PT2049556E

PT2049556E - Novos macrólidos úteis contra doenças inflamatórias e alérgicas

Info

Publication number: PT2049556E
Application number: PT77883205T
Authority: PT
Inventors: Johannes Laurenz Kellenberger; Juerg Dreier; Stefan Bernhard Reinelt
Original assignee: Basilea Pharmaceutica Ag
Priority date: 2006-08-09
Filing date: 2007-08-08
Publication date: 2013-08-22
Also published as: US20100120706A1; AU2007283556A1; CA2658950C; EP2049556A1; KR20090035639A; PL2049556T3; EP2049556B1; CY1114481T1; JP5254231B2; BRPI0716408A2; KR101239490B1; AU2007283556B2; CN101511855A; ZA200900677B; DK2049556T3; CA2658950A1; JP2010500329A; ES2428874T3; MX2009001140A; WO2008017696A1

Description

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DESCRIÇÃO "NOVOS MACRÓLIDOS ÚTEIS CONTRA DOENÇAS INFLAMATÓRIAS E ALÉRGICAS" A invenção diz respeito a novos compostos macrólidos, à utilização dos compostos referidos a titulo de medicamentos, em especial para o tratamento ou a prevenção de doenças inflamatórias e alérgicas, a composições farmacêuticas contendo os compostos referidos e a processos para a sua preparação. A invenção diz respeito em especial a compostos macrólidos com actividade anti-inflamatória mediada sobretudo pela inibição da fosfodiesterase 4 (PDE4) o que os torna úteis para o tratamento e/ou a prevenção de doenças do tipo inflamatório e alérgico, tais como doença obstrutiva pulmonar crónica (COPD), asma, artrite reumatóide, dermatite atópica ou doença inflamatória dos intestinos. 0 monofosfato de adenosina cíclico (cAMP) é um segundo mensageiro chave nas células. Sabe-se que teores aumentados em AMP cíclico suprimem a reacção celular em diversos tipos de células inflamatórias e imunológicas, incluindo linfócitos, monócitos, macrófagos, neutrófilos, eosinófilos, basófilos e células epiteliais pulmonares. As concentrações intracelulares em cAMP são reguladas por adenilil ciclase e pelas nucleótido fosfodiesterases 2 cíclicas (PDE) . As PDE são uma família de enzimas que inactivam os nucleótidos cíclicos cAMP e cGMP por hidrólise a AMP e a GMP. 0 enzima específico para cAMP, PDE4, é o enzima predominante nas células pró-inflamatórias. Mostrou-se que o PDE4 está envolvido nos processos inflamatórios (cf. por exemplo, Lipworth B. J., Lancet (2005) 365, pág. 167, ou Giembycz Μ. A., Curr. Opin. Pharmacol. (2005), 5, pág. 238) . Crê-se portanto que os inibidores de PDE4 são úteis no tratamento e/ou na profilaxia de doenças inflamatórias e alérgicas tais como a asma, a bronquite crónica, o enfisema, a dermatite atópica, a urticária, a rinite alérgica, a conjuntivite alérgica, a psoríase, a artrite reumatóide, a doença obstrutiva pulmonar crónica (COPD), o choque séptico, a colite ulcerosa, a doença de Crohn, a síndrome de aflição respiratória do adulto e a esclerose múltipla.

Estão descritos numerosos inibidores de PDE4 na literatura, (veja-se por exemplo J. O. Odingo, Expert Opin. Ther. Patents, 2005, 15(7), 773; M. Hendrix, C. Kallus,

Methods and Principies in Medicinal Chemistry (2004), 22 (Chemogenomics in Drug Discovery), 243-288 (Wiley-VCH)).

Muitos dos inibidores de PDE4 conhecidos têm efeitos colaterais que limitam a sua dose, tais como vómitos e cefaleias.

Foram descritos derivados de eritromicina com um anel lactónico com cinco membros fundido às posições 11,12 do anel de macrolactona, por exemplo nos WO 02/16.380, WO 3 03/004.509, WO 03/042.228, WO 03/072.588, WO 03/024.986, US 2004/0038.915 e no WO 2005/067.919. Os documentos WO 02/16.380, WO 03/072.588, WO 03/024.986 e US 2004/0038.915 descrevem exclusivamente os assim denominados cetólidos contendo uma posição carbonilo anelar na posição 3 do esqueleto da eritromicina. Os WO 03/042.228, WO 03/004.509 e WO 2005/06.791 descrevem derivados macrólidos com um anel lactona em 11,12 e possuindo um substituinte de açúcar cladinose na posição 3 do esqueleto de eritromicina. Estes derivados são no entanto diferente, na sua estrutura, dos da invenção descrita adiante neste documento.

Também já foi descrita a redução do grupo carbonilo na posição 9 do esqueleto da eritromicina, por exemplo em Tetrahedron, 2003, 59, pág. 7033 ou no J. Med. Chem. 2003, 46, pág. 2706.

Todos os compostos macrólidos descritos nos documentos mencionados acima foram descritos como sendo úteis para o tratamento de infecções bacterianas. Também foi descrito que os macrólidos derivados da eritromicina possuem uma actividade anti-inflamatória (por exemplo, Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 1998, 41, Suplemento B, 37-46 ou European Journal of Pharmacology, 429(1-3), págs. 209-229, 2001). Além disto, sabe-se que os macrólidos derivados da eritromicina se acumulam nas células inflamatórias.

Verificou-se agora surpreendentemente que determinados compostos macrólidos contendo um anel lactónico com cinco membros fundido ao esqueleto da eritromicina inibem selectivamente PDE4, uma nova actividade não descrita até à data para este tipo de moléculas. Estes macrólidos são portanto úteis para o tratamento e/ou a prevenção de doenças inflamatórias e alérgicas. As moléculas descritas neste documento são estruturalmente distintas das de inibidores de PDE4 conhecidos até à data e têm portanto o potencial para ultrapassar os efeitos colaterais referidos acima. A invenção presente diz portanto respeito a compostos macrólidos com a fórmula I: FMt R3

na qual RI seja um residuo -Y-X-Q; Y seja S, SO ou S02; seja uma seja uma ligação ou um grupo linear constituído por átomos de hidrogénio e até 9

X 5 átomos seleccionados de entre C, N, 0 e/ou S, dos quais até 2 átomos possam ser N e um átomo possa ser 0 ou S, um átomo de carbono passa estar sob a forma de um grupo CO e o átomo de enxofre possa estar sob a forma de um grupo S02, e dois átomos de C adjacentes possam estar presentes sob a forma de CH=CH- ou de -C=C-, grupo X este que seja não substituido, ou seja substituído com -COO-W ou -CONH-W; Q seja um resíduo -V-A1-L-A2-W ou, quando X não representar uma ligação, também possa ser -NR6R7; V seja um grupo divalente aromático ou heterocíclico; W seja arilo ou heterociclilo;

Al, A2 sejam independentemente um do outro um grupo alquileno Ci-C4 ou estejam ausentes; L seja -0-, -S-, -S02-, -NH-, -CO-, -(C0)0-, -O(OC)-, - (CO) NH-, -NH (CO) -, -(S02)NH-, -HN(S02)-, -HN(CO)NH-, -0(C0)NH-, -NH (CO) 0-; e R2 seja hidrogénio; 6 R3 seja 0R4 ou R2, R3 tomados em conjunto, formem um grupo C=0; R4 seja, independentemente em cada sua ocorrência na fórmula I, hidrogénio ou um grupo alifático saturado ou insaturado com 1 a 6 átomos de carbono; R6, R7 sejam seleccionados independentemente de entre arilo; aralquilo; heterociclilo e heterocicloalquilo; e um de entre R6 e R7 possa também ser um grupo -L-W; e * indica um centro quiral que esteja sob a forma (R) ou sob a forma (S); excepto no que toca ao composto com a fórmula I, para o qual R2, R3 tomados em conjunto, formem um grupo C=0, R4 seja metilo e 7

Para as finalidades da invenção presente o termo compostos macrólidos é entendido como incluindo as formas estereoisoméricas dos compostos em separado, bem como as suas misturas diastereoméricas.

Além disto, o termo compostos macrólidos é entendido na invenção presente como incluindo os sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico e os N-óxidos dos compostos com a fórmula (I), bem como os seus ésteres cliváveis in vivo.

Os compostos da invenção exibem uma actividade inibidora substancial das fosfodiesterases humanas (PDE), em especial de PDE4, que se demonstrou estar envolvida nos processos inflamatórios (cf. por exemplo Lipworth B. J., Lancet (2005) 365, pág. 167 ou Giembycz Μ. A., Curr. Opin. Pharmacol. (2005), 5, pág. 238). Mostra-se isto nos exemplos. A utilização dos compostos de acordo com invenção presente para o tratamento de doenças e patologias em seres humanos, as quais podem melhorar ou ser aliviadas por inibição das fosfodiesterases humanas, em especial da fosfodiesterase 4, é portanto mais um aspecto da invenção presente. Com base nesta actividade os compostos presentes são especialmente úteis para a prevenção e/ou o tratamento de doenças inflamatórias, bem como para o tratamento e/ou a prevenção de doenças alérgicas. São exemplos importantes destas doenças a doença obstrutiva pulmonar crónica (COPD), a asma, a artrite reumatóide, a dermatite atópica ou a doença inflamatória dos intestinos.

Para os objectivos da invenção presente os termos "grupo aromático" e "arilo" referem grupos aromáticos com um ou mais núcleos preferivelmente com 6 átomos, e contendo entre 6 e 14 átomos de carbono. São em especial exemplos fenilo, naftilo, anttrilo e fenantrilo. Estes grupos podem ser mais substituídos com 1, 2, 3 ou 4 substituintes seleccionados de entre, por exemplo, alquilo, tal como definido acima neste documento, alcoxilo inferior tal como alcoxilo C1-C4, por exemplo metoxilo, etoxilo, propiloxilo ou n-butoxilo, cicloalcoxilo C3-C7 ou cicloalquil C3-C7-alcoxilo C1-C4 tal como ciclopentiloxilo, ciclopropilmetiloxilo, halogéneo tal como se define adiante neste documento, grupos alquilo substituídos com halogéneo tais como difluorometilo ou trifluorometilo, tricloroetilo, ciano, nitro, amino, alquilamino, dialquilamino, alquiltio, mercapto, hidroxilo, carbamoílo, carboxilo, um grupo oxo. No caso de se encontrar ligado ao grupo arilo mais do que um substituinte, estes substituintes podem ser idênticos ou diferentes uns dos outros. Também se incluem no âmbito da invenção presente os diferentes regioisómeros possíveis de 9 um grupo específico, por exemplo "dimetoxifenilo" significa que ambos os substituintes metoxilo podem estar ligados ao anel fenilo nas posições 2,3-position, nas posições 2,4, nas posições 2,5, nas posições 2,6, nas posições 3,4, nas posições 3,5 ou nas posições 3,6.

Tal como se utiliza neste documento, o termo "grupo heterocíclico" ou "heterociclilo" refere-se a um sistema anelar heterocíclico insaturado ou saturado, não substituído ou substituído com 5 a 10 membros (monocíclico ou bicíclico), contendo pelo menos um heteroátomo seleccionado de entre o conjunto constituído por enxofre, oxigénio, e/ou preferivelmente azoto. São exemplos de substituintes heterocíclicos, sem que eles se limitem a estes, por exemplo, os seguintes grupos: piperidinilo, morfolinilo, 2-, 3- ou 4-piridilo, pirrolidinilo, piperazinilo, lH-pirazol-l-ilo, lfí-imidazol-l-ilo, 1H-imidazol-2-ilo, pirazinilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazolilo, triazinilo, tiazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, por exemplo 1H-[1,2,4]-triazol-1-ilo, lH-tetrazolilo, 2H-tetrazolilo; tienilo, furilo (2-furanilo ou 3-furanilo) , lH-azepinilo, tetrahidrotiofenilo, 3H-1,2,3-oxatiazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,5-oxaditiolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, 4H-1,2,4-oxadiazinilo, 1,2,5-oxatiazinilo, 1,2,3,5-oxatiadiazinilo, 1,3,4-tiadiazepinilo, 1,2,5,6-oxatriazepinilo, oxazolidinilo, tetrahidrotienilo, e outros semelhantes, ou sistemas anelares heterocíclicos condensados tais como quinolinilo, por exemplo quinolin-8-ilo, quinolin-5-ilo, 10 quinolin-2-ilo, quinolin-6-ilo, quinolin-3-ilo, isoquinolinilo (6-isoquinolinilo), quinazolinilo, 1H-benzotriazolilo, lH-imidazo[4,5-c]piridinilo, 5H-imidazo[4,5-c]piridinilo, ΙΗ-imidazo[4,5-b]piridin-l-ilo, 3H-imidazo [4,5-b]piridin-3-ilo, lfí-pirazolo [3,4-b]piridinilo, 1,2,3,4-tetrahidro-quinolinilo, 1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolinilo, tieno[2,3-b]piridinilo, benzotiazolilo (por exemplo 2-benzotiazolilo), 1H-benzoimidazolilo, lH-indolilo, 1,2,3,4-tetrahidroquinolinilo, purinilo, por exemplo 9íí-purin-9-ilo, 6-amino-9íí-purin-9-ilo, 2, 6-diamino-9íí-purin-9-ilo, lH-purin-6-ilo, 1H-2,3-dihidroindol-l-ilo, 2,1,3-benzoxadiazol-5-ilo, 2,1,3-benzoxadiazol-4-ilo, 1,3-benzodioxol-5-ilo, 2,3-benzoxazolinilo, 1,2-dihidro-oxazolo[5,4-c]piridinilo, 6-quinoxalinilo, 2-benzo[b]tien-3-ilo, 3,4-dihidro-lff-2-oxo-quinolin-6-ilo.

Os grupos heterociclilo podem ser mais substituídos com um ou mais substituintes. Incluem-se nestes substituintes, por exemplo, grupos alquilo tais como se definem adiante neste documento, alcoxilo inferior tais como alcoxilo Ci-C4, por exemplo metoxilo, etoxilo, propiloxilo ou n-butoxilo, cicloalcoxilo C3-C7 ou cicloalquil C3-C7-alcoxilo C1-C4 tal como ciclopentiloxilo, ciclopropilmetiloxilo, halogéneo tal como se define adiante neste documento, grupos alquilo substituídos com halogéneo tais como difluorometilo ou trifluorometilo, tricloroetilo, ciano, nitro, amino, alquilamino, dialquilamino, alquiltio, mercapto, hidroxilo, carbamoílo, carboxilo, um grupo oxo. 11

Quando se encontrarem ligados ao grupo heterociclilo diversos substituintes, estes substituintes podem ser idênticos ou diferentes uns dos outros. Também se incluem no âmbito da definição presente os diversos regioisómeros, por exemplo "dimetilpiridilo" significa que os dois grupos metilo podem estar ligados ao piridilo em quaisquer das posições quimicamente possíveis. Por exemplo os dois grupos metilo podem ligar-se ao grupo 2-piridilo nas posições 3,4, nas posições 4 ,5, nas posições 5,6, , nas posições 3,5, nas posições 3, 6, e nas posições 4, 6 . Por exemplo os dois grupos metilo podem ligar-se ao grupo 3-piri dilo nas posições 2,4, nas posições 2,5, nas posições 2, 6, nas posições LO nas posições 4,6, e nas posições LO LO Por exemplo os dois grupos metilo podem ligar-se ao grupo 4-piridilo Por exemplo os dois grupos metilo podem ligar-se ao grupo 2-piridilo nas posições 2,3, nas posições 2,5, nas posições 2,6, e nas posições 3,5. São substituintes especialmente preferidos dos grupos heterociclilo os grupos alquilo, alcoxilo, oxo, halogéneo, amino, alquilamino ou dialquilamino, em que alquilo e alcoxilo são tal como definidos acima neste documento. São exemplos de anéis heterociclicos substituídos preferidos lH-pirimidin-2,4-diona, 1H,3H-pirimidin-2,4-diona-5-metil, lH-pirimidin-4-amino-2-ona, 6-amino-9H-purina, 6-dimetilamino-9H-purina, 2,6-diamino-9H-purina, 6-amino-8- [ (3-piridinilmetil) amino] -9tf-purina, 4-amino- 12 imidazo[4,5-c]piridina, 4-metoxi-imidazo[4,5-c]piridina, 1-etil-pirazolo[3,4-b]piridina, 4-fenil-lH-pirazol, 3-(piridin-3-il)-lH-pirazol, 3-(piridin-4-il)-lH-pirazol-1-ilo, 3-(piridin-3-il)-lH-imidazol-l-ilo, 3-(piridin-4-il)-lH-imidazol-l-ilo, 3-(piridin-3-il)-1H-[1,2,4]triazol, 3-(piridin-4-il)-1H-[1,2,4]triazol e 2-oxo-l,2,3,4-tetrahidro-quinolina.

Tal como se utiliza neste documento, o termo "alquilo" refere-se a grupos hidrocarboneto ramificados ou preferivelmente de cadeia linear saturados, contendo preferivelmente 1 a 6 átomos de carbono. Estes grupos são por exemplo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, butilo terciário, pentilo, hexilo, e outros semelhantes. Estes grupos alquilo podem ser mais substituídos com um ou mais substituintes seleccionados de entre, por exemplo, alcoxilo inferior Ci-C4 tal como metoxilo, etoxilo, propiloxilo ou n-butoxilo, cicloalquiloxilo C3-C7 ou cicloalquil C3-C7-alcoxilo C1-C4 tais como ciclopentiloxilo, ciclopropilmetiloxilo, halogéneo tal como se define adiante, grupos alquilo substituídos com halogéneo tais como difluorometilo ou trifluorometilo, tricloroetilo, ciano, nitro, amino, alquilamino, dialquilamino, alquiltio, mercapto, hidroxilo, carbamoilo, carboxilo, ou oxo. Havendo mais do que um substituinte, os substituintes podem ser iguais ou diferentes. 0 termo grupo alifático refere-se a grupos hidrocarboneto saturado ramificados ou preferivelmente com 13 cadeia linear, contendo preferivelmente 1 a 6 átomos de carbono, que podem ser saturados ou insaturados. Incluem-se nos exemplos os mencionados para grupos alquilo, vinilo, n-propenilo, n-propinilo, butenilo, butadienilo, pentenilo, e outros semelhantes. 0 termo "halogéneo" refere-se a fluoro, cloro, bromo ou iodo.

