PT1773365E - Composição compreendendo substâncias naturais que possuem propriedades curativas, repelentes e biocidas para o tratamento e a cura de feridas externas - Google Patents

Description

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Descrição "Composição compreendendo substâncias naturais que possuem propriedades curativas, repelentes e biocidas para o tratamento e a cura de feridas externas" A presente invenção diz respeito ao campo dos dispositivos médicos e em particular a uma composição que compreende substâncias naturais de origem vegetal, que pode ser utilizada para o tratamento e a cura de lesões externas, de qualquer natureza, que combina ao mesmo tempo propriedades curativas, anti-sépticas, anti-bacterianas, repelentes em relação a diptera geradora de miase e diptera não geradora de miase, anti-inflamatórias e de alívio da dor. - }

Como é bem conhecido do estado da técnica protocolos habituais para a terapia de feridas externas na medicina humana e na medicina veterinária, incluem os passos de curettage (remoção de.partes moles em isquémia, necróticas ou degenerativas, ou supurativas) seguidas por desinfecção com desinfectantes contendo ou iodo ou cloretos de benazachil ou compostos baseados no peróxido de hidrogénio, estes desinfectantes danificam o .tecido de forma variável, mas são considerados indispensáveis para remover, ou matar espécies de bactérias que infectam as lesões.

Num outro passo é aplicada uma terapia antibiótica, localmente, ou sistemicamente na forma de formulações. em pó, creme, liquidas, ou de spray para evitar e/ ou contrastar posterior infecção bacteriana, mesmo que danifique parcialmente o tecido e não favoreça a cura. No final, para manter as lesões macias e evitar o endurecimento e desidratação da crosta, especialmente em lesões extensas, ou feridas por queimadura, são aplicadas gazes impregnadas em humefactantes gordurosos baseados na 2 vaselina, ou em óleos de silicone (muito caros). Durante a terapia de manutenção, os remédios mencionados acima são aplicados quando necessário esperando activação espontânea (reparação) dos processos de cura. Em particular, secreções e exudações, mais ou menos copiosas, dependendo da natureza e da extensão da ferida são removidos diariamente seguidas por desinfecção e aplicação dos remédios acima mencionados. Opcionalmente, em condições higiénicas/ ambientais adequadas, as feridas são protegidas por pensos que necessitam ser removidas a intervalos regulares, dependendo da natureza da lesão, para evitar dormência, infecção, ou putrefacção da ferida.

Em más condições higiénicas/ ambientais, i.e. aquelas que estão frequentemente presentes em países em desenvolvimento, ou em medicina veterinária, muitas vezes as feridas não podem ser tratadas adequadamente e permanecem expostas a ataques por moscas geradoras de míase (sarcophagidae, callyphoridae), ou quaisquer outras moscas (muscidae) que podem contribuir para grandes infecções das feridas.

Uma prática zootécnica generalizada, mas ineficiente e perigosa é verter creolina (contendo fenois e alcatrão) nas feridas dos animais para manter as moscas afastadas. Este remédio muito difundido e enraizado na criação animal danifica extremamente o tecido e também é tóxico. Além disso, o efeito repelente contra as moscas não excede a meia hora após o tratamento e necrotiza e destrói os tecidos em processo de cura. Este remédio não pode ser utilizado em lesões muito extensas devido à sua extrema toxicidade por absorção e às suas propriedades de danificação do tecido.

Um outro remédio adoptado no sector zootécnico é a aplicação de vários insecticidas incluindo piretróides naturais e/ ou sintéticos que possuem um efeito larvicida

D em vez de repelente, directamente nas feridas infestadas com vermes ou chagas. A absorção de compostos insecticidas nas superfícies abertas das feridas pode conduzir, em particular no caso de lesões prolongadas e de cura lenta, a uma intoxicação aguda, ou crónica dos animais. Além disso, a utilização arbitrária de insecticidas expõe por um lado os operadores a riscos de intoxicação e por outro lado, aumenta a carga tóxica no meio ambiente, assim como da cadeia de valor acrescentado do sector agro-alimentar se os animais tratados estiverem directamente ou indirectamente destinados à produção de alimentos. Não são conhecidos no estado da técnica nenhuns dispositivos médicos adoptados pela medicina oficial que apresentem propriedades curativas reconhecidas e/ ou provadas.

Na medicina veterinária, as feridas externas (lesões) representam um problema muito difícil de gerir, especialmente no período em que as moscas se encontram activas, e no caso de animais trabalhadores de grande porte como mulas, cavalos e burros e também no caso de animais de interesse zootécnico (bovinos, ovinos etc...) ou animais de estimação tanto de grande, como de pequena dimensão.

