PL97829B1 - Sposob wyodrebniania czystej erytromycyny a - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wyodrebnia¬ nia czystej erytromycyny A wolnej od erytromy¬ cyn B i C oraz anhydroerytromycyny A. W pro¬ cesie biosyntezy produkowane sa trzy rodzaje erytromycyn A, B i C, które posiadaja malo zróznicowana budowe chemiczna, ale wykazuja znaczne róznice w aktywnosci biologicznej.W trakcie procesu wytwarzania powstaje rów¬ niez produkt biologicznie nieaktywny, anhydroery- tromycyna A. Erytromycyna B i C charakteryzuja sie nizsza aktywnoscia wykazujac odpowiednio 85% i 20% aktywnosci biologicznej erytromycyny A i sa niepozadanymi skladnikami preparatów lecz¬ niczych tego antybiotyku.Znane i ogólnie stosowane metody wyodrebnia¬ nia i oczyszczania erytromycyny nie daja skutecz¬ nego wyizolowania odmian B i C jak równiez an¬ hydroerytromycyny A z produktu przeznaczonego do wytwarzania form farmaceutycznych.Istnieje mozliwosc rozdzialu erytromycyny A od erytromycyn B i C na drodze krystalizacji pro¬ duktu z nitrometanu (amerykanski opis patentowy nr 2 823 203) lub chloroformu {niemiecki opis paten¬ towy, NRD nr 82 351). Sposoby te nie znajduja za¬ stosowania w powiekszonej skali, zwlaszcza tech¬ nicznej ze wzgledu na niska wydajnosc procesu jak równiez wlasciwosci fizykochemiczne oraz tok¬ sycznosc rozpuszczalników.Obecnie stwierdzono, ze istnieje mozliwosc wy¬ odrebnienia z surowego produktu czystej erytro- mycyny A, wolnej od erytromycyn B i C oraz za¬ nieczyszczen stanowiacych produkty rozkladu tych antybiotyków.Sposobem wedlug wynalazku mieszanine erytro¬ mycyn A, B i C oraz anhydroerytromycyny A pod¬ daje sie reakcji w rozpuszczalniku organicznym, ko¬ rzystnie w bezwodnym acetonie z kwasami tlusz¬ czowymi o liczbie atomów wegla C2 do CM, ko¬ rzystnie z kwasem stearynowym, a otrzymana sól erytromycyny krystalizuje sie z rozpuszczalnika organicznego, korzystnie z bezwodnego acetonu w temperaturze —10° i rozklada do wolnej erytro¬ mycyny za pomoca soli metali wielowartosciowych w rozpuszczalniku organicznym lub w srodowisku wodnoorganicznym, albo za pomoca wodorotlenków metali wielowartosciowych w zawiesinie wodnej.Produkt wytworzony sposobem wedlug wyna¬ lazku, charakteryzuje sie bardzo duza czystoscia, a badanie metoda chromatografii cienkowarstwo¬ wej wykazuje obecnosc tylko erytromycyny A.Przyklad I. 138 g suchej, surowej zasady ery¬ tromycyny o aktywnosci biologicznej 665 j/mg za¬ wierajacej 5% erytromycyny C, 7% erytromycyny B oraz 10% anhydroerytromycyny A rozpuszcza sie w 690 ml acetonu i klaruje przez plytke azbestowa.Do klarownego przesaczu dodaje sie 69 g kwasu stearynowego, 3 g wegla aktywnego, ogrzewa do temperatury wrzenia i saczy przez plytke azbe¬ stowa. Klarowny roztwór stearynianu erytromy¬ cyny chlodzi sie do temperatury —10° i miesza 97 82997 829 3 w tej temperaturze 3 godziny. Otrzymuje sie 124 g stearynianu erytromycyny o aktywnosci 645 j/mg pozbawionego erytromycyny C i anhydroerytromy- cyny A oraz zawierajacego sladowa ilosc erytromy¬ cyny B.Otrzymany stearynian erytromycyny zawiesza sie w 2 1 wody de jonizowanej, ogrzewa do tempe¬ ratury 55—60° i alkalizuje wodna zawiesina wodo¬ rotlenku wapniowego do stalej wartosci pH 10.Zawiesine miesza sie przez 20 minut, chlodzi do temperatury pokojowej i koryguje kwasem octo¬ wym wartosc pH do 7,0.Po godzinie mieszania saczy sie osad stearynianu wapniowego. Z przesaczu wyodrebnia sie zasade erytromycyny przez sól tiocyjanowa lub przez za\- kalizowanie w temperaturze 50° 20%-owym wegla¬ nem sodowym do wartosci pH 9,8—110,0.Otrzymuje sie 78 g chromatograficznie czystej erytromycyny