PT86433B - Processo para a preparacao de derivados de acidos tiol-carboxilicos - Google Patents

Description

em que é hidroxilo; alcoxilo; ariloxilo.; aralquiloxilo; -NRgRy em que Rg e R? são hidrogénio ou alquilo, ou Rg e R? juntamente com o átomo N a que estão ligados formam um anel de 5 a 7 membros com um heteroátomo facultativo; -NHCH(Rg) CORg em que Rg é hidrogénio; alquilo facultativamente substituído por hidroxilo, alcoxilo, -NRgR?, guanidina, CO₂H, | C0NH₂, SH, ou S-alquil; ou CF^-Ar em que Ar é arilo facultativamente substituído; e Rg é hidroxilo, alcoxilo ou -NRgR?;

R₂ é hidrogénio ou acilo; Rg é alquilo Cg_g R^ é hidrogénio; alquilo -CH₂R_1Q em que R₁₀ é fenilo ou heteroarilo faculta tivamente substituído; ou -CH(R^₂60-R^ em que R^ é hidro | génio; alquilo; ou -CH₂Ph em que Ph é fenilo facultativamente substituído; e R₁₂ é hidrogénio ou alquilo; Rg ê hidrogénio; alquilo, ou -CH(R^₃)COR^em que R^g é hidrogénio ou aj_ quilo; e R₁₄ é hidroxilo, alcoxilo ou -NRgR?.

Estes compostos são úteis em medicina como inibidores da colagenase.

processo de preparação consiste, por exemplo em qe fazer reagir um composto de fórmula (III)

	o
R-
II ΤΓ		“5
0 0
		(III)
com o tiol L^-SH em que é um	grupo convencional protector
de enxofre, seguido, no caso em	que	R2 ê hidrogénio, de cli-

vagem do grupo Lj.

A presente invenção refere-se a no vos derivados do ácido tiol-carboxí1ico, processos para a sua preparação e sua utilização em medicina. Em particular, a presente invenção refere-se à sua utilização como inibidores da colagenase para tratar doenças artríticas e outras.

A gama de aplicações terapêuticas dos inibidores de colagenase descrita adiante, reflete o papel fundamental do colagénio na matriz de tecido conjuntivo através do corpo, e estende-se a muitas doenças que primâ riamente não se devem à destruição do colagénio mas envol vem a remodelação de tecidos, uma vez que estas serão tam bém susceptíveis à intervenção clinica com inibidores de co lagenase. Em particular, a inibição de colagenagens liberta das a partir de fibroblastos sinoviais e da pele, condrócitos, células mononucleares periféricas, queratinócitos e te eido da gengiva, assim como a inibição de colagenase armazenada em leucócitos polimorfonucleares (PMNLs) deverá ser de valor terapêutico, e os presentes compostos são vistos como tendo aplicação contra estas colagenases e outras relaciona, das, de mamíferos.

Especificamente, os inibidores de colagenase fornecerão tratamentos úteis para doenças artríti. cas como a artrite reumatóide e osteoartrite, reumatismo de tecidos moles, policondrites e tendinites; para doenças de reabsorção dos ossos como a osteoporose, doença de Paget, hipertaratiroidismo e colesteatoma; para as classes recessj. vas de'^,epidermolysis bullosa distrófica; para doenças perio dentais e consequências relacionadas de produção de colagenase gengival ou de produção de colagenase PMNL a seguir a infiltração celular em gengivas inflamadas, para ulceração da córnea E.G. a induzida por alcalis ou outras queimaduras, por radiação, por deficiência em vitamina E ou deficiência retinoide; e para quimioterapia sistémica do cancro, onde a colagenase tem sido implicada na neovascularização requerida para suportar a sobrevivência e crescimento do tumor, e na penetr^ ção de células tumorais através da membrana de revestimento das paredes vasculares durante a metastase. Um inibidor de colagenase pode também ser usado em algumas condições pós-operatórias como a anastomose do cólon em que os níveis de colagenase aumentam.

Como exemplo particular do valor terapêutico dos inibidores de colagenase, as doenças artrit^ cas crónicas levam à perda extensiva de colagénio e de compo nentes de proteoglicanos da cartilagem e osso das articula ções afectadas. As metaloproteases neutras, especialmente as colagenases e proteoglicanases, são correntemente consideradas como sendo os enzimas envolvidos mais importantes.

Estes enzimas têm sido detectados em extractos de tecido sinovial e de cartilagem, e têm tam bém sido extensivamente estudados em culturas de tecidos de£ tes orgãos. A parte do controlo da biossíntese ou secreção dos enzimas, a regulação natural mais significativa da actividade da colagenase e proteoglicanase no estado normal e doente, é considerada como sendo a produção de inibidores como o Tecido Inibidor de Metaloproteases (TIMP) e a o^-macroglobina. Um desequilíbrio entre os niveis de enzimas proteolíticos e inibidores naturais permitirá o inicio da des truição dos componentes do tecido conjuntivo.

A restauração do equilíbrio enzima-inibidor por matamento com inibidores sintéticos de colagenase oferece assim uma terapia útil para uma larga gama de doenças de tecidos conjuntivos em que a actividade colagenolítica é um factor causativo ou de maior contribuição.

A Patente dos EUA N⁹ 4595700 apresenta compostos de fórmula (A)

	H .CONHR. /N \c/ 4
SH £	R3

(A) em que:

R^ representa alquilo inferior, fenilo ou fenilalquilo inferior ;

R₂ e R₄ representam alquilo inferior; e

R₃ representa alquilo inferior, benziloxialquilo, alcoxibenzilo ou benziloxibenzilo em que a parte oxialquilo ou alcoxilo contem 1 a 6 átomos de carbono e a, b e c representam cen. tros quirais com estereoquimica facultativa R ou S.

Estes compostos são descritos como inibidores da colagenase, úteis no tratamento de artrite reij matóide e doenças relacionadas em que a actividade colagenolítica é um factor contribuinte.

Uma nova classe de derivados do âcido tiol-carboxí1ico foi agora descoberta, que é inibidora da colagenase e assim de utilidade potencial no tratamento de doenças em que actividade colagenolítica e a remodelação de tecidos está implicada.

De acordo com a presente invenção ê fornecido um composto de fórmula geral (I), ou um seu sal, solvato ou hidrato:

Ο

u em que:

R₁ é -OH; alcoxilo, ariloxilo; aralquiloxilo; -NRgR?, em que cada Rg e Ry ê hidrogénio ou alquilo, ou Rg e R? juntamente com o átomo de azoto a que estão ligados formam um anel de

5, 6 ou 7 membros com um átomo de azoto facultativamente substituído no anel; ou um grupo

-NH-CH-C-Rg ^8 em que R_Q é hidrogénio; alquilo facultativamente substituído por -OH, alcoxilo, -NRgR?, guanidina, -C0₂H, CONH₂, SH, ou S-alquilo; ou -CH₂-Ar em que Ar é arilo facultativamente substituído; e R_g é alcoxilo; OH; ou -NRgR?;

R₂ é hidrogénio; ou acilo, como -^-alquilo ou -$-Z, em que Z é arilo facultativamente substituído;

Rg é alquilo Cg_g;

R₄ é hidrogénio; alquilo; -CH₂- ^R10 em que R_1Q é fenilo ou he teroarilo facultativamente substituídos; ou um grupo

-CH-O-R_n

I ^r12 em que ^R11 ê hidrogénio; alquilo; ou -CHg-Ph em que Ph ê fenilo facultativamente substituído; e R₁₂ θ hidrogénio ou alquilo; e R₅ é hidrogénio; alquilo; ou um grupo

-CH-COR14 ^13 em que R^ é hidrogénio; ou alquilo; e R^ ê hidrogénio; alcoxilo; ou -NRgR?.

A menos que outra forma especificado, cada grupo alquilo ou alcoxilo ê um grupo C^g, mais preferivelmente 0^_θ, θ pode ser uma cadeia linear ou ramificada.

Os substituíntes facultativos para os grupos arilo, fenilo e heteroarilo podem ser seleccionados entre OH, alquilo C^_g, alcoxilo 0^_θ e halogénio.

Exemplos de R₁ são hidroxilo; alcoxilo 0^_θ como metoxilo, etoxilo ou t-butoxilo; benziloxilo; e -NRgRj em que R_g e hidrogénio e R? é hidrogénio ou alquilo

I

C^_g como metilo ou etilo; ou -NRgR? é N¹-meti 1-N-piperazin^ lo ou N-morfolinilo. Outros exemplos de R₁ são -NH-CH^-COOH, -NH-CH₂-C0NH₂, -NH-CH₂~C0₂Et, NH-CH^CO^Bu, -NH-CH-C0₂H, e -NH-CH_o-C0_o ^tBu. ^XBu • I 2 2 *Bu

R₁ é preferivelmente alcoxilo, como alcoxilo C^_₄, especialmente metilamino ou -NH-CH₂-C0₂H.

Quando R₂ é -C-Z, Z é preferivelmente um grupo fenilo facultativamente substituído.

Exemplos de R₂ são hidrogénio; -ÍLcHg e benzoílo.

Rg é preferivelmente um grupo alquilo C^, como n-butilo, iso-butilo ou sec-butilo, especialmente iso-butilo.

Quando R₄ é -CH₂-R^q e R₁₀ é heteroarilo, os valores para R₁₀ incluem heteroarilo monocíclico de 5 a 6 membros e bicíclico de 9 ou 10 membros, dos quais o heteroarilo biciclico de 9 a 10 membros é preferido.

Adicionalmente, o heteroarilo de 5 ou 6 membros e o bicíclico de 9 ou 10 membros, contém um dos dois heteroátomos seleccionados entre azoto, oxigénio e enxiô fre que no caso de serem mais do que um heteroátomo podem ser iguais ou diferentes. Quando R^é um heteroarilo bicíclico de 9 ou 10 membros os dois anéis são preferivelmente fundidos com um anel de 5 a 6 membros contendo um heteroátomo so1itârio.

R₄ é preferivelmente iso-butilo; benzilo; ou alcoxibenzilo 0^_θ, como 4-metoxibenzilo; 1-(benziloxi)etilo ou heteroarilmetilo bicíclico de 9 ou 10 mem -9-

bros fundido como 3-indolilmetilo.

Exemplos de R₅ incluem hidrogénio; alquilo como metro ou etilo, preferivelmente; e 1-(metoxicar boni1)et ilo.

Os compostos de fórmula (I) podem formar sais com bases e.g. hidróxido de sódio. Quando um áto mo de azoto básico está presente, os compostos de fórmula (I) podem formar sais de adição ácida e.g. com ácido clorídrico. Tais compostos são parte da presente invenção.

Quando os compostos de fórmula (I), ou seus sais, formam solvatos como hidratos, estes também for mam um aspecto da invenção.

