PL63140B1 - - Google Patents

Description

Przyklad IV. (3-D-Glikozyd cztero-O-acetylo-4'- 55 -karbobenzoksy-4/-demetylo-epipodoifiilotoksyny. 10,7 g 4'-karbobenzoksy- 4'-demetylo-podofilotoksyny rozpuszcza sie, ogrzewajac, w 30 ml chlorku etylenu, chlodzi roztwór do temperatury +15° i dodaje 14,0 g 2,3,4,6-cztero-O-acetyio-p-D-glikozy. Po 5 minutach mie- 60 szania chlodzi sie z wylaczeniem wilgoci do tempera¬ tury —15° i Wkrapla w ciagu 5 minut 7 ml schlodzo¬ nego uprzednio do temperatury —10° zwiazku kom¬ pleksowego eteru etylowego i trójfluorku borowego (48% BF3). Nastepnie miesza sie w ciagu 1 godziny w 65 temperaturze —15°, po czym wkrapla roztwór 7 ml ab-5 63140 6 solutnej pirydyny w 20 ml chlorku etylenu. Po rozcien¬ czeniu za pomoca 100 ml chloroformu przemywa sie pieciokrotnie kazdorazowo za pomoca 50 ml wody.Faze organiczna suszy sie nad siarczanem sodowym, odparowuje pod obnizonym cisnieniem i suszy (pozosta¬ losc pod obnizonym cisnieniem w temperaturze 60°C.Otrzymana piane rozpuszcza sie w 50 ml goracego eta¬ nolu, chlodzi do temperatury okolo 50°, zadaje 150 ml zimnej wody i miesza tak dlugo, az brylowaty i kleisty poczatkowo osad przybierze postac proszku i konsy¬ stencji piasku.Produkt odsysa sie, przemywa ponownie za pomoca 40 ml 25nprocentowego etanolu i suszy w prózni iw tem¬ peraturze 60°. Nastepnie preparat rozpuszcza sie w 200 ml goracego metanolu, filtruje do klarownosci, od¬ parowuje przesacz w prózni i suszy pozostalosc w wy¬ sokiej prózni w temperaturze 80° az do osiagniecia sta¬ lego ciezaru. Otrzymany (3-D-glikozyd cztero-0-acetylo- -4'-karbobenzoksy- 4'-demetylo-epipodofilotoksyny jest identyczny z preparatem wytworzonym wedlug przy¬ kladu III.Przyklad V. (3-D-Glikozyd cztero-0-acetylo-4'-de- metylo-epipodofiiloitoksyny.W celu odszczepienia grupy karbobenzoksylowej od (3-D-glikozydu- oztero-0-acetylo- 4'-karbobenzoksy-4 '-de- meitylo-epipodofilotoksyny 13,4 g tego zwiazku rozpu¬ szcza sie w 100 ml mieszaniny aceton — etanol (1:2), zadaje .0,5 ml lodowatego kwasu octowego i 2 g palladu osadzonego na weglu (10% Pd) i uwodornia w tempe¬ raturze 20°. Nastepnie odsacza sie katalizator, przemy¬ wa go ciepla mieszanina acetonu i metanolu i odparo¬ wuje przesacz w prózni. Pozostalosc zalewa sie 100 ml wrzacego etanolu, pozostawia do wykrystalizowania, a krysztaly po odessaniu i przemyciu metanolem suszy w prózni. Najczystszy (3-D-glikozyd cztero-O-acetylo-4'nde- metylo-epipodofilotoksyny krystalizuje w postaci de¬ likatnych igielek o temperaturze topnienia 225—227°; 21 (a) -p = —64,4° (c = 1,024) w chloroformie.Przyklad VI. (3-D-Glikozyd 4'-demetylo-epipodo- filotoksyny. 