Nas combinações "heterociclilalquilo" e "aralquilo", as partes "heterociclilo", "ar" (arilo) e "alquilo" têm os significados indicados acima. 0 termo grupo alquileno C1-C4 refere-se por exemplo a grupos metileno, etileno, n-propileno e n-butileno. RI é um residuo com a fórmula -Y-X-Q.

Nesta fórmula Y pode em geral ser S, SO ou SO2; são preferidos S e SO2, em especial S.

X é quer uma ligação; isto é, está "ausente", quer um grupo linear constituído por átomos de hidrogénio e até 9 átomos seleccionados de entre C, N, 0 e/ou S, dos quais até 2 átomos podem ser N e um átomo pode ser 0 ou S, um átomo de carbono pode estar presente sob a forma de um grupo CO e o átomo de enxofre pode estar sob a forma de um grupo SO2. Também podem estar presentes dois átomos de C 14 adjacentes como um grupo -CH=CH- ou -C=c-. 0 grupo X pode ser não substituído, ou substituído com um substituinte com a fórmula -COO-W ou -CONH-W, em que W tem o significado definido neste documento. Tal como já se indicou, o grupo espaçador X contendo até 9 átomos pode conter mais átomos de hidrogénio para saturar um átomo de C formando um grupo metileno ou para saturar um átomo de N formando um grupo amino. Preferivelmente, este espaçador é constituído por 2 a 5 átomos seleccionados de entre C, N, 0 e/ou S.

Os grupos X preferidos são: (CH2)n, (CH2)mOCH2, (CH2)2NCH3 (CH2)2, CH2CH2NH, (CH2) pCOO, (CH2) pCONH ou HN(CH2)P, em que n e p sejam 1-3 e m seja 0 ou preferivelmente 1-3.

Os grupos X especialmente preferidos são etilo e propilo.

As combinações adequadas de Y e X são por exemplo as que se seguem:

Para Y=S, X é etilo, propilo, CH2CO, CH2COCH2, CH2C0NR, CH2CONRCH2, ch2conrch2ch2, ch2ch2conr, CH2CH2CONRCH2, CH2CH2NR, CH2CH2NRC0, CH2CH2NRS02, CH2CH2NRC00, CH2CH20CH2, CH2SO2NR, CH2SO2NRCH2, CH2CH2OCONR, CH2CH=CH ou CH2C=C; em que R nas expressões acima seja hidrogénio ou metilo. 15

Na fórmula I, Q é um resíduo da fórmula -V-Al-L-A2-W. Em alternativa e quando não representar uma ligação, Q na fórmula I também pode ser -NR6R7. V pode ser um grupo divalente, aromático ou heterocíclico, por exemplo um dos mencionados particularmente acima.

Noutro conjunto de compostos especialmente preferidos com a fórmula I, V é um grupo divalente com a fórmula

na qual

é um anel fenileno ou um anel heterocicloalifático saturado ou insaturado ou heteroaromático, divalente, com x membros, contendo entre 2 e (x-1) átomos de carbono, em que x seja de 5 a 8, preferivelmente 5 ou 6, e entre 1 e 3 heteroátomos seleccionados de entre o conjunto constituído por enxofre, e preferivelmente oxigénio e azoto, R8 e R9 sejam seleccionados independentemente de entre o conjunto 16 constituído por hidrogénio, alquilo C1-C4, alcoxilo C1-C4, cicloalcoxilo C3-C7, cicloalquil C3-C7-alcoxilo C1-C4, halogéneo, grupos alquilo C1-C4 substituídos com halogéneo, ciano, nitro, amino, alquilamino C1-C4, dialquil (Ci — C4)amino, alquiltio C1-C4, mercapto, hidroxilo, carbamoílo, um grupo carboxilo, um grupo oxo; ou arilo ou heterociclilo, que podem ser não substituídos ou substituídos com um ou mais dos substituintes identificados acima, para além de arilo ou heterociclilo, ou, quando ambos os substituintes R8 e R9 estiverem localizados em átomos de carbono adjacentes do anel,

podem tomar-se estes dois substituintes em conjunto com os referidos átomos de carbono adjacentes para formar um anel com 5 ou 6 membros, aromático ou um anel com x membros, heterocicloalifático saturado ou insaturado, ou um anel heteroaromático contendo entre 2 e (x-1) átomos de carbono em que x seja de 5 a 8, preferivelmente 5 ou 6, e entre 1 e 3 heteroátomos seleccionados de entre o conjunto constituído por enxofre e preferivelmente, oxigénio e azoto, em que V possa ter ao todo um a quatro substituintes do tipo dos definidos para R8 e para R9, e as valências livres possam estar localizadas quer num, quer em ambos os anéis do grupo V. 17

Incluem-se nos significados especialmente preferidos de V: 17

W na fórmula I pode ser quer arilo, quer heterociclilo, tal como se explicou acima.

Numa concretização preferida com a fórmula I, W representa um grupo com a fórmula

em que

seja um anel fenilo ou um anel heterocicloalifático com x membros, saturado ou insaturado, 18 ou um anel heteroaromático contendo entre 2 e (x-1) átomos de carbono e sendo x de 5 a 8, preferivelmente 5 ou 6, e entre 1 e 3 heteroátomos seleccionados de entre o conjunto constituído por enxofre e preferivelmente, oxigénio e azoto, RIO e Rll sejam seleccionados independentemente de entre o conjunto constituído por hidrogénio, alguilo C1-C4, alcoxilo C1-C4, cicloalquiloxilo C3-C7, cicloalquil C3-C7-alcoxilo C1-C4, halogéneo, grupos alquilo C1-C4 substituídos com halogéneo, ciano, nitro, amino, alquilamino C1-C4, dialquil (C1-C4) amino, alquiltio C1-C4, mercapto, hidroxilo, carbamoílo, um grupo carboxilo, e um grupo oxo; ou quando ambos os substituintes RIO e Rll estejam localizados em átomos de carbono adjacentes do anel,

podem tomar-se estes dois substituintes em conjunto com os referidos átomos de carbono adjacentes para formar um anel com 5 ou 6 membros, aromático ou um anel com x membros, heterocicloalifático saturado ou insaturado, ou um anel heteroaromático contendo entre 2 e (x-1) átomos de carbono em que x seja de 5 a 8, preferivelmente 5 ou 6, e entre 1 e 3 heteroátomos seleccionados de entre o conjunto constituído por enxofre e preferivelmente, oxigénio e azoto, em que W possa ter ao todo um a quatro substituintes do tipo dos definidos para RIO e para Rll, e as valências livres possam estar localizadas quer num, quer em ambos os anéis do grupo W. 19 São exemplos especialmente preferidos de W os grupos seguintes: 19

Cl

o o

Num grupo -V-A1-L-A2-W os grupos AI e A2 são, em geral, independentemente um do outro, ou um grupo alquileno Ci-C4, ou estão ausentes. L é em geral seleccionado de entre -0-, -S-, -S02-, -NH-, -C0-, -(C0)0-, -0(0C)-, -(CO)NH-, -NH(CO)-, - (S02) NH-, -HN(S02)-, -HN(C0)NH-, -0(C0)NH-, e -NH(C0)0-, num tal grupo.

Nos exemplos preferidos de compostos macrólidos de acordo com a invenção, AI e A2 estão ausentes, independentemente um do outro, ou representam grupos alquileno Ci-C2; e L é seleccionado de entre -NH-, -(CO)NH-e -NH(CO)-. São especialmente preferidos os compostos com a fórmula (I), nos quais 20

Al, A2 estão ausentes, independentemente um do outro, ou representam grupos alquileno Cq-C2; L é -NH-, -(CO)NH- ou -NH(CO)-; V é um grupo divalente com a fórmula

e W é um grupo com a fórmula

Também são preferidos os compostos de acordo com a invenção presente, em especial os mencionados no parágrafo precedente, nos quais

Y é -S- e 21 X é -CH2-CH2-CH2- ou, preferivelmente, -CH2-CH2-NH- ligado ao resíduo Q através do grupo NH, ou -CHi-CH2-, de preferência -CH2-CH2-.

Quando X não representa uma ligação na fórmula I, então Q também pode ser -NR6R7. Neste caso R6, R7 podem ser seleccionados independentemente de entre arilo, aralquilo, heterociclilo e heterociclilalquilo, por exemplo tal como se explicou acima, e um de entre R6 e R7 também pode ser um grupo -L-W; em que L e W tenham um dos significados mencionados acima.

Os exemplos preferidos dos compostos macrólidos correspondentes de acordo com a invenção são compostos com a fórmula I nos quais Q seja um grupo -NR6R7 e tenha uma das seguintes fórmulas

É além disto preferido que R2 na fórmula I represente um átomo de hidrogénio, em especial quando R3 for em simultâneo hidroxilo ou viniloxilo. 22

Também são preferidos os compostos com a fórmula I em que R2 e R3, tomados em conjunto, formem um grupo C=0. São também preferidos os compostos de acordo com a invenção nos quais R4 na fórmula I seja quer hidrogénio, quer, mais preferivelmente, metilo.

Alguns exemplos específicos de compostos de acordo com a invenção, os seguintes compostos:

bem como o composto com a fórmula 23

e os compostos com a fórmula

Os compostos mais preferidos são os seguintes:

Tal como já se indicou acima, os compostos macrólidos com a fórmula I podem, caso tal se pretenda, estar também presentes e serem utilizados sob a forma de seus sais de adição a ácidos aceitáveis do ponto de vista farmacêutico. São considerados não apenas os sais com ácidos inorgânicos, mas também os sais com ácidos orgânicos. São exemplos destes sais, os cloridratos, os bromidratos, os sulfatos, os nitratos, os citratos, os acetatos, os trifluoroacetatos, os maleatos, os succinatos, os metanossulfonatos, os p-toluenossulfonatos e outros semelhantes.

Além disto, os compostos com a fórmula I podem assumir a forma de ésteres cliváveis in vivo, por exemplo de ésteres com o grupo 2'-hidroxilo da espécie açúcar. Os ésteres adequados são em geral os acetatos, os ésteres pivaloilicos, os tartaratos, os maleatos, os succinatos, e outros semelhantes.

Os compostos da invenção presente, incluindo os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico ou os seus ésteres cliváveis in vivo são úteis para a prevenção e/ou o tratamento de doenças tais como a doença obstrutiva pulmonar crónica (COPD), a asma, a artrite reumatóide, a dermatite atópica ou a doença inflamatória dos intestinos.

Os compostos da invenção presente e os seus sais de adição a ácidos aceitáveis do ponto de vista 25 farmacêutico ou ésteres cliváveis in vivo também podem ser utilizados para a prevenção e/ou o tratamento de doenças tais como a bronquite crónica, o enfisema, a urticária, a rinite alérgica, a conjuntivite alérgica, a psoriase, o choque séptico, a sindrome de aflição respiratória de adultos e a esclerose múltipla.

Os compostos de acordo com a invenção podem ser utilizados como medicamentos. Eles possuem boas propriedades de absorção por via oral. Uma concretização adicional da invenção presente são portanto medicamentos que incluam compostos com a fórmula I, os seus sais de adição a ácidos aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, os seus N-óxidos ou os seus ésteres cliváveis in vivo, para o tratamento e para a prevenção de doenças infecciosas, por exemplo, sob a forma de preparações farmacêuticas para administração entérica (oral) . Podem administrar-se os produtos de acordo com a invenção, por exemplo, por via oral, por exemplo sob a forma de comprimidos, de comprimidos revestidos com uma pelicula, de comprimidos revestidos com açúcar, de cápsulas duras ou moles, de soluções, emulsões ou suspensões, ou por via rectal, tal como sob a forma de supositórios, ou por via parentérica, por exemplo por injecção, ou por via nasal, ou por inalação ou por via transdérmica, ou localmente, por exemplo por administração tópica, administrando-se preferivelmente os compostos por via tópica ou por via oral. 26

Podem preparar-se composições farmacêuticas contendo estes compostos utilizando processos convencionais que são familiares para os especialistas a técnica, tais como por combinação dos ingredientes numa forma de dosagem em conjunto com materiais adequados, não tóxicos, inertes, compatíveis do ponto de vista terapêutico, sólidos ou líquidos e, caso tal se pretenda, os adjuvantes farmacêuticos habituais.

Contempla-se a inclusão eventual dos compostos em composições adequadas para formas de dosagem de administração por via oral, parentérica ou tópica. As composições desta invenção podem conter como ingredientes, a título opcional, quaisquer dos diversos adjuvantes que são habitualmente utilizados na produção de preparações farmacêuticas. Deste modo, por exemplo, na formulação das composições presentes às formas de dosagem oral pretendidas, podem utilizar-se, a título de ingredientes opcionais, cargas, tais como celulose microcristalina, fosfato de cálcio ou lactose; agentes desintegrantes, tais como amido, carboximetilcelulose sódica com ligações cruzadas ou polivinilpirrolidona com ligações cruzadas; e agentes lubrificantes, tais como talco, estearato de magnésio, estearato de cálcio, e outros semelhantes. Deve entender-se muito claramente, no entanto, que os ingredientes opcionais mencionados neste documento são incluídos apenas a título de exemplos e que a invenção não sofre qualquer restrição à sua utilização. Outros destes 27 adjuvantes, que são bem conhecidos na técnica, podem ser empregues nas concretizações desta invenção. São adequados a titulo de materiais veiculantes destes, não apenas produtos inorgânicos, mas também materiais veiculantes orgânicos. Deste modo, para comprimidos, comprimidos revestidos por pelicula, comprimidos revestidos com açúcar e cápsulas duras podem utilizar-se, por exemplo, lactose, amido de milho ou seus derivados, talco, ácido esteárico ou os seus sais. São veiculos adequados para cápsulas moles, por exemplo, óleos vegetais, ceras, gorduras e polióis semi-sólidos e liquidos (consoante a natureza da substância activa). São materiais veiculantes adequados para a preparação de soluções e de xaropes, por exemplo, água, álcoois, polióis, sacarose, açúcar invertido e glucose. São materiais veiculantes adequados para supositórios, por exemplo, óleos naturais ou endurecidos, ceras, gorduras e polióis semiliquidos ou liquidos. A titulo de adjuvantes farmacêuticos contemplam-se os conservantes, solubilizantes, estabilizadores, agentes molhantes emulsionantes, edulcorantes, corantes, agentes de sabor, sais para ajustar a tensão osmótica, tampões, agentes de revestimento e antioxidantes, que são habituais.

Podem utilizar-se os compostos com a fórmula I e os seus sais de adição a ácidos, N-óxidos ou ésteres 28 cliváveis in vivo para administração parentérica, e para esta finalidade eles são preferivelmente integrados em preparações para injecção, a titulo de liofilizados ou de pós secos para diluição com os agentes habituais, tais como água ou uma solução isotónica de sal comum.

Podem utilizar-se os compostos com a fórmula I e os seus sais de adição a ácidos, N-óxidos ou ésteres cliváveis in vivo para administração tópica, e para esta finalidade eles são preferivelmente integrados em preparações sob a forma de unguentos ou de geles.

Para o tratamento e/ou para a prevenção de doenças inflamatórias e alérgicas em mamíferos, humanos e não humanos, é habitual utilizar-se uma dosagem diária de entre cerca de 10 mg e cerca de 2.000 mg, em particular de entre cerca de 50 mg e cerca de 1.000 mg, sabendo os indivíduos com conhecimentos da técnica que a dosagem também dependerá da idade, do estado dos mamíferos, e do tipo de doenças que se estão a evitar ou a tratar. Pode administrar-se a dosagem diária numa única dose ou ela pode ser repartida em diversas doses. Pode contemplar-se uma dose única em média, de cerca de 10 mg, 100 mg, 250 mg, 500 mg e 1.000 mg.

Leva-se a cabo a preparação dos compostos com a fórmula I de acordo com os esquemas 1-5. 29 Ο

«* Ο

Esquema 1 30

Podem preparar-se os compostos da invenção presente a partir da eritromicina A, da claritromicina, ou de qualquer outra 6-O-alquil-eritromicina A, 6-O-alcenil-eritromicina A ou da 6-O-alcinil-eritromicina A. A preparação dos compostos com as fórmulas II, III e IV nas quais Rpi e Rp2 são H, acetilo, benzoilo ou qualquer outro grupo protector adequado para o hidroxilo pode ser levada a cabo por métodos bem conhecidos na técnica (esquema 1) . Para se obterem compostos com a fórmula II nos quais Rpi e Rp2 sejam tal como foram definidos acima, podem proteger-se os grupos hidroxilo nas posições 2' e 4" do macrólido de que se parte, quer sequencialmente, quer em simultâneo, por reacção com um anidrido de ácido ou com um cloreto de acilo adequados, tal como se descreveu em, por exemplo, Baker et al., J.Org. Chem. 1988, 53, 2340-2345 e em Kashimura et al., J. Antibiotics, 2001, 54, 664-678. Podem então transformar-se por exemplo os compostos com a fórmula II em compostos com a fórmula IV de um modo semelhante ao descrito em Baker et al., J.Org. Chem. 1988, 53, 2340-2345.

