PT101066A

PT101066A - Processo para a preparacao de derivados de ariletanolaminas

Info

Publication number: PT101066A
Application number: PT101066A
Authority: PT
Inventors: Barrie Christian Char Cantello; Lee James Beeley
Original assignee: Smithkline Beecham Plc
Priority date: 1991-11-19
Filing date: 1992-11-17
Publication date: 1994-02-28
Also published as: WO1993010074A1; ZA928859B; NZ245157A; MX9206614A; TW222619B; AU2949192A; GB9124512D0

Description

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Este invento diz respeito a novos compostos, a um processo para a preparação de tais compostos, a composições farmacêuticas contendo tais compostos e a utilização de tais composições em medicina e na agricultura. A Patente Europeia número 0023385 revela certos compostos que são descritos como tendo actividade como agentes anti--obesidade e/ou anti-hiperglicémicos.

Foi agora descoberto que uma série de derivados aril-otanolamina caindo dentro do âmbito geral dos compostos revelados na PE 0023385 tem uma boa actividade agonista β-adrenoreceptora e em particular mostra boa selectividade para B^-adrenoreceptores em vez de B^ ou B^-adrenoreceptores. Estes compostos são portanto indicados por terem boa actividade anti-hiperglicémica e/ou anti-obesidade associada especialmente com boa selectividade para efeitos laterais cardíacos e tremorigénicos.

Estes compostos também têm potencial como promotores do crescimento para o conjunto de animais de quinta, e para a diminuição da taxa da mortalidade de nascimento e da taxa de sobrevivência põs-natal dos animais numa quinta. Estes compostos também podem ser úteis no aumento concentração da lipoproteína de alta densidade (HDL) colesterol e diminuiçãoda concentração de triglicérido no soro do sangue humano e são portanto de utilização potencial no tratamento e/ou profilaxia da artereoesclerose. Eles tanbém são indicados como sendo úteis para o tratamento da hiperinsulinémia.

Consequentemente o presente invento fornece um composto de fórmula (I):

OH

aceitá- ou um seu sal de ácido,, éster ou amina farmaceuticamente veis, ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, em que R representa hidrogénio, halogênio ou CFg.

Em partidular, R é substituído na posição 3 no anel fenilo.

Adequadamente, R representa halogênio, especialmente cloro ou bromo, ou CF^.

De preferência, R representa cloro, especialmente 3-cloro.

Os compostos de fórmula (I) têm um átomo de carbono assimétrico, marcado com um asterisco na fórmula. Estes compostos podem, portanto, existir em uma ou duas formas estereo isoméri-câs f Ό presente' invento inclui todos os estereoisómeros dós compostos da fórmula geral (I), livres de outros isómeros ou misturados com outros isómeros em qualquer proproção, e deste modo inclui por exemplo, misturas racémicas de enanteõmeros.

De preferência, o carbono assimétrico está na configuração R,

Quando aqui utilizado o termo "alquilo", quando usado sozinho ou quamdo forma parte de outros grupos (tais como o grupo "alcoxi") inclui grupos alquilo de cadeia ramificada ou lineares contendo 1 a 12 átomos de carbono, adequadamente 1 a 6 átomos de carbono, exemplos dos quais incluem grupos metilo, etilo, n-pro-pilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo ou terc-butilo.

Quando aqui utilizado o termo "halogénio" refere-se a flúor, cloro, bromo e iodo, de preferência cloro.

Esteres adequados são ésteres hidrolisáveis in-vivo.

Quando aqui utilizado o termo "éster hidrolisável in vivo" diz respeito a um éster farmaceuticamente aceitável que prontamente se rompe no corpo do animal humano ou não humano para deixar o grupo hidroxi livre. Grupos éster hidrolisáveis in vivo são os que são utilizados convencionalmente na técnica, por exemplo aqueles que são fornecidos por ácidos c^_g alquilo carboxílicos.

Geralmente, os ésteres dos compostos de fórmula (I) são ésteres do grupo carboxílico de fórmula (I). Adicionalmente o grupo hidroxi presente na porção -CH(OH)CH2NH ("o grupo hidroxilo etanolamina") ou qualquer grupo hidroxilo presente no composto de fórmula (I) pode ser sujeito a derivação de modo a fornecer um derivado éster. Ésteres adequados do grupo carboxilo de fórmula (I) inclui ésteres alquílicos, especialmente ésteres C^_6 alquílicos tais como metílico. Éteres adequados de grupos hidroxilo são os que são fornecidos por um ácido aril carboxílico, um ácido arilalquil carboxílico ou um ácido C^_g a^<3u^-·'- carboxílico. 6

De preferência o grupo hidroxil etanolamina está presente como um grupo hidroxilo livre.

Amidas adequadas farmaceuticamente aceitáveis são as st st que apresentam fórmula NR R em que R e R cada um independentemente representa hidrogénio, alquilo ou alcoxialquilo.

Sais farmaceuticamente aceitáveis adequados dos compostos de fórmula (I) incluem sais de metais, tais como por exemplo alumínio, sais de metal alcalino tais como sódio ou potássio, sais de metal alcalino terroso tais como cálcio ou magnésio e sais de amónio ou de amónio substituído, por exemplo aqueles com C^_g alquilaminas tais como trietilamina, hidroxi-C1_g alquil-aminas tais como 2-hidroxietilamina, bis-(2-hidroxietil)-amina ou tri-(2-hidroxietil)-amina, cicloalquilaminas tais como biciclo-hexilamina, ou com procaína, dibenzilpiperidina, N-benzil-b--fenetilamina, desidroabietilamina, Ν,Ν'-bisdesidroabietilamina, glucamina, N-metilglucamina ou bases do tipo piridina tais como piridina, colina ou quinolina.

Compostos de fórmula (I) também formam sais de adição de ácidos.

Sais de adição de ácido farmaceuticamentre aceitáveis podem ser, por exemplo, sais com ácidos inorgânicos, por exemplo, como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido ortofosfórico ou ácido sulfúrico, ou com ácidos orgânicos tais como, por exemplo, ácido metanossulfõnico, ácido toluenossulfõnico, ácido acético, ácido propiónico, ácido láctico, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido málico, ácido succínico, ácido solicílico, ácido maleico ou ácido acetilsalicílico. 7

Solvatos farmaceuticamente aceitáveis adequados são solvatos convencionais, de preferência hidratos.

Este invento também fornece um processo para a preparação de um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, processo esse que compreende a reacção de uma forma activada de um composto de fórmula (II):

em que R é como definido em relação à formula (I), R representa hidrogénio ou um grupo de protecção de hidroxi e representa hidrogénio ou um grupo de protecção de azoto; com um composto de fórmula (III): l-ch2coorz em que RZ é hidrogénio ou um grupo de protecção e L representa um g.£upp dissociável; e depois disso se necessário efeptuam-se um ou mais dos seguintes passos: (i) remoção de qualquer grupo de protecção; e (ii) preparação de um sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável, de um composto de fórmula (I) ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável. δ

Um grupo L dissociável adequado é um átomo de halogé-nio, de preferência um átomo de bromo.

