Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania soli estrów kwasu polisiarkowego z farmakologicznie tolerowanymi zasadami.Sole metali alkalicznych, metali ziem alkalicznych, nizsze aminosole albo nizsze alkanoloaminosole estru kwasu Aescynopolisiarkowego oddzielnie albo w mieszaninie ze soba nadaja sie do zastosowania jako srodki lecznicze.Saponine Aescyne otrzymuje sie jako farmakologiczna substancje czynna o przeciwwysiekowej charakte¬ rystyce dzialania z nasion kasztanowca i w szerokim zakresie stosuje sie w medycynie i weterynarii jako srodek przeciwwysiekowy. Czysta kwasna krystaliczna Aescyna jest jednak tylko bardzo malo rozpuszczalna w wodzie, przez co ograniczona jest mozliwosc zastosowania terapeutycznego tej cennej substancji czynnej.Zadaniem wynalazku jest znalezienie pochodnej Aescyny, która przy silnie podwyzszonej rozpuszczalnosci w wodzie odznacza sie w szczególnosci wybitnym wchlanianiem przez skóre i podobnymi wlasciwosciami jak heparyna lub heparynoidy i dlatego specjalnie nadaje sie w szczególnosci do stosowania zewnetrznego np. w ma¬ sciach albo zelach o dzialaniu usuwajacym obrzeki i specjalnie przeciwzakrzepowym.Znaleziono, ze przez siarczanowanie Aescyny tworzy sie kwasny ester kwasu polisiarkowego saponiny, który po przeprowadzeniu w farmakologicznie przydatna sól ma w wysokim stopniu zadana kombinacje wlasci¬ wosci.Przedmiotem wynalazku jest zatem sposób wytwarzania estrów kwasu Aescynopolisiarkowegoi ich farma¬ kologicznie tolerowanych soli, polegajacy na tym, ze Aescyne, rozpuszczona w organicznym rozpuszczalniku o wlasciwosciach donatora elektronów, poddaje sie reakcji z kwasem chlorosulfonowym w nadmiarze i otrzyma¬ ny przy tym kwasny ester kwasu Aescynopolisiarkowego przeprowadza sie w znany sposób w farmakologicznie tolerowana sól.Jako rozpuszczalniki organiczne stosuje sie korzystnie pirydyne, dioksan albo formamid. Korzystny zakres temperatury dla reakcji siarczanowania wynosi 50—100° C, w szczególnosci stosuje sie zakres temperatury2 99630 70—90°C. Bardziej korzystnie rozpuszcza sie najpierw kwas chlorosulfonowy przy intensywnym chlodzeniu w pirydynie i nastepnie w temperaturze reakcji zadaje sie Aescyna, rozpuszczona równiez w nadmiarze pirydyny.Produkt wyjsciowy krystaliczna kwasna Aescyne mozna np. wytwarzac przez ekstraKcje rozdrobnionych nasion Aesculus hippocastanum za pomoca mieszajacych sie z woda rozpuszczalników organicznych, w szczegól¬ nosci alkoholi Ci —C3, korzystnie metanolu, etanolu i ich mieszanin z woda, np. 65% metanolu (1 czesc materia¬ lu roslinnego na 10 czesci srodka ekstrakcyjnego) i obróbke ptrzymanego w ten sposób ekstraktu za pomoca kwasnego wymieniacza kationów. Otrzymuje sie przy tym wodny alkoholowy roztwór kwasnej Aescyny, z której przez zatezenie uzyskuje sie kwasna krystaliczna Aescyne. Otrzymana Aescyna ma temperature topnienia 222—227°C, wartosc skrecalnosci —28° ± 2 i pKs = 4,7. Wzór sumaryczny C55H87024, wzór strukturalny jest przedstawiony na zalaczonym rysunku.Podane we wzorze reszty cukrowe i kwasowe moga sie zmieniac, porównaj G.Wulf i RTschesche, Tetrahe- dron 25, 415 (1969). Otrzymana w ten sposób Aescyna ma zawsze taki sam sklad procentowy.W sposobie wedlug wynalazku siarczanowanie korzystnie kontynuuje sie tak dlugo, az okolo 12% orga¬ nicznie zwiazanej siarki, w szczególnosci 11,2—14,4% wagowych, a korzystnie 12,8% wagowych organicznie zwia- - zanej siarki, kazdorazowo w przeliczeniu na substancje bezwodna, zostanie