Mesmo nos seres humanos a gestão de feridas externas (lesões, chagas) representam um problema grave em países em via de desenvolvimento em que as condições ambientais e higiénicas são muito frequentemente completamente inadequadas e o risco de serem expostos a complicações devidas infecções por parasitas, bactérias etc. é muito elevado e frequente especialmente em sujeitos fracos e subnutridos. A presente invenção disponibiliza uma composição compreendendo óleo de neem e extracto oleoso de hipericão (Hypericum perforatum) em percentagens variáveis entre 10 e 50%, de acordo com a necessidade de obter 5 efeitos 4 prevalecentes diferentes que pertencem a componentes individuais diferentes.

Outras caracteristicas da presente invenção são descritas na descrição detalhada seguinte da invenção e nas figuras em anexo, em que:

As figuras IA e 1B mostram o aspecto de uma ferida de mordedura num cão Maremmano no primeiro dia de tratamento (Figura A) e após 23 dias de tratamento (Figura 1B).

As figuras 2A e 2B mostram o aspecto de uma lesão no prepúcio de um carneiro colonizado por vermes de Wophartia magnifica no primeiro dia de tratamento (Figura 2A) e após 10 dias de tratamento (Figura 2B).

As Figuras 3A e 3B mostram um casco de ovelha infestado com vermes de Wophartia magnifica no .primeiro dia do tratamento (Figura 3A) e após 10 dias de tratamento (Figura 3 B).

As Figuras 4A e 4B mostram o aspecto de uma ferida traumática de esfolamento na parte superior da perna direita do cavalo 20 dias após o acontecimento traumático (Figura 4A) e após 3 meses de tratamento com a composição objecto da presente invenção (Figure 4B).

As Figuras 5A e 5B apresentam um ouriço cacheiro com feridas laceradas e com uma contusão no primeiro dia de tratamento (Figura 5A)' e após 1 mês de tratamento.

As figuras 6A e 6B mostram uma lesão purulenta devido à Corynebacterium pseudotuberculosis na alpaca no primeiro dia do tratamento (Figura 6A) e 1 mês após o tratamento (Figura 6B) . A Figura 7 apresenta o efeito repelente de diferentes componentes da composição contra moscas fêmeas de Callyphora na maturidade prontas a· desovar. 0 controlo é carne imersa em água.

I 5 A Figura 8 ilustra os efeitos biocidas dos diferentes componentes da composição contra o desenvolvimento das larvas da Callyphora esp. A tabela na Figura 9 ilustra os resultados da experimentação clinica efectuada em cães. (Na primeira coluna o caso individual é identificado pela lesão, ou pelo nome do animal, na segunda coluna é sumarizado o tipo de lesão, na terceira coluna é indicado o tempo, na quarta coluna é indicado, quando a terapia é iniciada, na quinta coluna é indicado· se uma terapia sistémica é administrada , na sexta coluna é indicada a terapia local utilizada e na última coluna são indicados os dias de inflamação). A tabela da figura 10 apresenta os resultados da experimentação clinica efectuadas na alpaca, cabras, ovelhas bovinos e porcos espinhos. A tabela da figura 11 apresenta os resultados da experimentação clinica efectuada em cavalos. A presente invenção revela uma terapia completa para lesões externas (feridas) que não necessita de quaisquer meios terapêuticos auxiliares i.e. antibióticos, desinfectantes, humidificadores, meios protectores etc. O dito dispositivo médico pode ser utilizado em todas as circunstâncias, especialmente naquelas em que é impossível hospitalizar os doentes em condições protectoras, e em todos aqueles casos de processos de cura alterados devido a doenças metabólicas ou doenças crónicas que provocam invalidez. O problema técnico é resolvido disponibilizando uma composição compreendendo os seguintes compostos activos: óleo de neem que possui propriedades curativas, repelentes, anti-sépticas e anti-inflamatórias e o extracto oleoso de 6 hipericão que possui propriedades curativas, lenitivas e anti-sépticas, ou antibióticas. A patente de invenção N.US006113907A revela estudos clinicos do hipericão na depressão suave a moderada, actividade anti-viral, efeitos curativos de feridas (nos quais são descritas actividades anti-bacterianas) e efeitos mistos. A patente de invenção N°US00621950A descreve um unguento incluindo entre outros extractos de plantas, extractos de neem que são utilizados devido às suas propriedades curativas naturais para pele com fissuras.