A o temperaturze topnienia 130—132°, aktywnosci 980 j/mg w przeliczeniu na substancje bezwodna. Wydajnosc izolacji czystej erytromy¬ cyny A liczona na jednostki aktywnosci biolo¬ gicznej wynosi 83%.Przyklad II. 122 g suszonej erytromycyny o aktywnosci biologicznej 577 j/mg, zawierajacej % erytromycyny C, 7% erytromycyny B oraz 10% anhydroerytromycyny A rozpuszcza sie w 610 ml acetonu i klaruje przez plytke azbestowa. Do kla¬ rownego przesaczu dodaje sie 50 g kwasu steary¬ nowego, 2 g wegla aktywnego, ogrzewa do tempe¬ ratury wrzenia i saczy przez plytke azbestowa.Klarowny roztwór stearynianu erytromycyny chlo¬ dzi sie do temperatury —10* i miesza w tej tem¬ peraturze 3 godziny.Otrzymuje sie 99 g krystalicznego stearynianu erytromycyny o aktywnosci biologicznej 625 j/mg pozbawionego erytromycyny C i anhydroerytromy¬ cyny A oraz zawierajacego sladowa ilosc erytromy¬ cyny E.Osad stearynianu rozpuszcza sie w 1180 ml me¬ tanolu, dodaje 39 g szesciowodnego chlorku wap¬ niowego rozpuszczonego w 100 ml metanolu i mie¬ sza przez godzine. Po odsaczeniu stearynianu wapniowego do przesaczu dodaje sie 15 g tiocyja- nianu potasowego oraz 3 1 wody. Po rozlozeniu tjocyjanianu erytromycyny otrzymuje sie 57 g chro¬ matograficznie czystej erytromycyny A o tempera¬ turze topnienia ;13Q—d35°, aktywnosci biologicznej 965 j/mg.Wydajnosc izolacji czystej erytromycyny A li- 40 45 50 czona na jednostki aktywnosci biologicznej wynosi 81%.Przyklad III. 350 g surowej erytromycyny o aktywnosci biologicznej 515 j/mg, zawierajacej % erytromycyny Cf 4% erytromycyny B oraz 14% anhydroerytromycyny A rozpuszcza sie w 1750 ml metanolu i klaruje przez plytke azbestowa.Do klarownego przesaczu dodaje sie 143,5 g kwasu laurynowego oraz 4 g wegla aktywnego, ogrzewa sie do temperatury wrzenia i saczy przez plytke azbestowa. Do klarownego przesaczu dodaje sie 1750 ml wody de jonizowanej i chlodzi do 15°.Otrzymany laurynian erytromycyny zawiesza sie w 3 1 wody, ogrzewa do temperatury 55—60°, do¬ daje 6 g octanu wapniowego i alkalizuje wodna za¬ wiesina wodorotlenku wapniowego do stalej war¬ tosci pH 10,0. Zawiesine miesza sie przez 20 minut, chlodzi clo temperatury pokojowej i koryguje kwasem octowym wartosc pH do 7,0.Po godzinie mieszania saczy sie osad stearynianu wapniowego, a klarowny przesacz alkalizuje sie %-O/wym wodnym roztworem weglanu sodowego do wartosci p(H 9,8—il0,0 i ogrzewa do temperatury 45—50°. Wytracony osad wolnej erytromycyny A saczy sie, przemywa woda i suszy pod zmniejszo¬ nym cisnieniem w temperaturze 50—55°.Otrzymuje sie 117 g chromatograficznie czystej erytromycyny A o temperaturze topnienia 135— —138°, aktywnosci biologicznej 950 j/mg.Wydajnosc izolacji czystej erytromycyny A li¬ czona na jednostki aktywnosci biologicznej wyno¬ si 63%. PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe .Sposób wyodrebniania czystej erytromycyny A wolnej od erytromycyn B i C oraz anhydroerytro¬ mycyny A, znamienny tym, ze erytromycyne A za¬ nieczyszczona erytromycynami B i C oraz anhydro- erytromycyna A poddaje sie reakcji w rozpuszczal¬ niku organicznym korzystnie w acetonie z kwasami tluszczowymi o liczbie atomów wegla od C2 do CUy korzystnie z kwasem stearynowym, a otrzymana sól erytromycyny krystalizuje sie z rozpuszczalnika organicznego korzystnie z acetonu w temperaturze —10° i rozklada do wolnej erytromycyny A za po¬ moca soli metali wielo wartosciowy eh w rozpusz¬ czalniku organicznym lub w srodowisku wodno- -organicznym albo za pomoca wodorotlenków me¬ tali wielo wartosciowy eh w zawiesinie wodnej. LDA - Zaklad 2, Typo - zam. 1148/78 -118 egz. Cena zl 45.— PL