PT86155B

PT86155B - Processo para a preparacao de acidos purin-9-il-alquilenoximetil-fosfonicos

Info

Publication number: PT86155B
Application number: PT86155A
Authority: PT
Inventors: John C Martin; Robert R Ii Webb
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1986-11-18
Filing date: 1987-11-18
Publication date: 1990-11-20
Also published as: DK603987A; EP0270885A1; PT86155A; AU8092587A; HU198947B; NO874759D0; JPS63198683A; HUT46023A; IL84476A0; DK603987D0; NO874759L; KR880006255A; KR900002709B1; HU202530B

Description

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE AGIDOS PDRIN-9-IL-AL^UILENOXIMETIL-FOGíOHICOS

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO:

Este invenção refere-se a um processo aperfeiçoado e mais eficiente para a síntese de novos análogos nucleótidos de purina de formule geral,

B

I alq,

I

H-C-O-CR’ -P-OH

I al j ί '

OH

I na qual alq^ e alq^ representem, ceda um, independentemente, um radical alquileno -j_jp θ B representa uma base de purina escolhida entre adenin-9-il © guanin-y-il.

Os compostos de fórmula geral I são eficazes como agentes anti-víricos selectivos, de largo espectro. DeOlercq, et al., descreverem in Mature, 1986, 323, pág, 46^-467, um exemplo de uma subclasse destes compostos, em que B representa um grupo adenin-9-il. 0 composto específico descrito por DeClercq é a (S)-9-(3-hidroxi-2-fosfonilmetoxipropil)-adenina, também conhecida como (S)-HPMPA, cuja estrutura se apresenta a seguir referenciada por (a)

CIHOrl OH £ (S)-HPEPA (a) e foi descrita antes por Holy, et al., Kucleic Acids Research, Symposium Series Ν^Ω 14-, 198½ pág. 277-273.

Um método sintético para a preparação de (S)-HPEPA e dos seus análogos isoméricos bem corno certos compostos intermediá rios tais como 9“(2,3“dihidroxipropil)-adenina (DrLPA) está descrito no pedido de patente britânica de Holy, et al., I7²2.134.9O7A publicado em 3/22/8½.

No esquema I que se segue, apresenta-se esta síntese do estado da técnica anterior.

EsqEsquema I

Cromatografia por troca fónica

APMPA

Como se mostra no esquema I a alquilação do sal de sódio de adenina 1 com isopropilideno-D-glicerol-/-tosilato 2 produz o acetonato intermediário J que que se aquece com ácido acético aquoso para se obter 9-(.2,3-dihidroxipropil)-adenina também conhecida como ΓΗΡΑ. Trata-se cepois a DHPA 4 ^corn diclo reto clorometilfosfónico para se obter uma mistura do fosfonato de clorometilo intermediário e o seu isdmero 2'. Pode realizar-se a separação destes isómeros por cromatografia líquida, a pressão elevada, de fase inversa (HPLC) elutriando- com ácido fosfórico aquoso O,1K. Trata-se então o fosfonato £ com hidróxido de lítio aquoso concentrado para se obter o sal de di-lítio rearranjado de HPKPA 6. tí necessário uma purificação por meio de cromatografia de coluna de permuta iónica para se obter a for ma de ácico fosfóni.co de EPKP/ desejada.

Seria vantajoso eliminar a necessidade da separação ce isómeros em larga escala e a cromatografia de permuta iónica sub sequente, necessária no método sintético da técnica anterior atrás descrita, sendo ambos os processos incómodos especialmente em larga escala. Concebeu-se uma síntese de análogos de nucleótidos de purina de fórmula geral i que se obtêm a partir do intermediário di-hidroxipropil-purina que se pode obter facilmente, por exemplo, DHPA J+ e utiliza o isolamento” sintético do hidroxilo secundário na cadeia de alquileno através de grupos protectores apropriados. A utilização de grupos protectores, particularmente os que possuem massa estérica. semelhante a dos utilizados no processo da presente invenção, são eficazes na preparação de derivados protegidos de riconúcleosidos e nucleotidos. Como exemplos de referências representativas que descrevem a protec ção de grupos amino de bases e de grupos hidroxi de açúcares pela classe trifenilmetil (tritil) de agente protector ver:

1) Eartin, et al., J. Ked. Chem”, 29, 1986, pág. 138'9

2) Schaller, et al. , Jacs, c5, 19Ó3? P£g· 3521.

3) Hata, et al., Buli. Chem. Soe. Japan, 55? 1982, pág. 29^9 - 2955.

Enquanto estas referências mostram que ambos os átomos de azoto de purina-amino e açúcar-0’-oxigénio tem sido protegidos com grupos protectores do tipo tritilo em aplicações sintéticas de nucleosidos e nucleótidos, não ha renhuma indicação ou sugestão na técnica anterior que sobre a sua aplicabilidade selectiva como no processo da presente invenção.

Besumo da Invenção:

Esta invenção refere-se a um processo sintético aperfeiçoado que pode ser adaptado à preparação, em larga, escala, de ácidos purin-9-il-alquilenoximetil fosfónicos que são análogos de nucleótidos novos. 0 presente processo inicia-se com 9-(2,3-dihidroxipropil)-purinas, sintetizadas recentemente. 0 presente processo aperfeiçoado oferece vantagens tanto na economia de material e custos de mão-de-obra em virtude da eliminação cas se parações de isémeros em larga escala e ca. cromatografia de permu ta idnica subsequente em ser aplicável as bases de guanina bem como as de adenina purina.

Descrição detalhada da invenção:

processo aperfeiçoado da. presente invenção é ilustrado no fluxograma sintético apresentado a seguir como esquema II.

