PL72822B2 - - Google Patents

Download PDF

Info

Publication number
PL72822B2
PL72822B2 PL144206A PL14420670A PL72822B2 PL 72822 B2 PL72822 B2 PL 72822B2 PL 144206 A PL144206 A PL 144206A PL 14420670 A PL14420670 A PL 14420670A PL 72822 B2 PL72822 B2 PL 72822B2
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
solvent
water
product
fermentation product
penicillin
Prior art date
Application number
PL144206A
Other languages
English (en)
Other versions
PL72822B1 (pl
Inventor
Allen Kennedy Robert
Lewis Mc Cormick Samuel
Jr.
Original Assignee
Eli Lilly And Company
Filing date
Publication date
Application filed by Eli Lilly And Company filed Critical Eli Lilly And Company
Publication of PL72822B1 publication Critical patent/PL72822B1/xx
Publication of PL72822B2 publication Critical patent/PL72822B2/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C51/00—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides
    • C07C51/42—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C07C51/43—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by change of the physical state, e.g. crystallisation
    • C07C51/44—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by change of the physical state, e.g. crystallisation by distillation
    • C07C51/46—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by change of the physical state, e.g. crystallisation by distillation by azeotropic distillation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/01—Saturated compounds having only one carboxyl group and containing hydroxy or O-metal groups
    • C07C59/08—Lactic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/01—Saturated compounds having only one carboxyl group and containing hydroxy or O-metal groups
    • C07C59/10—Polyhydroxy carboxylic acids
    • C07C59/105—Polyhydroxy carboxylic acids having five or more carbon atoms, e.g. aldonic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/235—Saturated compounds containing more than one carboxyl group
    • C07C59/245—Saturated compounds containing more than one carboxyl group containing hydroxy or O-metal groups
    • C07C59/265—Citric acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/78—Hydrolases (3) acting on carbon to nitrogen bonds other than peptide bonds (3.5)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/16—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing two or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
    • C12P19/60—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin
    • C12P19/62—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin the hetero ring having eight or more ring members and only oxygen as ring hetero atoms, e.g. erythromycin, spiramycin, nystatin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P33/00—Preparation of steroids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P35/00—Preparation of compounds having a 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring system, e.g. cephalosporin
    • C12P35/06—Cephalosporin C; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P37/00—Preparation of compounds having a 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring system, e.g. penicillin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
    • C12P7/44—Polycarboxylic acids
    • C12P7/48—Tricarboxylic acids, e.g. citric acid

Description