Uma forma activada de um composto de fórmula (II) adequada é uma forma aniõnica. A reacção entre uma forma activada de um compsoto de fórmula (II) e um composto de fórmula (III) pode ser efectuada em qualquer solvente adequado, geralmente um solvente aprótico tal como acetona, tetrahidrofurano ou dimetilformamida, a qualquer temperatura proporcionando uma velocidade adequada de formação do produto requerido a uma temperatura ambiente ou a uma temperatura elevada, tal como na gama de desde 20°C até 150°C, por exemplo 60°C; convenientemente quando a acetona é o solvente uma temperatura adequada é a temperatura de refluxo.

Uma forma activada de um composto de fórmula (II) pode ser preparada pelo processo convencional. Deste modo uma forma aniónica pode ser preparada tratando um composto de fórmula (II) com uma tal base de carbonato de sódio.

Geralmente, a forma activada do composto (II) é preparada in situ. A desprotecção de um compsoto de fórmula (I) constitui um aspecto separado do presente invento: consequentemente é fornecido um processo para a preparação de um compsoto de fórmula (I) ou um seu sal de ácido, éster ou amida farmaceuticamente aceitável, ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, processo esse que compreende a desprotecção de um composto de fórmula (IA) : 9

χ y OR R

(IA)

X V em que R é como definido em relação à fórmula (I) , R e R-* são como definidos em relação à fórmula (II), contando que pelo menos XV z um de R , R2 ou R representa um grupo de protecção; a seguir é necessário efectuar um ou mais dos seguintes passos: (i) remoção de qualquer grupo de protecção; e (ii) preparação de um sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável de um compsoto de fórmula (I) ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável.

Grupos de protecção adequados Rx incluem grupos tri-alquil sililo. . De preferência, R é hidrogénio.

De preferência, R^ é um grupo de protecção de azoto, por exemplo um grupo terc-butiloxi carbonilo. * _ 2

Grupos de protecção adequados R incluem grupos de protecção de carboxilo, tais como grupos C1-6 alquilo. 10

Ζ

De preferência, R é hidrogénio. A desprotecção do composto de fórmula (IA) pode ser efectuada utilizando qualquer adequado- processo convencional apropriado ao grupo de protecção particular escolhido. Deste modo por exemplo quando é um grupo terc-butiloxi-carbonil o composto de fórmula (IA) é desprotegido utilizando hidrólise acídica branda, utilizando por exemplo ácido trifluoroacético num solvente inerte tal como diclorometanol, de preferência sob uma atmosfera inerte tal como azoto e de preferência sob condições anidras . y

Quando R representa um grupo trialquil sililo pode ser removido por hidrólise acídica branda.

Quando Rz representa um grupo C^_g alquilo então pode ser removido por hidrólise básica branda.

Os compostos de fórmula (IA) podem ser preparados como descrito anteriormente por reacção entre os compostos das fórmulas (II) e (III).

Os compostos da fórmula (II) podem ser preparados fazendo reagir um composto de fórmula. (IV):

I

OR *chco2h (IV)

R 11

em que R e R são como definidos em relação à fórmula (II) com tiramina, e subsquentemente reduzindo a amida resultante; a seguir efectua-se, se for necessário, a remoção de qualquer grupo de protecção. A reacção entre um composto de fórmula (IV) e tiramina pode ser efectuada sob condições de amidação convencionais, por exemplo num solvente inerte, tal como diclorometano seco, na presença de um agente de acoplamento, a qualquer temperatura a qual fornece uma velocidade apropriada de formação do produto desejado, convenientemente desde baixa temperatura até à temperatura ambiente, por exemplo 0°C ou temperatura ambiente; e de preferência numa atmosfera inerte tal como azoto.

Agentes de acoplamento adequados são agentes de acoplamento convencionais tais como Ν,Ν'-diclorohexilcarbodiimida, benzotriazol-l-iloxi tris(dimetilamino)-fosfoniohexafluorofosfato e benzotriazol-l-iloxi tripirrolidinofosfoniohexafluorofosfato. A redução da amida resultante pode ser efectuada utilizando qualquer apropriado método de redução convencional, por exemplo utilizando um borano tal como boranodimetilsulfureto em tetrahidrofurano em refluxo, de preferência sob azoto. A protecção de qualquer grupo de reacção ou átomo, pode ser efectuada em qualquer estádio apropriado no processo acima mencionado. Grupos de protecção adequados incluem os utilizados convencionalmente na técnica para o grupo ou átomo particular a ser protegido, por exemplo aqueles mencionados anteriormente.

Os grupos de protecção podem ser preparados e removidos utilizando o processo convencional apropriado: 12

Por exemplo, grupos de protecção terc-butiloxicarbonilo podem ser preparados trantando o composto apropriado de fórmula (II) com o dicarbonato de di-terc-butilo na presença de uma base tal como a trietilamina. Os grupos de protecção terc-butiloxi-carbonilo podem ser removidos por hidrólise acídica branda, tal como por tratamento com ácido trifluoroacético.

Também, quando R é um grupo alquilo, pode ser removido utilizando hidrólise básica suave.

Um grupo dissociável é qualquer grupo que, sob condições de reacção, se separa do material de partida, promovendo deste modo a reacção num local específico. Exemplos adequados de tais grupos são os átomos de halogénio, grupos mesiloxi e grupos tosiloxi.

Compostos de fórmula (IA) e (II) são considerados como sendo novos e deste modo a constituem um aspecto adicional do invento.

Compostos das fórmulas (III) e (IV) são, ou compostos conhecidos ou podem ser preparados a partir de compostos conhecidos, por processos conhecidos ou processos análogos a processos conhecidos por exemplos aqueles que são revelados em Organic Syntesis, Collective Vol. 3 p.381 (para compostos de fórmula (III) e p.538 (para compostos de fórmula (IV)). A tiramina é um composto conhecido.

Um composto de fórmula (I) ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável; ou um seu solvato farmaceuti-camente aceitável também pode ser preparado por métodos revelados em EP 0023385; tais métodos são aqui incorporados por referência.

Os sais, ésteres, amidas e solvatos dos compsotos de fórmula (I) podem ser produzidos por métodos convencionais na técnica:

Por exemplo, sais de adição de ácido podem ser preparados pelo tratamento de um composto de fórmula (I) com um ácido apropriado. Ésteres de compostos de fómrula (I) podem ser preparados por processos de esterificação convencionais, por exemplo éteres alquílicos podem ser preparados tratando o composto de fórmula (I) requerido com um alcanol apropriado sob condições acídicas.