Esquema II

B	PG-B I
alq, \| fu-a	1 alq, \|
H-C-OH —------ í	> H-C-OH
1 ^slq2 1	alq_o
OH	1 OPG
V	IV

PG-B

1) MH f^lql 0

I ii

0 ^? II 2) LGH. P-OR, c-. \| _L	lí—G-lXJhz- 1 ‘ 1 alq. 0R_o \| d d
1 OFL·	OPG
d
VI

	III .
						/ Remoção
						/ de PG
B I		1)	Clivagem	de	E
1	0		TES-Br		L alq^	0 li
H-C-OCH,,	II -P-OH	2)	h₂o,(ch₃;	ECO c:	1 H-C-OC;	II m-P-OR, c., 1
1	1		<---------		\|	1
alq,- 1 ^z	OH				alq£	0£L· d.
OH					OH

I

Num outro aspecto, esta invenção compreende intermediários novos, nomeadamente, os novos intermediários de grupos di-protegidos, IV, e os novos intermediários dialquilfosfonilmetil, III, produzidos na prática, pelo processo de acordo com a presente invenção. Particularmente, relacionado com o objectivo da inven ção que se refere a novos intermediários, a presente invenção com preende os intermediários em que a base B , representada pelas fórmulas gerais II e III, respectivamente, é guanin-9-il.

/

%..........

No esquema II, B representa uma base de purina escolhi da entre adenin-9-il ou guanin-9-il; alq^ e alq^, são escolhidos, independentemente, entre grupos alquileno 2G representa um grupo protector selectivo que possui massa esférica e X repre senta um radical de um grupo eliminável escolhido entre grupos halogenetos ; MH representa um hidreto de metal; R^ e R^, escolbem-se independentemente, entre grupos alquilo ^e I* representa um grupo orgânico eliminável.

passo I do esquema II envolve a protecção da porção de um grupo amino de uma base de purina escolhida entre as bases adenina e guanina e do grupo hidroxi terminal do diol inicial, V, para se obter um purin-9-il-alquileno-diol protegido, IV. 0 gru po protector PG escolhe-se entre grupos em que as propriedades electrónicas e esféricas são tais que o grupo protector está liga do de modo selectivo ao grupo amino da purina e ao grupo hidroxi terminal da cadeia de alquileno em proporções que não favorecem ligações com o grupo hidroxilo secundário localizado no interior da cadeia de alquileno. Exemplos de grupos protectores deste tipo são a classe de trifenilmetilo de grupos protectores incluindo grupos trifenilmetilo insubstituídos (tritil”) e grupos trifenilmetilo substituídos com substituição num ou mais dos anéis fenilo. Deve-se entender que há grupos protectores para além de tritilo que possuem as propriedades electrénicas e esféricas ne cessárias que permitem a sua utilização no processo de acordo com a presente invenção e a utilização deste outros grupos protectores faz parte do processo em questão.

Exemplos desses outros grupos protectores incluem p-metoxife nildifenil-metilo e di-(p-metoxifenil)-fenilmetilo para refe-

rir só alguns desses grupos representativos. 0 símbolo X do reagente PG-X representa um grupo eliminável escolhido entre grupos halogeneto incluindo cloreto, brometo e iodeto, de preferência cloreto e brometo, preferível ainda o cloreto. As condições de reacção para a introdução de grupos protectores deveriam ser bem conhecidas para um perito da especialida.de de sínteses orgânicas e podem obter-se facilmente a partir da literatura de química para um perito da especialidade. De im: modo geral, os grupos protectores introduzem-se em reasções realizadas no seio de dissolx^entes inertes contendo normelmente um excesso de um reagente alcalino tal como trietilamina e piridina, cuja função é reagir e eliminar, isto e, Expulsar”, as espécies de grupos elimináveis e o ião hidrogénio que se libertam à medida que decorre a reacção. Exemplos de dissolventes inertes apropriados incluem a dimetilformamida (Lli*), o tetrahiôrofurano (THF) e o dimetilsulféxido (D1..S0), para so referir alguns.

Num processo preferido, o passo 1 envolve a reacção de pelo me nos dois equivalentes de cloreto de trifenilmetilo para cada equivalente do intermediário purin-9-il-alquileno-diol, V, utilizado. 0 dissolvente da reacção é dimetilformamida contendo trietilamina para eliminar o HG1 formado na reacção. Adicionou-se também uma pequena quantidade de Ν,Ν-dimetilaminopiridina pa ra aumentar o rendimento da reacção. Os rendimentos típicos de IV no passo 1 são da orcem dos 65 / e superiores . Os produtos intermediários de formula geral Γ7 no processo preferido podem existir em duas sub-classes principais que são apresentadas a seguir como IVa e IVb.