Wykaz ten obejmuje np. antybiotyki, takie jak bapitracyna, chloramfenikol, cefalosporyny, erytromycyna, neomycyna, penicyliny, streptomycyna, tylozyna iwankomycy- na, steroidy, takie jak kortizon, hydrokortizon, prednizolon i metyloprednizolon, enzymy, takie jak amylaza, katalaza, aksydaza, inwertaza, lipaza, i penicylinaza, kwasy organiczne, takie jak kwas cytrynowy, mlekowy, glikonowy, i glutaminowy, witaminy i zwiazki pokrewne, takie jak ryboflawina, giberelina, ksantofil, grzybki drozdzowe i witamina Bi 2, polimery, takie jak dekstran oriz rózne inne produkty fermentaai.Sposób wedlug wynalazku nadaje sie równiez do oddzielania produktów fermentacji przeksztalconych przez chemiczna obróbke brzeczki pofermentacyjnej przed oddzielaniem z niej produktu fermentacji i okreslenie „produkt fermentacji", stosowane w opisie i zatrzrzeniach patentowych, obejmuje takze takie produkty poddane •przemianie chemicznej. Przemiana ta moze miec na celu ulatwienie procesu oddzielania produktu lub nadanie produktowi korzystniejszych wlasciwosci. Przykladami takiego chemicznego przeksztalcania sa procesy takie jak zakwaszanie calkowitej brzeczki pofermentacyjnej zawierajacej penicyline Vw celu przeprowadzenia soli penicy¬ liny V w kwas i przeksztalcanie cefalosporyny C w N-chloroacetylocefalosporyne C w brzeczce przez traktowa¬ nie jej chlorkiem chloroacetylu lub mieszanym bezwodnikiem kwasu chlorooctowego.Jako rozpuszczalnik w procesie wedlug wynalazku stosuje sie taki rozpuszczalnik, który z woda tworzy azeotrop i który rozpuszcza wode w ograniczonym stosunku, korzystnie w ilosci nie wieksza niz okolo 10 g wody na 100 g rozpuszczalnika w temperaturze 25°C Ogólnie biorac jako rozpuszczalniki korzystnie stosuje sie alifatyczne alkohole o okolo 4-8 atomach wegla i estry tych alkoholi z nizszymi kwasami alifatycznymi, zwlasz¬ cza z kwasem octowym. Mozna tez stosowac nizsze chlorówcoalkany, ketony zawierajace co najmnia 5 atomów wegla i weglowodory aromatyczne. Odpowiednimi rozpuszczalnikami sa np. takie jak alkohol butylowy, amylo- wy, heksylowy lub benzylowy, octan butylu, octan amylu 1,2-dwuchloroetan, pentanon-3, heksanon-2, cyklohe- ksanon, benzen, toluen i ksyleny- oraz inne rozpuszczalniki tworzace z woda mieszaniny azeotropowe. Istota wynalazku nie polega na doborze rozpuszczalników tworzacych azeotropy, lecz na stosowaniu takich rozpusz¬ czalników, które moga byc uzyte do usuwania produktów fermentacji z brzeczki. Rodza uzytego rozpuszczal¬ nika zalezy od jego zdolnosci rozpuszczania produktu, który ma byc oddzielony.72822 3 Dosc dodanego rozpuszczalnika zalezy od róznych czynników, miedzy innymi do zawartosci wody w brzeczce, skladu mieszaniny azeotropowej woda-rozpuszczalnik oraz rozpuszczalnosci produktu w wodzie i rozpuszczalniku. Rozpuszczalnik nalezy dodawac w ilosci dostatecznej do azeotropowego usuniecia wody tak, aby pozostala jedna tylko faza ciekla, to znaczy aby osiagnac stan, w którym woda pozostala w naczyniu destylacyjnym jest rozpuszczona w rozpuszczalniku. W razie potrzeby mozna usunac wode zasadniczo calko¬ wicie. Jezeli usuwany produkt jest rozpuszczalny w rozpuszczalniku, wówczas ilosc rozpuszczalnika po zakoncze¬ niu destylaqi azeotropowej powinna byc dostateczna do calkowitego rozpuszczenia calego produktu. Rozpusz¬ czalnik moze byc dodawany jednorazowo w calosci lub tez w sposób ciagly albo z przerwami w ciagu pewnego okresu czasu. Rozpuszczalnik odprowadzany w postaci azeotropu moze byc po oddzieleniu od wody zawracany do procesu.Destylaqe azeotropowa prowadzi sie znanymi spsobami pod ci&iieniem atmosferycznym lub pod d&iie- niem obnizonymJezeli oddzielony produkt jest wrazliwy na dzialania ciepla, wówczas korzystnie jest prowadzic destylacje pod zmniejszonym cisnieniem, w nizszej temperaturze.Po skropleniu azeotropu i ochlodzeniu rozdziela sie go na faze wodna i faze rozpuszczalnikowa. Faze wodna, po usunieciu z niej rozpuszczonego rozpuszczalnika, mozna odprowadzic do scieków, przy czym ze wzgledu na sposób oddzielania z brzeczki woda ta nie jest zanieczyszczona, przeto nie trzeba poddawac jej dalszemu oczyszczaniu. Rozpuszczalnik otrzymany z azeotropu mozna zawracac do procesu.Po zakonczeniu destylacji azeotropowej produkt mozna wyosabniac z pozostalosci podestylacyjnej opisa¬ nymi wyzej