PT91632B - Processo para a preparacao de epipodofilotoxina-glucosidos comportando como substituinte um atomo de fluor e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

PATENTE DE INVENÇÃO

N.° 91.632

REQUERENTE: BRISTOL-MYERS COMPANY, norte-americana, com sede em 345 Park Avenue, New York, 10154, Estados Unidos da América,

EPÍGRAFE: Processo para a preparação de epipodofilotoxi na-glucósidos comportando como substituinte um átomo de flúor e de composições farmaceuti cas que os contêm

INVENTORES: Takeshi Ohnuma,

Tetsuro Yamasaki, Hideo Kamei, Takayuki Naito,

Reivindicação do direito de prioridade ao abrigo do artigo 4.° da Convenção de Paris de 20 de Março de 1883.

U.S.A., 06.09.1988, sob ο No 240,971

INPI. MOD 113 Rf 16732

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE EPIPODOFILOTOXINA-GLUCOSIDOS COMPORTANDO COMO SUBSTITUINTE UM

ÃTOMO DE FLÚOR E DE COMPOSIÇOES FARMACÊUTICAS ÇUE OS CONTÊM

BRISTOL-MYERS COMPANY

1. Campo da Invenção

A presente invenção refere-se a Glucosidos de 4'-desmetilepipodofilotoxina contendo, como substituinte, um átomo de flúor para sua utilização como agentes anti-tumorais e a corç posições farmacêuticas que os contêm.

2. Antecedentes

Os Glucosidos de 4¹-desmetilepipodofilotoxina de fórmula geral I são agentes anti-tumorais derivados do ligando de ocorrência natural, podofilotoxina II. 0 método para a sua sín tese encontra-se descrito na patente de invenção norte-americana N² 3-524.844, por Keller-Juslen et al.

R

Entre os compostos de fórmula geral I têm sido considerados o etoposido (IA) e o teniposido (Ib) como clinicamente úteis contra uma diversidade de tumores incluindo o tumor de células pequenas do pulmão, do ovário, do testículo, da mama, da bexiga, do cérebro, a leucémia não linfocítica e a doença de Hodgkin's.

As patentes de invenção norte-americanas N^c 4.547-567 e Ν^β 4.716.221 descrevem os compostos de fórmula geral, !

(III) na qual um dos símbolos X^ e X₂ representa um grupo hidroxi e o outro representa um grupo amino, monoalquilamino ou dialquilamino.

Considera-se exibirem estes derivados uma boa solubilidade na água e representar exemplos de epipodofilotoxinaiglucosidos em que os substituintes da pasta de açúcar estão modificados.

Besumo da Invenção

A presente invenção proporciona compostos anti-tumorais de fórmula geral,

Na qual R^ representa um grupo alquilo C-^ -^θ, alcenilo ^C2 10’ ^5.6’ 2-furilo, 2-tienilo, arilo Cg iq, aralquilo ou aralcenilo

Cg comportando cada um dos grupos aromáticos, eventualmente, um ou mais substituintes escolhidos entre átomos de halogéneo, ou grupos alquilo C-^ θ, alcoxi C-^_g, hidroxi, nitro ou amino,

R₂ representa um átomo de hidrogénio; ou

R^ e R₂ representam, cada um, um grupo alquilo ^cl-8’ ^ou

R-^ e R₂ formam conjuntamente com o átomo de carbono a que estão ligados, um grupo cicloalquilo 0_ς g;

Um dos símbolos R^ e R^ representa um grupo hidroxi e q ou tro representa um átomo de flúor;

R^ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo protector da função fenol; e representa uma ligação glicosídica O< ou^ .

Descrição Pormenorizada da Invenção

Os compostos da presente podem ser preparados por meio da -desmetilepipodofilotoxina V, invenção de fórmula geral IV condensação de -protegldos-

(V) na qual R^ representa um grupo protector do radical fenol, com um composto de fórmula geral

(VI) na qual e R^ têm o significado definido antes e um dos símbolos R^’ e R^' representa um grupo hidroxilo protegido e o outro representa um átomo de flúor, para se obter um composto de fórmula geral,

na qual , R^ , R^' , ^R4'’ ^5 ^{e 0} símbolo A/Ά.têm o significado definido antes.