<

HCOH

OH

^s'’^ql

HCOH

IVa pIq-,

I *

OCPh₃ alq_n

I

OCPh₃

IVb

O passo 2 do processo envolve a. introdução do radical fosfonilmetilo no grupo hidroxi secundário. Esta introdução faz-se por meio do tratamento do grupo protegido, mais particular mente, do grupo purin-9-il-alquileno-ciol Ν,Ο-di-protegido, IV, com um hidreto de metal, seguindo a reacção com um derivado de fosfonato de dialquilo, VI. Esta fosfonometilação foi surpreen dente, bem sucedida e inesperada, devido ao facto do grupo hidroxilo secundário do grupo intermediário di-protegido, IV, ser estericamente bloqueado. Os hidretos de metal preferidos utilizados no processo são os hidretos de metal alcalino tais como hiòretos de lítio, hidreto de sódio e hidreto de potássio. 0 πιο reto mais preferido e o hidreto d.e sódio. Escolhe-se o reagente fosfonato de dialquilo, VI entre um gnço de reagentes em que L representa um grupo orgânico eliminável seleccion^do cos conhecidos pelos peritos da especialidade de sínteses orgânicas. Os grupos orgânicos elimináveis representativos são os grupos toluenossulfonato (tosilato), metanossulfonato (mesilato) e trifluorometanossulfonato (triflato) . 0 grupo eliminável de tosilato é um > ·*· grupo eliminável preferido do presente processo, leste modo, o tratamento de IV com hidreto de sódio no seio de um dissolvente de reacção inerte não prótico tais como os mencionados atrás na descrição do passo 1 , por exemplo, tetrahidrofura.no, seguido da adição de fosfonato de dialquil cl.e tosiloximetilo produz o intermediário fosfonato di-protegido desejado de fórmula geral III. 0 passo 2 processa-se com rendimentos relativamente elevados normalmente, uni rendimento de cerca de 90 do composto III a partir do intermediário IV.

passo 3 envolve a eliminação dos grupos protectores a partir do intermediário III. Isto pode ser feito aquecendo o composto intermediário III em meio ácido bem como através cie hidrogenólise siave. As condições de reacção para, a eliminação de grupos protectores deve ser familiar para urn perito da. especiali daõe. Um método preferido para a eliminação de um grupo do tipo do trifenilmetilo do grupo protector consiste no aquecimento em meio ácido. Um método mais preferido de eliminação compreende o aquecimento do composto III no seio de ácido acético aquoso a 80 % a uma temperatura de 80°C durante cerca de meia a uma hora. A eliminação do grupo protector trifenilmetilo padrão e um processo de elevado rendimento com rendimentos de cerca de c5 / do intermediário II de fosfonometil de dialquilo. 0 último passo do processo envolve a desalquilação do grupo do éster intermediá rio de halogeneto de trialquilsililo (ou halogeneto de trialquilsilano) da porção de fosfonato de dialquilo, para se obter a estrutura do ácido fosfónico do produto de fórmula geral I. Um método preferido ce clivagem no último passo do processo em curso consiste na. reacção do intermediário II de fosfonato de dialquilo, / .

com o reagente de halogeneto de trialquilsilano para se efectuar a clivagem seguida da adição de água para a conversão em ácido fosfónico I.

Num método mais preferido de clivagem do produto II, faz, -se reagir o intermediário II com um halogeneto de trimetilsilano, sendo os átomos de halogéneo mais preferidos os átomos de bro mo e de iodo. 0 produto de fármula gerei I pode isolar-se facil mente na sua forma de hidrato de ião diyolar por adição de mais acetona à clivagem preferida e ao maio reaccional de hidrélise.

Numa outra forma de realização, este último passo do .pro cesso envolve a utilização do reagente de halogeneto de trialquil, silano de halogéneo de trimetilsilano, sendo os átomos de halogé, neo escolhidos entre átomos, de bromo e de iodo e em que se incluiu após reacção com o halogeneto de trimetilsilano e antes da adição de água que é o passo seguinte de eliminação dos reagentes volá teis, sub-produtos e dissolventes.

Uma outra vantagem do processo global como se descreveu no esquema II é que se mantém a estereoquímica introduzida no diol inicial de fórmula geral V, permitindo deste modo a especificação da estereoquímica desejada no produto seleccionando o estereoisómero inicial apropriado.

A síntese de ácidos purin-9-il-alquilenoximetil-fosfónicos como representativos do processo aperfeiçoado, de acordo com a presente invenção, realiza-se, de preferência, como uma série de quatro passos a partir do material inicial (o composto de diol in* termediário de fórmula geral V) até ao produto de fórmula geral I. Os passos que compreendem o processo são os seguintes:

(1) Reacção do purin-9-il-alquileno-diol V apropriado com um composto precursor de grupo protector de fórmula geral PG-Σ, em que PG represente um grupo protector selectivo que possui massa estérica tal como trifenilmetilo e X representa uma porção de grupo eliminável escolhido er.tre grupos halogeneto para se obter o produto intermediário õe grupo di-protegido IV;

(2) Tratamento de IV com um hidreto de metal alcalino e depois com uni reagente de fosfonato de dialquilo de fórmula geral VI para se obter o produto intermediário dialquilfosfonilmetilo III;

(3) Eliminação de grupos protectores rG a partir de III pelo processo de eliminação de grupo protector padrão, tal como hidrólise em meio ácido ou hidrogenólise, suave, para se obter um produto intermediário II de dialquilfosfonilmetilo desprotegi do; e (½) Clivagem dos grupos alquilo cie éster de fosfonato a partir do composto intermediário II por desalquilação do éster intermediário de halogeneto de trialquilsililo (ou halogeneto ce trialquilsilano) para se obter o produto I desejado.

Uma forma de realização preferida da presente invenção consiste num processo para a preparação de (S)-9“(3’hidroxi-2-fosfonilmetoxipropil)-B em que o símbolo B representa uma base de purina escolhida entre adenin-9-ilo ou guanin-9-ilo que compreende os seguintes passos consecutivos:

(1) Reacção de 9-(S)-(2,3-di-hidroxipropil)-B com clorotrifenilmetano para se -obter V, 3¹ -0-bis-trifenilmetil-(S) -9-(p¹ , 3'-di-hidrnxipropoil)-B ;

(2) Tratamento de 43¹ -0-bis-trifenilmetil-(5)-9-(2¹ ,.3¹ -di-hidroxipmpil)-B com hidreto ce sódio e depois com cietilfosfonato de tosiloximetilo para se obter N-3¹-O-bis-trifenil-

1Σ fmetil-2*-0-(dietilfosfonilmetil)-(£)-9-(2’,3'-di-hidroxipropil)-B ;

(3) aquecimento de N, 3¹-O-bis-trifenilmetil-2'-O-Cdietil fosfonilmetil)-(S)-9-(2',3'-di-hidroxipropil)-B em ácido acético aquoso para se obter 9-(2’-0-dietilfosfon.ilmetil)-(S)-(2’,3'-dihidroxipropil)-B ; e (4) Tratamento de (2-0-dietilfosfonilmetil)-(S)-9-(2’,3'-di-hidroxipropil)-B com bromotrimetilsilano e depois com água seguida de acetona, para se obter 2-0-fosfonilmetil-(S)-9-(2’,

3'-di-hidroxipropil)-B.

