PT2203165E - Paracetamol para utilização no tratamento do glaucoma - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO "PARACETAMOL PARA UTILIZAÇÃO NO TRATAMENTO DO GLAUCOMA" Área da Invenção

Esta invenção relaciona-se com um medicamento, mais especificamente com um medicamento para utilização no tratamento do glaucoma.

Antecedentes da Invenção 0 glaucoma é uma doença ocular bem conhecida, caracterizada por uma pressão anormalmente elevada no globo ocular que leva à perda das células ganglionares da retina de acordo com um padrão caracteristico de neuropatia ótica. Embora o aumento da pressão intraocular seja um fator de risco significativo para o desenvolvimento de glaucoma, não existe um limiar estabelecido para a pressão intraocular que causa glaucoma. 0 dano do nervo pode ocorrer a pressões relativamente baixas em alguns pacientes, enquanto que outros podem ter uma pressão ocular elevada durante anos e ainda assim nunca desenvolverem o dano. 0 glaucoma afeta uma em cada duzentas pessoas com cinquenta anos ou mais jovens, e uma em cada dez com idade superior a oitenta.

Se não for tratado, no entanto, o glaucoma leva ao dano permanente do nervo ótico e resultante perda de campo visual, causando problemas de visão e por vezes cegueira. A perda do campo visual ocorre frequentemente de forma gradual ao longo de um periodo de tempo longo e pode ser reconhecida apenas quando já está bastante avançada. Vários medicamentos com diferentes mecanismos de ação estão atualmente disponíveis para o tratamento do glaucoma, cada 2 um com um mecanismo de ação específico e eficácia ou tolerância. Novas moléculas e mecanismos de ação são objeto de muita investigação. Sabe-se que a canábis ou a marijuana reduzem a pressão intraocular. No entanto, a utilização generalizada de canábis como uma substância recreativa ilegal, bem como os seus efeitos secundários limitaram a sua aplicação no tratamento da pressão intraocular no glaucoma.

Objetivo da Invenção É um objetivo desta invenção proporcionar um medicamento para utilização no tratamento do glaucoma. 0 documento WO 2004/050065 indica inibidores da anidrase carbónica para diminuir a pressão intraocular.

Sumário da Invenção

De acordo com esta invenção é proporcionado, tal como definido na reivindicação independente anexada 1, paracetamol para utilização num método para o tratamento do glaucoma, método esse que compreende a administração a um paciente com necessidade de tal tratamento, de uma quantidade eficaz de paracetamol (também conhecido como acetaminofeno). Outras características preferíveis encontram-se definidas nas reivindicações dependentes anexadas.

De acordo com um aspeto da invenção proporciona-se que o paracetamol seja administrado na forma de uma solução oftálmica; que a solução contenha entre 0,1 a 5% de paracetamol; e que sejam administradas a cada olho uma a duas gotas da solução a cada 4 a 6 horas. 3

De acordo com um segundo aspeto da invenção, proporciona-se que o paracetamol seja administrado a um paciente por via oral a cada 4 a 6 horas. É ainda divulgada uma solução oftálmica incluindo paracetamol como o seu ingrediente ativo.

Outras caracteristicas da divulgação proporcionam que a solução inclua paracetamol no intervalo de 0,1 a 5%; e que a solução ainda inclua um ou mais dos seguintes excipientes: hidroxipropilmetilcelulose, cloreto de benzalcónio, ácido poliacrilico; e Teargel (RTM). A invenção também proporciona a utilização de paracetamol no fabrico de um medicamento para utilização num método para tratar o glaucoma, método esse que compreende a administração a um paciente com necessidade de tal tratamento, de uma quantidade eficaz de paracetamol.

Outras caracteristicas da invenção proporcionam que o referido método inclua a administração oral de paracetamol, alternadamente a administração oftálmica de paracetamol a um paciente.

Também é divulgada uma embalagem que inclui pelo menos uma dose de paracetamol numa quantidade eficaz para o tratamento do glaucoma e instruções para a utilização do mesmo num tratamento para o glaucoma.