Um processo conveniente para a preparação de ésteres alquílicos de compostos de fórmula (I), e especialmente um éster metílico é fornecido pelo tratamento de um composto de fórmula (II) com um composto de fórmula (III) em que Rz representa C g alquilo, especialmenmte metilo.

Amidas de compostos de fórmula (I) podem ser preparadas utilizando procesoss de amidação convencionais, por exemplo • s t amidas de fórmula CONR R de um composto de fórmula (I) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (I) com uma amina de st s t fórmula HNR R em que R e R são como definidos anteriormente.

Alternativamente, um éster C]_-.g alquílico tal como um éster metílico, de um composto de fórmula (I) pode ser tratado com uma . s t amina de fórmula NHR R anteriormente definida para fornecer a amida reuqerida. Tais reacções são muito convenientemente efec-tuadas na presença de agentes de acoplamento anteriormente mencionados.

Os compostos de fórmula (I) e seus sais, éster ou amida farmaceuticamente aceitáveis; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, produzido pelos processos anteriores, podem ser recuperados por métodos convencionais.

Se for requerido, compostos do invento podem ser separados nos estereoisómeros individuais por meios convencionais, por exemplo pela utilização de um ácido opticamente activo como um agente de resolução. Ácidos opticamente activos adequados os quais podem ser utilizados como agentes de resolução são descritos em "Topics in Stereochemistry", Vol.6, Wiley Inter-science, 1971, Allinger, N.L. and Eliel, W.L. Eds.

Alternativamente, qualquer enanteómero de um composto do invento pode ser obtido por síntese estereoespecífica utilizando materiais de partida opticamente puros de configuração conhecida: por exemplo um enanteómero do composto de fórmula (I) pode ser preparado por reacção de um enanteómero do composto de fórmula (II) com um composto de fórmula (III), por exemplo o enanteómero R do composto (I) poderá ser preparado a partir do enanteómero R do composto (II). Os substractos enanteoméricos de relevo são convencionalmente preparados utilizando métodos anteriormente abordados, por exemplo enanteómero R do composto da fórmula (II) pode ser preparado a partir do enanteómero R do composto da fórmula (IV). A configuração absoluta de qualquer composto da fórmula geral (I) pode ser determinada por técnicas cristalográficas de Raio-X convencional.

Como anteriormente indicado, os compostos do presente invento têm propriedades farmacológicas valiosas. 15

0 presente invento consequentemente fornece um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, para utilização como substância terapêutica activa.

Num aspecto, o presente invento fornece um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, para utilização no tratamento de hiperglicémia em humanos ou animais.

Animais não-humanos adequados incluem mamíferos não-humanos especialmente cães e gatos. 0 presente invento fornece adicionalmente um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceutiacmente aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, para utilização no tratamento da obesidade e/ou para o tratamento e/ou profilaxia de artereoesclerose e/ou para o tratamento de hiper-insulinémia em animais humanos ou não-humanos.

Num aspecto adicional, o presente invento fornece a utilização de um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, para a manufactura de um medicamento para o tratamento de hiperglicémia em animais humanos ou não-humanos. 0 presente invento também fornece a utilização de um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, para a manufactura de um medicamento para o tratamento da obesidade e/ou para o tratamento e/ou profilaxia de artereoesclerose e/ou para o tratamento de hiperinsulinémia em animais humanos e não-humanos. 16

Um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável; ou um seu solvato farmaceuti-camente aceitável, pode ser administrado per se ou, de preferência, como composição farmacêutica que também compreende um veiculo farmaceuticamenmte aceitável.

Consequentemente, o presente invento também fornece uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, e um seu veículo farmaceuticamente aceitável.

Como aqui utilizado o termo "farmaceuticamente aceitável" abrange compostos e ingredientes para ambas as utilizações humanas e veterinárias: por exemplo o termo " sal farmaceuticamente aceitável" abrange um sal veterinariamente aceitável. A composição pode, se desejado, estar na forma de uma embalagem acompanhada de instruções escritas ou impressas para utilização.

Normalmente as composições farmacêuticas do presente invento serão adaptadas para administração oral, apesar das composições para administração por outras vias, tais como por injecção, também serem consideradas.

As composições particularmente adequadas para administração oral são formas de dosagem unitárias tais como comprimidos e cápsulas. Outras formas de dosagem unitárias, tais como os pós apresentados em saquetas, também podem ser utilizados.

De acordo com a pratica farmacêutica convencional o veículo pode compreender um diluente, enchedor, desintegrante, 17

agente humectante, lubrificante, corante, aromatizante ou outro adjuvante convencional.

Veículos típicos incluem, por exemplo, celulose micro-cristalina, amido, glicolato de amido de sódio, polivinilpirro-lidona, polivinilpolipirrolidona, estereato de magnésio ou lauril sulfato de sódio.

Mais adequadamente a composição deverá ser formulada em forma de dosagem unitária. Uma tal dose unitária deverá conter normalmente uma quantidade do ingrediente activo numa gama de desde 0,1 a 1000 mg, mais habitualmente 2 a 100 mg ou desde 0,1 a 500 mg, e mais especialraente desde 0,1 a 250 mg. O presente invento fornece adicionalmente um método para o tratamento da hiperglicémia num animal humano ou não humano, o qual compreende a administração de uma quantidade efectiva, não tóxica, de um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável, a um animal humano ou não humano hiperglicémico com necessidade desse mesmo tratamento. 0 presente invento fornece adicionalmente um método para o tratamento da obesidade ou para o tratamento e/ou profilaxia de artereoesclerose num animal humano ou não humano, o qual compreende a administração de uma quantidade efectiva, não tóxica, de um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, a um animal humano ou não humano que tenha necessidade de tal tratamento.

O 18

Convenientemente, o ingrediente activo pode ser administrado como uma composição farmacêutica definida anteriormente, e este forma um aspecto particular do presente invento.

No tratamento dos humanos hipoglicémicos ou obesos o composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceu-ticamente aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, pode ser tomado em doses, tais como as descritas anteriormente, um a seis vezes ao dia de uma maneira tal que a dose total diária para um adulto de 70 Kg esteja geralmente numa gama de desde 0,1 a 6000 mg, e mais usualmente cerca de 1 a 1500 mg, isto -3 e, uma dosagem total numa gama de 1,4 . 10 mg/Kg até 86 mg/Kg, mais usualmente numa gama de 0,014 mg/Kg até 21,4 mg/Kg.

Os regimes de tratamento para a artereoesclerose são geralmente como descritos para a hiperglicémia.

No tratamento de mamíferos não humanos, cães especialmente, o ingrediente activo pode ser administrado pela boca, habitualmente uma a duas vezes por dia numa quantidade na gama de desde 0,025 mg/Kg até 25 mg/Kg, por exemplo 0,1 mg/Kg até 20 mg/Kg.

