PL64286B1 - - Google Patents

Description

Opublikowano: 20.XII.1971 64286 KI. 57 b, 5/00 MKP G 03 c, 5/00 CZYIELNIA niaitj iziczifNpii^) UHwij Twórca wynalazku i Bogdan Elsner, Warszawa (Polska) wlasciciel patentu: Sposób wykonywania powiekszen mikroobiektów Przedmiotem wynalazku jest sposób wykonywa¬ nia powiekszen mikroobiektów, które w obserwa¬ cji znanymi metodami mikroskopowymi nie wyka¬ zuja pewnych istotnych szczególów, jak np. ksztalt linii brzegowej cienkich preparatów organicznych i polozenie barwników organicznych przylaczonych do drobin lancuchowych.Znany sposób przeprowadzania badan tego typu za pomoca mikroskopu elektronowego polega na przygotowaniu preparatu metodami barwienia, kontrastujacego cieniowania itp., a nastepnie skie¬ rowaniu na tsn preparat strumienia elektronów, który rozpraszany jest w mniejszym lub wiekszym stopniu przez elementy mikroobiektu i daje na ekranie ich obraz powiekszony.Stosowany w mikroskopii elektronowej strumien elektronów nie jest dostatecznie rozpraszany przez atomy wegla, azotu, tlenu i wodoru, z których przewaznie zbudowane sa preparaty organiczne i przez to nie daja dostatecznej widocznosci linii brzegowej preparatu i innych szczególów pomimo uzycia srodków zwiekszajacych gestosc elektro¬ nowa.Jednym z takich srodków jest cieniowanie wy¬ puklych nierównosci preparatu za pomoca konden- sujacyeh na jego powierzchni par ciezkich metali, dla których dana nierównosc stanowi przeszkode mechaniczna w prostoliniowym biegu czasteczek.Wytworzony przez nie obraz cieniowy wykazuje jednak ujemna ceche w postaci ziarnistoscr war-* 10 15 20 25 2 stwy metalu zmniejszajacej widocznosc szczególów preparatu.Celem wynalazku jest zwiekszenie widocznosci szczególów w powiekszeniu mikroskopowym. Cel ten osiaga sie przez zastosowanie gazów nie kon- densujacych na preparacie, ale tworzacych obraz na innej plaszczyznie, oraz przez powiekszenie od¬ leglosci wzajemnych elementów tego obrazu.Sposób wykonywania powiekszen mikroobiektów wedlug wynalazku polega na rejestracji odbijaja¬ cych sie od preparatu lub przepuszczonych przez preparat czasteczek gazu na warstwach gazoczu- lych bedacych w ruchu liniowym, oraz pózniej¬ szym dodatkowym powiekszeniu powierzchni obra¬ zu w procesie pecznienia lub rozciagania srodkami mechanicznymi. W wyniku takiego postepowania uzyskuje sie zwiekszenie wzajemnych odleglosci elementów obrazu, co ulatwia ich wykrycie meto¬ dami znanymi jak autoradiografia, a nastepnie powiekszenie elektronowe lub optyczne.Uzyskane odwzorowanie szczególów mikroobiek¬ tu rejestrowane jest na materiale gazoczulym, któ¬ rym jest zelatyna wiazaca gazy swymi grupami aktywnymi, zelatyna pokryta w prózni drobnoziar¬ nista warstwa metalu np. srebra lub tez inny material o podobnych wlasciwosciach.Wykonanie powiekszenia wedlug wynalazku od¬ bywa sie nastepujaco: w komorze prózniowej umieszcza sie na siatce nosnej preparat. Na pre¬ parat ten skierowuje sie pod katem od 0 do 45° 642863 64286 4 waski — rzedu angstremów strumien radioaktyw¬ nego gazu jak H2S85, J2151, który odbija sie od ba¬ danej powierzchni pod katem zaleznym od jej struktury, lub zostaje przepuszczony wzdluz tej powierzchni, a odbite lub przepuszczone czasteczki gazu rejestruje sie na warstwie gazoczulej bedacej w ruchu