sposobami. Przykladami produktów rozpuszczalnych zarówno w wodzie, jak i w rozpuszczalnikach organicznych sa: penicylina V, penicylina G, tylozyna i erytromycyna. Produkty te w pozostalosci podestylacyj¬ nej wystepuja w postaci roztworu.Przykladem produktu rozpuszczalnego w wodzie, lecz nierozpuszczalnego w rozpuszczalnikach organicz¬ nych jest cefalosporyna C. Produkt ten oddziela sie od pozostalosci przez odsaczenie. Przykladem produktu fermentami nierozpuszczalnego w wodzie, lecz rozpuszczalnego w rozpuszczalnikach organicznych,jest monensy- na. Produkt ten znajduje sie w pozostalosci podestylacyjnej w postaci roztworu.Produkt oddzielony od pozostalosci podestylacyjnej mozna oczyszczac znanymi sposobami. Przykladami procesów oczyszczania sa procesy oczyszczania monensyny i penicyliny V. W przypadku monensyny, po odparo¬ waniu rozpuszczalnika z pozostalosci podestylacyjnej otrzymuje sie mieszanine monensyny z olejem. Do miesza¬ niny tej dodaje sie metanolu, który rozpuszcza monensyne, lecz nie rozpuszcza oleju, który oddziela sie od roztworu przez dekantaqe i odrzuca, a do roztworu metanolowego dodaje sie wody, powodujac wytracenie krystalicznej monensyny. Produkt ten oddziela sie przez odsaczenie.W przypadku penicyliny V, organiczny roztwór pozostaly po destylaqi traktuje sie weglem aktywowanym, w celu usuniecia zanieczyszczen, po czym do organicznego roztworu dodaje sie wodnego roztworu octanu potasowego. Penicylina V rozpuszczona w organicznym rozpuszczalniku reaguje z octanem potasowym, tworzac sól potasowa penicyliny V, która jako nierozpuszczalna w organicznym rozpuszczalniku wytraca sie. Sól te odsacza sie lub oddziela w inny sposób.Oba te procesy stanowia jedynie przyklady znanych metod oczyszczania, przy czym procesy te nie wcho¬ dza w zakres wynalazku i stosuje sie je w zaleznosci od rodzaju oczyszczanego produktu.Nizej podane przyklady ilustruja sposób wedlug wynalazku.Przyklad I. Do 2litrów brzeczki penicylinowej V, zawierajacej w 1 ml 934mg czynnej penicyliny i 30 mg nierozpuszczalnydi cial stalych, dodaje sie 1 litr alkoholu n-heksylowego, a nastepnie mieszajac, dodaje sie 20 ml 20% roztworu kwasu siarkowego, zakwaszajac warstwe wodna do wartosci pH=39. Nastepnie do mieszaniny dodaje sie 600 ml alkoholu heksylowego i otrzymana zawiesine poddaje sie destylaqi w temperaturze okolo 35°C pod cisnieniem 25,4 mmHg tak, aby pozostala jedynie faza rozpuszczalnika. Pod koniec destylacji, do wrzacej zawiesiny dodaje sie 400 ml alkoholu n-heksylowego w celu uzupelnienia rozpuszczalnika którego czesc odparowala w mieszaninie azeotropowej. Pozostala zawiesine nie zawierajaca wody odsacza sie, osad przemywa 200 ml swiezego alkoholu heksylowego w celu usuniecia alkoholu n-heksylowego zawierajacego aktywne substanqe. W ogólnej ilosci rozpuszczalnika znajduje sie 14,2 g czynnej penicyliny.W celu wyosobnienia penicyliny, do czesci przesaczu zawierajacej 7,9 g czynnej penicyliny dodaje sie 10 ml 80% roztworu octanu potasu. Otrzymana mieszanine miesza sie w ciagu 30 minut i odsacza wytracona sól potaso¬ wa penicyliny V, uzyskujac 6,13 g czynna penicyliny.Przyklad II. Do 900 ml brzeczki penicylinowej V o wartosci pH=3,2 zawierajacej w 1 ml 9,56 mg czynnej penicyliny i 27 mg nierozpuszczalnydi dal stalych, dodaje sie 3 litry octanu amylu. Mieszanine poddaje sie destylacji azeotropowej w temperaturze 28° C pod dSiieniem 25,4 mmHg tak, aby pozostala jedynie faza rozpuszczalnika. Pozostala bezwodna zawiesine odsacza sie, i osad przemywa 200 ml octanu amylu. Warstwa rozpuszczalnika o objetosd 1050 ml zawiera w 1 ml 4,43 mg czynnej penicyliny.4 72822 Postepujac w sposób analogiczny do opisanego w przykladzie I wyosabnia sie czysty produkt w postaci krysztalów.Przyklad IIL Do 1 litra brzeczki monensynowej, zawierajacej w 1 ml 2,26 czynnej substanqi dodaje sie 