Os compostos de fórmula (I) têm pelo menos um centro assimétrico e portanto existem em mais do que uma forma estéreo-isomérica. A invenção estende-se a todas essas formas e a suas misturas, incluindo racematos, e misturas diastéreo-isoméricas.

Os isómeros preferidos são os que têm configuração S no centro quiral marcado com um asterisco na fórmula (I).

Os compostos de fórmula I ou os seus sais, solvatos ou hidratos estão preferivelmente em for. ma farmacêuticamente aceitável ou substancialmente pura. Por forma farmacêuticamente aceitável entende-se, inter alia, um nível de pureza farmacêuticamente aceitável excluindo aditivos farmacêuticos normais como diluentes e veículos, e não incluindo material considerado tóxico a níveis de dosagem normal .

Uma forma substancialmente pura conterá geralmente pelo menos 50% em peso, preferivelmente 75%,

mais preferivelmente 90% e ainda mais preferivelmente 95% ou 99% ou mais do composto de fórmula I ou seus sais ou solvatos.

Uma forma farmacêuticamente aceitâ vel preferida é a forma cristalina.

A presente invenção fornece os com postos de fórmula (I) ou seus sais ou solvatos farmacêuticamente aceitáveis para utilização como agentes terapêutica mente activos, particularmente como agentes para tratamento de dosagens musculo-esqueléticas resultantes de actividade colabenolítica, particularmente doenças artríticas, e remodelação de tecidos, e também para a quimioterapia sistémica do cancro.

A presente invenção também fornece um processo para a preparação dum composto de fórmula (I) em que R2 ê hidrogénio, que compreende a clivagem dum grupo L dum composto de fórmula (II):

(II) em que L é que ê um grupo de protecção de enxôfre convencional ou L? que é um grupo R-S- em que R é qualquer resíduo orgânico de tal forma que o grupo R-S- dê uma libação dissu]_ feto clivável, é Rp Rg, R₄ e R₅ são como defenidos para a

fórmula (I).

Tipicamente, um grupo de protecção é um grupo benzilo substituído, como alcoxibenzilo e.g. 4-metoxibenzilo ou um grupo acilo alifãtico ou arilo como acetilo ou benzoílo. Quando é acilo é evidentemente idêntico a R₂, assim estes compostos de fórmula (II) são eles próprios compostos da invenção. Quando L é R-S- então tipicamente o composto de fórmula (II) ê um dimero do composto de fórmula (I) em que Rg é hidrogénio.

Quando L é Lp e é um grupo de protecção de enxôfre benzilo substituído, como 4-metoxibenzilo, então pode ser removido por tratamento com acetato de mercúrio em ácido trifIuoroacétíco contendo anisolo seguido por reacção com sulfeto de hidrogénio em dimetiIformamida num processo análogo ao descrito em Chem. Pharm. Buli. 1957, 26, 1576.

Quando é um grupo acilo pode ser removido por tratamento com uma base, pode por exemplo amónia aquosa ou hidróxido de sódio aquoso diluído, ou por tratamento com um ácido, por exemplo ácido clorídrico metanólico.

Quando é Lg o composto dimerizado pode ser cortado na ligação dissulfeto por tratamento com zinco e ácido clorídrico ou passando sulfeto de hidrogénio através da solução.

Podem também ser usados outros métodos convencionais para remover os grupos de protecção do ein xôfre ou quebrar ligações dissulfeto.

Os compostos de fórmula (II) em que L é L₁ podem ser preparados tratando um composto de fórmula (III):

(III) en que Rp Rg, R^ e Rg são como definidos na fórmula (I) com um tiol de fórmula (IV):

L₁ - SH (IV) em que é como definido na fórmula (II). Quando é Rg, os compostos de fórmula (II) assim produzidos são compostos da invenção.

Os compostos de fórmula (11) podem também ser produzidos tratando um composto de fórmula (V):

(v)

em que L, R^ e Rg são como definidos na fórmula (II), com um composto de fórmula (VI):

(vi) em que R^ e R^ são como definidos na fórmula (I).

A reacção é desenvolvida preferivej. mente na presença dum agente de ligação como a N,N-diciclo-hexilcarbodi imida.

Os compostos de fórmula (II) em que L é I_₂ podem também ser preparados por ligação oxidativa, com iodo ou oxigénio, dum composto de fórmula (I) em que R₂ é hidrogénio.

Os compostos de fórmula (II) podem ser convertidos noutros compostos de fórmula (II) mantendo o mesmo grupo L, cujo grupo por sua vez pode ser clivado para formar compostos da invenção em que R₂ é hidrogénio.

Por exemplo, aqueles compostos de fórmula (II) em que R^ é -OH podem ser preparados sob condições ácidas por hidrólise de compostos em que R^ é alcoxilo, ariloxilo ou aralquiloxilo ou por hidrogenólise de compostos em que R₁ é benziloxilo ou benziloxilo substituído na presença dum catalizador como o negro de paládio.

Aqueles compostos de fórmula (II) em que é -NRgR? podem ser preparados a partir de compostos em que R₁ é -OH por tratamento dos últimos compostos com uma amina de fórmula NHRgR? na presença dum agente de ligação como a N,N-diciclo-hexi1carbodiimida ou N-eti1-N¹-dimetilaminopropilcarbodi imida.

Compostos de fórmula (II) em que R^ é -NH-CH(Rg)-CORg podem ser preparados similarmente a partir de compostos em que R₁ é OH por tratamento com derivados de amina de fórmula NH₂CH(Rg)C0Rg em que Rg ê um grupo alcoxilo ou amina, seguido por hidrólise para dar um grupo hidroxilo Rg, se desejado.

Adicionalmente, compostos da invenção em que R₂ é acilo podem ser convertidos noutros compostos da invenção com clivagem concomitante do grupo acilo para dar compostos de fórmula (I) em que R₂ é hidrogénio.

Por exemplo, esses compostos de fór mula (I) em que R^ é OH e R₂ é hidrogénio podem ser preparados por hidrólise de compostos em que R₁ é alcoxilo, ariloxilo ou aralquiloxilo e R₂ é acilo sob condições básicas como o tratamento com hidróxido de sódio diluído.

Os compostos intermédios de fórmula (III) podem ser preparados tratando um composto de fórmula (VII):

*3

OH (VII)

-15em que R^ e Rg são como definidos na fórmula (I), com um composto de fórmula (VI) como definido anteriormente.

Os tióis de fórmula (IV) são compostos conhecidos.

Os compostos intermédios de fórmula (V) podem ser preparados tratando um composto de fórmula (IV).

Pode ser necessário ou conveniente proteger a função carboxilo nos compostos de fórmula (VII), por exemplo por esterificação, antes do tratamento com o tiol de fórmula (IV) e subsequentemente remover o grupo protector sob condições ácidas.

Os compostos de fórmula (VI) são tanto derivados conhecidos de aminoácido como podem ser feitos a partir desses derivados por métodos conhecidos.

Os intermédios de fórmulas (III), (V) e (VII) aqui apresentados são nalgumas formas compostos novos e formam um aspecto da presente invenção assim como os processos descritos para a sua preparação.

Quando se possam obter, os sais farmacêuticamente aceitáveis dos compostos de fórmula (I) podem ser formados convencionalmente por reacção com o ácido ou base apropriados. Os solvatos podem ser formados por cristaliza^ ção a partir do solvente apropriado.

Como préviamente mencionados, os com postos de fórmula (I) existem em mais do que uma forma diastéreoisomérica. Quando os processos da invenção produzem suas misturas, os isómeros individuais podem ser separados um do outro por cromatografia, e.g. H.P.L.C.

Alternativamente, compostos diastério-isoméricos separados de fórmula I podem ser obtidos usando materiais de partida estéreo-isoméricamente puros ou por separação os isómeros dos intermédios desejados em qualquer fase do processo sintético global, e convertendo esses intermédios em compostos de fórmula (I).

A presente invenção ainda fornece uma composição farmacêutica, que inclui um composto de fórmula (I), ou um seu sal, solvato ou hidrato farmacêuticamente aceitável, e um veículo farmacêuticamente aceitável.

Uma composição desta invenção é util no tratamento de reumatismo e artrite e no tratamento de outras condições colagénolíticas.

Uma composição da invenção, que pode ser preparada por mistura, pode conter um diluente, ligante, carga, desintegrante, agente aromatizante, agente corante, lubrificante ou conservante de maneira convencional. Estes excipientes convencionais podem ser empregues de forma convencional, por exemplo como na preparação de composições de inibidores de enzimas pépticos relacionados como o inibidor ACE captopril.

Uma composição da invenção pode ser adaptada para administração oral, topical, percutânea, rectal ou parental-intravenosa, intramuscular, sub-cutânea, intradér mica ou intra-articular, mas a administração oral é preferida.

Preferivelmente, uma composição far macêutica da invenção estâ em forma de dosagem unitária e numa forma adaptada para utilização no campo médico ou veterinário. Por exemplo, tais preparações podem estar numa forma de embalagem acompanhada por instrucções escritas ou impressas para utilização como agente no tratamento ou profilaxia

de qualquer das perturbações mencionadas anteriormente.

A gama de dosagens convenientes para os compostos da invenção pode variar de compostos para com posto e pode depender da condição a ser tratada. Dependerá também, inter alia, da relação da potência em relação à absor babilidade e do modo de administração escolhido.

composto ou composição da invenção pode ser formulado para administração por qualquer via, dependendo a via preferida da perturbação para o qual o trata_ mento é pretendido, e está preferivelmente numa forma de dosagem unitária ou numa forma em que um paciente humano a possa administrar a si próprio numa dosagem isolada.

As composições podem, por exemplo, estar na forma de comprimidos, cápsulas, saquetas, ampolas, pós, grânulos, grageias, pós reconstituíveis, ou preparações liquidas, por exemplo soluções ou suspensões, ou supositórios.

As composições, por exemplo as convenientes para administração oral, podem conter excipientes convencionais como agentes ligantes, por exemplo xarope, acácia, gelatina, sorbitol, tragacanta ou polivinilpirrolidona; cargas, por exemplo lactose, açúcar, amido de milho, fosfato de cálcio, sorbitol ou glicina; lubrificantes de comprimidos, por exemplo estearato de magnésio; desintegrantes, por exemplo amido, polivinilpirrolidona, glicolato de amido sódico ou celulose microcristalina; ou agentes de preparação farmacêuU camente aceitáveis como o laurilsulfato de sódio.