Outras caracteristicas da invenção proporcionam que pelo menos uma dose seja adequada para administração oral, alternadamente adequada para administração oftálmica. 4

Breve Descrição dos Desenhos A invenção será descrita apenas a titulo de exemplo fazendo referência à Figura 1, que é um gráfico de linhas a duas dimensões que mostra os valores de fluxo médios de paracetamol em solução aquosa (0,1%) e Teargel® (0,1%) através das córneas humana e de coelhos, onde as barras representam o erro-padrão da média.

Descrição Detalhada Fazendo Referência aos Desenhos

Tratamento de Pacientes com Glaucoma

Em testes iniciais administraram-se oralmente 1000 mg de paracetamol a cada 4 a 6 horas a vários pacientes com glaucoma. Em todos os casos a redução da pressão intraocular foi na ordem dos 30% após 24 a 48 horas. Isto compara-se bem com o efeito de diminuição da pressão de preparações comerciais disponíveis.

Extrapolando este teste, parece que uma dosagem no intervalo de 500 a 1000 mg deverá ser suficiente para tratar o glaucoma. Ao mesmo tempo que tais doses a cada 4 a 6 horas mostraram ser eficazes, é possível que esta frequência possa ser reduzida.

Embora o mecanismo de ação na presente aplicação não seja completamente compreendido, suspeita-se que seja através da ativação indireta por parte do paracetamol, dos recetores canabinóides CB1. O recetor CB1 é expresso no sistema nervoso central, olho e numerosos outros tecidos, e foi reconhecido como um alvo terapêutico importante para o glaucoma. Suspeita-se que seja por esta via que o paracetamol atue para reduzir a pressão intraocular. 5

Dados os efeitos do paracetamol nos sistemas hepático e renal, propôs-se uma solução oftálmica como o modo preferível de transportar uma quantidade eficaz de paracetamol ao olho num paciente com glaucoma.

Preparou-se uma solução oftálmica do seguinte modo: utilizou-se uma solução de 1 mg/mL (0,1%) de paracetamol em tampão fosfato salino (pH = 7,4) em metade das experiências e utilizou-se uma solução de 1 mg/mL (0,1%) de paracetamol numa suspensão de ácido acrílico em tampão fosfato para as experiências em córneas de coelhos. Em mais de 2000 experiências de penetração da córnea demonstrou-se que o paracetamol penetra bem na córnea. A penetração da córnea é estatisticamente melhorada de forma significativa quando o paracetamol é suspenso em gel de ácido poliacrílico. Estes testes foram conduzidos da maneira que se segue.

Materiais e Métodos Amostragem das córneas

As córneas recolhidas de dadores, que foram consideradas inadequadas para transplante devido a infeções tais como hepatite B e vírus da imunodeficiência adquirida (VIH), foram obtidas da Fundação Banco de Olhos do Observatório da África do Sul, de 6 pacientes (idade média ± DP, 35 ± 12 anos; intervalo 24-65 anos). Adicionalmente, as córneas de coelhos foram obtidas a partir de 6 coelhos recém-abatidos (Viveiros da Quinta de Country Lane, Kraaifontein, Cidade do Cabo, África do Sul). As córneas excisadas foram imediatamente colocadas numa solução McCarey-Kaufman e transportadas para um laboratório dentro de 6 horas. A solução McCarey-Kaufman consistia numa solução estoque de Meio 199 (Empresa Sigma Chemical, St. Louis, MO, E.U.A.), à 6 qual foi adicionado bicarbonato de sódio, bem como HEPES 25 mM e 5% de dextrano, antes de se utilizar a solução para o transporte das amostras de córneas. À chegada ao laboratório, as córneas foram hemiseccionadas. Uma metade foi imediatamente utilizada, e a outra metade foi sujeita a congelação rápida em azoto liquido e armazenada a -85 °C por um periodo inferior a 6 meses antes de ser utilizada. Pelo menos um pedaço de tecido corneano de cada amostra foi colocado em formalina e ai mantido para exame histológico. Não foi obtida nenhuma amostra em que existisse evidência clinica de alguma doença ou patologia da córnea que pudesse ter influenciado as caracteristicas de permeabilidade da córnea. 0 estudo foi aprovado pela Comissão de Ética da Faculdade de Ciências da Saúde da Universidade de Stellenbosch e pelo Hospital Académico Tygerberg na Cidade do Cabo, África do Sul.