liniowym. Strumien gazu przesuwany jest równiez wzdluz badanej powierzchni, ale z pred¬ koscia wielokrotnie mniejsza od predkosci warstwy gazoczulej.W warstwie gazoczulej wytwarza sie obraz w postaci niewidocznych prazków zlozonych z bardzo trudno rozpuszczalnych, radioaktywnych siarczków i jodków srebra. W celu dodatkowego zabezpiecze¬ nia obrazu przed stratami na skutek rozpuszczenia w wodzie, warstwe nasyca sie gazami nie radio¬ aktywnymi az do zamiany srebra na jego siarczki i jodki.Nastepnie warstwe moczy sie w wodzie az do maksymalnego zwiekszenia jej wymiarów geome¬ trycznych na skutek pecznienia zelatyny, skleja sie z zelatyna sucha i suszy. Oddzielone od siebie przez napeczniala zelatyne elementy obrazu wy¬ krywa sie metoda autoradiograficzna, obserwuje w mikroskopie oraz dokonuje sie pomiarów liczac ilosc napromieniowanych i wywolanych ziaren emulsji autoradiograficznej wzdluz danego prazka.W celu jeszcze wiekszego oddzielenia od siebie elementów obrazu warstwe zelatynowa moczy sie w wodzie do zawartosci 65 do 70% wody, nakleja na podloze elastyczne, nadtapia w polozeniu po¬ ziomym cieplym powietrzem az do wytworzenia bardzo gestej pólplynnej masy, rozciaga sie po¬ wierzchniowo wraz z elastycznym podlozem, po czym suszy sie, zdejmuje z podloza i bada autora- diograficznie.Sposobem wedlug wynalazku uzyskuje sie jedno¬ wymiarowe powiekszenie w kierunku linii prazków do 1000X i wieksze, zaleznie od wymagan zwia¬ zanych z rozdzielczoscia uzytego gatunku emulsji autoradiograficznej. c: Urz« Dodatkowe dwuwymiarowe powiekszenie w pro¬ cesie pecznienia wynosi 1,5 do 2X, a na skutek rozciagania warstwy do 6X. Efekt ten zwieksza sie przez powtórzenie procesu po kazdorazowym 5 wysuszeniu warstwy i sklejeniu ze swieza zela¬ tyna.Opisane powyzej dodatkowe powiekszenia moga byc potrzebne do oddzielenia od siebie elementów obrazu w kierunku prostopadlym do linii prazków. 10 Wielkosc uzyskanego powiekszenia jednowymia¬ rowego wzdluz linii prazka zalezy od stosunku predkosci ruchu warstwy gazoczulej do predkosci przesuwu strumienia gazu wzgledem plaszczyzn}^ preparatu. 15 Przykladowo dla predkosci przesuwu strumienia 1 M-m/sek, a warstwy gazoczulej 10 mm/sek nie¬ równosc powierzchni na dlugosci 5A° stanowi przeszkode w procesie rejestracji odbijanych lub przepuszczanych czasteczek gazu, ujawniajaca sie 20 jako brak ziaren, wywolanej emulsji autoradiogra¬ ficznej lub zmniejszenie ich ilosci na dlugosci 5 (xm.Wynik taki jest latwo obserwowany w mikrosko¬ pie przy rozdzielczosci emulsji 0,2 do 0,3 M-m. 25 PL PL

Claims (3)

1. Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wykonywania powiekszen mikroobiek- tów, znamienny tym, ze na preparat umieszczony 80 w prózni skierowuje sie waski strumien radio¬ aktywnego gazu, po czym przepuszczone wzglednie odbite czastki gazu dajace odwzorowanie szczegó¬ lów badanej powierzchni rejestruje sie na gazo- czulym materiale bedacym w ruchu liniowym. 35

2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze material gazoczuly z zarejestrowanym obrazem poddaje sie procesowi pecznienia i rozciagania.

3. Sposób wedlug zastrz. 1 i 2, znamienny tym, ze rozciaganie warstwy przeprowadza sie po uprzednim jej nadtopieniu. YTELNIA ju Poienlowogo lucziposplitii Utfmj W.D.Kart. C/795/71, A4, 230 PL PL