As composições sólidas podem ser obtidas por métodos convencionais de mistura, enchimento, elaboração de comprimidos e similares. Podem ser usadas opera ções de mistura repetidas para distribuir o agente activo atra vés dessas composições empregando grandes quantidades de car-18-

gas. Quando a composição está na forma dum comprimido, pó, ou grageia, pode ser usado qualquer veículo conveniente para formular composições farmacêuticas sólidas, sendo exemplos o estearato de magnésio, amido, glucose, lactose, sacarose, farinha de arroz e pó de giz. Os comprimidos podem ser reves tidos de acordo com métodos bem conhecidos da prática farmacêutica normal, em particular com um revestimento entérico. A composição pode também estar na forma duma cápsula ingerível, por exemplo de gelatina contendo o composto, se desejado com um veículo ou outros excipientes. Por exemplo, numa cápsula de gelatina dura contendo a quantidade pretendida dum composto da invenção na forma dum pó ou granulado em mistura intima com um lubrificante, como estearato de magnésio, uma carga, como celulose microcristalina, e um desintegrante, co mo o glicolato de amido sódico.

As composições para administração oral como líquidos podem ser na forma de, por exemplo, emulsões, xaropes ou elixires, ou podem ser apresentados como um produto seco para reconstituição com água ou outro veículo conveniente antes da utilização. Tais composições líquidas podem conter aditivos convencionais como agentes de suspensão por exemplo sorbitol, xarope, metilcelulose, gelatina, hidroxietiIcelulose, carboximetilcelulose, gel de estearato de alumínio, gorduras hidrogenadas comestíveis; agentes emulsionantes, por exemplo lecitina, sorbitano mono-oleato, ou acácia; veículos aquosos ou não aquosos, que incluem óleos alimentares, por exemplo óleo de amêndoa, óleo de côco fraccionado, ésteres oleosos, por exemplo ésteres de glicerina, ou propilenoglicol, ou álcool etílico, glicerina, água ou solução de cloreto de sódio normal; conservantes, por exemplo p-hidroxibenzoato metílico ou propílico ou ácido sórbico; e se desejado agentes aromatizantes ou corantes convencionais.

Os compostos desta invenção podem também ser administrados por uma via oral. De acordo com o processo farmacêutico de rotina, as composições podem ser for.

muladas, por exemplo para administração rectal como um supositório ou para administração parenteral numa forma injectável. Para injecção, os compostos da invenção podem ser apresentados numa solução, suspensão ou emulsão aquosa ou não aquosa num líquido farmacêuticamente aceitável, e.g. âgua sem pirogénios estéril ou um óleo parenteralmente aceitável ou uma mistura de líquidos, que podem conter agentes bactériostáticos, anti-oxidantes ou outros conservantes, tampões ou solutos para tornar a solução isotónica com o sangue, agentes espessantes, agentes de suspensão ou outros aditivos farmacêuticamente aceitáveis. Tais formas serão apresentadas em doses unitárias estéreis como ampoulas ou sistemas de injecção regeitáveis ou em formas multí-dose como uma garrafa da qual a dose apropriada pode ser retirada ou uma forma sólida ou concentrada que pode ser usada para preparar uma formulação injectável.

Para administração tópica e percutânea, as preparações podem também ser apresentadas como uma pomada, creme, loção, gel aspersão, aerossol, loção, pintura para a pele ou emplastro.

Uma dose unitária para doenças in1 flamatórias conterá geralmente de 10 a 1000 mg e preferivelmente conterá de 10 a 500 mg, em particular 10, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, ou 500 mg. A composição pode ser administrada uma ou mais vezes ao dia, por exemplo 2, 3 ou 4 vezes diárias, de forma a que a dose diária para um

I adulto de 70 kg seja normalmente da ordem dos 10 a 3000 mg.

Alternativamente, em particular para injecção, a dose unitária conterá de 2 a 200 mg dum composto da invenção e ser administrada em múltiplos, se desejado, para dar a dose diária desejada.

A presente invenção fornece adicionalmente um método para tratar uma condição colagenolítica como o reumatismo e/ou condições artríticas, ou cancro, ou

outras doenças em que a destruição de componentes de tecidos conjuntivos mediada por enzimas tem o seu papel em mamíferos como seres humanos, que se compreende a administração duma quantidade eficaz dum composto de fórmula (I) ou um seu sal, solvato ou hidrato farmacêuticamente aceitável, ao mamífero.

A presenta invenção também fornece a utilização dum composto de fórmula (I) ou um seu sal, solvato ou hidrato farmacêuticamente aceitável, para a produção dum medicamento para utilização como substância terapêutica activa, particularmente no tratamento de condições colagenolíticas, como reumatismo, cancro, desordens de ossos, doenças da pele, doença periodontal ou ulceração córnea em mamíferos.

As seguintes Descrições e Exemplos ilustram a preparação de compostos da invenção e os subsequentes dados biológicos ilustram a sua actividade farmacológica. Todas as temperaturas são expressas em ^SC.

DESCRIÇÃO 1

2-(2-MetiIpropi1)-3-oxopentanodioato de dietilo (D1)

Foi adicionado 3-oxopentanodioato de dietilo (45,5 ml, 0,25 mol) a uma suspensão de etóxido de magnésio (preparado a partir de aparas de magnésio(9 g, 0,375 mol) e iodo (0,1 g) em etanol seco (275 ml)), e a mistura foi aquecida durante 90 min..Foi adicionado 1-bromo-2-meti1 propano (54 ml, 0,5 mol), e a reacção foi aquecida ao refluxo durante 16 h. Mais 1-bromo-2-metilpropano (54 ml, 0,5 mol)

foi adicionado à mistura fervente, e após 3 h o solvente foi evaporado in vacuo. 0 resíduo foi dividido entre ácido clorídrico 2N e éter. Após extracção da fase aquosa com éter, as fases orgânicas misturadas foram lavadas sucessivamente com água, bicarbonato de sódio a 5%, água e solução saturada de cloreto de sódio, depois foram secas (Na₂S0₄) e evaporadas in vacuo. 0 resíduo foi destilado para dar o composto em título como um óleo incolor (40 g, 62%), p.e. 118-120^eC (1 mm Hg).

ò(CDC1₃): 0,9 (6H, d, J=6Hz), 1,25 (6H, t, J=7Hz), 1,4-1,9 (3H, m), 3,5 (2H, s), 3,7(1H, d, J=9Hz) e 4,2 (4H, q, J=7Hz).

DESCRIÇÃO 2

3-hidroxi-2-(2-metílpropil)pentanodioato de dietilo (D2)

Foi adicionado boro-hidreto de sódio (1,1 g, 29 mmol) a uma solução arrefecida em gêlo de 2I -(2-metilpropil)-3-oxopentanodioato de dietilo (7,5 g, 29 mmol) em etanol (75 ml). A mistura foi agitada a 5-10⁹C durante 2 h, depois foi adicionado lentamente ácido clorídrico 2N (18 ml) a 0^aC, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 45 min.. A mistura foi diluída com água

I (400 ml), depois foi extraída com acetato de etilo (4x100 ml).

Os extractos foram lavados com água (2x100 ml) e solução saturada de cloreto de sódio (100 ml), depois secos (Na₂S0₄) e evaporados in vacuo para deixar o composto em título como um óleo (7,5 g, 100%).

ó(CDClg): 0,9 (6H, d, J=5Hz), 1,15 (6H,t, J=7Hz), 1,1-1,8 (3H, m), 2,2-2,7 (3H, m), 2,2-2,7 (3H, m), 3,3 (1H, brs), 3,7-4,1(1H, m) e 4,1 (4H, q, J=7Hz).

-22DESCRIÇÃO 3

Ácidos 2- e 4-(2-metilpropi1)pent-2-enodióico (D3)

Foi adicionado 3-hidroxi-2-(2-metij_ I propi1)pentanodioata de dietilo (26 g, 100 mmol) a uma suspensão em agitação de pentóxido de fósforo (21,3 g, 150 mmol) em benzeno seco (220 ml), e a mistura foi aquecida ao refluxo durante 3 h. Foi adicionada água (200 ml) à mistura arrefecida para separar a goma castanha. As camadas foram sepaJ radas e a fase aquosa foi extraída com éter (4x150 ml). As fases orgânicas misturadas foram lavadas com água (150 ml) e solução saturada de cloreto de sódio (300 ml), depois foram secas (NagSO^) e evaporadas in vacuo para deixar um óleo ca.s tanho.

óleo anterior foi dissolvido numa solução de hidroxido de potássio (16,8 g, 300 mmol) em 80% de etanol (300 ml), e a mistura foi aquecida ao refluxo durante 3 h. 0 etanol foi evaporado in vacuo e o resíduo foi diluído com ãgua (400 ml), e lavado com éter (150 ml). A solução aquosa foi acidificada com ácido clorídrico 5N, depois ) extraída com éter (4x150 ml). Os extractos misturados foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio (2x100 ml), depois foram secos (Na₂S0^) e evaporados in vacuo para deixar uma mistura dos dois compostos em título como um óleo que solidificou lentamente (14,3 g, 77%). A mistura de áciI dos foi usada no passo seguinte sem separação. Contudo foi possível separar os isómeros por cristalização a partir de éter/pentano, o que deu ácido 2-(2-metilpropi1)pent-2-enodióico como um sólido, p. f. 129-135^SC (clorofórmio). 5(DMS0 d₆): 0,9 (6H, d, J=6Hz, 1,3-2,0 (1H, m), 2,15 (2H, d, J=7Hz), 3,2 (2H, d, J=7Hz) e 6,8 (1H, t, J=7Hz).

A evaporação dos líquidos-mãe deu ácido 4-(2-metilpropi1)pent-2-enodióico como um óleo.

6(CDC1₃): 0,9 (6H, d, J=6Hz), 1,4-2,3 (3H,m), 3,4 (1H, m), 5,85 (1H, d, J=15Hz) e 7,0 (1H, dd, J=15, 7Hz).

DESCRIÇÃO 4 (intermediário comum para todos os Exemplos)

Anidrido 2-(2-metilpropi1)pent-2-enodicarboxí1ico (D4)

Uma mistura de ácidos 2- e 4-(2-meti lpropi1)pent-2-enodióico (14,3 g, 77 mmol) em anidrido acé tico (40 ml) foi aquecida sob refluxo durante 2 ’/₂ h. 0 anidrido acético foi evaporado in vacuo para deixar um óleo cas. tanho, que foi destilado para dar o composto em titulo como um sólido amarelo de baixo ponto de fusão (5,8 g, 45%), p. e. 145-1552Ç (5mm Hg).

6(CDC1₃): 0,9 (6H, cl, J=6Hz), 1,5-2,4 (3H, m), 3,5 (2H, brd, J=4Hz), 6,5 (1H, t, J=4Hz).

DESCRIÇÃO 5

Acido 4-metoxicarbonil-2-(2-metilpropi1)but-2-enóico (D5)

Anidrido 2-(2-metilpropi1)pent-2-enodicarboxí1ico (960mg, 5,7 mmol) foi dissolvido em ácido sulfúrico concentrado (10 ml), e depois vertido imediatamente em metanol arrefecido em gêlo (50 ml). A solução foi diluída com água (100 ml) e foi extraída com éter (3x50 ml).

