PT97765A - Processo de preparacao de derivados de xantina 1,7-substituidos, dos seus sais fisiologicamente aceitaveis e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

DESCRITIVA 72 629

Tg.21450(CJ) 3

MEMÓRIA

Este invento refere-se a derivados de xantina 1//- substituídos tendo actívidade anti-asmática, bem como aos seus sais fisiologicamente aceitáveis, às suas composições farmacêuticas e ao processo para a sua preparação. É conhecido desde há muito tempo que as xantinas substituídas têm actívidade broncodilatadora«

Na verdade, a teofilina (l,3~dímetil-xantina) é utilizada com sucesso desde há longo tempo para o tratamento da asma bron-quica, embora a sua eficiência seja limitada por efeitos laterais no sistema cardiovascular e no sistema nervoso central (fâoodman e Gilmanss " The Pharmacological Basis of Therapeutics", MacMillan Publishing Company, 1985).

Mais recentemente, foram realizadas investigações aprofundadas para encontrar derivados de xantina dotados de uma maior actívidade e/ou com uma maior acção selectiva do que a teofilina. Por consequência, foram sintetizados rnuitos derivados substituídos por alquilo ou hídroxialquilo nas posições 1, 3, 7 e 8 da estrutura da xantina.

Em todos os compostos que mostrarem ser os mais interessantes como compostos broncodilatadores, a posição 3 é sempre substituída por alquilo (por exemplo, enerofilina; bamifilina; doxofiliria; Merck Indexj 11§ Edição, 1989) e em complemento, num estudo estrutura-activida.de apresentada por Cari fâ.A. Persson (Cari G.A. Persson, Trends Pharmacol. Sei. 1982, 312-313) é realçado que a substituição N^-alquilo é essencial para dar à estrutura da xantina a sua actívidade broncodilatadora.

Existem poucos exemplos de derivados de xantina sem substituição N3- na literatura científica, e, por outro lado, a própria paraxantina (1,7-dimetil-xantina) foi muito pouco investigada quanto aos seus efeitos.farmacológicos até aos nossos dias (Aznan Leio et al., J. Pharm. e Exp. Therapeutics 1989, 248,

72 629 Tg.21450(CJ) 4 615-319; M.J. Arnaud, C. Welsch em " Teophylline and other Methylxanthine" (The Proceedings of an International Symposíum, Frankfurt/Main, Maio 29-30, 1981) Vieweg e Sohn Braunschweig R.F.T), apesar de ser o mais importante metabolito cafeína (1,3,7-trimetil-xantina) no Homem-

As propriedades e a síntese das 1, 7-dialquil-xantinas foi. revelada na literatura por Frederick G. Mann et al. (Frederick G. Mann et al., d- Chem- oou« 1945,, 751—60), mas os autores 1 ϊmi — tam-se a reportar que tais compostos têm uma excepcional activí-dade anti-tiróide»

No due respeita à sua síntese, os derivados substituídos por 1,7-dialquilo não podem ser preparados através do muito conhecido procedimento de Traube (W. Traube, Chem. Ber, 1900, 3035-3056) tal. como modificado por Papesch (V- Papesch e E.F. Schroeder; 3- Org» Chem- 1951, 16, 1879-1890) começando de utna ureia substituída por monoalquilo, porque as 3-alquil-xantinas são sempre obtidas por meio deste procedimento, compostos a partir dos quais as 3,7--dialquil-xantinas são facilmente preparadas através de posterior aIquilação„ A preparação através da alquilação das 1-alquil-xantinas dá, por um lado, um número de problemas, porque as 1-alquil-xantinas são difíceis de sintetizar (Mah T. Schamin et al-, J- Med. Chem.., .1989, 32, 1231-1237), e por outro lado, através da alduilação dá uma mistura de 1,3- e "l,7-di-alquil~xan tinas que não podem ser facilmente separadas-

No artigo de Frederick G. Mann acima mencionado são referidas algumas sínteses alternativas que são no entanto muito complicadas e dão rendimentos muito baixos.

Por consequência, é possível pensar razoavelmente que o desenvolvimento limitado dos derivados da xantina substituídos em .1,7 por dialquilo é devida às enormes dificuldades na sua síntese e ao facto de os derivados substituídos terem sido 72 629

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no que considerados até aos nossos dias os melhores compostos respeita à sua actividade antibronco-espásmica A paraxantina acima mencionada também nunca foi profundamente investigada no que respeita à sua actividade farmaeobiológíca (Aznon Leio et al„, cf. „ as referências bibliográficas aqui citadas)» Contudo, nos testes laboratoriais realizados pelo proprio requerente, verificou-se que a paraxantina não apresenta nenhuma acti vidade ari tibronco-espásm ica sigri if icat i va.