Na patente de invenção N° KR2003002004 é revelada uma composição cosmética contendo óleo de neem anti-microbiano. A patente de invenção N° WO 02/22147 descreve uma combinação anti-bacteriana que compreende extractos de planta de neem. A patente de invenção N° US006579543 refere que neem pode ser considerado como um dos melhores agentes curativos e desinfectantes para doenças da pele. Descreve que neem pode também ser utilizado como um anti-inflamatório para a dors nas articulações e nos músculos, enquanto que o hipericão trata muitas doenças incluindo cortes, arranhões, nódoas negras, queimaduras menores, ciática, ferimentos nervosos, inflamações, úlceras, .mordeduras venenosas de répteis, doenças dos rins e pulmões, reacções alérgicas, ansiedade e depressão. O óleo de neem é obtido através de compressão assistida a frio/ quente, ou através de extracção por solventes a partir das sementes maduras da árvore de neem (Azadirachta índica (A Juss.)). O óleo obtido é monitorizado, quanto à ausência de > micotoxinas (aflatoxinas). O extracto oleoso de hipericão (Hypericum perforatum) é obtido através de um processo de maceração das coroas 7 floridas de hipericão de pelo menos três a seis semanas ao sol do óleo extraído da planta contido em recipientes de vidro transparente. As coroas floridas têm que ser colhidas no momento de maturação máximo. Após o processo de maturação se encontrar completo o extracto oleoso toma a coloração típica vermelho rubi. Posteriormente o extracto oleoso é filtrado e armazenado em recipientes de vidro escuro para evitar processos de degradação oxidativos devido à exposição à luz natural ou aos raios ultravioletas. Este processo de preparação particular do extracto oleoso de hipericão garante a sua eficácia.

Numa outra concretização da presente invenção, a azadirachtin A (triterpenoide da classe limonoide que é classificado como pertencente à IV classe de toxicidade, tanto pela EPA (EUA) e pela EEA (EU) i.e. não nociva à saúde ou ao meio ambiente) é adicionado para aumentar o efeito biocida.

Opcionalmente a azadirachtin A pode ser adicionada para aumentar o efeito biocida. A azadirachtin A possui propriedades insecticidas de inibição da regulação do crescimento (GRI - do inglês growth regulating inhibiting) e propriedades anti-alimentar em muitas espécies de insectos prejudiciais. A azadirachtin A é adicionada numa concentração entre 100 ppm e 1000 ppm.

Adicionalmente os óleos essenciais de rosmaninho, basxlico e orégão podem ser adicionados como anti-oxidantes, conservantes e aromáticos.

Pode ser obtida uma formulação sólida adicionando às misturas descritas acima cera natural de abelha. A cera de abelha como agente emulsificante e agente de solidificação é adicionadâ numa percentagem entre 7% e 15%. 8

Azeite, ou outros óleos de sementes comerciais podem ser adicionados para fazer chegar a solução final aos 1000 g-

Os componentes individuais da invenção encontram-se comercialmente disponíveis no mercado.

Como demonstrado nos seguintes testes experimentais a composição, objecto da invenção apresenta em combinação todas as propriedades necessárias para se obter uma cura bem sucedida das feridas i.e. um efeito curativo, efeito repelente, efeito anti-inflamatório, efeito lenitivo e anti-séptico. As propriedades de cada componente são reforçadas em comparação com os componentes individuais das plantas, graças aos efeitos sinergisticos.

Além disso, representa um dispositivo médico único que apresenta propriedades desinfectantes,, anti-inflamatórias, anti-microbianas, lenitivas, analgésicas, etc. em combinação com as propriedades necessárias para obter uma cura eficiente {desencadear, potenciar e acelerar os processos fisiológicos na base da cura das feridas) e um efeito repelente em relação a moscas .geradoras, ou não geradoras de míase. A composição da presente invenção pode ser aplicada diariamente nas superfícies da ferida, como um remédio simples, também em casos de perda de substância médias a graves i.e. feridas profundas, laceradas e contusões (traumatismos) com tecidos subjacentes ou destruídos ou necróticos ou/ em supuração em substituição de todos os medicamentos utilizados actualmente.

Em conclusão, a composição objecto da presente invenção permite resolver a cura de ferimentos exteriores de qualquer tipo de extensão, através da aceleração e reforço do processo de cura, sem a utilização de um tratamento com um antibiótico local, (com a excepção de um tratamento sistémico com antibiótico para ser realizado 9 através das fases iniciais de activação da superfície ferida conferida pelo tecido de granulação) e confere uma protecção adicional contra moscas geradoras ou não geradoras de míase que podem colonizar chagas ou feridas externas tanto em seres humanos como em animais, através do seu efeito repelente.

