm-io da fórmula IIα l) -por aceta LizaçSto de modo a c-bter ivi composto da í emula 17a ou rVb, OH Otí

   (XVa) k

   (iVb)

   Z) yor oxidaçSo de modo a obter- uri comnoato da fórmula V, 0

   ΙΛ (V) '3 3) por reduçlo d±astereos3©lect±va de ruo do a obter uni composto cia fórmula lYc,

   k) por desacetalização de :nodo a obter um composto da fórmula l‘Iot O OIT

   oh (Ilb) p) por reduçfio diastereosselectiva de modo a obter um composto da fórmula HXc ou Illd, 35

   (Illd) í) cor oxidação regio^relectiva de modo a obter um composto da fórmula 1c ou Id, e eventualmente 7} bidrog-enare.n-se as XigaçSes duplas da cadela alquilénica, ou c.f transformar-se um composto da fórmula Ia, Ib, Ic ou Id, em eme li^· l) representa um grupo alquilo linear ou ramificado com 3 a 13 átomos de carbono representa ura grupo rleenilo linear ou ramificado com 3 a 15 átomos de carbono e 1 a 7 ligaeSes duplas C-C, _ n por reacçSc com um composto da fórmula 11 -0- de modo a obter um composto da fórmula

   « 36 -

   í jIÍ

   (Vc)

   era que E reprciret.ta um qrupo alquilo oom 1 u 5 átomos de carbono , S) nor cetalibação com acetona ou <Hn>etoxipropano de modo a obter um composto da fórmula Via, Vlb, VI c ou Víd,

   HLC . OH., 3 w - 3

   37 *

   H3C CH3

   Γοϊ* oxidação com azono de modo a obter um composto da fórmula Vila, Vllb, ou VXTct, ii3c on3

   (Vila) GU, V

   (Vllb) * 33 -

   k) de modo a obter um composto da fórmula Ia, Xb, Io ou Icl em que R1 representa CII^OH. - 2& - Processo de acordo com a reivindicação 1, 1 caracterizado por R representar 1) um grupo alquilo linear ou ramificado com 3 a 10 átomos de carbono, 2) um grupo alcenilo linear ou ramificado com 3 a 10 átomos de carbono e 1 a 5 ligações duplas 0-C* O CL - “ Processo de acordo com a reivindicação 1, 1 caracterizado por E representar 1) ura grupo alquilo linear ou ramificado com 5 átomos de carbono, 2) um grupo alcenilo linear ou ramificado com 5 átomos de carbono e 1 ou 2 ligações duplas C-C, X5

   0-R 3 (vilc)

   (VXId) 4) de modo a obter um composto da formula Ia, Ib, Ic ou 1 Id em que R representa CIIgGH» Mr 1·» Processo de acordo com a reivindicação 1, 1 caracterizado por R representar 1) um grupo alquilo linear ou ramificado com 3 a 10 átomos de carbono, 2) um grupo alcenilo linear ou ramificado com 3 a 10 áto· mos de carbono e 1 a 5 ligações duplas C-C. - 35 - Processo do acordo com a reivindicação 1, 1 carac terizado por R representar 1) um grupo alquilo linear ou ramificado cora 5 átomos de carbono, 2) um grupo alcenilo linear ou ramificado com 5 átomos de carbono e 1 ou 2 ligações duplas C-G* — 39 — -, — Processo para a preparação de uma composição farmacêutica caracterizado por se incorporar como ingrediente activo numa fornia de apresentação apropriada pelo menos um composto da fórmula Ia, Ib, Ic ou !d obtido de acordo Com qualquer das reivindicações 1 a 3* excluindo o composto da fórmula 1 Ia de acordo com a reivindicação 1 em que R representa uma cadeia alquilénica linear com 5 átomos de carbono, em conjunto con um veiculo fisiologicaraente aceitável e eventualmente outros adj tivos e/ ou adjuvantes. - 5§ - Processo para a preparação de tuna composição farmacêutica útil para a inibição da síntese do colesterol caracterizado por se incorporar como ingrediente activo pelo menos um composto da fórmula Ia OH

   (la) em que R1 representa 1) um grupo alquilo linear ou ramificado com 3 a 15 átomos de carbono* 2) um grupo alcenilo linear ou ramificado com 3 a 15 átomos de carbono e 1 a f ligações duplas C-C* 3) um grupo CH^OH, em conjunto com um veículo fisiologicamente aceitável e eventual mente com outros aditivos e/ou adjuvantes· ** — Processo para a preparação de um composto da fórmula Illa, Illb, IIlc ou XIXd de acordo com a reivàtldica-ção 1 caracterizado por kO s? a) se reduzir diastereo sselectivamente um composto da formula Ilb

   (Ilb) de modo a obter um composto da fórmula IIIe ou Illd ou b) se reduzir diastereosseleetivamente um composto da fórmula IXa 0 OH R1 S OH (Ha) de modo a obter um composto da fórmula Illa ou Illb* - 7* - Processo para a preparação do um composto de fórmula Ilb de acordo com a reivindicação' 1 caracterizado por se desacetalizar um composto da fórmula IVe de acordo com a reivindicação 1* A requerente'reivindica as prioridades dos pedidos ode patentes alemãs apresentados em 1 de Agosto de 1990 sob o K9 p 4o 24 425*3 © cm 1 de Junho de 1991» sob o MS P 4l 13 009.7. Lisboa, 31 de Julho de 1991 0 AGENTE OFICIAL DA FEOPFE^AIíE OBUSTMAIi

   «41«