Esterifica-se o grupo hidroxilo na posição 12 dos compostos com a fórmula IV por tratamento com ácido 2-cloroacético, com DCC e com DMAP ou com anidrido 2-cloroacético, piridina, e DMAP num solvente clorado tal como cloreto de metileno. Trata-se então o intermediário V com o nucleófilo adequado R1H em acetona na presença de uma base tal como DBU para se obterem os compostos com a fórmula VI nos quais Rl, Rpx e Rp2 sejam tal como se 31 definem acima. Dependendo da natureza dos compostos, o RI na fórmula VI também pode ser sintetizado fazendo reagir o composto com a fórmula IV com um ácido carboxilico adequado (RICH2COOH) , DCC e DMAP num solvente clorado tal como cloreto de metileno, para se obterem compostos com a fórmula VI. Tratam-se os compostos com a fórmula VI com uma base de metal alcalino tal como NaH ou terc-butóxido de potássio, ou LDA, num solvente aprótico tal como DMF ou THF, para se obterem compostos com a fórmula VII sob a forma de misturas de diastereómeros em diversas razões (esquema 1).

Desprotegem-se os compostos com a fórmula VII nos quais Rl, Rpi e Rp2 sejam tal como se definiram acima, na posição 2', com metanol a temperaturas de entre 20°C e 60°C durante 2-5 dias, para se obterem compostos com a fórmula VIII (esquema 2). Desprotege-se o grupo 4"-hidroxilo por tratamento do composto com DBU em metanol ao refluxo durante 3 a 12 horas (J. Antibiotics, 2001, 54(8), 664) ou por tratamento com guanidina/nitrato de guanidinio em metanol/diclorometano (Tetrahedron Letters 1997, 38(9), 1627) ou com carbonato de potássio em metanol ou com uma mistura de MeONa em metanol, preferivelmente com DBU em metanol ao refluxo durante 5 a 7 horas para se obterem compostos com a fórmula Ia.

Em alternativa podem desproteger-se compostos com a fórmula VII nas posições 2' e 4" em simultâneo utilizando um dos métodos descritos acima para a desprotecção do grupo 32 ,...., „ „ ,, „ fórmula Ia hidroxilo em 4", para se obterem compostos com & (esquema 2).

Esquema 2

No caso em que RI é S-Rp3 e Rp3 é um grupo protector de enxofre, por exemplo benzilo, 4-metoxibenzilo, 3,4-dimetoxibenzilo ou 4-nitro-benzilo, preferivelmente 4-metoxibenzilo, transforma-se o intermediário Vila na presença de peneiros moleculares, no derivado dissulfureto IX no qual Rpi e Rp2 são tal como se definiram acima e Rp4 é por exemplo 3-nitro-2-piridinilo ou metilo, por um método semelhante ao descrito no WO 03/072.588. 33

Tratam-se os compostos com a fórmula IX com um agente redutor tal como uma trialquilfosfina, preferivelmente tributilfosfina, ou com uma triarilfosfina, preferivelmente trifenilfosfina, num solvente tal como acetona aquosa, dimetilformamida aquosa, dioxano aquoso ou tetrahidrofurano aquoso, preferivelmente dimetilformamida aquosa, a entre 0°C e 60°C, preferivelmente à temperatura ambiente durante entre 1 minuto e 1 hora, preferivelmente 15 durante minutos, para se obter o composto X. Trata-se o composto X, preferivelmente sem o isolar, directamente no mesmo sistema solvente, com compostos com a fórmula Q-X-Lg, na qual Q e X são definidos tal como acima e Lg é um grupo de saida, por exemplo cloreto, brometo, iodeto, metanossulfoniloxilo, p-tosilsulfoniloxilo, trifluorometanossulfoniloxilo ou um grupo vinilo no caso em que X representa um grupo carbonilo ou sulfonilo, para se obterem compostos com a fórmula VII. Leva-se a cabo a reacção preferivelmente na presença de uma base tal como um carbonato ou um hidrogenocarbonato de um metal alcalino, por exemplo carbonato de potássio, carbonato de césio ou hidrogenocarbonato de sódio, ou de uma base orgânica, por exemplo trietilamina, N-etil-N,N-di-isopropilamina, 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno ou 1,5-diazabiciclo[4.3.0]non-5-eno, preferivelmente 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno a uma temperatura de entre 0°C e 50°C, preferivelmente a 20°C. Pode ser vantajoso adicionarem-se quantidades catalíticas de um sal iodeto, - 34 - preferivelmente iodeto de sódio, à mistura reaccional (Esquema 3).

Para R1 - S-Rp3

Esquema 3

Em alternativa, também se podem preparar os compostos com a fórmula I, nos quais R2 e R3 tomados em conjunto para formarem um grupo C=0 e R4 tenha o significado acima e RI seja um resíduo -Y-X-Q, em que X e Q tenham o mesmo significado que se descreveu acima e Y seja S; por 35 a) transformação de um composto macrólido com a fórmula 35

num como de um modo conhecido por si próprio, composto com a fórmula IV, por exemplo tal a descrita acima a propósito do Esquema 1

no qual Rpi e Rp2 são ambos grupos protectores de hidroxilo e R4 seja tal como se definiu acima, bl) transformação do referido composto com a fórmula IV na presença de um derivado activado de ácido cloroacético, tal como por exemplo anidrido do ácido di(cloroacético), de um modo 36 conhecido por si próprio, a um composto com a fórmula V, por exemplo tal como se descreveu sob o Esquema 1

36 O

na qual Rpi e Rp2 e R4 têm os significados acima; b2) fazendo em seguida reagir o composto referido com a fórmula V, com um composto com a fórmula MS-X-Q,

na qual M representa um átomo de um metal alcalino e X e Q têm os significados descritos acima, para formar um composto com a fórmula VI 37

em que RI é -S-X-Q, e X, Q, Rpi e Rp2 e R4 têm os significados acima,

c) fazer-se reagir o composto referido com a fórmula VI num solvente aprótico com uma base de metal alcalino para se formar um composto com a fórmula VII

na qual RI e Rpi e Rp2 e R4 têm os significados acima, e removerem-se em simultâneo ou consecutivamente os grupos protectores de hidroxilo Rpi e Rp2 para se formar o composto com a fórmula I. 38

Podem transformar-se estes compostos, caso tal se pretenda, de um modo conhecido por si próprio, por exemplo tal como se indica no Esquema 5, num composto com a fórmula I na qual R2 seja hidrogénio e R3 seja seleccionado de entre hidroxilo ou um grupo -0-(alifático), representando o referido grupo alifático um grupo alifático saturado ou insaturado com 1 a 6 átomos de carbono .

Podem preparar-se os compostos com a fórmula Ic por exemplo por tratamento de compostos com a fórmula Ib (composto com a fórmula I em que Y=S) com 2 a 2,5 equivalentes de ácido 3-cloroperoxibenzóico (mCPBA) e 4 a 5 equivalentes de NaHCCb num solvente tal como cloreto de metileno a temperaturas de entre 0°C e a temperatura ambiente, preferivelmente a 0°C, durante entre 1 hora e 3 horas. Reduz-se o grupo N-óxido que se forma no grupo dimetilamino do residuo açúcar durante a reacção na fase de separação, tratando a fase orgânica com uma solução aquosa de pirossulfito de sódio à temperatura ambiente durante entre 5 minutos e 24 horas para se obterem os compostos pretendidos com a fórmula Ic sob a forma de uma mistura de diastereómeros. Em alternativa, caso seja apropriado, reduz-se o N-óxido por hidrogenação catalitica e acordo com processos padrão. Podem oxidar-se mais os compostos com a fórmula Ic tal como se descreveu acima mas à temperatura ambiente durante entre 1 e 48 horas para se obterem, depois da redução do N-óxido, compostos com a fórmula Id. Também se podem obter os compostos Id num passo, a partir dos 39 compostos com a fórmula Ib, utilizando entre 3,5 e 10 equivalentes do agente oxidante e entre 7 e 20 equivalentes de NaHC03, a temperaturas na gama de entre 0°C e a temperatura ambiente durante entre 5 e 48 horas, seguindo-se o processo de separação descrito acima (esquema 4).

No caso em que Q tenha mais substituintes sensíveis à oxidação tais como grupos amino, pode ser necessário proteger estes substituintes antes de se submeter o sulfureto Ia a uma oxidação. Podem introduzir-se grupos protectores adequados habitualmente conhecidos na técnica de acordo com processos padrão descritos em T. W. Green et al., Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1999. Depois da oxidação, pode remover-se o grupo protector seguindo procedimentos padrão também descritos em T. W. Green et al. 40

41

Esquema 5

Podem por exemplo preparar-se os compostos com a fórmula XI por tratamento de compostos com a fórmula VII com um agente redutor tal como NaBH4 num solvente tal como 42 metanol, etanol, isopropanol, THF, THF/água ou éter dietílico a temperaturas de entre 0°C e a temperatura ambiente, preferivelmente a 0°C, durante entre 1 hora e 24 horas. Os compostos com a fórmula XI são então desprotegidos tal como se descreveu acima para se obterem os compostos com a fórmula Ie. Em alternativa, também se podem preparar os compostos com a fórmula Ie a partir dos compostos com a fórmula Ia seguindo o método descrito para a redução dos compostos com a fórmula VII. No caso em que Rpi é acetilo o grupo protector pode ser parcialmente removido durante a redução num solvente tal como metanol, tornando necessária uma nova protecção do grupo hidroxilo em 2' antes da alquilação do grupo hidroxilo formado de novo.

Alquila-se o grupo hidroxilo do composto com a fórmula XI seguindo procedimentos padrão conhecidos para a alquilação dos grupos hidroxilo, obtendo-se compostos com a fórmula XII. No caso em que Q tem mais substituintes que sejam alquilados nas condições utilizadas para a transformação de XI em XII, podem proteger-se estes substituintes antes de se submeter o composto XI à alquilação. Podem introduzir-se os grupos protectores adequados habitualmente conhecidos na técnica de acordo com procedimentos padrão descritos em T. W. Green et al., Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1999. Depois da alquilação, pode remover-se o grupo protector seguindo procedimentos padrão também descritos em T. W. Green et al. Desprotegem-se os compostos com a 43 fórmula XII seguindo os processos descritos acima, para se obterem compostos com a fórmula If.

Os exemplos que se seguem são incluídos para ilustrar melhor a invenção e não devem ser interpretados como limitativos do âmbito da invenção presente. À. Exemplos

Notas gerais: Mediram-se os espectros de massa (MS) utilizando (A) um sistema Micromass Waters ZQ com um programa Masslynx, e (B) utilizando um Q-Tof-Ultima (Waters, AG) equipado com o Waters Cap-LC. Para determinação precisa da massa utilizou-se a fonte de ESI nano aferrolhada à massa. As massas precisas são dadas com quatro casas decimais. HPLC analítica: Sistema Aa:

Instrumento: Varian Prostar 210; coluna: Inertsil ODS-3V, 5 ym, 250x4 mm; caudal: 1,0 mL/minuto; detecção: 254 nm; fase móvel A: água; fase móvel B: acetonitrilo; gradiente: 0-5 min constante a 5 % de acetonitrilo; 5-25 minutos linear de 5 % a 95 % de acetonitrilo. Sistema Ba: Instrumento: Varian Prostar 210; coluna: Inertsil ODS-3V, 5 ym, 250x4 mm; caudal: 1,0 mL/minuto; detecção: 254 nm; temperatura da coluna: 35°C; fase móvel A: água+0,1 % de HCOOH; fase móvel B: acetonitrilo+0,1 % de HCOOH; gradiente: 0-5 minutos constante a 5 % de B; 5-20 minutos linear de 5 % a 95 % de B. A purificação dos produtos finais por HPLC foi conseguida recorrendo aos seguintes sistemas: Sistema Ap: Coluna: YMC ODS-AQ, 120A, 5 ym, 50 x 20 mm; pré-coluna: YMC 44 ODS-AQ, 120A, 5 ym, 10 x 20 mm; caudal: 30 mL/minuto; injecção: 500 yL; detecção: ELSD; fase móvel A: água + 0,1 % de HCOOH; fase móvel B: acetonitrilo; gradiente: linear de 10 a 95 % de acetonitrilo ao longo de 4 minutos. Sistema Bp: Coluna: Purospher STAR RP18e, 5 ym, 125x25 mm; caudal: 25 mL/minuto; detecção: 254 nm; fase móvel A: água 25 mM em formato de amónio; fase móvel B: metanol; gradiente: linear de 60 % a 90 % de metanol ao longo de 10 minutos. Sistema Cp: Coluna: Purospher STAR RP18e, 5 ym, 125x25 mm; caudal: 25 mL/minuto; detecção: 254 nm; fase móvel A: água 25 mM em formato de amónio: fase móvel B: acetonitrilo; gradiente: linear de 20 % a 50 % de acetonitrilo ao longo de 10 minutos. Abreviaturas: HPLC significa cromatografia liquida de elevado desempenho; DMSO significa sulfóxido de dimetilo; DBU significa diazabiciclo-undecano; DCM significa diclorometano; DIPEA significa di-isopropiletilamina (base de Huenig); DMF significa dimetilformamida; THF significa tetrahidrofurano; DCC significa diciclohexilcarbodi-imida; DMAP significa 4-dimetilaminopiridina; EDOHC1 significa cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodi-imida, HOBt significa 1-hidroxi-benzotriazol; HATU significa hexafluorofosfato de 2- (lií-azabenzotriazol-l-il) -1,1,3, 3-tetrametilurónio; mCPBA significa ácido m-cloroperbenzóico; KOtBu for significa terc-butilato de potássio; TBDMSCI significa cloreto de terc-butil-dimetil-sililo, TBAF significa fluoreto de tetrabutilamónio, MS significa espectrometria de massa; RMN significa ressonância magnética nuclear; ESI significa ionização por electroaspersão. 45

46 46

1 o asterisco (*) indica o ponto no qual se liga Rl| ao resto da molécula 2"=0" na célula relativa ao conjunto de R2 e R3| significa que R2 e R3, tomados em conjunto, formam um| grupo carbonilo, com o carbono a que ambos se ligam. |

Exemplo 1 (de Comparação)

Preparação de 1-1, composto com a fórmula I em que RI seja [2-[6-amino-8-(2-piridin-3-il-etil)-purin-9-il]etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formem um grupo C=0 e R4 seja metilo. A] Preparação de 2-(6-amino-8-bromo-purin-9- il)etanol

Adiciona-se a uma solução de 10 g de 2-(6-amino-purin-9-il)etanol em 200 mL de tampão de AcONa 0,5 M/AcOH a pH 4, 4 mL de Br2. Agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 8 horas. Isolou-se o produto 47 precipitado, lavou-se com água e cristalizou-se a partir de etanol para se obterem 6,13 g (43 %) do composto pretendido. B] Preparação de 2-(6-amino-8-(2-piridin-3-il-etinil)-purin-9-il)etanol

Adicionou-se a uma solução de 258 mg de 2-(6-amino-8-bromo-purin-9-il)etanol numa mistura de Et3N com DMF, sob uma atmosfera de árgon, 35 mg de Pd(PPh)3Cl2, 19 mg de Cul e 150 mg de 3-etinilpiridina. Agitou-se a mistura sob árgon a 60°C durante 3 horas e de um dia para o outro à temperatura ambiente. Isolou-se o precipitado, lavou-se com água e com etanol quente e secou-se para se obterem 150 mg (53 %) do produto pretendido. C] Preparação de 2-(6-amino-8-(2-piridin-3-il-etil)-purin-9-il)etanol

Adicionou-se a uma suspensão de 1,1 g de 2-(6-amino-8-(2-piridin-3-il-etinil)-purin-9-il)etanol em 400 mL de metanol, 2,0 g de niquel de Raney, e hidrogenou-se a mistura (sob 4 atm) a 80 °C durante 6 horas. Depois de se completar a reacção removeu-se o catalisador e evaporou-se o solvente. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna sobre silicagel (CHCl3:MeOH a 9:1) para se obterem 0,45 g (41 %) do produto pretendido. 48 D] Preparação de 6-amino-9-(2-cloroetil)-8-(2-piridin-3-il-etil)-purina

Arrefeceram-se 0,45 g de 2-(6-amino-8-(2-piridin-3-il-etil)-purin-9-il)etanol a -20°C e adicionaram-se-lhe 6 mL de S0C12. Aumentou-se gradualmente a temperatura até 50°C e agitou-se a mistura a esta temperatura durante 12 horas. Evaporou-se o excesso de SOCI2 e retomou-se o residuo em diclorometano, lavando-se com solução aquosa saturada de NaHC03, sevou-se sobre Na2S04 e evaporou-se in vacuo. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida sobre silicagel (CHCl3:MeOH a 50:1) para se obterem 40 mg (8 %) do produto pretendido. RMN de (DMSO-d6) : 8,65 (s, 1H) ; 8,4 (s, 1H) ; 8,1 (s, 1H) ; 7,75 (d, 1H) ; 7,30 (m, 1H) ; 6,95 (s, 2H,-NH2); 4,45 (t, 2H); 4,0 (t, 2H). E] Preparação de vim composto com a fórmula II no qual Rpi e Rp2 são acetilo e R4 é metilo (II-l)

Adicionaram-se a uma solução de 25 g (33,4 mmol) de claritromicina e 1,63 g (13,4 mmol) de DMAP em 50 mL de DCM, 11 mL (117 mmol) de anidrido acético, de uma só vez, e agitou-se a mistura durante 20 h à temperatura ambiente. Verteu-se a mistura reaccional sobre uma quantidade de NaOH 0,2 N para se obter um valor de pH de 8-9 e depois extraiu-se com acetato de etilo. Lavou-se o conjunto dos extractos orgânicos com água e com salmoura, secou-se sobre MgS04 e 49 evaporou-se sob pressão reduzida. Cristalizou-se o produto em bruto a partir de acetato de etilo quente para se obterem 24,3 g (87 %) de cristais incolores. MS(ESI): 832,5 [MH] + F] Preparação de vim composto com a fórmula III no qual Rpi e Rp2 sejam acetilo e R4 seja metilo (III-l)

Dissolveram-se 24,3 g (29,2 mmol) de 2',4"-di-0-acetil-6-0-metileritromicina A (II-l) em 500 mL de THF a -45°C sob árgon e tratou-se por adição gota a gota de 29,2 mL de uma solução 1 M de bis(trimetilsilil)amideto de sódio em tetrahidrofurano (29,2 mmol) ao longo de 15 minutos. Passados 20 minutos a -45°C, adicionaram-se em 3 porções 16,24 g (100,1 mmol) de carbonildi-imidazole ao longo de 5 minutos. Agitou-se a mistura reaccional a -45°C durante 30 minutos, depois aqueceu-se até 0°C ao longo de um periodo de 15 minutos e manteve-se a 0°C durante 2,5 horas.