Os extractos foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio, depois foram secos (MgSO^) e o solvente foi evapo rado in vacuo para deixar o composto em título como um sólido amarelo claro (960 mg, 84%), p.f. 40-45^sC (hexano). _ò(CDC1₃): 0,9 (6H, d, J=6Hz), 1,4-2,0 (1H, m), 2,2 (2H, d, J=6Hz), 3,55 (2H, d, J=7Hz), 6,2 (1H, t, J=7Hz) e 9,6 (1H, I brs).

^Vmax (^nuJ⁰¹)^{: 1735}’ ^{1690 e 1635 cm}~¹

DESCRIÇÃO 6 (intermediário para o Exemplo 1)

Ester metílico do ácido 6-metil-4-/'/'/'1-/'(metilamino)carbonil7-2-(4-metoxifeni1)eti ljaminojcarboni17-hept-3-enóico (D6)

N,N-Diciclo-hexilcarbodiimida (515 mg, 2,5 mmol) foi adicionada a uma solução arrefecida em gêlo de ácido 4-metoxicarbonil-2-(2-metilpropil)but-2-enóico | (500 mg, 2,5 mmol) e 0-meti1-L-tirosina-N-metilamida (520 mg,

2,5 mmol) em diclorometano seco (30 ml), e a mistura foi agj_ tada à temperatura ambiente durante 18h. 0 sólido precipitado foi isolado por filtração e lavado com um pouco de diclorometano, depois a solução orgânica foi lavada sucessivamenI te com ácido clorídrico 1N (20 ml), bicarbonato de sódio 1N (20 ml), e água. A solução foi seca (MgSO^) e evaporada in vacuo. A cromatografia de coluna (30 g de sílica) do sólido residual, eluindo com metanol a 5%/diclorometano deu o composto em título (520 mg, 53%), p.f. 142-144^eC (diclorometano/pentano).

$(CDC1₃): 0,82 (3H, cl, J=7Hz), 0,83 (3H, d, J=7Hz), 1,58 (1H, m), 2,18 (2H, d, J=7Hz), 2,72 (3H, d, J=5Hz), 3,02 (2H, m), 3,16 (2H, d, J=7Hz), 3,70 (3H, s), 3,78 (3H, s), 4,57

(1Η, m), 5,70 (1H, brs), 6,32 (1H, t, J=7Hz), 6,45 (1H, d, J=8Hz), 6,83 (2H, cl, J=8Hz) e 7,12 (2H, d, J=8Hz).

DESCRIÇÃO 7

Acido 4-Benziloxícarboni1-2-(2-metilpropi1)but-2-enóico (D7) compostos em título foi preparado com produção de 91% a partir de álcool benzílico pelo método D5.

Uma amostra cristalizada a partir de éter/pentano deu agulhas brancas, p.f. 72-73,5^SC. (Encontrado: C, 69,55; H, 7,38. C|g^H20⁰4 ^ΓΘ(1^υθ^Γθ ^C’ 69,54; H, 7,30%).

ô(CDC1₃): 0,9 (6H, d, J=6Hz), 1,4-2,0 (1H, m), 2,16 (2H, d, J=6Hz), 3,63 (2H, d, J=7Hz), 5,08 (2H, s), 6,23 (1H, t, J= 7Hz) e 7,2 (5H, s).

DESCRIÇÃO 8 (intermediário para o Exemplo 3)

Esteres benzílicos dos ácidos 6-met i 1-4-/771 - (S)-/'(meti lami no)-carboni 17-2-( 4-metoxifeni 1 )eti 17amino_7carboni lJ-hept-2 (e 3)-enóicos

éster benzílico (D7) (26,46 g, 0,096 mole) em acetonitrilo seco (500 ml) sob N₂ foi arrefecido a 09 num banho de gêlo e tratado com 1,1¹-carbonildiimidazolo (15,69g, 0,096 mole) de uma só vez. Após 1h a 0^s, uma solução de O-metil-L-tirosina-N-metilamida (20 g, 0,096 mole) em acetonitrilo seco (200 ml) foi adicionada gôta a gôta com agitação. Após completar a adição a mistura foi maii tida a 0^s durante 1h e depois deixada aquecer até à temperatura ambiente. A agitação continuou durante a noite e depois o solvente foi removido in vacuo e o resíduo tomado em acetato de etilo. Após lavagem com HC1 1N (2x200 ml) e extraindo as fases aquosas combinadas com acetato de etilo (3x100 ml), as fases orgânicas saturadas foram lavadas com água (100 ml), secas com MgSO^ anidro, filtradas e evaporadas até à secura para dar um óleo vermelho. A purificação por cromatografia em gel de sílica com clorofórmio seguido por metanol a 2%/clorofórmio deu os compostos em título como uma goma amarela (41,01 g, 92%). A recristalização duma amostra a partir de acetato de etilo/pentano deu um produto cristalino branco, p.f. 98-101⁵C. (Encontrado: C, 69,38; H, 7,50; N, 5,73. ¢27^34^05 ^rec1^uere 69,51 ; H, 7,34; N, 6,00%).

DESCRIÇÃO 9

Acido 4-meti1aminocarboni1-2-(2-metíIpropi1)but-2-enóilo (D9)

Um ligeiro fluxo de metilamina anidra foi passado através duma solução de anidrido 2-(2-metilpropi1)pent-2-eno-dicarboxí1ico (1,3 g) em éter seco (25 ml) a osc. Após 1h a fonte de metilamina foi removida e a solução foi evaporada até à secura ín vacuo. 0 resíduo foi dissolvido em acetato de etilo e extraído com carbonato de só-

dio aquoso a 10%. A fase aquosa foi acidificada com ácido clorídrico diluído e re-extraída com acetato de etilo. Os extractos foram lavados com âgua, secos (MgSO^), e evaporados atê à secura para deixar o composto em titulo como um sólido (0,75 g, 49%), p.f. 120-122⁹C, após trituração com éter; (Encontrados: C, 60,4; H, 8,5; N, 6,95. C_1QH₁₇N0₃ requere C, 60,3; H, 8,6; N, 7,05%).

^(dg-DMSO): 0,85 (6H, d, J=8Hz), 1,75 (1H, m), 2,15 (2H, d, J=6Hz), 2,7 (3H, d, J=5Hz), 3,3 (2H, d, J=8Hz), 6,05 (1H, t, J=8Hz), 7,8 (1H, brs) e 12,4 (1H, brs).

DESCRIÇÃO 10

Ester terc-butí1ico do ácido 4-metilaminocarbonil-2-(2-metilpropil)-but-2-enóico (D10)

Uma suspensão de ácido 4-metilaminocarbonil-2-(2-metilpropil)but-2-enóico (2,4 g) em clorofór mio (35 ml) foi tratada com um excesso de isobutileno (30 ml) e ácido sulfúrico concentrado (3 gotas) foi adicionado como catalizador. A mistura foi agitada à temperatura ambiente num recipiente vedado durante 8 dias. 0 produto foi purificado por cromatografia em gel de sílica /clorofórmio/pentano (1:1) como eluente.7 para dar o composto em título (2,5 g, 81%), p.f. 35-36⁹C (pentano).

£(CDC1₃): 0,85 (6H, d, J=8Hz), 1,5 (9H, s), 1,7 (1H, m), 2,1 (2H, d, J=8Hz), 2,8 (2H, d, J=6Hz), 3,2 (2H, d, J=10HZ), 5,9 (1H, t, J=10Hz) e 6,5 (1H, brs).

DESCRIÇÃO 11 (intermediário para o Exemplo 7)

Ester terc-butí1ico do ácido 2-(1-benzoílmercapto-2-/metilaminocarboni l/eti1)-4-metiIpentanóico (D11)

Uma mistura de éster terc-butí1ico do ácido 4-metilaminocarbonil-2-(2-metilpropil)but-2-enóico (1,25 g, 4,9 mmol) e ácido tiobenzóico (1,3 g, 9,4 mmol) foi aquecido a 80^eC sob azoto durante 48 h. 0 produto foi cromatografado sob alumina neutra (50 g) usando clorofórmio como eluente para dar uma espuma (0,5 g) contendo o composto em título como constituinte principal.

£(CDC1₃): 0,9 (m), 1,45 (m), 1,45 (m), 1,65 (m), 2,6 (m), 2,8 (d, J=5Hz), 2,82(d, J=5Hz), 3,0 (m), 3,2 (m), 4,3 (m),

5,5 (m), 7,4 (m), 7,55 (m) e 7,95 (m). FAB observado (M + H)⁺ 394. C₂^Hg^N0^S requere M 393.

DESCRIÇÃO 12 (intermediário para o Exemplo 9)

Ester metílico do ácido 6-metil-4-/7‘/'1-(S)-Z~(metilamino)carboni lJ-2-feni leti 17-amino7carboni l_7-hept-2(e 3)-enóico (D12)

Preparado a partir de ácido 4-metoxicarbonil-2-(2-metilpropil)but-2-enóico (2,0 g, 10 mmol) e L-fenilalanina-N-metilamida (1,87 g, 10,5 mmol) como descrito na Descrição 8. 0 produto foi cromatografado sobre gel de sílica com metanol/diclorometano (1:24) como eluente para dar o composto em título (2,5 g, 69%) como uma espuma p.f. 78-83^sC. (Encontrado: C, 66,7; H; 8,2; N, 7,6.

^C20^H28^N2°4 ^recI^{Líere c}> 66,65; H, 7,85; N, 7,74%).

DESCRIÇÃO 13

Acido 6-meti1-4-/7^1 “(S)-f(metílamino)carboni 17-2-(4-metoxífeni 1 )eti ljamíno/carbonil7-hept-3-enóico (D13 )

Uma solução do éster metílico (D6;

7,2 g) em metanol (80 ml) foi tratada com hidróxido de sódio (1,1 g) em âgua (20 ml) e a solução foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A solução foi diluída com água, o metanol foi removido in vacuo e a solução aquosa foi lavada com acetato de etilo. A solução aquosa foi acidificada com HC15N e extraída com acetato de etilo (3x50 ml). Os extractos orgânicos misturados foram secos (NâgSO^), filtrados e o solvente evaporado in vacuo para dar o composto em titulo como uma espuma (6,6 g).