25 g czystego p-D^g] ikozydu eztero-0-acetylo-4'-kairbo- benzoksy- 4'-demetylo-epipodofilotoksyny, 3,6 g bez¬ wodnego octanu cynkowego i 1,45 g bezwodnego octanu sodowego ogrzewa sie w 150 ml metanolu mieszajac, pod chlodnica zwrotna.Po uplywie 2 i 4 godzin oddestylowuje sie kazdorazo¬ wo po 12,5 ml metanolu. Nastepnie po uplywie kaz¬ dych 2 godzin dodaje sie po 12,5 ml metanolu i ponow¬ nie oddestylowuje. Po uplywie ogólem 18 godzin od- szczepienje grup acetyloiwych jest zakonczone i otrzy¬ muje isie mieszanine zlozona z okolo 60% (3-D-g'likozydu 4'-karbobenzoksy-4'-demetylo-epipodofilotoksyny i oko¬ lo 40 % (3-D-glikozydu 4'-demetylo-epipodofilotoksyny.Reakcje kontroluje sie w chromatografie cienkowarst¬ wowym na plytkach z zuzlu krzemionkowego, stosujac jako eluent mieszanine octanu izopropylowegoi i meta¬ nolu w stosunku 4:1, nasycona woda. Rozwijanie przez zraszanie 0,2 procentowym roztworem siarczanu ceru (IV) w 50 procentowym kwasie siarkowym i ogrzewa¬ nie do temperatury 110—130°.W celu dalszej obróbki zadaje sie 5ml lodowatego kwasu octowego, odparowuje w prózni w temperaturze lazni 50° i suszy w ciagu 15 minut w wysokiej prózni w temperaturze 50°. Pozostalosc wprowadza sie do 250 ml mieszaniny chloroformu i izopropanolu w stosunku 4:1 i 25 ml wody, oddziela faze wodna i ponownie prze¬ mywa faze organiczna 25 ml wody. Obie partie wody uzytej do przemycia ekstrahuje sie za pomoca 50 ml 5 mieszaniny chloroformu i izopropanolu, a polaczone fazy (organiczne po wysuszeniu nad siarczanem sodowym odparowuje sie w prózni. Pozostalosc odciaga sie trzy¬ krotnie w prózni, stosujac kazdorazowo 30 ml acetonu, a nastepnie suszy w ciagu 2 godzin w wysokiej prózni 10 w temperaturze 75°.Z mieszaniny (3-D^glikozydu 4'^karbobenzo:ksy-4'-de- metylo-epipodofilotoksyny i (3-D-glikozydu 4'-demetylo- -epipodoifilotoksyny otrzymuje sie przez krystalizacje z metanolu |3-D-glikozydu 4'-karbobenzoksy-4'-demetylo- 15 -epipodofilotoksyny w niezupelnie czystej postaci. W wy¬ niku chromatografii na 100-krotnej ilosci zelu krzemion¬ kowego otrzymuje sie po eluowaniu mieszanine octanu izopropylowego i metanolu (9:1), nasycona woda, czysty |3-D-glikozvd 4'^karbobenzoksy-4'-demetylo-epipodofilo- 2o toksyny, który wykrystalizowany z acetonu topnieje w temperaturze 155^156°. (a)p = —92,0° (c = 1,00) w chloroformie.W celu odszczepienia grupy karbobenzoksylowej mie¬ szanine (3-D-glikozydu 4'Hkarbobenzoksylo-4'-demeitylo- -epipodofilotoksyny i |3-D-glikozydu-4'-demetylo-epipo- dofilotoksyny rozpuszcza sie w 200 ml acetonu, wpro¬ wadza roztwór do zawiesiny 3 g 10% palladu osadzo¬ nego na weglu w 50 ml wody i luwodarnia do odszcze¬ pienia grupy ochronnej (1,5 godziny). Przebieg reakcji kontroluje sie w chroimatografie cienkowarstwowym jak podano wyzej. Nastepnie odsacza sie katalizator, prze¬ mywa 100 ml mieszaniny ocetonu i wody w stosunku 4:1 i odparowuje przesacz w prózni do objetosci okolo 40—45 ml, przy czym wykrystalizowuje (3-D-glikozyd 4'-demetylo-epipodofilotoksyny.W celu uzupelnienia krystalizacji pozostawia sie jesz¬ cze w ciagu 20 minut w kapieli lodowej, odsysa krysz¬ taly, wymywa 25 ml wody i suszy w wysokiej prózni 0 w temperaturze 70°. W wyniku krystalizacji z metanolu ' otrzymuje sie czysty |3-D-grikozyd 4'-demetylo-epipodo- 21 filotoksyny o temperaturze topnienia 225—227°, (a) D = = 88,6° (c = 1,05) w metanolu. Temperatura topnienia innej odmiany wynosi 262—264°. . 45 Przyklad VII. (3-D-Glikozyd 4'-denietykepi- po dofilo toksyny. 