wprowadzone do czasteczki. Produk¬ ty wytworzone sposobem wedlug wynalazku zawieraja z reguly 7—9, korzystnie okolo 8, grup estru kwasu siarkowego w czasteczce Aescyny. Odpowiednie ilosci reagentów do przeprowadzenia procesu wedlug wynalazku wynosza np. kazdorazowo na 1 czesc wagowa Aescyny 2,8—3,5, korzystnie 3,0 czesci objetosciowe kwasu chlorosulfonowego i 8—20, korzystnie 10—15 czesci objetosciowych, rozpuszczalnika organicznego, w szczegól¬ nosci pirydyny. Nieoczekiwanie okazalo sie, ze w tych wymienionych warunkach reakcji mozna bylo otrzymac produkt siarczanowania Aescyny o nadzwyczaj wysokiej skutecznosci farmakologicznej. Produkty o innym stop¬ niu siarczanowania wykazuja niedostateczne dzialanie biologiczne.Produkt siarczanowania Aescyny mozna uzyskac przez wytracenie za pomoca alkoholi, w szczególnosci etanolu, z mieszaniny reakcyjnej. Przeprowadza sie go nastepnie w znany sposób za pomoca farmakologicznie tolerowanej zasady w odpowiednia sól, np. za pomoca wodnego lugu sodowego w sól sodowa. Po oczyszczeniu otrzymuje sie sól sodowa estru kwasu polisiarkowego w stalej postaci jako bialobrunatnawy proszek o tempera¬ turze rozkladu powyzej 186°C. Sól jest latwo rozpuszczalna w wodzie, w metanolu trudno rozpuszczalna i w 90% etanolu praktycznie nierozpuszczalna. Ta sól sodowa estru kwasu Aescyno-polisiarkowego, oznaczona dalej krótko jako Aescyno-PSNa, jest szczególnie przydatna do stosowania przez skóre do leczenia umiejscowio¬ nych obrzmiewan wskutek zmian zapalnych albo zwyrodnieniowych i uszkodzen urazowych. Aescyno-PSNa wykazuje przy tej formie stosowania zewnetrznego wyrazne wspieranie krazenia krwi przy jednoczesnym hamo¬ waniu krzepniecia krwi i dzialaniu przeciwzapalnym. Nadaje sie ona tym samym w szczególnosci do zastosowa¬ nia w kremach, zelach, masciach, nalewkach itp. o dzialaniu przeciwzakrzepowym i przeciwzapalnym. Szczegól¬ nie celowe moze byc wspólne zastosowanie z nie-siarczanowana Aescyna. Specyficzne przeciwwysiekowe wlasci¬ wosci tej saponiny uzupelniaja sie w doskonaly sposób z wlasciwosciami pizeciwzapalnymi i przeciwzakrzepowym mi pochodnej Aescyny wytworzonej sposobem wedlug wynalazku.W przypadku Aescyno-PSNa chodzi o heparynoid, to znaczy substancje czynna o dzialaniu w rodzaju hepa¬ ryny. W porównaniu z heparyna odznacza sie Aescyno-PSNa tym, ze ma tylko okolo 1/10 ciezaru czasteczkowe¬ go heparyny i dlatego penetruje znacznie latwiej przez krew. Aescyno-PSNa dzialanie tylko przeciwzakrzepowo i fibrinolitycznie, lecz wplywa równiez na regeneracje lacznotkankowych substancji podstawowych i uzupelnia przeciwzapalny efekt Aescyny. Zaklada sie przy tym, ze heparyna a szczególnie maloczasteczkowy heparynoid przez zlóg w substancje cementowe tkanki lacznej przeciwdziala wzrostowi stopnia polimeryzacji i tym samym gestosci elastycznych wlókien i stopien polimeryzacji moze obnizyc w pewnym sensie do stopnia polimeryzacji stadium wczesnego. Oznaczaloby to depolimeryzacje lub substytucje lacznotkankowej substancji podstawowej.Aescyno-PSNa przyspiesza przez uwodnienie zdolnosc do pecznienia tkanki krezkowej mezenchymalnej zubozo¬ nej w estry kwasu siarkowego.Toksycznosc Aescyno-PSNa jest bardzo mala. Przy okresleniu ostrej toksycznosci u myszy wedlug injekcji Lv. (sposób wedlug Prigge'a, R.W.Schafera w Arch.exper. Path. und Pharmakol. 