Pelo contrário, foi surpreendentemente revelado, de acordo com o presente, que outros derivados da xantina 1,7-dialquilo- ou i-alquí lo-7-hidroxialqui lo-substituídos mostram urna actividade broncodilatadora significativa o que está associado com os reduzidos efeitos de excitação central pelo que estes compostos podem ser empregues eficientemente como drogas antí-asmáticas..

Por consequência, o objecto específico do presente invento consiste nos derivados da xantina tendo actividade anti-asmáti-ca, com a fórmula geral (I):

na quais R é um grupo alquilo de cadeia linear ou ramificada de um a seís átomos de carbono, e é um grupo alquilo ou hídroxialquilo de cadeia linear ou ramificada de um a seis átomos de carbono, com a condição de R e nunca serem simultaneamente grupos meti lo.

No caso onde os grupos substituintes R e/ou R-j^ tenham um átomo de carbono assimétrico, este invento inclui todas as

72 629 Tg.21450(CJ) possíveis formas opticamente activas, bem como as misturas racémicas dos compostos de fórmula (I).

Além disso, o objecto do presente invento consiste também nos sais f is i o logicamente aceitáveis dos derivados de xaritína de fórmula (I), que também podem ser utilizados no tratamento de doenças asmáticas.

As composições farmacêuticas que contêm os derivados da xantina acima mencionados ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis pertencem também ao âmbito do invento, sendo estas composições adequadas para administração oral, rectal, parente-ral, por inalação, bem como para uso tópico e útil no tratamento de asma. brônquica, sendo convenientemente formulada como comprimidos, ampolas, xaropes, gotas, aerosóis, supositórios, geles, unguentos, formas de libertação sustida e outras.

Obviamente, os compostos que são estruturalmente diferentes dos de fórmula (I), mas uma vez administrados a organismos vivos sao transformados em compostos de fórmula (I) e como tal utilizam os seus efeitos farmacológicos, são para ser considerados como incluídos no âmbito de protecção do presente invento.

Além disso, este invento refere-se a um processo para a preparação de compostos de fórmula (I), no qual: a) 6-amino-l-benzil"5-bromo-2,4(lH,3H)-pirímídinodiona (2) reage em Ν,Μ-dimetilformamída" com uma alquil- ou hidroxialquil-amina primária de fórmula R^Nl·^» na qual tem o mesmo significado que o definido em referência aos compostos de fórmula I; b) as 6-amino-5-alquilamina-l-benzil-2,4-(lH,3H)-pirimidinodionas obtidas (3) são formiladas de preferência a 90°C com ácido fórmi-co, de preferência com 98% de concentração; c) os derivados N-formílo resultantes (4) são alquilados com dí-alquilsulfatos em NaOH diluído ou com haletos de alquilo num sol” vente adequado, em particular em Ν,Ν-dímetilformamida através da 72 629

Tg.21450(CJ) Λ..ψ *>' •L· >i prévia formação de sais com hidretos ou hidróxidos alcalinos; c!) as 3-alquil -6-ami n o- 1-ben zi I ~5~-(N-f o rmí 1 -N-a 1 qu i 1 ami η o) 2 „ 4- (1H 3H)~pirimidinodionas (5) são desbenziladas por hídrogenação catalítica à pressão ambiente na presença de Pd/C e numa mistura so 1 vente amoni.aco-agua~álcoo 1; e e) as 3-a 1 qu i 1 -6-amino-5- (N-f o r m i '1 -N~a 1 qu i 1 am i na)-2,4- (xH * 3H ) -pi -rimidínodionas assim obtidas (6) sâo finalmente sujeitas a cicl:i··· 2ação com oxícloreto de fósforo e N,N~dimetilformamida a 50~60°C.