Os resultados experimentais (Figuras IA, 1B, 2Α, 2B, 3A, 3B, 4A, 4B, 5A, 5B, 6A, 6A, 9, 10, 11} demonstraram uma estimulação imediata da granulação fisiológica com revascularização precoce do tecido danificado, eliminação dos tecidos isquémicos e necróticos, paragem dos exudados de soro) (chamados hemorragia branca no caso de queimaduras extensas), reabsorção de derrames hemáticos e paragem da proliferação de bactérias putreficantes. Após 24-36 horas do primeiro tratamento a ferida apresenta o aspecto da reacção tipicamente positiva do processo de reparação activado. Além disso, a superfície ferida é completamente coberta com tecido de granulação macio, elástico e adequadamente humidificado, as feridas não formam uma crosta dura permanente e o exudado do soro é parado. Além disso devido à humidade adequada, não ocorrem fissuras, ou quebra da crosta. As feridas tratadas com a composição da presente invenção apresentam imediatamente um aspecto suave e elástico das partes danificadas e sem ocorrência de fissuras devido a exudatos de dessecação que é geralmente formado à superfície da ferida em reparação. A medicação diária é facilitada especialmente em espécies muito sensíveis à dor i.e. no ser humano, cavalo etc. como resultado das excelentes propriedades lenitivas e analgésicas da invenção.

Processos de cura de feridas 10 O sarar de feridas é uma sequência complexa de acontecimentos celulares e bioquímicos. É um sistema regenerativo para o restabelecimento da anatomia e funcionalidade dos tecidos feridos. Não é um sistema completamente regenerativo porque a cicatriz final não apresenta a mesma anatomia e função da situação do tecido original. Os instrumentos terapêuticos utilizados na reparação de feridas podem ser tradicionais, naturais, ou altamente tecnológicos. É conhecido no campo científico que um único agente exógeno capaz de mediar eficazmente todos os numerosos aspectos do processo de cura da ferida não se encontra disponível e humidade ominicompreensiva especial para -· a regulação de processos de regulação da cura de feridas não existem. O processo de cura é constituído por 3 fases: A fase inflamatória: dura não mais do que 3 dias, mas é prolongada e exacerbada quando a infecção bacteriana se encontra presente. A fase de granulação: começa imediatamente após o ferimento, mas torna-se evidente após 3 dias depois do ferimento. Representa uma barreira temporária auto-selante até à reepitelização da nova pele se encontrar completa. É inibida ou atrasada por acontecimentos inflamatórios. Apresenta diferentes evoluções no tempo dependendo da espécie. Para a maior parte dos animais e seres humanos dura 15 dias, no cavalo a evolução no tempo é muito lenta (meses) dependendo da extensão, localização e tensão das feridas. Nos cavalos este processo pode também conduzir a um processo patológico denominado de formação queloide. A fase de remodelação: é a parte instável do processo de cura e demora meses óu anos. Começa quando a reepitelização da parte ferida é completa e é responsável pela retracção desfigurante da cicatriz, quando as fases precedentes não se encontram bem reguladas. 11

Efeito Anti-microbiano

Complicações bacterianas (infecção) da ferida ocorrem sempre, de facto o tecido danificado é colonizado imediatamente após o ferimento, especialmente em feridas traumáticas contaminadas com terra, cabelo, fezes, ou provocadas por mordedura.

Foi observado que quando a composição objecto da invenção é aplicada imediatamente após o ferimento, o processo de cura inicia-se sem complicações bacterianas, a fase inflamatória dura os 3 dias fisiológicos após o que o tecido de granulação se torna evidente em todas as superfícies da ferida. Se o tratamento com a composição objecto da invenção se inicia quando já se encontram presentes complicações bacterianas e uma reacção inflamatória excessiva, foi observado regularmente em três dias a esterilização das feridas e a transformação regular da fase inflamatória no processo de granulação, devido aos efeitos anti-bacterianos, anti-inflamatórios e curativos da composição.

Todos estes efeitos foram também observados em feridas muito complicadas com mais de 7 dias de idade (antes do tratamento ser iniciado)', em que a necrose gangrenosa em todas as superfícies da ferida se encontra presente. Após 3 -5 dias do tratamento com a composição objecto da presente invenção, os sinais gerais e locais de infecção (mau cheiro de necrose' das feridas, detritos, febre, toxemia, etc.) desaparecem.

Efeito no tecido inviável

Na presença de tecido inviável, de tecidos necróticos e/ ou infectados, a remoção salina de detritos nos 12 primeiros 2 ou 3 dias encontra-se regularmente associada ao tratamento com a composição objecto da presente invenção. A eliminação salina de detritos remove a fibrina que aprisiona os fragmentos necróticos e desidrata os tecidos necróticos que podem ser removidos.