A reacção de condensação realiza-se no seio de um dissolvente orgânico inerte, como, por exemplo, cloreto de metileno ou cloreto de etileno, a uma temperatura inferior a 0°C e na presença de um catalisador tal como eterato de etilo, trifluore to de boro. 0 tempo de reacção pode estar compreendido entre cerca de 10 minutos e cerca de 5 horas, de preferência entre cer ca de 30 minutos e cerca de 90 minutos, A acçao do eterato de etilo trifluoreto de boro pode ser interrompida por meio de adição à mistura reaccional de uma amina terciária tal como a pi ridina ou a trietilamina. A escolha dos grupos protectores dos grupos hidroxilo e fenol não é particularmente restrita mas pode incluir a formação de derivados de acilo tais como ésteres e carbonatos, éteres, acetais e outros. Estes grupos protectores podem ser eliminados utilizando-se métodos de desbloqueamento convencionais, a escolha dos quais depende da natureza dos grupos de protecção utilizados. Os métodos habituais que podem ser

mencionados incluem a hidrogenação, a hidrólise catalisada por ácido ou por base e a alcoólise na presença de um catalisador metálico tal como o pó de zinco ou o acetato de zinco. Não á crítico que os grupos protectores, hidroxilo ou fenol, sejam re movidos primeiro ou que os grupos protectores sejam escolhidos de tal modo que possam ser eliminados na mesma fase.

Os compostos de fórmula geral VI podem, por sua vez, ser preparados mediante reacção de um açúcar de fórmula geral,

na qual um dos símbolos R^ e R^ representa um grupo hidroxilo ou um grupo hidroxilo protegido s o outro representa um átomo de flúor, e R^ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo protector do radical hidroxilo, com um composto carbonilo de fórmula geral °u um seu ace tal ou cetal em que R-^ e R₂ tem os significados definidos antes.

A -rêéb^ão realiza-se no seio de um dissolvente orgânico inerte tal como cloreto de metileno, cloreto de etileno, acetonitrilo, tetrahidrofurano ou suas misturas na presença de um catalisador ácido como, por exemplo, ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido tolueno-sulfónico ou um ácido de Lewis tal como o cloreto de zinco. A temperatura de reacção pode situar-se entre cerca de 10°C e cerca de 50°C e de preferência será a temperatura ambiente. 0 composto de fórmula geral VIII na qual um dos símbolos

e R^ representa um grupo hidroxi pode ser convertido no composto hidroxi-protegido correspondente utilizando-se métodos convencionais tais como a formação de éster, de éter ou de acetal, para os comoostos de formula geral VIII na qual R_z reoresenta um grupo hidroxi-protector, podendo, o referido grupo pro tector ser removido selectivamente por tratamento com, por exem pio, alumina como se encontra descrito por Herzig e Nuldelman, em Carbohydrate Research, 153 (1936), 102-167.

Os compostos iniciais para os compostos de fórmula geral VIII, viz. 2-desoxi-2-flúoro-D-glucose, 3^-desoxi-3-fluoro-D-glucose e seus derivados acetilados podem ser preparados de acordo com os processos descritos na literatura; por exemplo, o processo de Kovac, Carbohydrate Research 153 (1936), 163-170, para a preparação do 2-desoxi-2-fluoro-£-glucose e os processos descritos por Tewson e Welch, J. Org. Chem 4-3 (1973), 1090-1092, para a preparação do 3-desoxi~3-fluoro-D-glucose.

Alternativamente, a sequência reaccional acima descrita pode ser diversificada, condensando primeiro o composto V com um açúcar de fórmula geral,

na qual Ry e Ry têm o significado definido antes e A re presenta um grupo hidroxi-protector, para formar um composto de fórmula geral, r

BAD ORIGINAL

na qual A, R^,, R^' e R^ têm o significado definido antes. A remoção dos grupos hidroxi-protectores seguida do acoplamento com R^C(0)R2 ou com um seu acetal ou acetal da' compostos de fórmula geral IV.

Verificou-se que a condensação de um composto V com uma fluoro-D-glucopiranose, ou com um seu derivado protegido, ou com os seus derivados b-, ó-Q-acetal ou acetal pode resultar em uma mistura dos glucosidos (X - ou β -. a mistura pode ser sepa rada nos componentes individuais utilizando-se as técnicas de separação conhecidas tal como a cromatografia em coluna. A separação dos isómeros pode ser realizada durante qualquer fase conveniente da sequência reaccional.