Esquema de Reacçâo A

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No processo de preparação Ilustrado no esquema de reacção A é utilizado o procedimento através do qual W- Hutzerilaub e W. Pfleiderer (Liebigs An π - Chem. .1979, 1847-1354) sintetizaram a paraxantina* A reacção entre 6-amino~i-'benzil-5~bromo-2,4(lH!,3H)“pirimi~ dinodiona (2) e alquilaminas primárias a lOO^C em Ν,Ν-dimetilfor-mamida produz 6-'amino“5-alquIlamiriO“l-ben2ll-2!J4(lH,3H)"pírimidi-nodionas (3) que são formiladas a 90 °C com ácido fórmico a 98% (4) e depois são alquiladas com dialquilsulfatos em NaOH diluído ou com haletos de alquilo em Ν,Ν-dimetilformamida através da prévia formação de sais com hidretos e hidróxidos alcalinos por forma a produzir S-alquíl-ó-amino-l-benzil-S-CN-formil-N-alquila- 72 629

Tg-21450(CJ) 9 mino)-2,4-(lH,3H)~pirinãdinodionas (5) „

Neste ponto, o processo prossegue através da reacção de desbenzilação, que é realizada através de hidrogenação catalítica, à pressão ambiente, na presença de Pd/C e numa mistura solvente amoníaco-água-álcool para obter 3~alquil-6~amino~ -5-(N-formil”N--alquilamino)“2,4-(lH,3H)-pirimidinodionas (6) que sâo finalmente ciclízadas com oxicloreto de fósforo e N,N-díme-tilformamida por forma a produzir 1,7-dialquilxantinas de fórmula geral (I)„ É descrito um segundo processo, de acordo com o invento, para a preparação de compostos de fórmula (I), como a seguir se apresenta: a) l-alquil-4-amino-2-metoxi-pirímidina-6(lH)-onas (2) são nitro-sadas com a quantidade estequiométrica de nitrito de sódio e ácido clorídrico, processando-se a reacção em dimetilsulfóxido a 60-70 °C," b) as l-alquil-4-amino-2-metoxi-5-nitrosopi rimidina~6(lH)-onas assim obtidas (3) são preferencialmente reduzidas através de hidrogenação catalítica sob pressão 303-505 kPa (3-5 atm) numa suspensão de álcool e na presença de Ptc^. c) os derivados l-alquil-4,5-diamino obtidos (4) são ciclízados por aquecimento sob refluxo com ácido fórmico a 98% ou por tratamento a 100°C com anidrido acético e trietilortoformato; d) as l-alquil-2-metoxi-hipoxantinas assim obtidas (5) são subse-queritemente alquiladas com dialquilsulfatos em NaOH diluído ou com haletos de alquilo num solvente adequado, em particular N,N-di-metilformamida através de prévia formação de sais com hidretos ou hidróxidos alcalinos ou com de epóxidos de alquilo num meio alcoólico e na presença de piridina; e) as 1-alquíl-2-metoxi-7-alquí1-hipoxantinas (7) obtidas após a separação da mesma a partir dos correspondentes isómeros substituídos na posição 9, que podem ser formados na reacção correspondente ao passo d), são finalmente tratadas no frio, com ácido clorídrico concentrado- 72 629 Tg.21450(CJ) 10

Esquema de Reacção B

h2n A, H3C0 nh

(4)

H (1)

72 629 Tg„21450(CJ) 11

No processo de preparação ilustrado no esquema de reacção B, procede-se de uma forma semelhante ao procedimento de W» Pfleiderer (Chem» Ber» 1957, 90, 2272-2276,) ate á. obtenção das i-alquil-4,5-diamino-2-metoxi-pirimidina-6(ih)-onas (4). No processo modificado de acordo com o presente invento, as l-alquil-4-amino-2“metoxi-5-nitroso"pirimidina-6ClH)™onas (3) são obtidas de preferência pela reacção das l-alquil“4-amino~2~metoxí~pirimidina~6(lH)-onas correspondentes (2) a 60-70eC em dimetilsulfóxido com a quantidade estequiométrica de nitrito de sódio dissolvido na mínima quantidade de água, e então pela adição da quantidade estequiomé-trica de HC1 concentrado»

Além disso, as l-alquil-4,S“diamino-2-~metoxi-pirimidína~6“ (IH)-onas (4) são obtidas de preferência por hidrogenaçâo catalítica sob pressão 303-505 kPa (3-5 atm) dos derivados nitroso correspondentes numa suspensão álcool e na presença de PtO^. A reacção de ciclização não realizada de acordo com W. Pfleiderer, pode ocorrer indiferentemente por aquecimento sob refluxo com ácido fórmico a 98% ou por tratamento a 100°C com anidrido acético e trietílortoformato»