Geralmente este método .de remoção de detritos não é ainda suficiente para separar a superfície viável dos tecidos necróticos é ligeiramente doloroso e .·. provoca hemorragia na superfície da ferida. A separação completa dos tecidos viáveis e inviáveis tem de ser efectuada pela actividade das células inflamatórias (especialmente os "macrófagos activados") e as células epidérmicas. Estas duas linhagens celulares desempenham um papel muito importante na indução da eliminação espontânea de detritos das feridas. A composição, objecto da presente invenção desempenha provavelmente um papel na recuperação e boa regulação destas células inflamatórias e epidérmicas. Foi observado que o método de eliminação mecânica salina de resíduos não é completamente eficaz para remover todos os detritos. Mas antes de efectuar a eliminação de detritos diária, e tendo tratado as superfícies da ferida com a dita composição no dia anterior é possível remover os detritos antigos num tempo muito curto (um ou dois dias) : Em casos extremos a eliminação cirúrgica de resíduos pode ser pedida. Dentro de 3-5 dias a superfície limpa apresenta um tecido de granulação perfeito e é induzida a segunda fase do processo de tratamento. Os parâmetros fisiológicos dos doentes voltam ao normal. A dor aguda provocada pela infecção e o estado de inflamação desaparece. Uma vez que o aparecimento do tecido de granulação atesta.que a infecção acabou e o processo inflamatório é transformado num processo de boa cura, o efeito anti-bacteriano, anti-inflamatório e de cura da mistura objecto da invenção encontram-se demonstrados. 13

Efeito lenitivo

Foi demonstrado que a composição objecto da presente invenção apresenta um efeito lenitivo, não apenas indirectamente. De facto é capaz de regular adequadamente o processo inflamatório, também quando a dor é provocada pelas fibras nervosas sensoriais feridas (como nas queimaduras) . Os animais que são muito sensíveis à dor, i.e. cavalos podem ser tratados sem serem sedados mesmo na presença de ferimentos graves. Os animais tratados com a dita composição nunca apresentam o comportamento compulsivo de coçar, ou lamber. Testes experimentais confirmam o rápido efeito lenitivo da dita composição especialmente, quando é aplicada em queimaduras.

Efeito anti-hemorráqico e angiogénico A composição objecto da presente invenção apresenta um efeito anti-hemorrágico na superfície da ferida, quando o tecido de granulação é acidentalmente danificado, a hemostase é conseguida em menos do que um minuto após a aplicação.

Além disso; a dita composição apresenta efeitos potentes em processos de neo-angiogénese durante a formação do tecido de granulação, verificou-se que o tecido de granulação apresenta sempre a vascularização certa em qualquer parte da ferida começando nos primeiros passos do processo. A neo-angiogenese é um processo muito importante da segunda fase de cura, é estimulada pela hipóxia do tecido ferido e pela reacção inflamatória. Os vasos recentemente formados têm que suportar o tecido de granulação em proliferação. A integridade e permeabilidade destes novos vasos são reguladas por várias proteínas 14 funcionais secretadas por células inflamatórias e mesenquimais <fibroblastos). Foi demonstrado que a composição objecto da presente invenção possui um efeito potente na função vascular devido à sua capacidade de parar hemorragias (efeitos na integridade dos vasos) e na sua capacidade de controlar o inchamento da superfície da ferida (efeitos na permeabilidade dos vasos) que representa uma das mais importantes complicações em feridas de queimaduras. Após o risco de infecção a permeabilidade exarcebada dos vasos da superfície da ferida (linforreia hemorragia branca), quando afecta uma grande parte do corpo pode provocar a morte dos doentes devido à concentração do sangue (inspissatio sanguinis) e que bloqueiam consequentemente a função renal. É possível obter a paragem da hemorragia branca em não mais do que 3 dias, e doentes queimados mesmo para cima de 50-60%. da superfície corporal sobrevivem. Tendo em vista os efeitos poderosos da dita composição sobre a linforreia deveria ser muito importante efectuar testes em seres humanos queimados.

Poderia ser também interessante testar os efeitos da mistura na fase de retracção da cura da ferida. Isto porque nunca foram observadas cicatrizes desfigurantes também, quando as feridas eram muito graves, enquanto que o resultado de queimaduras são sempre cicatrizes desfigurantes.