191, 281, 1939 w polaczeniu z L.C.Millerem i M.L.Tainter w Proc. Soc. Exper. Biol. and Med. 57, 261 (1944) wynosi DL50 2,1+°\\ g/kg Lv.Odpowiednia wartosc DL50 dla badan na szczurach wynosi 1,2* g'^ g/kg i.v. W badaniach zgodnosci na króliku wedlug injekcji i.v. dobrze znoszone sa 100-500 mg/kg i.v. Aescyno-PSNa przez zwierzeta doswiadczalne.Zgodnosc skóry Aescyno-PSNa jest bardzo dobra. Przeprowadzono ja na swiniach karlowatych. Wartosci surowicy, które wystapily u poszczególnych zwierzat i miedzy obydwoma zwierzetami mieszcza sie w obrebie znanego dla tych swin karlowatych fizjologicznego zakresu wahania. Ogólna ilosc bialka okolo 6,4, albumina99630 3 55,8-61,6, globuliny ax 1,7-3,7, a2 10,2-14,7, a3 3,2-4,2, 0 7,2-10,2, y 13,2-15,2, próba tymolu 0,5-1,0, ogólna ilosc cholesterolu 54-94, wolny cholesterol 27—40, estrowy cholesterol 14-56, wolny cholesterol/estro¬ wy cholesterol 0,68—2,9, ester cholesterolu 23,4—93,5, ogólna ilosc fosfatydów 84-94,5, ogólna ilosc choleste¬ rolu/fosfatydów 0,64—1,03, fosfor lipidowy 3,6-4,0, zestryfikowane kwasy tluszczowe 114-150, ogólna ilosc tluszczu 233-265, zelazo 93,0-118,8, GOT 22,9-31,9, GPT 17,2-32,1.Badania doswiadczalne skutecznosci, szczególnie resorpcji skóry i nastepnego dzialania przeciwzapalnego jak równiez hamowania krzepniecia krwi przeprowadzono miedzy innymi w próbie krwiaków, jak równiez przez pomiar temperatury skóry przy Periphlebitis i wyznaczenie czasów resorpcji, na znormalizowanych podskórnych krwiakach. W próbie krwiaków wybiera sie babel sródskórny (fizjologiczny roztwór soli kuchennej), którego intensywnosc przed i po traktowaniu Aescyno-PSNa w zaleznosci od czasu oznacza sie za pomoca wielokrotnego przyrzadu pomiarowego odbiciowofotometrycznie. Okazalo sie przy tym. ze preparaty zawierajace Aescy¬ no-PSNa, np. w postaci zelu, tak samo jak i takie, które dodatkowo zawieraja niesiarczanowana Aescyne, nadaja sie dobrze do resorpcji powierzchniowo polozonych krwawien w najszerszym sensie. Równiez przy pomiarach temperatury skóry w ogniskach zapalnych, tak samo jak przy oznaczaniu czp^ów resorpcji sztucznej krwiaków podwstrzykiwanych, wypadly wyniki jednoznacznie na korzysc Aescyno-PSNa.P r z.y k l a d. Do 8,5 litra pirydyny wprowadza sie dobrze mieszajac i intensywnie oziebiajac powoli 2,5 litra kwasu chlorosulfonowego. Utrzymuje sie przy tym temperature ponizej 50°C. Po wprowadzeniu calego kwasu chlorosulfonowego ogrzewa sie do temperatury 75°C, nastepnie dodaje sie 0,8 kg Aescyny rozpuszczonej w 2 litrach pirydyny. Nastepnie ogrzewa sie do temperatury 85°C i miesza dalej w tej temperaturze prawie 10 minut. Mieszanine reakcyjna wprowadza sie nastepnie do 70 litrów ogrzanego wstepnie etanolu i potem jak najszybciej oziebia do niskiej temperatury, korzystnie do co najmniej —10°C. Utworzony ester otrzymuje sie jako zabarwiona miodowo substancje o konsystencji lepkocieklej. Znajdujaca sie ugory mieszanine etanolu i pirydyny odlewarowuje sie i ester przemywa dodatkowo kilkakrotnie etanolem. Oczyszczony ester rozpuszcza sie calkowicie w wodzie i nastawia 2 n wodnym lugiem sodowym na wartosc pH 7,2. Przez wytracenie alkoho¬ lem i oczyszczenie otrzymuje sie Aescyno-PSNa w stalej postaci soli. Produkt koncowy zawiera 12,8% wagowych organicznie zwiazanej siarki. Odpowiednio mozna przeprowadzic przyklady z dioksanem albo formamidem jako rozpuszczalnikami organicznymi o wlasciwosciach donatora elektronów.Do utworzenia soli stosuje sie korzystnie wodorotlenki i weglany metali alkalicznych i metali ziem alkalicz¬ nych jak równiez nizsze aminy i nizsze alkanoloaminy. PL PL PL PL PL PL PL