As l-alquil-2-metoxi-hipoxantinas (5) são subsquentemente alquiladas por meio de dialquilsulfato em NaOH diluído ou com haletos de alquilo em N,N~dimetilformamida através de prévia formação de sal com hidretos ou hidróxidos alcalinos, ou com epóxidos alquilo em álcool, como solvente, e na presença de piridina»

Em cada caso podem-se obter misturas isoméricas (6) de compostos alquilados nas posições 7 e 9 da estrutura da hipoxan-tina, sendo as referidas misturas separadas através de cristalização fraccionada ou através de HLPC preparativa ou através de cromatografia flash»

As l-alquil-2-metoxi-7-alquil-hipoxantinas (7) são finalmente tratadas no frio, com HC1 concentrado por forma a produzir as

'''riUiíSAJw·.., é 72 629 Tg.21450(03) 12

1,7-dialquil-xantinas de fórmula geral lM

Os exemplos seguintes da preparação dos compostos do pr$^ sente invento pretendem ilustrar o invento de uma forma não limi^ tativa.

Preparação... da.....ι-meti 1 -7-isobut ϊ l-xantina í.£.sguema...de.....Reaccão A)

1.. Preparação da 6-amiriO“5~isobutilamino-i~benzil~2,4~(lH ' * 3H)~pirimidinodiona A uma suspensão de 50 g (0,169 moles) de 6~amino~l~benzil~S-~ -bromo-2,4 (lH,3H)~pirimidinodiona (W. Hutzenlaub; W. Pfleiderer, Liebigs Ann. Cherri., 1979, 1847-1854) em 250 ml de Ν,Ν-dimetíIfor-mamida, são adicionados gota a gota com agitação, 50 ml (0,5 moles) de isobutilamina. A solução assim obtida é mantida a 90-100°C durante 3 horas, então, permite-se que a soluçãO arrefeça até se obter uma grande quantidade de um precipitado qu© é eritão filtrado sob vácuo e lavado com álcool etílico e éter N São obtidos 20 g de um produto branco, p.f. 209-211°C.

Da solução reagente obtém-se um resíduo sólido após concentração até à secura, sendo o referido resíduo retomado com água e filtrado. Obtém-se assim uma quantidade adicional de 7 g de produto, p.f. 204-206°C. 2. Preparação da 6-amino-l~benzil-5~(N~formil-N-isobutilami-no)-2,4 (lH,3H)~pirimidinodiona.

Uma solução de 2.0g (0,069 moles) de ó-amino-5~isobutilamino-~l-benzil~2,4(lH,3H)-pirimidinodiona em 30 ml de ácido fõrmico a 98% é aquecido até 90°C durante 45 minutos, e subsequentemente é evaporado até à secura em vácuo. 0 sólido assim obtido é retomado com álcool etílico, filtrado em vácuo e lavado com éter. p.f. 255-258°C. Rendimento 20 g. 3. Preparação da 6-amino~l~benzil-3-metil~5~(N-formil-N~Iso-butilamino)-2,4 (lH,3H)-pirimidinodiona.

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Tg.21450(CJ) A uma solução de 7 g (0,022 moles) de 6-amino l~benzi 1·~5·~(ν~ "farmri~N~isobutilamino)-2,4(lH,3H)~pirimidinodiona em 45 ml de NaOH, 0,7 M são adicionados gota a gota, 3,2 ml de dimetilsulfa-to, Apos alguns minutos começa-se a formar um precipitado, que é filtrado em vácuo e lavado com água. Rendimento 4,5 g. p.f. 174-5° C. 4. Preparação da ó~amino~3-metil-5“(K~formil-N-ísobutllamino) -2,4(1H,3H)-pi rimidinodiona.