DESCRIÇÃO 14 (intermediário para o Exemplo 22)

Ester terc-butí 1 ico do ácido 6-metil-4-ffZ‘1-(S)-/’(metilamino) carbonilJ-2-(4-metoxifeni1)etí17amínojcarbonilj-hept-2(e 3)-enóico (D14)

Uma solução de ácido 6-meti1-4-/Ζ/Ί-($)-/( meti lamino)-carbonil?-2-(4-metoxif en i 1 )eti 17 amino7carboni17-hept-3-enóico (D 13; 6,6 g) em diclorometano (50 ml) e

excesso de isobutileno foi colocada num recipiente fechado com ácido sulfúrico concentrado durante 7 dias. Após lavagem com uma solução de carbonato de sódio a 10%, seguida de água, os extractos orgânicos foram secos (Na₂S0₄), filtrados e evaporados até à secura para dar um óleo vermelho (4,1 g). A cro matografia de coluna em gel de sílica, eluindo com metanol a 10% clorofórmio deu o composto em título como uma espuma. (Encontrado: C,66,51; H,8,31; N,6,37. ^C24^H36^N2°5 requere: C,66,64; H,8,39; N,6,48%). FAB Observado (M+H)⁺ 433, θ24^Η36^Η2θ5 ^recI^uere M 432.

DESCRIÇÃO 15 (Intermediário para o Exemplo 24)

Esteres metílicos dos ácidos 6-meti1-4-7772-(R)-benziloxi-1-(S)-Λmeti lamino)carboni17propil/amino/carboni lj-hept-2(e 3)-enóicos (D15) éster metílico (D5; 3,1 g) ace tonitrilo seco (75 ml) sob N₂, foi arrefecido a 0^s num banho de gelo e tratado com 1,1'-carbonildiimidazolo (2,74 g) de uma vez. Após 1 h a 0^s, uma solução de 0-benzi1-L-trequina-N-metilamida (3,44 g) em acetonitrilo seco (25 ml) foi adicionada gota a gota. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante a noite, o solvente removido in vacuo e o resí_ duo tomado e acetato de etilo. Após lavagem com HC1 1N (2 χ 25 ml) e extracção das fases aquosas misturadas com acetato de etilo (3 χ 50 ml), as fases orgânicas misturadas foram la_ vadas com água (50 ml), secas (Na₂S0₄), filtradas e evaporadas até à secura para dar um óleo. A purificação por croma I

tografia em gel de sílica, eluindo com clorofórmio, seguido por metanol a 5%/clorofórmio deu os compostos em título como uma espuma (4,4 g).

Encontrado: C,65,51; H,8,03; C, 65,32; H,7,97; N,6,92%).

N,6,80;

θ22^32^2θ5^ΓΘ(:Ι^υθ^Γθ

DESCRIÇÃO 16 (Intermediário para o Exemplo 26)

Ester metílico do ácido 6-metil-4-/'/7'1-(S)-/'~(metilamíno)carboní 1J-2-(3-indo1i1)etil/aminoVcarbonil7-hept-2(e 3)-enóico (D16)

Preparado a partir do ácido 4-me toxicarbonil-2-(2-metilpropi1)but-2-enóico (1,75 g, 8,75 mmol) e L-triptofano-N-meti1amida (2.64 g. 13 mmol) como descrito na Descrição 8. 0 produto foi cromatografado em gel de sílica com metanol/clorofórmio (1:99) como eluente para dar o composto em título (2,8 g, 80%) como uma espuma. P,F. 60-65⁵C.

(Encontrado: C, 66,07; H.7,37; N.10.53.

C, 66,14; H,7.32; N,10,52%).

*22^29^Ν3θ4 ^recl^Liere

-32I

EXEMPLOS

Os compostos do Quadro seguinte foram preparados de acordo com os processos aqui anterior mente descritos.

Todos os compostos têm estéreo química S no centro quiral marcado *.

As letras A a D, sob o título Isómero, referem-se a diasteréomeros singulares. Onde não é indicada letra, o composto foi isolado como uma mistura de diastereómeros.

Todas as estruturas foram con firmadas por análise espectroscópica e elementar.

QUADRO

CONHMe

Examplo R]___________R? Rd____________Isomero P.F.(^UC)

1	-OMe	-COMe	4-ΜβΟ-ΟθΗ4ΟΗ 2-	A B	162-165 116-118
2	-OMe	H	4-MeO-C6H4CH2-	-	80-86
				A	193-196
				B	-
3	-OCH2Ph	-COMe	4-MeO-CgH4CH2-	A	89-90
4	-OCH2Ph	H	4-MeO-C6H4CH2-	A	199-201
				B	133-135
				C	guma
				D	-
5	-OH	-COMe	4-MeO-C6H4CH2-	A	92-95
				B	106-110
6	-OH	H	4-MeO-C6H4CH2-	A	171-176
				B	107-110
7	-NHMe	-COPh	4-MeO-C6H4CH2-	-	140-144
8	-NHMe	H	4-ΜθΟ-ΟθΗ4ΟΗ2-	-	175-190
				A	243-250
9	-OMe	-COMe	c6h4ch2-	-	188-189
10	-OMe	H	CôH4CH2-	-	169-171
11	-NHMe	-COMe	4-MeO-CgH4CH2-	-	195-199
12	-NHCH2CO2 tBu	-COMe	4-MeO-C6H4CH2-	A	192-194

Exemplo Ri		R4 Isómero P.F.(°Ç)
13	-NHCH2CO2 tBu	H	4-MeO-CgH4CH2-	A	223-226
14	-NHCH2CO2H	-COMe	4-MeO-CôH4CH2	A	188-192
15	-NHCH2CO2H	H	4-MeO-C6H4CH2-	A	228-231
16	-NHCH2CONH2	-COMe	4-MeO-C6H4CH2-	A	218-219
17	-NHCH2CONH2	H	4-MeO-C6H4CH2-	A	247-252
18	-N	N-Me	-COMe	4-MeO-C6H4CH2-	A	133-138
19	-N	N-Me	H	4-MeO-C5H4CH2-	A	65-68
a20	-N	0	-COMe	4-MeO-C6H4CH2-	A	146-149
b21	-N	0	H	4-MeO-C6H4CH2-	A	106-108
22	-OtBu		-COMe	4-MeO-C6H4CH2-	A	147-151
23	-OtBu		H	4-MeO-C6H4CH2	A	133-137
c24	-OMe		-COMe	(R)-CH(Me)OCH2Ph	A/B	105-106
					c/d	111-113
c25	-OMe		H	(R)-CH(Me)OCH2Ph	a/b	113-119
					c/d	72-76
				-ch2
26	-OMe		-COMe		A	134-136
				-ch2
27	-OMe		H		A	73-75
28	-nh2		-COMe	4-MeO-C6H4CH2-	—	235-240

Exemplo R]R₂ R₄

29	-nh2	H	4-MeO-C6H4CH2-	221-225
30	-NHCH2CO2Et	-COMe	4-MeO-C6H4CH2-	190-198
31	-NHCH2CO2Et	H	4-MeO-C6H4CH2“	221-228
34	-NHCHCO2 tBu	-COMe	4-MeO-C6H4CH2-	'14-8 -157

CH₂CH(Me)₂

-NHCHCO2H -COMe 4-MeO-C6H₄CH₂- - 195 - 20Ú

CH₂(CH(Me)₂

-NHCHCO₂H H 4-MeO-C₆H₄CH₂- - 216 - 220 d₂CH(Me)₂ a: Isolado como 0 hidrato

b.: Isolado como 0 Hemi-hidrato \ c: Isolado como uma mistura 3:2 de diastereômeros A e B e uma mistura 2:1 de diastereómeros C e D.

-36EXEMPLO 1

Ester metílico do ácido 3-acetilmercapto-6-metil-4-/77'1-(S)-7(metilamino)carbonil7-2-(4-metoxifenil )eti ljamino/carbo ni 17-heptanóico (E1)

Uma solução de éster metílico do ácido 6-meti 1-4-77/1 - (S)-/(meti lamino)carboni 1/-2 - (4-metoxifenil )etilJamino7carbonil_7-hept-3-anóico (D6; 500 mg, 1,3 mmol) em ácido tiolacético (3 ml) foi agitado à temperatura ambiente durante 14 dias, depois foi evaporado até à secura in vacuo. A cromatografia de coluna (30 g de sílica) do resí. duo, eluindo com 10 a 25% de acetato de etílo/diclorometano deu o composto em título (100 mg, 17%) p.f. 118-135²C. Massa observada 466,2137; ^C23^H24^H2°6^S requere 466,21 36. HPLC preparativa (diol Lichrosorb), eluindo com (metanol a 1%/diclorometano)/Hexano 20/80 deu dois isómeros singulares do composto em título.

Isómero A, p.f. 162-165²C, tinha o tempo de retenção mais longo. A (CDClg): 0,85 (3H, d, J=7Hz), 0,87 (3H, d, J=7Hz), 1,2-1,7 (m), 2,31 (3H, s), 2,45 (1H, dd, J=8.17Hz), 2,63 (1H, dd, J=5, 17Hz), 2,6 (1H, m), 2,71 (3H, d, J=5Hz), 2.95 (1H, dd, J=7, 14Hz), 3,03 (1H, dd, J=7, 14Hz), 3,78 (3H, s), 3,66 (3H, s), 3,89 (1H, m), 4,55 (1H, q, J=8Hz), 5,58 (1H, brd), 6,33 (1H, d, J=8Hz), 6.83 (2H, d. J=9Hz) e 7.14 (2H. d, J=9Hz).

Isómero B, p.f. 116-118²C, tinha o tempo de retenção mais curto, á (CDClg): 0,84 (3H, d, J=7Hz). 0,86 (3H, d, J=7Hz). 1,2-1,7 (m), 2,32 (3H, s), 2.49 (2H. d. J=7Hz). 2,7 (1H, m), 2,72 (3H, d, J=5Hz), 2,97 (1H, dd. J=7, 14Hz), 3,04 (1H, dd, d=7, 14Hz), 3,78 (3H, s). 3,66 (3H, s), 3,97 (1H, m), 4,52 (1H, q. J=8Hz), 5,67 (1H, brs). 6,43 (1H, d, J=8Hz), 6,83 (2H, d, J=9Hz) e 7.15 (2H. d. J=9Hz).

Ester metilico do ácido 3-mercapro-6-metíl-4-/ZZ'1-(S)-/'(metílamino )carboni17-2-(4-metoxífeni1)etil/amino/carboni17-heptanóico (E2)

Uma solução arrefecida com gelo de éster metilico do ácido 3-acetilmercapto-6-metil-4-Z’Z7'1-(S)-f(metilamino)carboni 17-2-(4-metoxifeni1 )eti 17amino7carboni17-heptanóico (E1; 100 mg, 0,21 mmol) em metanol purgado com azoto (10 ml) foi tratada com amónia aquosa a 35% (0,5 ml) e a mistura de reacção foi agitada sob azoto durante 20 h. A solução foi evaporada in vacuo. depois foi triturada com água, filtrada e seca para dar o composto em título (46 mg, 52%), p.f. 80-86^sC.