Actividade Biológica

Compostos representativos da presente invenção foram avaliados em relação a sua actividade anti-tumoral contra leucemia murina P388 transplantável. Inocularam-se por via intra^

-peritoneal murganhos fêmeas CDF^ com 5 semanas, com 0,9 ml de líquido ascítico diluído contendo 10° células P388 de leucemia linfocítica. Os compostos em ensaio foram administrados intraperitonealmente em uma única dose no primeiro dia e os animais foram observados durante 95 dias. 0 aumento percentual do tempo de sobrevivência médio (MST) dos animais tratados em relação aos animais de controlo não tratados foi determinado e referido como percentagem de T/C. Os compostos que apresentaram valores ds % T/C iguais a 125 ou superiores foram considerados como tendo uma significativa actividade anti-tumoral. 0 quadro I apresenta os resultados da avaliação in vivo; encontram-se apenas referidos os valores máximos de % T/C e as doses que proporcionaram os efeitos máximos.

Quadro I:

Actividade	Anti-tumoral contra leucemia	P388
Composto	Dose (mgAg/dia)	% T/C e
Etoposide	120	250
XVI	60	155
XVII	30	190
XVIII	30	185

Assim, a presente invenção proporciona um método para inibir tumores de mamíferos que consiste na administração de uma dose,eficaz para inibir o tumor, de um composto de fórmula geral IV a um hospedeiro de um tumor. Para’.· esta· finalidade, o fármaco pode ser administrado pelas vias convencionais incluindo ás não

limitadas, a endonvenosa, intramuscular, intra-tumoral, intra-arterial, intra-linfática e oral.

Um outro aspecto da presente invenção proporciona uma composição farmacêutica, a qual compreende um composto de fórmula geral IV e um veículo aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. A composição anti-tumoral pode ser preparada sob qualquer forma farmacêutica adequada à via de administração desejada. Exeniplos de tais composições incluem composições sólidas para administração oral como comprimidos, cápsulas, pílulas, pós e granulados; composições líquidas para administração oral como soluções, suspensões, xaropes e elixires; e composições para administração parentêrica como soluções estéreis, suspensões ou emulsões. Podem ainda ser preparadas sob a forma de compo sições sólidas estéreis, as quais serão dissolvidas em água esterilizada, solução salina fisiológica ou qualquer outro melo injectàvei estéril apropriado, imediatamente antes da administra, ção.

As doses e os regimes posológicos óptimas para um dado hospedeiro mamífero podem ser facilmente determinadas pelos téç nlcos. E evidente que a dose a utilizar deve variar de acordo com a composição particular formulada, o composto particular uti lizado, a forma de aplicação e o sítio a que se destina, o hospe deiro e a doença a tratar. Muitos factores que modificam a acção do fármaco terão de ser considerados incluindo a idade, o pe so, o sexo, a dieta, tempo de administração, via de administração, velocidade de excreção, condição geral do doente, associações de fármacos, reacções de sensibilidade e gravidade da doença.

Os exemplos que se seguem têm apenas um fim ilustrativo

e não devem ser considerados como limitativos do âmbito da presente invenção, o qual é somente definido pelas reivindicações apensas a esta memória descritiva.

Preparação de Compostos Iniciais:

A. Preparação de 3^-2.-^acstil-4,ó-0-etilideno-2-desoxi-2-fluoro-D-Glucose (XI)

A) 2-Desoxi-2-fluoro-D-Glucose (XII)

2-desoxl-2-fluoro-D-glucose foi preparado de acordo com o método descrito por P. Kovac, Carbohydrate Research, 153 (1986), I68-I70. A primeira fase da reacção envolve a conversão da D-manose em 1,3,4,6-tetra-0-acetil-^ -D-nanopiranose e consiste numa modificação de processo descrito por Deferrari J. 0, et al., Carbohydrate Research, 4 (1967), 432-434.

Adicionaram-se a 50 ml de anidrido acético alguns mg de D-manose seguindo-se a adição de 2 gotas de ácido perclérico a 70 %. Adicionaram-se à solução amarela 13,2 g (7,3 mmoles) de D-manose, por porções, com agitação contínua durante 35 minutos, mantendo-se a temperatura interna compreendida entre 40° e 45°C. A mistura foi mantida à temperatura ambiente durante 60 minutos e foi então arrefecida até 15°C e adicionaram-se 10,6 ml de tri brometo de fósforo, gota a gota, enquanto se manteve a temperatura interna compreendida entre 20 e 25°C. Adicionaram-se 4,6 ml de água e a mistura foi mantida à temperatura ambiente duran te 60 minutos. Uma solução de 40 g de tri-hidrato de acetato de sódio em 5θ ml de água foi lentamente adicionada enquanto se π