Tratou-se a mistura reaccional com uma solução aquosa saturada de NaHCC>3 e com água (a 1:1) e extraiu-se por duas vezes com acetato de etilo. Lavou-se o conjunto das fases orgânicas por duas vezes com uma solução aquosa a 10 % de amoniaco, com salmoura, secou-se sobre sulfato de sódio e evaporou-se sob pressão reduzida para se obterem 23,57 g (94 %) de um sólido incolor. MS (ESI): 858, 6 [MH]+. G] Preparação do composto com a fórmula IV no qual Rpi e Rp2 são acetilo e R4 é metilo (IV-1) 50

Dissolvem-se 23,5 g (27,47 mmol) do composto III-1 e 10,25 mL (68,7 mmol) de DBU em 500 mL de tolueno à temperatura de refluxo ao longo de 1,5 h, arrefeceu-se até à temperatura ambiente e verteu-se sobre uma solução aquosa 0,5 M de NaH2P04. Extraiu-se a fase aquosa por duas vezes com acetato de etilo. Lavou-se o conjunto dos extractos orgânicos com NaH2P04 0,5 M, com salmoura, secou-se sobre Na2S04 e concentrou-se para se obterem 18,43 g (86 %) de um sólido incolor. MS (ESI): 814,5 [MH]+. H] Preparação do composto com a fórmula V na qual Rpi e Rp2 são acetilo e R4 é metilo (V-l)

Adicionou-se a uma solução de 64,0 g (78,6 mmol) do composto IV-1 e 3,84 g (31,4 mmol) de 4- dimetilaminopiridina e 12,5 g de piridina em 60 0 mL de diclorometano, gota a gota, uma solução de 2 6,9 g de anidrido do ácido cloroacético (157,3 mmol) em 250 mL de diclorometano, ao longo de 2 horas, sob azoto. Agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 3,5 horas. Verteu-se a mistura reaccional por sobre uma solução aquosa 0,2 N de NaOH para se obter um valor de pH de 8-9 e extraiu-se por duas vezes com diclorometano. Lavou-se o conjunto das fases orgânicas sucessivamente com água, por duas vezes com uma solução aquosa 0,5 N de NaH2P04, com água e por duas vezes com salmoura, secou-se sobre Na2S04 e evaporou-se para se obter produto em bruto. Adicionou-se éter de petróleo ao produto em bruto, agitou-se a mistura durante 3 horas à 51 temperatura ambiente e filtrou-se para se obter o composto pretendido (57,5 g, 82 %) sob a forma de um sólido acastanhado-claro. MS (ESI): 890,3. I] Preparação do composto com a fórmula VI na qual RI é [ (4-metoxifenil)metil] tio e Rpi e Rp2 são acetilo e R4 é metilo (VI-1)

Dissolveram-se 10,5 g do composto V-l sob árgon em 180 mL de acetona e adicionaram-se de uma só vez 2,42 g DBU, 20 mg de iodeto de sódio e 2,20 g de (4-metoxifenil)metanotiol. Agitou-se a mistura reaccional sob árgon à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Adicionaram-se 250 mL de DCM à mistura reaccional. Lavou-se a fase orgânica por três vezes com solução aquosa de NaHCCb a 5 %, secou-se sobre Na2S04 e evaporou-se in vácuo para se obterem 11,7 g (98,4 %) de uma espuma castanho-clara. MS(ESI) : 1008, 4 . K] Preparação do composto com a fórmula VII em que Rl é [ (4-metoxifenil)metil] tio e Rpi e Rp2 são acetilo e R4 é metilo (VII-1)

Dissolveram-se 6,00 g do composto de VI-1 sob azoto em 60 mL de DMF e arrefeceu-se com um banho de gelo. Adicionou-se 0,39 g de uma dispersão em óleo de hidreto de sódio (60 %) e agitou-se a mistura durante 3 horas a 0-5 °C. Em seguida adicionou-se uma solução aquosa 0,5 N de KH2P04 e extraiu-se a mistura com 100 mL de éter dietilico. 52

Lavou-se a fase orgânica por três vezes com 60 mL de solução aquosa de NaHC03 a 3 % e com 80 mL de salmoura, secou-se sobre Na2SC>4 e evaporou-se in vácuo para se obterem 4,65 g de produto em bruto. MS(ESI): 1008,4 [MH]+. L] Preparação do composto com a fórmula I em que Rl é [(4-metoxifenil)metil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo

Dissolveram-se 21,8 g (21,6 mmol) de composto VII-1 em bruto, em 290 mL de metanol e adicionaram-se 16,2 mL (108,3 mmol) de DBU. Aqueceu-se a mistura ao refluxo sob árgon durante 5 horas. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida e retomou-se o resíduo em 580 mL de DCM. Lavou-se a fase orgânica por duas vezes com água e com salmoura, secou-se sobre Na2SC>4 e evaporou-se in vacuo. Lavou-se o produto em bruto com éter de petróleo/éter dietílico a 5/1. Dissolveu-se o resíduo em 150 mL de metanol e adicionaram-se 55 mL de água. Agitou-se a mistura durante 2 horas e isolou-se o produto por filtração para se obterem 11,1 g (41 %) do composto em título sob a forma de um sólido. MS (ESI) : 924,4. M] Preparação de composto com a fórmula Vila em que Rp3 é (4-metoxifenil) metilo e Rpi é acetilo, Rp2 é hidrogénio e R4 é metilo (VIIa-1)

Dissolveram-se 2,0 g (2,16 mmol) do produto do passo L do exemplo 1 em 50 mL de DCM e adicionou-se-lhes 53 0,22 mL (2,4 mmol) de anidrido acético. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 48 horas. Lavou-se a solução com solução aquosa de NaHCCh (a 5 %) e com salmoura, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se in vácuo para se obterem 2,17 g de uma espuma castanho-clara. Utilizou-se o produto em bruto sem mais purificação no passo seguinte. MS (ESI) : 967,3 [MH] + . N] Preparação do composto com a fórmula IX no qual Rp4 é metilo, Rpi é acetilo, Rp2 é hidrogénio e R4 é metilo (IX-1)

Dissolveram-se 2,17 g (2,25 mmol) de VIIa-1 em 50 mL de DCM e adicionaram-se peneiros moleculares. Adicionaram-se à mistura 880 mg (4,49 mmol) de tetrafluoroborato de dimetil(metiltio)sulfónio e agitou-se a mistura reaccional durante 5 horas à temperatura ambiente. Filtrou-se a mistura reaccional e lavou-se por duas vezes com 20 mL de solução aquosa de NaHCC>3 (a 5 %) e com salmoura, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se in vácuo para se obterem 1,62 g de uma espuma castanho-clara. Utilizou-se o produto em bruto no passo seguinte, sem qualquer purificação. MS(ESI): 893,1 [MH]+. O] Preparação do composto com a fórmula VII no qual Rl é [2-[6-amino-8-(2-piridin-3-il-etil)-purin-9-il]etil]tio, Rpi é acetilo, Rp2 é hidrogénio e R4 é metilo (VII—1) 54

Adicionou-se a uma solução de 0,120 g (0,13 mmol) do produto do passo N do exemplo 1 em 4 mL de DMF e 1 gota de água, 66,4 yL (0,27 mmol) de tributilfosfina, e agitou-se a mistura durante 30 minutos à temperatura ambiente. Em seguida adicionaram-se 44,8 mg (0,15 mmol) de 6-amino-9-(2-cloroetil)-8-(2-piridin-3-il-etil)-purina e 40,2 yL de DBU (0,27 mmol) à solução. Agitou-se a mistura reaccional de um dia para o outro à temperatura ambiente e concentrou-se in vácuo e retomou-se o residuo em DCM. Lavou-se a fase orgânica com uma solução aquosa de NaHC03 (a 5 %) e com salmoura, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se in vácuo para se obter o produto em bruto. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida sobre silicagel (DCM/MeOH/NH3 a 99:1:0,01 -► 95:5:0,01) para se obterem 57 mg (38 %) do produto pretendido. MS(ESI): 1.112,6 ([MH]+), 577,0 ( [MH2]++) . P] Preparação do composto com a fórmula I no qual Rl é [2-[6-amino-8-(2-piridin-3-il-etil)-purin-9-il]etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo (1-1)

Dissolveu-se o produto do passo 0 do exemplo 1 (54 mg) em 2 mL de metanol e agitou-se durante 96 horas à temperatura ambiente. Em seguida concentrou-se a mistura reaccional in vácuo e purificou-se o residuo por HPLC para se obter o produto pretendido sob a forma de um sólido branco. MS: massa precisa (ESI): 1069,5792 Da. 55

Exemplo 2

Preparação de 1-2, composto com a fórmula I no qual RI é [2-[6-amino-8-(piridin-3-ilamino)-purin-9-il]etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. A] Preparação de 6-amino-8-bromo-9-[2-(fcerc- butil-dimetil-silaniloxi)-etil]-purina

Adicionaram-se a uma solução de 3,0 g de 2-(6-amino-8-bromo-purin-9-il)etanol (passo A do exemplo 1) em 30 mL de DMF, 2,8 g de TBDMSC1 e 1.1 g de imidazole, e agitou-se a mistura durante 24 horas sob árgon a 20°C. Separou-se o precipitado por filtração, lavou-se com água e secou-se para se obterem 3,6 g (84 %) do produto pretendido. B] Preparação de 6-amino-8-(piridin-3-ilamino)-9-[2-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)etil]-purina

Adicionaram-se a uma solução de 0,372 g do produto do passo A do exemplo 2 e 0,23 g de 3-aminopiridina em 10 mL de tolueno, 0,091 g de Pd2(dba)3, 0,14 g de t-BuONa e 0,087 g de 9,9-dimetil-4,5- bis(difenilfosfino)xanteno (Xantphos). Agitou-se a mistura a 100°C sob uma atmosfera de árgon durante 16 horas. Completada a reacção, diluiu-se a mistura com água e extraiu-se com DCM. Concentrou-se a fase orgânica e 56 purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida sobre silicagel (CHCl3:MeOH a 20:1) para se obterem 0,1 g (26 %) do produto pretendido. C] Preparação de 2-(6-amino-8-(piridin-3-ilamino)-purin-9-il)etanol

Adicionaram-se a uma solução de 0,46 g do produto do passo B do exemplo 2, em 10 mL de THF, 0,12 g de TBAP*3H20 e agitou-se a mistura durante 16 horas a 20°C. Em seguida concentrou-se a mistura reaccional e purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida sobre silicagel (acetato de etilo:metanol a 20:1) para se obterem 0,19 g (59 %) do produto pretendido. D] Preparação de 6-amino-9-(2-cloroetil)-8-(piridin-3-ilamino)-purina

Arrefeceram-se 0,11 g de 2-(6-amino-8-(piridin-3-ilamino)-purin-9-il)etanol a -20°C e adicionaram-se-lhe 2 mL de SOC1. Aumentou-se gradualmente a temperatura até 50°C e agitou-se a mistura a esta temperatura durante 12 horas. Evaporou-se o excesso de SOCI2 e adicionou-se amónia ao resíduo. Extraiu-se a mistura com acetato de etilo. Separou-se a fase orgânica e evaporou-se. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida sobre silicagel (acetato de etilo:MeOH a 20:1) para se obterem 30 mg (27 %) do produto pretendido. RMN de (DMSO-d6) : 9,10 (s, 1H) ; 57 9,0 (s, 1H) ; 8,35 (d, 1H) ; 8,20 (d, 1H) ; 8,05, (s, 1H) ; 7,30 (m, 1 H) ; 6,65 (s,2H,-NH2); 4,55 (t,2H); 4,0 (t,2H). E] Preparação do composto com a fórmula I em que Rl e [2-[6-amino-8-(piridin-3-ilamino)-purin-9-il]etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo (1-2)

Preparou-se o composto em título 1-2 a partir de 6-amino-9-(2-cloroetil)-8-(piridin-3-ilamino)-purina e de IX-1 seguindo os procedimentos descritos nos passos O-P do exemplo 1. MS: massa precisa (ESI): 1056,5548 Da.

Exemplo 3

Preparação de 1—3, composto com a fórmula I em que Rl é [2-[(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)-(piridin-4-il-carbonil)-amino]etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. A] Preparação de N—(3—ciclopentiloxi—4—metoxi— fenil)-isonicotinamida

Dissolveram-se 7,0 g (33,8 mmol) de 3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenilamina (Garcia et al., JOC, 2005, 70, pág. 1.050) em 150 mL de DCM. Arrefeceu-se a solução a 0°C e adicionaram-se-lhe 5,74 g (40,5 mmol) de cloreto de isonicotinoílo dissolvidos em 50 mL de DCM. Formou-se um precipitado. Em seguida agitou-se a mistura 58 reaccional à temperatura ambiente durante duas horas. Adicionou-se à mistura reaccional avermelhada uma solução de 2,7 g de NaOH em 100 mL de água. Separou-se a fase orgânica, secou-se sobre Na2SC>4 e evaporou-se. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida sobre silicagel (acetato de etilo/n-hexano a 2:1) para se obterem 7,2 g (62 %) do produto pretendido. MS (ESI): 313,1. B] Preparação de N-(2-cloroetil)-N-(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-isonicotinamida

Dissolveram-se 3,0 g (9,6 mmol) do produto do passo A do exemplo 3 em 50 mL de l-bromo-2-cloroetano e adicionaram-se à solução 5,33 g (95 mmol) de hidróxido de potássio. Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente de um dia para o outro e depois aqueceu-se a 60°C durante quatro horas. Arrefeceu-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente e adicionaram-se-lhe 50 mL de água. Extraiu-se a mistura com 50 mL de DCM. Lavou-se a fase orgânica com água e com salmoura, secou-se sobre Na2S04 e evaporou-se. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida sobre silicagel (acetato de etilo/n-hexano a 1:1) para se obterem 1,3 g (43 %) do produto pretendido sob a forma de um óleo amarelo. RMN de 1H (DMSO-d6) : 8,45 (d, 2H) ; 7,21 (d, 2H) ; 6,8 (m, 3H) ; 4,63 (m, 1H) ; 4,13 (t, 2H) ; 3,76 (t, 2H) ; 3,66 (s, 3H) ; 1,4-1,8 (m, 8H) . C] Preparação do composto com a fórmula I em que Rl é [2-[(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)-(piridin-4-il- 59 carbonil)-amino]etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo (1-3)

Preparou-se o composto 1-3 em título a partir de N- (2-cloroetil)-N-(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-isonicotinamida e de IX-1, seguindo-se os processos descritos nos passos 0-P do exemplo 1. MS: massa precisa (ESI): 1.141,6073 Da.