Experiências de Permeabilidade e Histologia

Antes de cada experiência de permeabilidade, descongelaram-se amostras de tecido à temperatura ambiente em tampão fosfato salino (PBS, pH 7,4). Embora possa ter ocorrido algum dano ao nivel celular, demonstrou-se que os processos de congelamento, armazenamento e descongelamento não tiveram qualquer efeito adverso nas caracteristicas de permeabilidade dos tecidos corneanos em 2 estudos prévios (Van der Bijl et al., 2001; Van der Bijl et al., 2002). Posteriormente, as córneas foram cortadas muito cuidadosamente de modo a não danificar as superfícies endo ou epitelial, em secções de 4 mm2 e montadas em células de difusão através de fluxo (áreas expostas, 0,039 cm2), tal como previamente descrito (Van der Bijl et al., 1997; Van der Bijl et al., 1998; Van der Bijl et al., 2000) . Cada 7 experiência utilizando a solução de paracetamol foi repetida seis vezes para as córneas humanas e de coelhos, respetivamente. Antes de começar cada experiência de permeabilidade, equilibraram-se discos de tecidos durante 10 minutos com PBS (pH 7,4) a 20 °C tanto nos compartimentos doadores como recetores das células de difusão. A seguir ao equilíbrio, o PBS foi removido do compartimento doador e substituído por 1,0 mL de PBS contendo 1 mg/mL (0,1%) de paracetamol em PBS a pH 7,4 (p/v) ou então 1 mg/mL (0,1%) de paracetamol num gel de lágrima artificial comercialmente disponível, isto é, gel líquido Teargel® (Laboratórios Restan, Bryanston, África do Sul). O último é um gel transparente altamente viscoso, com um tempo longo de rutura do filme lacrimal. O gel, após a sua adição à câmara doadora, foi completamente tapado com um disco de teflon apertado e depositou-se 1 mL de PBS no topo do disco. 0 PBS não se misturou de modo algum com o gel, tendo sido simplesmente utilizado para prevenir a dessecação do gel durante as 24 horas da experiência. Cada grama do

último gel contém 2 mg de ácido poliacrilico e cetrimida a 0,01% m/m como conservante. Bombeou-se o PBS a 20 °C através das câmaras recetoras a uma velocidade de 1,5 mL/h com uma bomba de tubagem de alta precisão de 16 canais ISMATEC® e recolheu-se-o, por meio de um coletor de frações ISCO Retriever IV, a intervalos de 2 h durante as 24 h. Os estudos de permeabilidade foram efetuados sob condições sink, isto é, ao final de cada corrida a concentração da solução de paracetamol na câmara recetora nunca atingiu 10% da do compartimento doador. Foram recolhidas amostras contendo paracetamol em tubos de amostragem apropriados do coletor de frações. As amostras foram analisadas por HPLC com deteção UV na Divisão de Farmacologia da Faculdade de Ciências da Saúde da Universidade de Stellenbosch. As frações recolhidas foram analisadas quanto ao seu teor em paracetamol diretamente após finalização da respetiva experiência. Cálculo de Valores de Fluxo

Os valores de fluxo (J) através de membranas foram calculados através da relação J = Q/A x t (ng x cm-2 x min-1)

Em que Q indica a quantidade de substância que atravessa as membranas (em ng); A, a área de membrana exposta (em cm2) ; e t, o tempo de exposição (em minutos).

Cinética do Estado Estacionário

Quando não se obtiveram diferenças estatisticamente significativas (p<0,05; análise de variância e teste de múltiplos intervalos de Duncan) entre os valores de fluxo ao longo de pelo menos dois intervalos de tempo consecutivos, assumiu-se ter sido atingido um estado estacionário (equilíbrio cinético) para uma amostra particular de córnea.