/ manteve a temperatura interna compreendida entre 35 θ 40°C e a solução amarela resultante foi mantida a esta temperatura du rante 10 minutos. A solução foi então vertida sobre água gelada e extraiu-se a mistura com 3 ^x 40 ml de clorofórmio. Reuniram-se os extractos de clorofórmio e lavaram-se sucessivamente com água fria, solução de hidrogeno carbonato de sódio fria e água fria, secando-se depois sobre sulfato de magnésio anidro. Evaporou-se a solução orgânica até à secura e o resíduo foi cristalizado em éter etílico obtendo-se 5,3 g de l,3,4,ó-tetra-0-acetil-(& -D-manopiranose (rendimento 21 %) sob a forma de cristais incolores. P. F. 1ó3-165°C (lit. l64-l65°C).

A uma solução de 4,9 g (14 mmoles) de 1,3,4,ó-tetra-0-acetil-^ -D-manopiranose em 35 ml de dioxano anidro foram adi cionados 5,1 ml (42 mmoles) de trifluoreto de trietilamina-enxofre. A mistura foi agitada durante 10 minutos a uma tempera tura compreendida entre 100 e 105°C (banho), foi arrefecida até 7°C e adicionaram-se 2 ml de metanol. A mistura foi vertida em 80 ml de uma solução aquosa de hidrogeno carbonato de sódio e foi extraída com 3 ^x 3θ ml de cloreto de metileno. Secaram-se os extractos com hidrogeno carbonato de sódio. Evaporou-se a fase organica até à secura e purificou-se o resíduo i

numa coluna de gel de sílica (MeOH: CH^C^ = 1:10) obtende-se um óleo incolor, o qual foi cristalizado em éter dietíli co/éter isopropílico fornecendo 2,56 g de l,3,4,6-tetra-0-acetil-2-desoxi-2-fluoro-^ -D-glucopiranose (rendimento 52 %) sob a forma de cristais incolores. P. F. 94-96°C (lit. 95-9ó°C).

Uma solução de 2,43 g (6,9 mmoles) de tetraacetato em 20 ml de metanol foi tratada com 6,0 ml (cerca de 3θ mmoles) de

Γ

BAD ORIGINAL

1# metóxido de sódio metanólico 3 28 ;í e foi mantida à temperatura ambiente durante 3 horas. Após neutralização com acido sul fúrico concentrado À temperatura de 0°C, o precipitado inorgâ-i nico foi filtrado e seguidamente evaporado ate à secura com ben zeno para fornecer 1,30 g do composto XII, o qual foi submetido, sem/ser purificado, à reacção de etilidenação seguinte:

b) 1,3-d i-_0-acetil-2-desox i-4, ó-0-etilideno-2-fluoro-D-glucopiranose (XIII)

A uma suspensão de l,2ó g (6,9 mmoles) de 2-desoxi-2-fluoro-D-glucose (XII) em óO ml de cloreto de metileno e 10 ml de tetrahidrofurano adicionaram-se 2,0 ml de acetoaldeído e duas gotas de acido sulfúrico concentrado. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 15 horas, foi lavada com solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio e foi a seguir seca sobre sulfato de sódio. 0 dissolvente orgânico foi evaporado sob va-L 7io para fornecer #80 mg de 2-desoxi-#,ó-0-etilideno-2-fluoro-D-glucopiranose (rendimento 3# #) sob a forma de um óleo que mostrou uma única mancha numa C.C.F. em gel de sílica (Rf 0,6l, CH2CI2: MeOH =5:1)· Sste óleo foi acetilado sem purifica-

^ão posterior.	Adicionou-se	1,0 m 1	de	anid rido	acético a
uma. solução de	150 mg (0,72	mmole) do	óleo obtido	como aci-
ma se descreve	em 2,0 ml de	piridina	e	a mistura	foi agita
da à temperatura ambiente durante toda	a	noite. Adicionou-se

BAD ORtâINÂL

1,0 ml de metanol e prosseguiu-se a agitação durante irais uma hora. A mistura foi concentrada sob vazio e o resíduo foi di_r luído com 30 ml de acetato de etilo. A solução foi sucessivamente lavada com ácido clorídrico a 5 %, solução aquosa de hidrogenocarbonato de sodio e água; foi seca sobre sulfato de sódio anidro e o dissolvente foi evaporado para fornecer 150 mg do composto XIII (rendimento; 71 sob a forma de um óleo contendo uma mistura a 1:1 de anomeros.