Uma suspensão de 2,5 g (7,7 mmol.es) de 6~amino~l~benzil~3~ -meti1-5-(N-formi1-N-isobutilamino)-2,4(1H,3H)-pirimidinodiona em 70 mi de álcool rnetílico é hidrogenada à pressão ambiente com agitação na presença de 10 mg de Pd/C a 10%. A quantidade estequiométrica de hidrogénio é absorvida em cerca de 3 horas, então a suspensão é filtrada, a solução assim obtida é evaporada até à secura e o residuo sólido é retomado com álcool etílico, filtrado em vácuo e lavado com éter. Rendimento 1,5 g. p.f. superior a 300^0. 5. Preparação da l-metil~7-ísobutil-xantína A uma suspensão de 1 g (4,2 mmoles) de 6-amino-3-metil-5-(N--formil-N-isobutilamino)-2,4-(lH,3H)~pirimidinodiona em 5 ml de N,N~dimetilformamida, são adicionados 0,6 ml de uma solução preparada adicionando 0,9 ml de oxicloreto de fosforo a 1 ml de Ν,Ν-dimetilformamida. Após aquecimento a 60°C durante 30 minutos, a solução assim obtida é evaporada até à. secura em vácuo e o resíduo eemi-sólido é retomado com água gelada. 0 sólido assim obtido é filtrado em vácuo, lavado com água e seco numa estufa a 80-100°C. Rendimento 800 mg. p.f. 222°C (H20)-

Análise elementar (ειο^14^4®2) ^calculado 54,04 ^encontrado 53,98 ^calculado 6,35 ^encontrado 6,36 ^calculado 25,21 ^encontrado 25,25

Preparação da l-metil-7-(2-metil-2-hidroxi-propil)-xantina (Esquema de.....Reaccão.....B.) 14 72 629 Tg.21450(CJ) 1., Preparação da l-metii-4~amino~5~nitroso~2~metoxí~pírimi-dina-6(lH~ona« A uma solução de 60 g (0,39 rnoles) de l“metil~4~amino~2-me-toxx-pirimidina~6(lH)~ona (W. Pfleíderer, Chem. Ber» 1957, 90, 2272-2276) em 900 ml de dímetilsulfóxido, são adicionados a 60°C com agitação vigorosa, 28,5 g (0,41 rnmoles) de nitrito de sódio dissolvido em 60 ml de água, e depois são adicionados gota a gota 34 ml de HC1 a 35%. Após alguns minutos, forma-se um precipitado de· cor azul. Permite-se que a solução arrefeça em cerca de 1,5 horas até à temperatura ambiente, sendo então adicionados com agitação 2 1 de água e após 1,5 horas o precipitado violeta é filtrado em vácuo e lavado com água, álcool etílico e éter. Rendimento 65 g. p.f. 125-126°C (dec.). Análise elementar (c6h8n4°3, h2g) C,H,N„ 2. Preparação da l-meti1-4,5-diamíno-2~inetoxi-pirimídina~6~ (IH)-ona.

Uma suspensão de 20,2 g (0,1 moles) de l-metil-4-amino~5-rii~ troso-2-metoxi-pirimidina-6(lH)“ona em 600 ml de álcool metílico é hídrogenada sob pressão 303 kPa (3 atm) e com agitação na presença de 50 mg de Pt02- A reacção está completa depois de cerca de 1,5 horas e a solução assim obtida é filtrada e evaporada até à secura. 0 resíduo sólido é cristalizado em 120 ml de água, obtendo-se assim 13 g de um composto cristalino amarelo, que é seco em vácuo em Ρ205 e após secagem funde a 162-1631¾. Análise elementar (C6 Hi0n402) c,h,n. '3. Preparação da l-metil-2-metoxi-hipoxantina.

Uma suspensão de 13 g (0,76 moles) de l-metil-4,5~diamino~2--metoxi-pirimidiria-6(lH)-ona em 100 ml de anidrido acético e 100 ml de trietilortoformato é agitada durante 2 horas à temperatura ambiente e então aquecido a 1205¾ durante 3 horas. A solução assim obtida é evaporada até à secura, o resíduo é retomado com éter, filtrado em vácuo e cristalizado em 100 ml de água. Desta forma, são obtidos 7,5 g de um compostos com um p.f. 230-2405¾. 72 629 Tg,21450(CJ)

15 ff. * 7n8Mu2

Análise elementar (CyHpN^O^) C,H,N.

pil)~hipoxantina, A uma suspensão de 7,2 g (0,04 moles de l~metIl~2~metOxi~hipoxantina em 100 ml cie álcool metilícg, sâo adicionados 0,6 ml de piridina e 6 ml de

durante 3 horas, ocorrendo uma completa dissolução. A solução é evaporada até à secura e o resíduo é dissolvido por aquecimento com 70 ml de álcool isopropi.lico. Depois de um longo período de repouso, precepítam 4 g de um composto com p.f. 180Analise elementar (Cj^H^N^Og) C,M,N, 5. Preparação da l-metíl-7~(2-metíl"-2~hidroxí"-propíl)-xanti- na.