Massa observada 424,2028; ^C21^H32^5^N2^S requere 424,2033.

Cada um dos diastereomeros separados do composto S-acetilo do Exemplo 1 (5-15 mg) foram dis solvidos individualmente em metanol purgado com azoto (1 ml) e tratados com amónia aquosa a 35% (0.1 ml). As soluções foram agitadas à temperatura ambiente sob azoto durante 2 h. depois foram evaporadas sob vacuo. e os resíduos foram triturados com agua e secos para dar:

Isómero A, p.f. 193-196²C.

6(CDC1₃): 0,87 (6H, d, J=6Hz), 1,2-1,7 (3H, m), 1,67 (1H, d, J=9Hz), 2,32 (1H, dd, J=1O, 15Hz), 2,41 (1H, m), 2,59 (1H, dd, J=4, 15Hz), 2,73 (3H, d, J=5Hz), 3,0 (2H, d, J=8Hz), 3,21 (1H, m), 3,70 (3H, s), 3,78 (3H, s), 4,59 (1H, q, J=7Hz), 5,66 (1H, brd) , 6,34 (1H, d, J=8Hz), 6,83 (2H, d, J=9Hz) e 7,13 (2H, d, J=9Hz).

Massa observada 424,2039; C^H^I^OgS requere 424,2031 .

e o Isómero B:

δ (CDC1₃): 0,86 (6H, t, J=7Hz), 1,2-1,7 (3H, m), 2,00 (1H, d, J=9Hz), 2,49 (1H, m), 2,51 (1H, dd, J=9, 15Hz), 2,68 (1H, dd, J=5, 16 Hz), 2,73 (3H, d, J=5Hz), 2,97 (1H, dd, J=7, 13Hz), 3,07 (1H, dd, J=7H, 13Hz), 3,28 (1H, Hl), 3,72 (3H, s), 3,79 (3H, s), 4,55 (1H, q, J=7Hz), 5,64 (1H, brs), 6,33 (1H, d, J=7Hz), 6,84 (2H, d, J=8Hz) _e 7,14 (2H, d, J=7Hz).

Massa observada 424.2024; C2<jH22^N2°5^S requere 424,2031.

EXEMPLO 5

Acido 3-acetiImercapto-6-metil-4-/~Z'Z~1 -(S)-/'(meti lamino)carbonil J-2-(4-metoxifení1)etíljaminojcarbonilj-heptanóico (E5)

Uma solução de éster-benziIico do ácido 3-acetiImercapto-6-meti 1-4-/771 - (S) - /(meti lamino)carbo ni 17-2-(4-metoxifeni1)-eti17amino7carbonilj-heptanôico (E3, 300 mg, 0.55 mmol) em 4.5% de ácido formico/metanol (6 ml) foi adicionada, sob azoto, a uma suspensão em agitação de ne gro de paládio (310 mg) no mesmo solvente (15 ml). Após 90 min. a mistura foi filtrada através de Kieselguhr e evaporada in vácuo. A cromatografia de coluna fase reserva em sílica (30 g) e eluindo com metanol aquoso a 25% deu dois diastereómeros singulares do composto em título, como mono-hidratos.

Isómero A, p.f. 92-95^sC (54 mg). (Encontrado: C.56,34; H. 7.11; N. 7.08. ^C22^H32^N2°6^S”^H20

requere C, 56,15; H, 7,28; N, 5,95%).

δ (CDC1₃): 0,85 (3H, d, J=6Hz) , 0,91 (3H, d, J=6Hz),

1,2-1,7 (3H, m), 2,31 (3H, s), 2,50 (1H, dd, J=3, 17Hz), 2,67 (1H, dd, J=7, 17Hz), 2,68 (3H, d, J=5Hz), 2,85-3,0 (2H, m), 3,15 (1H, t, J=10Hz), 3,74 (3H, s), 3,80 (1H, m), 4,80 (1H, q, J=8Hz) , 6,36 (1H, m), 6.,77 (2H, d, J=9Hz), 7,07 (2H, d, J=9Hz) e 8,41 (1H, d,

J=10Hz).

e o Isómero B, p.f. 106-110^sC (70 mg).

(Encontrado: C, 56,33; H, 7,17; N, 6,15, CggHggNgOgS.HgO requere C, 56,15; H, 7.28; N, 5,95%).

δ (CDC1₃): 0,77 (3H, s), 0,86 (3H, s) , 1,1-1,7 (3H,

m), 2,34 (3H, s), 2,73 (2H, d, J=4Hz), 2,82 (3H, d, J=4Hz), 2,8-3,0 (3H, m), 3,75 (3H, s), 3,88 (1H, brd, J=llHz), 4,80 (1H, q, J=8Hz), 6,61 (1H, m), 6,78 (2H, d, J=9Hz), 7,11 (2H, d, J=9Hz) e 8,53 (1H, d, J=9Hz).

tratamento semelhante do isóme ro singular do composto acetilmercapto (E3, Isómero A; 1,4g,

2,6 mmol) deu o composto em título como um isómero singular (Isómero A), 980 mg (84%).

EXEMPLO 7

1

3-Benzoilmercapto-N -metil-N -(S)-/'(nieti 1 amino)carboni 17-2-(4-metoxifeni1)eti 1J-2-(2-metiIpropi1)pentanodiamina (E7)

éster terc-butí1íco do ácido 2-(1-benzoilmercapto-2-Zmeti1aminocarboni1 feti1)-4-metilpey tanóico (D11; 0,5 g) foi tratado com ácido trifluoroacético (10 ml) a 0^sC duranet 2he evaporado até à secura in vacuo para dar ácido 2-(1-benzoilmercapto-2-Zmetilaminocarboni1/ etil)-4-metiIpentanóico.

ZJ (CDClg) nenhum sinal a 1,5 ppm indicando ausência do grupo Terc.-butiloJ.

N,N-Diciclo-hexicarbodiimida (235 mg) e hidroxibenzotriazolo (145 mg) foram adicionados a uma solução arrefecida em gelo do ácido anterior e 0-metil-L-tirosino-N-metilamida (220 mg) em diclorometano seco (20 ml), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 h. 0 sólido precipitado foi removido por filtração, e lavado com um pouco de diclorometano, depois a solução orgânica foi lavada sucessivamente com ácido clorídrico 1N, bicarbonato de sódio 1N e água. A solução foi seca (MgS0₄) e evaporada até à secura in vacuo. 0 sólido residual foi cromatografado em alumina neutra usando clorofórmio/pentano (1:1) como eluente. 0 produto sólido foi triturado com éter para dar o composto em título (130 mg), p.f. 140-144^eC como uma mistura de diastereómeros.

M⁺ observado 527,2449. C_2QH₃₇N₃0₅S requere M⁺ 527.2453

EXEMPLO 10

Ester metílico do ácido 3-mercapto-6-metil-4-/Z/l-(S)-Z'(metilamino)carboni\J-2-fenileti l/aminojcarboni17-heptanóico (E10)

-41Ester metílico do ácido 3-mercapto-6-niet i 1-4-/Ά/Ί - (S)-/'(meti lamino) c ar boni 1J-2-feni leti ljaminojc ar boni 17-heptanóico (E10)

Uma solução arrefecida em gelo de éster metílico do ácido 3-acetilmercapto-6-metil-4-ZZ7'1-(S)f(met i lamino) - ca rboni 17-2-fen i let i lZamino/carboni 17-heptanój_ co, p.f. 188-189^SC, (E9; 100 mg) em metanol purgado com azoto (5 ml) foi tratada com amónia aquosa a 35% (2 ml) e a mis^ tura de reacção foi agitada sob azoto durante 3,5 h. A solução foi filtrada e o filtrado foi evaporado até à secura in vacuo. 0 residuo foi triturado com água e o sólido foi iso lado e recristalizado a partir de acetato de etilo/éter para dar o composto em título (25 mg), p.f. 169-171^eC. como um diastereómero singular (Isómero A).

Encontrado: C. 60.65; H. 7.85; N. 7.05. C₂qH₃₀N₂0₄S requere C. 60.9; H. 7.65; N. 7.1%).

δ (CDCI3): 0,85 (6H, d, J=5Hz), 1,2-1,7 (3H, m), 1,64 (1H, d, J=9Hz), 2,3 (1H, dd, J=9, 16Hz), 2,42 (1H, m) , 2,58 (1H, dd, J=4, 16Hz), 3,07 (1H, d, J=8Hz), 3,2 (1H, m), 3,68 (3H, s), 4,65 (1H, q, J=8Hz), 5,75 (1H, brd), 6,39 (1H, d, J=8Hz) e 7,25 (5H, m).

EXEMPLO 11

2-acetí Imercapto-N -meti I-N -ΖΊ - (S)-Z~(meti 1 amino)carbonilZ-2-(4-metoxifení1)eti 17-2-(2-metilpropil)pentanodiamina (E11)

Diisopropiletilamina (0,13 ml,

0.7 mmol) e clorofórmato de etilo (0.07 ml, 0,7 mmol) foram adicionados a uma solução de acido 3-acetilmercapto-6-meti1-4-///1 -(S)-Z(meti lamino )carboni 17-2-(4-metoxifenil) et i 1.7 amj_ no/carbonilj-heptanóico (E5, Isomero A; 300 mg, 0,66 mmol) em THF seco (10 ml). A -20^sC. Após 15 minutos uma solução de metilamina (20 mg) em THF (0,8 ml) foi adicionada gota a gota e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 3 h. 0 solvente foi evaporado in vacuo, e uma solução do resíduo em diclorometano foi lavada sucessivamente com água, ácido clorídrico 1M, água, hidrogenocarbonato de sódio saturado e solução saturada de cloreto de sódio. A solução foi seca (MgS0₄) e evaporada in vacuo. A cromatografia de coluna de sílica (10 g), eluindo com metanol a 5%/acetato de etilo deu o composto em titulo, p.f. 195-199⁹C.

(Encontrado: C.58,97; H.7.78; N..8.92. C23H35N3O5S requere 0,59,33; H.7.58; N.9.03%).

(CDClj): 0,84(6H,q,J=3Hz), 1,2-1,7(3H,m), 2,10(lH,dd, J=7,15Hz), 2,30(3H,s), 2,31(1H,dd,J=5,15Hz), 2,68(1H, m), 2,74(3H,d,J=5Hz), 2,76(3H,d,J=5HzJ, 2,95(1H,dd,J=

6,14Hz), 3,08(1H,dd,J=6,14Hz), 3,78(3H,s), 3_>83(lH,m), 4,63(1H,q,J=7Hz), 5,49(1H,brs), 5,88(lH,brs), 6,68(1H, d,J=7Hz), 6,82(2H,d,J=8Hz) e 7,14(2H,d,J=8Hz).