Reepitelização

As extremidades da ferida regularmente tratada com a composição objecto da presente invenção mostraram sempre sinais de reepitelização devido a uma migração epitelial rápida e eficaz e transformação do tecido de granulação subjacente em tecido, pálido, maduro e curado, também nos casos em que a extensão da área da ferida era muito grande. 15 A restrição da área da ferida parece linear se a composição for aplicada regularmente e torna-se mais lenta se a mistura não for aplicada. Em cães e cavalos o efeito de um processo bem modelado de maturação do colagénio na área neo reepitelizada da ferida é claramente observável. De facto, enquanto que a parte interior da área danificada está ainda coberta pelo tecido de granulação, as margens reepitelizadas próximo da ferida apresentam sinais de retracção que desaparecem enquanto que o processo de cura da ferida está em curso e desaparece completamente quando o processo de cura acaba. A composição, objecto da presente invenção é capaz de manter a superfície da ferida bem hidratada (propriedade humectante) , uma vez que nunca é coberta com tecido seco, escuro e anelástico designado por "escara" (crosta). A escara é a reacção normal da superfície da ferida ao processo de desidratação (que é 20 vezes superior ao grau de desidratação da pele saudável) . 0 processo de cura tem de ser efectuado sob o grau de desidratação correcto, senão as proteínas funcionais e estruturais presentes no tecido danificado formam uma mistura pegajosa que prende e evita o processo. A superfície desidratada da ferida não é removida pelas células inflamatórias até o processo de cura se encontrar completo. A escara tem de funcionar para manter o nível de hidratação correcto das feridas até ocorrer a reepitelização. Muitas vezes torna-se dura e anelástica e pode sofrer fissuração e remoção traumática que pode provocar hemorragia no tecido de granulação subjacente. A ausência da escara em todos os casos prova que a dita composição cria um ambiente favorável sobre a superfície da ferida evitando a desidratação e os seus efeitos colaterais.

Quando a composição objecto da presente invenção é aplicada, a escara final em feridas muito grandes e graves 16 nunca apresente sinais de retracção ou de fibrose. A pele reconstruída é macia e elástica, quase como a original (fisiologicamente recuperada) e apresenta reconstrução de pigmentação e anexos (pelos, glândulas). Estes efeitos são devidos a sequências perfeitamente sincronizadas dos eventos de cura o que é raro e quase impossível de se conseguir em feridas que não são tratadas com a presente composição.

Efeito repelente

As feridas tratadas não são colonizadas por moscas que geram míase durante um período de 24 h após o tratamento (efeito repelente contra a desova). 0 efeito repelente da composição, objecto da presente invenção tem sido bem documentado in vivo.' A Diptera visita as feridas dos animais durante toda as estações quentes. Muscidae (Musca domestica) alimenta-se dos fluidos corporais, incluindo aqueles secretados pela ferida. Representam um inconveniente real e um potencial vector mecânico de infecção. Quando parte de uma ferida é tratada com a presente composição, nenhumas moscas permanecem na parte tratada, enquanto que a parte tratada é regularmente visitada. 0 efeito dura 6-8 horas. Utilizando a composição objecto da presente invenção o tratamento veterinário da ferida durante o período sazonal torna-se possível.

Algumas Sarecophagide Diptera, conhecidas como moscas que geram míase (Wolphartia magnifica, Lucilia serícata) depositam larvas vivas nas feridas e estas larvas comem o tecido' dos animais afectados. Feridas infectadas que apresentam necrose e gangrena são colonizadas por outras Sarcophagidae Diptera (Sarcofaga emorroidaria) . A míase é um grande problema nas ovelhas após a tosquia, após aplicação das etiquetas nas orelhas e em todos os casos de 17 feridas traumáticas especialmente do casco . A míase é também um problema importante para todos os outros animais feridos durante o período de Verão. Foi tratado um rebanho de ovelhas durante dois Verões utilizando a presente composição obtendo uma redução da incidência dos animais afectados. Em outros dois rebanhos a presente composição foi aplicada em feridas infestadas, quando as lesões foram descobertas. A composição objecto da presente invenção apresenta um efeito potente repelente contra moscas geradoras de míase durante 24 horas. Não foram encontradas novas gerações de larvas de diptera nas feridas, quando a presente composição é aplicada diariamente. As larvas têm que ser removidas mecanicamente, mas dependendo da ferida não é geralmente possivel remover todas as larvas presentes, mas em feridas tratadas não é um problema, porque morrem nesse período (efeitos biocidas da mistura testados in vitro) . 0 processo de cura da ferida apresenta o curso descrito anteriormente. Se uma ferida limpa não for medicada em 24 horas novas gerações de vermes serão sempre' depositadas, de outro modo ir-se-à curar regularmente.

Testes in vitro para efeitos repelentes e biocidas

De modo a ilustrar o efeito repelente e biocida da composição de óleo de neem e extracto oleoso de hipericão foram testados tanto os componentes isolados como a composição objecto da invenção.

Os testes foram efectuados com moscas da Callyphora esp. que são um agente gerador de míase comum no gado, in vitro. Para cada tese testada foram efectuados 5 réplicas.