Uma solução de 4 g (0,016 moles) de 1-metíl~2~metoxi~7~(2~ ~metil-2-~hidroxi-propil)-hipoxantina em 30 ml de HC1 concentrado é mantida durante 30 horas à temperatura ambiente, sendo então concentrada até à secura sob vácuo e o resíduo sólido é cristalizado em 30 ml de Η?0.

Rendimento: 3 g; p.f, 265°C (H20) Análise elementar (^10^14^4^3·^ ^calculado Cencontrado ^0,46 ^calculado S»92 ^encontrado 6,03 ^calculado 2,5 5,52 ^encontrado 23:-62

De seguida, são descritos os testes farmacológicos realizados com os compostos de acordo com o presente invento, sendo estes testes referidos a testes similares realizados com teofili-na e, nalguns casos, com paraxantina.

Toxicidade aguda

Ratinhos macho suíços (20 g de peso) em jejum (18 h) receberam drogas oralmente (0,2 ml/10 g de peso). 72 629 Tg.21450(CJ) 1 *

Os ratinhos foram administração da droga. A DLí-q foi obtida de acordo .16 observados durante 10 dias após a morte e os sintomas foram avaliados. A com Litchfield e Wilcoxon (J. Pharm.

Expt. Ther. 96, 99; 1949).

DROGA

dl50 mQ/kQ 1-met i1~ 7-i sobu t i1~xan t i n a 303

Teofilina 230

Actlvidade . aritibronco-espásmica.....in vitro 0 efeito antibronco-espãsmico foi avaliado nos brônquios isolados de cobaias (Manziní et al, Br. J. Pharmacoi., 98, 1077; 1989). Foi produzida uma resposta broncomotora tónica estacionária por administração de carbacol (0,3 μΜ) ou capsaícina (0,3 μΜ, em presença de tiorfan (10 μΜ) com a qual foi realizada uma curva concentração-resposta com os vários derivados da xantina. Na Tabela 1 são apresentadas as suas potências expressas como ICki0. TABELA 1

Actividade antibronco-espásmica em brônquios isolados de cobaias. Os Resultados são expressos como I%0 μΜ (95% C.L.) n Carbacol Capasicina Teofilina (5) 92 (69-139) 40 (34-47) l-metil~7~iso- butil-xantina (8) 31 (29-34) 21 (19-23) Paraxantina (3) 135 (94-241) 82 (68-102)

Antagonismo relativamente aos efeitos broncomotores induzidos por acetilcolina e capasicina em cobaias anestesiadas

Foram utilizadas cobaias anestesiadas. Foi administrado 72 629 Tg.21450(CJ)

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Sc.....^ D~Tubocurarina (3 mg/kg i.v.) e foi realizada ventilação mecânica (60 batidas/minuta) com uma bomba através de uma cânula traqueal. As drogas foram administradas por forma intravenosa num volume inferior a 0,5 ml/kg através de uma cânula jugular. A administração de acetilcolina (25 pg/kg) ou de capasicina (2,5 pg/kg) suscitou urn poderoso e momentâneo aumento da pressão de insuflação traqueal que se repetiu após 30 minutos. Foram administrados derivados de xantina em teste (70 pmol/kg í.v.) 15 minutos antes do segundo desafio com o agonista. A actividade anti-bronco-espásmica foi expressa como percentagem de inibição referida ao primeiro aumento da pressão de insuflação traqueal.

Os dados são apresentados na Tabela 2„ TABELA 2

Efeito inibidor das xantinas administradas í.v. sobre o bronco-espasmo induzido por acetilcolina (Ach), capsaícina (caps) por aritigénio (OA) etn cobaias anestesiadas. As xantinas foram administradas em doses de 70 pmol/kg (Ach e Caps) e de 140 pmol/kg (OA).

Os valores são expressos como percentagem de inibição relativa-mente ao controlo de respostas (média ± e.p.m.). Entre parenteses é registado o número de experiências.

Ach

Caps

OA l-metil-7-isobutil- 86±5(5) 75±2 (5) N.A. -xantína 54±5(5) 52±3(5)

Teofilina fíl±8(9) 51±7(8)

Paraxantina N.D. H.D. N.D. - Não determinado N.A. - Nao activo

Antagonismo relatívamente ao bronco-espasmo induzido por antigénio em cobaias sensibilizadas.