Num aspecto adicional o presente invento também fornece um método para o aumento da taxa do aumento de peso e/ou melhorar da eficiência da utilização da alimentação e/ou aumento de massa corporal de carne magra e/ou diminuição da taxa da mortalidade à nascença e aumento da taxa de sobrevivência pós-natal; de animais de quinta, método esse que compreende a administração aos animais de uma quantidade efectiva não tóxica de um composto de fórmula (I) ou um seu sal, éster ou amida aceitável em veterinária; ou um seu solvato aceitável em veterinária. 19

Enquanto os compostos de fórmula (I) e seus sais, éster ou amida aceitáveis em veterinária podem ser administrados a quaisquer animais de quinta pelo método anteriormente mencionado, eles são particularmente adequados para o aumento da taxa de aumento de peso e/ou eficiência da utilização da alimentação e/ou da massa corporal em carne magra e/ou diminuição da taxa da mortalidade à nascença e aumento da proporção da sobrevivência pós-natal; nas aves domésticas, especialmente perus e galinhas, gado, porcos e carneiros.

No método precedente os compostos de fórmula (I) ou seus sais, éster ou amida aceitáveis em veterinária são normal-emnte administrados oralmente apesar de também serem visados modos de administração não oral, por exemplo injecção ou implantação. Adequadamente os compostos são administrados na ração sólida ou agua de beber dos animais de quinta. Convenientemente . . 3 estes são administrados na ração sólida a desde 10- ppm-550ppm da total ração diária, mais habitualmente 0,01 ppm até 250 ppm, adequadamente menos do que 100 ppm.

As formulações particulares utilizadas claro que vão depender do modo de administração mas devem ser aqueles utilizados convencionalmente no modo de administração escolhido. Para administração nas rações as drogas são convenientemente formuladas como uma prê-mistura em associação com um veículo adequado.

Consequentemente, o presente invento também fornece uma formulação aceitável em veterinária pré-misturada que compreende um composto de fórumla (I), ou um seu sal, éster ou amida aceitável em veterinária; ou ums eu solvato aceitável em veterinária, em associação com um seu veículo aceitável. 20

Veículos adequados são agentes inertes convencionais tais como amido em pó. Outros veículos de pré-mistura de rações também podem ser empregues. Não são esperados efeitos tóxicos não aceitáveis quando os compostos do invento são administrados de acordo com o presente invento.

Os Exemplos seguintes ilustram o -invento· mas não o limitam de qualquer maneira.

Procedimento l (R)-3-Cloro-a-hidroxi-N-[2-(4-hidroxifenil)etil]benzenoacetamida (R)

O

α

Uma mistura de 4,23 g (30,8mM) de tiramina, 5,01 g (26,9 mM) de ácido (R)-3-cloromandélico, 10,80g (24,5 mM) de hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxi-tris(dimetilamino)fos-fónio e 2,72g (26,9mM) de trietilamina em 100 ml de dicloro-metano, sob azoto, foi agitada ã temperatura ambiente durante 48 21

horas. A solução foi diluída com 500 ml de acetato de etilo e lavada com 50 ml de solução de hidrogénio carbonato de sódio saturada, 50 ml de água, 50 ml de ácido clorídrico aquoso a 2M e 50 ml de água. Depois de secar (MgS04) e da evaporação in vacuo o resíduo amarelo foi dissolvido em 200 ml de hidroxido de sódio a 1M, lavado com 50 ml de éter dietílico e acidificado com 15 ml de ácido clorídrico concentrado. A fase aquosa foi extraída com 2x100 ml de acetato de etilo e as lavagens orgânicas combinadas foram secas (MgS04). A evaporação in vacuo produziu o produto em bruto como um óleo amarelo pálido. A purificação por cromatogra-fia em gel de silica eluindo com 50-90% acetato de etilo em hexano deu o composto em título como uma espuma incolor. 1H rmn S(DMSO-d6) 7,99 (1H, permutado com D 0), 2H, m) , 6,65 (2H, m), 6,30 (1H d), 3,24 (2H, m), 2,59 (2H, t). 7,43 d, 9,14(1H, permutado comD20), (1H, s), 7,33 (3H, m), 6,93 (2H, [a]25D -41,3° (c= 1,25, metanol)

Procedimento 2

Sal hidrocloreto de (R)-4[2-[[2-(3-clorofenil)-2-hidroxietil]-amino]etil]fenol

.HCI A uma solução agitada de 6,10g (19,9 mM) de (R)-3- -cloro-a-hidroxi-N-[2-(4-hidroxifenil)etil]benzenoacetamida em 130 ml de tetrahidrofurano sob azoto â temperatura de refluxo foi adicionado 5,90ml (59,0mM) de 10M borano-dimetilsulfureto, gota a gota. A solução foi refluxada durante quatro horas, arrefecida até â temperatura ambiente e tratada com 75 ml de metanol gota a gota. Depois da agitação durante 0,5 horas adicionais, a solução foi refluxada .0,5 horas, então foi arrefecida e evaporada in yacuo,. .0: produto em bruto foi dissolvido em 70 ml de, isopr.opanol e tratado com cloreto de hidrogénio aquoso. A evaporação in vacuo e a trituração com 100 ml de éter dietílico deu o composto em título como um sólido brnaco o qual recristalizou a partir de acetona para produzir cristais brancos, pf. 162-30°c. rmn S (DMSO-d.)

O 23

9,39 (2Η, s, permutado com D20), 8,98 (1H, s, permutado com D20), 7,47 (1H,s), 7,41 (3H, m), 7,03 (2H, d), 6,73 (2H, d), 6,36 (1H, d, permutado com D20), 5,05 (1H, m), 3,11 (6H, br, m). -31,8° (c= 1,40, metanol)

Procedimento 3 carbamato de (R)-i,1-Dimetiletil-N-[2-(3-clorofenil)-2-hidroxi-etil]-N-[2-(4-hidroxifenil)etil]

(R) A uma solução agitada de 3,30 g (lO.mM) de sal hidro-cloreto de (R)-4-[2-[[2-(3-clorofenil)-2-hidroxietil]amino]etil]-fenol em 20 ml dé dimetilformamida seca sob azoto à temperatura ambiente foi adicionado 6,07g (60.mM) de trietilamina seguida de 2,40g (11.0 mM) de dicarbonato de di-terc-butilo. A reacção foi agitada durante 18 horas, depois foi diluida com 80 ml de água e extraída- com.' 2-x: 30ml de éter dietílico. As fases orgânicas' combinadas foram lavadas com 2 ·χ 10 ml de água, secas (MgSO^) e 24

evaporadas in vacuo para produzir o produto em bruto como uma espuma branca. XH rmn δ (cdc13) 7,34 (1H, s), 7,21 (3H, m), 6,96 (2H,d), 6,73 (2H, d), 4,83 (1H, m), 4,54 (2H, br. s, permutado com D20), 3,34 (4H, br.m), 2,61 (2H, m), 1,45 (9H, s). -8,9 (c= 1,5, metanol)

