PL93184B1 - - Google Patents

Description

Opis patentowy opublikowano: 15.12.1977 93184 MKP Cl2d 9/20 Int. Cl2.Cl 2D 9/20 CZYTELNIA Urzed* hfeitt tom* •• « l« •** Twórcywynalazku: Jerzy Meller, Halina Wosko, Ewa Garstka, Teresa Zakrzewska Uprawniony z patentu: Kutnowskie Zaklady Farmaceutyczne ,,Polfa", Kutno (Polska) Sposób otrzymywania stezonych koncentratów nizyny Wynalazek dotyczy sposobu otrzymywania stezonych koncentratów nizyny.Z opisu patentowego nr 68835 znany jest sposób otrzymywania stezonych koncentratów nizyny z brzeczki po hodowli szczepu nizynotwórczego Streptococcus lactis na pozywkach, zawierajacych mleko, serwatke, syrop ziemniaczany, glukoze, hydrolizat pepsynowy hodowli paciorkowców z grupy serologicznej N po zakonczonej fermentacji, przeprowadzonej w celu wytworzenia nizyny, na drodze zakwaszenia kwasem solnym do pH= 3,3 — 3,7, ogrzania do temperatury 60—120°C, schlodzenia do temperatury 25°C i wydzielenia osadu bialkowego. Nastepnie brzeczke po wydzieleniu osadu bialkowego poddaje sie spienieniu, a po osuszeniu piany uzyskuje sie wysoko stezony roztwór nizyny i brzeczke wyczerpana, za pomoca której ekstrahuje sie uprzednio wydzielony osad bialkowy przez rozmieszanie i odsaczenie, po czym otrzymany ekstrakt poddaje sie spienieniu i uzyskuje frakcje nizynowa, która laczy sie z frakcja, uzyskana z procesu glównego.Z polaczonych obu frakcji nizynowych wysala sie nizyne przy pH = 3,3 — 3,7, a nastepnie odwirowuje i odwadnia przez trzykrotne rozmieszanie z oziebionym ponizej zera acetonem. Osad nizyny po odsaczeniu suszy sie pod próznia w temperaturze ponizej zera. Sposób ten jednak na etapie wydzielania nizyny z roztworów wodnych po wysoleniu posiada wady, poniewaz wydzielajaca sie nizyna stanowi drobny i slabo osadzajacy sie osad, i nie nadaje sie do odwirowywania na zwyklej wirówce.Znane sa takze jeszcze inne sposoby otrzymywania stezonych koncentratów nizyny na etapiejej wydziela¬ nia. W opisie patentowym Wielkiej Brytanii nr 683423 stezony roztwór nizyny wysala sie i wytracony osad oczyszcza na drodze krystalizaqi z 70-procentowego wodnego roztworu acetonu.Wedlug szwajcarskiego opisu patentowego nr 370794 stezony wodny roztwór nizyny wysala sie i wydzielo¬ ny osad rozpuszcza w metanolu, a nastepnie z metanolowego roztworu wydziela sie osad nizyny przez dodanie acetonu.WUllmanns Encykl. der tech.Chemie, tom 3 z 1953 r. str.750 opisany jest sposób, wedlug którego brzecz¬ ke pofermentacyjna z nizyna zakwasza sie do pH = 2,0, stale zanieczyszczenia odwirowuje, z przesaczu wyeks- trahowuje nizyne za pomoca chloroformu, ekstrakt chloroformowy wydziela, miesza go z etanolem i powstala mieszanine odstawia do krystalizacji.2 93184 Wszystkie te znane sposoby maja jednak wady, polegajace badz na trudnosci wydzielania osadu aktywnego z roztworów wodnych, badz tez sa kosztowne i pracochlonne w przypadku zastosowania rozpuszczalników.Wynalazek ma na celu takie rozwiazanie zagadnienia, które by umozliwilo wydzielanie nizyny po jej wysoleniu z frakcji nizynowej w postaci latwo osadzajacego sie osadu, nadajacego sie do odwirowywania na zwyklych wirówkach.Stwierdzono, ze wady i niedogodnosci mozna ominac, jezeli do cieczy, otrzymanej z osuszonej piany nizynowej, po wysoleniu nizyny wprowadzi sie przy mieszaniu podstawiony atomami chloru weglowodór o za¬ wartosci 1-5 atomów wegla w czasteczce, na przyklad chloroform lub trójchloroetylen, w ilosci co najmniej 0,5 czesci wagowych na 100 czesci wagowe uzyta do wysolenia cieczy, calosc miesza, odstawia na kilka godzin i produkt wyodrebnia w znany sposób. Sposób wedlug wynalazku ulatwia koagulacje drobnych czasteczek wydzielajacej sie nizyny, dzieki czemu zwieksza sie jej ciezar wlasciwy i uzyskany osad mozna latwo odwirowac na zwyklej wirówce. r^*~,Nizej podane przyklady wyjasniaja blizej istote wynalazku, nie ograniczajacjego zakresu. f * Przyk lad I. 100 litrów wodnego roztworu nizyny o aktywnosci 75000 j/ml,uzyskanego w wyniku fermentacji szczepu Streptococcus lactis na mleku, oddzielenia bialka i zageszczenia przez wypienienie, poddaje sie^wltfoteniu^jprzez dodatek 25 kg chlorku sodu, a nastepnie dodaje 3 kg chloroformu i miesza w ciagu 15 minut, j^raym-oóitawia na szesc godzin. Po tym czasie osad odwirowuje sie na wirówce sedymentacyjnej i odwadnia przez zawieszenie W acetonie. Uzyskuje sie 0,876 kg koncentratu nizyny o mocy 8,5* 106 j/g.Przyklad II. 100 litrów wodnego roztworu nizyny o aktywnosci 75000 j/ml, uzyskanego, jak w przykladzie I, wysala sie przez dodatek 25 kg chlorku sodu, a nastepnie dodaje 4 kg trójchloroetylenu i calosc miesza w ciagu 15 minut, po czym odstawia na szesc godzin. Po tym czasie aktywny osad nizyny odwirowuje sie na sedymentacyjnej wirówce i odwadnia przez zawieszenie w acetonie. Otrzymuje sie 0,870 kg koncentratu nizyny o mocy 8,5-106 j/g. PL