2®^sc£i£ã° das^formas_de_realização específicas processo da presente invenção é ilustrado com maior de. talhe nos exemplos seguintes dirigidos a certas formas de realização preferidas dos passos do processo descrito atrás· Estes exemplos, porém, não devem ser encarados como forma de limitar 0 âmbito da presente invenção. Nos exemplos que se seguem, utiliza dos para ilustrar 0 processo anterior, as temperaturas quando não especificadas são expressas, como anteriormente em graus centígrados. Os pontos de fusão não estão correç. tos. As características do espectro de ressonância magnética nu clear dos protões (RMR) referem-se a trocas químicas G^) expres. sas em partes por milhão (ppm) em função do tetrametilsilano (TMS) como referência padrão. A área relativa referida para as várias trocas nos dados do espectro de RMN dos protões correspon de ao número de átomos de hidrogénio de um tipo funcional parti, cular na molécula. A natureza das trocas bem como a multiplicidade são referidas como singlete largo (sl), singlete (s), multiplete largo (ml), multiplete (m), doblete (d), doblete de do-

bletes (dd), triplete (t) ou quarteto (q). As abreviaturas uti lizadas são DNSO-d.^ (perdeuterodimetilsulfóxido), CDCl^ (deute ro clorofórmio) e são por outro lado convencionais. As descrições do espectro infravermelho (IR) incluem apenas os números de onda de absorção (cm ) que possuem um valor de identificação do grupo funcional. As determinações IR foram feitas utilizando brometo de potássio (xJBr) como diluente. Todos os compostos possuíam análise elementar satisfatória. Os exemplos 1-4 dizem respeito a ad.enin-9-llo como base e os exemplos restantes a guanin-9-ilo como base.

Passo 1)

Nó,3¹-õ-ris-(t rifenilmetil) - (S)-9-(2',3¹-d i-hid roxi)-pro· pil-adenina (N,O-di-tritil ΓΗΡΑ; IV)

Tratou-se uma suspensão de IHPA (9-(2¹ ^‘-úi-hidroxipro (200 ml) com clorotrifenilmetano (00,70 g, 0,2&9 mole), trietilArrefereduzida e dividiu-se o ree água. Secaram-se as capor cromatografia. sobre gel de sílica, elutriando com acetato de etilo-hexano 1:1. As fracções apropriadas foram combinadas e

concentradas a pressão reduzida para se obter cerca de um rendimento de 65 % de ditritil-DHPA IV sob a forma de uma espuma incolor. Obteve-se uma amostra analítica no seio de CGl^/nexano sob a forma de um sólido cristalino amorfo, ponto de fusão 230-231°C, ^ΧΗ 10(360MHz, CDC1₃, Me^Si) 7,93(s, 1H), í 7,66(s, 1H), 7, complexo, 30H), 7,0Õ(s, 1H), 4,40(d, J=14Hz, IE), 4,30(dd, J= =7,14Hz, 1H), 4,15(d, J=7Ez, IE), 3,26(dd, J=7Hz, 1H), 2,94( d, J=7Hz, 1H), l,^5(s, IE, trocas com lyo);

Análise : (-4,/3/3°.) C,E,N.

Exemplo 2

Passo 2

ZTó, 3' -O-Bis-(t rifenilmetil)-2' -O-(dietilfosfonilmetil)-(0)-9-(2¹,3'-di-hidroxipropil)-adenina Ifl

Tratou-se uma solução de ditritil-DHPA (IV 9,12 g,

0,0137 mole) em tetrahidrofurano anidro (30 ml), numa atmosfera de árgon, com hidreto de sódio (0,6 g, 0,0150 mole ,dispersão em 61eo a 60% em peso).Agitou-se a suspensão resultante durante 15 minu tos e depois adicionou-se tosiloximetildietilfosfonato (4,0 g, 0,0137 mole) dissolvido em tetrahidrofurano (10 ml). Agitou-se a mistura resultante durante 14 horas à temperatura ambiente numa atmosfera de árgon, na altura em que a análise cramatográfica da camada fina da mistura indicou o termo da reacção. Adicionou-se depois uma solução salina e extraiu-se a mistura exaustivamente com acetato de etilo. Secaram-se as camadas combinadas de acetato de etilo sobre sulfato de magnésio e concentrou-se á pres /

sao reduzida.0 óleo obtido foi submetido a cromatografia sobre gel de sílica elutriando em primeiro lugar com acetato de etilo-hexano 1:1 e depois com acetato de etilo-hexanomstano 90:5:5· Combinaram-se as fracções apropriadas e concentrou-se a pressão reduzida para se obter 10,3 g (90 do fosfonato III sob a forma de uma espuma incolor. Obteve-se uma amostra analítica no seio de acetato de etilo-hexs.no por cristalização lenta em concentração diluída para produzir cristais amorfos, ?. F. u8-39°C, ^XH RMN(3óOMHz, CDCly ke^Si) á 7,97(s, 11), 7,82(s, 1H), 7,39 (dd, 1=3,5, 11Hz, ÓH), 7,32(dd, 1=3,5,11Hz, óH), 7,2ó(m, complexo^ 18H), 6,90 (s, ÍH), 4,33(ABqd, 1=7, 14α z , 2H), 3,/4(m, complexo, ÓH), 3,6O(cd, 1=11, l^Hz, 1E), 3,22(A3qd, 1=3,5, 21'.z, 211), l,25(t, . = /' z, 3 >, l,17(t, l=7Hz, 3H);

Análise: (C_clH_KPN 0_cP) C,H,N.