Procedimento 4 feniloxiacetato de (R)-Metil 4-[2-[N-[2-(3-clorofenil)-2-hidroxi etil]-N-[l,l-dimetil-etoxi)carbonil]amino]etil]

Uma mistura de 3,90g (9,95 mM) de (R)-1,1-dimetiletil--N-[2-(3-clorofenil)-2-hidroxietil]-N-[2-(4-hidroxifenil)etil)-carbamato, 5,33g (3,48mM) de bromoacetato de metilo e 4,13g (2,99 mM) de carbonato de potássio em 150 ml de acetona foi agitada à temperatura de refluxo sob azoto durante 6 horas. A reacção foi 25 25

arrefecida, filtrada e evaporada in vacuo para produzir o produto em bruto como um óleo. A purificação por cromatografia em gel de silica, eluindo com 25-50% -de acetato de etilo em n-hexano deu o composot em título como um óleo incolor» *Η rmn δ (CDClg) 7.35 (1H, S) , 7,27 (3H, m) , 7,06 (2H, m) 6,83 (2H, m), 4,84 (1H, m), 4,61 (2H, s), 4,61 (1H, s, permutado com D^O), 3,79 (3H, s), 3.35 (4H, br. m), 2,67 (2H, m), 1,45 (9H, s).

[a]25D -0,8° (c= 1,3, metanol)

Procedimento 5 (R)-a-Hidroxi-N-[2-(4-hidroxifenil)etiljbenzenoacetamida

HO

Utilizando um método idêntico ao descrito no Procedimento 1, a reacção de tiramina (l,64g, 11,9 mMol), com ácido mandélico (R) (l,79g, 11,9 mMol) e hexafluorofosfato de i benzotriazol-l-il-oxitripirrolidino fosfónio (6,2g, 11,9 mMol) deu o composto era título como uma espuma branca. XH rmn δ (DMSO-dg) 8,0-7,9 (1H, br.s, permutado com D20 lentamente), 7,5-7,2 (5H,m), 7,00 (2H,d), 6,70 (2H, d), 6,4-6,3 (1H, br.s, permutado com D20) , 4,9-4,8 (1H, br.s, permutado com D20), 4,41 (1H, s), 3,5-3,3 (2H, m), 2.,9-2,5 (2H/:.m). ·..·

Procedimento 6 (R)-4-[2-[[2-hidroxi-2-feniletil]amino]etil]fenol

Utilizando um método.idêntico ao descrito no Processo 2 a" reacção de :'(R) -d-hidroxi-N- [2- (4-hidroxifeniij etil]benzeno-acetamida (3,lg, 11,4 mMol) com borano-dimetil sulfureto (12 ml de solução a 10N) deu, depois de cromatografia sobre gel de silica eluindo .com acetato de etilo contendo 5% metanol e 5% trietilamina,·o-composto em título como um óleo incolor. 1H rmn δ (DMSO-dg) 27

7,3-7,2 (5Η, m) , 6,94 (2H, d), 4,70 (1H, m) , 4,6-4,5 (3H, br.S, permutado com D20), 3,0-2,5 (6H, ms).

Processo 7 carbonato de (R)-1,l-Dimetiletil-N-[2-hidroxi-2-feniletil]-N-[2--(4-hidroxifenil)etil]

Utilizando um método idêntico ao descrito no Processo 3 a reacção de (R)-4-[2-[[2-hidroxi-2-feniletil]amino]etilfenol (l,5g, 5,84 mMol) com decarbonato de di-terc-butilo (l,9g, 8,76 mMol) deu o composto em título como um óleo viscoso incolor. 1H rmn S (DMSO-d,)

O 7/5-7,2 (5H, m) , 6,96 (2H, d) , 6,73 (2H, d) , 5,9-5,8 (1Η, m) , 5,9-5,8 (1H, br.m, permutado com D20), 4,6-4,3 (1H, br.m, permutado com D20), 3,5-3,1 (4H, m), 2,8-2,6 (2H, m) 1,54 (3H, s), 1,45 (6H, s). 28

Procedimento 8 feniloxiacetato de(R)-Metil 4-[2-[N-[2-hidroxi-2-feniletil]-N -[1,l-dimetiletoxi)carbonil]amino]etil]

0CH2C02CH3

Utilizando um método idêntico ao descrito no Procedimento 4 carbonato de (R)-1,1-dimetiletil-N-[@-hidroxi-2-fenil-etil]-N-[2-(4-hidroxifenil)etil] (l,36g, 3,8 mMol) e bromoacetato de metilo (l,74g, 11,4 mMol) deram, depois da cromatografia sobre gel de silica eluindo com acetato de etilo contendo 2% trietil-amina, o composto em titulo como uma goma incolor. ^ rmn 6 (CDC13) 7,3-7,2 (5H, m), 7,06 (2H, d, J= 8,0Hz), 6,83 (2H, d, J= 8,0Hz), 4,9-4,8 (1H, br.m, permutado cora D2°)/ 4,60 (2H, s), 4,3-4,2 (1H, m), 3,78 (3H, s), 3,5-3,2 (4H, br.m), 2,9-2,7 (2H, br.m), 1,45 (9H, s).

Procedimento 9 (R)-3-Bromo-ahidroxi-N-[2-(4-hidroxifenil)etil-benzenoacetamida

Utilizando um método idêntico ao descrito no Procedimento 1, a reacção de tiramina (l,78g, 13mMol), com ácido (R)—3— -bromomandélico (3,0g, 13 mMol) e hexafluorofosfato de benzo-triazol-l-il-oxitripirrolidinofosfónio (7,43g, 14,2 mMol) deu o composto em título como um óleo amarelo. rmn 5 (CDC13) 7,7-7,5 (1H, br.m, permutado lentamente com D20), 7,55 (1H, s), 7,43 (1H, d), 7,3-7,1 (2H, m), 6,76 (2H, d), 6,4-6,3 (1H, br.S, permutado' com , 5,3 0 (1H, s, permutado còmD^Ô), 4,95 (1H, S), 3,5-3,3 (2H, m), 2,7-2,6 (2H, m). 30 -

-V

Procedimento 10 (R)-4-[2-[[2-(3-bromofenil)-2-hidroxietil]aminoJ etil]fenol

OH

Utilizando um método idêntico ao descrito no Procedimento 2 a reacção de (R)-3-bromo-a-hidroxi-N-[2-(4-hidroxifenil)-etil]benzeno acetamida (6,28g, 17,9 mMol) com borano-dimetil- sulfureto (20 ml de solução a 10M) deu, depois da cromatografia sobre gel de silica eluindo com diclorometano contendo 4% metanol, o composto em título como uma espuma branca. ‘‘H rmn S (DMSO-d,)