Claims (1)

1. Zastrzezeniepatentowe Sposób otrzymywania stezonych koncentratów nizyny z brzeczki po hodowli szczepu nizynotwórczego Streptococcus lactis na pozywkach, zawierajacych mleko, serwatke, syrop ziemniaczany, glukoze, hydrolizat pepsynowy hodowli paciorkowców z grupy serologicznej N, na drodze zakwaszenia jej do pH = 3,3 — 3,7 ko¬ rzystnie 3,5, podgrzania do temperatury 60—120°C, najkorzystniej 95°C, oziebienia, odsaczenia wytraconego osadu i wymycia go brzeczka wyczerpana, pozbawiona bialka i nizyny, a nastepnie na drodze poddania wyplenie¬ niu osobno brzeczki, uzyskanej po odsaczeniu bialka i zawierajacej nizyne, i osobno ekstraktu, uzyskanego z wymywania wytraconego bialka, poprzez zamiane calej ilosci cieczy w piane droga zmieszania z powietrzem za pomoca mechanicznej wytwornicy piany, osuszenia tak otrzymanej piany przez odstawanie i przeprowadzenie w ciecz poprzez zmiane szybkosci strumienia piany, wysolenia z cieczy nizyny przy pH = 3,3 — 3,7, najkorzy¬ stniej 3,5, oddzielenia osadu od cieczy, odwodnienia go przez kilkakrotne zawieszanie w acetonie o temperaturze ponizej zera, korzystnie — 15°C i odpedzenie resztek acetonu pod próznia w temperaturze ponizej zera, ¦ korzy- stnie —15°C, znamienny t y m, ze do cieczy,otrzymanej z osuszonej piany-nizynowej, po wysoleniu nizy¬ ny wprowadza sie przy mieszaniu podstawiony atomami chloru weglowodór o zawartosci 1—5 atomów wegla w czasteczce, korzystnie chloroform lub trójchloroetylen, w ilosci co najmniej 0,5 czesci wagowych na 100 czesci wagowe uzytej do wysolenia cieczy, calosc miesza, odstawia na kilka godzin do wydzielania sie osadu, a nastepnie wyodrebnia go w znany sposób. Prac. Poligraf. UP PRL naklad 12U+18 Cena 10 zl PL