Λ Λ 5 5

Exemplo 3 rssso 3)

2¹ -0- (dietilfosfonilmetil) -{8 )-9-(2¹ ,3 ’ -di-hidroxi)-propil)-adenina (dietil-C-HPkPA: li)

Aqueceu-se uma solução de 2 g (0,00236 mole) de ditritil fosfonilmetilo DHPA, III num banho de vapor com ácido acético aquoso a 80 Após \2 hora, a analise por cromatografia em camada fina indicou que a reacção terminava. Eliminaram-se os reagentes voláteis e os subprodutos por meio de co-destilação com 4 volumes sucessivos de etanol absoluto, a pressão reduzida e finalmente com 2 volumes de tolueno, de modo semelhante. Purifi1Ζ z

CQU-se o resíduo solido remanescente por cromatografia sobre gel de sílica elutriando com metanol a 10 / em cloreto de metileno para se obter 0,75½ & (89 ,?) ôe dietil-S-ΗΡχΛ II sob a forma de um sólido cristalino, ponto de fusão = 15^°G; “35° (etanol, 0 = 0,16).

UVí X máx 160, ^ΣΗ RKN(200PHz, uDCly ke^Si) £ 8,2(s, 11Ί), 7,9(s, 1H), 5,8(s, largo, 2H), A£(dd, 1=3, tHz, 1H), 4,i+5(m, 2H), complexo, Ml), 3,8ó(m, pH), 3,6(m, com plexo, 1H), 3,45(m, complexo, 1Ξ) , l,35(2t, óll).

Sxemplo 4

Passo 4) (S)(3-hid roxi-2-,fosfonilmetoxipropil)-edenina (S)-HPkPA; I)

Tratou-se uma solução de dietil-HPEPA (II; 1,00 g, 0,00278 mole) em cimetilformamida anidra (10 ml) numa atmosfera de azoto com bromotrimetilsilano (½ ml, 0,0278 mole). Após se ter deixado repousar a mistura resultante durante 3 horas s temperatura ambiente, eliminaram-se os reagentes voláteis e os subprodutos a 60°C e durante 5 mm. Tratou-se o resíduo restante com agua (5 ml) e depois com acetona. Recolheu-se 0 sólido formado lavou-se com acetona e reeristalizou-se no seio de água em ebulição/etanol, para se obter um sólido cristalino amorfo branco, ponto de fusão 243,5-244°L (elevado) que provou ser um hemi-hidrato de I.

RMNÍIkSO-dó/I^⁰» LESO e D₂0 omissão de barulho) X 8,12(s, 1H), ò,10(s, 1E), 7,20(s, largo, ER), 4,<í6(ABqd, 0=3,5, 7, 14Ez, 3í),

3,75(m, largo, 5 linhas, 1E), 3,59(m, 2H), 3,3ò(m, 1H), 3?3O(s, largo, EH). Análise; (C^H^N^rO^ 1/SH^O) C,H,E.

Exemplo 5

Passo 1)

N-E-(Lifenil-4-(metoxifenil)-met il)-9-(E-hidroxi-3-(d ifenil-4-(metoxifenil)-metoxi)-p ropll)-gusnina (17)

Tratou-se suspensão de 9-(2,3-di-hidmxi)-prr>pil-guanina (5,3 g, 0,022 mole) em dimetilformamida anidra (100 ml) com 30 g (0,097 mole) de p-anisildifenilclorometano, 40 ml de trietilamina e 0,5 g ce 7,’T-dimetilaminopiridina e aqueceu-se a mistura resultante durante 12 horas a 8J°C. Arrefeceu-se depois a solução, adicionou-se metanol (50 ml), eliminou-se os reagentes voláteis e os subprodutos em vácuo a 70G durante 5 mm . Divi diu-se o resíduo entre acetato de etilo e água e secaram-se as camadas de acetato de etilo combinadas (KgSO^) e concentrou-se em vácuo. 0 óleo escuro restante foi submetido a cromatografia sobre gel de sílica elutriando com acetato de etilo/hexano 1;1 para se obter 4,5 g (27 _z-) do composto bis-monometoxitritilo sob a forma de uma espuma cor de laranja clara, ponto de fusão = = 104-10ó°C (dec.), •’έ RMN(GDC1., Me^Si) í 7,3^(m, óH), 7,2ó(m, 10H), 7,16(m, oE), ó,7b(d, J=7Hz, EH), 6,72(d, J=7Hz, EH), 6,23(s, 1H), 5,00(s? 3rso, 2H), 3,95(m, l^rgo, EH), 3,74(s, 3H), 3,14(a, largo, 1H), E,cc(s largo, 1H); ¹³C REH(90MHz, CDCl^, Me^Si) (£ 159,97, 15^,54, 150,05, 157,34, 153,55, 145,51, 144,04,

143,95, 1Μ·0,11, 137,76, 136,27, 135,10, 130,05, 128,82, 128,12,

127,90, 127,‘Λ, 127,5+, 126,87, 126,43, 11+,99, 113,06, 112,85,

86,45, 70,4-5, 69,43, 67,79, 64,26, 55,04, 47,93;

UV (CHCl ) λ máx 285,5(e = 12,277) ; I'KOr) 3210( largo), 3020, 3010, 2985, 1720, 1605(s), 126o(s), 700 cm¹; ΕΜ(ΞΙ) 76δ(Μ=1,1Ο); Análise: (Ο^θΗ^Ν^Ο^) C,H,N.