Exemplo 4

Preparação de 1-4, composto com a fórmula I na qual RI é [2-[ (3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)-(piridin-4-ilmetil)-amino]-etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. A] Preparação de (3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(piridin-4-ilmetil)-amina

Dissolveram-se 0,5 g (1,6 mmol) do produto do passo A do exemplo 3, sob azoto, em 20 mL de THF seco e adicionaram-se 0,24 g (6,4 mmol) de hidreto de alumínio e lítio à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura reaccional durante duas horas à temperatura ambiente e depois arrefeceu-se a 0°C e adicionaram-se-lhe 2 mL de água. Extraiu-se a mistura com 3 x 20 mL de acetato de etilo. Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com água e com salmoura, secou-se sobre Na2SC>4 e evaporou-se in vacuo 60 para se obter o produto em bruto sob a forma de um óleo. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida sobre silicagel (acetato de etilo/n-hexano a 1:1) para se obterem 0,4 g (84 %) do produto pretendido sob a forma de um óleo. MS (ESI): 299,2 ([MH]+). B] Preparação de (2-cloro-etil)-(3- ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(piridin-4-ilmetil)-amina

Dissolveram-se 3,85 g (12,9 mmol) do produto do passo A do exemplo 4 em 50 mL de metanol a 25°C e adicionaram-se à solução 5,1 mL de uma solução de cloroacetaldeído (a 40 % em água; 77,4 mmol, 6 equivalentes), 4,86 g (77,4 mmol, 6 equivalentes) de cianoborohidreto de sódio e 0,74 mL (12,9 mmol) de ácido acético. Agitou-se a mistura a 25°C durante 16 horas. Em seguida removeu-se o solvente sob pressão reduzida e retomou-se o resíduo em 100 mL de diclorometano. Lavou-se a mistura com 3 x 50 mL de salmoura, secou-se sobre Na2SC>4 e evaporou-se in vacuo. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida sobre silicagel (acetato de etilo/n- hexano a 1:4) para se obterem 1,66 g (35 %) do produto pretendido sob a forma de um óleo. MS (ESI) : 361,2, 363, 1 ( [MH]+) . RMN de (CDC13) : 8,52 (d, 2H) ; 7,17 (d, 2H) ; 6.75 (d, 1H) ; 6,18-6,24 (m, 2H) ; 4,6 (m, 1H) ; 4,52 (s, 2H) ; 3.75 (s, 3H) ; 3, 64-3, 73 (m, 4H) ; 1,5-1,9 (m, lg, 8H) . 61 C] Preparação de composto com a fórmula IX em que Rp4 é metilo, Rpi e Rp2 são hidrogénio e R4 é metilo (IX-4)

Dissolveram-se 3,1 g (3,35 mmol) do produto do passo L do exemplo 1 em 80 mL de DCM e adicionaram-se-lhe peneiros moleculares. Adicionou-se 1,0 g (4,94 mmol) de tetrafluoroborato de dimetil(metiltio)sulfónio à mistura e agitou-se durante 20 horas à temperatura ambiente. Filtrou-se a mistura reaccional e lavou-se por duas vezes com 80 mL de solução aquosa de NaHCCy (a 5 %) , com 80 mL de água e com 80 mL de salmoura, secou-se sobre Na2SC>4, filtrou-se e concentrou-se in vácuo para se obterem 3,04 g de uma espuma castanho-clara. Utilizou-se o produto em bruto no passo seguinte, sem purificação. MS (ESI) : 850,2 [MH]+. D] Preparação de composto com a fórmula I no qual Rl é [2-[(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)-(piridin-4-ilmetil)-amino]-etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. (1-4)

Adicionaram-se a uma solução de 0,136 g (0,16 mmol) do produto do passo C do exemplo 4 em 7,5 mL de DMF e 35 yL de água, 80 yL (0,32 mmol) de tributilfosfina, e agitou-se a mistura à temperatura ambiente até já não restar matéria-prima nenhuma (3 horas). Em seguida adicionaram-se à solução 45 mg (0,24 mmol) do produto do 62 passo b do exemplo 4 e 36 pL de DBU (0,24 mmol) . Agitou-se a mistura reaccional durante 13 horas à temperatura ambiente e depois adicionaram-se 15 mL de água e extraiu-se a mistura com 3 x 20 mL de acetato de etilo. Concentrou-se o conjunto das fases orgânicas, secou-se sobre Na2SC>4, filtrou-se e concentrou-se in vácuo para se obter o produto em bruto sob a forma de um óleo amarelo. Uma primeira purificação do produto foi levada a cabo por cromatografia rápida sobre silicagel (acetato de etilo/hexano a 5/1). Purificou-se mais o composto por HPLC preparativa (coluna: Xterra C18 (5 ym) 100 mm x 10 mm; fase móvel A: água + 0,02 % de NH4OH, fase móvel B: MeOH; caudal: 10 mL/minuto; detecção: 254 nm; gradiente: 0 minutos/90% de A/10 % de B, 10 minutos/40 % de A/60 % de B, 10,1 minutos/0 % de A/100 % de B) . MS: massa precisa (ESI): 1128,6423 Da.

Periodo de retenção: 10,8 minutos (coluna:

Prontosil 120-3-C18 SH 3 ym, 75x4,6 mm; caudal: 1,0 mL/minuto; detecção: 254 nm; temperatura da coluna: ambiente; fase móvel A: água+0,1 % de TFA; fase móvel B: metanol; gradiente: 0-5 minutos constante a 30 % de B; 5-25 minutos linear, de 30 % a 95 % de B).

Exemplo 5

Preparação de 1-5, composto com a fórmula I no qual RI é [2-[(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)-(piridin-3- 63 ilmetil)-amino]-etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. A] Preparação de N—(3—ciclopentiloxi—4—metoxi— fenil)-nicotinamida

Dissolveram-se 3,2 g (14,3 mmol), de 3- ciclopentiloxi-4-metoxi- fenilamina (Garcia et ai., JOC, 2005, 70, pág. 1.050) em 12 0 mL de DCM. Arrefeceu-se a solução a 0°C e adicionaram-se à mistura reaccional 15 mL (107,6 mmol, 7,5 equivalentes) de trietilamina e 3,7 g (26,1 mmol; 1,8 equivalentes) de cloreto de nicotinoilo em 50 mL de DCM. Agitou-se a mistura reaccional durante 2 h e depois adicionou-se à mistura uma solução de 1,3 g de NaOH em 50 mL de água. Separou-se a fase orgânica e lavou-se com água e com salmoura, secou-se sobre Na2S04 e evaporou-se in vacuo. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida sobre silicagel (acetato de etilo/n-hexano a 1:1) para se obterem 4 g (85 %) do produto pretendido sob a forma de um sólido branco. MS (ESI) : 313, 0 ( [MH] +) .

RMN 1H) ; 8,73 (d, 1H); 7,29 (d, 3H);1,56-1, 90 : 10,24 (s, 1 1H) ; 7,54 (dd, 1H) ; 4,70 (m, H) ; 9, 07 (s 1H) ; 7,42 (s 1H) ; 3, 71 (s de XH (DMS0-d6) 1H) ; 8,25 (d, 1H) ; 6,91 (d, (m, 8H) . 64 B] Preparação de (3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(piridin-3-ilmetil)-amina

Dissolveram-se 0,5 g (1,6 mmol) do produto do passo A do exemplo 5 sob azoto, em 20 mL de THF seco e adicionaram-se-lhe a 0°C 0,24 g (6,4 mmol) de hidreto de aluminio e litio. Agitou-se a mistura reaccional a durante duas horas a 15°C e depois arrefeceu-se a 0°C e adicionaram-se-lhe 2 mL de água. Extraiu-se a mistura com 3 x 20 mL de acetato de etilo. Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com água e com salmoura, secou-se sobre Na2S04 e evaporou-se in vacuo para se obter o produto em bruto sob a forma de um óleo. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida sobre silicagel (acetato de etilo/n-hexano a 1:1) para se obterem 180 mg (38 %) do produto pretendido sob a forma de um óleo amarelo-claro. MS (ESI): 299.1 ([MH]+) . RMN de ΧΗ (DMSO-de) : 8,54 (s, 1H); 8,41 (d, 1H) ; 7,72 (d, 1H) ; 7,32 (dd, 1H) ; 6, 64 (d, 1H) ; 6,22 (d, 1H) ; 6, 02 (dd, 1H) ; 4,60 (m, 1H) ; 4,21 (s, 2H) ; 3,56 (s, 3H) ; 1,50- 1,76 (m, 8H) . C] Preparação de (2-cloro- etil) -(3- ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(piridin-3-ilmetil)-amina

Dissolveram-se 150 mg (0,51 mmol) do produto do passo B do exemplo 5 em 10 mL de metanol a 25 °C e adicionaram-se-lhe 0,5 mL de uma solução de 65 cloroacetaldeido (a 40 % em água; 7,74 mmol, 15 equivalentes), 0,25 g (3,98 mmol, 7,8 equivalentes) de cianoborohidreto de sódio e 0,05 mL (0,87 mmol) de ácido acético. Agitou-se a mistura a 15°C durante 4 horas. Em seguida removeu-se o solvente sob pressão reduzida e retomou-se o residuo em 100 mL de diclorometano. Lavou-se a mistura com 3 x 50 mL de salmoura, secou-se sobre Na2SC>4 e evaporou-se in vacuo. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida sobre silicagel (acetato de etilo/n-hexano a 1:4) para se obterem 140 mg (35 %) do produto pretendido sob a forma de um óleo amarelo-claro. MS (ESI): 361,2, 363, 1 ( [MH]+) . RMN de XH (DMSO-de) : 8,45 (s, 1H) ; 8,39 (d, 1H) ; 7, 58 (d, 1H) ; 7,29 (dd, 1H) ; 6,72 (d, 1H) ; 6,25 (s, 1H) ; 6, 20 (d, 1H) ; 4,62 (m, 1H) ; 4,60 (s, 2H) ; 3, 74 (t, 2H) ; 3, 71 (t, 2H) ; 3,58 (s, 3H) ; 1,46-1, 67 (m, 8H) D] Preparação do composto com a fórmula I no qual Rl é [2-[(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)-(piridin-3-ilmetil)-amino]-etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam u grupo C=0 e R4 é metilo (1-5).

Preparou-se o composto em titulo, 1-5, a partir de (2-cloro-etil)-(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-piridin-3-ilmetil-amina (passo C do exemplo) e de IX-4 seguindo-se o procedimento descrito no passo D do exemplo 4 . 66

Purificou-se o produto em primeiro lugar por HPLC preparativa com o sistema Bp. Dissolveu-se o produto isolado em DCM e lavou-se com uma solução aquosa diluida de NaOH. Secou-se a fase orgânica e evaporou-se. Este produto foi em seguida purificado por HPLC (sistema Ap). MS: massa precisa (ESI): 1128,6434 Da.

Periodo de Retenção (sistema Aa): 16,7 minutos.

Exemplo 6

Preparação de 1-6, composto com a fórmula I na qual RI é [2-[ (5-(3,5-dicloro-piridin-4-il-amino-carbonil)-1-etil-lH-pirazolo[3,4 —b]piridin-4-ilamino]-etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. A] Preparação de éster etílico do ácido 4-(2-cloro-etilamino)-1-etil-lH-pirazolo[3,4-b]piridine-5-carboxílico

Adicionaram-se 2,54 g (10 mmol) de éster etílico do ácido 4-cloro-l-etil-lH-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxílico (J. Med. Chem. 2001, 44, 1025) e 1,28 g (11 mmol) de cloridrato de 2-cloroetilamina a 40 mL de etanol anidro. Em seguida adicionaram-se 7 mL (50 mmol) de trietilamina. Aqueceu-se a mistura ao refluxo até se completar a reacção (4 horas). Concentrou-se a mistura reaccional sob pressão reduzida e adicionaram-se-lhe 20 mL 67 de solução aquosa saturada de carbonato de sódio. Extraiu-se a mistura com 3x20 mL de acetato de etilo. Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com 15 mL de água e com 15 mL de salmoura, secou-se sobre Na2S04 e evaporou-se in vacuo. Purificou-se em primeiro lugar o produto em bruto (2,88 g) por cromatografia rápida sobre silicagel (éter de petróleo/acetato de etilo a 5:1) e depois cristalizou-se a partir de 20 mL de hexano/acetato de etilo a 1/1 para se obterem 1,24 g (42 %) do produto pretendido sob a forma de um sólido cristalino branco. MS (ESI) : 297,1 ( [M+H]+) . RMN de ΧΗ (CDCls) : 9,70 (largo, 1H) , 8, 90 (s 1H) , 8,04 (s, 1H), 4,54 (q, 2H) , 4,36 (q, 2H) , 4, 03 (t CM 3,87 (t, 2H), 1,50 (t, 3H), 1, 40 (t, 3H) B] Preparação de ácido 4-(2-cloro-etilamino)-1-etil-lH-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxílico

Adicionou-se uma solução de 1,17 g (4,0 mmol) do produto do passo A do exemplo 6 em 15 mL de etanol a uma solução de 0,64 g (16,0 mmol) de NaOH em 2 mL de água. Aqueceu-se a mistura resultante ao refluxo durante 3 horas. Removeu-se o etanol sob pressão reduzida e adicionaram-se 10 mL de água ao resíduo. Acidificou-se a solução até pH 5 com HC1 2 N, levando à precipitação do produto. Isolou-se o precipitado por filtração e secou-se para se obterem 0,5 g 68 (44 %) do produto pretendido sob a forma de um sólido branco. MS (ESI) : 269, 1 ( [M+H] +) . RMN de ΧΗ (CDC13) : 12,75 (b, 1H) , 9, 54 (s, 1H) (s, 1H), 8,19 (s, 1H) , 4,36 (q, 2H) , 4,05 (t, 2H) (t, 2H) , 1,34 (t, 3H) . 8, 68 3, 93 C] Preparação de (3,5-dicloro-piridin-4-il)-amida do ácido 4-(2-cloro-etilamino)-1-etil-lH-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxílico

Suspenderam-se 0,8 g (3,0 mmol) do produto do passo B do exemplo 6, 0,8 g (6 mmol) de HOBt e 1,14 g (6 mmol) de EDOHC1 em 25 mL de THF e adicionaram-se 2,1 g (21 mmol) de trietilamina. Agitou-se a mistura a 15°C até ter desaparecido toda a matéria-prima (24 horas). Removeu-se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna (éter de petróleo/acetato de etilo a 4:1) para se obterem 0,64 g de um sólido branco.

Suspenderam-se 131 mg de NaH (a 60 %, 5,7 mmol) em 15 mL de THF e adicionou-se gota a gota uma solução de 3,5-dicloro-4-aminopiridina em 5 mL de THF a 15°C, a esta suspensão. Passada 1 hora, adicionou-se lentamente uma solução de 570 mg (1,42 mmol) do sólido branco mencionado acima em 5 mL de THF e esta mistura, e agitou-se durante mais 30 minutos. Adicionaram-se 0.1 mL de água à mistura 69 reaccional e removeu-se o solvente por evaporação. Purificou-se o residuo por cromatografia rápida sobre silicagel (éter de petróleo/acetato de etilo a 4:1) para se obterem 92 mg do produto pretendido. Recristalizou-se este produto a partir de acetona/hexano a 1:2 para se obterem 68 mg (11,6 %) do produto pretendido sob a forma de um sólido amarelo-claro. MS (ESI) : 413, 0 ([M+H]+) . RMN de (CDC13) : 9, 68 (s, 1H) , 8, 77 (s, 1H) 2H) , 8,06 (s, 1H) , 7, 91 (s, 1H) , 4,53 (q, 2H) 2H) , 3,82 (t, 2H) , 1, r 52 (t , 3H) D] Preparação de composto com a fórmula I em que Rl é [2-[(5-(3,5-dicloro-piridin-4-il-amino-carbonil)-1-etil-lH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-ilamino]-etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo (1-6)

Preparou-se o composto em titulo, 1-6, a partir de (3,5-dicloro-piridin-4-il)-amida do ácido 4-(2-cloro-etilamino)-1-etil-lH-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxílico (produto do passo C do exemplo 6) e de IX-1, seguindo os processos descritos nos passos 0-P do exemplo IP.

Purificou-se o produto por HPLC (Sistema Ap). MS: massa precisa (ESI): 1180,5134 Da. 70

Exemplo 7

Preparação de 1-7, composto com a fórmula I em que RI é [3-[2,3-dimetoxi-6-(piridin-4-il-amino-carbonil)fenil]-propil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. A] Preparação de 1-(3-benziloxi-propil)-2,3-dimetoxi-benzeno

Sob uma atmosfera de azoto, suspenderam-se 2,50 g (62,5 mmol) de NaH (a 60 % em óleo) em 70 mL de THF seco, e adicionou-se uma solução de 7,1 g (36,2 mmol) de 3-(2,3-dimetoxi-fenil)-propan-l-ol (J. Org. Chem., 1987, 52, 1072) em 50 mL de THF, a 18°C. Agitou-se a mistura resultante durante 30 minutos e depois adicionou-se-lhe gota a gota uma solução de 6,81 g (39,8 mmol) de brometo de benzilo em 30 mL THF e agitou-se a mistura de um dia para o outro a 18 °C. Terminou-se a reacção adicionando 10 mL de água à mistura e evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Dissolveu-se o residuo em 200 mL de acetato de etilo e lavou-se a fase orgânica com água e com salmoura, secou-se sobre Na2S04 e evaporou-se in vacuo. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna sobre silicagel (acetato de etilo/n-hexano a 1:40) para se obterem 8 g (77 %) do produto pretendido sob a forma de um óleo incolor. RMN de ΧΗ (CDCls) : 7,36-7,27 (m, 5H) ; 6,99- 6, 95 (m 1H) ; 6, 78-6, 76 (m, 2H) ; 4,52 (s, 2H) ; 3,86 (s, 71 3Η, ) ; 3,81 (s, 3H) ; 3,52 (t, 2H) ; 2,73 (t, 2H) ; 1,93 (m, 2H) . B] Preparação de 1-(3-benziloxi-propil)-6-bromo-2,3-dimetoxi-benzeno

Sob atmosfera de azoto, dissolveram-se 8,0 g (27,9 mmol) do produto do passo A do exemplo 7 em 120 mL de DCM e adicionaram-se 5,47 g (30,7 mmol) de N-bromo-succinimida e 0,48 g (2,8 mmol). Agitou-se a mistura de um dia para o outro a 18°C. Concentrou-se a mistura reaccional in vácuo e purificou-se 0 produto em bruto por cromatografia em coluna sobre silicagel (acetato de etilo/n-hexano a 1:40) para se obterem 9,7 g (95 %) do produto pretendido sob a forma de um óleo incolor. RMN de (CDCI3 ) : 7, 38-7,27 (m , 5H); 7,24 (d, 1H) ; 6, 67 (d, 1H) ; 4, 54 (s, 2H) ; : 3,84 (s, 3H) ; 3,81 (s, 3H) ; 3,58 (t, 2H) ; 2, 86 (t, 2H) ; 1,875 (m, 2H) . C] Preparação de ácido 2-(3-benziloxi-propil)-3,4-dimetoxi-benzóico

Dissolveram-se 9,7 g (26,7 mmol) do produto do passo B do exemplo 7, sob azoto, em 40 mL de THF seco. Arrefeceu-se a solução a -78°C e adicionaram-se-lhe 18 mL de uma solução de butil-litio (2,2 M em n-hexano). Passados 30 minutos adicionaram-se 400 g de CO2 sólido e aqueceu-se lentamente a mistura reaccional até à temperatura ambiente. Verteu-se a mistura reaccional sobre água e extraiu-se a 72 mistura com hexano. Adicionaram-se 20 mL de uma solução aquosa 3 M de HC1 à fase aquosa e extraiu-se com 2 x 100 mL de acetato de etilo. Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura, secou-se sobre Na2SC>4 e evaporou-se in vácuo para se obterem 9 g do produto em bruto sob a forma de um sólido branco. RMN de (CDC13) : 7,86 (d, 1H); 7,37-7,24 (m 5H) ; 6,82 (d, 1H) ; 4,53 (s, 2H) ; 3,92 (s, 3H) ; 3,82 (s 3H) ; 3,59 (t, 2H) ; 3,13 (t, 2H) ; 1,92 (m, 2H) . D] Preparação de 2-(3-benziloxi-propil)-N-(3,5-dicloro-piridin-4-il)-3,4-dimetoxibenzamida