Foram efectuados os testes seguintes:

Repelência em relação a fêmeas a desovar utilizando pedaços de carne completamente imersos nas substâncias a serem testadas: âgua, óleo de neem, extracto oleoso de 18 hipericão, uma mistura 50/50 de óleo de neem e extracto oleoso hipericão (referido como mistura na figura 7) e utilizando a carne imersa em água como controlo:

Efeito biocida das diferentes substâncias: água, óleo de neem, extracto oleoso de hipericão uma mistura 50/50 de óleo de neem e extracto de óleo de hipericão (referido como mistura na figura 8) no desenvolvimento larvar da Calliphora esp.

Os resultados experimentais apresentados nas figuras 7 e 8 demonstram claramente que ambos os componentes possuem um efeito repelente em relação a fêmeas grávidas de moscas Callyphora, tal como a própria composição. O efeito biocida da presente composição é apenas devido ao componente de óleo de neem.

Experimentação Clinica A experimentação clinica foi efectuada em vários tipos de lesão de diferentes animais: cães (figura 9), alpaca, cabra, ovelha, vaca, ouriço cacheiro (figura 10) e cavalos (figura 11) .

Foi demonstrado que utilizando a composição objecto da presente invenção é possível resolver a cura das feridas externas de qualquer tipo e extensão, através da aceleração e reforço do processo de cura, sem utilizar um tratamento com antibiótico local, (com excepção de um tratamento sistémico com antibiótico para ser efectuado durante as fases iniciais da activação da protecção da superfície ferida dada pelo tecido de granulação) e conferindo simultaneamente uma protecção adicional contra as moscas geradoras de míase que podem colonizar chagas ou feridas externas tanto em seres humanos como em animais, devido ao seu efeito repelente. 19

Os tempos de cur.a estão contidos e/ ou reduzidos aos processos fisiológicos essenciais típicos de cada espécie animal devido à evidente estimulação dos processos de cura e devido ao facto de se evitar outras complicações que se encontram geralmente presentes. Por isso é evidente que especialmente na medicina veterinária aqueles objectos utilizados para trabalhar podem continuar a viver no seu ambiente habitual ·e cumprirem as suas funções se não subsistirem outras condições invalidantes.

Caso especial: cavalos

Foi de grande interesse a experimentação clinica em cavalos apresentada na tabela da figura 11. De facto, um processo bem regulado de cura de ferida em cavalos representa o objectivo mais importante do tratamento equino. Nestas espécies o processo de cura é lento e complicado frequentemente por várias patologias. O mais importante é a formação de queloides.

Queloide é um distúrbio do tecido de granulação devido a uma hiperprolíferação dos fibroblastos. Estas células param a actividade· mitogénica, quando quantidade suficiente de matriz extracelular enche a cratera da ferida. Fibrilhas de colagénio da matriz começam a retrair-se ancorando as extremidades da ferida aos fibroblastos. Quando as fibrilhas de colagénio começam a retrair-se os fibroblastos param de secretar matriz (efeito anti-rrdtogénico) . A maior parte deles sofre apóptose (morte celular sem induzir uma reacção inflamatória) e quiescência (fibroplastos em dormência), enquanto que apenas uma pequena parte sofre transformação em miofibroblastos (que desempenham um papel nas últimas fases da cura da ferida). Vasos capilares recentemente formados são absorvidos e desaparecem em sincronia com os fibroblastos. Os queratinócitos no topo da 20 área curada começam a reepitelizar a área e o processo fica completo: no cavalo os investigadores identificaram duas ordens de problemas responsáveis pela elevada incidência de patologia queloide: 1) estímulos de tensão exagerados nos níveis da parte distai das pernas dos cavalos devido a escassez de massa muscular e gordura hipodérmica e 2) capacidade lenta dos queratinócitos obterem reepitelização da área granulada devido a uma escassez dos sinais responsáveis pelos efeitos anti-mitogénicos nos fibroblastos. Uma vez que os estímulos de tensão exercidos ao nível dos limites da ferida pela pele saudável adjacente perturba os efeitos anti-mitogénicos da retracção da matriz, ferida localizada na parte distai dos membros do cavalo em que a tensão da pele é muito forte sofre formação queloide. Além disso, os efeitos são amplificados pela baixa velocidade da proliferação de queratinócitos que determina niveis demasiado baixos de moduladores derivados de queratinócitos anti-mitogénicos. O resultado é que o fibroblasto não reconhece o efeito anti-mitogénico e continua a proliferar e secretar matriz extra-celular. O tecido de granulação torna-se muito grande, parece uma esponja mole sem apresentar sinais de regressão. É muito frágil, sangra continuamente e pode provocar danos funcionais graves porque pode aprisionar as estruturas anatómicas dentre dele (nervos, tendões, etc.). São muito difíceis de controlar, 0 tempo de cura é anormalmente prolongado, não existe disponível uma terapia eficaz. Geralmente, uma terapia muito agressiva consiste em queimar o tecido exuberante por aplicação do ácido salicílico na superfície queloide, até o seu nível se retrair até ao nível da pele e a reepitelização é efectuada. É uma terapia que exige muito tempo. Utilizando a composição objecto da presente invenção sem qualquer tipo de ligadura (tal como no uso normal da presente composição) numa ferida, na parte 21 distai de um membro do cavalo, na qual se forma o queloide observa-se que a terapia com a presente composição não é capaz de controlar a formação queloide. Se a ligação permanente da ferida for aplicada sem utilizar a dita composição, o queloide continua a crescer, é possível observar algum efeito autolítico sobre a superfície queloide devido a uma hipóxia compressiva, mas não devido à regressão queloide. Quando a terapia com a presente composição, duas vezes ao dia, se encontra associada ao penso permanente das feridas, observa-se uma regressão extraordinária de todas as partes patológicas do queloide.