Exemplo 6

Passo 2)

N-2-Í difenil-+-(metoxifenil)-metil-9-( 2-dietilfosfonilmetoxi —3“( difenil-4-( metoxifenil)-metoxi)-propil)-?ua nina (III)

Tratcu-se uma solução de bis-(monoir.etoxi)-tritil DHPG a partir do ex. 5 (3,0 g, 0,0039 mole) em TEF anidro (30 ml) num banho com NaH (Aldrich, 0,311 g, C,CC41 mole, 6c / em peso êm óleo). Agitou-se a solução durante 15 minutos h temperatura ambiente, depois tratou-se com dietilfosfonato de tosilcximetilo (l,50 g, 0,CC46 mole), agitando-se a mistura resultante durante 12 horas h temperatura ambiente. A análise cromatográfica de camada fina da mistura impura revelou a ausência do álcool inicial (Rf C,4 em acetato de etilo/hexano 1:1) e a presença de um produ to polar simples (Rf 0,1 no mesmo). Adicionou-se metanol (10 ml) e eliminou-se os produtos voláteis em vácuo. Dissolveu-se o óleo restante em acetato de etilo aplicado a uma coluna de gel de sílica (ca. 3 x 300 cm ) e fez-se a elv.ição com acetato de etilo puro. Obteve-se 0 produto em 40 fracções que se combinaram e concení ts trou-se em vácuo para se obter 3,2 g (90 -') de uma espuma incolor, ponto de fusão = 78-80°C.

^XH RMN( 360 í-Hz,

7,27( m, 12H), 7

2E), 6,21(s, 111), 5,0C-(s largo, 27), 4,17(m, 17), 4,C7(q, -T-7Fz, ffl), 3,98(1, J=7Hz, 2H), 3,8CU, Ui), 3,7^(s, 3E), 3,71(s, 3H), 3,ó7(m, complexo, U^T), 3,62(m, complexo, 1E), 3,14(m, 1F), 1,2^ (t, J=7Hz, 3E), l,19(t, J=7Hz, 3E); 13C

RW(9C<Iz, CDC1 , Me^Si) í 159,71, 158,52, 157,40, 153M, 140,73, 143,48, 140,02, 137,91, 13^,87, 130,C4, 128,79, 128,10, 127,86,

127,69, 127,55, 127,4c, 126,36, 126,31, 114,65, 113,03, 112,71,

86,45 , 79,25(J_c__c__c__p = 9Hz), 70,28, 67,59, 64,C9, (J_c__p=166,5Sz),

62,10, 54,98, 44,42, 16,42; UV(CEC1J λ max 285,5( e = 12,602); Análise: (C,H.

r? (

Passos 3) e 4) (S)-9-(3-hidroxi-2-fosfonilmetoxipropil)-guanlna (S-HPMPG)

Aqueceu-se suavemente uma solução de bis-(monometoxi)-tritil-dietilo HPMPG (1,5 g, 0,0016 mole) em ^ciôo acético aquo so a 80 % (50 ml) num banho de vapor durante ~/2 hora. A análise cronatográfica de camada fina indicou que o fosfato inicial estava ausente e que o subproduto de tritanol e o dietil-FPMPG foram os únicos compostos presentes (Fr 1,0 e 0,2 em cloreto de metano 1/metileno a 10 %, respectivamente). 3vaporcu-se a mistura até /

-V.:^rr / * à secagem, co-evaporou-se com etanol absoluto (½ x 100 ml) e finalmente com tolueno (2 x 100 ml). Triturou-se o sólido amarelo obtido no seio de acetato de etilo/tolueno (1:1, 3 ^x 100 ml) e a CGF dos extractos de acetato de etilo/tolueno indicou que ape nas o tritan^l estava presente. Secou-se o material sólido restante após trituração, por meio de evaporação com tolueno e secou-se novamente em vácuo durante mais duas horas. Tratou-se o dietil-EPMPG impuro obtido deste modo (ponto de fusão 37-90°C) com 5 ml de bromotrimetilsilano em d im etil formam ida. anidra (10 ml). A mistura amarelo claro resultante permaneceu em repou so à temperatura ambiente durante 5 horas. Eliminaram-se os reagentes volaíteis e os subprodutos em vácuo, adicionou-se água (5 ml) e acetona (5 ml) e conservou-se a solução turva a -20°0 durante 1 hora. Recolheu-se o sólido formado por filtração de sucção, lavou-se com acetona e recristalizou-se no seio de água/ /acetona, para se obter um sólido branco sujo de ponto de fusão 135-190°C (dec.).

Ήΐ RMN(36OXH2, EM£0-d6) á 7,7^(s, 1H), 6,47(s largo, 2H), ^,15(p?rte B, ABq, J=3,5, iMlz, 1H), 3,9S(parte A, ABq, 2=7, 14·ιΐ2, 1Ή), 3;67(m, complexo, ΓΞ), 3,62(m, 5 linhas, 2H), 3?37(m, complexo, 211), REE(9011Hz, DkSO-dó) í 156,72, 153,67, 151,31,

13o,25, 115,03, 60,45(^.0^= 10Hz),

69,86, 66,39,

64,61(J_c_p= 166hz),

43,cl.

Ixemplo o

Preparação do produto inicial 9-(2,3-di-hidroxipropil-guanina.