Análise Estatística

Efetuaram-se análises de regressão não-linear (polinómios de terceira ordem) utilizando um programa de computador GraphPad Prism, Versão 4, 2003. Utilizou-se um teste F para comparar as curvas inteiras. Também se realizou um teste-t no estado estacionário para efeitos de comparação. Utilizou-se um nível de significância de 5% para todos os testes e comparações. 9

Deteção do Paracetamol por HPLC

Analisaram-se amostras contendo efluentes permeáveis recolhidas dos compartimentos recetores do aparelho de perfusão ao longo dos intervalos de amostragem de 2 horas, utilizando um cromatógrafo liquido binário de alto desempenho Hewlett Packard série 1100 (Agilent Technologies, Waldbronn, Alemanha) equipado com uma coluna analítica Zorbax Agilent Eclipse (XDB-C18) (tamanho de partícula de 3,5 ym), de 150 x 4,6 mm (ID). A última coluna foi precedida por uma coluna de guarda C18 de 30 x 2,1 mm (ID) (tamanho de partícula de 40 ym) . A temperatura foi mantida a 40 °C e utilizou-se uma velocidade de fluxo de 1.0 mL/min durante a corrida inteira. A fase móvel consistiu numa mistura de 2 solventes, A (KH2PO4 50 mol/L, pH 5,4) e B (acetonitrilo-isopropanol, 4:1 vol/vol). Utilizaram-se três misturas isocráticas de A:B na ordem sequencial que se segue: em primeiro lugar, de 0 a 1,0 min: 90% Solvente A / 10% Solvente B; em segundo lugar, de 1 a 4.0 min: gradiente linear até 70% Solvente A / 30% Solvente B; em terceiro lugar, de 4.10 minutos: voltou-se a utilizar 90% Solvente A / 10% Solvente B. Utilizou-se um tempo de equilíbrio de 2,5 minutos para 90% Solvente A / 30% Solvente B. Todos os reagentes utilizados na fase móvel foram de grau HPLC (Burdick & Jackson, Honeywell International Inc, Muskegon, MI), e todos os solventes inorgânicos foram filtrados através de um filtro de 0,45 ym. Utilizou-se água desionizada para preparar todos os padrões aquosos e soluções-tampão. Injetaram-se alíquotas (15 yL) de uma amostra de cada fração diretamente na coluna. Dado que não foi preciso nenhum procedimento de extração, não foi necessário determinar taxas de recuperação. O paracetamol foi detetado a 245 nm (tempo de retenção, 3,45 mins), enquanto que o tempo total da corrida foi programado para 5.0 minutos. O registo e integração dos 10 picos foram efetuados por meio de uma estação Agilent Chem. Incluíram-se aleatoriamente padrões introduzidos ao longo do intervalo de concentrações esperado de 250 ng/mL a 4000 ng/mL (4,0 yg/mL) em cada grupo de registos num detetor de onda variável (Agilent, Waldbonn, Alemanha). A calibração foi linear ao longo de todo o intervalo de concentrações (R2 = 0, 9999) .

Resultados

Experiências de Permeabilidade

Encontram-se apresentados na Figura 1 os valores médios de fluxo para paracetamol a 0,1 % em solução aquosa (PBS) e Teargel (TG) através das córneas congeladas/descongeladas de coelhos e humanas em função do tempo. As velocidades de difusão do paracetamol (tanto em PBS como em TG) através das córneas humanas foram maiores nas primeiras horas da experiência de difusão do que os valores encontrados para a difusão através das córneas dos coelhos. O estado estacionário também foi atingido muito mais cedo para a difusão do paracetamol através das córneas humanas. O Teargel como solvente não afetou a velocidade de difusão do paracetamol através das córneas humanas, dado que os gráficos são quase idênticos. O Teargel aumenta no entanto a velocidade de difusão do paracetamol através das córneas dos coelhos.