EXEMPLO 12

Ester t-butilico do ácido 2-/3-acetilmercapto-6-meti1-4Z'ZZ'1 - (S)-/(meti lamino)carboni17-2- (4-metoxifeni 1 )eti l/aminoj carbonil7-heptanoilamino7etanóico (E12)

Uma solução de ácido 3-acetil me rc apto-6-meti 1-4-///1 -(S)-/(metilamino)carbonil7-2-(4-metoxifeni1)eti17amino7carboni 17-heptanóico (E5, Isõmero A;

mg, 0,2 mmol), cloreto de N-eti1-N'-dimetilaminopropi1 carbodiimida (42 mg, 0,22 mmol), 1-hidroxibenzotriazolo (34 mg, 0,22 mmol), cloreto de t-butilglicina (37 mg, 0,22 mmol) e diisopropiletilamina (0.07 ml, 0.4 mmol) em dicloro metano (2 ml), foi agitada à temperatura ambiente durante 18 h. A mistura foi diluída com diclorometano e foi lavada sucessivamente com hidrogenocarbonato de sódio saturado, água, ácido cítrico 1M e solução saturada de cloreto de sódio. A solução foi seca (NagSO^) e evaporada in vacuo para deixar o composto em título como um isõmero singular (Isõme ro A) (74 mg, 68%). p.f. 192-194²C (acetato de etilo). (Encontrado: C, 59,51; H.7.70; N.7.33. (^gH^N^O^S requere C,59,45; H, 7,66; N,7,43%).

δ (CDC1₃): 0,77(3H,d,J=6Hz), 0,83(3H,d,J=6Hz), 1,2-1,7 (3H,m), l,47(9H,s), 2,30(3H,s), 2,35(2H,m), 2,56(1H,

m), 2,77(3H,d,J=5Hz), 3,00(lH,dd,J=10,15Hz) ,

3,10(1H,dd,J=7,15Hz), 3,70(1H,dd,J=6,19Hz), 3,78(lH,s),

3,95(lH.dd,J=6,19Hz), 4,00(lH,m), 4,64(1H,q,J=7Hz), 6,05(lH,m), 6,33(lH,brt), 6,83(2H,d,J=9Hz), 7,14(2H,d,J=9Hz) e 7,43(lH,d,J=7Hz).

EXEMPLO 14

Acido 2-/3-acet i 1 me rc apto-6-meti 1-4-///1 - (S)-/(meti lamino) carbonilf-2-(4-metoxifeni1)eti 17amino7carboni 17-heptanoíla mino7etanoico (E14)

Uma solução de éster t-butílico do acido 2-f3-acetílmercapto-6-metil-4-/TÍ1-(S)-í’(metilamino)carboni17-2-(4-metoxifenil)eti17-amino7carboni 17-hepta nôilamino7etanóico (E12. Isomero A; 60 mg, 0,11 mmol) em ácido trifluoroacético (1,5 ml) e agua (0,05 ml) foi agitada num banho de gelo durante 1 h. depois à temperatuar am biente durante 2 h. 0 solvente foi evaporado in vacuo e o resíduo foi seco azeotrópicamente com tolueno para deixar o composto em titulo como um isómero singular (Isomero A), p.f. 188-1922C.

EXEMPLO 32

Ester metílico do ácido 3-acetilmercapto-6-nieti l-4-/~Z7~1-(S)-(aminocarboni 1 )-2-fenileti17amino7carboni 17-heptanóíco (E 3 2)

(E32) composto em titulo foi prepara do a partir do éster metílico do acido 6-meti 1 -4-//7.Ί - (amino carbonil)-2-feniletil7amino7carbonil7-hept-2(e 3)-enõico e do ácido tiolacético por um processo análogo ao descrito no Exemplo 26. A cromatografia em gel de silica deu misturas de diastereómeros (Isómero A/B). p.f. 160-164²C e (Isómero C/D),

-45p.f. 50-54^eC (depois de trituração com éter). Os ãcidos hept-2(e 3)-enóicos intermédios foram preparados a partir do ácido 4-metoxicarbonil-2-(2-metilpropil)but-2-enõico e L-fenilalanina como descrito na Descrição 12.

EXEMPLO 33

Ester metilico do ácido 3-mercapto-6-metil-4-/77'1-(S)-(aminocarboni1)-2-feniletiljamino7carboni 17-heptanõico (E 3 3)

(E33) composto em título, isolado co mo uma mistura de diastereõmeros, (Isõmero A/B), e (IsOmero C/D), p.f. 64-66^sC foi preparado a partir do composto do Exemplo 32 por um processo análogo ao descrito no Exemplo 10. 0 produto bruto foi purificado por cromatografia em gel de sílica usando acetato de etilo como eluente.

EXEMPLO 37

Ester metilico de N-Z'N-Z''3-acetilmercapto-2-(2-metilpropil)-1 -oxo-4-Z~(f enil metoxi) carboni IJbuti 17-L-leuci1-L-alanína. (E37)

PhCH

OMe (E37) do a partir do go ao descrito cil-L-alanina.

composto em título foi prepara_ composto da Descrição 7 por um processo análo no Exemplo 32 usando éster metilico de L-leu0 composto em título foi isolado sob a forma de uma espuma higroscõpica.

EXEMPLO 38

Ester metilico de N-/N-/“3-mercapto-2-(2-metilpropil )-1-oxo-4-f(feni1metoxi)carboni l/butilJ-L-leuci1-L-alanina. (E38)

-ΜPhCH

I (Ε38)

I Ο composto em título foi preparado a partir do composto do Exemplo 37 por um processo anji logo aos descritos no Exemplo 10.

composto em título foi isolado sob a forma de uma mistura de diastereomeros (Isómero A/ Isómero B. 1:1). p.f. 106-110^0.

Os compostos dos Exemplos 3,9, 22.24 e 26 foram preaparados a partir dos composto das descrições 8. 12. 14. 15 e 16 respectivamente por reacção com acido tiolacético usando um processo análogo ao descrito no Exemplo 1.

Os compostos dos Exemplos 4, 6. 8, 13, 15. 17, 19. 21. 23. 25. 27. 29. 31 e 36 foram preparados a partir dos compostos dos Exemplos 3, 5, 7, 9, 12, 14, 16, 18, 20. 22, 24. 26, 28. 30 e 35 respectivamente por clivagem do grupo alilo apropriado usando um processo análo go ao descrito no Exemplo 2 ou EXEMPLO 10.

Os compostos dos Exemplos 16.18. 20. 30 e 34 foram preparados a partir do composto do Exem pio 5 e do derivado amina apropriado usando um processo anã logo ao descrito no Exemplo 12.

composto do Exemplo 28 foi pre parado a partir do composto do Exemplo 5 e amónia usando um

processo análogo ao descrito no Exemplo 14.

composto do Exemplo 35 foi pre parado a partir do composto do Exemplo 34 usando um processo análogo ao descrito no Exemplo 14.

-49TESTE DE INIBIÇÃO DA COLAGENASE

O teste ê feito essencialmente como em Cawston e Barrett, Anal. Biochem. 99, 340-345 ( 1979). Os compostos a testar são dissolvidos em metanol e adicionados a colagenase de osso de coelho purificada em tampão. Após uma incubação de 5-15 minutos a 37^SC, os tubos de en saio são arrefecidos a 4⁹C e é adicionado colagénio Tipo I

4 de pele de rato C-acetilado. Os tubos de ensaio são incu 1 4 bados a 37^aC durante a noite. 0 colagénio C forma fibrilos insolúveis que são o substracto para o enzima.

Para terminar o ensaio, os tu bos de ensaio são centrifugados a 12.000 RPM durante 15 mi14 nutos. 0 colagénio C não diferido é sedimentado, o cola 1 4 génio C digerido é encontrado como peptídeos solúveis no sobrenadante. Etomada uma amostra do sobrenadante para contagem por situação líquida.

A actividade dos inibidores de colagenase é expressa como a quantidade do compostos que inibe uma quantidade conhecida de enzima em 50% ( ^IC50>'

As actividades dos compostos re presentativos da invenção, no processo de ensaio anterior, estão ilustradas no Quadro abaixo.

EXEMPLO NO.

ISOMERO

IC₅₀ (nM)

2	mistura de diastereómeros	100
2	A	3,9-6,4 (2 experiências)
2	B	72
4	A	31
4	B	270
4	C	230
4	D	12600
8	A	4,7-14 (3 experiências)
10	A	8,3

Claims (11)

1. P. - Processo para a preparação dum composto de fórmula (I) ou de um seu sal, solvato ou hidrato:

   (D em que:

   R é -OH; alcoxilo; ariloxilo; aralquiloxilo; -NRgR? em cada Rg e Ry é hidrogénio ou alquilo; ou R_g e R? juntamente com o átomo de azoto ao qual estão ligados formam um anel de 5,6 ou 7 membros facultativamente com um átomo de oxigénio, enxôfre ou azoto facultativamente substituído, no anel; ou um gru po o

   il

   -NH-CH-C-Rç em que Rg é hidrogénio; alquilo facultativamente substituído por -OH, alcoxilo, -NR^R?, guanidina, -C0₂H, C0NH₂, SH ou Salquil; ou -CH₂-Ar em que Ar é arilo facultativamente substituído; e Rg é alcoxilo; OH; ou -NR^R?;

   R₂ é hidrogénio; - 8-alquil; ou -?- Z, em que Z é arilo fa | cultativamente substituído; Rg é alquilo Cg_₆;

   R4 é hidrogénio; alquilo; -CH₂-R₁₀ em que R₁₀ é fenilo ou heteroarilo facultativamente substituído; ou um grupo em que é hidrogénio; alquilo; ou -CH₂-Ph em que Ph é fenilo facultativamente substituído; e R₁₂ é hidrogénio ou alquilo; e Rg é hidrogénio ou alquilo; ouum grupo

   -CH-COR em que R^g é hidrogénio; ou alquilo; e R^ é hidroxilo; alcoxilo; ou -NRgRy, caracterizado por compreender:

   (a) a reacção dum composto de fórmula (III):

   (III) em que Rp Rg, R^ e Rg são como definido na fórmula (I) com um tiol de fórmula (IV):

   LpSH (IV) em que L₁ é um grupo protector de enxofre convencional; ou (b) a reacção dum composto de fórmula (V) (v) em que R₁ e Rg são como definido na fórmula (I) e L é L₁ que é um grupo protector de enxôfre convencional, ou que ê um grupo R-S em que R é qualquer resíduo de tal forma que o gru_ po R-S origine uma ligação dissulforeto clivável, com um com posto de fórmula (VI):

   (VI) ο

   em que R₄ e R_g são como definidos na fórmula (I), para dar um composto de fórmula (II)

   Rj 'y7 r 0 0 S-L 0 1 ^R4 (II) em que Rp Rg, R^ e Rg são como definidos na fórmula (I) e