W 9,3-9,1 (1H, br.s, permutado com D20), 7,64 (1H, s), 7,52 (1H, dj , 7,4-7,3 ('2H, :: m) , 7,10 (2H, d) , .6/71 (2H, d)/ 5,7-5,5 (1H, br.m, permutado com D2°), 4,64 (1H, m), 4,2-4,1 (1H, br.m, permutado com D20), 3,0-2,6 (6H, m). 31 31

Processo ll carbonato de (R)-1,l-Dimetiletil-N-[2-(3-bromofenil)-2-hidroxi-etil]-N-[2-(4-hidroxifenil)etil]

BOC

Utilizando um método idêntico ao descrito no Procedimento 3 a reacção de (R)-4-[2-[[2-(3-bromofenil)-2-hidroxietil]-amino]etilfenol (l,69g, 5,5 mMol) com dicarbonato de di-terc- -butilo (l,31g, 6,0 mMol) deu o composto em título como um óleo. rmn δ (CDC13) 7,52 (1H, s), 7,39 (1H, d), 7,25-7,20 (2H, m), 7,1-7,0 (1H, br.m, permutado com D20), 7,05-6,9 (2H, m) , 6,77 (2H, d), 4,9-4,7 (lH,m), 3,5-3,1 (5H, m, 1H, permutado com D20), 2,7-2,5 (2H, m), :2,7-2,5 (2H, m),1,55 (3H, S), 1,45 (6H, s).

32

Procedimento 12 feniloxiacetato de (R)-Metil 4-[2-[N-[2-(3-bromofenil)-2-hidroxi etil]-N-[1,1-dimetiletoxicarbonil]amino]etoxi]

OCH2CO^CH3

Utilizando um método idêntico ao descrito no Procedimento 4 a reacção de carbonato de (R)-1,l-dimetiletil-N-[2-(3--bromofenil)-2-hidroxietil] (2,74g, 6,3 mMol) com bromoacetato de metilo (3,36g, 22 mMol) deu o composto em título como um oleo amarelo. 1H rmn 5 (CDC13> 7,50 (1H, S), '7,41 (1H, d), 7,3-7,2 (2H, m), 7,0-7,1 (2H, m), 6/ 83"('2H, d) ,' 4,84 (1H, m) , 4,4-4,6 (ΪΗ, m, permutado com DO) , 4,61 (2H, S), 3,80 (3H, S), 3,7-3,6 (lH,m), 3,5-3,1 (3H, m), 2,8-2,3 (2H, m), 1,45 (9H, s). 33

Procedimento 13 (R)-a-Hidroxi-3-trifluorometil-N-[2-(4-hidroxifenil)etil]benzeno acetamida 0

Utilizando um método idêntico ao descrito no Procedimento 1 a reacção de tiramida (5,16g, 37,6 mMol) com ácido (R)-3-trifluorometilmandélico (7,2g, 32,7 mMol) e hexafluoro-fosfato de benzotriazol-l-il-oxitripirrolidinofosfónio (15,3g, 29,4 mMol) deu, depois da cromatografia sobre gel de sílica eluindo com 35% de hexano em acetato de etilo, o composto em título como um óleo amarelo pálido. rmn S. (CDC13) 8,40 (1H, s, permutado com D2°)' 7,71 (1H, s), 7,58-7,39 (3H, br.m), 7,13 (1H, t), 6,92 (2H, d); 6,71 (2H, d); 5,71 (1H, d, permutado com D20), 5,04 (1H, d), 3,43 (2H, m), 2,67 (2H, br.t).

Procedimento 14 (R)-4-[2-[[2-hidroxi-2-(3-trifluorometilfenil)etil]amino]etil]fe nol

HO

OH

Utilizando um processo idêntico ao método descrito no Procedimento 2 a reacção de (R)-a-hidroxi-3-trifluorometil-N-[2--(4-hidroxifenil)etil]benzenoacetamida (10,Og, 29,5 mMol) com borano dimetilsulfureto (8,8 ml, 88,4 mMol) deu o composto em título como uma espuma branca. rmn δ (CDC13) 9,41 (1H,. s, permutado com D20) , 9,25 (1H, br. s, permutado com D20), 7,77 (1H, S), 7,69 (3H, m), 7,04 (2H, d), 6,74 (2H, s), 6,45 (1H, d, permutado com D20), 5,16 (1H, m), 3,38-2,89 . (6H, br.m). -30,8° (c= 2,28 metanol)

35 - 'V

Procedimento 15 carbamato de (R)-1,1-Dimetil-N-[2-hidroxi-2-(3-trifluorometil- fenil)etil]-N-[2-(4-hidroxifenil)etil]

Utilizando uxn procedimento idêntico ao método descrito no Processo 3 a reacção de (R)-4-[2-[[2-hidroxi-2-(3-trifluoro-metilfenil)etil]amino]etilfenol (6,20g, 17,1 mMol) com dicarbo-nato de di-terc-butilo (4,11 ml, 18,9 mMol) deu uma espuma branca. 1H rmn δ (CDC13) 6,94 (2H, d), 6,73 (2H, d), 6,48 4,90 (2H, m), 3,50-3,05 (4H,. br. 7,60 (1H, s), 7,46 (3H, br. m), (1H, br.m, permutado com D20), m), 2,63 (2H, m), 1,44 (9H, s).

Procedimento 16 feniloxiacetato de (R)-Metil 4-[2-[N-[2-hidroxi-2-(3-trifluoro-metilfenil)etil]-N-[l,l-dimetiletoxicarbonil]amino]etil]

Utilizando um método idêntico ao descrito no Procedimento 4 a reacção de carbamato de (R)-1,l-dimetiletil-N-[2-(4--hidroxifenil)etil] (7,2g, 16,9 mMol) com bromoacetato de metilo (5,6ml, 59,2 mMol) deu depois da cromatografia sobre gel de silica eluindo com 50% acetato de etilo em hexano, um óleo incolor. XH rmn <$ (CDC13) 7,7 (1H, s), 7,49 (3H, m) , 7,03 (2H, br. ,d), 6, ,83 (2H, d), 4,91 (1H, m), 4,73 (1H, br.s, permutado com t D, >0), 4, ,60 (2H, s) , 3,79 (3H, s) , 3,60-3,50 (4H, br.m), 2,80-2, 52 (2H, br. ,m) , 1,45 (9H, s). -3,5° (c= 2,19 metanol) EXEMPLO 1

Sal hidrocloreto de feniloxiacetato de (Rl-Metilo 4-Γ2-ΓΝ-Γ2-Π--clorofenill-2-hidroxietillaminoletin