1500 ml alkoholu n-heksylowego. Otrzymana mieszanine poddaje sie destylacji azeotropowej w temperaturze 98°C pod cisnieniem atmosferycznym tak, aby pozostala jedynie faza rozpuszczalnikowa. Otrzymana zawiesine chlodzi sie i przesacza, osad przemywa sie 100 ml swiezego alkoholu n-heksylowego. Przesacz odparowuje sie pod zmniejszonym cisnieniem w temperaturze okolo 30°C tak, aby pozostala jedynie faza oleista, do której nastepnie dodaje sie 500 ml metanolu i oddziela warstwe oleista od warstwy metanolowej. W metanolu znajduje sie 1,89 g czynnej monensyny. W celu wyosobnienia monensyny roztwór metanolowy odparowuje sie i dodaje wody. Wytracona monensyne w postaci krysztalów przesacza sie.Przyklad IV. Do cienkowarstwowej wyparki pracujacej w sposób ciagly wlewa sie 35 litrów alkoholu benzylowego. Wyparka pracuje pod cisnieniem 698 mmHg w temperaturze 50°C, przy czym przez rozpuszczal¬ nik krazy przez uklad w ilosci 4 galonów na minute. Do wyparki wprowadza sie w sposób ciagly wciagu ? 1 godziny 50 litrów pelnej brzeczki monensynowej o aktywnosci 8,75mc/ml i 27 litrów swiezego alkoholu ben¬ zylowego. Odprowadzany azeotrop skrapla sie, a zawiesine zawierajaca bezwodne ciala stale i rozpuszczalnik o duzej zawartosci monensyny odprowadza sie co pewien czas z wyparki tak, aby utrzymac w niej stala objetosc mieszaniny wynoszaca okolo 35 litrów. Rozpuszczalnik oddziela sie przez dekantacje od cial stalych i oznacza w nim zawartosc monensyny. Calkowita wydajnosc monensyny wynosi 90% w stosunku do ilosci zawartej w brzeczce.Przyklad V. Do kotla destylacyjnego o pojemnosci 300 galonów wlewa sie 200 galonów alkoholu n-heksylowego i powoli 100 galonów brzeczki pofermentacyjnej, zawierajacej pozakomórkowy polisacharyd bakteryjny i dekstran, wytworzone przez drobnoustroje Xanthomonas campestris, NRRLB—1459. Brzeczka za¬ wiera okolo 3% wagowych cial stalych i ma lepkosc 7800 cP. Lepkosc jest wskaznikiem stezenia polisacharydu i ciezaru czasteczkowego. Mieszanine poddaje sie destylagi azeotropowej w temperaturze 98°C, odprowadzajac i skraplajac azeotrop. Pod koniec procesu destylacje prowadzi sie w temperaturze 102°C. Dekstran nierozpusz¬ czalny w alkoholu n-heksylowym odsacza sie i osusza cieplym powietrzem w temperaturze okolo 70°C. Suchy i nie zawierajacy oleju polisacharyd jest trwaly podczas dlugotrwalego magazynowania. Produkt ten za pomoca wody doprowadzany do objetosci wyjsciowej wykazuje lepkosc 7100 cP.Przyklad VI. Przyklad ten dotyczy uzyskiwania cefalosporyny P z brzeczki zawierajacej cefalospo- ryne C. Cefalosporyna Pjest steroidem drobnoustrojowym znajdujacym sie w ilosciach sladowych w brzeczce zawierajacej cefalosporyne C. Steroid ten jest bardzo trudno oddzielic i oczyscic. Mieszanine 150 ml brzeczki, -zawierajacej cefalosporyne C, zalkalizowanej do wartosci pH=10,5 za pomoca 5 n wodorotlenku sodu i 250 ml alkoholu n-heksylowego poddaje sie destylacji azeotropowej pod zmniejszonym cisnieniem w temperaturze oko¬ lo 35°C tak, aby pozostala jedna tylko warstwa ciekla. Pozostala warstwe rozpuszczalnika oddziela sie przez dekantaqe od cial stalych i za pomoca chromatografii bibulowej oznacza zawartosc cefalosporyny P. Analiza wykazuje ze cefalosporyna P zostaje w calosci rozpuszczona w rozpuszczalniku. Po odparowaniu rozpuszczalnika uzyskuje sie cefalosporyne P.Przyklad VII. Mieszanine 200 ml brzeczki cefalosporyny C, zawierajacej wl,ml 6,8 mg substancji czynnej i 200 ml alkoholu n-heksylowego poddaje sie destylacji azeotropowej pod zmniejszonym cisnieniem w temperaturze okolo 30°C tak, aby pozostala jedynie zawiesina cial stalych w jednej tylko warstwie cieklej.Otrzymana substancje w postaci papki saczy sie i ciala stale osusza sie w temperaturze okolo 50°C. Analiza wykazuje, ze w osuszonym produkcie stalym znajduje sie 78% czynnej cefalosporyny C