2' ,3'-0-Isopropilideno-6-j-benzil-(s)-9-(2'>3' d rox i)-p ro p il)-gua nina

Secou-se no forno um frasco ce 250 κΐ g tubuladuras, de fundo redondo provido com esguichou-se com árgon e carregou-se com hidreto de sódio (1 le, ε 60 > em peso no óleo)

Lavou-se o hicreto sócio nas seco (250ml, destilada a partir de purina* (10,00 g, 0,0^1 mole,

Ad i c ionou-s e 2 - amir.o- 6- benz ilox i preparada a partir ce cloreto de

2-aminopurin-6-il-trimetilamónio) num banho e aqueceu-se a solução a 60°C durante 1 hora. Adicionou-se então o isopropilice no-D-glicerol-^-tosilato (11,bó g, 0,0^1 mole, ZLuka) de uma só vez, seguindo-se depois a adição de uma quantidade catalítica (I g) de rante do-se da mistura impura revelou a. presença do isómero (mr j,7 em cloreto metanol/me

Λ

X·acetato de etilo produziu 10 g do g co * MacCoss,

26, 19c5 ; iburis,

Λ*

isdmero cristalino Γ-7, ponto de fusão 184-186°C, (rendimento global de cO _? , proporção de N-9/H-7, 5:D· A caracterização de cada isórnero foi a seguinte:

N-9: ¹H RMN (360 1Hz, CI-C1₃, Me^Si) í 7,66(s, 11), 7,47(d,

J=1 Hz, 2H), 7,30 (m, complexo, 3E), 5,52(s, 21-:), 4,93(s largo, 2H), 4,39(nl·, complexo, 1E), 4,19(8d, parte A, ABq, J-4, 14Hz, 11) 4,08(cd. parte B, ABq, J=4Hz, ÍH), 4,01(dd, J=6, 3Hz, 1H),

3,66(dd,	=6, gRz, 1H), l,32(s, 3H), l,2õ(s, 3E) ; 13_c
RMN(Cm,, ú	r-.e^oi) Ióg-,47, 158,90, 153,/^u, 139,g5, lp5,93.

127,80, 1^7,57, 1^7,39, 114,44, 109,37, 73,44, 67,47, 65,68,

49,42, 44,66, 26,12, 24,66; uma experiência de desacoplamerto heteronuclear fechado (^*³C) revelou que C-5 estava acoplado ape nas ao protão sm u-u (d = lôHz), enquanto que 0-4 estava acopla do ao protão em C-8 (J = 12Ez) e os protões de metileno em C-l (J = 4Hz; EM (Cl) 356(K+H, 100), 266(X-benzilo, 18), 91(0^ fenilo, 95).

N-7: ¹H RMN (36OMEZ, CDCK , Xe^Si) S 7,20(s, 1E), 7,350, complexo, 5H), 5,46(s, 2Ή), 5,O8(s largo, 2Ξ), 4,31(2 sobrepondo m, complexo, 211), 4,20(dd, J=7, 14Hz, 1E), 3,82(dd, J=6, cEz, 1H), 3,52(dd, J=6, 8Hz, 1E), l,2ó(s, 36), l,24(s, 3H); ¹³C RMN(901Hz, CBC1., Me^Si) <í 163,80, 159,10, 156,76, 145,63, 135,33, 128,47, 128,25, 128,07, 109,84, 106,91, 74,20, 67,99, 65,94, 49,oO, 2:6,47, 25,12; realizou-se uma experiência de desa coplamento heteronuclear fechado (como para oisdmero E-9) c.ue indicou que C-4 estava acoplado apenas ao protão em C-8 (j’=10Hz) enquanto que 0-5 estav-e acoplado ao protão em C-g (2=12Hz), mas também aos protões de metileno em C-l' (j'=4Hz);

-<·*

Análise;

b. 9-(2,3-di-hiaroxipropil)-guanina.

Aqueceu-se uma solução de 2’,3'-O-isopropilideno-6-O-ben zil-(S)-$-(2’,3’-di- hic.roxipropiD-guanina (5,0 g, 0,0139 mole) em ácido acético aquoso a 80 (co ml) num banho de vapor duran te 1 hora. Eliminou-se os reagentes voláteis, subprodutos e d is solvente em vácuo e evaporou-se a. partir do resíduo restante quatro volumes de 100 ml de etanol absoluto e depois dois volu mes de tolueno. Becristalizou-se o material sólido branco no seio de âgua e secou-se a 5 mm durante 12 horas para produzir 2,8 g (69 %) de 9-(5)-(2 ,3-di-hidroxipropil)-guanina sob a forma de um sólido branco, ponto ce fusão = 2o0°C.

¹H RMN(3Ó0KHz, LMSO-dó) í 10,57(s, 111), 7,?8(s, 1E), 6,44(s largo, 2H), 5,05(8, J=5Hz, 1H), 4,7?(t, J=5Hz, 1E), 4,07(8, J=llEz,

1H), 3,77(2 sobrepondo m, complexo, zH)

3,35(41, complexo, 1H),

3,27(m, complexo, 11); ¹³G BMN(90EHz, LESO-dó) <í 1$6,9Ο, 153,47,

151,32, 138,36, 116,3o, 69,77, 63,51, 46,10; UV (0,17 aq. EG1) / máx 253(e=12,3O5), \ máx 272(e=ô ,4'95); (EaOH aq 0,11)

A máx 256(e=10,096), λ max 267(e=10,614); /X = -45°, = -54° (c=0,5, DMSO);

IV(EBr) 3I0O (s largo), 3100(s), 1095, 1650, 160$ cm^{* 1}; Análise: (όβ^ρ^θβ) υ,Π,Ε.

Pre pa rou- sé 6-(2-metoxietoxi-9-(2, 3-di-hidroxipropil)-guanina seguindo substancialmente 0 processo descrito no exemplo

A e fazendo a desprotecção como no exemplo 3 utilizando

6-(2-metoxietoxi)guanina no lugar de 2-amino-6-benziloxipurina.