Adicionaram-se 10,8 g (52,4 mmol) de DCC e 5,0 g (37 mmol) de HOBt a uma solução de 8,7 g (26,3 mmol) do produto do passo C do exemplo 7 em 150 mL de DCM sob uma atmosfera de azoto e agitou-se a mistura a 40°C durante 2 horas. Filtrou-se a suspensão e concentrou-se o filtrado in vácuo. Purificou-se o produto resultante por cromatografia em coluna sobre silicagel (hexano/acetato de etilo a 8/1) para se obterem 8,5 g de um sólido branco. Adicionou-se gota a gota uma solução de 4 g (8,9 mmol) deste sólido branco em 40 mL de THF seco a uma suspensão de 1,6 g (9,8 mmol) de 4-amino-3,5-dicloro-piridina e 822 mg (35,8 mmol) de NaH (a 60 % em óleo) em THF, que havia se agitou à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Agitou-se a mistura resultante a 30 °C durante 2 horas e depois terminou-se a reacção adicionando água à mistura. Extraiu-se a mistura 73 com 2 x 100 mL de acetato de etilo. Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com água e com salmoura, secou-se sobre Na2S04 e evaporou-se in vacuo. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna sobre silicagel para se obterem 4,1 g (96 %) do produto pretendido sob a forma de um sólido branco. RMN de 1H-NMR (DMSO-d6) : 8,47 (s, 2H) ; 8,39 (s, 1H) ; 7,43 (d, 1H) ; 7,26-7,17 (m, 5H) ; 6,88 (d, 1H, ) ; 4,38 (s, 2H) ; 3,92 (s, 3H) ; 3,84 (s, 3H) ; 3,54 (t, 2H) ; 3,08 (t, 2H) ; 2,09 (q, 2H) . E] Preparação de 2-(3-hidroxi-propil)-3,4-dimetoxi-N-piridin-4-il-benzamida

Dissolveu-se 1,0 g (2,1 mmol) do produto do passo D do exemplo 7 em 200 mL de etanol e adicionaram-se-lhe 230 mg de Pd/C (a 10 %). Agitou-se a mistura durante 36 horas à temperatura ambiente sob uma atmosfera de hidrogénio gasoso (40 psi) . Removeu-se o catalisador por filtração e concentrou-se o filtrado sob pressão reduzida. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna sobre silicagel para se obterem 280 mg do produto pretendido sob a forma de um sólido branco. MS (ESI) : 317,1 ( [MH] +) . 74 RMN de ΧΗ (DMSO-d6) : 11,58 (s, 1H) ; 8,71 (d, 2H) ; 8,18 (d, 2H) ; 7,37 (d, 1H) ; 7,04 (d, 1H) ; 3,86 (s, 3H) ; 3,74 (s, 3H) ; 3,36 (t, 2H) ; 2,75 (t, 2H) ; 1,61 (q, 2H) . F] Preparação de 2-(3-cloro-propil)-3,4-dimetoxi-N-piridin-4-il-benzamida

Dissolveram-se 200 mg (0,63 mmol) do produto do passo E do exemplo 7 e 163 mg (0,76 mmol) de PCI5 em 4 mL de DCM e agitou-se a mistura resultante a 20°C durante 30 minutos. Concentrou-se a mistura e purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna sobre silicagel (DCM/MeOH a 10:1) para se obterem 160 mg (75 %) do produto pretendido sob a forma de um sólido branco. MS (ESI) : 335, 1 ( [MH] +) . RMN de ΧΗ (DMSO-d6) : 11,54 (s, 1H) ; 8,69 (d, 2H) ; 8,15 (d, 2H) ; 7,391 (d, 1H) ; 7,09 (d, 1H); 3,87 (s, 3H) ; 3,76 (s, 3H); 3,61 (t, 2H) ; 2,84 (t, 2H) ; 1, 934 (q, 2H) G] Preparação do composto com a fórmula I na qual Rl é [3-[2,3-dimetoxi-6-(piridin-4-il-amino- carbonil)fenil]-propil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo (1-7)

Preparou-se o composto em titulo 1-7 a partir de 2-(3-cloro-propil)-3,4-dimetoxi-N-piridin-4-il-benzamida (passo F do exemplo 7) e de IX-4, seguindo o processo 75 descrito no passo D do exemplo 4. Purificou-se este produto por HPLC preparativa (sistema Ap) para se obter um sólido branco. MS: massa precisa (ESI): 1102,5927 Da.

Exemplo 8

Preparação de 1-8, composto com a fórmula I na qual RI é [3-[4-amino-7-(piridin-4-il-amino-carbonil)-imidazo[4,5-c]piridin-l-il]-propil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. A] Preparação de éster etílico do ácido 4,6-dihidroxi-nicotínico

Aqueceu-se uma mistura de 5,0 g (24,73 mmol) de 1,3-acetonadicarboxilato de dietilo, 5,05 g (49,45 mmol) anidrido acético e 3,7 g (24,73 mmol) de ortoformato de etilo a 120°C durante 2 horas. Removeram-se as componentes voláteis sob pressão reduzida e tratou-se o resíduo remanescente com 10 mL de amónia (a 25 %) . Agitou-se a mistura durante 30 minutos à temperatura ambiente. Subsequentemente ajustou-se o pH da mistura a pH 2 com solução aquosa de HC1 (2 N) . Separou-se o sólido por filtração, lavou-se com água fria e secou-se. Adicionaram-se 8 mL de tolueno ao produto em bruto, agitou-se a mistura a 0°C durante 30 minutos e depois filtrou-se e secou-se para se obterem 2,26 g (50 %) de um sólido vermelho. 76 RMN de ΧΗ (DMSO-d6) : 11,77 (s, lg, 1H) ; 10,74 (s, lg, 1H) ; 8,01 (s, 1H) ; 5,60 (s, 1H) ; 4,26 (q, 2H) ; 1,28 (t, 3H) . B] Preparação de éster etílico do ácido 4,6- dihidroxi-5-nitro-nicotínico

Adicionou-se gota a gota, a uma solução de 2,34 g (12,78 mmol) do produto do passo A do exemplo 8 em 9 mL de ácido acético, a 60°C, 1.24 g de ácido nitrico (a 65 %; 12,78 mmol). Agitou-se a mistura a 90°C durante 20 horas. Arrefeceu-se a mistura reaccional a 0°C, filtrou-se e lavou-se o bolo de filtração com água fria. Secou-se o sólido para se obterem 2,2 g (75 %) do produto pretendido sob a forma de cristais amarelo-claros. MS (ESI) : 229, 0 ( [MH] +) . C] Preparação de éster etílico do ácido 4,6- dicloro-5-nitro-nicotínico

Agitou-se a 80°C durante 74 horas 2,0 g (8.77 mmol) do produto do passo B do exemplo 8 em 8,0 mL (86 mmol) de oxicloreto de fósforo. Removeu-se então cerca de metade do oxicloreto de fósforo in vacuo e verteu-se a mistura resultante sobre gelo. Extraiu-se a mistura com 3 x 30 mL de acetato de etilo. Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com 30 mL de solução aquosa de carbonato de sódio 77 (a 10 %) , com 2 x 30 mL de água e com 30 mL de salmoura, secou-se sobre Na2SC>4 e evaporou-se in vácuo para se obter o produto em bruto sob a forma de um óleo castanho que se purificou por cromatografia em coluna sobre silicagel (acetato de etilo/hexano a 1:20) para se obterem 1,67 g (72%) do produto pretendido sob a forma de um sólido amarelo-claro. RMN de XH (DMS0-d6) : 9,08 (s, 1H) ; 4,40 (q, 2H) ; 1,35 (t, 3H). D] Preparação de 3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-propilamina

Adicionou-se uma solução de 7,4 g (98 mmol) de 3-aminopropanol em 10 mL de THF à temperatura ambiente, a uma suspensão de 4,12 g de hidreto de sódio (a 60 %; 103,2 mmol) em 140 mL de THF. Agitou-se a mistura durante 1 hora e depois adicionaram-se-lhe 16,28 g (108 mmol) de cloreto de terc-butildimetilsililo e continuou a agitar-se vigorosamente durante 1 hora. Diluiu-se a mistura com 300 mL de éter dietilico e lavou-se sucessivamente com 100 mL de uma solução aquosa de K2CO3 (a 10 %), com 100 mL de água e com 100 mL de salmoura, secou-se sobre MgSCL e evaporou-se para se obterem 17 g do produto em bruto amarelo-claro. Dissolveu-se este produto em acetato de etilo/hexano a 1/10 e filtrou-se através de uma altura de silicagel.

Concentrou-se o filtrado in vacuo para se obterem 13 g (70 %) do produto pretendido sob a forma de um óleo incolor. 78 RMN de ΧΗ (CDC13) : 3,67 (t, 2H) ; 2,78 (t, 2H) ; 1,83 (s, lg, 2H) ; 1,64 (m , 2H) ; 0,87 (s, 9H) ; 0,33 (s, 6H) . E] Preparação de éster etílico do ácido 4-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-propilamino]-6-cloro-5-nitro-nicotínico

Aqueceu-se ao refluxo uma solução de 6,0 g (22,6 mmol) do produto do passo C do exemplo 8 com 2,3 g (22,6 mmol) de trietilamina em 75 mL de etanol. Adicionaram-se 4,0 g (22,6 mmol) do produto do passo D do exemplo 8 a esta solução e agitou-se a mistura ao refluxo durante mais uma hora. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se o resíduo resultante por cromatografia em coluna sobre silicagel (hexano/acetato de etilo a 80:1) para se obterem 9 g (95 %) do produto pretendido sob a forma de um óleo amarelo. RMN de ΧΗ (DMSO-de) : 8,96 (t, 1H) ; 8,70 (s, 1H) ; 4,36 (q, 2H) ; 3,70 (t, 2H) ; 3,22 (td, 2H) ; 1,84 (m, 2H) ; 1,39 (t, 3H); 0,88 (s, 9H); 0,02 (s, 6H) . F] Preparação de éster etílico do ácido 5—amino-4-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-propilamino]-6-cloronicotínico

Dissolveram-se 8,5 g (26,5 mmol) do produto do passo E do exemplo 8 em 100 mL de etanol e adicionaram-se 79 2,5 g de níquel de Raney. Agitou-se a mistura reaccional durante 16 horas sob uma atmosfera de hidrogénio gasoso (1 atm) à temperatura ambiente. Removeu-se o catalisador por filtração através de uma almofada em silicagel e concentrou-se o filtrado sob pressão reduzida. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna sobre silicagel (hexano/acetato de etilo a 20:1) para se obterem 5, 6 g (58 %) do produto pretendido sob a forma de um óleo castanho. MS (ESI): 388,1; 390,1 ([MH)+). G] Preparação de éster etílico do ácido l-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-propil]-4-cloro-lH-imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxílico

Dissolveram-se 5,6 g (15,5 mmol) do produto do passo F do exemplo 8 em 45 mL de ortoformato de trietilo e aqueceu-se a mistura ao refluxo durante 4 horas.

Concentrou-se a mistura sob pressão reduzida e adicionaram-se mais 45 mL de ortoformato de trietilo e aqueceu-se a mistura ao refluxo durante mais 24 horas. Concentrou-se a mistura sob pressão reduzida e purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna sobre silicagel eluindo com hexano/acetato de etilo (desde 20/1 ->· 5/1) para se obterem 2,7 g (40 %; com uma pureza ~62 %) do composto pretendido sob a forma de um sólido amarelo-claro. 80 RMN de (CDC13) : 8,27 (t, 1H) ; 7,90 (s, 1H) ; 4,25 (q, 2H) ; 3, 60 (t, 2H) ; 3,40 (td, 2H) ; 1,65 (m, 2H);1,30 (t, 3H) ; 0,80 (s, 9H) ; 0,01(s, 6H) . H] Preparação de éster etílico do ácido 4-amino-1-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-propil]-1H— imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxílico

Dissolveram-se cerca de 20 g de amoníaco gasoso em 40 mL de etanol numa autoclave de 100 mL e adicionaram- se-lhe 2,7 g (6,28 mmol; pureza ~62 %) do produto do passo G do exemplo 8. Agitou-se a mistura a 100°C durante 20 horas. Arrefeceu-se a mistura reaccional e evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna sobre silicagel (DCM/MeOH a 100:1 e depois a 50:1) para se obterem 1,5 g (83 %) de um sólido castanho-escuro. I] Preparação de éster etílico do ácido 4-amino-1-[3-hidroxi-propil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxílico

Dissolveram-se 1,5 g (3,4 mmol) do produto do passo H do exemplo 8 em 30 mL de THF seco e adicionaram-se- 81 lhe 1,17 g (~4,5 mmol) de monohidrato de fluoreto de tetrabutilamónio. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 hora. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna sobre silicagel (acetato de etilo, e depois acetato de etilo/MeOH a 50:1 e depois acetato de etilo/MeOH a 20:1) para se obterem 750 mg (69 %) do produto pretendido sob a forma de um sólido branco. RMN de ΧΗ (DMSO-d6) : 8,31 (s, 1H) ; 8,08 (s, 1H) ; 7,00 (s, 2H) ; 4,59(t, 2H) ; 4,26 (q, 2H) ; 3,22 (t, 2H) ; 1,72 (m, 2H); 1,29 (t, 3H). K] Preparação de éster etílico do ácido 4-amino-1-[3-cloro-propil]-lH-imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxílico

Agitou-se uma suspensão de 750 mg (2,36 mmol) do produto do passo I do exemplo 8 em 22 mL de cloreto de tionilo a 50°C durante 0,5 horas. Adicionaram-se 0,275 mL de trietilamina e continuou a agitar-se durante 11 horas a 50 °C. Completada a reacção adicionaram-se 30 mL de éter dietílico à mistura reaccional já arrefecida, levando à formação de um precipitado. Isolou-se o sólido por filtração para se obterem 640 mg (91 %) do produto pretendido sob a forma de um pó amarelo-claro. MS (ESI) : 283, 0 ( [MH] +) . 82 RMN de (DMSO- -d6): 9, 00 (s, ií 1-1 2H) ; 8,52 (s, 1H) ; 8,30 (s, 1H) ; 4, 68 (t, 2H) ; 4,35 (q/ 2H) ; 3, 40 (t, 2H) ; 2,15 (m, 2H) ; 1 , 32 (t , 3H) . L] Preparação de ácido 4-amino-l-[3-cloro-propil]-lH-imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxílico

Adicionaram-se a uma mistura de 100 mg (0,35 mmol) do produto of passo K do exemplo com 0,7 mL de uma solução aquosa 2 M de LiOH, 2 mL de THF e 4 mL de MeOH. Agitou-se a mistura de um dia para o outro à temperatura ambiente e depois adicionaram-se mais 0,7 mL de uma solução aquosa 2 M de LiOH e agitou-se a mistura a 45°C de um dia para o outro. Ajustou-se o pH da mistura a pH=7 com solução aquosa 2 N de HC1 e evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por HPLC preparativa (Coluna: Purospher STAR RP18e, 5 ym, 125x25 mm; caudal: 25 mL/minuto; detecção: 254 nm; fase móvel A: água + 0, 1 % de ácido fórmico; fase móvel B: acetonitrilo; gradiente: linear de entre 20 % e 60 % de acetonitrilo em 10 minutos) para se obterem 30 mg (33 %) do produto pretendido sob a forma de um sólido branco. M] Preparação de piridin-4-ilamida do ácido 4-amino-1-[3-cloro-propil]-lH-imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxilico 83

Agitou-se uma suspensão de 60 mg (0,24 mmol) do produto do passo L do exemplo 8, 108 mg (0,28 mmol) de HATU, 72 mg (0,77 mmol) de 4-amino-piridina e 0, 048 mL (0,28 inmol) de DIPEA em 4,5 mL de DMF durante 3 horas a 30°C. A mistura reaccional clarificou. Adicionaram-se mais 90 mg (0,24 mmol) de HATU, 22 mg (0,24 mmol) de 4-amino-piridina e 0,040 mL (0,24 mmol) de DIPEA à mistura reaccional e continuou a agitar-se durante mais 21 horas. Concentrou-se a mistura e purificou-se o produto em bruto por HPLC preparativa para se obter o produto pretendido (contendo algum formiato) sob a forma de um sólido branco. MS (ESI): 331,1; 333, 1 ([MH]+) . RMN de ΧΗ (DMSO-d6) : 10,76 (s, 1H) ; 8,44 (d, 2H) ; 8,15 (s, 1H) ; 8,13 (s, 1H) ; 7,21(d, 2H) ; 6,93 (s, 2H) ; 4,51 (t, 2H); 3,42 (t, 2H); 2,03 (m, 2H). N] Preparação de composto com a fórmula I na qual Rl é [3-[4-amino-7-(piridin-4-il-aminocarbonil)- imidazo[4,5-c]piridin-l-il]-propil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. (1-8)

Preparou-se o composto em titulo 1-8, a partir de piridin-4-ilamida do ácido 4-amino-l-[3-cloro-propil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxílico (produto do passo M do exemplo 8) e de IX-1, seguindo os processos descritos nos passos 0-P do exemplo 1. Purificou-se o produto 1-8 por HPLC (Sistema Ap). 84 RMN de ΧΗ (CDC13) : (apenas os sinais para diagnósi tico) 8, 97 ( s, lg, 1H); ; 8,56 (d, 2H) ; 8,27 (s, 1H) ; 8,15 (s, , 1H); 7 ,72 (d, ig, 2H) ; 5,82 (s, ig/ 2H) ; 5,40 (dd, 1H) ; 4, 91 (d, 1H) ; 4, 60-4,77 (m, 2H) ; 4,51 (d, 1H) ; 4,18 (s, 1H) ; 3,98- 4,05 (m , 1H) ; 3,79 (d, 1H) ; 3, 69 (d, 1H) ; 3,5- 3, 6 (m, 1H) ; 3, 35 (s, 3H), ; 3,08 (s, 3H) ; 1,42 (s, 3H) ; 1,37 (s , 3H) ; 1,15 (d 3H) ; 1,08 (d, 3H) ; 1,01 (d, 3H) ; 0,85 (t, 3H) .