Obtiveram-se diferenças estatisticamente significativas (P < 0,05) quando se comparam as curvas inteiras utilizando um teste-F (polinómio de 3o grau) entre os valores de fluxo do estado estacionário do paracetamol (TG) e do paracetamol (em PBS) através das córneas dos coelhos (P<0,0001); o paracetamol (em PBS) através das córneas dos coelhos e 11 humanas (P<0,0001); e o paracetamol (TG) através das córneas dos coelhos e humanas (P = 0,0095). Não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas para o paracetamol (TG) e o paracetamol (em PBS) através das córneas humanas (P = 0,9939).

Para o paracetamol do paracetamol a 0,1% em PBS, os valores de fluxo no estado estacionário foram de 774 ± 30 ng-cm-2 .min-1 e 870 ± 76 ng-cm-2 .min-1 através das córneas dos coelhos e humanas respetivamente (Fig. 1) . Para o paracetamol do paracetamol a 0,1% em TG, os valores de fluxo no estado estacionário foram de 860 ± 39 ng.cm-2 .min-1 e 860 ± 33 ng. cm-2.min-1 através da córnea dos coelhos e humana respetivamente (Fig. 1).

Conclusões

Dado que o paracetamol tem sido utilizado de modo seguro em humanos há mais de 100 anos e os seus efeitos no corpo são bem conhecidos, a invenção proporciona uma descoberta promissora no tratamento do glaucoma. Isto é especialmente verdade para o paracetamol numa solução oftálmica que apresenta boa permeabilidade corneana ao paracetamol. Esta tem as vantagens do paracetamol atuar diretamente para ter um efeito direto nos alvos terapêuticos para o glaucoma, bem como de reduzir os seus efeitos nos sistemas hepático e renal.

Está previsto que doses de paracetamol que sejam eficazes no tratamento do glaucoma serão embaladas com instruções para a utilização do mesmo no tratamento desta condição. Tais doses podem destinar-se a administração oral e podem consistir em um ou mais comprimidos, cápsulas ou semelhantes. Alternativamente, as doses podem destinar-se a administração oftálmica e podem ser proporcionadas por um 12 ou mais recipientes de uma solução oftálmica adequada destinada a utilização única ou repetida.

Será apreciado que existam muitas outras formas de realização da invenção que se insiram no âmbito da invenção, particularmente no que diz respeito a formas de dosagem e regimes terapêuticos.

Referências

Van der Bijl P, van Eyk AD, Meyer D., "Effects of three penetration enhancers on transcorneal permeation of cyclosporine". Cornea. 2001; 20: 505-508.

Van der Bijl P, Engelbrecht AH, van Eyk AD, et al., "Comparative permeability of human and rabbit corneas to cyclosporin and tritiated water". J Ocul Pharmacol Ther. 2002; 18: 419-427.

Van der Bijl P, Thompson IOC, Squier CA., "Comparative permeability of human vaginal and buccal mucosa". Eur J Oral Sei. 1997; 105: 571-5.

Van der Bijl P, Van Eyk AD, Thompson IOC., "Diffusion rates of vasopressin through human vaginal and buccal mucosa". Eur J Oral Sei. 1998; 106: 958-62.

Van der Bijl P, Penkler L, Van Eyk AD., "Permeation of sumatriptan through human vaginal and buccal mucosa". Headache. 2000; 40: 137-41.

Lisboa, 31 de julho de 2013

Claims (6)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Paracetamol para utilização num método de tratamento do glaucoma, método esse que compreende a administração a um paciente com necessidade de tal tratamento, de uma quantidade eficaz de paracetamol.

2. Paracetamol para utilização de acordo com a reivindicação 1, em que a quantidade eficaz de paracetamol se encontra entre 500 mg e 1000 mg.

3. Paracetamol para utilização de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que o paracetamol é administrado ao paciente por via oral.

4. Paracetamol para utilização de acordo com a reivindicação 1, em que o paracetamol é administrado ao paciente na forma de uma solução oftálmica.

5. Paracetamol para utilização de acordo com a reivindicação 4, em que a solução oftálmica contém entre 0,1 e 5% de paracetamol.

6. Paracetamol para utilização de acordo com a reivindicação 4 ou 5, em que o paracetamol é administrado como uma a duas gotas da solução a cada olho, a cada 4 a 6 horas. Lisboa, 31 de julho de 2013