nierozpuszczalnej w roz- . puszczalniku organicznym.Przyklad VIII. Mieszanine 200 ml brzeczki tylozyny, zawierajacej w 1 ml 4150 mg czynnej tylozyny, która zalkalizowano do wartosci pH=9,5 za pomoca 1 n wodorotlenku sodu i 250 ml alkoholu n-heksylowego poddaje sie destylacji azeotropowej pod zmniejszonym cisnieniem w temperaturze okolo 30°C tak, aby pozosta¬ la jedna tylko warstwa ciekla, Pozostalosc podestylacyjna saczy sie i oznacza zawartosc czynnej tylozyny w przesaczu.Przyklad IX- Kwas cytrynowy jest kwasem organicznym wytwarzanym w procesie fermentami. Jest on rozpuszczalny w wodzie' w ilosci 207 mg na 1 ml wody. w temperaturze 20°C, a w alkoholu benzylowym tylko 65 mg na 1 ml w takich samych warunkach. Oddzielenie kwasu cytrynowego na drodze ekstrackji jest trudne, ze wzgledu na stosunkowo mala róznice rozpuszczalnosci kwasu cytrynowego w wodzie i alkoholu benzylowym. Jednakowoz kwas cytrynowy oddziela sie z brzeczki postepujac analogicznie do sposobu opisanego w przykladzie VIII z ta róznica, ze zamiast brzeczki tylosyny stosuje sie brzeczke kwasu cytrynowego, a zamiast alkoholu heksylowego stosuje sie alkohol benzylowy.72822 5 Przyklad X. Enzym arylamidasa III, wytwarzany przez drobnoustroje Cephalosporium acremonium, rozpuszcza sie w wodzie lecz nie rozpuszcza sie w rozpuszczalnikach organicznych. Brzeczke zawierajaca ten enzym o aktywnosci 670 jednostek na miligram bialka poddaje sie destylacji azeotropowej z alkoholem n-heksy- lowym tak, aby pozostala jedna tylko faza ciekla. Nierozpuszczalny enzym oddziela sie z pozostalosci podesty¬ lacyjnej za pomoca saczenia.W sposób analogiczny do wyzej opisanego oddziela sie enzym stosujac alkohol benzylowy zamiast alkoholu n-heksylowego.Przyklad XI. Do 205 ml brzeczki cefalosporyny C zawierajacej w 1 ml 5,92 mg cefalosporyny C doda¬ je sie 9 równowazników mieszanego bezwodnika kwasu propionowego i kwasu chlorooctowego, a nastepnie 2500 ml cykloheksanonu. Otrzymana mieszanine poddaje sie destylaqi azeotropowej w temperaturze 40°C pod cisnieniem 20 mm Hg, tak, aby pozostala jedna tylko warstwa ciekla. Pozostalosc w postaci papki saczy sie i osad przemywa 1 litrem cykloheksanonu w celu oddzielenia pochodnej N-chloroacetylocefalosporyny C zaab¬ sorbowanej przez ciala stale. Otrzymuje sie 1490 ml rozpuszczalnika o aktywnosci antybiotycznej. Odzyskuje sie okolo 82,4% antybiotyku.Przyklad XII. W celu otrzymania pochodnej N-chloroacetylocefalosporyny C do 205 galonów brzecz¬ ki cefalosporyny C zawierajacej w 1 ml 5,61 mg czynnej cefalosporyny C dodaje sie 7 równowazników miesza¬ nego bezwodnika kwasu propionowego i kwasu chlorooctowego, a nastepnie do otrzymanej mieszaniny dodaje sie 205 galonów cykloheksanonu i poddaje sie ja destylacji azeotropowej w wyparce recyrkulacyjnej pracujacej w temperaturze 50°C pod cisnieniem 60 mmHg. Destylacje prowadzi sie az do otrzymania w pozostalosci jednej tylko fazy cieklej. Pozostalosc w postaci papki przesacza sie otrzymujac 75 galonów rozpuszczalnika o aktyw¬ nosci antybiotycznej. Odzyskuje sie 54% antybiotyku. PL PL

Claims (10)

1. Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wyodrebniania produktu fermentacji o temperaturze wrzenia ponizej okolo 200°C z wodna brzeczki pofermentacyjnej, znamienny tym, ze do brzeczki dodaje sie rozpuszczalnik organiczny, który tworzy mieszanine azeotropowa z woda i w którym rozpuszczalnosc wody w temperaturze 25°C jest mniejsza niz 10 g na 100 g rozpuszczalnika i mieszanine te poddaje sie destylacji azeotropowej w celu usuniecia wody tak, aby pozostala jedynie woda rozpuszczona w organicznym rozpuszczalniku, a nastepnie produkt fermentacji oddziela sie z pozostalosci podestylacyjnej, przy czym rozpuszczalnik organiczny dodaje sie do brzeczki w ilosci wiekszej od tej, którajest niezbedna do azeotropowego oddzielenia wody.