.HC1 A uma solução agitada de l,97g (4,25 mM) de fenoxi-acetato de (R)-metilo 4-[2-[-N-[2-(3-clorofenil)-2-hidroxietil]--N-[l,1-dimetiletoxi)carbonil]amino]etil] em 25 ml de dicloro-metano seco sob azoto a 0°C foi adicionado 3,63g (31,8 mM) de ácido trifluoroacético gota a gota. A reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 6 horas depois foi neutralizada com hidrogeno carbonato de sódio. A fase orgânica foi separada, lavada com 5 ml de água e seca (MgSC>4). A evaporação in vacuo deu o produto em bruto como um óleo amarelo o qual foi purificado por cromatografia em gel de silic.a, eluindo com acetato de etilo. 0 óleo incolor resultante foi dissolvido em 20 ml de metanol e 'tfàtâdo1 com cloreto de hidrogénio gasoso, seco. A evaporação in vacuo deu o composto em título como um sólido branco que foi cristalizado a partir de isopropanol,’p.f. =130-1°C. 1 H rmn δ (DMS0-dc).

O - 38 -

9,28 (1Η, s, permutado com D20), 7,47 (1H, s), 7,41 (3H, m), 7,17 (2H, m), 6,89 (2H, m), 6,37 (1H, d, permutado com D20), 5,07 (1H, m), 4,77 (2H, s), 3,69 (3H, s), 3,08 (6H, br.m).

[a]25D -24,5° (c= 1,3 metanol) EXEMPLO 2

Sal de sódio,- ácido · (R) -4-Γ2.-N- Γ 2 - (3-clorof enil) -2-hidroxietill-aminoletill-fenoxiloxi acético

0CH2C02Na

A uma solução agitada de feniloxiacetato de (R)-metilo 4-[2-[N-[2-(3-clorofenil)-2-hidroxietil]amino]etil], sal hidro-cloreto (600 mg, 1,5 mM) em água (60 ml9 foi adicionada uma solução de hidroxido de sódio, a 2,0 M (3ml, 6,0 mM) . Depois de 1 hora a mistura de reacção foi neutralizada com ácido clorídrico a ' 2 ÒM' e entãò 'foi:::evapòrada in vacuo. 0'resíudo foi dissolvido num pequeno volume de água e a solução foi basifiçada com carbonato de sódio. Esta solução foi então cromàtografada em silica de fase reversa com 0-30% metanol/água como eluente para dar o ácido requerido:como ·o =seu· monohidrato, (sólido branco, p.f.= 179°C decomposição). ‘ · 39

1H rmn δ (DMSO-cl./D.o) ο Ζ 7,4-7,26 (4Η, complexo m), 7,01 (2Η, m), 6,?1 (2Η, m), 4,65 (1Η, m), 4,9 (2Η; s), 2,76-2,59 (6Η, complexo m).

[α] 25d -15,8° [Ο 0,5 metanol/H20] EXEMPLO 3

Hidrocloreto de feniloxlacetato de CEO-Metilo 4-r2-rN-f2-hidroxi--2-feniletillaminoletill

Utilizando um procedimento idêntico ao descrito no Exemplo 1 a reacção de feniloxiacetato de (R)-etilo 4-(2-[N—[2— -(hidroxi-2-feniletil]-N-[1,1-dimetiletoxicarbonil]amino]etil] (1,369, 3,2 mMolj com ácido trifluoroacético (3,6g, 32 mMoí) deu um óleo amarelo. A cromatografia sobre gel de silica eluindo com acetato de etilo contendo 5% trietilamina forneceu uma goma incolor. Esta foi dissolvida em acetato de etilo e tratada com cloreto'-de'hidrogénio seco. 0 arrefecimento para -15°C produziu o' composto em titulo como um sólido branco, pf.= 161,2°C. 40 - *

1H rmn δ (DMSO-dJ Ο 9,1-8,3 (2Η, br.m, permutado, com D20), 7,4-7,3 (4H, m) , 7,33-7,31 (1H, m) , 7,17 (2H, d), 6,89 (2H, d), 6,17 (1H, d,= permutado com D20), 4,98-4,94 (1H, m), 4,77 (2H, s), 3,69 (3H, s), 3,18-3,11 (3H, m), 3,05-2,89 (3H, m).

[a]

-30,2° (c= 1,3 etanol) EXEMPLO 4

Hidrocloreto de feniloxiacetato de fR)-Metilo 4-Γ 2-ΓΝ-Γ2-(3--bromofenil-2-hidroxietil]amino1etill

HO

OCH2COl,CH3

Utilizando um processo idêntico ao descrito no Exemplo 1 a reacção de feniloxiacetato de (R)-etilo 4-(2-[N-[2-(3-bromo-fenil)-2-hidroxietil]-N-[1,l-dimetiletoxicarbonil]amino]etil] (2,78g, 5,5 mMol) com ácido trifluoroacético (4,7g, 41 mMol) deu, depois da cromatografia sobre gel de silica eluindo com dicloro-metano contendo metanol (0-3%), um óleo incolor. Este foi 41 -

dissolvido em acetato de etilo e tratada com cloreto de' hidrogénio. 0 solvente foi evaporado e a espuma residual cristalizou a partir de acetato de etilo/metanol a -15°c para produzir o composto em título como um sólido branco, -pf ,=?146r7°C. 2H rmn δ (DMSO-dg) 9,0-8,8 (2H, br.m, permutado com D20), 7,60 (1H, s), 7,52 (1H, dxd) , 7,51-7,34 (2H, m) , 7,17 (2H, d) , 6,90 (2Η, d), 6,30 (1H, d,, permutado com D^O), 4,97· (1H, dxd), 4,77 (2H, s), 3,69 (3H, s), 3,25-3,10 (3H, m), 3,03 (1H, dxd), 2,94-2,89 (2H, m). -22,4° (c= 2,12 metanol) EXEMPLO 5

Hidrocloreto de feniloxiacetato de (R)-Metilo 4-r2-rN-r2-hidroxi--2-f3-trifluorometilfeniletillaminoletill

HO

OCHjCC^CHa

Utilizando um processo idêntico ao descrito no Exemplo 1 a reacção de feniloxiacetato de (R)-metilo 4-(2-[N-[2-hidroxi--2-(3-trifluorometilfenil)etil]-N-[1,l-dimetiletoxicarbonil]ami- 42 -

nojetil] (6,65g, 13,4 mMol) com ácido trifluoroacético (7,7g, 68 mMol) deu um óleo incolor. A cromatografia sobre gel de silica eluindo com acetato de eitlo contendo 5% metanol seguida de conversão no sal hidrocloreto com cloreto de hidrogénio seco em metanol e a cristalização, deu o composto em título. pf.= 147,8°C. XH rmn δ (DMSO-dg) 9,51 (1H, br.s, permutado com D^O), 9,09 (1H, br.s, permutado com D20), 7,69 (4H, br.m), 7,18 (2H, d), 6,89 (2H, br.s, permutado com D20), 5,17 (1H, br.d), 4,77 d), 6,46 (1H, (2H, s), 3,70 , S), 3,43-2,95 (6H, m). -25,3° (c= 2,0 metanol) DADOS FARMACOLÓGICOS Lipólise

Foram preparadas adipócitos de ratazanas brancas por digestão colagenase como descrito por Rodbell (1964) com a modificação de Honnor et al. (1985), na qual adenosina foi incluída na preparação para inibir a lipólisis basal.