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As cobaias (sensibilizadas 14 dias antes com 100 mg/kg s»c. mais 100 mg/kg i.p. de ovalbumina) (Herxheimer e Streseman-"Arch. Int» Pharmacodyn. Ther» 125, 265; 1960) foram desafiados por um aerosol de 0,5% de ovalbumina, por um período de iú segundos numa câmara fechada»

Num primeiro conjunto de experiências, foi registado o número de bronco-espasmos induzidas por aerossol em condições de controlo ou 1. hora depois da administração oral das substancias em teste»

Os dados são apresentados na Tabela 3» 1 ABEL A... 3

Actividade antibronco-espásmica iri vivo de xaritínas administradas oralmente (0,55 inmol/kg) a cobaias sensibilizadas, 1 hora antes de expostas a um aerossol com ovalbumina»

Os dados (média ± e.p. m. ) são expressos em número de bronco-espasmos registadas em 5 minutos» n bronco-espasmos/minuto

Qrupo de controlo 12 8,4±0,8 l-metil-7-isobutil~xantina 9 5,011,1*

Teofilina 6 4,6±1,2* * p<0,05

Num segundo conjunto de experiências, as cobaias (sensibilizadas com 100 mg/kg s.c. mais 100 mg/kg i.p. de ovalbumina (OA) 14 dias antes) foram tratadas tal como previamente descrito, embora o bronco-espasmo fosse produzido por administração de OA por aerossol OA (0,5% durante 20 segundos)» As substâncias em teste (140 pmol/kg i.v») foram administradas 15 minutos antes» A actividade antibronco-espãsmica foi expressa como percentagem de inibição referida ao grupo de controlo» Os dados são apresentados na Tabela 2.

72 629 Tg.21450(CJ) 19

Efeitos no sistema nervoso central Letal idade induzida por pentilentetrazol em ratinhos Ratinhos macho suiços (20 g de peso corporal) ern jejum (2.0 horas) receberam i.p. pentilentetrazol (PTZ) numa dose convulsiva que provocou a morte ern cerca de 10% dos animais (60-75 rng/kg). Os ratinhos foram observados durante 1 hora após a injecçao de PTZ. As drogas foram administradas oralmente (0,55 rnmol/kg) num volume de 20 ml/kg, 1 hora antes do PTZ. A excitação do SNC foi avaliada como o aumento da mortalidade do PTZ. Os resultados são apresentados na Tabela 4.

Sono induzido por clorodiazepoxido em ratinhos Ratinhos macho suíços (20 g de peso corporal) esfomeados (20 horas) foram injectados com clorodiazepoxido (CDO) (100 mg/kg i„p.) e foi estabelecida a duração do sono induzido. 0 tempo de sono foi definido como o tempo decorrido entre a perda e a recuperação do reflexo de compensação (righting reflex). As drogas foram administradas oralmente (0,55 mmol/kg) num volume de 20 ml/kg, 1 hora antes do CDO. A excitação do SNC foi avaliada como o decréscimo do tempo de sono (Tabela 4). I.ABELA....4

Efeito dos derivados da xantiria (0,55 rnM/kg) administrados oralmente na mortalidade induzida por pentilenotetrazol(PTZ) e o sono induzido por clorodiazepoxido(CDO) em ratinhos

Teste PTZ Teste CDO

Taxa de'mortalidade (%) Tempo de sono (minutos)

Controlos 10 27 , 1±3,5 Teofilina 80 7,8±2,2* i-metil-7-isobutil- -xantina 20 2ó„l±3,3 Paraxantina 82 2,3+1,S* *p<0,01

Este invento foi descrito com referência específica a &

72 629 Tg.21450(CJ) 20 algumas concretizações preferidas do mesmo, mas deve ser entendido que modificações e/ou alterações podem ser introduzidas pelos especialistas na arte sem sair do âmbito do invento para o qual é reivindicado o direito de prioridade.,

Claims (1)

1. 72 629 Tg-21450(ca) 9

   21 REIVINDICAÇÕES

   lâ« Processo de preparação de derivados de xantina, possuindo actividade ariti-asmática, de fórmula geral (X);

