PL58130B1 - - Google Patents

Description

Wytwarzanie.Kultury produkcyjne hoduje sie w temperaturze 37°C w ciagu 24 godzin, a pózniej pozbawia sie je aktywnosci przez dodanie 0,5% formaliny. Nastep¬ nie dodaje sie enzymu „Pronase" w ilosci 5 mikro- gramów/ml, z roztworu podstawowego, zawiera¬ jacego 0,25 mg~na 1 ml. Po dodaniu enzymu war¬ tosc pH roztworu nastawia sie na 8, stosujac 5 n NaOH. Roztwór utrzymuje sie na lazni wodnej w temperaturze 45°C w celu uaktywnienia enzymu, po czym pozostawia sie w temperaturze pokojo¬ wej w ciagu 7—10 dni, kontrolujac codziennie pH i nastawiajac je w razie potrzeby oraz obserwujac postep rozpuszczenia. Po zakonczenia lizy roztwór bada sie na jalowosc, bezpieczenstwo stosowania i sile dzialania, stosujac znane metody badan.Badanie sily dzialania.Piec swinek morskich szczepi sie domiesniowo ¦1,0 ml szczepionki przeciw bakteriom Clostridium chauvoei, przygotowanej z rozpuszczonych calko¬ wicie komórek, jak wyzej opisano. Po 10 dniach wstrzykuje sie w podobny sposób 1,0 ml zastrzyku pobudzajacego. Po nastepnych 10 dniach, zarówno tym swinkom morskim jak i pieciu kontrolnym, nie szczepionym swinkom, wstrzylkuje sie domies¬ niowo 0,5 ml standardowej, zarodnikowej zawiesiny bakterii Clostridium chauvoei, zawierajacej 10 M.L.D. w zawiesinie. Cztery (80%) na piec szcze¬ pionych swinek morskich pozostaly przy zyciu.Zadna z pieciu nie szczepionych swinek nie przezyla doswiadczenia.Przyklad IX. Rozpuszczanie innymi amino¬ kwasami.Chociaz zaleca sie glicyne do stosowania jako aminokwas, takze inne aminokwasy moga ulatwiac w podobny sposób rozpuszczenie komórek bakte¬ ryjnych w celu wytworzenia uzytecznych szczepio¬ nek. Wyniki zestawiono w tabeli V.Aminokwas L-argenina 1 Kwas D i L-aspara¬ ginowy L-histydyna p i L-walina L-prolina Glicyna | (porównanie) Steze¬ nie 1,0 2,5 1,5 3,0 3,0 3,5 Liczba bakterii Staphy- lococcus Szczep nr 584763 7X10r 1X107 1X107 5X107 2X107 2X107 Staphy- lococcus Szczep nr 596297 8,5 X107 3X107 8X107 8X10T 6X107 12X107 Rozpuszczanie + + + + + + Dodatkowymi szczepami bakterii, stosowanymi w wytwarzaniu uzytecznych szczepionek sa na¬ stepujace: Staphylococcus szczepy 1645, 591714, 598022, 597497, 595354, 598074 i 6003.Streptococcus szczepy 1510 T 35, 589 Tl, 601 Tli, 613 T22 i 599 T9.Meningococcus szczepy D2 (Lapeyssonnie), M 111, NI (Lapeyssonnie), 962 (Brannon) M 132 (Lapeys¬ sonnie).Szczególnie interesujacymi sa bakterie z rodzin Micrococcaccae, Lactobacteriaceae, Bacillaceae i Enterobacteriaceae, do których naleza rodzaje: Neisseria, Staphylococcus, Streptococcus, Escheri- chia coli i Clostridium. PL

Claims (2)

1. Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania somatycznych antygeno¬ wych szczepionek z rozpuszczonych, pozbawionych aktywnosci bakterii chorobotwórczych nalezacych do grupy takich jak Streptococcus, Staphylococcus, Neisseriaceae, Escherichia coli i Clostridium, przez hodowanie wymienionych bakterii na odpo¬ wiedniej pozywce zawierajacej jeden lub wiecej aminokwasów uzywanych przez te bakterie lub wspóldzialajacych w syntezie budowy komórek, zebranie bakterii, pozbawienie ich aktywnosci i nastepne ich rozpuszczenie, znamienny tym, ze aminokwasy stosuje sie w ilosci 1—5% wagowych w stosunku do ilosci pozywki hodowlanej w celu uzyskania bakterii o oslabionych sciankach ko¬ mórkowych, bardziej podatnych na rozpuszczenie.
2. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania szczepionek z bakterii nalezacych do grupy Staphylococcus, Streptoco¬ ccus, Neisseria i Escherichia coli jako aminokwas stosuje sie glicyne. 55 3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze jako aminokwas stosuje sie L-proline, D,L-wa- line, L-histydyne, D,L-asparagine i L-argine. 4. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze rozpuszczanie bakterii przyspiesza sie przez po- 60 dzialanie na nie enzymem litycznym, po uprzed¬ nim pozbawieniu ich aktywnosci odpowiednim srodkiem bakteriobójczym. 5. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze jako pozywke hodowlana stosuje sie zmodyfiko- 65 wana pozywke Frantza. ' . * 58130 25 30 35 50 55 65 LZGraf, Zam. 2050 27.V.69 230 PL