2,0 g otrzymanego wedlug przykladu V (3-D-glikozydu czteiro-0-acetylo-4'-demetylo-epipodofilotoksyny i 1 g 50 bezwodnego octanu cynkowego ogrzewa sie w ciagu 25 godzin w 30 ml absolutnego metanolu pod chlodnica zwrotna. Otrzymany bialy osad rozpuszcza sie przez do¬ danie kilku ml lodowatego kwasu octowego^ i lekkie pod¬ grzanie, rozpuszczalnik usuwa sie w prózni w tempera- 55 turze 40°, a pozostalosc roztwarza iw 50 ml mieszaniny chloroformu i butanolu (4:1). Faze organiczna przemy¬ wa sie dwukrotnie, stosujac kazdorazowo 10 ml wody, po wysuszeniu nad siarczanem sodowym odparowuje, w prózni i chromatografuje pozostalosc na zelu krze- 60 mionkowym.Nasycona woda mieszanina octanu izopropylowego i metanolu w stosunku 9:1 wymywa najpierw skladniki niepolarne, a nastepnie czysty i|3-D^glikozyd 4'-demetylo- -epipodofilotoksyny. Poszczególne frakcje bada sie za 65 pomoca chromatogramu cienkowarstwowego na plytkach63140 8 z zelu krzemionkowego, stosujac jako eluent nasycona woda, mieszanine octanu izopropylu i metanolu (8:1), frakcje glikozydowe laczy sie i krystalizuje dwukrotnie z metanolu. (3-D-Glikozyd 4'-demetylo-epipodofilotoksyny topnie¬ je w temperaturze 222—230°, a inna jego odmiana w temperaturze 262—264° (a) ^ = -^88° (c = 0,507) w metanolu.Przyklad VIII. |3-D-benzylideno-glikozyd 4'-deme- tyloepipodofilotoksyny. 1 g wysuszonego 0-Dnglikozydu 4'-demetylo-epipodo- filotoksyny rozpuszcza sie w 20 ml czystego benzaldehy¬ du i po dodaniu 0,5 g bezwodnego chlorku cynkowego z wylaczeniem wilgosci wytrzasa na wstrzasarce w ciagu 5—6 godzin. Postep reakcji sledzi sie na biezaco za po¬ moca chromatografii cienkowarstwowej. W tym celu stosuje sie plytki z zelu krzemionkowego i chloroform zawierajacy 6% metanolu jako eluent. W celu uwidocz¬ nienia substancji plytki zrasza sie 1 procentowym roz¬ tworem azotanu cerowo (IV) — amonowego w 50 pro¬ centowym kwasie siarkawym i ogrzewa nastepnie do temperatury 100—120°. Nastepnie klarowny roztwór reakcyjny o zabarwieniu czerwono-brunatnym zadaje sie chloroformem i wytrzasa z woda.Faze wodna ekstrahuje sie dwukrotnie chloroformem.Wszystkie fazy chloroformowe laczy sie, przemywa dwukrotnie woda, suszy mad isiarczanem sodowym i od¬ parowuje rozpuszczalnik w prózni. Oleista pozostalosc rozciera sie z pentanem w celu usuniecia pozostalosci benzaldehydu, az do 'otrzymania produktu w postaci proszku. W celu dalszego oczyszczania (pochodna ben- zylidenowa roztwarza sie w 10 ml acetonu i mieszajac wkraipla roztwór acetonowy do 100 ml pentanu, otrzy¬ mujac osad o zabarwieniu jasnozóltym do bialego-.Surowy produkt mozna oczyscic w kolumnie chroma¬ tograficznej na zelu krzemionkowym. W tym celu roz¬ twór 1 g surowej pochodnej benzylidenowej o mozliwie najwiekszym stezeniu w mieszaninie chloroformu i 2% metanolu saczy sie na kolumne z 200 g zelu krzemion¬ kowego i eluuje taka sama iloscia mieszaniny rozpusz¬ czalników. Jednolite pod wzgledem chromatografii cien¬ kowarstwowej frakcje laczy sie i wytraca z mieszaniny acetonu i pentanu. (3-D^benzylideno-glikozyd 4'-demety- lo-epipodofilotoksyny otrzymuje sie w postaci bialego proszku o temperaturze topnienia'182—185°. W wyniku przekrystalizowania z absolutnego etanolu otrzymuje sie krysztaly o temperaturze topnienia 245—246°. Wartosci 20 skrecalnosci optycznej wynosza: (a)j^ = —99° w meta¬ nolu i —104° w chloroformie.Przyklad IX. |3-D-Tenylideno^glikozyd 4'-deme- tylo-epipodofilotoksyny. 