   H na qual R é urn grupo alquilo de cadeia linear ou ramificada com um a seis átomos de carbono., e Rjl é urn grupo alquilo ou hidroxialquilo de cadeia linear ou ramificada com um a seis átomos de carbono, com a condição de R e Rj_ não serem simultaneamente grupos meti lo, das suas formas opticamerite activas e misturas racémicas quando R e/ou R-l tem um átomo de carbono assimétrico e dos seus sais fisiologicamerite aceitáveis, caracterizado por a) se fazer reagir 6-amino-l-benzil-S-bromo~2,4(lH,3H)-piri··· midinadiona, em Ν,Ν-dimetilformamida, com uma alquil- ou hidroxi-alquil-amina primária de fórmula na qual R_^ tem o signifi cado definido relativamente aos compostos de fórmula (1)? b) se formilarem as 6-amino-5-alquilamino~l-benzil-2,4(lH, 3H)-pirimidinadionas obtidas, com ácido fórmico; c) se alquilarem os derivados N-formil, obtidos, com sulfatos de dialquilo em NaÒH diluído ou com haletos de alquilo num solvente adequado através de salificaçâo prévia com hidretos ou hidróxidos alcalinos; d) se desbenzilarem as 3-alquil-6-amino-l-benzil-5-(N-fot— mil-N-alquilamino)-2,4-(lH,3H)-pírimidinadionas por hidrogenaçâo catalítica à pressão atmosférica na presença de Pd/C e numa mistura solvente de amoníaco-água-álcool; e e) se ciclizarem as 3-alquil-6-amino-5-(N-formil-N-alquil-amino)-2,4-(lH,3H)~pirimidinadionas assim obtidas com oxicloreto fosforoso e Ν,Ν-dimetilformamida a 50-60oC; ou a-j_) se nitrosarem l-alquil-4-amino-ó-metoxi-pirimidina-ó- 22 ./^11 72 629 Tg.21450(CJ) y £' "(lH)“onas cotn a quantidade estequíométrica de nitrito de sódio e ácido clorídrico em dimetílsulfóxido a 60-70°C; Ójl) se reduzirem as 1-alquíl~5~amino-2~metoxi~4-nitroso-piri-midiria-6(lH)-onas obtidas, por hidrogenaçâo catalítica sob pres~ -são 3,03 x 10^ x 5,05 x 10^ Pa (3-5 atmosferas) numa suspensão em álcool e na presença de PtC^; c2) se cíclizarem os derivados l-alquil-4,5~diamina obtidos, por aquecimento sob refluxo com ácido fórmico a 98% ou por tratamento a 100"C com anidrido acético e trietílortoformato; d;i) em seguida, se alquilarem as 1-alquí 1-2-metoxi-hipoxan-tinas assim obtidas, com sulfatos de alquilo em Na0H diluído ou com haletos de alquilo num solvente adequado, por salificação prévia com hidretos ou hidróxidos alcalinos ou com epóxidos de alquilo num álcool, como solvente, ou na presença de piridinaj e e-^) finalmente, se tratarem, no frio, com ácido clorídrico concentrado as l~alquil~2-metoxí-7~alquil-hípoxantinas obtidas depois da separação dos isómeros 9-substituídos correspondentes que se formam na reacção correspondente ao passo bx); e, em seguida, quando adequado, se formarem os saís fisiologica-mente aceitáveis dos derivados de xantina* 2ã. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por a reacção do passo a) ser levada a cabo a cerca de 100°C» 3ã- Processo de acordo com a reivindicação 1. ou 2, caracterizado por no passo b), a formilação ser realizada a 90°C com ácido fórmico a 98%« 4ã« Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1-3 precedentes, caracterizado por a reacção de alquilação da passo c) ocorrer em Ν,Ν-dimetilformamida. 3â« Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por a alqu ilação de acordo com o passo d-^) ser levada a cabo em Ν,Ν-dimetilformamida. 6i. Processo de preparação de uma composição farmacêutica adequada para o tratamento de asma brônquica, caracterizado por 23 72 629 Tg.21450(CJ) se associarem derivados de xantina ou os seus sais fisiologíca-mente aceitáveis, preparados de acordo com as reivindicações anteriores, com portadores ou diluentes adequados, 7ã. Processo de acordo com a reivindicação 6, caracterizado por se formular a composição na forma de comprimido, frasco, xarope, çjotas, aerossol, supositórios, çjelos, unçfuentos ou formas cie libertação sustida. Lisbo. £4. MAi 1991 Por MALESCI lsTl.TUT0 'DOENTE FARMACOBIOLOfâlCO S , p „ A. OFICIAL." 4ΪΟ