Lipólisis estimulada pelo agonista β foi medida durante 30 minutos num meio onde a concentração de adenosina foi controlada; o meio incluía (-)-N6-(2-fenilisopropil)adenosina (100 nM) + deaminase como descrito por Honnor et al. (1985) A incubação foi parada por adição de ácido tricloroacético (0,2 ml de 10% p/v) por 1 ml de células. 0 glicerol foi medido pelo método fluorimétrico de Boobis e Maugham (1983).

Referências 1. Rodbell M. (1964) J. Biol. Chem. 239, 375-380 2. Honnor R. C., Dhellon G. S. e Londos C. (1985) J. Biol,

Chem. 3. Boobis L. H. e Maugham R. J. (1983) Clinica Chemica Acta 132, 173-179.

Actividade agonista na ratazana adrenoceptor β.^ e in vitro Agonismo a adrenoceptor E>1

Ratazanas fêmeas Sprague-Dawley (150-250 mg) foram sacrificadas por pancada na cabeça e sangradas. Foram removidos os átrios direitos com batimento espontâneo pelo método de Broadley e Lumley (1977) e colocados num recipiente de vidro para tecidos. Cada tecido foi colocado em 30 ml de banho de orgãos a 37°C contendo uma solução de Kreb-Henseleit. Cada átrio foi ligado a um transdutor isométrico através de um fio de algodão e colocado sob uma tensão de repouso inicial de 1 g. Foram obtidos registos da frequência dos átrios com batimento espontâneo a partir de um sinal da tensão utilizando um medidor de frequências Lectromed Tipo 4522. Todos os vestígios foram gravados num gravador de gráficos Lectromed M4. Foram então adicionados ao meio Kreb de uma maneira cumulativa agonistas de Adrenoceptores β e os resultados foram expressos como um aumento de percentagem na frequência dos átrios.

Agonismo a adrenoceptor B2

Cornos uterinos de ratazanas foram removidos e - 44 - ·>χ - bisseccionados longitudinalmente. Cada tecido foi preso a um recipiente de vidro de tecidos e colocado numa solução de Kreb--Henseleit em 30 ml de um banho de orgãos como anteriormente. Os tecidos foram colocados sob uma tensão de repouso de 1 g e deixados até atingirem o equilíbrio. Cada faixa uterina foi pré contraída pela adição de 40 mM K+ ao banho para produzir uma contracção tónica estável. Foram então adicionados ao banho de uma maneira cumulativa os agonistas β e os resultados foram expressos percentagem de inibição da contracção.

Foram calculados Agonistas EC5Q (átrios) e IC50 (uterinos) como a concentração de agonistas que produzem 50% do seu aumento máximo na frequência dos átrios ou relaxação uterina. A actividade intrínseca relativa expressa como as respostas máximas aos agonistas do teste relativamente à isoprenalina (=1,0) nos átrios e nos úteros.

Referências K.J. Broadley & Lumley (1977) Br. J. Pharmacol. 59.51

Ki(nM)

Exemplo 2 β1 7510 β2 3656

Lisboa, 17 de Novembro de 1992

Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 10-A 3* 1200 LISBOA

Claims

REIVINDICAÇÕES: lâ - Processo para a preparação de um composto de formula (I);

ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, em que R representa hidrogénio, halogénio ou CF3; caracterizado por compreender: a) a desprotecção de um composto de fórmula (IA): 2 x yOR R

(IA) , ^ y em que R e definido em relação a formula (I), R representa hidrogénio ou um grupo de protecção de hidroxi, R^ representa hidrogénio ou um grupo de protecção de azoto e R representa hidrogénio ou um grupo de protecção, contando que pelo menos um XV z de R , RJ ou R representa um grupo de protecção; ou b) reacção de uma forma activada de um composto de fórmula (II) :

(II) em que R é como definido em relação à fórmula (I), Rx representa hidrogénio ou um grupo de protecção de hidroxi e R^ representa hidrogénio ou um grupo de protecção de azoto; com um composto de fórmula (III): L-CH2COORz (III) 2 φ em que R é hidrogénio ou um grupo de protecção e L representa um grupo dissociável; e depois disso se for necessário efectuar um ou mais dos seguintes passos opcionais: (i) remoção de qualquer grupo de protecção: e (ii) preparação de um sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável de um composto de fórmula (I) ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável. 2^ - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracte-rizado por se preparar um composto em que R é substituído na posição 3 no anel fenilo. 3a - Processo de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2, caracterizado por se preparar um composto em que R representa halogénio ou CF3· 4 a - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 3, caracterizado por se preparar um composto em que R representa cloro. 5a - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 4, caracterizado por se preparar um composto em que R representa 3-cloro. 4

6â - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 5, caracterizado por se preparar um composto na configuração R. 7a - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se prewparar (R)-metil 4-[2-[N-[2-(3-clorofenil)-2-hi-droxietil]amino]etil ]-feniloxiacetato; ou Ácido (R)-4-[2-N-[2-(3-clorofenil)-2-hidroxietil]amino]etil]feno-xiloxi acético; ou, como apropriado, um seu sal, éster ou amida farmaceuticamenmte aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável. 8a - processo para a preparação de uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, e um veiculo farmaceuticamente aceitável, caracterizado por se misturar um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, com um o veículo farmaceuticamente aceitável.
93 - Utilização de um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente' aceitável; ou um seu solvato farmaceuticamente aceitável, para a preparação de um medicamento para o tratamento de hiperglicémia e/ou para a preparação de um medicamento para o tratamento da obesidade e/ou para o tratamento e/ou profilaxia de artereoesclerose e/ou para o tratamento de hiperinsulinémia.
103 - Porcesso para a preparação de uma formulação de pré mistura aceitável em veterinária que compreende um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida aceitável em 5 veterinária; ou um seu solvato aceitável em veterinária, em associação com um seu veículo aceitável em veterinária, caracte-rizado por compreender a mistura de um composto de fórmula (I), ou um seu sal, éster ou amida aceitável em veterinária; ou um seu solvato aceitável em veterinária com um veículo aceitável em veterinária. Lisboa, 17 de Novembro de 1992

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