0,5 g wysuszonego (3-D-glikozydu 4'-demetylo-epido- filotoksyny zadaje sie 10 ml czystego aldehydu 2-tiofe- nowego oraz 0,25 g bezwodnego chlorku cynkowego, po czym mieszanine wytrzasa sie z wylaczeniem, wilgoci na wstrzasarce w temperaturze 20°, przy czym stopniowo powstaje klarowny roztwór. Przebieg kondensacji kon¬ troluje sie za pomoca chromatografii cienkowarstwowej, jak opisano wyzej. Po Uplywie 3—4 godzin czasu trwa¬ nia reakcji roztwór rozciencza sie chloroformem i wy¬ trzasa z wodas. Faze chloroformowa przemywa sie jeszcze dwukrotnie niewielka iloscia wody, po czym suszy nad¬ siarczanem sodowym i odparowuje.W celu usuniecia nadmiernej ilosci aldehydu 2-tiofe- nowego, pozostalosc rozpuszcza sie w niewielkiej ilosci acetonu i wytraca przez dodanie pentanu. Wytracanie z mieszaniny acetonu i pentanu powtarza sie az do wytra- 5 cenia sie produktu kondensacji w postaci platków. W celu dalszego oczyszczenia surowy produkt poddaje sie chromatografii na zelu krzemionkowym. Jednolite w chromatografii cienkowarstwowej frakcje laczy sie i z absolutnego alkoholu otrzymuje krysztaly. Czysty (3-D- 10 -tenylideno-glikozyd 4'-demetylo-epipodofilotoksy ma temperature topnienia 242—246° (ostatnie resztki do 20 255°); (a) jy = —107° w mieszaninie chloroformu i metanolu w stosunku 9:1. 15 Przyklad X. (3-D-Furfurylideno^glikozyd 4'-deme- tyloepipodofilotoksyny. 0,5 g wysuszonego i|3-D-glikozydu 4'-demetylo-epipodo¬ filotoksyny zadaje sie 10 ml czystego furfurolu i po do¬ daniu 0,25 g bezwodnego chlorku cynkowego z wylaicze- 20 niem wilgoci wytrzasa w temperaturze 20° w ciagu 3—4 godzin na wstrzasarce. Przebieg reakcji kondensacji kon¬ troluje sie za pomoca chromatografii cienkowarstwowej.Chromatografie cienkowarstwowa mozna przeprowadzac na plytkach z zelu krzemionkowego z chloroformem za- 25 wierajacym 6 % metanolu jako eluentem.W celu uwidocznienia substancji zrasza sie 1 procen¬ towym roztworem lazotanu cerowo — (IV)-amonowego w 50 procentowym kwasie siarkowym i ogrzewa nastep¬ nie do temperatury 100—'120°. Po zakonczeniu konden¬ sacji zabarwiony na zielono roztwór reakcyjny zadaje sie chloroformem «i wytrzasa z woda,. Faze wodna ekstra¬ huje sie dwukrotnie chloroformem. Wszystkie fazy chlo¬ roformowe laczy sie, przemywa jeszcze dwukrotnie nie¬ wielka iloscia wody, suszy nad siarczanem sodowym i odparowuje rozpuszczalnik w prózni w (temperaturze 60°.W celu usuniecia furfurolu, do oleistej pozostalosci w ilosci okolo 10 ml wkrapla isie, mieszajac, 150 ml pen¬ tanu, otrzymujac mazisty osad. Po dekantacji pentanu 40 osad roztwarza sie w niewielkiej ilosci acetonu i wkrapla roztwór do 150 ml pentanu. Oddzielony produkt kon¬ densacji w postaci platków mozna oczyscic za pomoca chromatografii na zelu krzemionkowym. W tym celu na kolumne z 100 g zelu krzemionkowego wprowadza sie 45 stezony roztwór surowego produktu w chloroformie z do¬ datkiem 2% metanolu i wymywa za pomoca takiej sa¬ mej mieszaniny rozpuszczalników.Jednolite w chromatografii cienkowarstwowej pierwsze frakcje laczy sie i wytraca z mieszaniny acetonu i pen- 50 tanu. (3-D-Furfurylidenp^glikozyd 4'Hdemetylo-epipodo- filotoksyny otrzymuje sie w postaci bialego proszku o temperaturze topnienia 188—191°. Z absolutnego etano¬ lu otrzymuje sie krysztaly o temperaturze topnienia 267—269°. Skrecalmosc optyczna w chloroformie wyno- 30 35 55 si (a) 20 D ^102° Przyklad XI. i(3-D-Benzylideno-glikozyd 4'-deme- tyloepiipodofitlotoksyny. 1,0 g subtelnie sproszkowanego (3-D-glikozydu 4'-de- 60 metylo-eipLpodofilotoksyny rozpuszcza sie w 20 mg czy¬ stego benzaldehydu i dodaje 2 g wysuszonego proszku „Dowex" 50WX2. Powietrze z kolby wypiera sie za po¬ moca azotu i mieszanine reakcyjna z wylaczeniem wil¬ goci miesza za pomoca mieszadla magnetycznego. Prze- 65 bieg reakcji kontroluje sie na biezaco za pomoca chro-9 63140 10 matografii cienkowarstwowej sposobem a) chloroform i 6% metanolu lub sposobem b) chloroform, metanol, woda (70 : 25 : 5). Po uplywie 1 godziny reakcja jest za¬ konczona. W celu dalszego przerobu zabarwiony na pomaranczowo roztwór odsacza sie od katalizatora i dobrze wymywa chloroformem.Rozpuszczalnik oddziela sie w prózni w temperatu¬ rze 50°. Otrzymany olej oczyszcza sie na 60 g zelu krzemionkowego „Merck'4 o iwielkoisci czastek 0,05— 0,2 mm. Po oddzieleniu benzaldehydu przez ekstrakcje za pomoca chloroformu, substancje przemywa sie chlo¬ roformem z dodatkiem 2% metanolu. W wyniku chro¬ matografioznego oczyszczania otrzymuje sie bezpostacio¬ wy (3-D-benzylidenoglikozyd 4'-demetylo-epipodofilotok- syny, calkowicie jednolity w chromatografie cienkowar¬ stwowym.W celu charakteryzacji preparat rozpuszcza sie w 5 ml acetonu i wkraipla mieszajac doi 60 ml pentanu. |3-Benzylideno-D-glikozyd 4'-demetylo-epipodofilotoksy- ny otrzymuje sie jako bezpostaciowy bezbarwny proszek o temperaturze topnienia 182—184°. Z absolutnego eta¬ nolu otrzymuje sie krysztaly o temperaturze topnienia 246—246°; (a)D = —104° (c = 0,766 w chloroformie). PL

Claims (1)

Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania nowych glikozydów o wzorze 1, w którym R oznacza grupe fenylowa, 2-furylowa lub 10 2-tienylowa, znamienny tym, ze (3-D-glikozyd 4'-deme- tylo-epipodofilotoksyny o wzorze 2 poddaje sie reakcji z aldehydem o wzorze 3, w którym R ma znaczenie wy¬ zej podane, w obecnosci kwasnego katalizatora. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze jako 15 katalizator stosuje sie kwasy Lewisa. 3. Sposób wedlug zastrz. 1 i 2, znamienny tym, ze jako katalizator stosuje sie bezwodny chlorek cynkowy. 4. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze jako katalizator stosuje sie wysuszony kationit zawierajacy 20 grupy kwasu sulfonowego w postaci H+. Dok -"-no W* poorawefc | 'S&o- ch3o W Z 0 l

1. HO- wo¬ li — CWO . w 1 o e 3KI. 12q,25 63140 MKP C 07 d, 21/00 CH,OA WZÓR 6 OH CH30— k^ —°CH3 O — C— O— CH2C6H5 WZÓD 7KI. 12 q, 25 63140 MKP C 07 d, 21/00 OH ChLO—k ^ —OCH, °-C-0-CH2C6H5 O WZÓR 8 OH CH30 —^' J -OCH^ WZÓR 9 WZÓR 10 PL