Exemplo 9 (de Comparação)

Preparação de 1-9, composto com a fórmula I no qual RI é [3-[4-amino-7-([metoxicarbonilmetil]-amino-carbonil)-imidazo[4,5-c]piridin-l-il]-propil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. A] Preparação de éster metilico do ácido { [4-amino-1-(3-cloro-propil)-lH-imidazo[4,5-c]piridina-7-carbonil]-amino}-acético

Agitou-se uma mistura de 60 mg (0,24 mmol) do produto d passo L do exemplo 8, 54 mg (0,28 mmol) de EDC, 38 mg (0,28 mmol) de HOBt e 89 mg (0,71 mmol) de sal cloridrato do éster metilico da glicina em 6 mL de DMF durante 2 horas à temperatura ambiente. Concentrou-se a mistura e purificou-se o produto em bruto por HPLC preparativa para se obterem 72 mg do produto pretendido sob a forma de um sólido branco. 85 RMN de (DMSO-d6) : 9.32 (m, 1H) ; 8,66 (s, lg, 2H) ; 8,47 (s, 1H) ; 7,89 (s, 1H) ; 4,52 (t, 2H) ; 4,04 (d, 2H) ; 3,67 (s, 3H) ; 3,52 (t, 2H) ; 2,11 (m, 2H) . B] Preparação de composto com a fórmula I no qual Rl é [3-[4-amino-7-([metoxicarbonilmetil]-amino-carbonil)-imidazo[4,5-c]piridin-l-il]-propil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo (1-9).

Preparou-se o composto em titulo 1-9 a partir de éster metilico do ácido { [4-amino-l-(3-cloro-propil)-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carbonil]-amino}-acético (produto do passo A do exemplo 9) e de IX-1, seguindo os processos descritos nos passos O-P do exemplo 1. Purificou-se o produto 1-8 por HPLC (Sistema Ap) para se obter o produto pretendido sob a forma de um sólido branco. MS: massa precisa (ESI): 1093,5698 Da.

Exemplo 10

Preparação de 1-10, composto com a fórmula I na qual Rl é [2-[4-amino-7-(piridin-4-il-amino-carbonil)-imidazo[4,5-c]piridin-l-il]-etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. 86 A] Preparação de éster etílico do ácido 4— [ 2— (terc-butil-dimetil-silaniloxi)-etilamino]-6-cloro-5-nitro-nicotínico

Aqueceu-se ao refluxo uma solução de 362 mg (1,37 mmol) do produto do passo C do exemplo 8 e de 138 mg (1,37 mmol) de trietilamina em 4 mL de etanol. Adicionaram-se gota a gota a esta solução 240 mg (1,37 mmol) de 2-(terc-butil-dimetil-silaniloxi) -etilamina e agitou-se a mistura ao refluxo durante mais uma hora. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se o resíduo resultante por cromatografia em coluna sobre silicagel (hexano/acetato de etilo a 80:1) para se obterem 430 mg (79 %) do produto pretendido sob a forma de um óleo amarelo. RMN de ΧΗ (DMSO-de) : 9,05 (m, 1H) ; 8, 66 (s, \—1 4,33 (q, 2H) ; 3,75 (t, 2H) ; 3,11 (t, 2H) ; 1,32 (t, 3H) ; 0, 84 (s, 9H); 0,04 (s, 6H) . B] Preparação de éster etílico do ácido 4-amino-1-[2-cloro-etil]-lH-imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxílico

Preparou-se o éster etílico do ácido 4-amino-l-[2-cloro-etil]-ΙΗ-imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxílico a partir do produto do passo A do exemplo 10 seguindo os processos descritos nos Passos F a K do exemplo 8. Isolou-se o produto pretendido sob a forma de um pó amarelo-claro. 87 87 (DMSO-d6) : 9,00 (s, 4,96 (t, 2H) ; 4,33 ig, 2H) ; 8,53 (s (q, 2H) ; 4, 00 (t RMN de 1H) ; 8,31 (s, 1H) ; 2H); 1,32 (t, 3H). C] Preparação de ácido 4-amino-l-[2-cloro-etil]-lH-imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxílico

Adicionaram-se a uma mistura de 50 mg (0,19 mmol) de éster etilico do ácido 4-amino-l-[2-cloro-etil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxilico (passo B do exemplo 10) com 1,1 mL de uma solução aquosa 2 M de NaOH, 0,3 mL de THF e 0,8 mL de MeOH. Agitou-se a mistura durante 2,5 horas à temperatura ambiente. Evaporaram-se o MeOH e o THF sob pressão reduzida e ajustou-se o pH da mistura remanescente a pH=2 com solução aquosa 2 N de HC1. O produto precipitou e foi isolado por filtração. Adicionou-se tolueno ao produto e evaporou-se o solvente. Repetiu-se este processo três vezes. Por último isolaram-se 24 mg (53 %) do produto pretendido sob a forma de um sólido cinzento-claro. MS (ESI) : 241,0 ( [MH] +) . RMN de XH (DMSO-d6) : 8,35 (s, 1H) ; 8,14 (s, 1H) ; 7,06 (s, lg, 2H) ; 4,93 (m, 2H) ; 3,89 (m, 1H) . D] Preparação de piridin-4-ilamida do ácido 4-amino-1-[2-cloro-etil]-lH-imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxilico

Agitou-se uma mistura de 48 mg (0,20 mmol) do produto do passo C do exemplo 10, 114 mg (0,30 mmol) de HATU, 61 mg (0,65 mmol) de 4-amino-piridina e 0,051 mL (0,30 mmol) de DIPEA em 15 mL de DMF de um dia para o outro a 30°C. Purificou-se directamente o produto por HPLC preparativo para se obterem 47 mg (74 %) do produto pretendido sob a forma de um sólido branco. RMN de ΧΗ (DMSO-de) : 10,79 (s, 1H) ; 8,43 (d, 2H) ; 8,29 (s, 1H) ; 8,17 (s, 1H) ; 7,69 (d, 2H) ; 6,94 (s, 2H) ; 4,77 (t, 2H); 3,86 (t, 2H). E] Preparação de composto com a fórmula I em que Rl é [2-[4-amino-7-(piridin-4-il-aminocarbonil)- imidazo[4,5-c]piridin-l-il]-etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam vim grupo C=0 e R4 é metilo (1-10) .

Preparou-se o composto em titulo I—10 a partir de piridin-4-ilamida do ácido 4-amino-l-[2-cloro-etil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxilico (passo D do exemplo 10) e de IX-4, e seguindo o processo descrito no passo D do exemplo 4. Purificou-se este produto por HPLC preparativa (sistema Cp) para se obter um sólido branco. MS: massa precisa (ESI): 1084,5637 Da.

Exemplo 11 89

Preparação de I—11, composto com a fórmula I em que RI é [2-[4-amino-7-(3,5-dicloro-piridin-4-il-amino-carbonil)-imidazo[4,5-c]piridin-l-il]-etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. A] Preparação de composto com a fórmula I na qual RI é [2-[4-amino-7-etoxicarbonil-imidazo[4,5-c]piridin-l-il] -etil] tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam vim grupo C=0 e R4 é metilo.

Adicionou-se a uma solução de 1,6 g (1,9 mmol) do produto do passo C do exemplo 4 (IX-4) e 0,5 mL de água em 40 mL de DMF, 765 mg (3,8 mmol) de tributilf osf ina, e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 3 horas. Adicionaram-se 400 mg (1,39 mmol) do produto do passo B do exemplo 10 e 290 mg (1,9 mmol) de DBU e agitou-se a mistura durante 20 horas a 20°C. Em seguida adicionaram-se 60 mL de água à mistura reaccional e extraiu-se a mistura com 3 x 80 mL de acetato de etilo. Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com água, secou-se sobre Na2S04 e removeu-se o solvente in vacuo. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna sobre silicagel (DCM/MeOH a 40/1, depois a 20/1, e depois a 10/1) para se obterem 895 mg (46 %) do produto pretendido sob a forma de um pó amarelo-claro . MS (ESI): 518,8 ([M+2H]++/2) 90 B] Preparação de composto com a fórmula I na qual Rl é [2-[4-amino-7-carboxil-imidazo[4,5-c]piridin-l-il]-etiljtio, R2 e R3 tomados em conjunto formam vim grupo C=0 e R4 é metilo.

Agitou-se uma mistura de 300 mg (0,3 mmol) do produto do passo A do exemplo 11, 3 mL de uma solução

aquosa de LiOH (2 N) , 8 mL de THF e 6 mL de MeOH a 18°C durante 20 horas. Concentrou-se a mistura reaccional sob pressão reduzida e extraiu-se o residuo com 3 x 50 mL de DCM. Lavou-se o conjunto das fases orgânicas com salmoura, secou-se sobre Na2SC>4 e evaporou-se o solvente in vácuo para se obterem 0,172 g do produto em bruto. Purificou-se o produto em bruto por HPLC preparativa (Coluna: Purospher Star RP-18e, 5 pm, 125x25 mm; caudal: 25 mL/minuto; detecção: 254 nm; fase móvel A: água + 0,1 % de ácido fórmico; fase móvel B: acetonitrilo; gradiente: linear de 10 % a 40 % de acetonitrilo ao longo de 8 minutos; depois 100 % de acetonitrilo) para se obter um sólido branco. MS (ESI): 504,8 ([M+2H]++/2)

Periodo de Retenção (sistema Ba): 12,9 minutos. C] Preparação de composto com a fórmula I na qual

Rl é [2-[4-amino-7-(3,5-dicloro-piridin-4-il-amino- carbonil)-imidazo[4,5-c]piridin-l-il]-etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo (I-11) . 91

Suspenderam-se 153 mg (4,46 mmol) de NaH (a 60 % em óleo) em 1 mL de DMF e adicionou-se uma solução de 873 mg (5,3 mmol) de 4-amino-3,5-dicloropiridina em 2 mL de DMF. Agitou-se a suspensão a 25°C durante 3 horas. Em paralelo, agitou-se uma solução de 260 mg (0,26 mmol) do produto do passo B do exemplo 11, 153 mg (0,8 mmol) de EDC e 78 mg (0,58 mmol) de HOBt em 5 mL de DMF durante 1 hora a 25°C. Adicionou-se então esta solução a entre -5 e 0°C à solução de 4-amino-3,5-dicloropiridina preparada acima. Agitou-se a mistura a esta temperatura durante 10 minutos e terminou-se a reacção adicionando 1 mL de água à mistura, e ajustando o pH da mistura a pH 7-8 com solução aquosa de HC1 2 N. Concentrou-se a mistura e purificou-se o resíduo por HPLC preparativa (Coluna: Purospher Star RP-18e, 5 pm, 125x25 mm; caudal: 25 mL/minuto; detecção: 254 nm; fase móvel A: água+ 0,01 % de ácido fórmico; fase móvel B: acetonitrilo; gradiente: linear desde 20 % a 60 % de acetonitrilo ao longo de 10 minutos; 5 minutos a 60 % de acetonitrilo) para se obterem 210 mg (70 %) do produto pretendido sob a forma de um sólido branco. RMN de (DMSO -d6) : 10,68 (s, 1H) ; 8,70 (t, 2H) ; 8,31 (s, 1H) ; 8,24 (s, 1H) ; 6, 97 (t, 2H) ; 5, 15 (m, 1H) ; 4,85 (m, 1H) ; 4,72 (m, 1H) ; 4, 62 (m, 1H) ; 4,40 (m, 3H) ; 4,00 (m, 1H) ; 3, 66 (m, 1H) ; 3,58 (t, 2H) ; 2,40 (s, 6H) ; 1,80 (m, 2H) ; 1, 65 (m, 2H) ; 1,51 (m, 3H) ; 1,40 (s, 3H) ; 1,29 (s, 3H) ; 1,05 -1,20 (m, 16H) ; 1,00 (d, 3H) ; 0, 93 (d, 3H) ; 0,73 (t, 3H) . 92 MS: massa precisa (ESI): 1152,4906 Da.

Exemplo 12

Preparação de 1-12, composto com a fórmula I na qual RI é [2-[6-amino-2-[[(3-piridil)metil]amino]-purin-9-il]etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. A] Preparação de 9-(2-cloroetil)-2,6-diamino- purina

Suspenderam-se 10 g (66,6 mmol) de 2,6-diaminopurina sob árgon em 300 mL de DMF e adicionaram-se 21,6 g (156,5 mmol) de carbonato de potássio e 24 mL de 1-bromo-2-cloroetano. Agitou-se a mistura durante 64 horas à temperatura ambiente. Filtrou-se a suspensão amarelo-clara e lavaram-se os sólidos com 30 mL de DMF e subsequentemente triturou-se com 100 mL de água durante 30 minutos. Filtrou-se a mistura e lavaram-se o sólidos com 50 mL de água e secou-se in vácuo para se obterem 10,15 g (72 %) do produto pretendido sob a forma de um sólido branco. RMN de ΧΗ (DMSO-de) : 7,72 (s, 1H) ; 6,67 (s, lg, 2H) ; 5,81 (s, lg, 2H); 4,30 (t, 2H); 3,99 (t, 2H). B] Preparação de 6-amino-9-(2-cloroetil)-2-[(3-piridilmetil)amino]-purina 93

Dissolveram-se 100 mg (0,47 mmol) de 9 — (2 — cloroetil)-2,6-diamino-purina (passo A do exemplo 12) em 10 mL de MeOH e adicionaram-se 3 g de peneiros moleculares (4Ã) , 0, 044 mL (0,47 mmol) de 3-piridinacarboxaldeido e 0,135 mL (2,35 mmol) de ácido acético. Agitou-se a mistura durante 2 horas à temperatura ambiente. Adicionaram-se 23,6 mg (0,38 mmol) de cianoborohidreto de sódio e continuou-se a agitação durante 4 horas. Adicionou-se mais 0,044 mL (0,47 mmol) de 3-piridinacarboxaldeido e 72 mg de cianoborohidreto de sódio em três porções ao longo de três dias à temperatura ambiente. Evaporou-se o solvente e retomou-se o residuo em 50 mL de acetato de etilo. Lavou-se a fase orgânica com solução aquosa saturada de carbonato de sódio e com salmoura, secou-se sobre Na2S04 e evaporou-se o solvente in vácuo para se obterem 0,254 g do produto em bruto sob a forma de um óleo amarelo. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida sobre silicagel (DCM/MeOH desde 99,5/0,5 -► 80:20) para se obterem 88 mg do produto pretendido sob a forma de um sólido branco. RMN de ΧΗ (DMSO-d6) : 8,57 (s, 1H) ; 8,40 (m, 1H) ; 7,74 (s, lg, 1H) ; 7,73 (s, 1H); 7,30 (m, 1H); 6, 99 (m, 1H); 6, 75 (s, lg, 2H) ; 4,45 (d, 2H) ; 4,30 (t, 2H); 3, 95 (t, 2H). C] Preparação do composto com a fórmula I na qual Rl é [2-[6-amino-2-[[(3-piridil)metil]amino]-purin-9-il]etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo (1-12). 94

Preparou-se o composto em título, 1-12, a partir de 6-amino-9-(2-cloroetil)-2-[(3-piridylmetil)amino]-purina (produto do passo B do exemplo 12) e de IX-1, seguindo os processos descritos nos passos 0-P do exemplo 1. Purificou-se o produto em bruto por HPLC (Sistema Ap) para se obter o produto pretendido sob a forma de um sólido branco. MS: massa precisa (ESI): 1071,5826 Da.

Exemplo 13

Preparação de 1-13, composto com a fórmula I na qual RI é [2-[6-amino-2-[[(4-piridyl)metil]amino]-purin-9-il]etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo. A] Preparação de 6-amino-9-(2-cloroetil)-2-[(4-piridilmetil)amino]-purina

Preparou-se a 6-amino-9-(2-cloroetil)-2-[(4-piridilmetil)amino]-purina a partir de 4- piridinacarboxaldeído e de 9-(2-cloroetil)-2,6-diamino-purina seguindo o processo descrito no passo B do exemplo 12. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia rápida (DCM/MeOH desde 99,5/0,5 ->· 80:20) para se obter o produto pretendido sob a forma de um sólido branco. 95 RMN de (DMSO-d6) : 8,44 (d, 2H) ; 7,73 (s, 1H) ; 7, 31 (d, 2H) ; 7,01 (t, 1H); 6,75 (s, lg, 2H); 4,46 (d, 2H); 4, 27 (t, 2H) ; 3, 91 (t, 2H) . B] Preparação do composto com a fórmula I na qual Rl é [2-[6-amino-2-[[(4-piridil)metil]amino]-purin-9-il]etil]tio, R2 e R3 tomados em conjunto formam um grupo C=0 e R4 é metilo (1-13).

Preparou-se o composto em título 1-12 a partir de 6-amino-9-(2-cloroetil)-2-[(4-piridilmetil)amino]-purina (produto do passo A do exemplo 13) e de IX-1 seguindo os processos descritos nos passos 0-P do exemplo 1. Purificou-se o produto em bruto por HPLC (Sistema Ap) para se obter o produto pretendido sob a forma de um sólido branco. MS: massa precisa (ESI): 1071,5826 Da. B. Actividade biológica

Os compostos da invenção manifestam actividades inibidoras substanciais em relação às fosfodiesterases humanas (PDE), em especial em relação à PDE4. Utilizou-se o ensaio seguinte para se determinar a actividade inibidora dos compostos.