2. Sposób wedlug zastrz-1,znamienny tym, ze produkt fermentami jest rozpuszczalny w brzeczce.
3. Sposób wedlug zastrz. 2, znamienny tym, ze produkt fermentacji jest rozpuszczalny w rozpuszczalniku organicznym.
4. Sposób wedlug zastrz. 3, znamienny tym, ze produktem fermentacji jest penicylina V, penicylina G, tylozynalub erytromycyna.
5. Sposób wedlug zastrz. 3, znamienny tym, ze produktem fermentacji jest N-chloroacetylocefalospory- naC.
6. Sposób wedlug zastrz. 2, znamienny tym, ze produkt fermentami jest nierozpuszczalny w rozpuszczal¬ niku organicznym.
7. Sposób wedlug zastrz, 6, znamienny tym, ze produktem fermentacji jest cefalospoiyna C.
8. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze produkt fermentacji jest nierozpuszczalny w wodnej brzeczce pofermentacyjnej.
9. Sposób wedlug zastrz. 8, znamienny tym, ze produkt fermentacjijest rozpuszczalny w rozpuszczalniku organicznym.
10. Sposób wedlug zastrz. 9, znamienny tym, ze produktem fermentacji jest monenzyna. PL PL
PL144206A 1970-11-02 PL72822B2 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US87351069A 1969-11-03 1969-11-03
US7573670A 1970-09-25 1970-09-25

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL72822B1 PL72822B1 (pl) 1974-08-30
PL72822B2 true PL72822B2 (pl) 1974-08-31

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO163897B (no) Fremgangsmaate ved fremstilling av et terapeutisk aktivt (6r,7r)-3-karbamoyloksymetyl-7-((z)-2-(fur-2-yl)-2-metoksyiminoacetamido)-ceph-3-em-4-karboksylsyre-1-acetoksyetylester (cefuroksimaksetil).
CZ54495A3 (en) Process for preparing and/or purification of clavulanic acid
Martland et al. The preparation and use of the bone phosphatase
EP2039777A1 (en) Method for purification of hyaluronic acid salt
SK112096A3 (en) A process for the isolation of clavulanic acid and of pharmaceutically acceptable salts thereof from the fermentation broth of streptomyces sp. p 6621 ferm p 2804
US2658078A (en) Solvent extraction of oxytetracycline
US4639534A (en) Isolation of pseudomonic acid
US20190248726A1 (en) Solid-solid separation process for long chain dicarboxylic acids
DE69633330T2 (de) Verfahren zur herstellung von pharmazeutisch verträglichen salzen der clavulansäure
Shishikura et al. Citric acid purification process using compressed carbon dioxides
FI75571B (fi) Framstaellningsfoerfarande foer synnerligen kristalliniskt natriumcefoperazon.
PL72822B2 (pl)
US3378441A (en) Tetraene antibiotic purification
NO119673B (pl)
US3076750A (en) Microbiologically reducing keto acids
US2774712A (en) Bacitracin compound and recovery of bacitracin
US3928431A (en) Method of isolating L-dopa from a aqueous solution thereof
US2864817A (en) Process for crystallization of erythromycin
SU423303A3 (ru) Способ получения производных цефалоспорина с
IL35521A (en) Method for separating fermentation products
CN111072497B (zh) 一种从头孢尼西钠待再生的离子交换树脂中回收n,n’-二苄基乙二胺盐的方法
CA2598565C (en) Purification of mupirocin
US2602045A (en) Azeotropic distillation process for preparing pure, crystalline penicillin salts
AT298374B (de) Verfahren zur Abtrennung eines nicht unterhalb 200°C siedenden Fermentationsproduktes
US2683680A (en) Method of recovering vitamin b12 activity