   L ê L₁ ou L₂; e subsequentemente, quando R₂ num composto de fórmula (I) for hidrogénio, a clivagem do grupo L.
2. 2^ã. - Processo de acordo com a rei vindicação 1 caracterizado por L ser L₁ em que L₁ é acetilo ou benzoilo.
3. 3³. - Processo de acordo com a reivindicação 1 ou 2 caracterizado por R, ser hidroxilo, alcoxi 1 ~ lo C^_^, benziloxilo, amino, metilamino, N -meti 1-N-piperazj_ nilo, N-morfolinilo ou -NH-CH(Rg)CORg em que R_g é hidrogénio ou isobutilo e Rg é OH, NH₂, etoxilo ou t-butoxilo.
4. 4³. - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 3 caracterizado por R₂ ser hidro génio, acetilo, ou benzoilo.
5. 5³. - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 4 caracterizado por R_g ser ji-butilo, iso-butilo ou sec-butilo.
6. 6³. - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 5 caracterizado por R^ ser iso-butilo, benzilo, 4-metoxibenzilo, 1-(BenziloxiJetilo ou 3-indolilmetilo.

   |
7. 7^ã. - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 6 caracterizado por R_g ser hidr£ génio, metilo, ou 1 -(metoxicarboni1)etilo.
8. 8³. - Processo de acordo com a re^ vindicação 1 caracterizado por R^ ser metoxilo, amino, metij. amino ou -NHCH₂C0₂H; R₂ ser hidrogénio, acetilo ou benzilo; R_g ser iso-butilo; R^ ser benzilo ou 4-metoxibenzilo e R_g ser metilo.
9. 9³. - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8 caracterizado por o centro qui_ ral marcado com um asterisco na fórmula (!) ter a configuração S.
10. 10^a. - Processo de acordo com a rej_ vindicação 1 caracterizado por o composto de fórmula (I) ser: Ester metílico do ácido 3-acetilmercapto-6-metil-4-///1-(S)-/(meti lamino )carboni1/-2-(4-metoxifeni1 )eti 1/amino/carboni 1/-heptanóico,

    Ester metílico do ácido 3-mercapto-6-metil-4-///1-(S)-/(metilamino)-carbonil/-2-(4-metoxifeni1)eti1/amino/carbonil/-heptanóico,

    Acido 3-mercapto-6-meti1-4-///1-(S)-/(metilamino)carbonil/-2-(4-metoxifeni1)eti 1/amino/carboni 1/-heptanóico, 3-mercapto-N^-meti1-N¹ /1-(S)-(metilamino)carbonil/-2-(4-metoxifeni1)eti1/-2-(2-metilpropi1Jpentanodíamina,

    Acido 2-/3-mercapto-6-meti 1 -4-///1 -(S)-7(metilamino)carboni 1/-2-(4-metoxifeni1)eti1/amino/carboni l/-heptanoiIamino/etanóico,

    N⁵-(aminocarboni 1 )meti 1-3-mercapto-N¹ -/1-(S)-/(metilamino)carboni1/-2-(4-metoxifeni 1)eti 1/-2-(2-metilpropi1)pentanodiamida, Ester benzilico do ácido 3-acetilmercapto-6-meti1-4-///1-(S)-Z*(meti 1amino)carboni1/-2-(4-metoxifeni1 )et i 1/amino/carboni 1/ -heptanóico,

    Ester benzilico do ácido 3-mercapto-6-meti1-4-///1 -(S)-/(meti lamino )c ar boni 1/-2-( 4-metoxif eni 1) et i 1/amino/carboni 1/-heptanóico,

    Acido 3-acetilmercapto-6-meti1-4-///1 -(S)-/(meti lamino)carboni1/-2-(4-metoxifeni1)eti1/amino/carboni1/-heptanóico, r 4

    3-Benzoi lmercapto-N -meti 1-N -/1 -(S) -/(meti lamino )carboni 1.7-2-(4-metoxifeni1)eti 1/-2-(2-metilpropi1)pentanodiamida, Ester metílico do ácido 3-acetilmercapto-6-meti1-4-///1 -(S)-/(metilamino)carboni l/-2-feni1 eti 1/amino/carboni 1/-heptanoico,

    Ester metílico do ácido 3-mercapto-6-metil-4-///'1-(S)-/(metilamino)carbonil/-2-fenilatil/amino/carbonil/-heptanóico,

    -573-Acet i lmercapto-N⁵-metil-N¹-7l-(S)-7(metilamino)carbonil7-2-(4-metoxifeni1)eti 17-2-(2-metilpropi1Jpentanodiamida, Ester t-butilico do ácido 2-73-acetilmercapto-6-metil-4-777l-(S)-/'(metilamino)carbonil7-2-(4-metoxifenil)etil7amino7carboni17-heptanoilamino7etanóico,

    Ester t-butílico do ácido 2-73-mercapto-6-meti1-4-7771 -(S)-Z(met i lamino )carboni 17-2- (4-metoxifeni 1 )eti 17amino7carboni 17heptanoi lam ino7etanó ico,

    Acido 2-73-80611 lmercapto-6-meti 1-4-//7Ί-(S)-/'(metilamino)carboni17-2-(4-metoxifeni1)eti17amino7carboni 17-heptanoi lamino?etanóico,

    3-Aceti lmercapto-N - (Aminocarboni 1 )meti 1-N -β - (S)-/(metilamino )carboni17-2-(4-metoxifeni1)eti 1?-2-(2-metilpropi1)pentanodiamida,

    1 -73-Acetilmercapto-6-meti 1-4-7/7Ί -(S)-7(meti lamino) carboni 1?-2-(4-metoxifeni1)eti 17amino7carboni 17-heptanoi17-4-metiIpiperazina,

    1 -73-Mercapto-6-meti 1-4-7771 -(S)-7(metilaminoJcarboni l?-2-(4-metoxifeni1)eti 17amino7carboniL7heptanoi 17-4-metilpiperazi na,

    Hidrato de 1-73-acetilmercapto-6-metil-4-f/7'1-(S)-f(metilamino)-carbonil?-2-(4-metoxifeni1)et il?amino?carboni17-heptanoi1? morfolina,

    Hemi-hidrato de 1-73-mercapto-6-metil-4-777l-(S)-7(Metilamino) carboni 17-2-(4-metoxifeni1)eti 17amino?carboni17-heptanoi1? morfolina,

    Ester tert-butí1ico do ácido 3-aceltilmercapto-6-metil-4-7771-(S)-7(metilamino)carboni17-2-(4-metoxifeni1)etil?amino?carboni17-heptanoico,

    Ester tert-butí1ico do ácido 3-mercapto-6-metil-4-777l-(S)-7(meti lamino) carboni 17-2- (4-metoxifeni 1 )eti l?amino?carboni 1?-heptanóico,

    Ester metílico do ácido 1-73-acetilmercapto-6-meti1-4-7772-(R)-benziloxi-1-(S)-7(metilamino)carbonil/propil?amino?carboni17-heptanoico,

    Ester metílico do ácido 3-mercapto-6-metil-4-/772-(R)-benziloxi-1 -(S)-7(meti1amino)carboni 1 ?propil?amino7carboni17-heptanoico,

    Ester metílico do ácido 3-acetilmercapto-6-metil-4-/7/’1-(S)-/(metilamino)carboni17-2-(3-indo 1i 1)eti Ijaminojcarboni 17-heptanóico,

    Ester metílico do ácido 3-mercapto-6-metil-4-/'/'/’1-(S)-Z'(meti lamino)-carboni 1J-2- (3-indol i 1 )eti l?amino7carboni Ij-heptanoico,

    3-Aceti lmercapto-N¹ -/'1-(S)-/'(Metilamino)carbonilJ-2-(4-metoxifeni1)-eti 17-2-(2-metilpropi1)pentanodiamida,

    3-Mercapto-N¹-f1 -(S)-f(meti1amino)carbonil?-2-(4-metoxifeni1)eti17-2-(2-meti 1propi 1Ipentanodiamida,

    Ester etílico de 3-acetilmercapto-6-metil-4-/77'1-(S)-/’(metilamino)carboni17-2-(4-metoxifeni1)eti17amino7carboni17-heptanoiIglicina,

    Ester etílico de 3-mercapto-6-metil-4-/7/1-(S)-f(metiIamino)-carboni 17-2-(4-metoxifeni1)eti 17amino7carboni17-heptanoi 1 glicina,

    Ester metílico do ácido 3-acetilmercapto-6-metil-4-/'f/'1-(S)-(aminocarboni1)-2-feniletil}amino7carboni17-heptanoico,

    Ester metílico do ácido 3-mercapto-6-meti1-4-/77Ί-(S)-(aminocarboni 1 )-2-feni leti 17amino7carboni 17-heptanoico,

    Ester t-butilico de 3-acetilmercapto-6-meti1-4-/77Ί-(S)-A(meti1amino)carboni 17-2-(4-metoxifeni1)eti 17amino7-heptanoi1-D-leucina,

    3-Acetilmercapto-6-metil-4-/7Zl-(S)-/'(metilamino)carbonil7-2-(4-metoxifeni1)eti 17amino7carboni 17-heptanoi1-D-leucina, 3-Merc apto-6-meti 1-4-/7/1 - (S)-ZÍmeti lamino )carboni I?-2- (4-metoxifeni1)eti 17amino7carboni 17-heptanoi1-D-leucina,

    Ester metílico de N-/^,N-f3-acetilmercapto-2-(2-metilpropil)-1-oxo-4-7(fenilmetoxi)carboni Γ7 but i 17-L-leucil~L-alanina, ou

    Ester metílico de N-/’N-/'3-mercapto-2-(2-metilpropil)-1-oxo-4-f( fenilmetoxi)carbonil7butil7-L-leucil-L-alanina.

    -5911a. - Processo para a preparação duma composição farmacêutica caracterizado por se incluir na referida composição um composto de fórmula (I)obtido de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 10 ou um seu sal,solvato ou hidrato farmaceuticamente aceitável juntamente com um veículo farmaceuticamente aceitável.

    125. _ Método para tratar condições colagenolíticas como desordens de tecidos de ligação em memíferos caracterizado por compreender a administração de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I) obtido de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 10 ou de um seu sal, solvato ou hidrato farmaceuticamente aceitável, a um paciente necessitado de tratamento.
11. 13a. - Processo, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado por se administrar ao referido paciente uma quantidade eficaz compreendida entre 10 mg a 3000 mg, por dia, relativamente a um adulto de 70 kg de peso Lisboa, 22 de Dezembro de 1987

    J. PEREIRA DA CRUZ Agente Oficial da ProprhàJs Industrial RUA ViCTOR COPIDON, 10-A, 1.* 1200 LISBOA