IR Ò’. (Puro) cm^-1 1730· RMN ^ΣΗ )CDC1_O £ 6,33 (0,5H, d, J=4 Hz, 1-P-H), 5,79 (0,5H, dd, J=4 À 3 Hz, 1-<X-H), 4,63 (IH, q J=5 Hz, 7-H), 2,20 e 2,l6 (ÓH, cada s, COCH^), 1,33 (3H, d, J=5 Hz, 7-CH₃).

c) 3^-0-Acetil-2-desoxi-¹+, 6-0-etilideno-2-fluoro-D-glucopi ranose (XI)

Uma suspensão de 150 mg (0,51 mmole) do composto XIII e 3 δ de alumina (Woelm I) em 15 ml de metanol foi aquecida à temperatura de 6o°C durante 4 horas com agitação vigorosa.

produto inorgânico foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob vazio fornecendo 117 mg do composto (XIV (rendimento: 91$) sob a forma de um óleo incolor.

RMN ^ΤΗ (60 MHz, CDCl^) 6 5,3 (0,5H, m, 1-f-H), 4,89 (0,5H, m, l-OC-H), 4,63 (IH, q, J=5 Hz,7-H), 2,12 (3H, s, C0CH₃), 1,30 (3H, d, J=5 Hz).

tí. Preparação de 2,4-, 6-tri-Q.-acetil-3-desoxi-3-fluoro-D-glu copiranose (XIV)

a) 1,2,4-, ó-tetra-0-acetil-3-desoxi-3-fluoro-D-glucopiranose (XV)

1,2,4,6^-tetrs-O-acet il-3-desoxi-3-fluoro-D-glucópiranose foi preparado de acordo com o processo descrito por Tewson e Welch em J. Org, Chem. 4-3 (197θ), 1090-1092.

A uma solução de 7,00 g (27 mmoles) de 1,2,5,ó-bis-O-isopropilideno-o<-D-alofuranose (a quel é preparada em três fases a partir de D-glucose de acordo com o método de Baker's,

Carbobjdr. Res., 24- (1972), 192-197, e 6,1 g (50mmoles) de N,N-dlmetilaminopiridina em 50 ml de cloreto de metileno foi lenta mente adicionada a 5,4- ml (4-1 mmoles) de trifluoreto de dietilamino-enxofre sob atmosfera de érgon à temperatura de -10°C.

A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante toda a noite e foram adicionados 5 nil de metanol lentamente e a solução resultante foi diluída com 50 ml de cloreto de metileno

A solução foi lavada com solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio e seca (Na₂S0^). A fase orgânica foi evaporada sob va.

zio para fornecer um óleo castanho impuro que se purificou por uma cromatografia em coluna de gel de sílica (hexano:Ac0Et = = 9?1) para se obter 3,77 S de 3~desoxi-3-fluoro-l,2,5,6-bis-0-isopropilideno-o(-D-glucofuranose (rendimento: 53 sob a forma de um óleo incolor.

r '

BAD ORIGINAL

Uma suspensão de 2,62 g (10 mmoles) de 3~fl^uor°-ói-0-isopropilideno-glucose e de 4,5 g de resina de permuta catiónica Amberlite IR-120 (H⁺) em 45 ml de água foi aquecida à tem peratura de 50°C com agitação vigorosa durante 4 horas. A resina foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vazio para fornecer um óleo, o qual, sem ser purificado foi submetido a acetilação subsequente. A uma solução do óleo em 20 ml de ani drido acético foram adicionadas duas gotas de ácido per clorídrico a /0 % à temperatura ambiente. Após se ter agitado durante 1 hora a mistura reaccional foi arrefecida ate <X°C e adicionaram -se 10 ml de metanol. A mistura foi diluída com 50 nil de cloreto de metileno e foi lavada com solução aquosa de hidrogeno-carbonato de sódio e água e, foi depois seca (Na^SO^). A fase orgânica foi evaporada para fornecer 1,58 g do composto XV (ren dimento: 45 %) sob a forma de um óleo incolor o qual foi cristã lizado a partir de éter de petróleo para se obterem cristais incolores. P. F. 115-121°C (lit. ll6-120°C).

b) 2,4,6-tri-0-acetil-3-desoxi-3-fluoro-D-glucopiranose (XIV)

A uma. solução de 1,60 g (4,5 mmoles) do composto XV em S ml de cloreto de metileno foi adicionado ácido bromídrico a 25 % em 8 ml de ácido acético. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante uma noite, diluiu-se com 50 ml de cloreto de metileno, lavou-se sucessivamente com água, solução aquo sa de hidrogenocarbonato de sódio e com água secando-se em seguida sobre sulfato de sódio anidro. 0 dissolvente orgânico —