Após 3 dias de terapia com a mistura o tecido exuberante apresenta uma cor pálida e menos espessura. Após 5 dias o tecido exuberante desapareceu completamente sem sinais de necrose ou presença de detritos. 0 tecido foi absorvido como no caso da apóptose fisiológica. Estas observações são reforçadas pelo efeito hemorrágico que se observa na altura da remoção do penso que não dura mais do que dois minutos. 0 sangramento diz respeito à superfície completa da ferida, onde o queloide se encontra presente. A superfície da ferida apresenta um tecido de granulação normal, as extremidades da ferida apresentam um processo de cura normal (reepitelização). Foi colocada como hipótese que a apóptose afecta apenas os fibroblastos exuberantes, enquanto que os vasos não se encontram envolvidos. Quando o penso é removido áreas dos vasos que já não estão incluídos na matriz iniciam o sangramento. Quando a composição objecto da presente invenção é utilizada em queloides, não se encontram presentes detritos ou tecido necrótico, enquanto que quando apenas um penso é permanentemente aplicado os queloides não desaparecem e encontram-se presentes alguns fenómenos autolíticos com detritos necróticos. 0 tempo de cura na terapia com a presente composição é mais rápido do que com terapia com ácido 22 salicílico. Associação de um penso permanente com a terapia do ácido salicílico não é tão eficaz como a terapia com a presente composição. Estas observações tornam realista o tratamento das piores feridas em cavalos, sem ter o problema da formação de queloides. Um penso permanente associado à composição objecto da presente invenção têm de ser aplicados à ferida sob risco de queloide até as feridas estarem completamente fechadas. Se o penso permanente for removido dentro de seis horas, a formação de queloides começa novamente e o processo é muito rápido. O andamento da nova formação de queloides irá passar pela mesma temporização de cinco dias de regressão e fase de sangramento final, antes de apresentar um tecido de granulação normal quando a presente composição e um penso permanente são mais uma vez aplicados. Um penso permanente actua evitando a tensão entre as fronteiras da ferida, mas o processo de cura tem de ser suportado pelos factores de cura presentes na mistura. Nem um penso permanente, nem a terapia apenas com a presente composição pode actuar eficazmente na formação de queloides, nem outras terapias existentes sozinhas, ou associadas podem evitar a formação de queloides ou promover a resolução rápida apresentada pela composição objecto da presente invenção.

Lisboa, 15 de Fevereiro de 2008

Claims (9)

1 Reivindicações 1. Composição compreendendo óleo de neem e extracto oleoso de Hypericum perforatum.

2. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o óleo de neem se encontrar numa percentagem entre 10% e 50%.

3. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o extracto oleoso de Hypericum perforatum se encontrar numa percentagem entre 10% e 50%.

4. Composição de acordo com a reivindicação 1 caracterizada por compreender opcionalmente Azadirachtin A

5. Composição de acordo com a reivindicação 4 caracterizada por a Azadirachtin A se encontrar numa concentração entre 100 ppm e 1000 ppm.

6. Uso da composição de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores para a preparação de um medicamento.

7. Formulação farmacêutica para ser utilizada no tratamento tópico de feridas' externas de animais e seres humanos compreendendo uma composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada por compreender azeite, ou óleos comerciais de sementes de plantas de modo a ser suficiente para obter 1000 g de produto final. 2

8. Formulação farmacêutica para ser utilizada para o tratamento tópico de feridas externas de animais e seres humanos compreendendo uma composição de acordo com qualquer umas das reivindicações 1 a 5, caracterizada por compreender óleos essenciais derivados do orégão, basílico e rosmaninho como antioxidante e agentes aromatizantes.

9. Formulação farmacêutica de acordo com a reivindicação 7, caracterizada por compreender cera de abelha numa percentagem entre 7% e 15%. Lisboa, 15 de Fevereiro de 2008