Ensaio 96 A PDE4 hidrolisa especificamente o cAMP libertando o produto AMP. Determinou-se a potência da inibição da PDE pelos agentes referidos por um ensaio enzimático in vitro. Este ensaio pode ser obtido comercialmente (ensaio IMAP™ FP da Molecular Devices Corp.) e foi optimizado para a utilização com PDE4 humana. Hidrolisou-se cAMP marcado de modo fluorescente utilizando PDE4 e num segundo passo, levaram-se a cabo medições por polarização da fluorescência (FP) de produto marcado ligado a um parceiro de ligação de grande dimensão.

Purificou-se parcialmente PDE4 a partir de células monociticas humanas não diferenciadas (U-937) de acordo com Thorpy et al. 1992 (J. Pharmacol. Exp. Ther. 263: 1195). As preparações finais eram especificas para cAMP e não hidrolisavam cGMP a valores superiores aos do limite de detecção do ensaio. Além disto, as preparações de PDE4 foram validadas por estuos de inibição com inibidores específicos de PDE4 e não específicos de PDE.

Prepararam-se soluções de origem dos compostos em teste em DMSO e diluíram-se em tampão de ensaio (Tris-HCl 10 mM, MgCl2 10 mM, com 0,1 % de BSA e 0,05 % de NaN3, pH 7,2) às concentrações pretendidas. As soluções utilizadas no ensaio continham o composto em teste num tampão do ensaio, com 2 % de DMSO.

Misturaram-se 10 yL de substrato (a uma concentração recomendada pelo fabricante) com 5 pL de uma 97 diluição apropriada de PDE e com 5 pL de solução do composto em teste. A titulo de reacções de controlo utilizaram-se 5 pL de tampão reaccional contendo 2 % de DMSO. As concentrações finais em DMSO no ensaio eram de 0,5 %, o que não alterava significativamente a actividade de PDE. Depois de uma incubação durante 90 minutos à temperatura ambiente, adicionaram-se 60 pL do reagente de ligação tal como o especificava o fabricante. Deixou-se a ligação prosseguir durante 30 minutos e mediu-se a polarização da fluorescência. Observou-se uma inibição de PDE dependente da dose ensaiando diluições em série dos compostos em teste, em duplicados. Determinaram-se os valores de IC50 a partir das actividades medidas, por ajuste de curvas.

Resultados ji Exemplo IC50 (PDE4) [pM] | \ 1* 13,4 2 3, 9 ? 3,4 I - 0,28 : 0,85 1 ii 6 0,37 J j 7 ί;χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ· 7,6 Ι 8 _ 4,7 | ii 9* 24,2 χψχψχ·χ·χ·χ·χ·χψχψχψχνχ·χ·χ·χ·χ·χ:χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χ·χψχψχ·χ·χ·χ·χ·χ·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·χ·χ·χ· χ·χ·χ·Χ:Χ·Χ·Χ 98 98 Exemplo IC50 (PDE4) [μΜ] 10 :1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1 1,0 li*:*:*:*:*:*:*içiçiçi:i:i:i:::i:i:i:i:i:i:i:i:i:i:i:i:i:i:i:;:i:i:;: ::1:1:1:::1:1:1:1:1¾ 11 12 13 η.:.:.:ΐ:ΐ:ΐ:ΐ:ΐ:,:ΐ:ΐ:ΐ:ΐ:ι:;: ΐ: 0,008 ::::::::-::::::::::::-:-:::-::: :1:1:.-. ·1·:·:·:·:: 3, 8 2, 6 |* de comparação A Actividade de inibição de PDE4 que se determinou para compostos desta invenção, tal como os constantes dos exemplos é especialmente surpreendente, porque ο macrólido de base dos compostos exemplificados que tem a seguinte fórmula:

não manifesta nenhuma actividade inibidora de PDE4 até uma concentração de 50 μΜ, no ensaio utilizado nos exemplos e, mesmo quando o substituinte ligado ao referido macrólido de base num dos compostos da invenção presente, quando utilizado sob a sua forma livre, evidencia uma determinada actividade inibidora de PDE4 no ensaio referido, tal como, por exemplo, o composto que se segue 99

cujo valor de IC5o (PDE4) é de 3,6 μΜ, a actividade inibidora de PDE4 para o composto respectivo de acordo com a invenção presente, no qual exactamente estes mesmo compostos estão ligados em conjunto para formar uma molécula com a fórmula (I), denota em geral uma actividade inibidora de PDE4 que é muito melhor do que a actividade correspondente das suas componentes parciais, bem como muito melhor do que a actividade que poderia ser esperada razoavelmente para uma mistura das referidas componentes parciais. No caso presente, por exemplo, observa-se um valor de IC50 (PDE4) de 0,008 μΜ para o composto do Exemplo 11 que apresenta a fórmula:

que é apenas cerca de quinhentas vezes menor do que o valor de IC50 (PDE4) para o substituinte macrólido sob forma livre.

Lisboa, 1 de Agosto de 2013.

Claims

1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto macrólido com a fórmula I:

no qual RI seja um resíduo -Y-X-Q; Y seja S, SO ou S02; X seja uma ligação ou um grupo linear constituído por átomos de hidrogénio e até 9 átomos seleccionados de entre C, N, 0 e/ou S, dos quais até 2 átomos possam ser N e um átomo possa ser 0 ou S, um átomo de carbono passa estar sob a forma de um grupo CO e o átomo de enxofre possa estar sob a forma de um grupo S02, e dois átomos de C adjacentes possam estar presentes sob a forma de CH=CH- ou de -C=c-, grupo X este que seja não substituído, ou seja substituído com - COO-W ou -CONH-W; 2 Q seja um resíduo -V-A1-L-A2-W ou, quando X não representar uma ligação, também possa ser -NR6R7; V seja um grupo divalente aromático ou heterocíclico; W seja arilo ou heterociclilo; Al, A2 sejam independentemente um do outro um grupo alquileno C1-C4 ou estejam ausentes; L seja -0-, -S-, -S02-, -NH-, -C0-, -(C0)0-, -0(00-, -(CO)NH-, -NH(CO)-, -(S02)NH-, -HN(S02)-, -HN(CO)NH-, -0(C0)NH-, -NH (CO) 0- ; e R2 seja hidrogénio; R3 seja 0R4 ou R2, R3 tomados em conjunto, formem um grupo C=0; R4 seja, independentemente em cada sua ocorrência na fórmula I, hidrogénio ou um grupo alifático saturado ou insaturado com 1 a 6 átomos de carbono; 3 R6, R7 sejam seleccionados independentemente de entre arilo; aralquilo; heterociclilo e heterocicloalquilo; e um de entre R6 e R7 possa também ser um grupo -L-W; e * indica um centro quiral que esteja sob a forma (R) ou sob a forma (S); excepto no que toca ao composto com a fórmula I, para o qual R2, R3 tomados em conjunto, formem um grupo C=0, R4 seja metilo e

NH,

N N H s RI seja

2. Um composto de acordo com a reivindicação 1, no qual Y seja SO2 ou, preferivelmente, S.

3. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou a 2, no qual 4 R3 seja hidroxilo ou aliloxilo, ou, preferivelmente, R2, R3 tomados em conjunto formem um grupo C=0.

4. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, no qual R4 em especial na posição 6 do anel macrólido, seja hidrogénio ou, preferivelmente, metilo.

5. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, no qual Q seja um resíduo -V-A1-L-A2-W.

6. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, no qual Q seja -NR6R7.

7. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, no qual W seja heterociclilo.

8. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, no qual 5 V seja um grupo divalente com a fórmula 5

9. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, em especial de acordo com a reivindicação 5, no qual V seja um grupo divalente com a fórmula 7

«9 na qual

um anel fenileno ou um anel heterocicloalifático saturado ou insaturado ou heteroaromático, divalente, com x membros, contendo entre 2 e (x-1) átomos de carbono, em que x seja de 5 a 8, preferivelmente 5 ou 6, e entre 1 e 3 heteroátomos seleccionados de entre o conjunto constituído por enxofre, e preferivelmente oxigénio e azoto, R8 e R9 sejam seleccionados independentemente de entre o conjunto constituído por hidrogénio, alquilo Ci-C4, alcoxilo Ci-C4, cicloalcoxilo C3-C7, cicloalquil C3-C7-alcoxilo Ci-C4, halogéneo, grupos alquilo Ci~C4 substituídos com halogéneo, ciano, nitro, amino, alquilamino Ci-C4, dialquil (Ci — C4)amino, alquiltio Ci~C4, mercapto, hidroxilo, carbamoilo, um grupo carboxilo, um grupo oxo; ou arilo ou heterociclilo, que podem ser não substituídos ou substituídos com um ou mais dos substituintes identificados acima, para além de arilo ou heterociclilo, ou, quando ambos os substituintes R8 e R9 estiverem localizados em átomos de carbono adjacentes do anel, 1 6

possam tomar-se estes dois substituintes em conjunto com os referidos átomos de carbono adjacentes para formar um anel com 5 ou 6 membros, aromático ou um anel com x membros, heterocicloalifático saturado ou insaturado, ou um anel heteroaromático contendo entre 2 e (x-1) átomos de carbono em que x seja de 5 a 8, preferivelmente 5 ou 6, e entre 1 e 3 heteroátomos seleccionados de entre o conjunto constituído por enxofre e preferivelmente, oxigénio e azoto, em que V possa ter ao todo um a quatro substituintes do tipo dos definidos para R8 e para R9, e as valências livres possam estar localizadas quer num, quer em ambos os anéis do grupo V.

10. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, no qual W seja um grupo com a fórmula

no qual

R11 um anel insaturado, seja um anel fenilo ou heterocicloalifático com x membros, saturado ou ou um anel heteroaromático contendo entre 2 e (x-1) átomos de carbono e sendo x de 5 a 8, preferivelmente 5 ou 6, e entre 1 e 3 heteroátomos seleccionados de entre o conjunto constituído por enxofre e preferivelmente, oxigénio e azoto, RIO e Rll sejam seleccionados independentemente de entre o conjunto constituído por hidrogénio, alquilo C1-C4, alcoxilo C1-C4, cicloalquiloxilo C3-C7, cicloalquil C3-C7-alcoxilo C1-C4, halogéneo, grupos alquilo C1-C4 substituídos com halogéneo, ciano, nitro, amino, alquilamino C1-C4, dialquil (C1-C4) amino, alquiltio C1-C4, mercapto, hidroxilo, carbamoílo, um grupo carboxilo, e um grupo oxo; ou quando ambos os substituintes RIO e Rll estejam localizados em átomos de carbono adjacentes do anel,

podem tomar-se estes dois substituintes em conjunto com os referidos átomos de carbono adjacentes para formar um anel com 5 ou 6 membros, aromático ou um anel com x membros, heterocicloalifático saturado ou insaturado, ou um anel heteroaromático contendo entre 2 e (x-1) átomos de carbono em que x seja de 5 a 8, preferivelmente 5 ou 6, e entre 1 e 3 heteroátomos seleccionados de entre o conjunto constituído por enxofre e preferivelmente, oxigénio e azoto, em que W possa ter ao todo um a quatro substituintes do tipo dos definidos para RIO e para Rll, e as valências livres possam estar localizadas quer num, quer em ambos os anéis do grupo W. 9

11. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, no qual W seja um grupo com uma das fórmulas

12. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, em especial com a reivindicação 5, no qual Al, A2 estejam ausentes independentemente um do outro ou sejam um grupo alquileno C1-C2; e L seja -NH-, -(CO)NH- ou -NH(CO)-

13. Um composto de acordo com as reivindicações 9, 11 ou 12, no qual Al, A2 independentemente um do outro, estejam ausentes ou representem grupos alquileno Ci-C2; L seja -NH-, -(CO)NH- ou -NH(CO)-; seja um grupo divalente com a fórmula V

alquilo(Ci-C2)

e W seja um grupo com a fórmula

uma das com a

14. Um composto de acordo com qualquer reivindicações 1 a 13, em especial de acordo reivindicação 13, no qual Y seja -S- e X seja -CH2“CH2-·

15. Um composto de acordo com a reivindicação 6, no qual -NR6R7 seja um grupo com uma das seguintes fórmulas 11

16 em que RI seja tal como definido na reivindicação 1 ou um grupo com a fórmula -S-Rp3 em que Rp3 seja um grupo protector de enxofre, e Rpi e Rp2 e R4 tenham os significados acima, c) fazer-se reagir o composto referido com a fórmula VI num solvente aprótico com uma base de metal alcalino para se formar um composto com a fórmula VII

na qual RI e Rpi e Rp2 e R4 tenham os significados acima, e removerem-se os grupos protectores de hidroxilo Rpi e Rp2 em simultâneo ou consecutivamente para se formar o composto com a fórmula I, no qual R2 e R3 tomados em conjunto formem um grupo C=0, e transformar-se o composto referido, caso tal se pretenda, de um modo conhecido por si próprio num composto com a fórmula I no qual R2 seja hidrogénio e R3 seja seleccionado de entre hidroxilo ou um grupo -0-(alifático) , representando o referido grupo alifático um 17 grupo alifático saturado ou insaturado com 1 a 6 átomos de carbono; com a limitação de que no caso em que RI seja S-Rp3, o composto com a fórmula VII seja transformado na presença de um peneiro molecular, no derivado dissulfureto com a fórmula IX antes de se removerem os grupos protectores de hidroxilo Rpi e Rp2

em que Rp4 seja alquilo Ci-C4, em especial metilo, ou 3-nitro-2-piridinilo, composto este que se trata com um agente redutor, em especial uma trialquilfosfina ou uma triarilfosfina, num solvente, em especial acetona aquosa, DMF, dioxano ou THF, para se obter um composto com a fórmula X 18

na qual Rpi e Rp2 tenham os significados acima, composto este que se faz em seguida reagir com um composto com a fórmula Q-X-Lg, na qual Q e X sejam tal como se definiram na reivindicação 1 e Lg seja um grupo de sarda ou, quando X representar um grupo carbonilo ou sulfonilo, um grupo vinilo, para se obter um composto com a fórmula VII na qual RI seja tal como se definiu na reivindicação 1.

16. 0 composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, em especial as reivindicações 9, 11, 12, 13, 14 ou 15, no qual R2, R3 tomados em conjunto formem um grupo C=0; e R4 na posição 6 do anel macrólido seja metilo.

17. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, com a fórmula 12

18. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, com a fórmula

19. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, com a fórmula 13

20. Um medicamento incluindo um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19 e um veiculo aceitável do ponto de vista farmacêutico.

21. Um medicamento de acordo com a reivindicação 20, para o tratamento de patologias sobretudo por inibição das fosfodiesterases humanas, em especial da fosfodiesterase 4 humana.

22. Um medicamento de acordo com a reivindicação 20 ou a 21 para a prevenção e/ou o tratamento de doenças inflamatórias e/ou alérgicas.

23. Um medicamento de acordo com qualquer uma das reivindicações 20 a 22 para a prevenção e/ou para o tratamento de doença obstrutiva pulmonar crónica (COPD), asma, artrite reumatóide, dermatite atópica, doença inflamatória dos intestinos ou psoriase. 14

24. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 to 19 para utilização em terapia medicinal, em especial para a prevenção ou para o tratamento de doenças inflamatórias e/ou alérqicas.

25. A utilização de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19 para o fabrico de um medicamento para a prevenção e para o tratamento de doenças inflamatórias ou alérqicas.

26. A utilização de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19 para o fabrico de um medicamento para o tratamento de uma doença ou de uma patologia que possa ser melhorada por inibição das fosfodiesterases humanas, em especial da fosfodiesterase 4 humana.

27. Um processo para o fabrico de um composto com a fórmula I de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19, que inclua a) transformar-se um composto macrólido com a fórmula 15

na qual R4 seja tal como se definiu na reivindicação 1, de um modo conhecido por si próprio, num composto com a fórmula IV

na qual Rpi e Rp2 sejam ambos grupos protectores de hidroxilo e R4 seja tal como se definiu acima, b) transformar-se o composto referido com a fórmula IV de um modo conhecido por si próprio num composto com a fórmula VI

28. Um processo para o fabrico de um composto com a fórmula I de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19, no qual RI seja um residuo -Y-X-Q, em que X e Q tenham os mesmos significados que na reivindicação 1 e Y seja S; incluindo a) transformar-se um composto macrólido com a fórmula 19

e R4 seja tal como se definiu na reivindicação 1, de um modo conhecido por si próprio, num composto com a fórmula IV

na qual Rpi Rp2 sejam ambos grupos protectores de hidroxilo e R4 seja tal como se definiu acima, bl) transformar-se o composto referido com a fórmula IV na presença de um derivado activado de ácido cloroacético, em especial de anidrido de ácido di(cloroacético), de um modo conhecido por si próprio, num composto com a fórmula V 20

na qual Rpi e Rp2 e R4 tenham os significados acima; b2) fazer-se ainda reagir o composto referido com a fórmula V com um composto com a fórmula MS-X-Q, na qual M represente um átomo de um metal alcalino, para se formar um composto com a fórmula VI

na qual RI seja -S-X-Q, e X, Q, Rpi e Rp2 e R4 tenham os significados acima, c) fazer-se reagir o referido composto com a fórmula VI num solvente aprótico com uma base de 21 um metal alcalino para se formar um composto com a fórmula VII

na qual RI e Rpi e Rp2 e R4 tenham os significados acima, e removerem-se os grupos protectores de hidroxilo Rpi e Rp2 em simultâneo ou consecutivamente para se formar o composto com a fórmula I, na qual R2 e R3 tomados em conjunto formem um grupo C=0, e transformar-se o composto referido, caso tal se pretenda, de um modo conhecido por si próprio, num composto com a fórmula I na qual R2 seja hidrogénio e R3 seja seleccionado de entre hidroxilo e um grupo -0-(alifático), representando o referido grupo alifático um grupo alifático saturado ou insaturado com 1 a 6 átomos de carbono. Lisboa, 1 de Agosto de 2013.