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18,

V foi evaporado sob vazio para forncecer 1,58 g de um óleo casta nho. A uma solução deste óleo impuro em 40 ml de acetona aquq sa a 20 % foram adicionados 1,26 g (5,0 mmoles) de cianeto de mercúrio. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 3 horas, concentrou-se sob vazio, foi diluída com 50 ml de acetato de etilo, lavada com a'gua, brometo de sódio IN e em seguida seca sobre sulfato de sódio anidro. 0 dissolvente orgâni co foi evaporado para fornecer 1,07 è do composto XIV (rendimen to: 77 $) sob a forma de cristais incolores.

PF 115-12O°C. IV(Nujol) cm^-1 3530, 1755, 1735 RMN ¹H (60 MHz, CDCly DMSO-dg) 5,33 (1 H, m, 4-H), 5,00 (1H, d, J=8 Hz, 1-K), 4,83 (1H, m, 2-Ή), 4,5 (1H, ffi, 3“H), 4,l6 (2H, ffi, 6-H), 3,67 (1H, m, 5-H).

Exemplo 1. Síntese de 2-desoxi-2’¹fluoro'etocó)sido (XVI) e do seu nome ro (XVII)

0H (XVI) (XVII)

A uma solução arrefecida a uma temperatura compreendiA

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L.

da entre -15 θ -20°C de 200 mg (0,35 mmoles) do produto solvatação metanólico 4’-benziloxi-carbonil-4'-desmetilepipodofilótoxina (seco à temperatura de 110°C, sob vazio, antes da sua utilização) e 110 mg (0,44 mmoles) de 3-Q-acetil-4,6-0-etilide no-2-desoxi-2-fluoro-D-glucose em 20 ml de dicloreto de etile no adicionaram-se 125^il (1 mmole) de eterato de etilo de trifluoreto de boro sob atmosfera de árgon. Após agitação da mistura reaccional durante 50 minutos à temperatura de -15°C, adicionaram-se 0,2 ml de trietilamina e lavou-se a solução resultan te com água e em seguida secou-se com sulfato de sódio anidro. Evaporou-se o dissolvente orgânico sob vazio e hidrogenaram-se 320 mg de resíduo impuro resultante em 5 ml de acetona e 3θ ml de etanol com 150 mg de paládio,a 10 % sobre carvão à pressão de 1 atmosfera. Retirou-=se por filtração o catalisador e concentrou-se o filtrado sob vazio para se obterem 170 mg de uma mistura, impura de 3-0-acetil-2-desoxi-2-fluoroetoposido e do seu o< -anómero.

Submeteu-se a refluxo durante 30 horas, uma suspensão da mistura impura de 170 mg de fenois e de 240 mg de di-hidrato de acetato de zinco em 40 ml de metanol. Evaporou-se o dissolvente orgânico sob vazio para se obterem 124 mg de um sólido amorfo o qual apresentou duas manchas principais por C.C.F. (Rf.0,47 e 0,40: 2 % MeOH/CH^C^). Os dois componentes foram separados por cromatografia em coluna de gel de sílica (2 % MeDH/CH^C^) para se obterem 50 mg do composto XVI (rendimento;tòtal: 19 j Rf 0,47) e 20 mg do composto XVII (rendimento total: 8 %·,

Rf 0,40) sob a forma de cristais incolores, mediante recristali zação em etanol.

/

XVI: EP 2O7~2O9°C. Pureza avaliada: 95 X cor HPLC (LiChrosorb RP-18, 70 ^MeOH-HpO). IV ν) , (Nujol) cm^-1 3300, 1765, 1Ó15.

RMN ^ΤΗ (400 MHz, CDClyDMSO-dz) £ 4,32 (1H, dd, J=3,7 d 7,7 Hz, 1-H), 4,74 (1H, q, J=4,3 Hz, 7-H), 4,13 (1H, dd, J=4 d 9,9 HZ, 6-Keq) , 4,14 (1H, dt, Õ-7,7 d 50,6 Hz, 2-H) , 3,^3 (1H, m, 3-H), 3,56 (1H, t, J=9,9 HZ, 6-Hax) , 3,3 (2H, m, 4”, 5-H), l, 37 (3H, d, J=4,S Hz, 8-H).

XVII: PF 1Ó3-163°C. Pureza avaliada 70 por HPLC.