* (meilloerg, J.; Liljenterg, k. , Johansson, N.G.,

Tetrahedron Lett, 17, 1986, p. 877.

Claims

Reivindicações

1Processo para a preparação de compostos de fórmula geral

B aiq, H-Ç-O-CHj alq₂

OH na qual alq^ e alq₂ representam, cada um , independentemente, um radical alquileno ^c-j_4' ^e

B representa uma base de purina escolhida entre adenin-9-il e guanin-9-il, caracterizado pelo facto:

a) de se fazer reagir um diol como composto inicial de fórmula geral

B |^lq1

H-C-OH V

I y

OH com um composto precursor do grupo protector de fórmula geral PG-X, na qual PG representa um grupo protector selectivo que possui uma porção orientada e X representa uma porção de grupo eliminável escolhida entre halogenetos, para se obter o grupo di-protector in-27- intermediário de fórmula geral

PG—B alq₁

HCOH |^lq2

OPG

IV

b) de se tratar o composto de fórmula geral IV com um hidreto de metal alcalino e depois com um composto de fórmula geral l-ch₂p-or₁ VI or₂ na qual R^ e R₂ representam, cada um, independentemente, um radical alquilo C^ _g e L representa um grupo orgânico eliminável para se obter o intermediário dialquilfosfonilmetilico de fórmula geral

PG-B i¹ ¹ ?

HCOCH-P-OR. III

I ¹ alq₂ ^0R2

OPG

c) de se remover os grupos protectore PG do composto de fórmula geral III por um método escolhido entre o aquecimento do composto de fórmula geral III em meio ácido e a hidrogenólise suave do com-28- posto de fórmula geral III para se obter o intermediário dialquilfosfonilmetílico desprotegido de fórmula geral

B

I alq₁

HCOCH^P-OR^ ^I]: _η ^0R2 alq_o

I ²

OH

d) de se cindir os grupos e R₂ alquílicos de éster fosfonato a partir do composto de fórmula geral II por desalquilação do éster mediada pelo halogenotrialquilsilano do composto de fórmula geral II seguindo-se a adição de água para produzir o composto desejado de fórmula geral I.
2. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o grupo protector PG do composto de fórmula geral PG-X ser escolhido no grupo que consiste em trifenilmetilo, p-metoxifenildifenilmetilo e di-(p-metoxi-fenil)-fenilmetilo e X representar um halogeneto escolhido entre os iões cloreto e brometo.
3. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o hidreto metálico utizado no passo b) ser um hidreto de metal alcalino.
4. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo facto de o composto de fórmula geral VI no passo b) ser esco lhido entre os compostos dialquilfosfonato de tosiloximetilo e dialquilfosfonato de trifliloximetilo.
5. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o método de remoção do grupo protector do passo

c) consistir no aquecimento em ácido aquoso.
6. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de a cisão do passo d) consistir na reacção do fosfonato de dialquilo intermediário de fórmula geral II com um reagente halotrimetilsilano seguindo-se a adição de ãgua para efectuar a conversão no ácido fosfónico de fórmula geral I.
7. - Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo facto de PG representar um grupo trifenilmetilo e X representar um ião cloreto.
8. - Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo facto de o hidreto metálico ser hidreto de sódio.
9. - Processo de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por o composto de fórmula geral VI ser di-etilfosfonato de tosiloximetilo.
10. - Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo facto de o método de remoção do grupo protector do passo c) consistir no aquecimento em ácido acético aquoso.
11. - Processo de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo facto de o reagente halogenotrialquilsilano ser halogenotrimetilsilano,representando o halogêneo um ãtomo de bromo e um átomo de iodo e de se incluir após a reacção com o halogenotrimetilsilano e antes da adição de água um outro passo de remoção dos reagentes voláteis, produtos secundários e dissolventes.
12.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de alq^ e alq₂ representarem grupos mono-metileno.

/
13. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o grupo B representar adenin-9-ilo.
14. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o grupo B representar guanin-9-ilo.
15. - Processo para a preparação de (S)-9-(3-hidroxi-2-fosfonilmetoxipropil) B, em que B representa uma base de purina escolhida entre adenin-9-ilo ou guanin-9-ilo, caracterizado pelo facto:

a) de se fazer reagir (S)-9-(2,3-di-hidroxi-propil)B com clorotrifenilmetano para se obter o N, 3'-O-bis-trifenilmetil-(S)-9-(2',3'-di-hidroxipropil)B;

b) de se tratar N,3'-O-bis-trifenilmetil-(S)-9-(2¹,3'-di-hidroxipropil)B com hidreto de sódio e depois com di-etilfosfonato de tosiloximetilo para se obter o N,3¹-O-bis-trifenilmetil-2'-0-(dietilfosfonil-metil)-(S)-9-(2',3’-di-hidroxipropil)B;

c) de se aquecer N,3'-0-bis-trifenilmetil-2'-0-(di-etil-fosfonilmetil)-(S)-9-(2',3'-di-hidroxipropil)B no seio de ácido acético aquoso para se obter o (2'-0-di-etilfosfonilmetil)-(S)-9(2¹,3’-dihidroxipropil)B; e

d) de se tratar (2'-O-di-etilfosfonilmetil)-(S)-9-(2',3¹-di-hidroxipropil)B com bromotrimetilsilano e depois com água seguida de acetona para se obter o 2'-O-fosfonilmetil-(S)-9-(2',3'-di-hidroxipropil)B.
16. - Processo de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo facto de B representar um grupo adenin-9-ilo.
17. - Processo de acordo com a reivindicação 15, caracteri-31- zado pelo facto de B representar um grupo guanin-9-ilo.