IV (Nujol) cm¹ 3350, I76O, 1615. RMN ^ΤΗ (400 MHz,

CDCl^) S 4,73 (1H, d, J=2,9 Hz, 1-H), 4,63 (1H, q, J=4,8 Hz, 7-H), 4,4 (1H, m, 2-H), 4,10, 1H, dd, J=4, 10,6 Hz, 6-Heq), 3,33 (1H, m, 3-H), 3,50 (1H, t, J=10,6 Hz, Ó-Hax), 3,3 (2H, m, 4”, 5-H), 1,34 (3H, d, J=4,3 Hz, 3-H).

Exemplo 2. Síntese de 3~desoxi-3-±luoroetoposido (XVIII),

(XVIII)

A uma solução arrefecida à temperatura de -15°C de 462 mg (1,5 mmole) do composto XIV e 534 mg (1 mmole) de 4'-benziloxicarbonil-4'-d^smetilepipodofilotoxina em 30 ml de dicloreto de r

BAD ORIGINAL

etileno adicionaram-se 3^0 jil (3 mrnoles) de eterato de etilo de trifluoreto de boro sob atmosfers de árgon. Agitou-se a solução à temperatura de -15°C durante 1 hora e em seguida adicionargm-se 0,3 ml de piridina. Lavou-se a solução resultante com água, ácido clorídrico a 5 % θ solução aquosa de hidrogeno carbonato de sódio e secou-se sobre sulfato de sódio anidro. Svaporou-se o dissolvente orgânico sob vazio para se obter l,19g um sólido amorfo impuro que foi purificado numa coluna de gel de sílica (2 % MeOH-CI^C^) para se obterem 659 mg de 4-0-(2,4-ó-tri-0-a cetil-3-desoxi-3-fluoro-^D-glucop iranosil) -4-benziloxicarbonil-4-desmetil-epipodofilotoxina (XIX). (Rendimento:

%).

Submeteu-se a refluxo durante 20 horas uma suspensão de 412 mg (0,5 mmole) do composto XIX e 1,24 mg (5,7 mrnoles) do di-hidrato de acetato de zinco em 3θ ml de metanol. A mistura foi concentrada sob vazio e o resíduo ressuspenso em 70 ml de cloreto de metileno e 0,5 ml de AcOH, foi lavada com água e solução aquosa de hidrogeno carbonato de sódio, foi seca sobre sulfato de sódio anidro, e o dissolvente orgânico foi evaporado sob vazio para se obter 370 mg de 4-0-(3-desoxi-3-fluoro-£ -D-glucopiranosil)-4'-desmetilepipodofilotoxina (XX) sob a forma de um sólido amorfo o qual, sem mais purificação, foi em segui, da submetido a etilidenação.

A uma suspensão de 370 mg do sólido amorfo em 70 ml de cloreto de metileno foi adicionado 0,2 ml de acetaldeído-acetaldlmetílico e uma gota de ácido sulfúrico concentrado. Após agitação durante 5 horas à temperatura ambiente, a mistura foi lavada com solução aquosa de hidrogeno carbonato de sódio e foi seguidamente seca sobre sulfato de sódio anidro. 0 dissolvente orgânico foi evaporado sob vazio fornecendo 1Ó0 mg de um gó lido amorfo que se purificou por coluna de gel de sílica (2 % MeOH-C^CI^) para se obter 87 mg de 3^-desoxi-3-fluoroetoposido (XVIII) (rendimento: 29 %) sob a forma de cristais in colores, mediante recristalizaçào em metanol.

PF 235-287°C. Pureza calculada 95 % por HPLC.

RMN ¹H (900 MHz, CDCl^) á 9,70 (IH, q, J=5,l Hz, 7-H), 9,66 (IH, d, J=7,7 Hz, 1-H), 9,59 (IH, dt, J=8,9 £ 53,5 Hz,

3-H), 9,2 (IH, m, 6-Heq), 3,68 (IH, dt, J=2,ó & 8,9 Hz,

2-H), 3,60 (IH, t, J=10,3 Hz, 6-Hax), 3,59 (lH,t, J=9,3 Hz, 9-H), 3,32 (IH, m, 5-H), 2,90 (IH, d, J=2,ÓHz, 2-0H).

Reiν;

Claims (5)

1. REIVINDICAÇÕES

   1.- Processo para a preparação de compostos de fórmula geral na qual y representa um grupo alquilo C₂__1Q; alcenilo-C₂__1Q; cicloalquilo ; 2-furilo; 2-tienilo; arilo aralquilo C₂_₁₄; ^ou aralcenilo Cg_₁₄ comportando cada um dos núcleos aromáticos, eventualmente, um ou mais substituinte(s) escolhido(s) de entre átomos de halo géneo ou grupos alquilo C^_g, alcoxi C^_g, hidroxi, nitro ou amino; e

   R^ representa um átomo de hidrogénio; ou R^ e R^ representam, cada um, um grupo alquilo C^_g,· ou R^ e Rg formam, conjuntamente com o átomo de carbono a que estão ligados, um grupo cicloalquilo um dos símbolos Rg e R^ representa um grupo hidroxi e o outro representa um átomo de flúor;

   Rg representa um átomo de hidrogénio ou um grupo protector da função fenol; e representa uma ligação glucosídica ou p ;

   caracterizado pelo facto:

   a. de se fazer reagir um composto de fórmula geral na qual R^ representa um grupo protector da função fenol, com um composto de fórmula geral na qual um dos símbolos R'^ θ R¹^ representa um grupo hidroxi protegido e o outro representa um átomo de flúor e A representa um grupo hidroxi protegido ou dois grupos A, considerados conjuntamente, representam um radical de fórmula geral R^R₂C(/ na qual R^ e R^ têm os significados definidos antes, no seio de um dissolvente orgânico e na presença de um agente de acoplamento, para se obter um composto de fórmula geral antes e R^ representa um grupo protector da função fenol;

   b. quando os dois grupos A representam conjuntamente o radical de fórmula geral , de se eliminar os grupos protectores das funções hidroxi e fenol para se obter um composto de fórmula geral IV na qual R^ representa um átomo de hidrogénio; ou de se eliminar selectivamente o grupo protector da função hidroxi para se obter um composto de fõrmula geral IV na qual R^ representa um grupo protector da função fenol; ou

   c. quando A representa um grupo protector da função hidroxi, de se eliminar os grupos protectores da função hidroxi e eventualmente o grupo protector da função fenol; de se fazer reagir o composto intermediário desprotegido com um composto de fõrmula geral R^C(O)R₂ na qual e R₂ têm os significados definidos antes, ou com um equivalente acetálico ou cetãlico correspondente, na presença de um catalisador ãcido; e

   d. de se separar os anõmeros das fases b ou c se necessário.
2. 2. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fõrmula geral IV na qual R₂ e R^ representam, cada um, um átomo de hidrogénio e R^ representa um grupo metilo, 2-tienilo ou fenilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
3. 3. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do composto de fórmula caracterizado pelo facto de se utilizar compostos respondentemente substituídos.

   iniciais cor- caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
4. 5.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a pre28 paraçao do composto de fórmula caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
5. 6.- Processo para a preparação de composições farmacêuticas com acção antitumoral, caracterizado pelo facto de se misturar uma quantidade efectiva de um composto de fórmula geral IV, preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1, como ingrediente activo, com um veículo aceitável em farmácia,

   Lisboa

   O ·'· J , 5 de Setembro de 1989,

   - - - X-. Ρ'-υί mc.ν-.π-I tís Ciiziut u-‘ ^r*-Ρ'

   PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE EPIPODOFILITOXRIA-GLUCOSIDOS COMPORTANDO COMO SUES

   TITUINTE UM ÃTCMD DE FLÚOR E DE COMPOSIÇOES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM

   RESUMO

   Descreve-se um processo para a preparação de compostos de fórmula geral no seio de um dissolvente orgânico e na presença de um agente de acoplamento, para se obter um composto de fórmula geral

   b. quando os dois grupos A representam conjuntamente o radical de fórmula geral R^R₂C , de se eliminar os grupos protectores das funções hidroxi e fenol para se obter um composto de fórmula geral IV na qual R^ representa um átomo de hidrogénio; ou de se eliminar selectivamente o grupo protector da função hidroxi para se obter um composto de fórmula geral IV na qual R^ representa um grupo protector da função fenol; ou

   c. quando A representa um grupo protector da função hidroxi, de se eliminar os grupos protectores da função hidroxi e eventualmente o grupo protector da função fenol; de se fazer reagir o composto intermediário desprotegido com um composto de fórmula geral R^C(O)R2 ou com um equivalente acetãlico ou cetãlico corresponente na presença de um catalisador ácido; e

   d. de se separar eventualmente os anõmeros das fases b ou c.

   Estes compostos são úteis como agentes antitumorais.